乳腺癌反义寡核苷酸治疗的研究进展

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反义寡核苷酸类药物的研究进展

具备三个主要条件：它应有足够的稳定性、目的即对基因的选择性以及对细胞的通透性和靶向性。满足
ＯＮ。作为第一代ａ．Ｄ药物，ＳＯＮ具有良好ＤｓＯＮＰ－Ｄ的水溶性、定性及易于大量合成，本能满足临床稳基
基修饰、糖修饰和磷酸二酯键修饰。碱基修饰主核要为杂环修饰、一５甲基胞嘧啶和二氨基嘌呤；糖修核
不经修饰的ＯＮ（图之１不论在体液内还是Ｄ附）细胞中都极易被降解，能发挥其反义作用。因而不采用经化学修饰的ＯＮ，Ｄ以减少核酸酶对ＯＮ的降Ｄ
解。对ＯＮ化学修饰的方法主要针对三方面，碱Ｄ即
ＯＮ）药物是人工合成并经化学修饰的寡核苷Ｄ类酸（Ｄ片段，通过自身设计的特定序列与靶ＯＮ）能ｍＮＡ结合，基因水平干扰致病蛋白的产生。由Ｒ在于其高度的选择性和较低的副作用，ｓＯＮ类药物ａ— Ｄ
维普资讯
国外医学药学分册
２０Ｏ２年８月
第２９卷第４期
・１３・９
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／ｌ－、
综述与编译
反义寡核苷酸类药物的研究进展
杨鹏远综述芮耀诚审校
２０３）０４３（二军医大学药学院药理学教研室，海第上

生存素反义寡核苷酸对乳腺癌MCF-7细胞株MMP-2及MMP-9表达的影响

2
� � � � � � � � � XU B 1 , XI A O W 2 , J IA O X 2 , H A O Y 2 , J IA N G X - 2 , Y U H
( 1. D epa rt m en t o f G e n er a l Surg er y , 2 . D epa rt m en to f P a tho lo g y, Ta i zho u P e o ple ’ s Ho spi t a l, Ta i zho u Ji ang s u 2 25 0 0 0 , C hi na )
( m at rix m et a llo p ro t eina se, M M P) -2 M M P-9 � � � � � � � � � � � �, � � � ��
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反义寡核苷酸的抗病毒作用及其研究进展

反义寡核苷酸的抗病毒作用及其研究进展
李黎;文立民
【期刊名称】《国外医学：微生物学分册》
【年(卷),期】1994(017)001
【摘要】根据靶核酸序列设计的具有一定长度的反义寡核苷酸可与靶核酸特异结合，从而发挥调节基因表达的功能。

本文涉及反义寡核苷酸及其类似物的抗病特性、抗病毒机理、反义寡核苷酸的毒性和药物动力学以及未来的发展前景。

【总页数】5页(P5-8,4)
【作者】李黎;文立民
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R963
【相关文献】
1.食用菌活性成分的抗病毒作用研究进展 [J], 张相锋
2.食用菌活性成分的抗病毒作用研究进展 [J], 张相锋
3.多糖抗病毒作用研究进展Ⅰ.多糖抗病毒作用 [J], 王长云;管华诗
4.多糖抗病毒作用研究进展Ⅲ.卡拉胶及其抗病毒作用 [J], 王长云;管华诗
5.多糖抗病毒作用研究进展Ⅱ.硫酸多糖抗病毒作用 [J], 王长云;管华诗
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反义寡核苷酸的药代动力学研究进展

[12]　Mamiya K,Ieiro I ,Shimam oto J ,et al .The effects of ge 2netic polym orphisms of CY P2C9and CY P2C19on phenytoin metabolism in Japanese adult patients with epilepsy :studies in stereoselective hydroxylation and population pharmacoki 2netics[J ].Epilepsia ,1998,39(12):1317-1323.[13]　K irchheiner J ,Brockm oller J ,Meineke I ,et al .Impact ofCY P2C9amino acid polym orphisms on glyburide kinetics and on the insulin and glucose response in healthy v olunteers[J ].Clin Pharmcol Ther ,2002,71(4);286-296.[14]　Leger F ,Seronie 2Vivien S ,Makdessi J ,et al .Impact ofthe biochemical assay for serum creatinine measurement on the individual carboplatin dosing :a prospective study[J ].Eur J Cancer ,2002,38(1):52-56.[15]　Frame B ,Miller R ,Lalonde R L.Evaluation of mixturem odeling with count data using NONME M[J ].J Pharma 2cokinet Pharmacodyn ,2003,30(3):167-184.反义寡核苷酸的药代动力学研究进展尚明美综述　刘秀文,汤仲明,陈惠鹏审校(军事医学科学院放射医学研究所,北京　100850)摘要:反义药物在经历了20年后,又迎来了一个蓬勃的发展阶段。

