东华大学仪器分析复习提纲共14页
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仪器分析复习提纲
第1章引言
1.了解仪器分析的作用、特点,
2.了解仪器分析的分类,
3.了解仪器分析的发展趋势。
第2章气相色谱分析
色谱概论
一、色谱法的分类与气相色谱的特点
1、按两相状态分类
2、按固定相分类
柱色谱:包括填充柱色谱和毛细管色谱
纸色谱:
薄层色谱或薄层层析(TLC):
3、按分离原理分类
吸附色谱:利用固定相对不同组分的吸附性能的差别分离
分配色谱:利用不同组分在两相中分配系数的差别分离
离子交换色谱:利用不同离子在离子交换固定相上的亲和力的差别分离
凝胶色谱:利用不同组分分子量的差别(即分子大小的差别)先后被过滤进行分离
4、气相色谱的特点
1)应用范围广:气体、液体或沸点不太高的固体在操作温度不分解,一般都可使用。
有机化合物约20%可用GC 分析。
2)效能高:可一次分离分析几十种甚至上百种组分。
3)灵敏度高:ppm~ppb级
4)分析速度快:几分钟或几十分钟可完成
5)操作简便:仪器成本相对较低
二、气相色谱流程与气相色谱仪
(一)气相色谱流程
(二)气相色谱仪
气相色谱检测器(作用,分类)
1)热导池检测器
2)氢火焰检测器
3)电子捕获检测:
4)火焰光度检测器
三、色谱流出曲线及有关术语
(一)色谱流出曲线
可定性
色谱图作用:1、由t
R
2、由峰面积可定量
3、由峰位置及宽度可对分离情况进行判断
(二)基线
(三)保留参数
1、保留时间(t R)
2、 死时间(t M )
3、 调整保留时间(t R /
)
4、
相对保留值 α1,2 = t R /(2)/ t R /
(1)=K 2/K 1
(四)色谱峰区域宽度
1、 标准偏差σ:峰高0.607h 处宽度的一半
2、 半峰宽Y 1/20.5h 处的宽度,Y 1/2=2.354σ
3、 峰底宽 Y=4σ
气相色谱基本理论
一、气相色谱基本原理
分配过程
分配系数K=C S /C m
分配比(容量因子)k=p/q 注意:①K 是浓度比k 是分配总量之比 ②K 与β无关,k 与β有关
③k 越大,保留时间越长,k=0,则t R = t M ④k= t R // t M 二、气相色谱基本理论
(一) 塔板理论
n=5.54(t R /Y 1/2)2=16(t R /Y )2
n 有效=5.54(t R //Y 1/2)2=16(t R //Y )2
(二) 速率理论 (范第姆特方程) H=A+B/μ+C μ 式中: A ——涡流扩散项 B ——分子扩散系数 C ——传质阻力系数 μ—— 流动相线速度
可见:填充物粒度、填充物的均匀性,载气种类、流速,柱温等对柱效、峰扩张有关系 三、分离效率
1、 柱效率与分离效率
色谱的分离效率(或选择性)由相对保留值α衡量。
2、 分离度(分辨率)
R=2 [t R (2)- t R (1)] /(Y 1+Y 2)或 R=2d /(Y 1+Y 2)式中:d ——峰间距 3、色谱分离基本方程(柱效率、分离效率及分离度的关系)
R= n 1/2/4×(α-1)/α×k/(1+k ) [或R=n 有效1/2/4×(α-1)/α] 从色谱分离基本方程可看出:
① n 1/2
/4(反映柱效率对分离度的作用,称柱效项):α不变时,R
取决于n 有效或n ,为提高n 有效或n 可增加L 或减小H ② R 与k 的关系:k 增大R 增大,但k>10,R 增大不明显,1< k <10
时,可通过改变固定相,柱温变化或改变相比实现k 的变化。
