总糖的测定：苯酚硫酸法
黄酒中总糖与还原糖含量测定方法比较
黄酒中总糖与还原糖含量测定方法比较黄酒作为一种传统的中国酒类饮品，其甜度对于消费者来说是一个重要的指标之一、而酒中的糖分主要可以分为总糖和还原糖两部分。
总糖是指以葡萄糖为单位计算的糖的总含量，包括单糖、双糖和多糖等。
而还原糖则是指可以通过还原反应将还原糖转化为葡萄糖的糖的含量。
目前测定黄酒中总糖和还原糖含量的方法有很多种，下面将对其中的几种常用方法进行比较。
一、酶法测定酶法测定是一种常用的测定酒中糖含量的方法。
其基本原理是利用特定的酶将糖分解成可以被检测的物质，进而测定其浓度。
常用的酶法测定总糖和还原糖的方法有苯酚-硫酸法、巴氏显色法和Nelson-Somogyi法等。
苯酚-硫酸法是一种简单、灵敏的测定方法。
该方法将样品中的糖与苯酚发生反应，生成呈紫蓝色的复合物，再用硫酸将复合物水解，生成浓黄色的产物。
样品的吸光度与糖的含量成正比。
巴氏显色法和Nelson-Somogyi法是一种将糖与多酚氧化酶作用后生成还原物质，再与葡萄糖酸生成呈蓝色的化合物的方法。
二、硫酸蒽酮显色法硫酸蒽酮显色法是一种测定还原糖含量的方法。
其基本原理是还原糖经酸水解生成葡萄糖，葡萄糖与蒽酮反应生成紫红色的产物，其吸光度与还原糖的浓度成正比。
该方法操作简单、时间短，但只适用于测定还原糖，不能测定总糖的含量。
三、显色剂法显色剂法是一种常用的测定总糖含量的方法。
其基本原理是糖与特定的显色剂反应生成有色化合物，通过测定化合物的吸光度来测定糖的含量。
显色剂法可以测定总糖的含量，但不能区分不同类型的糖。
四、色谱法色谱法是一种常用于测定糖含量的方法。
其基本原理是将糖分离开来，并通过色谱柱上的吸附剂将糖分解为可以被检测的物质。
常用的色谱法有高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱法（GC）等。
HPLC法可以快速、准确地分析各种糖类的含量，但设备价格较高。
GC法适用于分析低浓度的糖类，但需要进行样品的脂肪酸酯化处理。
综上所述，测定黄酒中总糖和还原糖含量的方法有很多种，各种方法有其优劣之处。
总糖的测定实验报告
总糖的测定实验报告
《总糖的测定实验报告》
实验目的：通过实验测定食品中的总糖含量，了解食品的营养成分，为人们合
理膳食提供参考。
实验原理：总糖是指在食品中以单糖、双糖和多糖形式存在的糖类物质的总和。
本实验采用酚硫酸法测定总糖含量，即将食品样品与酚和硫酸混合后，在高温
条件下发生酚酸反应，生成有色产物，通过比色计测定其吸光度，从而计算出
总糖的含量。
实验步骤：
1. 取适量食品样品，将其加入试管中；
2. 加入适量的酚溶液和硫酸，混合均匀；
3. 将试管放入沸水中加热，保持一定时间；
4. 冷却后，用比色计测定吸光度，并根据标准曲线计算出总糖含量。
实验结果：根据实验测定，我们得出了食品样品中总糖的含量为X%，这为我们
进一步了解食品的营养成分提供了重要的数据支持。
实验结论：通过本次实验，我们成功地测定了食品样品中总糖的含量，为人们
合理膳食提供了数据支持。
同时，也提醒大家在饮食中要适量摄入糖类，保持
身体健康。
总结：本次实验通过酚硫酸法测定了食品样品中总糖的含量，为我们提供了重
要的营养成分数据。
希望通过这样的实验，能够引起大家对于饮食营养的重视，合理搭配膳食，保持健康生活。
总糖的测定：苯酚硫酸法
总糖的测定：苯酚硫酸法2008-12-06 22:38:00 作者：来源：互联网浏览次数：758 文字大小：【大】【中】【小】苯酚-硫酸法测定总糖[原理]多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。
再以比色法测定。
[试剂]1．浓硫酸：分析纯，95.5%2． 80%苯酚：80克苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。
3． 6%苯酚：临用前以80%苯酚配制。
（每次测定均需现配）4．标准葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）,或分析纯葡萄糖。
5． 15%三氯乙酸（15%TCA）：15克TCA加85克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。
6． 5%三氯乙酸（5%TCA）：25克TCA加475克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。
7． 6mol/L 氢氧化钠：120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水。
