细胞生物学实验报告
细胞生物学实验实验报告
细胞生物学实验班级:生科142姓名:旷江学号:10143131组号: 2小组成员:旷江、韦立尧、莫霞指导老师:范立强、李鹏飞华东理工大学应用生物学系摘要本次细胞生物学实验通过细胞形态与结构的观察技术,细胞化学,细胞生理,细胞培养与分析,细胞周期分析,细胞成分分离与分析,细胞增殖与染色等技术对动植物细胞进行细胞形态结构的观察、细胞生理过程的研究、细胞培养与细胞分析、细胞冻存与复苏等,以此来研究动植物细胞的结构、功能和各种生命规律。
关键词:细胞增殖、细胞染色、冻存复苏、生理过程、形态结构AbstractThe cell biology experiment was carried out by cell morphology and structure observation technique, cytochemistry, cell physiology, cell culture and analysis, cell cycle analysis, cell fractionation and analysis, cell proliferation and staining. Observation of cell physiological processes, cell culture and cell analysis, cell cryopreservation and resuscitation, in order to study the structure of animals and plants, functions and a variety of laws of life.Key words: cell proliferation, cell staining, cryopreservation, physiological processes, morphological structur目录第一章综述 (1)1.1实验目的 (1)第二章实验原理 (2)2.1实验流程和应用实验方法 (2)2.2细胞器活体染色与显微观察 (2)2.3细胞骨架的观察 (3)2.4细胞冻存复苏 (3)2.5细胞冻存复苏活力检测 (3)2.6哺乳动物细胞的基因转染 (4)2.7细胞凋亡诱导和分析 (4)第三章实验仪器及试剂 (6)3.1实验仪器 (6)3.2实验试剂 (6)第四章实验步骤............ 错误!未定义书签。
细胞生物学实验报告
细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告篇一实验教师:xxx所在学校:xxx中学目的要求:1练习徒手切片2认识叶片的结构3画叶片的表皮细胞和保卫细胞材料用具:新鲜叶片(如菠菜、槐树、蚕豆的叶片),显微镜,双面刀片(两片、并在一起、一侧用胶布粘牢)、镊子、载玻片、盖玻片、叶片的永久切片、盛有清水的培养皿、滴管、吸水纸、碘液、纱布、毛笔、小木板。
方法步骤方法与步骤要点注意事项(一)练习徒手切片,制作叶片横切片的临时切片1将新鲜的叶片平放在小木板上。
2右手捏紧并排的两片刀片,沿着图中虚线的方向,迅速切割。
3把刀片夹缝中存在的切下的薄片放入盛有清水培养皿中。
要多切几次(每切一次,刀片要蘸一下水)。
4用毛笔蘸出较薄的一片,制成临时切片。
叶片下面要垫上小块木板,以防损坏桌面。
刀片要捏紧,切割速度要快,注意安全。
为了便于观察,载玻片的水滴中可以同时放几片叶的横切片,选择切得较薄的一片用来观察。
(二)观察叶片的结构1.用显微镜先观察叶片横切面的临时切片,再观察叶片的永久横切片。
2.观察时注意分清时的表皮、叶肉和叶脉。
仔细观察上、下表皮细胞的`区别(三)观察叶片的下表皮1.用镊子撕下一小块叶片的下表皮,制成临时装片。
2.用显微镜进行观察,下表皮细胞的形态是什么样子的,下表皮上有没有气孔?撕取下表皮时,一定要薄,否则影响观察效果。
注意观察气孔的结构。
(四)画图在下面空白处画出下表皮上一对保卫细胞及周围的几个表皮细胞,这一对保卫细胞要详细画,周围的细胞只需勾出轮廓。
画图时,要真实、实事求是。
讨论与交流1.保卫细胞的结构特点对植物的蒸腾作用有什么意义?2.从结构上看,叶片有哪些方面是适于接受阳光的?细胞生物学实验报告篇二一、实验目的1. 初步学会观察植物细胞质壁分离和复原的方法。
2. 理解植物细胞发生渗透作用的原理。
二、实验原理当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时,细胞液中的水分就透过原生质层进入外界溶液中,使细胞壁和原生质层都出现一定的收缩。
细胞生物学实验报告
细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告动物细胞融合【实验目的】⒈了解动物细胞融合的常用方法。
⒉学习化学融合的基本操作过程。
⒊观察动物细胞融合过程中细胞的行为和变化。
【实验原理】细胞融合是指在自发或者诱导条件下,两个或两个以上细胞合并为双核或者多核细胞的过程。
目前人们已经发现有很多方法可以诱导细胞融合,包括病毒诱导融合、化学诱导融合和电激诱导融合。
⒈病毒诱导融合仙台病毒、牛痘病毒、新城鸡瘟病毒和疱疹病毒等可以介导细胞的融合。
这类病毒的被膜中含有融合蛋白,可介导病毒和宿主细胞融合,同时也可介导细胞与细胞的融合。
用紫外线灭活后,这些病毒即可诱导细胞发生融合。
⒉化学诱导融合很多化学试剂能够诱导细胞融合,如聚乙二醇(PEG)、二甲基亚砜、山梨醇、甘油、溶血性卵磷脂、磷脂酰丝氨酸等。
这些物质能够改变细胞膜脂质分子的排列,在去除这些物质之后,细胞膜趋向于恢复原有的有序结构。
在恢复过程中相接触的细胞由于接口处脂质双分子层的相互亲和与表面张力,细胞膜融合,胞质流通,发生融合。
化学诱导方法,操作方便,诱导融合的概率比较高,效果稳定,适用于动、植物细胞,但对细胞具有一定的毒性。
PEG是被广泛使用的化学融合剂。
⒊电激诱导融合包括电诱导、激光诱导等。
其中,电诱导是先使细胞在电场中极化成为偶极子,沿电力线排布成串,再利用高强度、短时程的电脉冲击破细胞膜,细胞膜的脂质分子发生重排,由于表面张力的作用,两细胞发生融合。
电诱导方法具有融合过程易控制、融合概率高、无毒性、作用机制明确、可重复性高等优点。
【实验用品】⒈材料鸡血红细胞。
⒉试剂50%PEG、Hank’s溶液(pH7.4)、Alsever’s细胞保存液、0.85%氯化钠溶液。
⒊器材正置显微镜、离心机、离心管、载玻片、盖玻片、滴管、注射器等。
【实验步骤】⒈鸡血红细胞的制备和保存用无菌注射器先吸入Alsevers溶液1ml,再从鸡翼下静脉取血0.5~1ml,取出后放入刻度离心管中,再加入2~3mlAlsevers溶液,使总量为4~5ml,混匀并封口,置于4℃冰箱内。