③ R 与α的关系(柱效率对分离度的作用):α增大R 增大,α代
表柱的选择性,α大选择性好,分离效果好,增加α的办法是改变固定相。
4、分离条件的选择
(1)载气流速
从H=A+B/μ+Cμ可看出:
、Ar)
1)μ较小时,应选择分子量较大的载气(N
2
、He)
2)μ较大时,应选择分子量较小的载气(H
2
(2)固定液的性质和用量(选择色谱柱)
(3)担体的性质和粒度(选择色谱柱)
(4)柱温选择:沸点最高的组分可分析的最低温度,不能超过色谱柱允许的最高使用温度。
(5)进样量和进样时间
(6)气化温度
(7)检测器温度
固定相及其选择
一、GSC固定相(低分子量、气体样品的分析)
由待测成分的吸附能力选择(非极性、弱极性、极性)
二、GLC固定相
1、担体的选择
作用:承担固定液
要求:
1)化学惰性
2)多孔性
3)热稳定好、不易破碎
4)粒度均匀,大小合适
种类:
1)硅藻土型可分红色(非极性、弱极性)、白色(极性)
2)非硅藻土型可分为氟担体、玻璃微球、高分子多孔微球
选择原则:
1)固定液含量>5%,用硅藻土型
2)固定液含量<5%,用表面处理的硅藻土型
3)高沸点样品,用玻璃微球
4)强腐蚀性,用氟担体
2、固定液的选择
1)利用相似相溶原理选择
2)优先固定液的利用
3)广谱固定相的利用
4)特殊选择性固定相的利用
5)混合固定相的利用:串联或并联单一固定相柱,填料混合柱及混合涂渍填料柱等
气相色谱定性测试方法
一、已知物直接对照法
1、利用保留时间或保留体积定性
2、利用相对保留值定性
3、加入已知物增加峰高法定性
特点:简便可靠
缺点:需纯物质
二、利用保留值与结构的关系定性
1) 碳数规律(用于同系物分析) 2) 沸点规律
三、利用不同检定器定性
四、与其它分析方法结合定性 1、 与红外光谱 2、 与核磁共振 3、 与质谱
4、 与化学分析
气相色谱定量测试方法
一、定量测试原理
m i =f i ×A i 式中:
m i ——i 组分的质量 A i ——i 组分的峰面积 f i ——i 组分的校正因子 二、 峰面积测定方法 1、剪纸称重法 2、几何作图法
1)A=h ×Y 1/2 2)A=h ×Y 3)A=hY 平均 4)A=h ×t R 3、积分仪法
4、电子数字积分器 三、 校正因子
1) 绝对校正因子f i =m i /A i ………………①
2) 相对校正因子:某物质与标准物质的绝对校正因子之比 ①质量校正因子f m =f i /f s =A s m i /A i m s ………………②
②摩尔校正因子f M = A s m i M s /A i m s M i …………………③
测定校正因子方法:准确称量被测组分和标准物质混合后在实验条件下进行分析,分别测量峰面积用②或③计算。
四、 气相色谱定量计算方法
1) 归一化法
适合做全分析,各组分的含量均可测定
假设样品含有n 个组分,其质量分别是m 1、m 2……m n ,m 1+m 2+……+m n =m ,则
%C i =m i /m ×100%=m i / (m 1+m 2+……+m n )×100%
=A i f i /(A 1f 1+A 2f 2+……+A n f n )×100% 2) 内标法
不能全部分离时可用此法测定可分离的某些组分 测试方法:将一定量的纯物质作为内标物(m s ),加入准确称量的试样(m )中,由试样及内标物的质量及峰面积求出某组分的含量。
m i = A i f i m s = A s f s m i = A i f i /A s f s ×m s
