酶法测定游离脂肪酸液体试剂盒的稳定性评价
血清游离脂肪酸酶法测定的方法学评价分析与生物学变异探究
血清游离脂肪酸酶法测定的方法学评价分析与生物学变异探究作者：郭欣桐来源：《现代养生·下半月版》 2015年第7期郭欣桐河北大学临床医学院河北省保定市071000【摘要】目的：分析研究血清游离脂肪酸酶法测定的正确度以及精密度，并探究血清FFA个体之间与个体内的生物学变异。
方法：血清游离脂肪酸酶法的正确度以及精密度将采用EP5-A2文件以及EP15-A文件进行评价，随机选取12名健康者在6周内每间隔2周测定一次血清FFA浓度，并分析个体间生物学变异以及个体内生物学变异。
结果：批内不精密度为 2.14%、批间不精密度为3.42%、日间不精密度为3.65%、室内不精密度为5.43%。
测定结果的百分比偏差分别为24.21%、-0.92%、-1.51%。
血清FFA个体间生物学变异为8.44%、个体内为19.32%。
结论：血清游离脂肪酸酶法测定的正确度以及精密度均满足相关要求，而血清FFA个体间以及个体内的生物学变异可作为实验室质量规范的参考依据。
【关键词】血清游离脂肪酸酶法；精密度；正确度；方法学评价；生物学变异游离脂肪酸（FFA）也可称为非酯化脂肪酸。
其在血液中的浓度可作为评价人体脂肪代谢水平的指标。
过去临床多采用气相色谱法或高效液相色谱法进行血清FFA检测但上述检测方法具有较为严格的操作要求，而且检测成本也相对较高[1]。
近年来酶学比色法（酶法）在血清FFA检测工作中的应用范围愈趋广泛，本次研究将采用方法学评价血清游离脂肪酸酶法测定的临床应用价值，探究血清FFA个体之间与个体内的生物学变异，现报道如下。
1资料和方法1.1研究对象本次研究将随机选择12名健康者作为研究对象，其中男性3例，女性9例；年龄：22-24岁，平均年龄为（22.3±1.1）岁；BMI为18.48-26.71kg/m2，平均BMI为（21.31±1.3）kg/m2。
排除具有心血管病史、手术史、吸烟以及饮酒者。
游离脂肪酸(NEFA)测定试剂盒(ACS-ACOD酶法)产品技术要求百奥泰康
游离脂肪酸(NEFA)测定试剂盒（ACS-ACOD酶法）适用范围：该产品用于体外定量测定人血清中游离脂肪酸的浓度。
1.1产品规格1.2 组成成分1.2.1 试剂组成试剂1：磷酸盐缓冲液（pH=7.0） 50mmol/L；辅酶A 0.5mmol/L；ATP 3 mmol/L；乙酰辅酶A合成酶（ACS ） 0.4KU/L；）2mmol/L；氯化镁（MgCl2偶联终点比色法结合成份（Trinder结合成份）0.5g/L；表面活性剂和稳定剂＜1%；试剂2：磷酸盐缓冲液（pH=7.0） 50mmol/L；乙酰辅酶 A 氧化酶（ACOD ）30KU/L；过氧化物酶（POD ） 45KU/L；4-氨基安替比林（4AAP） 1.5g/L；表面活性剂和稳定剂＜1%1.2.2 校准品的组成单水平的液体校准品，在50mM pH7.0的磷酸盐缓冲液中添加十六烷酸纯品，稳定剂<0.5%；定值范围：0.8-1.2mmol/L。
1.2.3质控品的组成两个水平的液体质控品，在牛血清(20g/L)中加入十六烷酸纯品，添加的牛血清的比例为5%-10%，稳定剂<0.5%；目标浓度范围：低水平（0.30-0.60）mmol/L，高水平（0.80-1.20）mmol/L。
2.1 外观液体双试剂：试剂1：无色或淡黄色澄清液体；试剂2：黄色澄清液体。
校准品：无色或淡黄色澄清液体。
质控品：无色或淡黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 空白吸光度试剂空白吸光度应≤0.3。
2.4 分析灵敏度浓度为0.5mmol/L时，吸光度差值的绝对值在0.01-0.2范围内。
2.5 线性在(0,3.0]mmol/L线性范围内，线性相关系数r 应≥0.995；在(0,1.2] mol/L 时绝对偏差不超过0.18mmol/L；在（1.2,3.0]mmol/L范围内的相对偏差不超过±15%。
2.6 精密度变异系数CV应≤6%2.7 批间差不同批号之间测定结果的相对极差应≤10%。
游离脂肪酸测定试剂盒(ACS-ACOD法)产品技术要求华宇亿康
游离脂肪酸测定试剂盒（ACS-ACOD法）适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中游离脂肪酸（NEFA）的含量。