细胞生物学研究实验报告
细胞生物学研究实验报告1. 引言在细胞生物学领域,研究细胞的结构和功能对于理解生命的基本原理至关重要。
本实验旨在利用细胞培养技术,观察并探究不同条件下细胞的生长和变化,以及细胞代谢的影响因素。
2. 实验材料与方法2.1 细胞培养物准备:选择合适的培养基,并根据说明书的指导进行配制,确保培养基的pH值及其他参数的准确性。
2.2 细胞处理:将细胞培养物均匀接种于含有培养基的培养皿中,根据实验设计设置不同的处理组和对照组。
2.3 细胞观察:在指定时间点,使用显微镜观察细胞的形态和数量,并记录相关数据。
2.4 细胞计数:利用细胞计数板或自动细胞计数器,对处理组和对照组的细胞数量进行计数,并进行统计学分析。
3. 实验结果在本实验中,我们观察了不同培养条件对细胞生长的影响以及细胞数量的变化。
3.1 培养基成分对细胞生长的影响:将细胞分别培养于不同成分的培养基中,并观察其生长情况。
结果显示,不同成分的培养基对细胞生长产生了明显的影响。
例如,在含有特定营养因子的培养基中,细胞的生长速率显著提高。
3.2 不同培养温度对细胞生长的影响:将细胞在不同的温度条件下培养,并在一定时间内观察其生长情况。
实验结果显示,细胞的生长速率在适宜温度范围内最高,而过低或过高的温度均对细胞生长产生了抑制作用。
3.3 细胞代谢产物对细胞生长的影响:添加不同浓度的代谢产物(如乙醛、乙酸等)到培养基中,观察其对细胞生长的影响。
实验结果显示,过高或过低的代谢产物浓度均对细胞生长产生了不利影响,而适宜浓度范围内则促进了细胞的繁殖能力。
4. 讨论与结论本实验结果表明,细胞的生长和变化受到多种因素的影响,包括培养基成分、培养温度以及代谢产物浓度等。
细胞在适宜的培养条件下能够更好地进行增殖和发育,而不利因素则会抑制细胞的生长。
因此,在细胞生物学研究中,合理控制和优化培养条件对于获得准确可靠的实验结果至关重要。
总结:通过本次实验,我们深入了解了细胞生物学领域中的相关实验技术和细胞生长的条件调控。
细胞生物学实验报告_2
细胞生物学实验报告细胞凝集反应【实验目的】⒈了解细胞膜的表面结构。
⒉掌握凝集素促使细胞凝集的原理。
⒊学习研究细胞凝集反应的方法。
【实验原理】⒈细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构, 脂和蛋白质又能和糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。
目前认为: 细胞间的联系, 细胞的生长和分化, 免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖外被有关。
⒉凝集素(lectin)是一类含糖(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质, 它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。
凝集素使细胞凝集是由于它与细胞外被中的糖分子连接, 在细胞间形成“桥”的结果, 加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。
【实验用品】⒈材料土豆块茎、家兔。
⒉试剂⑴PBS缓冲液称取NaCl 7.2g、Na2HPO4 1.48g、KH2PO4 0.43g, 加蒸馏水, 定容至1L, 调pH至7.2。
⑵1%肝素溶液0.1g肝素溶解于10mL0.9%氯化钠溶液中。
⒊器材5mL注射器、酒精棉球、双凹片、普通光学显微镜、托盘天平、滴管、离心管。
【实验程序】⒈以无菌方法抽取兔耳缘静脉血液(5mL注射器先吸取3mL1%肝素溶液)1mL, 用0.9%氯化钠溶液洗5次, 每次3000r/min离心5min, 最后按沉淀的红细胞体积用0.9%氯化钠溶液配成1%红细胞悬液。
⒉称取去皮土豆块茎2g, 切成薄片, 加10mLPBS缓冲溶液, 浸泡2h, 浸出的粗提取液中含有可溶性土豆凝集素。
⒊用滴管吸取土豆凝集素和PBS缓冲液各一滴, 置于双凹片的左右两孔内, 再分别滴入一滴1%红细胞悬液, 振荡10min。
4.待红细胞液发生明显凝集反应后, 将双凹片置于显微镜下观察。
【实验结果】⒈结果细胞凝集反应实验现象⒉图像加土豆凝集素加PBS缓冲液【分析与讨论】⒈结果分析实验过程中可以观察到: 在双凹片上, 加有土豆凝集素的一侧, 震荡过程中, 红细胞液先变浑浊, 随后又变澄清, 同时发生凝集反应, 且凝集后的块状物聚集在液滴中央;而加有PBS缓冲液的一侧, 震荡过程中, 红细胞不发生明显变化, 静置后, 后细胞逐渐集中于液滴中间部位, 而四周表现为澄清。
细胞生物学实验报告(3篇)
细胞生物学实验报告(3篇)细胞生物学实验报告(精选3篇)细胞生物学实验报告篇1一、实验目的:1、掌握显示细胞中过氧化物酶反应的原理和方法。
2.了解细胞凋亡的生物学意义3、掌握凋亡细胞的形态学检测方法二、实验原理:1、细胞内的过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物,用联苯胺处理标本,细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝,进而变为棕色产物,因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。
中间产物蓝色联苯胺是不稳定的,无需酶的参加即可氧化为棕色化合物。
2、细胞凋亡是指细胞在生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程。
它是一个主动的、高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。
3、凋亡细胞形态学特征是:体积变小,细胞质浓缩;细胞核发生染色质凝聚和聚集于核膜周围(边缘化);细胞膜有小泡状形成;晚期细胞膜内陷形成大小不同的凋亡小体;根据细胞凋亡形态学特征进行显微观察是检测细胞凋亡的一种直观、可靠的方法。
三、实验步骤:细胞中过氧化物酶的显示1、在载片上滴一滴PBS缓冲液;2、取骨髓细胞:用断颈法处死小鼠,立即剪取后肢,去除肌肉,剥出后肢股骨,剪开股骨一端,用牙签尖的一端插入剪开的小孔中,抠取少许骨髓细胞置滴有PBS的载片上;3、涂片:用另一玻片将骨髓细胞沿一个方向涂布推开,室温晾干;4、媒染:在涂片上滴0.5%硫酸铜液,以盖满涂片为宜,处理30秒-1分钟。
5、倾去硫酸铜液,直接滴入联苯胺混合液反应6分钟(以盖满涂片为宜)6、清水冲洗,番红复染2min。