8． 6mol/L 盐酸[操作]1．制作标准曲线：准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5. 0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。
2．样品含量测定：①取样品1克（湿样）加1ml 15%TCA溶液研磨，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液于10毫升离心管中，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液，重复3次。
最后一次将残渣一起到入离心管。
注意：总的溶液不要超出10毫升。
（既不要超出离心管的容量）。
②离心，转速3000转/分钟，共三次。
第一次15分钟，取上清液。
后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。
最后滤液保持18毫升左右。
（测肝胰腺样品时，每次取上清液时应过滤。
因为其脂肪含量大容易夹带残渣。
总糖含量的测定苯酚硫酸法
总糖含量的测定苯酚硫酸法
总糖含量的测定苯酚-硫酸法的实验原理为：苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸（或甲苯衍生物）起显色反应，己糖在490nm处（戊糖及糖醛酸在480nm）有最大吸收，吸收值与糖含量呈线性关系。
实验材料包括葡萄糖试剂、试剂盒、浓硫酸、苯酚等，实验步骤如下：
1. 材料处理：将0.5～1g所测的材料捣碎，用适量蒸馏水、玻璃碾磨器碾磨并分次抽提，混合液离心得抽提液即样品液。
2. 标准曲线制作：取50μg/ml的己糖标准溶液0ml，0.1ml，0.2ml，0.3ml，0.4ml，0.5ml于试管中，用水补足到0.5ml，加0.3ml 5%酚溶液，混匀后快速加入1.8ml浓硫酸，振荡混匀，室温放置20min即可出现橙黄色，以第一管调零点，可于490nm处比色测定读OD值。
以糖含量为横坐标，相应的OD值为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 样品含量测定：取0.5ml内含2～25μg糖量，同样加入0.3ml 5%酚溶液，混匀后立刻沿管壁加入浓硫酸1.8ml，振荡混匀，达室温后，可测490nm处的OD值，从标准曲线上查相应糖含量。
该方法不需要沸水浴加热，且蛋白质的存在对显色反应影响不大，故也可用于糖蛋白中的己糖测定，还可用于己糖甲基化衍生物和6-脱氧核糖、戊糖的测定。
除此之外，该方法的热量来自浓硫酸与水的混合，因此加浓硫酸时反应快，且应立即混匀，试管应大一些，以免烫手。
实验五总糖的测定-蒽酮比色法
苯酚-硫酸法两种测量固体含糖量的方法选择一种比较适合的自己的方法两种方法可以对比下那种更好苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。
再以比色法测定。
编辑本段原理多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。
再以比色法测定。
编辑本段试剂1．浓硫酸：分析纯，95.5%2． 80%苯酚：80克苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。
3． 6%苯酚：临用前以80%苯酚配制。
（每次测定均需现配）4．标准葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）,或分析纯葡萄糖。
5． 15%三氯乙酸（15%TCA）：15克TCA加85克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。
6． 5%三氯乙酸（5%TCA）：25克TCA加475克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。
7． 6mol/L 氢氧化钠：120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水。
8． 6mol/L 盐酸编辑本段操作1．制作标准曲线：准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。
2．样品含量测定：①取样品1克（湿样）加1ml 15%TCA溶液研磨，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液于10毫升离心管中，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液，重复3次。
最后一次将残渣一起到入离心管。
注意：总的溶液不要超出10毫升。
（既不要超出离心管的容量）。
②离心，转速3000转/分钟，共三次。
第一次15分钟，取上清液。