%C i = m i /m ×100= A i f i /A s f s ×m s /m ×100 若f s =1,则%C i = A i f i /A s ×m s /m ×100 内标物条件:
① 试样中不存在的纯物质
② 保留时间和待测定组分相近,但可完全分离 ③ 物理化学性质和待测定组分相似 第3章 高效液相色谱分析
概述
HPLC 一般按其分离机理的不同分类。
主要有:L-L 色谱法、L-S 色谱法、离子交换色谱法、离子对色谱法、离子色谱法和空间排阻色谱法。
一、L-L 色谱法(分配色谱法)
原理:和GLC 相似,分配系数K=C s /C m =k ×V m /V s
根据流动相和固定相的极性不同可分为:
1、正向LLC :流动相极性<固定相极性,极性小的组分先流出色谱柱,适合极性物质分离。
2、反向LLC :流动相极性>固定相极性,极性大的组分先流出色谱柱,适合非极性物质分离。
化学键合固定相:将固定相各种不同的有机基团通过化学反应共价键键合到载体(硅胶)表面的游离羟基上。
二、LSC (吸附色谱法)
流动相为液体,固定相为固体吸附剂 原理:利用组分吸附作用的不同来进行分离
机理:组分分子(X )和溶剂分子(S )对吸附剂(固定相)表面有竞争性吸附:
三、离子交换色谱法
原理:离子交换剂上可电离的离子与流动相中组分离子进行可逆的离子交换,利用试样中不同组分与离子交换剂具有不同的亲和力而将它们分离的方法。
离子对色谱法:与待测离子电荷相反的离子(对离子)加到流动相或固定相中,使其与待测离子形成离子对化合物,利用在种离子对化合物在两相中分配系数的不同而进行分离的分析方法。
可分为:
正相离子对色谱法:非极性固定相,极性流动相
反向离子对色谱法:极性固定相,非极性流动相
离子对色谱法可用紫外检测器、荧光检测器。
离子色谱法(1975年Small提出):色谱柱后增加一个化学抑制柱,使洗脱也中背景离子变为低电导性物质。
前面的例子中增加一条强酸性O,消除了OH-的影响。
柱,则OH-+ H+=H
2
四、空间排阻色谱法(凝胶色谱法)
用于分子量大于2000的组分分离
原理:试样中分子量大小不同的组分进入凝胶柱时,题目渗入微孔的程度不同,大分子直接从间隙中越过,首先出柱,分子越小,进入微孔月深,保留值越大,溶剂分子通常最小,最后流出,组分一般在死时间前出柱。
固定相和流动相
一、固定相
1、LLC固定相
1)固定液涂渍在担体上,分为全多孔型和表面多孔型
2)化学键合固定相
常用的固定液有:极性的-氧二丙青(ODPN),非极性的十八烷(ODS),异二十烷(SQ)等。
2、LSC固定相
有薄膜型硅胶、全多孔型硅胶,薄膜型氧化铝、全多孔型氧化铝、分子筛和聚酰氨等。
3、离子交换色谱固定相
1)多孔型树脂:能分离复杂样品,进样量大,但耐压性差;
2)薄壳型树脂:在玻璃微球上涂以薄层的离子交换树脂,耐压,柱效高,但容量小,进样少。
4、空间排阻色谱法(凝胶色谱法)固定相
1)硬质凝胶:硅胶、多孔玻璃珠等,适用于各种情况;
2)半硬质凝胶:有机高分子凝胶,适用于非水流动相;
3)质凝胶:、聚葡糖,适用于常压、水为流动相。
二、流动相
流动相选择原则:极性大的样品用极性大的洗脱剂
极性小的样品用极性小的洗脱剂
流动相要求:
1)高纯度
2)对样品各组分均有一定的溶解度
3)与检测器相匹配
4)不溶解固定相
5)粘度小
梯度洗脱:采用两种或两种以上洗脱剂,按一定程序连续地或分阶段地改变流动相的组成进行洗脱的分析方法。
通过梯度洗脱可提高选择性和分离效率,按混合程序的不同可分为:
1)低压梯度(外梯度):常压下按程序将溶剂混合后用泵输入柱中,只须一台泵;