7、镜检:清水冲洗,室温晾干,先低倍镜下观察,后换高倍镜下观察(油镜100_)细胞凋亡的形态学检测与观察吉姆萨染色:1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞3、95%乙醇固定5min4、PBS缓冲液洗2次5、吉姆萨染色液染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液7、普通光学显微镜下观察。
吖啶橙染色:1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞3、甲醇:冰醋酸(3:1)固定5min4、PBS缓冲液洗2次每次1min5、0.01%吖啶橙染色液在避光环境下染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液6、选用蓝光激发滤片在荧光显微镜下观察。
细胞生物学实验报告
细胞生物学实验报告实验名称:细胞培养实验实验目的:1. 了解细胞培养的基本原理和过程2. 观察细胞生长和分化的现象3. 掌握细胞培养的实验技术和方法实验原理:细胞培养是一种将生物体细胞从其原始生存环境中分离出来,在体外条件下进行培养的技术。
这种技术对于研究细胞生物学、发育生物学、药物筛选等学科具有重要意义。
本实验将通过观察细胞生长和分化的现象,加深对细胞培养技术的理解。
实验材料:1. 人体皮肤细胞2. 培养基(包含血清、抗生素、氨基酸、维生素等)3. 塑料瓶(培养皿)4. 显微镜5. 记录表实验步骤:1. 取适量人体皮肤细胞,用胰蛋白酶消化,使其从组织中分离出来。
2. 将细胞接种到塑料瓶(培养皿)中,加入适当浓度的培养基。
3. 将塑料瓶(培养皿)放入恒温培养箱中,定期观察并记录细胞生长和分化的现象。
4. 在合适的时间点,使用显微镜拍照记录细胞生长和分化的过程。
5. 实验结束后,整理数据和图片,撰写实验报告。
实验结果:经过一段时间的培养,我们观察到皮肤细胞在培养基中开始贴壁,并逐渐生长。
随着时间的推移,部分细胞开始出现分裂,形成相互连接的细胞团。
一些细胞逐渐伸展成梭形或扁平形,呈现出典型的贴壁生长形态。
在某些区域,我们观察到细胞开始分化为两种不同形态的细胞群,一种呈圆形或椭圆形,另一种呈多角形。
这些现象表明细胞已经开始分化。
实验分析:根据实验结果,我们可以得出以下结论:1. 细胞确实可以在体外条件下贴壁生长并增殖。
这证明了细胞培养技术的可行性。
2. 细胞分化是一个自然的过程,在本实验中得到了证实。
这说明细胞具有自我更新和多向分化的潜能。
3. 实验过程中需要注意无菌操作和适宜的培养条件,以确保细胞的存活和正常生长。
此外,不同种类的细胞可能需要不同的培养条件,因此在实际操作中需要针对具体细胞类型进行实验。
实验结论:通过本次实验,我们了解了细胞培养的基本原理和过程,观察了细胞生长和分化的现象,并掌握了细胞培养的实验技术和方法。
细胞生物学实验报告
细胞生物学实验报告实验目的,通过观察细胞在不同环境条件下的变化,了解细胞的结构和功能。
实验材料,显微镜、玻璃片、盐水、葡萄糖水溶液、洋葱、细胞培养基、显微镜玻璃片、移液管、显微镜盖玻片、细胞标本。
实验步骤:1. 取一片洋葱表皮,放入盐水中浸泡5分钟,然后用移液管将洋葱表皮移至显微镜玻璃片上,加一滴盐水,用显微镜盖玻片盖好,放入显微镜下观察。
2. 取一片洋葱表皮,放入葡萄糖水溶液中浸泡5分钟,然后用移液管将洋葱表皮移至显微镜玻璃片上,加一滴葡萄糖水溶液,用显微镜盖玻片盖好,放入显微镜下观察。
3. 取一片洋葱表皮,直接放入显微镜玻璃片上,加一滴蒸馏水,用显微镜盖玻片盖好,放入显微镜下观察。
实验结果:在盐水中浸泡的洋葱表皮细胞,细胞质内部出现了空泡,并且细胞质收缩,细胞膜离细胞壁。
在葡萄糖水溶液中浸泡的洋葱表皮细胞,细胞质内部没有出现空泡,细胞质没有收缩,细胞膜紧贴细胞壁。
直接放入蒸馏水中的洋葱表皮细胞,细胞质内部也没有出现空泡,细胞质没有收缩,细胞膜紧贴细胞壁。
实验分析:盐水中的高渗环境导致了细胞失水和质内空泡的形成,细胞质收缩,细胞膜离细胞壁。
而葡萄糖水溶液中的低渗环境对细胞没有明显的影响,细胞质没有收缩,细胞膜紧贴细胞壁。
蒸馏水中的等渗环境对细胞也没有明显的影响,细胞质没有收缩,细胞膜紧贴细胞壁。
结论:细胞在不同渗透压环境下会出现不同的变化,高渗环境会导致细胞失水、质内空泡形成和细胞质收缩,而低渗环境对细胞没有明显的影响,等渗环境也不会对细胞产生明显的影响。
这些结果说明了渗透压对细胞的影响,也说明了细胞对外界环境的敏感性。
实验的意义:通过这个实验,我们更深入地了解了细胞在不同环境条件下的变化,也更加深入地了解了细胞的结构和功能。
这对于我们进一步研究细胞生物学,了解生命的奥秘,具有重要的意义。
实验存在的不足:本实验只是对细胞在不同渗透压环境下的变化进行了初步的观察和分析,还需要进一步的研究和探讨,以便更加全面地了解细胞的生物学特性。
细胞生物实验报告大一
细胞生物实验报告大一实验目的:本实验的目的是通过观察和分析细胞的生物学特性,深入了解细胞的结构和功能。
实验材料:1. 显微镜2. 显微镜玻片和盖片3. 染色剂(如甲苯胺染色液)4. 盐水溶液5. 实验用样本(如洋葱片、口腔腮膜细胞等)实验步骤:1. 准备洋葱片样本:将洋葱切成薄片,并用盐水浸泡片刻。
2. 处理洋葱片样本:将浸泡过的洋葱片放置在甲苯胺染色液中,使细胞质着色。
3. 将染色的洋葱片取出,用盖片盖好,放在显微镜玻片上。
4. 将盖片下的洋葱片放在显微镜上,调节镜头使其清晰可见。
5. 通过显微镜观察洋葱细胞的结构,包括细胞膜、细胞质、细胞核等。
6. 记录观察到的细胞特征,包括细胞的大小、形状以及细胞核的位置等。
7. 用显微镜观察其他样本(如口腔腮膜细胞),重复步骤5和步骤6。
8. 对比不同样本的细胞特征,并进行分析和讨论。
实验结果:通过显微镜观察,我们可以清晰地看到洋葱细胞和口腔腮膜细胞的结构。
洋葱细胞呈矩形或长方形,细胞质较为丰富,细胞核位于细胞的中心。
口腔腮膜细胞则呈扁平状,细胞核位于细胞的一侧。
细胞膜在两种细胞中均可清晰观察到。
讨论和分析:根据观察结果,我们可以推断洋葱细胞和口腔腮膜细胞在结构上存在差异。
洋葱细胞的细胞形状较规则,而口腔腮膜细胞的细胞形状较扁平。
这可能与它们不同的功能和位置有关。
另外,洋葱细胞的细胞核位于细胞的中心,而口腔腮膜细胞的细胞核则位于细胞的一侧,也可能与它们不同的生理需求有关。
细胞生物实验的目的是通过观察细胞的结构和功能,加深我们对细胞的了解。
细胞是生物体的基本单位,具有复杂的结构和功能,对生命活动至关重要。
通过实验,我们能够直观地观察到细胞的组成和特征,进一步认识生命的奥秘。
对细胞的研究不仅有助于我们理解生物的生命过程,还为疾病的研究和治疗提供了重要的基础。
结论:通过本实验,我们观察和比较了洋葱细胞和口腔腮膜细胞的结构特征。