后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。
蒽酮硫酸法测定总糖
苯酚硫酸法和蒽酮硫酸法测总糖的方法及步骤2011-07-15 11:45:19| 分类：默认分类|字号订阅植物体内的碳素营养状况以及农产品的品质性状，常以可溶性糖和淀粉的含量作为重要指标，本实验学习几种定量测定可溶性糖和淀粉的方法。
（一）苯酚法测定可溶性糖【实验原理】植物体内的可溶性糖主要是指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖。
苯酚法测定可溶性糖的原理是：糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10－100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。
苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳定160min以上。
【实验仪器及试剂】1．仪器：分光光度计、电炉、铝锅、20mL刻度试管、刻度吸管、记号笔、吸水纸适量。
2．试剂：（1）90％苯酚溶液：称取90g苯酚（AR），加蒸馏水10mL溶解，在室温下可保存数月。
（2）9％苯酚溶液：取3mL 90％苯酚溶液，加蒸馏水至30mL，现配现用。
（3）浓硫酸（比重1.84）。
（4）1％蔗糖标准液：将分析纯蔗糖在80℃下烘至恒重，精确称取1.000g。
加少量水溶解，移入100mL容量瓶中，加入0.5mL浓硫酸，用蒸馏水定容至刻度。
（5）100ug/L蔗糖标准液：精确吸取1％蔗糖标准液1mL加入100mL容量瓶中，加水定容。
【实验步骤】1．标准曲线的制作：取20mL刻度试管11支，从0－10分别编号，按表27－1加入溶液和水，然后按顺序向试管内加入1mL 9％苯酚溶液，摇匀，再从管液正面以5－20s。
加入5 mL浓硫酸，摇匀。
比色液总体积为8 mL，在恒温下放置30min。
显色。
然后以空白为参比，在485nm波长下比色测定，以糖含量为横坐标，光密度为纵坐标，绘制标准曲线，求出标准直线方程。
2．可溶性糖的提取取新鲜植物叶片，擦净表面污物，剪碎混匀，称取0.10－0.30g，共3份，分别放入3支刻度试管中，加入5-10mL 蒸馏水，塑料薄膜封口，于沸水中提取30min （提取2次），提取液过滤入25mL容量瓶中，反复冲洗试管及残渣，定容至刻度。
苯酚_硫酸法测定食品总糖方法的应用和改进
半乳糖
90. 4 90. 7 92. 2 88. 1 99. 2 97. 2 77. 1
乳糖
73. 2 70. 3 70. 5 66. 0 73. 6 71. 8 90. 6
麦芽粮
63. 9 58. 2 60. 2 56. 6 73. 1 83. 0 99. 0
庶糖
102. 3 100. 9 102. 4 99. 8 103. 8 99. 8 100. 1
淀粉
103. 0 103. 4 101. 0 100. 7 102. 1 102. 5 99. 4
总糖
89. 8 86. 7 88. 8
81. 1 84. 0 99. 3
总糖 + 纤维 -
103. 9
上面的 6 种方法在资料上转载 ,以葡萄糖计 ;苯酚法以庶 糖计 。本法总糖回收范围 91. 0 %～107. 3 % x = 99. 3 % ;总糖 + 纤维素 92. 0 %～110. 2 % x = 103. 9 %
本法结果明显优于以上 6 种方法 。单糖的回收以半乳糖
结果较差 ,纤维素不影响总糖的测定 ,且其他各种纯品糖 、总 糖回收符合检验要求 。
2. 2 测定样品 、观察精密度 选择 2 个含糖量低 、含纤维素高 的样品 ,柿茶叶 、辣椒面 ;2 个含糖量高 ,含纤维素少的样品 ,面 粉 、大米 。测定含糖量并观察精密度 。
素 。5 %苯酚溶液 、分析纯浓硫酸 、15 %盐酸 。
0. 5ml 加入总糖中按总糖测定 。
表 1 不同测定方法对纯品糖 、总糖 、总糖 + 纤维素 、回收 ( %)
方法
斐林 1 号 斐林 2 号 甘油铜法 氧化法 DNS 法 蒽酮法 苯酚法
动物多糖--总糖的测定
1.硫酸蒽酮法（1）样品处理：称取0.1g样品（动物），以E/S比为1/25的比例，加入0.004g酸性蛋白酶定容至10mL容量瓶中，在pH=2,温度在37℃下，进行水解5h，水解后在100℃灭酶3min。
将经酶处理过的样品用5mL注射器经0.45um针孔滤膜过滤，收集滤液，并取1mL 滤液定容至50mL容量瓶中待用。
（2）紫外分光检测：准确称取0.1g葡萄糖（分析纯），溶解并用蒸馏水定容到100ml后，分别取出1ml、2ml、3ml、4ml、5ml分别加入到50的容量瓶中，并用蒸馏水定容到50ml,配成了浓度分别为20ug/ml、40ug/ml、60ug/ml 、80ug/ml、100 g/ml, 以蒸馏水做对照空白，各取1ml于试管中，再加入4ml蒽酮试剂，迅速浸入冰水中冷却，待几只试管均匀加完后，一起浸入100℃恒温水浴锅中，为防止水分蒸发，应在试管口上加塞。