3)高压梯度(内梯度):各种溶剂用高压泵输入梯度混合室,混合后入
色谱柱,每种洗脱剂均须一台泵。
3)内标标准曲线法
4)外标法(标准曲线法)
毛细管色谱法
一、方法:用内涂一层薄而均匀的固定液的毛细管代替填充柱。
二、特点:
1、阻力小,可用高速载气、可用长柱;
2、分析时间短;
3、用样品少;
4、柱效高,分离能力大大提高
三、分类:
四、仪器差别:增加分流(减少进样量)和尾吹(减少扩散)装置
第7章原子发射光谱分析
1.了解光谱分析基础,
2.掌握发射光谱分析法的基本原理,
3.了解发射光谱仪的构造及其工作原理,掌握光源的分类、特点和应用范围,
4.掌握发射光谱定量分析和定性分析原理及方法,
5.了解发射光谱半定量分析方法,
重点和难点:发射光谱定量分析和定性分析原理及方法,塞伯-罗马金公式,内标法,内标准曲线法。
第8章原子吸收光谱分析
1.理解原子吸收分光光度法的基本原理,
2.了解原子吸收分光光度计的构造及其工作原理,
3.掌握原子吸收定量分析方法,
4.掌握原子吸收分光光度法的干扰及干扰抑制方法
5.了解原子吸收分光光度法的分析步骤,
6.了解原子吸收分光光度计的使用方法,
重点和难点:标准曲线法、标准加入法和内标标准曲线法的原理和相关计算方法,原子吸收分光光度法干扰及其抑制方法,原子吸收分光光度计的使用和样品分析步骤。
原子吸收分光光度法:利用物质所产生的原子蒸气对特征谱线的吸收作用来进行定量分析的一种方法。
锐线光源发射的共振线被基态原子吸收的程度与火焰宽度及原子蒸气浓度的关系符合朗伯-比尔定律。
即:吸光度A=log I
OV / I
V
= K
V
CL
原子吸收测试中一般固定火焰宽度,即L恒定。
所以
A= K
V
C 原子吸收的基本公式
三、线轮廓与谱线变宽
为什么吸收线会有一定宽度呢?
其一. 由于原子本身的性质决定(自然宽度)
其二. 由外因引起(如热、压力等)
3.自然宽度ΔV
N
:无外界因素影响的情况下,谱线具有的宽度,约
10-5nm
4.热变宽度(多普勒变宽)ΔV
D
这是由原子在空间作无规则热运动而产生的多普勒现象引起的,
5.压力变宽
产生原子吸收的原子与蒸气中同种原子或其它粒子之间的相互碰撞引起的能级变化,从而导致吸收光频率改变而造成的谱线频率变宽的现象。
①劳伦斯变宽(ΔV
L
):待测原子同其它粒子相碰撞而引起的谱线变宽。
②共振变宽(ΔV
H
,Holtzmark变宽)同种原子间碰撞引起的谱线变宽
其中:火焰原子化器以ΔV
D 为主,无火焰原子化器以ΔV
L
为主。
谱线变宽对测量的影响:导致原子吸收分析灵敏度下降。
一、光源
作用:提供(锐线)共振线
要求:①锐线
②共振线
③强度足够,稳定性好
二、原子化系统
作用:将试样中的待测元素转变为原子蒸气
种类:火焰原子化器、无火焰原子化器、冷原子化器、氢化物原子化器
①火焰原子化器:由雾化器和燃烧器两部分构成,是最常用原子化器。
雾化器作用:将试样雾化
燃烧器作用:使试样原子化
火焰种类:
ⅰ)空气-乙炔焰<2300℃适用于熔点较低金属原子化
ⅱ)氧化亚氮-乙炔焰 3000℃
ⅲ)氧-乙炔焰>2900℃
火焰种类的选择,应根据所测元素性质决定,使之原子化但不电离。
优点:重现性好,易操作,适应范围广。
缺点:灵敏度低(仅10%左右的试液被原子化)
②无火焰原子化器
优点:灵敏度高(试样全部原子化),检测限低。
缺点:干扰大,重现性差。
③氢化物原子化器
As、Sb、Bi、Ge、Sn、Se、Te等在酸性条件下,用强还原剂(K(Na)BH
4
)还原成挥发性的氢化物,这些氢化物在较低温度(<1000℃),就可分解成原子蒸气。