洋葱细胞和口腔腮膜细胞在形态上存在差异,这可能与它们的功能和位置有关。
生物细胞实验报告范文
一、实验目的1. 通过观察植物细胞和动物细胞,了解其基本结构和组成。
2. 比较植物细胞和动物细胞的异同,加深对细胞生物学知识的理解。
二、实验原理细胞是生物体的基本结构和功能单位,植物细胞和动物细胞在结构上存在一定的差异。
植物细胞具有细胞壁、叶绿体等特有结构,而动物细胞则没有。
通过显微镜观察植物细胞和动物细胞的形态和结构,可以了解它们之间的差异。
三、实验材料1. 植物细胞:洋葱鳞片叶2. 动物细胞:人的口腔上皮细胞3. 实验仪器:显微镜、载玻片、盖玻片、吸水纸、镊子、纱布、滴管、稀碘液、生理盐水、消毒牙签4. 实验试剂:清水、生理盐水、碘液四、实验步骤1. 制作植物细胞临时装片(1)用纱布将载玻片、盖玻片擦干净。
(2)在载玻片上滴一滴清水。
(3)用镊子在洋葱鳞片叶上撕下一小片表皮。
(4)将撕下的表皮放入载玻片上的水滴中,用针将其展平。
(5)用镊子夹住盖玻片,先将一边接触载玻片的水滴边经再慢慢把盖玻片放平,制成临时切片。
(6)在盖玻片的翼侧滴加稀碘液,用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引,使染液浸润标本的全部。
2. 制作动物细胞临时装片(1)用洁净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净。
(2)在载玻片的中央滴一滴生理盐水。
(3)用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下。
(4)把牙签上附有碎屑的一端,放在载破片的生理盐水滴中涂抹几下。
(5)用镊子夹起盖玻片,使它的一边先接触载玻片的水滴,然后缓缓地盖在水滴上,注意避免盖玻片下面出现气泡。
(6)在盖玻片的翼侧滴加稀碘液,用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引,使染液浸润标本的全部。
3. 显微镜观察将临时装片放到显微镜上,调整显微镜与临时切片位置,直到可以观察到清晰的图像为止。
五、实验结果与分析1. 植物细胞结构通过显微镜观察,可以看到植物细胞具有以下结构:(1)细胞壁:位于细胞的最外层,呈透明、均质状,具有支持和保护细胞的作用。
(2)细胞膜:紧贴细胞壁,呈透明、薄膜状,具有选择性透过作用,控制物质的进出。
细胞生物学实验报告
细胞生物学实验报告一、实验目的:了解细胞的基本结构、形态和生物学特性。
二、实验原理:在微观水平上,细胞是生命体的基本单位。
细胞通常由细胞膜、细胞质和细胞核组成,细胞质中含许多小器官和细胞器,如内质网、高尔基体、线粒体、溶酶体、细胞骨架等。
通过显微镜的观察,可以看到不同类型、不同来源的细胞的基本组成结构和形态特征。
三、实验步骤:1. 熟悉实验设备和原理,准备好实验所需的盖玻片、覆盖片、构建显微镜和目镜等设备;2. 用洗涤液彻底清洗玻璃片,用酒精棉轻轻擦拭干燥;3. 取一滴洗涤液滴在玻璃片上,用银夹取一片洋葱内皮,撕下一小块后放入滴在玻璃片中央;4. 用银夹按住洋葱内皮表面,轻轻地撕成细胞块后,再滴上一滴洗涤液,轻轻摇晃玻片,使洋葱细胞均匀分散在玻片表面;5. 取一块覆盖片,斜着压入滴在玻片表面的细胞悬液,使其平滑成一小片;6. 在玻片表面上放置一滴染料,如伊红染料或甲基蓝染料,然后再建立显微镜后调整到适当的放大倍率;7. 观察细胞的形态、细胞核的位置、大小和形状等。
四、实验结果分析:洋葱内皮细胞是一种球形或椭圆形的细胞,由细胞膜、细胞质和细胞核组成。
细胞膜是细胞的外边包围结构,它隔开了生物体环境与细胞内环境。
细胞质包含细胞器和细胞液。
细胞核是控制细胞体的生长、发育和遗传物质DNA的复制和转录的最重要的细胞器之一,它的位置比较固定在细胞的中央或靠近细胞膜的一侧。
在显微镜下,可以看到洋葱内皮细胞的大小和形状,并且细胞核位置明显。
染色后,细胞质和细胞核可以更清晰地观察到。
五、实验结论:通过本次实验,我们了解到细胞是生命体的基本单位,不同的细胞类型有着不同的结构和形态特征。
在细胞中,细胞膜、细胞质和细胞核的结构和功能较明显,可以通过显微镜观察到。
本实验通过观察洋葱内皮细胞的形态和染色,深刻理解了细胞的结构和生物学特性,并对进一步的生命科学研究提供了基础支持。
细胞生物学实验报告
细胞生物学实验报告细胞是生命的基本单位,它们的结构和功能对于生物体的正常运作至关重要。
本次实验旨在通过观察细胞在不同环境条件下的变化,探究细胞的生物学特性及其对外界环境的适应能力。
首先,我们选取了大肠杆菌作为实验对象,将其分别置于高温、低温、酸性和碱性环境中,并观察其形态和生长情况。
结果显示,大肠杆菌在高温环境下生长缓慢,细胞形态变得不规则;而在低温环境下,细胞生长速度减缓,但形态保持相对正常;在酸性环境中,细胞数量迅速减少,形态也发生了变化;而在碱性环境中,细胞的生长受到一定程度的抑制,但形态相对稳定。
这些结果表明,细胞对于外界环境的变化具有一定的适应能力,但也存在一定的生长限制。
其次,我们进行了细胞色素实验,观察细胞内色素的分布情况。
实验结果显示,在正常生长条件下,细胞色素分布均匀,细胞呈现出健康的状态;而在受到外界刺激或压力的情况下,细胞色素分布不均匀,甚至出现聚集或凋亡的现象。
这说明细胞色素对于细胞内部环境的稳定起着至关重要的作用,一旦受到干扰,细胞的正常功能将受到影响。
最后,我们进行了细胞分裂实验,观察细胞在不同阶段的形态和变化。
实验结果显示,在有丝分裂阶段,细胞依次经历了纺锤体形成、染色体分离和细胞质分裂等过程;而在减数分裂阶段,细胞则经历了同源染色体的联会、交换和分离等过程。
这些观察结果揭示了细胞分裂过程中的复杂性和精密性,也为我们深入理解细胞生物学提供了重要的参考。
综上所述,本次实验通过对细胞在不同环境和条件下的观察,揭示了细胞的生物学特性及其对外界环境的适应能力。
这些发现不仅对于细胞生物学的研究具有重要意义,也为我们更好地理解生命的奥秘提供了有力支持。
希望本次实验结果能够为相关领域的研究和应用提供一定的参考和启示。
细胞生物学实验报告完整
一、实验目的1. 了解细胞膜的功能和特性;2. 掌握细胞膜的制备和观察方法;3. 学习细胞膜的流动性和渗透性实验技术;4. 通过实验验证细胞膜在细胞生理活动中的作用。
二、实验原理细胞膜是细胞与外界环境之间的分隔层,具有保护、物质交换、信号转导等功能。
细胞膜主要由磷脂双分子层和蛋白质组成,具有一定的流动性和选择性渗透性。
本实验通过制备细胞膜、观察细胞膜形态、测量细胞膜流动性、研究细胞膜渗透性等方法,探讨细胞膜在细胞生理活动中的作用。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜猪肝、生理盐水、磷酸缓冲液(pH 7.4)、0.25%胰蛋白酶、0.1%EDTA、0.2%Triton X-100、红四唑(MTT)、无水乙醇、氯化钠、蒸馏水等。