反义寡核苷酸药物的高效液相色谱大规模纯化技术

反义寡核苷酸药物的高效液相色谱大规模纯化技术
反义寡核苷酸药物已成功应用于肿瘤治疗，具有多种有益的属性，但其纯化技术受到了很多限制，进一步的研究可以提高效率并降低成本。

本文提出了一种高效的液相色谱大规模纯化技术，用于纯化反义寡核苷酸药物。

该技术主要包括三个步骤：第一步是将物质通过活性炭进行吸附，以去除非结构性杂质，如脂肪酸和蛋白。

第二步是强离子交换柱层析，以结构性组分与不同的离子解离。

最后一步是使用电泳层析，以根据反义寡核苷酸药物的不同充电性质对其进行分离。

这种高效的液相色谱大规模纯化技术实现了快速、低成本的分离和纯化，它还可用于其器件的分离和纯化以确保其质量。

该技术通过活性炭和强离子交换柱层析技术可以有效清除杂质，进而提高不是最终产品的活性物质和密度。

此外，该技术还确保了所有关键步骤都是可重复性的，这就使得获得高纯度的药物更加容易。

从而，上述技术的实施，可实现反义寡核苷酸药物的快速、低成本的大规模纯化，为实现高纯度研究产品的有效开发提供了重要依据。

HER-2癌基因反义寡核苷酸对乳腺癌细胞化疗敏感性的影响

Ｆ显著增加Ｓ－ｒ３细胞对阿霉素和顺铂的敏感性，Ａ）ＫＢ－使细胞存活率明显降低。结论ＨＥ－Ｒ２反义寡
ห้องสมุดไป่ตู้
脱氧核苷酸能增加乳腺癌细胞对阿霉素和顺铂的化疗敏感性。
关键词
ＨＲ２Ｅ－原癌基因反义寡脱氧核苷酸乳腺癌细胞化疗敏感性
ＥｆｅｔｆｆｃｓｏＨＥＲ－ｎｏｅｅａｔｅｓｌｏｅｘｎｃｅｔｅ－ｌｔ１ｃｅｍｓｎｉｉｉｎｂｅｓ￣ｎ２ｏｃｇｎｎｉｎｅｏｉｄｏｙｕｌｏｉｓｆａｅ０１ｈｎｅｓｔｔｒａｔｓ￣ｒｓｇｄｏｖｙｉ
ＡｓｒｃＯｂｅＵｅＴｔｄｅｅｆｔｆＨＥ－ｎｏｅｅａｔｅｓｌｏｅｘｎｅｏｉ－ — ｂｔｔａ］ｃｖｏｓｙｔｆｃｓｏＲ２ｏｃｇｎｎｉｎｅｏｉｄｏｙｕｌｔｅｆｕｈｅｓｇｅｄｏ
ｌｔ０ＤＮ－－Ｅ２ＡＳａｅＡＳＦＨＲ－０ＤＮＳ，ａｎｏｅｅｉｈｂｔｒｎｃｅｔｅａｅｔｒｇｓｎｉｖｔｎＡｓａｏｃｇｎｎｉｉ，ｏｈｍｏｈｒｐｕｉｄｕｅｓｔｉｙｉｏｃｉ
ｃｌｌｅｉｉｏＸｉＪａｅｎｖｒｅｕｎ，ＴｎＳｉｅｇ，ｌｉｎｔａｈｓｎＸ“Ｙｎｅａ．ｐｒｍｎｆＰａｍｃＧｉｈｕ０ｈａｇ，ｔ１Ｄｅａｔｅｔｈｒａｙ，ｕｚｏ一ｏＰｒ
ｖｎｉｌＰｅｐｅ’ ｉｃａｏｌＨｏｐｔｌ，Ｇｕｙｎ５０２ｓｉａｉａｇ５００

反义核酸的研究进展

vitro1J C lin Pharm Sci,1996,5(2):8816　郑俊民主编1经皮给药新剂型1北京:人民卫生出版社,19971 78～8617　李娅芳,邓英杰,刘淑琴,等1透皮吸收制剂研究进展1中国药学杂志,1997,32(1):318　陈小平1电致孔法促进药物的透皮吸收1国外医学・药学分册, 1999,26(4):22219　P rausnitz M R,Edel m an E R,Gi m m J A,et al.T randerm al deliv2ery of heparin byeletropo rati on.B i o techno logy,1995,13(11): 120520　M ichealM,V ijeyalak shm i G,L i po som e.A selective drug delivery system fo r the top ical route of adm inistrati on:gelclo sago fo rm.J Pharm Pharm aco l,1982,34(7):47221　朱于村1促进透皮给药的物理和生化方法1国外医学・药学分册,1993,10(6):357(收稿日期:2000212226)反义核酸的研究进展赵　倩(天津医科大学药学院　天津300203) 摘　要　从反义核酸的作用机理、药理作用及化学修饰等方面介绍当前在这一领域的最新研究成果。