1.1 产品型号/规格试剂1：1×8mL、试剂2：1×2mL；试剂1：1×16mL、试剂2：1×4mL；试剂1：1×20mL、试剂2：1×5mL；试剂1：1×32mL、试剂2：1×8mL；试剂1：1×40mL、试剂2：1×10mL；试剂1：2×40mL、试剂2：2×10mL；试剂1：4×40mL、试剂2：4×10mL；试剂1：2×40mL、试剂2：1×20mL；试剂1：4×40mL、试剂2：2×20mL；试剂1：8×40mL、试剂2：8×10mL；试剂1：1×80mL、试剂2：1×20mL；试剂1：2×80mL、试剂2：2×20mL；试剂1：4×80mL、试剂2：4×20mL；试剂1：8×80mL、试剂2：8×20mL；试剂1：1×60mL、试剂2：1×15mL；试剂1：2×60mL、试剂2：2×15mL；试剂1：3×60mL、试剂2：3×15mL；试剂1：8×50mL、试剂2：2×50mL；试剂1：6×70mL、试剂2：3×35mL；试剂1：5×40mL、试剂2：1×50mL；试剂1：4×50mL、试剂2：1×50mL；试剂1：3×60mL、试剂2：1×45mL；试剂1：8×20mL、试剂2：8×5mL；试剂1：1×20L、试剂2：1×5L；试剂1：1×10L、试剂2：1×2.5L；试剂1：1×4L、试剂2：1×1L；试剂1：1×1L、试剂2：1×250mL。
小鼠游离脂肪酸(FFA)酶联免疫分析 试剂盒 说明书
小鼠游离脂肪酸（FFA）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围：7.8ng/ml-500ng/ml最低检测限：1.95ng/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的小鼠FFA，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、尿液或其它相关生物液体中FFA含量。
说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
概述游离脂肪酸，即未脂化的脂肪酸（nonesterified fatty acid），是中性脂肪分解成的物质。
血浆中含量甚少，仅占总脂肪酸含量的5%～10%，在血浆中半衰期2～3分钟，主要与血清蛋白结合转运到全身组织利用。
当肌肉活动所需能源－肝醣耗尽时，脂肪组织会分解中性脂肪成为游离脂肪酸来充当能源使用。
所以，游离脂肪酸可说是进行持久活动所需的物质。
例如：马拉松赛跑。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗FFA抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗FFA抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的FFA呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板（Assay plate）：一块（96孔）。
2.标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3.样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
游离脂肪酸(NEFA)测定试剂盒(ACS-ACOD法)产品技术要求sainuopu
游离脂肪酸（NEFA）测定试剂盒（ACS-ACOD法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中游离脂肪酸的含量。
1.1 试剂盒包装规格试剂1：1×15ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×54ml，试剂2：2×18ml；试剂1：3×39ml，试剂2：3×13ml；试剂1：4×54ml，试剂2：4×18ml；试剂1：2×300ml，试剂2：1×200ml；试剂1：2×30ml，试剂2：2×10ml。
校准品（选配）：1×1ml；1×3ml。
质控品（选配）：1×1ml；1×3ml。
1.2试剂盒主要组成成分2.1 外观试剂1：无色至淡黄色澄清液体；试剂2：黄色澄清液体。
校准品：无色至淡黄色澄清液体。
质控品：无色至淡黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度在37℃、600 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.3。