2. 实验仪器:显微镜、离心机、超速离心机、恒温水浴锅、移液器、培养皿、烧杯、试管等。
四、实验步骤1. 制备细胞膜(1)取新鲜猪肝,用生理盐水冲洗干净,切成小块;(2)将肝组织放入烧杯中,加入适量生理盐水,用组织捣碎器捣碎;(3)将捣碎的肝组织过滤,收集滤液;(4)将滤液加入适量0.25%胰蛋白酶,在37℃恒温水浴锅中消化30分钟;(5)将消化后的滤液加入适量0.1%EDTA,终止消化;(6)将终止消化的滤液离心(3000r/min,10分钟),收集上清液;(7)将上清液加入适量0.2%Triton X-100,充分混匀,室温下放置10分钟;(8)将混合液离心(12000r/min,30分钟),收集沉淀即为细胞膜。
2. 观察细胞膜形态(1)取细胞膜沉淀,用生理盐水洗涤2次,每次5000r/min,10分钟;(2)将洗涤后的细胞膜沉淀加入适量生理盐水,制成细胞膜悬液;(3)取少量细胞膜悬液,滴于载玻片上,用盖玻片封片;(4)在显微镜下观察细胞膜形态。
3. 测量细胞膜流动性(1)取细胞膜悬液,加入适量红四唑(MTT),混匀;(2)将混合液离心(3000r/min,10分钟),收集上清液;(3)用分光光度计测定上清液在570nm处的吸光度值;(4)根据吸光度值计算细胞膜流动性。
细胞生物学实验报告
细胞生物学实验报告实验目的:探究植物细胞与动物细胞在不同条件下的结构和功能差异。
实验材料与方法:1. 实验材料:- 镜片- 显微镜- 植物叶片样本- 动物组织样本- 注射器或吸管- 0.9% NaCl生理盐水- 甘油或其他透明溶液2. 实验步骤:1. 取一片植物叶片,并在显微镜盖玻片上放上一滴生理盐水。
2. 将植物叶片放在生理盐水中,使用镊子轻轻剪碎叶片,使细胞释放。
3. 将显微镜盖玻片置于显微镜下,调节镜片使其聚焦在细胞上。
4. 观察细胞的结构,包括细胞壁、细胞膜、细胞核等。
5. 取一片动物组织,并在显微镜盖玻片上放上一滴甘油或其他透明溶液。
6. 使用镊子将动物组织放入溶液中,轻轻搅拌,使细胞释放。
7. 将显微镜盖玻片置于显微镜下,调节镜片使其聚焦在细胞上。
8. 观察细胞的结构,包括细胞膜、细胞核、线粒体等。
实验结果:通过观察植物细胞和动物细胞的实验,我们得出以下结论:1. 植物细胞具有细胞壁,而动物细胞没有。
细胞壁是植物细胞的一个重要特征,它能提供结构支持和保护细胞。
2. 细胞膜是植物和动物细胞共有的特征,它控制物质的进出,维持细胞内外环境的稳定。
3. 细胞核是细胞的控制中心,核内含有遗传物质DNA。
无论是植物细胞还是动物细胞,细胞核都是存在的。
4. 植物细胞内含有叶绿体,而动物细胞没有。
叶绿体是植物细胞中进行光合作用的重要器官,能够将阳光转化为化学能。
5. 动物细胞内含有线粒体,而植物细胞也存在但数量相对较少。
线粒体是动物细胞中的能量合成器官,能够产生细胞所需的能量供应。
实验结论:通过本实验,我们明确了植物细胞和动物细胞的结构和功能差异。
植物细胞具有细胞壁和叶绿体,能够进行光合作用,而动物细胞具有线粒体,能够进行代谢和产生能量。
另外,细胞膜和细胞核是所有细胞共有的结构,起着重要的生命活动调控作用。
实验意义:细胞是生命的基本单位,通过深入了解细胞的结构与功能差异,有助于我们更好地理解生物的生命活动和各种生物现象。
细胞生物学实验报告
细胞生物学实验报告引言细胞是生命的基本单位,它们组成了所有生物体,从微观的细菌到宏观的植物和动物。
了解细胞的结构和功能对于理解生命系统的运作机制至关重要。
本实验旨在通过观察和研究细胞的各个方面,探索细胞的奥秘。
材料与方法本实验使用了显微镜、荧光显微镜、细胞培养皿、培养基和染色剂等实验材料。
首先,我们在细胞培养皿中放入培养基,并加入细胞样本。
接着,我们使用显微镜观察细胞的结构,并通过染色剂标记特定的细胞结构。
最后,我们使用荧光显微镜观察细胞内的荧光分子。
结果与讨论1. 细胞的形态和结构通过显微镜观察,我们发现细胞具有不同的形态和结构。
植物细胞通常具有细胞壁和叶绿体,而动物细胞则没有细胞壁,但有细胞膜和细胞器如线粒体和高尔基体。
这些不同的结构为细胞的功能提供了支持。
2. 细胞的运动和分裂我们观察到细胞在培养皿中具有一定的运动能力。
细胞可以通过细胞膜的伸缩和细胞骨架的变形实现不同的移动方式,如原生动物的鞭毛运动和细胞质流动。
此外,我们还观察到细胞分裂的过程,这是细胞增殖和生长的基本方式。
3. 细胞的代谢活动通过观察荧光显微镜下的细胞样本,我们可以看到许多荧光分子在细胞内的活动。
这些分子参与了细胞的代谢过程,如蛋白质合成、物质转运和能量代谢。
荧光分子的存在使我们能够更直观地了解细胞的生理活动。
4. 细胞的信号传导在细胞培养条件下,我们还观察到细胞之间的相互作用和信号传导。
细胞可以通过细胞外信号分子的识别和细胞膜上的受体进行相互沟通。
这种信号传导机制对于细胞内外环境的调节和细胞功能的协调起着重要作用。
结论通过本实验,我们深入了解了细胞的形态、结构、运动、代谢和信号传导等方面。
细胞生物学是研究生命的基本单位的科学,其对于解答许多生物学问题具有重要意义。
今后的研究中,我们可以进一步探索细胞的分子机制和调控网络,以深化对细胞生物学的理解,并应用于生物医学和生物工程领域。
致谢感谢实验室的老师和同学们对本实验的支持和帮助,使我们能够顺利完成实验,并获得有价值的数据和观察结果。
细胞生物学实验报告
细胞生物学实验报告摘要:本实验旨在研究细胞的结构和功能。
通过显微镜观察和实践操作,我们对细胞的基本组成、细胞膜的特性以及细胞器的功能进行了研究和分析。
结果表明,细胞是生命的基本单位,各部分之间紧密配合,共同完成细胞的代谢和生长活动。
1. 引言细胞是生命的基本单位,是构成生物体的基本结构单元。
为了深入了解细胞的结构和功能,我们开展了本次细胞生物学实验。
2. 实验材料和方法2.1 实验材料- 显微镜- 盖玻片和载玻片- 显微镜玻璃片- 无菌注射器- 盐水和色素溶液- 植物和动物细胞样本2.2 实验方法2.2.1 制备细胞样本- 取一片新鲜的植物叶片,用剪刀剪下小块,并用无菌注射器吸取盐水和色素溶液分别滴在样本上。
- 取一片洋葱切片样本。
2.2.2 制备载玻片- 取一个载玻片,在玻片的一个小角上滴一滴盐水。
- 把叶片小块或洋葱切片放在盐水上,用另一个载玻片平铺在上方。
- 轻轻按压上层载玻片,让叶片或洋葱细胞均匀涂抹在载玻片上。
- 用棉签擦干载玻片边缘的溶液。
2.2.3 显微镜观察- 将制备好的载玻片放在显微镜台上。
- 转动显微镜的聚焦手轮,使细胞样本清晰可见。
- 观察不同放大倍数下的细胞结构和组织。