反义核酸作为一种生化药物,在治疗病毒感染性疾病、心血管疾病以及肿瘤、艾滋病和遗传性疾病方面,与传统药物相比更具有选择性和高效低毒。

关键词　反义核酸　作用机理　药理作用　化学修饰中图分类号:Q52 文献标识码:A 文章编号:1006-5687(2001)02-0007-04 随着分子生物学的飞速发展以及对控制生物体性质与功能的基因及作用机制认识的提高,人类有可能在基因水平上阻断或控制某些异常基因或感染病毒的表达,从而达到控制疾病的目的。

Clusterin在乳腺癌中的研究进展

Clusterin在乳腺癌中的研究进展曹立芬【摘要】Clusterin( CLU ) is an enigmatic glycoprotein with a nearly ubiquitous tissue distribution, apparently involved in many biological processes and pathological states. Its expression has been demonstrated to have changed in many malignancies. In breast cancer, CLU was reported to correlate with the tumorigenesis and progression of the malignancy,and high expression of CLU may be a poor prognosis of breast cancer in survival analysis. The cytoprotective function of CLU in breast carcinoma cells was demonstrated to be involved in the resistance mechanism of conventional chemotherapy, endocrine therapy and targeted therapy of breast cancer and it has been investigated on the capacity of anti-CLU treatment to sensitize breast carcinoma cells to multiple therapy strategies, however, there were insufficient responses to meet the criteria for proceeding to the second stage of accrual in clinical trials.%簇集蛋白(CLU)是一种广泛存在于哺乳动物各种体液中并在各种组织中表达的糖蛋白.CLU参与多种生理病理过程.在多种恶性肿瘤中均发现有CLU表达的改变.在乳腺癌的研究中,CLU被认为与乳腺癌的发生和发展相关,CLU高表达可能是乳腺癌不良预后指标之一.CLU参与乳腺癌综合治疗耐药机制的产生,抗CLU治疗可以增加乳腺癌对化学治疗、内分泌治疗和靶向治疗的敏感性,然而其临床有效性尚未达到Ⅱ期临床试验的标准.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2011(017)009【总页数】4页(P1328-1331)【关键词】簇集蛋白;乳腺癌;化学治疗;内分泌治疗;靶向治疗【作者】曹立芬【作者单位】中南大学湘雅二医院普外科,长沙,410011【正文语种】中文【中图分类】R737.9乳腺癌是女性最常见的肿瘤之一，也是世界上女性癌症死亡最常见的原因之一。

抗肿瘤反义寡核苷酸药物研究现状和趋势

抗肿瘤反义寡核苷酸药物研究现状和趋势
陈忠斌;王升启
【期刊名称】《中国新药杂志》
【年(卷),期】2002(011)009
【摘要】以基因为靶的反义药物是抗肿瘤新药研究和开发的重要方向之一,已有近10种不同抗肿瘤反义寡核苷酸药物正在进行Ⅱ或Ⅲ期临床试验.基于肿瘤相关基因的多样性和复杂性,抗肿瘤反义药物的发畏趋势是研究和开发靶向特定基因治疗特定类型肿瘤的"窄谱"抗肿瘤反义药物,以及由靶向多个肿瘤相关基因的反义寡核苷酸组成的"复方"式"广谱"抗肿瘤反义药物.
【总页数】3页(P683-685)
【作者】陈忠斌;王升启
【作者单位】军事医学科学院放射医学研究所,北京,100850;军事医学科学院放射医学研究所,北京,100850
【正文语种】中文
【中图分类】R979.1
【相关文献】
1.抗肿瘤纳米药物研究现状及展望 [J], 温宁;付之光;李云霞
2.抗肿瘤药物顺铂的剂型开发研究现状 [J], 王琳
3.抗肿瘤反义寡核苷酸药物靶标的研究进展 [J], 杨英;王升启
4.从2001年国家自然科学基金抗肿瘤药物申请项目分析我国抗肿瘤药物药理学研
究现状与问题 [J], 戴垚;吴镭;邵荣光
5.青蒿素及其衍生物逆转抗肿瘤药物耐药性的研究现状 [J], 邸天男;曹慧君;葛春蕾因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

反义寡核苷酸在肿瘤基因治疗中的研究

反义寡核苷酸在肿瘤基因治疗中的研究
刘同华;张恩娟;张昭
【期刊名称】《中国药业》
【年(卷),期】1999(008)007
【摘要】基因治疗为彻底攻克肿瘤带来了新希望．反义技术是基因治疗的一个重要内容。