优点:选择性高,干扰少,灵敏度高(10-9),原子化温度低。
缺点:适用范围窄。
④冷原子化装置
Hg2+、 Hg+在还原剂SnCl
2
、盐酸羟胺作用下还原为Hg,Hg是低温元素,常温下蒸气压高,直接原子化。
(10-8以上)
作用:测痕量Hg。
六、仪器的性能
1.灵敏度(S)
1UPAC规定:被测元素浓度(C)或质量,改变一个单位时,吸光度(A)的变化量:即S=dA/dc 或S=dA/dm
2.特征浓度(Sˊ)
能产生1%吸收或0.0044吸光度值时,溶液中待测元素的质量浓度(ug·ml-1/1%)
Sˊ=C×0.0044/A
石墨炉Sˊ=(CV×0.0044/A)Pg/1%
定量测试方法
原子吸收定量测试方法主要有标准曲线法,标准加入法和内标法三种。
一、标准曲线法
优点:简便、快速
缺点:基体效应(物理干扰)大,适用于组成简单的试样
注意:
1、标准曲线应在线性范围
2、标准溶液应与试样用相同方法处理,使其组成尽可能一致
3、整个分析过程中工作条件始终保持一致
4、每次测定前应用标准溶液对标准曲线进行校正
二、标准加入法
优点:适合于组成复杂样品,可消除基体效应和某些化学干扰
不足:不能消除背景吸收的影响
注意:
1、测量应在线性范围内进行
最好与Cx相当
2、至少采用4点,C
三、内标法
要求:内标元素不存在试样中,原子化条件相似。
优点:可消除雾化系统和火焰等测试因素波动而产生的误差。
缺点:须用双道型仪器测量。
干扰及其抑制
一、光谱干扰
1.与光源有关的干扰(相邻谱线干扰)
①与分析线相邻的是待测元素的谱线,这种情况下,不产生吸收,使标准曲线向下弯曲,分析灵敏度下降,负误差。
引起原因:常见于多谱线元素(Fe、Co、Ni等)
消除方法:减少狭缝
②相邻线不是待测元素谱线
A、不是干扰元素的吸收线,则和①效果相同,消除方法同①。
B、是干扰元素吸收线
a.样品中不含该元素,和①效果相同,消除方法同①。
b.样品中含该元素,则使标准曲线向上弯曲,正误差
引起原因:阴极材料不纯或隋气引起,多见于多元素灯。
消除方法:选合适惰气,高纯度阴极材料。
2.光谱线重叠正误差,假吸收
产生原因:干扰元素共振线和待测元素共振线重叠造成。
消除方法:另选分析线或分离干扰元素。
3.背景干扰(与原子化器有关的干扰)
①背景吸收:这种干扰均增加吸收值,产生正误差(包括分子吸收、光散射和火焰气体吸收三种)。
产生原因:
A、火焰中成分对光的吸收称火焰气体吸收
B、某些很稳定化合物(原子化条件下不分解),如:卤化物、氧化物、氢氧化物、硫酸盐、磷酸盐等对光的吸收
C、固体颗粒的散射称光散射
消除方法:A、氘灯背景较正
B、邻近线扣除法
②背景发射:火焰本身或原子蒸气中待测元素的发射。
消除方法:调制消除,用交流电源或用斩光器使之变为交流电源。
4.连续背景发射(非锐线光源)
由灯质量引起,灵敏度降低,工作曲线弯曲。
二、物理干扰(基体效应)
产生原因:待测试样与标准溶液在转移、蒸发等过程中的物理因素(粘度、表面张力、溶剂)等的改变的引起的干扰。
消除方法:标准加入法
三、电离干扰
产生原因:由于电离作用导致基态原子数减少,灵敏度降低。
消除方法:
①加入消电剂,K不变,[e]增加,故[M]增加
②降低火焰温度,K变小,[M]增加
四、化学干扰
产生原因:待测元素和共存元素产生化学作用引起。
结果:生成难挥发化合物,使原子化率下降。
消除方法:①加入释放剂
②加入保护剂(络合)
③标准加入法
④分离
测定条件选择
测定条件对测定灵敏度、准确性及干扰情况有决定性影响。
主要测试条件有:
1.分析线选择:共振或次灵敏线