3. 结果与讨论在本次实验中,我们观察了植物和动物细胞的结构和功能。
3.1 植物细胞观察- 在低倍放大镜下观察植物细胞,可以看到细胞壁、细胞膜、细胞质和细胞核。
- 在高倍放大镜下观察植物细胞,可以看到细胞质内的细胞器,如叶绿体、高尔基体和线粒体。
3.2 动物细胞观察- 在低倍放大镜下观察动物细胞,可以看到细胞膜、细胞质和细胞核。
- 在高倍放大镜下观察动物细胞,可以看到细胞质内的细胞器,如内质网、高尔基体和线粒体。
3.3 细胞结构与功能的关系细胞的结构和功能密切相关。
不同的细胞器在细胞内部发挥着不同的功能。
例如,叶绿体是植物细胞中进行光合作用的地方,它含有光合色素,能够将光能转化为化学能。
而动物细胞中缺少叶绿体,无法进行光合作用。
细胞生物学实验报告_2
细胞生物学实验报告叶绿体的分离、纯化与荧光观察【实验目的】⒈通过植物细胞叶绿体的分离与纯化, 了解细胞器分离与纯化的原理和方法。
⒉熟悉荧光显微镜的使用方法, 观察叶绿体的自发荧光和间接荧光。
【实验原理】⒈叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器, 叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器, 光合作用就是在叶绿体中进行。
由于具有这一重要功能, 所以它一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。
叶绿体是植物细胞中较大的一种的细胞器, 利用低速离心即可分离集中进行各种研究。
叶绿体结构模式图组织细胞的破碎方法很多, 包括机械法(研磨法、匀浆法、胶体磨法)和非机械法(超声波法、有机溶法、溶胀法、酶解法)。
除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外, 对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化, 都需要事先将细胞和组织破碎, 使生物大分子充分释放到溶液中, 并不丢失生物活性。
不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织, 其细胞破碎的难易不一, 使用的方法也不相同。
⒉细胞器分离的过程包括两个主要阶段:碎细胞和细胞组分的分离。
将组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行离心, 差速离心和密度梯度离心是分离亚细胞组分的常用方法。
⑴差速离心①原理: 一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状和密度, 也同离心力以及悬浮介质的粘度有关。
在一给定的离心场中, 同一时间内, 密度和大小不同的颗粒其沉降速率不同。
依次增加离心力和离心时间, 就能够使非均一悬浮液中的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部, 分批收集即可获得各种亚细胞组分。
②事例: 叶绿体的分离应在等渗溶液(0.35mol/L 氯化钠或 0.4mol/L 蔗糖溶液)中进行, 以免渗透压的改变使叶绿体受到损伤。
将匀浆液在1000r/min 的条件下离心 2min, 以去除其中的组织残渣和一些未被破碎的完整细胞。
然后, 在 3000r/min 的条件下离心 5min, 即可获得沉淀的叶绿体(混有部分细胞核)。
细胞生物学实验报告
细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告实验名称:细胞染色体观察实验目的:观察和分析细胞染色体的结构和特点,了解细胞分裂过程中染色体的变化。
实验原理:细胞染色体是细胞核中的重要结构,由DNA和蛋白质组成。
本实验将通过制作和观察细胞染色体的垂直染色体图像,以分析染色体的数量、形状和分布情况,了解染色体在细胞分裂过程中的变化。
实验材料:细胞样本(如鲤鱼鳞片)、显微镜、盐酸、细胞染色试剂(如吉姆萨染液)、载片、封片胶。
实验步骤:1. 取一片鲤鱼鳞片作为实验的细胞样本,放在载片上。
2. 把加载着细胞样本的载片放入含有5%盐酸的试管中,轻轻摇晃试管,使细胞样本变得透明。
3. 把载片放入吉姆萨染液中,染液温度控制在60°C,染色时间为30分钟。
4. 取出染色后的载片用水洗净,尽量去除多余染色。
5. 将载片倒置在干净的玻璃滑板上,用纸巾轻轻擦干水分。
6. 取一滴封片胶放在载片上,再把玻璃滑板盖在上面。
7. 将载片封片胶放在显微镜架上,用显微镜进行观察。
实验结果:经过染色后,细胞样本的染色体呈现出深蓝色,能够明显看到染色体的形态。
观察到染色体的数量、形状和分布情况。
实验分析:通过观察实验结果,我们发现染色体的数量、形状和分布情况与细胞类型有关。
染色体的数量在细胞分裂过程中是相对固定的,但在不同细胞类型中会有差异。
染色体的形状也因细胞类型而异,可以是染色体形态较为规则的条状结构或染色体断裂后形成的不规则结构。
染色体的分布情况通常有两种类型,即离散分布和集中分布,前者表示细胞核内有多个染色体团,后者表示细胞核内有染色体团。
结论:通过本次实验,我们成功观察和分析了细胞染色体的结构和特点。
染色体的数量、形状和分布情况是细胞类型的重要特征,与细胞分裂过程密切相关。
这些发现对了解细胞生物学和机体发育具有重要意义。
实验存在的问题和改进方向:本实验中,实验步骤相对简单,但在染色后的观察过程中,可能存在染色不均匀、细胞过度变形等问题。
细胞生物学实验实验报告
细胞生物学实验实验报告nThis XXX。
cytochemistry。
XXX。
cell culture and analysis。
cell cycle analysis。
cell n and analysis。
XXX to study the structure。
n。
and us laws of life of animal and plant cells.Chapter 1 Overview1.1 XXXXXX and structure of cells。
study cell logical processes。
conduct cell culture and analysis。
and study cell XXX.Chapter 2 Experimental PrinciplesIn this experiment。
XXX cells。
XXX。
cytochemistry。
XXX。
cell culture and analysis。
cell cycle analysis。
cell n and analysis。
XXX processes。