自温度重新升至100℃起计时，准确保温10min后取出，用流动水冷却。
然后，于室温中平衡片刻（约10min左右），再在分光光度计上，进行光谱扫描，检测在波长620nm有最大吸收峰，选择620nm紫外检测波长，用0.5cm厚度的比色杯进行比色。
其标准曲线制作如表1.1 所示：表1.1 葡萄糖标准曲线结果标样号浓度（ug/ml）吸光度(ABS)1 20.000 0.067282 40.000 0.257233 60.000 0.438604 80.000 0.589235 100.000 0.74802多糖含量（%）=（样品浓度×稀释倍数×样品体积）/式样称重量×100%。
2．苯酚-硫酸法（1）标准曲线的制备: 准确称量干燥至恒重的葡萄糖标准品0.020g,置于体积500mL的容量瓶中定容并摇匀,得到葡萄糖的标准溶液。
以2.0mL蒸馏水作为空白样,依次取0.4mL, 0.6mL, 0.8mL, l.0mL, 1.2mL,1.4mL, 1.6mL,1.8mL 葡萄糖标准溶液,用蒸馏水补足至2.0mL,在每个样品中按顺序加入浓度为6%的苯酚溶液l.0mL,98%的浓硫酸5.0mL,静置10min后摇匀,室温下放置20min,再在分光光度计上，进行光谱扫描，检测在波长490nm有最大吸收峰，选择490nm紫外检测波长，用0.5cm厚度的比色杯进行比色，测得吸光值。
苯酚-硫酸法测定樱桃酒中总糖
营养成分 和保健价值 ， 由其酿造 而成 的樱桃酒 在基本 保 持其原有价 值的基础上 更增 添了许多新 的保健 因 子 ， 以说是集营养 、 可 保健 、 尚和文明于一身＿］ 时 ｌ。樱 － ２
桃酒 中的总糖含量 是影 响樱 桃酒质 量和 区别樱 桃酒
类别的主要指标之一 ， 目前测定 总糖 的方法有高效液 相色谱法 、 直接滴定法及 间接滴定 法等 ， 者仪器 昂 前 贵， 后者方法简单 ， 但易受试验人员操作熟练程度 、 滴 定终点难判断等影响口 １ 。本文采用 苯酚一 硫酸显色建立
樱桃酒是 以新鲜樱桃或樱桃 汁为原料 ， 通过添加
的或 自然存在的酵母发酵酿制而成 。樱桃具有丰富的
分析纯。
葡萄糖标准溶液 的配制 ：精密称取 １５℃干燥至 ０ 恒重 的 Ｄ 无水 葡 萄糖 ０ ５０ｇ 于 ５０ｍ 一 ． ０ 置 ０ ０ Ｌ容 量瓶
中， 加水溶解并稀释至刻度摇匀 ， １０ｇ ／ 得 ０ ｇ ￣ｍＬ的储备 溶液 ， 备用 。 ５ ％苯酚溶液的配制 ： 精密称取重蒸馏苯酚 １．ｇ ２ ， ５
ｏ ｔｌ ｕ ａ ｏ ｔｎ ｎｃ ｅ ｒ ｎ ． ｆｏａ ｇ ｒｃ ｎｅ ｔ ｈ ｒｙｗｉｅ ｔ ｓ ｉ
Ｋ ｅ ｒ ｓ ｃ ｅ ｎ ； ｏａ ｕ ａ ； ｈ ｎ ｌ ｕ ｆｒｃａ ｉ ｔｏ ｙｗｏ ｄ ： ｈ ｗｙｗｉ ｅ ｔｔｌ ｇ ｒ ｐ ｅ ｏ－ｓ ｌ ｉ ｃｄｍｅｈ ｄ ｓ ｕ
港 ２２０ ） ２ ０ ４
摘 要 ： 立 测 定樱 桃 酒 中总糖 含 量 的 方 法。采 用 苯 酚一 酸 法 ， 别 考 察该 方 法 的测 定 波 长 、 密度 、 确度 及稳 定 建 硫 分 精 准
Hale Waihona Puke 性。结果表 明， 测定波长为 ４ ０ ｍ， ９ ｎ 样品樱桃酒 中总糖含量平均为 ５ ． ， ６ Ｌ 相对标准偏差（ ｓ ） ０ ４ 平均回收 ８ Ｒ Ｄ 为 ． ％， ５
糖含量测定-苯酚硫酸法
1．1原理
多糖可以被浓硫酸在适当高温下水解，产生单糖，并迅速脱水成糠醛衍生物，该衍生物在强酸条件下与苯酚起显色反应，生成橙黄色物质，在波长490nm处和一定浓度范围内，其吸光度值与糖含量呈线性关系，从而可用比色法测定其含量。
1．2实验步骤
1．2．1100μg/ml D-葡萄糖对照品溶液制备
精密称取10mg D-葡萄糖，加纯化水充分溶解，定容至100ml，作为对照品溶液。
1．2．26%苯酚溶液配制
称取6g苯酚，加入纯化水充分溶解，定容至100ml，备用。
1．2．3对照品管制备
取8支试管，按下表按下表加入100μg/ml D-葡萄糖对照品溶液：
1．2．4供试品管制备
将供试品采用纯化水稀释至D-葡萄糖标准曲线范围内，每步稀释应不超过10倍。
10倍及以内的稀释直接在玻璃试管中进行。
10倍稀释用移液器量取供试品100μl，加纯化水900μl，振荡混匀。
原倍稀释直接取供试品1.0ml加入玻璃试管中。
10倍以内稀释操作按下表在试管中加入相应溶液。
大于10倍的稀释需按下表操作在离心管中先做10倍或100倍稀释（2步10倍稀释）后，再在玻璃试管中按照下表量取稀释。
更高稀释倍数也按照上述原则进行。
1．2．5试验操作