2.4 分析灵敏度测定浓度为0.5mmol/L样本时，吸光度变化值（ΔA）应在（0.01，0.2）范围内。
2.5 线性范围在（0，3）mmol/L范围内，线性相关系数r应不小于0.995。
在[1，3）mmol/L 范围内线性相对偏差应不大于±15%；测定浓度（0，1）mmol/L时线性绝对偏差应不大于±0.15mmol/L。
2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于6%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于10%。
2.8 准确度回收试验：回收率应在85%～115%之间。
2.9 质控品赋值有效性测定结果在靶值范围内。
2.10 校准品溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，校准品溯源至企业工作校准品。
游离脂肪酸检测试剂盒的性能评价_布威海丽且姆_图鲁普
参考文献［１］叶应妩，王毓三，申子瑜．全国临床检验操作规程［Ｍ］．３版．东南大学出版社．２００６：５９－６０．［２］丛玉隆，冯仁丰，陈晓东．临床实验室管理学［Ｍ］．北京：中国医药科技出版社，２００４：１１１－１１４．（收稿日期：２０１３－０６－０３）△ 通讯作者，Ｅ－ｍａｉｌ：６１９２２３９２１＠ｑｑ．ｃｏｍ。
·检验仪器与试剂评价·游离脂肪酸检测试剂盒的性能评价布威海丽且姆·图鲁普１，胡治宝２△（１．和田洛浦县人民医院检验科，新疆和田８３４０００；２．宁波美康生物科技股份有限公司，浙江宁波３１５１０４） 摘 要：目的 对由宁波美康公司生产的游离脂肪酸检测试剂盒进行了精密度、线性范围、准确度以及干扰试验的研究。
方法 分别根据美国临床和实验室标准协会（ＣＬＳＩ）标准文件ＥＰ５－Ａ２，ＥＰ６－Ａ，ＥＰ７－Ａ２对游离脂肪酸检测试剂盒进行精密度评价、线性范围评价、干扰物质实验，同时参考相关文献方法进行了准确度回收率评价。
结果 精密度：高、低浓度水平的批内精密度ＣＶ分别为２．４７％和３．１２％，总精密度ＣＶ分别为３．５１％和３．８９％；线性范围：在０～２．５ｍｍｏｌ／Ｌ范围内，线性良好（ｒ＝０．９９９ ４）；准确度：高低浓度水平回收率分别为９６．３％和９４．８％；干扰实验：非结合胆红素在８０ｍｇ／ｄＬ以内，结合胆红素在２０ｍｇ／ｄＬ以内，维生素Ｃ在２５ｍｇ／ｄＬ以内，三酰甘油在１２ｍｍｏｌ／Ｌ以内和血红蛋白在１２ｇ／Ｌ以内，产生的相对偏差小于５．０％。
结论 该试剂盒的精密度、线性范围、准确度、抗干扰能力能满足临床检测需求。
关键词：游离脂肪酸检测试剂盒； 精密度； 线性范围； 准确度； 干扰物ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－４１３０．２０１３．２０．０５７文献标识码：Ａ文章编号：１６７３－４１３０（２０１３）２０－２７５１－０２ 胰岛素、促酰化蛋白、过氧化物酶增殖因子激活受体γ、脂联素和泛酸等因素会导致ＮＥＦＡ水平降低；肿瘤坏死因子α、儿茶酚胺类激素、白细胞介素－６和瘦素会导致ＮＥＦＡ水平升高［１］。
酶法测定血清游离脂肪酸的方法学评价及临床应用
酶法测定血清游离脂肪酸的方法学评价及临床应用李义龙;王萌;唐志毅;韩靖云;黄桂玉【摘要】@@ 游离脂肪酸(FFA)是由油酸、软脂酸、亚油酸等组成,是甘油三酯的水解产物,大部分游离脂肪酸与血清白蛋白结合存在于血液中.血清中游离脂肪酸浓度受脂类代谢、糖代谢、内分泌功能等的影响.近年来研究发现FFA 水平升高即可增加胰岛素抵抗又可引起高胰岛素血症[1].大多数肥胖人群的2 型糖尿病患者都存在胰岛素抵抗,而血浆游离脂肪酸(FFA) 是联系肥胖和胰岛素抵抗或高胰岛素血症的重要环节.【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2011(015)006【总页数】3页(P1099-1101)【作者】李义龙;王萌;唐志毅;韩靖云;黄桂玉【作者单位】卫生部北京医院,检验科,北京,100730;卫生部北京医院,检验科,北京,100730;卫生部北京医院,检验科,北京,100730;卫生部北京医院,检验科,北京,100730;卫生部北京医院,检验科,北京,100730【正文语种】中文游离脂肪酸(FFA)是由油酸、软脂酸、亚油酸等组成,是甘油三酯的水解产物,大部分游离脂肪酸与血清白蛋白结合存在于血液中。