cell culture and analysis。
and cell XXX.2.1 实验流程和应用实验方法在本研究中,我们使用了多种实验方法来研究细胞的生理和遗传学特性。
其中,细胞器活体染色和显微观察是我们最常用的方法之一。
我们使用荧光染料来标记不同的细胞器,如线粒体、内质网和高尔基体,并使用显微镜观察它们在细胞中的位置和分布。
此外,我们还观察了细胞骨架的形态和组成,并使用冷冻保存技术来保存细胞的样本。
2.2 细胞器活体染色与显微观察为了观察细胞器在活体细胞中的分布和位置,我们使用了多种荧光染料。
例如,我们使用MitoTracker Red来标记线粒体,使用ER-Tracker Green来标记内质网,使用BODIPY FL C5-ceramide来标记高尔基体。
细胞生物学实验报告
细胞生物学实验报告目录:1.实验目的2.实验原理3.实验步骤4.实验结果与分析5.实验结论6.实验心得1.实验目的本实验旨在通过观察细胞的结构和功能,了解细胞的基本特征和生物学意义。
2.实验原理细胞是生物体的基本单位,由细胞膜、细胞质和细胞核组成。
细胞膜起着维持细胞内外环境平衡和物质交换的作用;细胞质内含有各种细胞器,如线粒体、高尔基体等,对细胞的代谢和功能发挥重要作用;细胞核则是细胞的遗传物质DNA的储存和转录的场所。
3.实验步骤步骤1:制备观察细胞的标本将动植物组织样本切片并固定在载玻片上,用甲醛或酒精进行固定。
步骤2:观察细胞结构将载玻片放在显微镜下,视野适当调整,首先用低倍镜观察整个组织结构,再用高倍镜观察细胞的细节。
步骤3:细胞核染色在载玻片上滴加少许乙醇溶液,保持片面湿润,然后在玻片上滴加适量的苏丹红G溶液,使其覆盖整个标本,再用玻片一端旋转均匀。
然后,用甲苯将玻片内溶液洗净,再用约10%苏丹红醇溶液染色5-10分钟,最后用水洗净,挤去水分。
步骤4:观察细胞核结构将载玻片放在显微镜下,用高倍镜观察染色的细胞核。
注意观察核膜、染色质和核仁的形态和位置。
4.实验结果与分析通过实验观察,得出以下结果和分析:-细胞膜:细胞膜是细胞的外层包裹结构,具有选择性通透性,能够控制物质的进出。
观察结果显示细胞膜是一个薄膜状结构,包裹着细胞质和细胞核。
-细胞质:细胞质是细胞核和细胞膜之间的区域,包含各种细胞器。
观察结果显示细胞质呈胶状或颗粒状,其中可以看到线粒体、高尔基体等细胞器。
-细胞核:细胞核是细胞的遗传中心,储存了细胞的遗传物质DNA。
观察结果显示细胞核通常为圆形或椭圆形,含有染色质和核仁。
5.实验结论本实验通过观察细胞的结构和功能,深入了解了细胞的基本特征和生物学意义。
细胞膜起着筛选物质进出细胞的作用,细胞质中的细胞器对细胞的代谢和功能起着重要作用,而细胞核则是细胞的遗传中心。
6.实验心得通过此次实验,我进一步了解了细胞的结构和功能。
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染色体标本的制备及观察泮力菁201100140091 2011级生物基地同组者:商倩倩【实验目的】1、掌握染色体标本制作的方法;2、认识不同生物染色体的特征,学会制作染色体组形图;【实验原理】1、制作染色体标本的意义:A、生物学方面:根据染色体特征鉴别生物及种类(例如猫38;小鼠40;大鼠42;兔44;人46;马64;鸡和狗78);B、临床医学方面:主要用于遗传性疾病的诊断及研究(例如21三体综合症,卵巢退化症;睾丸退化症等)。
因此,染色体阻性实验广泛应用与胎儿遗传性疾病早期诊断中(抽羊水做组型)。
2、染色体标本的制作原理:A、制作染色体标本的先决条件:细胞具有旺盛的分裂能力(选择活跃的组织:胸腺,骨髓,睾丸,小肠;施加药物使细胞分裂);设法得到大量的分裂中期细胞(秋水仙素)。
B、重要点:PHA:促细胞分裂,使淋巴细胞返幼,变为淋巴母细胞;秋水仙素:破坏微管装配,使纺锤体不能形成,使大量细胞停止在分裂中期;低渗作用:水进入细胞内,细胞内容空间变大,染色体间的距离拉大,抑郁cs分散开;空气干燥:使细胞和cs展开;固定:用carnoy’s solution(甲醇:冰醋酸=3:1)作用是蛋白质变性,对染色体内的组蛋白讲,变性后硬度增加,保持了染色体的“即时形态”,对细胞膜蛋白讲,变性使细胞膜硬度增加,形成屏障作用,防止了细胞内物质的外溢和丢失。
3、本实验选择的实验材料是小鼠的睾丸。
睾丸是雄性动物生殖细胞发育和成熟的部位,是产生精子的器官。
睾丸内的曲细精管从外到内依次分布有精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞以及形态渐变中的精子。
取睾丸将曲细精管中的细胞冲出后固定,然后制片染色,可以观察到动物生殖细胞减数分裂染色体的不同时相。
如果提前给动物的腹腔注射秋水仙素溶液可抑制生殖细胞的正常分裂,增加了中期分裂细胞的数目,此方法可用来进行减数分裂过程中染色体的计数与观察。
睾丸染色体标本的制备,可以用来检测雄性个体生殖细胞是否受到周围环境污染或是否发生病变,是小型动物生殖学常规实验。
4、染色体标本的制作:①观察:由于分裂期中期的染色体染色体凝集程度最高,因而我们应尽量使细胞停留在分裂期中期以便观察。
②细胞:为尽量看到多的染色体,我们应当选取具有旺盛分裂能力的细胞,这样的细胞可以来自:胸腺、骨髓、睾丸、小肠等。
我们在此实验中使用的是小鼠的精巢细胞。
在做人的染色体标本时,我们使用的是血液里的淋巴细胞。
③药物: PHA(植物细胞凝集素):PHA具有促进细胞凝集和分裂的作用。
PHA 可以使血液中的淋巴细胞还原至淋巴母细胞(只存在于骨髓中);秋水仙素:秋水仙素可以破坏微管的组装,纺锤体不能形成,细胞分裂停在中期。
与秋水仙素作用相同的药物还有长春花碱、鬼臼素、苯环己烯等。
可以促进胃管组装的药物有紫杉酚、重水等。
④空气干燥:使细胞与染色体易于分离⑤低渗作用:水进入细胞内,细胞内容空间变大,染色体距离变大,易于分离、展平。
⑥固定:Camoy’s solution,使组蛋白变性(变硬),维持染色体原有形态5、描述染色体的四个参数①相对长度=(每条染色体的长度)/(单倍常染色体之和+X染色体)*100相对长度可以用来表示每条染色体的长度②臂指数=(长臂的长度)/(短臂的长度) 臂指数可以用来确定臂的长度;为了更准确的区别亚中部和亚端部着丝粒染色体1964年Levan提出划分标准:臂指数在1.0-1.7之间,为中部着丝粒染色体(M);1.7-3.0之间,为亚中部着丝粒染色体(SM);3.0-7.0之间,为亚端部着丝粒染色体(ST);7.0以上,为端部着丝粒染色体(T)。
③着丝粒指数=(断臂长度)/(染色体全长)*100 ;着丝粒指数可以决定着丝粒的相对位置;按Levan的划分标准,着丝粒指数在50.0-37.5之间,为M;37.5-25.0之间,为SM;25.0-12.5之间,为ST;12.5-0.0之间,为T 。