向含有1ml标对照品和供试品的试管中加入0.6ml 6%苯酚溶液，混匀，迅速加入3ml浓硫酸，混匀，置沸水浴反应20分钟。
显色后，冷却至室温，依据紫外-可见分光光度计标准操。
硫酸苯酚法测可溶性总糖含量
硫酸苯酚法测可溶性总糖含量一、测定原理可溶性糖主要有能溶于水及乙醇的可溶性单糖和寡聚糖。
糖在浓硫酸作用下脱水生成糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚所合成一种橙红色化合物，在10~100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，因此可用比色法在此波长下测定。
硫酸苯酚法可以用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，灵敏度高且不受蛋白质存在的影响，产生的颜色稳定时间160min以上。
二、实验试剂1．90%苯酚溶液：称取90g苯酚，加蒸馏水定容至100ml。
2．9%苯酚溶液：取3ml 90%苯酚溶液，加蒸馏水至30ml，现配先用。
3．浓硫酸（比重）4．1%蔗糖标准液：将分析纯蔗糖在80 ℃下烘至恒重，精确称取1.000 g ，加少量水溶解，移入100ml 容量瓶中，加入浓硫酸，用蒸馏水定容至刻度。
5．100μg/L 蔗糖标准液：精确吸取1％蔗糖标准液lml加入100ml容量瓶中，加蒸馏水定容。
三、仪器设备分光光度计，50ml比色管7支，移液管四、实验步骤1．标准曲线的制作取20 ml刻度试管6支，从0～5分别编号，按表1加入溶液和水，然后按顺序向试管内加入1ml 9％苯酚溶液，摇匀，再从管液正面以5～20 s 时间加入5ml浓硫酸，摇匀。
比色液总体积为8ml，在室温下放置3 0 min ，显色。
然后以空白为参比，在485 nm波长下比色测定，以糖含量为横坐标，光密度为纵坐标，绘制标准曲线，求出标准直线方程。
表一2．可溶性糖的提取称取样品～0.3 g, 放入1支刻度试管中，加入5～10 ml蒸馏水，塑料薄膜封口，于沸水中提取30min（提取2次），提取液过滤入25 ml容量瓶中，反复冲洗试管及残渣，定容至刻度。
3．测定吸取样品液于试管中（重复2次），加蒸馏水1.5 ml，同制作标准曲线的步骤，按顺序分别加入苯酚、浓硫酸溶液，显色并测定光密度。
由标准线性方程求出糖的量，计算测试样品中糖含量。
米酒总糖实验报告
一、实验目的1. 掌握米酒中总糖含量的测定方法。
2. 了解米酒发酵过程中糖分的转化规律。
3. 分析不同发酵条件下米酒总糖含量的变化。
二、实验原理米酒的制作过程中，糯米中的淀粉在微生物（如酵母菌）的作用下，被分解为葡萄糖，进而转化为乙醇和二氧化碳。
本实验采用苯酚硫酸法测定米酒中的总糖含量，该方法基于糖与苯酚在硫酸作用下的颜色反应，颜色深浅与糖含量成正比。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 糯米- 酵母菌- 水浴锅- 研钵- 研杵- 移液管- 试管- 烧杯- 酒精灯- 苯酚- 硫酸- 氢氧化钠- 蒸馏水2. 实验仪器：- 分光光度计- 移液器- 移液管- 烧杯- 玻璃棒- 试管四、实验方法1. 制备米酒：- 将糯米洗净，浸泡8小时后，蒸煮30分钟。
- 将蒸熟的糯米冷却至35℃左右，加入酵母菌，搅拌均匀。
- 将混合物装入发酵瓶中，密封，置于28℃的恒温培养箱中发酵。
2. 测定总糖含量：- 取一定量的发酵液，加入苯酚和硫酸，混合均匀。
- 将混合液置于沸水浴中加热10分钟。
- 取出冷却至室温，用蒸馏水定容至一定体积。
- 使用分光光度计在波长620nm处测定吸光度值。
- 根据标准曲线计算发酵液中总糖含量。
五、实验结果与分析1. 不同发酵时间对米酒总糖含量的影响：- 随着发酵时间的延长，米酒总糖含量逐渐降低，发酵第5天时总糖含量达到最低值。
2. 不同发酵温度对米酒总糖含量的影响：- 在28℃的恒温培养箱中发酵，米酒总糖含量最低，表明该温度有利于酵母菌的生长和淀粉的分解。
3. 不同酵母菌种类对米酒总糖含量的影响：- 实验中使用的酵母菌为酿酒酵母，其发酵效果较好，总糖含量较低。
六、实验结论1. 本实验采用苯酚硫酸法成功测定了米酒中的总糖含量。
2. 发酵过程中，糯米中的淀粉被酵母菌分解为葡萄糖，进而转化为乙醇和二氧化碳。
3. 发酵温度、发酵时间和酵母菌种类等因素对米酒总糖含量有显著影响。
七、实验讨论1. 本实验结果表明，发酵温度对米酒总糖含量有显著影响，适宜的发酵温度有利于酵母菌的生长和淀粉的分解。
苯酚硫酸法测定草莓中总糖含量
摘要：目的：建立草莓中总多糖含量测定方法。
方法：以葡萄糖为对照品，采用苯酚-硫酸法，在490nm 处测定吸光度。
结果：葡萄糖浓度在10～100mg/L 范围内与吸光度呈良好的线性关系（r=0.9995）；回收率在90.0%~101.5%范围内，测得不同品种的草莓总多糖含量在3.43%~5.43%。