2.灯电离的选择
灯电流小,灵敏度高,但I过小则测量精确度差。
灯电流大,谱线宽度变大,灵敏度下降,灯寿命缩短。
实际工作中由A-i曲线选择
3.狭缝宽度
狭缝宽度变(过)大,稳定性下降,背景干扰上升。
以能排除光谱干扰和具有一定的透光强度为原则
4.原子化条件选择(火焰法)
①火焰类型:易电离→低温焰,难电离→高温焰
②燃烧器高度:外焰:氧化性,易电离内焰:还原焰,背景吸收↑,中间层:中性焰,原子蒸气多,较好。
③助燃气和燃烧气比例:控制温度。
原子吸收分光光度法操作
一、样品预处理
标准样品配制、待测样品处理
二、仪器预热
三、分析条件选择
四、分析条件选择
五、定量方法选择
六、结果处理
第9章紫外吸收光谱分析
1.理解分子吸收光谱原理,
2.深入了解紫外吸收光谱与分子结构的关系,
3.了解紫外光谱图的解析,
4.了解紫外-可见光分光光度计的构造及其工作原理,
5.掌握光吸收基本定律及显色反应和显色反应条件,
6.掌握标准曲线法和标准加入法,
7.学会紫外-可见光分光光度计的使用。
重点和难点:
紫外光谱与分子结构的关系,饱和脂肪烃、芳烃和α,β不饱和化合物的紫外光谱特征,紫外光谱图的解析,影响紫外光谱的因素,混合物的分光光度分析法,标准曲线法和标准加入法,紫外-可见光分光光度计的使用
紫外-可见吸收光谱的产生
一、产生原因:分子中价电子跃迁产生的光谱吸收
二、电子跃迁类型
与有机化合物有关的价电子有σ、π和n电子,主要跃迁有:
1.N-V跃迁:由基态跃迁至反键轨道:σ-σ*、π-π*
2.N-Q跃迁:非键电子跃迁到反键轨道:n-σ*、n-π*
3.N-R跃迁:σ电子激发到更高能级或电离
此外,与分光光度法有关的跃迁还有:
4.电荷转移跃迁,常见过渡金属与有机配位体(显色剂)之间电子转移跃迁,大多在可见光区,吸收强度大,往往用于定量分析。
5.配位场跃迁,d-d或f-f轨道在配位场作用下简并,轨道分裂,产生d-d(Ⅳ、V周期)、f-f(La系、Ar系)跃迁。
此吸收能量少,吸收强度较小,多在可见光区。
三.辐射吸收的基本定律—朗伯-比尔定律
1.透光率
T =Ia/I 0 T↑,吸收↓ 2.吸光度
A =lg1/T =lgI 0/Ia A ↑,吸收↑ 3.朗伯-比尔定律
当入射光波长一定时(单色光),溶液吸光度A 只与溶液中有色物质浓度和比色皿厚度有关,成正比,即 A∝LC => A=kLC 4.吸光度的加和性
若溶液中有m 种成分,其在某一波长下吸光系数分别为ε1、ε2…εm,浓度分别为C 1、C 2…Cm ,则
对于同一种物质,波长不同时ε(或K)不相同。
四、 无机化合物的紫外-可见光谱
有机化合物的紫外-可见光谱
常用术谱
1.生色基团:含有π键的不饱和基团(为C =C 、C =O 、N =N 、-N =O 等)能产生π-π*跃迁,使得有机化合物分子在紫外-可见光区产生吸收的基团。
① 非共轭生色团
a 、基团结构不同:独立吸收
b 、相同,仅一个吸收峰,但强度随生色团数目增加叠加。
② 共轭:仅一个吸收峰(红移强度显著增大)。
2.助色基团:含有非键电子(n 电子)的基团(为-OH 、-NH 2、-SH 、
-X 等),其本身在紫外-可见光区无吸收,但能与生团中π电子发生n-π*共轭,使生色团吸收峰红移的基团。
3.红移和蓝移
使分子的吸收峰向长波方向移动的效应称红移。
使分子的吸收峰向短波方向移动的效应称蓝移。
有机化合物的紫外-可见光谱
2.不饱和脂肪烃
①单烯:π-π*在170-200nm ,不属一般意义紫外区
②共轭烯:共轭使π-π*的ΔE↓,吸收峰红移,强度增大,这种吸收带称K 吸收带(共轭带)。