血清中游离脂肪酸浓度受脂类代谢、糖代谢、内分泌功能等的影响。
近年来研究发现FFA水平升高即可增加胰岛素抵抗又可引起高胰岛素血症[1]。
大多数肥胖人群的2型糖尿病患者都存在胰岛素抵抗,而血浆游离脂肪酸(FFA)是联系肥胖和胰岛素抵抗或高胰岛素血症的重要环节[2]。
目前测定血清FFA有滴定法,比色法,原子分光光度法,高压液相层析法,气相色谱法和酶法等。
由于传统方法操作繁琐且精密度差,而日本积水医疗株式会社最新研制的酶法检测血清FFA试剂盒具有特异性高精密度好,操作简单并可直接用于自动生化仪检测。
本文将FFA酶法试剂盒进行方法学评价,并对部分2型糖尿病患者进行FFA检测,结果如下。
1 材料与方法1.1 标本来源收集北京医院临床血清标本,按照FFA低、高2个水平制成混合血清,分装后于-80℃储存,用于不精密度测定;选择FFA高值样本用于线性分析。
第三方质控品评价两种GGT生化试剂的稳定性_石兴景
本研究患者在血糖保持稳定的情况下，我们进行了超声乳化 白内障手术。与血糖控制良好的手术患者相比较发现，血糖控制 在 13mmol/L 下的白内障手术术中未发生前房出血、晶体后囊膜 破裂、玻璃体脱出等并发症。同样，我们比较两组术后早期并发症 中 IOL 表面色素、渗出膜形成、角膜水肿、瞳孔后粘连，也无显著
植物游离脂肪酸（FFA）酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书
植物游离脂肪酸（FFA）酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定植物血清、血浆、组织等样本中游离脂肪酸（FFA）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物游离脂肪酸（FFA）水平。
用纯化的植物游离脂肪酸（FFA）捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被的微孔中依次加入植物游离脂肪酸（FFA），再与HRP标记的检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的植物游离脂肪酸（FFA）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中植物游离脂肪酸（FFA）含量。
试剂盒组成：样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
两种酶法测定血清游离脂肪酸试剂盒的分析性能比较
两种酶法测定血清游离脂肪酸试剂盒的分析性能比较王昌敏;孟晓辉;宋金萍;张慧【期刊名称】《标记免疫分析与临床》【年(卷),期】2013(020)006【摘要】目的比较两种酶法测定血清游离脂肪酸试剂盒的分析性能.方法分别应用国产与进口两种血清游离脂肪酸检测试剂盒,通过雅培c8000全自动生化分析仪测定50份体检样本血清游离脂肪酸浓度,进行精密度、准确度、抗干扰和线性试验等分析性能的评价与比较.结果①精密度分析结果:国产试剂的批内CV％为7.6％、5.8％,批间CV％为9.6％;进口试剂的批内CV％为0.7％、2.8％,批间CV％为2.2％.②平均回收率结果:国产试剂平均回收率为100.3％,进口试剂为97.76％,两者差异无统计学意义(P＞0.05).③线性范围分析结果:在3.11 mmol/L内,国产试剂测定血清游离脂肪酸线性相关性良好;在3.23mmol/L内,进口试剂线性相关性良好,且两者差异无统计学意义(P＞0.05).④干扰试验分析结果:在血红蛋白＜0.12mmol/L,胆红素＜0.34mmol/L,甘油三酯＜11.3mmol/L,维生素C＜1.2mmol/L条件下,两种试剂盒测定血清血清游离脂肪酸的结果之间无显著差异(P ＞0.05).⑤对临床血清游离脂肪酸测定结果分析表明,两种试剂相关性好(Y九强=0.9667X德赛+0.0175,R2=0.9801,P＜0.05,n=50),偏差无统计学差异(P＞0.05).结论国产与进口试剂盒检测血清游离脂肪酸结果一致性较好,且CV％均小于10％.国产试剂精密度相对较低,线性可达3.11 mmol/L,抗干扰能力较强.该结果表明两种试剂盒的分析性能无明显差异,具有较好可比性.