结论：该方法简便准确、稳定可靠，可作为草莓中总多糖含量的测定方法。
关键词：苯酚-硫酸法；草莓；总糖含量中图分类号：TS262.6文献标识码：ADOI 编号：10.14025/ki.jlny.2019.04.011蔡红梅1，田子玉2*（1.吉林省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所；2.吉林省农业科学院农业经济与信息研究所，吉林长春130033）苯酚-硫酸法测定草莓中总糖含量shi yan yanjiu草莓是蔷薇科草莓属植物，由于其营养丰富、含有多种营养物质、且有保健功效等特点广受人们的喜爱。
已报道的总糖含量测定方法有苯酚-硫酸[1-3]、蒽酮-硫酸[4-5]等，其中，苯酚-硫酸法的应用最多。
本实验建立苯酚-硫酸法测定草莓中总糖含量的方法，旨在为草莓品质分析提供理论基础。
1材料与方法1.1原料不同品种的草莓，购自长春市的某超市和农贸市场。
1.2试剂苯酚、葡萄糖、浓硫酸、乙腈等试剂均为国产分析纯。
1.3仪器电子天平（德国Sartorius ）；GSY-11型恒温水浴箱（北京市医疗设备厂）；分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；数控超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；TDL －40B 离心机（上海安亭科学仪器厂）。
1.4供试溶液的制备草莓匀浆后，准确称取1g （精确到0.001g ）于25mL 具塞试管内，加入10mL 的乙腈-水（v ∶v=1∶9）溶液，涡旋10s ，超声提取30min ，离心，取上清液，制得供试溶液。
1.5标准溶液的配制取适量葡萄糖于105℃烘箱内烘至恒重，精确称取0.1000g 于100mL 容量瓶，用蒸馏水溶解定容刻度，即得浓度为1.0000mg/mL 的葡萄糖标准溶液。
苯酚硫酸法测多糖含量
一、硫酸苯酚法测多糖含量1、试剂配制1. 浓硫酸：分析纯，95.5%2. 5%苯酚：取苯酚5 g，置100 ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀后，置棕色试剂瓶中，冰箱中冷藏储存备用。
3. 标准葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）或分析纯葡萄糖。
准确称取20m g经105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品于500ml容量瓶中，蒸馏水溶解定容。
2、制作标准曲线准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）10mg于250ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8及0.9ml，各以蒸馏水补至1.0ml，然后加入5%苯酚1ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20min以后于490nm测光密度，以1.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。
1 2 3 4 5 6 7 8 0 标准葡萄糖溶液0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 0 （mL）蒸馏水（mL ）0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 1.0 5%苯酚（mL）0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 浓硫酸（mL） 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 3 注意事项（1）此法简单、快速、灵敏、重复性好，对每种糖仅制作一条标准曲线，颜色持久。
（2）制作标准线宜用相应的标准多糖，如用葡萄糖，应以校正系数0.9校正μg数。
（3）对杂多糖，分析结果可根据各单糖的组成比及主要组分单糖的标准曲线的校正系数加以校正计算（4）测定时根据光密度值确定取样的量。
光密度值最好在0.1——0.3之间。
比如：小于0.1之下可以考虑取样品时取2克，仍取0.2ml样品液，如大于0.3可以减半取0.1ml的样品液测定。
（5）正常的反应溶液是深棕色。
糖越多颜色越深。
注意硫酸的纯度。
空白的颜色很深，说明你的空白中的苯酚被氧化了深红是醌（苯酚氧化生成）的颜色颜色过深的话说明你的酚的难度过大，一般是5%但是没遇到你说的那么严重，不是深红色的做的好的时候颜色很浅，颜色深点也有肯能。
苯酚-浓硫酸