3.醛、酮化合物
有σ、π、n 电子,可产生n-σ*、π-π*、n-π*,其中n-π*
跃迁在270-300nm 称R 吸收带(基团带),对于α、β不饱和醛酮-C =O 和C =C 共轭,因此,R ,K 吸收带均红移。
4.芳香化合物
①无取代:苯在紫外区有三个吸收带,均由π-π*引起。
E 1吸收带在185nm ε=104(60000) E 2吸收带在204nm ε=103(7900)
B 吸收带(苯带)在254-260nm (230-270nm )ε=200 => 由于振动跃迁叠加在π-π*上引起。
②单取代:取代为助色基团 E2红移、B红移
取代为生色基团 E
2
与K吸收带合并,红移
③取代:对位εmax增大,红移,邻位间此作用较小。
④环化合物:共轭苯环数增加,红移,ε↑
影响紫外-可见光谱的因素
一.溶剂效应
对于π-π*跃迁引起的吸收峰,溶剂极性变大,红移。
对于n-π*跃迁引起的吸收峰,溶剂极性变大,蓝移。
二.空间效应
空间阻碍使共轭程度下降,吸收峰蓝移。
例:二苯乙烯反式:λmax=295,顺式:λmax=280nm
三.超共轭效应
烷基取代时,C-H的σ饱键和苯环分子轨道重叠,使得ΔE↓,红移。
四.PH
改变介质PH,对于不饱和酸、烯醇、酚、苯胺等化合物紫外光谱影响较大。
紫外-可见光分光光度计
光源
作用:提供入射光
要求:提供足够强度和稳定的连续辐射,强度基本不随波长变化而改变。
种类:钨灯(卤钨灯)发光波长360-1000nm 适用于可见光区
氢(氘)灯波长范围180-375nm 适用于紫外区
吸收池
作用:盛待测试样
要求:透光性好,无折射,反射,宽度精确
种类:石英 => 紫外区
玻璃 => 可见光区
紫外-可见光分光光度法的应用
一.定性分析
根据紫外可见光谱提供的信息可判断分子中生色基团和助色基团的性质。
1.结构骨架推断:和标准谱图完全相同,则说明有相同生色团,若
无K吸收带则不含共轭不饱和键;无R吸收带则无n-π*。
利用E
1、E
2
、B
吸收带可判断苯环或芳烃。
2.构型和构象(顺反式)
三、纯度检测(微量杂质)
四、定量分析
(一)测定方法
1.单组分:
①绝对法 Cx=A/εl(知ε)
②比较法 Cx=Ax·Cs/As 需已知浓度标样
③标准曲线法
④标准加入法 Cx =Ax·C Δ/(A x+Δ-Ax) 2.多组分 利用吸光度加和性解联主方程 *
3.双波长法 ΔA =(ε2b -ε1b )C (a 组分在λ1、λ2吸光度相同) *
4.差示分光光度法 A =εl(Cs-Cx) 高浓度、低浓度 (二)测量条件选择
1.吸光度范围 0.2-0.8
2.入射光波长选择 由吸收曲线确定 3.显色反应条件
①显色剂用量 固定L 、C ,改变显色剂用量作图选择
②PH 值:使得络合物,络合物组成,显色剂,待测离子等均稳定的PH 范围
③温度 ④时间
⑤干扰离子
⑥显色剂要求:A 、无色
B 、稳定络合物
C 、不与共存离子络合
第12章 分子发光分析
1.掌握荧光分析法的基本原理,包括荧光和磷光的发生过程,激发光谱和荧光光谱,分子结构与荧光的关系,影响荧光强度的外界因素等内容。
2.掌握荧光定量分析方法,了解荧光分析仪器。
希望以上资料对你有所帮助,附励志名言3条:
1、常自认为是福薄的人,任何不好的事情发生都合情合理,有这样平常心态,将会战胜很多困难。
2、君子之交淡如水,要有好脾气和仁义广结好缘,多结识良友,那是积蓄无形资产。
很多成功就是来源于无形资产。
3、一棵大树经过一场雨之后倒了下来,原来是根基短浅。
我们做任何事都要打好基础,才能坚固不倒。