【总页数】3页(P443-445)【作者】王昌敏;孟晓辉;宋金萍;张慧【作者单位】新疆维吾尔自治区人民医院临床检验中心,新疆乌鲁木齐830001;新疆维吾尔自治区人民医院临床检验中心,新疆乌鲁木齐830001;新疆维吾尔自治区人民医院临床检验中心,新疆乌鲁木齐830001;新疆维吾尔自治区人民医院临床检验中心,新疆乌鲁木齐830001【正文语种】中文【中图分类】R392-33【相关文献】1.血清游离脂肪酸酶法测定的方法学评价及生物学变异研究 [J], 鹿刚;高社军;巨英博2.酶法测定血清胆红素试剂盒在BECKMANSYNCHRON CX5生化分析仪上的应用 [J], 朱穗兰3.胆红素氧化酶法测定血清总胆红素试剂盒在Monarch自动生化分析仪上… [J], 白峰;赵海舰4.血清胆固醇酶法测定系列试剂盒的研制及临床应用的分析 [J], 景寿年5.酶法测定游离脂肪酸液体试剂盒的稳定性评价 [J], 张玲; 刘华伟; 杨清; 马玉华; 林艳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
游离脂肪酸(NEFA)测定试剂盒(ACS—ACOD酶法) 产品技术要求性能指标yp
医疗器械产品技术要求编号：
游离脂肪酸（NEFA）测定试剂盒（ACS-ACOD酶法）
1.性能指标
1.1外观
1.1.1试剂盒各组分应齐全，内外包装均应完整，液体组分应无渗漏，包装标签文字符
号应清晰。
1.1.2R1应为无色澄清均一液体；R2应为黄色澄清均一液体。
1.2装量
各组分的液体装量应不少于标示值。
1.3试剂空白吸光度
试剂以生理盐水为空白在37℃±1℃，600 nm波长条件下，试剂空白吸光度应不大于0.300。
1.4分析灵敏度
测试浓度为0.50 mmol/L的样本，吸光度差值应在0.010～0.200范围内。
1.5线性区间
试剂线性区间应覆盖[0.05,3.00] mmol/L
a)线性相关系数（r）应不小于0.995；
b)在[0.05,1.20]mmol/L区间内，线性的绝对偏差应不超过±0.18 mmol/L；
在(1.20,3.00]mmol/L区间内，线性的相对偏差应不超过±15.0%。
1.6精密度
1.6.1重复性
重复测试（0.50±0.20）mmol/L和（1.50±0.50）mmol/L的血清样本，所得结果的重复性（变异系数，CV）应不大于6.0%。
1.6.2批间差
重复测试（0.50±0.20）mmol/L和（1.50±0.50）mmol/L的血清样本，所得结果的批间差（相对极差，R）应不大于10.0%。
1.7准确度
回收率应在90.0%～110.0%范围内。
游离脂肪酸测定试剂盒(ACS-ACOD法)产品技术要求baiding
游离脂肪酸测定试剂盒（ACS-ACOD法）适用范围：用于体外定量测定人血清中游离脂肪酸的含量。
1.1规格校准品(选配)：1×1mL；质控品(选配)：水平1：1×1mL，水平2：1×1mL。
1.2组成注：校准品靶值、质控品质控范围详见包装标签。
2.1 外观2.1.1试剂1：无色液体，无浑浊，无不溶物。
2.1.2试剂2：无色至淡黄色液体。
2.1.3校准品：无色至淡黄色液体。
2.1.4质控品：无色至淡黄色液体。
2.1.5包装外观应整洁，标签字迹清晰，不易脱落。
2.2 净含量液体试剂的净含量不低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度试剂空白吸光度≤0.5。
2.4 分析灵敏度样本浓度为0.5 mmol/L时，吸光度差值的绝对值在0.01-0.20范围内。
2.5 线性区间在[0.1，2.0] mmol/L范围内，线性相关系数r≥0.990；测试浓度在[0.1，1.0] mmol/L时，绝对偏差不超过±0.1mmol/L，测试浓度在（1.0，2.0] mmol/L 时，相对偏差不超过±10%。
2.6 精密度2.6.1 批內精密度用高、低2个浓度的样本测试试剂盒，各重复测试10次，其变异系数（CV）应不大于6%。
2.6.2批间差用样本分别测试3个不同批次的试剂盒，每个批次测试3次，其相对极差（R）应不大于10%。
2.7 准确度回收率在85%-115%范围内。
2.8 质控品赋值有效性测试结果在质控范围内。
2.9 瓶内均匀性校准品和质控品瓶内均匀性（CV）应不大于6%。
2.10 量值溯源校准品量值溯源至公司内部工作校准品，并与北京九强生物技术股份有限公司生产的游离脂肪酸测定试剂盒（ACS-ACOD法）比对验证。