苯酚—浓硫酸法测糖含量原理是糖样品在浓硫酸作用下，迅速脱水生成糖醛衍生物，然后和苯酚缩合反应，显橙黄色，在波长490 nm处和一定浓度范围内，其吸光度和糖浓度呈线性关系用比色法与葡萄糖标准系列比较进行定量分析。
①标准曲线的测定
取100 mg，用蒸馏水定容至1000 mL，得到浓度为0.01%的葡萄糖标准溶滚。
分别稀释2，4，5，8倍，各取2.0 mL分别置于试管内，再向各试管中加入1.0 mL 0.6%的苯酚溶液，振荡再加入5.0 mL浓硫酸，迅速振荡摇匀，放在室温下反应15至20分钟。
另取2ml蒸馏水，同上操作加苯酚和浓硫酸进行显色反应，作为空白对照。
分别于490 nm处测定以上溶液的吸光度值，以葡萄糖的浓度为纵坐标，吸光度值为横坐标，绘制标准曲线，并求出回归方程。
图5 糖浓度标准曲线
②苯酚—浓硫酸法测定发酵液中含糖量
反应液为2.0 mL发酵液（按具体情况稀释一定倍数），1.0 mL 0.6%苯酚溶液，5.0 mL浓硫酸，在沸水中反应15至20分钟后，冷却，在490 nm处测定吸光度。
并根据标准曲线求出糖浓度，以时间为横坐标，以糖浓度为纵坐标作图。
苯酚-硫酸法测定菊苣根中总糖的含量
苯酚－硫酸法测定菊苣根中总糖的含量目的：研究菊苣根总糖的测定方法。
方法：采用苯酚-硫酸法，在488nm处测菊苣根中总糖的含量。
结果：回归方程为Y=10.908X-0.13264，r=0.9999，线性范围为30-80μg/ml。
平均回收率为103.27%，RSD=2.20%。
菊苣根中平均总糖含量为平均含量为34.613mg/g。
结论：方法简便，结果准确，为菊苣根总糖的进一步研究奠定良好的基础。
标签：菊苣根总糖苯酚-硫酸法菊苣根为菊科植物毛菊苣(CichoriumglandulosumBoiss.etIIout )及菊苣(CichoriumintybusL.)干燥的根。
菊苣系维吾尔族习用药材，维吾尔语名为卡申纳，有清肝利胆、健胃消食、利尿消肿之功效[1]。
《中国药典》2000年版一部只收载其地上部分。
菊苣根主要含有三萜、倍半萜、有机酸等类成分[2-4]。
现代药理研究表明，菊苣根具有改善消化器官活动机能、改善心脏功能、保肝降脂、降血糖和抗菌等作用[5]。
为了确定菊苣根总糖的含量，本文利用苯酚-硫酸法制得醛糖衍生物，采用分光光度法对菊苣根总糖含量进行测定。
1 仪器与试药SpectrumLab 54分光光度计(上海棱光技术有限公司)，RE52CS-2旋转薄膜蒸发仪(上海亚荣仪器厂)，KQ-400DBC超声清洗仪(昆山市超生仪器有限公司)，BS110S分析天平(北京，赛多利斯)，DZF-6021型真空干燥箱(上海精宏实验设备厂);其它所用试剂均为分析纯。
菊苣根采自新疆乌鲁木齐市南山，经新疆自治区中医医院李永和主任药师鉴定为菊科植物菊苣(CichoriumintybusL.)的干燥根。
2 方法与结果2.菊苣根总糖的提取：菊苣根干燥，粉碎过20目筛，精密称取药材粉末10g，用石油醚索氏回流提取4h，药渣在50℃减压干燥至干。
然后精密称取脱脂后的药渣3g，加蒸馏水100mL，回流提取3次。
每次20min，过滤，合并滤液并定容至200 ml，得0.015g/ml的总糖提取液，备用。
总糖含量的测定方法
总糖含量的测定方法
总糖含量的测定方法有以下几种：
1. 酚硫酸法：将样品与酚硫酸溶液反应生成花色素，然后用紫外分光光度计测定吸光度值，并通过标准曲线计算出总糖含量。
2. 比色法：将样品与苯酚溶液和硫酸溶液混合反应，生成芝麻酚，再用紫外分光光度计测定吸光度值，并通过标准曲线计算出总糖含量。
3. 酵母法：将样品加入含糖培养基，然后将培养基放入恒温摇床中培养，通过测定培养液中呼吸产生的二氧化碳量来计算总糖含量。
4. 红外光谱法：将样品与KBr混合制成透明的样品片，然后使用红外光谱仪进行测定，通过分析样品片的红外吸收光谱来计算总糖含量。
5. 高压液相色谱法：将样品通过高压液相色谱仪进行分析，通过分离出的糖类成分来计算总糖含量。
苯酚硫酸法
苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。
再以比色法测定。
编辑本段原理多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。
再以比色法测定。
编辑本段试剂1．浓硫酸：分析纯，95.5%2． 80%苯酚：80克苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。
3． 6%苯酚：临用前以80%苯酚配制。
（每次测定均需现配）4．标准葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）,或分析纯葡萄糖。
5． 15%三氯乙酸（15%TCA）：15克TCA加85克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。
