葡萄糖氧化酶法测空腹血糖(标准管法)

葡萄糖氧化酶法测空腹血糖（标准管法）

实验目的：

1.了解自动生化分析仪的工作原理

2.熟悉糖尿病相关生化的检测项目及检测方法

3.掌握糖尿病相关生化检测项目的临床意义。

实验原理：

葡萄糖氧化酶法测空腹血糖:葡萄糖可由葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸并产生过氧化氢，后者与苯酚及4-氨基安替比林在过氧化物酶作用下产生红色化合物。在505nm波长测定该红色化合物的吸光度，能计算出葡萄糖含量。

实验操作：

1.将准备好的酶工作液（葡萄糖氧化酶和过氧化物酶、苯酚、4-氨基安替

比林）加入空白管、浓度标准管、测定管各3ml，再向标准管加20μl

葡萄糖标准液（5.55mmol/L），再向测定管加入20μl血清。

2.将三支试管放入水浴锅中，37℃保温20分钟

3.调节分光光度计波长505nm,透光度T至100%，将空白管酶工作液对光的

吸收调节为0，再用空白管调“零”点测定其他各管的吸光度。

实验结果：

分光光度计测得标准管吸光度和测定管吸光度，根据朗伯-比尔定律,得到血清样品血糖值=（测定管吸光度/标准管吸光度）x5.55

分析讨论：

酶酚混合液变成了红色是否还可以继续使用？

不可以。酶酚混合液应为无色，如酶酚混合液已经变为红色，说明试剂污染，不可使用。

思考题：

1.高血糖对机体的影响有哪些？

1)引起血管、神经并发症。糖尿病患者长期高血糖会使血管、神

经并发症发生和发展使病

情加重。

2)β细胞功能衰竭。长期高血糖对胰岛β细胞不断刺激，使其功

能衰竭，胰岛素分泌更

少。

3)电解质紊乱。高血糖时大量排尿，从尿带走电解质，使电解质

紊乱。

4)严重失水。高血糖引起渗透性利尿，尿量增加，机体失水。

5)渗透压增高。高血糖时，细胞外液渗透压增高,细胞内液向细胞

外流动，导致细胞内失

水。当脑细胞失水时，可引起脑功能紊乱，临床上称高渗性昏迷。

6)全身乏力。血糖过高，葡萄糖不能很好地被机体吸收利用而从尿中排出。

7)视力减退。血糖升高时，眼睛视力往往减退。

2.糖尿病患者为何会出现尿糖阳性？

糖尿病患者的血糖超过肾糖阈（8.96～10.08mmol/L）时，近端小管对葡萄糖的重吸收达到极限，尿中开始出现葡萄糖。

3.胰岛素对人体有哪些生理作用？

1）对血糖代谢的调节：促进细胞摄取葡萄糖。血糖浓度升高时,迅速引起胰岛素的分泌,使全身各组织加速摄取和储存葡萄糖,尤

其能加速肝细胞和肌细胞摄取葡萄糖,并且促进它们对葡萄糖的

贮存和利用。肌肉组织在无胰岛素作用时，几乎不能摄取葡萄糖。

肝细胞和肌细胞大量吸收葡萄糖后, -方面将其转化为糖原贮存

起来，或在肝细胞内将葡萄糖转变成脂肪酸，转运到脂肪组织贮

存;在肝脏,胰岛素使进食后吸收的葡萄糖大量转化成糖原,并促

进葡萄糖转变成脂肪酸,转运到脂肪组织贮存.此外胰岛素还抑

制糖原异生。胰岛素不但可使葡萄糖迅速转运入肌细胞,而且可

加速葡萄糖的利用和肌糖原的合成,从而使血糖浓度降低。胰岛

素缺乏时糖不能被贮存利用。另一方面促进葡萄糖氧化生成高能

磷酸化合物作为能量来源,结果使血糖水平下降。

2）对脂肪代谢的调节：胰岛素对脂肪合成和贮存起着非常重要的作

用,不但在肝脏能加速葡萄糖合成脂肪酸,然后贮存到脂肪细胞

中，而且脂肪细胞本身在胰岛素作用下也可合成少量脂肪酸。胰

岛素还能促进葡萄糖进入脂肪细胞，使其转化成a-磷酸甘油，

并与脂肪酸形成甘油三酯贮存于脂肪细胞中。胰岛素还抑制对激

素敏感的脂解酶的活性,进而抑制脂肪分解。胰岛素缺乏不仅引

起糖尿病，而且还可造成脂类代谢的严重紊乱、血脂升高、引起

动脉硬化,并常常导致心血管和脑血管系统的严重疾病。

3）对蛋白质代谢的调节：胰岛素能促进氨基酸进入细胞,然后直接作用于核糖体,促进蛋

白质的合成。它还能抑制蛋白质分解。