2.11 稳定性2.11.1校准品开瓶稳定性校准品开瓶后2℃～8℃避光保存可稳定3天。
稳定期过后4小时内进行测试，测试结果与靶值的相对偏差不超过±6%。
生化试剂性能评估及稳定性测试流程和方法-20091026
线性范围-注意事项
分析次序-随机 分析次序 随机 临床重要评价浓度
最小分析浓度或线性范围下限； 多种医学决定水平； 最大分析浓度或线性范围上限。
线性范围-计算方法举例
将血清样本随机排列， 每个样本重复测定3次， 计算其平均值 ； 以线性上限物加入量为 横坐标（x），测定结果 均值为纵坐标（y）作线 性回归 ； 计算相关及各测定平均 值和线性回归值的相对 偏差（S）等。
分析干扰-干扰物测试的浓度
为确定在最坏情况下一种物质是否存在干扰，应当在 实验室分析的患者样本中期望观察到的最高浓度处进 行全面的干扰筛选 。 药物和代谢物：报告的治疗剂量最高浓度的2倍处测试 ； 倍 内源性物质：确定预期的患者群体期望的最高 最高浓度 ； 最高 抗凝血剂和防腐剂：5倍推荐的添加浓度 ； 倍 进食的物质：测试2倍的期望的最大浓度 ； 倍 注：部分干扰物浓度可参照EP7附录推荐浓度。
分析干扰-不同浓度干扰血清标本的制备
试剂空白吸光度-测试方法
测定待检试剂在测定波长、37 ℃±1℃条 件下检测蒸馏水的吸光度A； 将试剂更换成蒸馏水，再测定吸光度B； 试剂空白吸光度值=A-B。
分析灵敏度
定义： 定义：检测系统可检测的样本中最低分 析物浓度； 检测低限：定性含义； 检测低限： 功能灵敏度： 功能灵敏度：定量含义。
检测低限（LLD）
定义： 定义：以天间重复CV为20%时对应检测限样本具
有的平均浓度，确定为检测系统或方法可定量报 告分析物的最低浓度或其他量值的限值。
注意： 注意：为估计FS，须用多个检测限浓度来确定在
低浓度处的精密度表现，从中选择具有或最近于 20%CV值的对应浓度，为可定量报告的最低浓度。
线性范围
参照文件： 参照文件：CLSI EP6-A:2003（定量测量程序
游离脂肪酸检测试剂盒的性能评价
Ｉ ｎ ｔ Ｊ Ｌ ａ ｂＭｅ ｄ ， Ｏ ｃ ｔ ｏ ｂ ｅ ｒ ２ ０ １ ３ ， Ｖ０ １ ． ３ ４ ， Ｎ ｏ ． ２ ０
［ ２ ］ 丛玉隆 ， 冯仁丰 ， 陈晓东． 临床实验室管理学 ［ Ｍ］ ． 北京 ： 中 国 医 药
１ 材 料 与 方 法
干 扰 物 及 其 加 入 浓 度
加 入 浓 度 ０ ０ ０
０
７ ． ５ １ ． ８ ７ ５
３ ０ ７ ． ５
６ ０ １ ５
８ Ｏ ２ ０ ２ ５
１ ２
２ ． ３ ４ ４ ９ ． ３ ７ ５ １ ８ ． ７ ５
检验 仪器 与试 剂 评价 ・
游 离脂 肪 酸检 测 试 剂 盒 的性 能 评价
布威 海 丽且姆 ・图鲁普 ， 胡 治 宝地
（ １ ． 和 田洛浦 县人 民 医院检 验科 ， 新疆和田 ８ ３ ４ ０ ０ ０ ； ２ ． 宁波 美康 生物科技 股份 有 限公 司， 浙江 宁波 ３ １ ５ ｌ ｏ ４ ）
摘 要 ： 目的 对 由 宁 波 美 康公 司生 产 的 游 离脂 肪 酸检 测试 剂 盒 进 行 了 精 密 度 、 线性 范围、 准 确 度 以及 干扰 试 验 的研 究 。 方 法 分 别根 据 美 国 临 床 和 实验 室标 准协 会 （ Ｃ Ｉ Ｓ Ｉ ） 标 准文 件 Ｅ Ｐ ５ 一 Ａ２ ， Ｅ Ｐ ６ － Ａ， Ｅ Ｐ ７ 一 Ａ２对 游 离 脂 肪 酸 检 测 试 剂 盒 进 行 精 密 度 评 价 、
１ ． １ ２ ５ ４ ． ５ ９
１ ． １ 仪 器 与 试 剂 游 离 脂 肪 酸 检 测 试 剂 盒 （ 酶法） 为 宁 波 美 康 生 物科技 股 份 有 限公 司生 产 （ 批号： ２ ０ １ ３ ０ １ １ ５ ） ， 仪 器 为 日立 ７ １ ８ ０全 自动 生 化 分 析 仪 。
酶法检测游离脂肪酸试剂盒的稳定性研究
酶法检测游离脂肪酸试剂盒的稳定性研究
桂香
【期刊名称】《华夏医学》
【年(卷),期】2017(030)003
【摘要】目的:评价游离脂肪酸测定试剂盒(酶法)的稳定性.方法:采用奥林巴斯
AU680全自动生化分析仪,通过重复性、线性试验测定试剂盒的稳定性.结果:两个水平质控中物质浓度的变异系数(CV)无论在0时间还是各种加速试验开瓶20 d后都小于5％,在0.1～ 3.0 mmol/L浓度范围内线性良好.结论:上海复星长征医学科学有限公司研发的游离脂肪酸测定试剂盒稳定、结果准确,操作快速、简便,可满足大批量临床样本的常规和自动化分析.