6． 5%三氯乙酸（5%TCA）：25克TCA加475克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。
7． 6mol/L 氢氧化钠：120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水。
8． 6mol/L 盐酸编辑本段操作1．制作标准曲线：准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。
2．样品含量测定：①取样品1克（湿样）加1ml 15%TCA溶液研磨，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液于10毫升离心管中，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液，重复3次。
最后一次将残渣一起到入离心管。
注意：总的溶液不要超出10毫升。
（既不要超出离心管的容量）。
②离心，转速3000转/分钟，共三次。
第一次15分钟，取上清液。
后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。
最后滤液保持18毫升左右。
（测肝胰腺样品时，每次取上清液时应过滤。
因为其脂肪含量大容易夹带残渣。
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总糖的测定：苯酚硫酸法
2008-12-06 22:38:00 作者：来源：互联网浏览次数：758 文字大小：【大】【中】【小】
苯酚-硫酸法测定总糖
[原理]
多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。
再以比色法测定。
[试剂]
1．浓硫酸：分析纯，95.5%
2． 80%苯酚：80克苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。
3． 6%苯酚：临用前以80%苯酚配制。
（每次测定均需现配）
4．标准葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）,或分析纯葡萄糖。
5． 15%三氯乙酸（15%TCA）：15克TCA加85克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。
6． 5%三氯乙酸（5%TCA）：25克TCA加475克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。
7． 6mol/L 氢氧化钠：120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水。
8． 6mol/L 盐酸
[操作]
1．制作标准曲线：准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.
4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5. 0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。
2．样品含量测定：
①取样品1克（湿样）加1ml 15%TCA溶液研磨，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液于10毫升离心管中，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液，重复3次。
最后一次将残渣一起到入离心管。
注意：总的溶液不要超出10毫升。
（既不要超出离心管的容量）。
②离心，转速3000转/分钟，共三次。
第一次15分钟，取上清液。
后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。
最后滤液保持18毫升左右。
（测肝胰腺样品时，每次取上清液时应过滤。
因为其脂肪含量大容易夹带残渣。
）
③水浴，在向比色管中加入2毫升6mol/L 盐酸之后摇匀，在96℃水浴锅中水浴2小时。
④定容取样。
水浴后，用流水冷却后加入2毫升6mol/L 氢氧化钠摇匀。
定容至25毫升的容量瓶中。
吸取0.2 ml的样品液，以蒸馏补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却室温放置20分钟以后于490nm测光密度。
每次测定取双样对照。
以标准曲线计算多糖含量。
[注意]
测定时根据光密度值确定取样的量。
光密度值最好在0.1——0.3之间。
比如：小于0.1之下可以考虑取样品时取2克，仍取0.2ml样品液，如大于0.3可以减半取0.1ml的样品液测定。