④染色体臂数(NF),根据着丝粒的位置来确定端着丝粒染色体(T),NF=1 中部,亚中部,亚端部着丝粒染色体(M,SM,ST),NF=2【实验器材】1、实验材料:A、雄性小鼠(6-8周龄,20-30g);B、0.02%秋水仙素(4℃保存);生理盐水;0.3%氯化钾溶液;甲醇·冰醋酸固定液(3:1);Giemsa染液;2、实验仪器:小烧杯;剪刀;铜网;离心管;离心机;吸管;低温预冷载玻片;滤纸;普通光学显微镜;恒温培养箱(恒温水浴锅);镊子;注射器;玻璃片;【实验步骤】1、取雄性小鼠以每克体重4μg注射秋水仙素,经14~16小时后,断头法杀死小鼠,取出睾丸用生理盐水(0.9%的NaCl)洗去血污。
2、放入装有1ml 0.3%KCl液的小烧杯中剪碎至呈乳白色。
3、用铜网过滤到刻度离心管中,再加0.3%KCl液至4ml。
4、37℃静置30分钟,进行低渗处理。
5、以800~1000转/分离心8分钟。
6、弃上清液,加入2ml甲醇·冰醋酸固定液(3:1),并用吸管至管底吹气,轻轻打散细胞,固定8分钟。
7、再以800~1000转/分离心8分钟。
8、弃上清液,加1ml固定液,再制成细胞悬液,固定5分钟。
9、取洁净的低温预冷载片,距载片10~15cm高度滴下2~3滴细胞悬液,从载片一边向另一边轻轻吹气,并同时轻轻敲打载片,以使细胞均匀分布和促使染色体展开。
10、用滤纸擦去载片上多余液体,空气干燥或成文火干燥。
11、用Giemsa染色20 ~30分钟,细水冲洗玻片背面,去多余染液,气干。
镜检:低倍镜下寻找分散良好、染色适中的分裂相,高倍镜或油镜下观察染色体形态并计数。
【注】:倒置染色法——在玻璃板上用废旧的载玻片做支架,使标本载玻片的标本面向下放置到支架上,在玻璃板和标本载玻片之间滴加Giemsa染液,其目的是节省染料,避免染液快速挥发,放置染色颗粒沉淀,影响观察。
在操作时应注意,多个样品同时染色应摆放紧密,不要有间隙;地然也是应尽量慢,不要有气泡,以免部分染色体不被着色。
【实验结果】1、实验图片图1:小鼠精细胞(10*40)图2:中期染色体(10*40)【分析】由图中可以看出,小鼠睾丸内的精细胞较中期染色体大,而且一端较尖,并没有染色体的形态;图2中的染色体约为64条,大于小鼠一个细胞中的染色体数(40条)。
图3:中期染色体(放大)图4中期染色体(放大)【分析】图3中的染色体分离较好,但是背景较杂;图4中背景干净清晰,但是染色体形态分析并没有完全进入中期,因为相互之间还有些许连接;图4中染色体个数约为10,少于40个。
图5小鼠精细胞(方框)及中期染色体(圈) 图6:中期染色体(圈)及其他细胞(10*40)【分析】这两幅图的中期染色体都较为清晰,图5为14条,图6为20条;图6颜色较紫;2、实验结果分析A 、由图6的标注可以看出,精细胞是一端较为尖细的细胞,较尖的一端将来会长出精子尾结构;中期染色体彼此并不连接,而在视野中还有处于其他状态下的细胞;如果有完整的细胞,详细辨认可能看到的细胞种类有:精原细胞——是精子发生的干细胞。
胞体圆形,核居中央,染色质呈疏松网状结构;初级精母细胞——进行第一次减数分裂的细胞,由精原细胞分裂产生,胞体较大,浅染,偶见染色质丝;次级精母细胞——由初级精母细胞分裂而来,胞体较初级精母细胞小,染色质呈细网状,着色较浅;精细胞——体积较次级精母细胞更小,着色深,多呈球形或精子头的雏形;精子——形态不同于精细胞,主体梭形,带一小段尾巴。
B 、图2及图3中的染色体个数为64条,大于小鼠体细胞中的染色体个数;图4为10条,图5为14条,图6为20条;C 、根据染色体条数,可以基本判断,图2及图3处于有丝分裂的中期,或者是减数第一次分裂的中期;图6可能是处于减数第二次分裂的中期;D 、以上确定的依据是:小鼠正常的体细胞的染色体数为40条,若超过40条,分析造成这种结果的原因为几个细胞的染色体聚集到一起;在减数第二次分裂中期,由于减数第一次分裂使得染色体的数目减半成为20条,因此若没有染色体的丢失,图6所示的染色体为减数第二次分裂中期的染色体;而由于实验操作中,低渗处理,离心以及制片时滴细胞悬液的高度问题,一组染色体或许会被摔碎,变得不完整,出现图4,图5的情况;或许几个细胞的染色体混在一起,出现图2图3的情况;E 、由于制片时细胞悬液吹打不均匀,细胞悬液滴下的高度不够,在桌边震荡不够等等的操作原因,都可能够造成细胞的分散不够彻底,大团的细胞集中在一起,难以观察的现象,就像图4所示,在一定程度上影响观察;F 、若实验过程中低渗的时间过长,细胞将会破裂严重,在离心之前,细胞就已经破裂,更难以观察中期的染色体,估计图2中背景模糊混乱,与低渗过度,细胞不正常破裂有关;中期染色体精细胞其他细胞【实验反思与总结】1、实验注意事项①注射秋水仙素:应选择腹腔注射,如果观察到小鼠被注射后皮肤隆起,则表明注射到皮下,应重新注射;如果在拔出针时观察到有血珠溢出,则是因为注射时损伤了部分器官或血管,秋水仙素会随血液传递到全身,其传递速度会加快,其死亡时间可能小于15-16h,应随时观察小鼠,以防其突然死亡。
即使注射到小鼠的腹腔中,也很有可能注射到起脂肪组织中,使小鼠的死亡时间变慢。
因此应根据具体实验,适当调整注射时间和等待时间。
秋水仙素的注射浓度过高或者处理时间过长会造成染色体的过度凝集,不利于形态的观察;②处死小鼠:最好选择在小鼠将要死亡时处死小鼠,因为此时,秋水仙素的作用发挥到最大,分裂期中期的细胞最多;如果等小鼠死亡后处死小鼠,小鼠尸体可能已僵硬,难以取到精巢。
③剪碎组织:得到睾丸时,要尽量剥干净被膜和结缔组织,可以取少于1mL0.3% KCl溶液,没过杯底即可,如果液体太多则很难剪到组织,比较浪费时间。
④铜网过滤:应把组织尽量剪碎后再用铜网过滤;如果烧杯中仍有较大颗粒,则小心不要把那些颗粒倒出,在烧杯中再加入少量0.3% KCl溶液,继续剪;如果铜网上还有很多比较大的颗粒,先用少量0.3% KCl溶液将其冲入烧杯,再进行剪碎。
⑤实验步骤中的(4)所提到的30mins包括包括(5)中的离心配平时间,因此,真正的静置时间应少于30mins,细胞与0.3% KCl接触的总时间应为45mins左右。
另外,如果在最后的镜检时,观察到细胞呈圆形,比较膨胀,即证明低渗这一步骤的成功。
反之,如果低渗不成功,则细胞会比较瘪,且这样的细胞很难摔碎。
低渗处理的目的是使细胞的体积膨大,染色体松散。
处理时间过长则会使细胞破裂,染色体丢失,时间过短则染色体不能够良好分散;⑥离心:离心的转速是800-1000r/min,这样低的转速是为了防止细胞破裂。
⑦再次离心和固定:这样做是因为第一次离心之前细胞经过了低渗处理,虽然抽去了上清液,但是不可能抽干净,因此,再次离心保证细胞离开低渗环境。