【总页数】4页(P99-102)
【作者】桂香
【作者单位】桂林市中心血站,广西桂林541000
【正文语种】中文
【中图分类】R446
【相关文献】
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翁艳;黎海珊;赵肃清
5.葡萄糖检测试剂盒已糖激酶法和氧化酶法抗干扰性能评价 [J], 张桂春;周方满因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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１５９２
ＬａｂｅｌｅｄＩｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ＆ ＣｌｉｎＭｅｄ，Ｓｅｐ．２０１９，Ｖｏｌ．２６，Ｎｏ．９
游离脂肪酸（ｆｒｅｅｆａｔｔｙａｃｉｄ，ＦＦＡ）又称非酯化脂 肪酸（ｎｏｎｅｓｔｅｓｔｅｒｉｆｉｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄ，ＮＥＦＡ），主要由油酸、 软脂酸、亚油酸 ３种成分组成。正常情况下血液中 ＮＦＦＡ含量较少，ＮＥＦＡ浓度的升高与 ２型糖尿病、 胰岛素抵抗、动 脉 硬 化、冠 心 病、肥 胖 等 疾 病 有 密 切 的关系［１３］。因此，血清 ＮＥＦＡ水平的监测越来越受 到临床重视。目前测定血清 ＮＥＦＡ的方法主要有酶 法、滴定法、比色法、原子分光光度法、高压液相层析 法、气相色谱法等［４］，其中在全自动生化分析仪上批 量化检测样本普遍使用的是酶法试剂［５］。酶法试剂 由于测 定 原 理 的 需 要 必 须 加 入 辅 酶 Ａ（Ｃｏｅｎｚｙｍｅ Ａ），但是辅酶 Ａ带有的巯基具有还原型，会导致后 续 Ｔｒｉｎｄｅｒ反应生成的有色产物发生降解。目前，解 决该问题的方法一般是加入马来酰亚胺来消除过量 的辅酶 Ａ，但马来酰亚胺不稳定很容易降解，所以游 离脂肪酸试剂盒的稳定性是试剂生产厂商要重点解 决的问题。笔者实验室也评价过一些厂家的 ＮＥＦＡ 试剂，有不少 试 剂 尤 其 是 国 产 厂 家 试 剂 的 稳 定 性 都 存在问题，而 进 口 试 剂 价 格 昂 贵。 本 研 究 选 取 北 京 九强生物技术股份有限公司和德国德赛诊断系统有 限公司的酶法 ＮＥＦＡ试剂盒，参考美国临床实验室 标准化委员会（ＣＬＳＩ）文件 ＥＰ２５Ａ和欧洲标准化委 员会 文 件 ＥＮｌ３６４０以 及 中 国 医 药 行 业 标 准 ＹＹ／ Ｔ１５７９２０１８，评估这两种试剂的效期稳定性、开瓶稳 定性以及热加速稳定性［６７］，为临床实验室的使用提 供数据参考。
标记免疫分析与临床 ２０１９年 ９月第 ２６卷第 ９期
１５９１酶法测定游离脂肪酸液体 Nhomakorabea剂盒的 稳定性评价
张 玲，刘华伟，杨 清，马玉华，林 艳
（西南交通大学附属医院 ／成都市第三人民医院，临床医学检验部，四川 成都 ６１００３１）
摘要：目的 评估北京九强生物技术股份有限公司（简称九强）和德国德赛诊断系统有限公司（简称德赛）的酶法游离脂 肪酸（ＦＦＡ）试剂盒的效期稳定性、开瓶稳定性以及热加速稳定性。方法 取出两个厂家的三批试剂后同时定标，分别测 定其批内不精密度、线性范围、开 瓶 稳 定 性 和 热 加 速 稳 定 性。结 果 九 强 和 德 赛 各 批 次 试 剂 配 套 质 控 品 的 偏 倚 均 小 于 ５％，质控品及低、中、高浓度血清样本的批内不精密度 ＣＶ均小于 ５％；九强和德赛试剂线性范围分别是 ０．１～２ｍｍｏｌ／Ｌ和 ０．０１～３ｍｍｏｌ／Ｌ；九强和德赛试剂在开瓶监测期前后测定质控累计偏 差 分 别 为 ４．２６％、８．８８％ （朗 道 质 控 水 平 １）和 ５．１９％、－１．４３％（朗道质控水平 ２）。结论 九强和德赛试剂实时稳定性良好，在效期内各批次包括接近效期末批次的 试剂正确度、批内不精密度、线性范围都可满足厂商制定的性能指标要求。两种试剂开瓶稳定性都较好，在机开瓶可稳定 ４周，但九强试剂比德赛试剂具有更长的有效期，可达 １８个月。 关键词：批内不精密度； 线性范围； 开瓶稳定性； 热加速稳定性
Ａ ＳｔａｂｉｌｉｔｙＥｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆＬｉｑｕｉｄＫｉｔｆｏｒｔｈｅＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＦｒｅｅ ＦａｔｔｙＡｃｉｄｓｂｙＥｎｚｙｍａｔｉｃＭｅｔｈｏｄ
ＺＨＡＮＧ Ｌｉｎｇ，ＬＩＵ Ｈｕａｗｅｉ，ＹＡＮＧ Ｑｉｎｇ，ＭＡ Ｙｕｈｕａ，ＬＩＮ Ｙａｎ
（ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｏｕｔｈＷｅｓｔＪｉａｏｔｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ＆ｔｈｅＴｈｉｒｄＰｅｏｐｌｅ’ｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＣｈｅｎｇｄｕ， ＣｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１００３１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｅｆｆｉｃａｃｙｓｔａｂｉｌｉｔｙ，ｏｐｅｎｂｏｔｔｌｅｓｔａｂｉｌｉｔｙａｎｄｔｈｅｒｍａｌａｃｃｅｌｅｒａｔｉｏｎｓｔａｂｉｌｉｔｙ ｏｆｅｎｚｙｍａｔｉｃｆｒｅｅｆａｔｔｙａｃｉｄ（ＦＦＡ）ｋｉｔｓｆｒｏｍ ＢｅｉｊｉｎｇＳｔｒｏｎｇＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（ＢＳＢＥ）ａｎｄＤｉａＳｙｓＤｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ ＳｙｓｔｅｍｓＧｍｂＨ（ＤｉａＳｙｓ）．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｒｅｅｂａｔｃｈｅｓｏｆｒｅａｇｅｎｔｓｆｒｏｍ ｔｗｏｃｏｍｐａｎｉｅｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄａｎｄ ｃａｌｉｂｒａｔｅｄａｔｔｈｅｓａｍｅｔｉｍｅ．Ｔｈｅｉｎｔｒａｂａｔｃｈｉｍｐｒｅｃｉｓｉｏｎ，ｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅ，ｂｏｔｔｌｅｏｐｅｎｉｎｇｓｔａｂｉｌｉｔｙａｎｄｔｈｅｒｍａｌ ａｃｃｅｌｅｒａｔｉｏｎｓｔａｂｉｌｉｔｙｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｂｉａｓｏｆｅａｃｈｂａｔｃｈｏｆｒｅａｇｅｎｔｓｉｎＢＳＢＥａｎｄ ＤｉａＳｙｓｗａｓｌｅｓｓｔｈａｎ５％ ａｎｄｔｈｅｉｎｂａｔｃｈｉｍｐｒｅｃｉｓｉｏｎＣＶ ｏｆｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｐｒｏｄｕｃｔａｎｄｓｅｒｕｍ ｏｆｅａｃｈ ｌｅｖｅｌｗｅｒｅａｌｌｌｅｓｓｔｈａｎ５％．ＴｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｓｏｆＢＳＢＥａｎｄＤｉａＳｙｓｗｅｒｅ０．１２ｍｍｏｌ／Ｌａｎｄ０．０１３ｍｍｏｌ／Ｌ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅａｃｃｕｍｕｌａｔｉｖｅｄｅｖｉａｔｉｏｎｓｏｆｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｐｒｏｄｕｃｔｂｅｆｏｒｅａｎｄａｆｔｅｒｂｏｔｔｌｅｏｐｅｎｉｎｇｗｅｒｅ ４．２６％，８．８８％ （Ｌａｎｄａｕｌｅｖｅｌ１）ａｎｄ５．１９％，－１．４３％ （Ｌａｎｄａｕｌｅｖｅｌ２）ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅ ｓｔａｂｉｌｉｔｉｅｓｏｆＢＳＢＥａｎｄＤｉａＳｙｓａｒｅｇｏｏｄ，ａｎｄｔｈｅａｃｃｕｒａｃｙｏｆｅａｃｈｂａｔｃｈ，ｔｈｅｉｎｔｒａｂａｔｃｈｉｍｐｒｅｃｉｓｉｏｎａｎｄｔｈｅ ｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｃａｎｍｅｅｔｔｈｅｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｂｙｔｈｅｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅｒｄｕｒｉｎｇｔｈｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｐｅｒｉｏｄ．Ｔｈｅｂｏｔｔｌｅｏｐｅｎｉｎｇｓｔａｂｉｌｉｔｉｅｓｏｆｔｈｅｔｗｏｒｅａｇｅｎｔｓｃａｎｍａｉｎｔａｉｎｆｏｒ４ｗｅｅｋｓｉｎｔｈｅｍａｃｈｉｎｅ．Ｔｈｅｒｅａｇｅｎｔ ｏｆＢＳＢＥｈａｓａｌｏｎｇｅｒｐｅｒｉｏｄｏｆｖａｌｉｄｉｔｙｔｈａｎｔｈａｔｏｆｔｈｅＤｉａＳｙｓ，ｗｈｉｃｈｃａｎｒｅａｃｈ１８ｍｏｎｔｈｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｉｎｔｒａｂａｔｃｈ ｉｍｐｒｅｃｉｓｉｏｎ； ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅ； Ｂｏｔｔｌｅ ｏｐｅｎｉｎｇ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ； Ｔｈｅｒｍａｌ
ａｃｃｅｌｅｒａｔｉｏｎｓｔａｂｉｌｉｔｙ
ＤＯＩ：１０．１１７４８／ｂｊｍｙ．ｉｓｓｎ．１００６－１７０３．２０１９．０９．０３３ 收稿日期：２０１９０３２６；修回日期：２０１９０７０１ 基金项目：四川省卫生和计划生育委员会普及应用项目（编号：１６ＰＪ０４９） 作者简介：张玲，副主任技师，主要从事临床检验方面的研究。 通讯作者：刘华伟，Ｅｍａｉｌ：ｌｉｕｈｕａｗｅｉ＠ｖｉｐ．ｓｉｎａ．ｃｏｍ