本文概述了近年来肿瘤反义基因治疗方面取得的一些实验成果．包括对某些癌基因(c-myc,c-myb,bcl-2,mdm2,ras家族)、肿瘤自分泌生长因子及其受体(TGFβ，IGF-I，IGF-IR)等所开展的反义基因治疗。

【总页数】3页(P6-8)
【作者】刘同华;张恩娟;张昭
【作者单位】第三军医大学新桥医院，重庆市400037
【正文语种】中文
【中图分类】R730.54
【相关文献】
1.CRISPR-Cas9基因编辑技术在肿瘤基因治疗中的研究进展 [J], 梅雯;杨勇琴;孙美涛;丁小倩;杨泽芳;张晓娟;熊伟
2.肿瘤基因治疗学研究:血管内皮生长因子反义寡核苷酸对小鼠Lewis肺癌生长的抑制 [J], 成小松;李春艳;王颖;李曦;李景鹏
3.端粒酶研究在实体瘤诊治中的应用 : 针对端粒酶进行肿瘤基因治疗可能会引起肿瘤基因治疗的一场革命 [J], 李德志;陈正堂
4.超声靶向微泡破坏在肿瘤基因治疗中的应用现状及研究进展 [J], 张波; 王琳萍
5.化学修饰mRNA在细胞重编程、组织工程和肿瘤基因治疗中的研究进展 [J], 谢路远; 盛小伍; 周晓; 姚超灵; 许安吉
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乳腺癌反义寡核苷酸治疗的研究进展

乳腺癌反义寡核苷酸治疗的研究进展反义寡核苷酸技术(ASODN)作为一种新的分子生物学工具及新型药物受到医疗界越来越多的关注。

许多反义药物作为抗肿瘤药物已进入临床试验，并取得了令人欣喜的效果。

1 反义寡核苷酸的作用机理简介1.1反义寡核苷酸是在体外人工合成的能与体内某RNA或DNA序列互补结合的短序列单链DNA。

它可以作为反义药物与细胞内特异的靶序列互补,从而抑制基因表达。

该技术的作用原理主要通过下列途径发挥作用：（1）ASODN与DNA结合，抑制DNA复制和转录，它通过在DNA结合蛋白的识别点处与DNA双螺旋结合形成三螺旋，阻止基因的转录和复制。

(2) ASODN可影响真核生物mRNA核内加工的步骤，如5’端加帽结构、3’端加polyA及剪接的过程，从而抑制了mRNA的成熟过程。

(3)ASODN与目标mRNA特异性碱基互补结合，阻断RNA加工、成熟，阻止核糖体与起始因子的结合，影响核糖体沿mRNA移动，从而阻止翻译。

1.2天然的ASODN能够很快被在细胞内存有的大量的核酸外切酶和核酸内切酶降解。

因此，ASODN必须要经过修饰才能在体内发挥作用。

研究表明，硫代修饰之后的ASODN稳定，具有良好的水溶性，并容易大批量人工合成来应用于临床的研究。

所以，目前硫代磷酸型的ASODN已应用于各个水平的研究领域中。

1.3反义寡核苷酸在乳腺癌的治疗研究中的应用主要通过抑制乳腺癌细胞生长、增殖、分化诱导凋亡，抑制乳腺癌细胞的转移和侵袭，降低乳腺癌的多药耐药性来实现。

1.4反义基因技术具有明显的优点，由于DNA序列在一般情况下是单拷贝，而mRNA是多拷贝，因此ASODN相比于反义RNA只需少量的ODN与DNA靶序列结合，就可以具有很强的抑制效果。

它治疗乳腺癌特异性高，副作用少，与化疗、放疗和靶向药物结合有协同作用，并已逐步从实验室走向临床。

2 针对主要的进入临床前试验的致乳腺癌基因的反义寡核苷酸的研究理论上认为任何致乳腺癌基因都可以成为ASODN的作用靶点，目前主要以细胞凋亡抑制基因、乳腺癌转移和血管生成基因、生长因子及受体、信号传导通路等作为常用的分子靶点。

靶向MDM2反义寡核苷酸对乳腺癌MCF-7细胞株紫杉醇药物敏感性的影响

『摘要］目的
探讨靶向ＭＤＭ２基因的反义寡核苷酸（ＡＳＯＮ）对ＭＣＦ一７细胞株乳腺癌紫杉醇药物敏感
性的影响。方法人工合成一段针对ＭＤＭ２ｍＲＮＡ的反义寡核苷酸及错义寡核苷酸，采用脂质体介导ＭＤＭ２ＡＳＯＮ转染ＭＣＦ－７乳腺癌细胞系，ＲＴ — ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ方法检测其抑制效率，Ｍ｜ｒｒ观察细胞给药后的增殖能力。结果ＭＤＭ２ＡＳＯＮ转染细胞，给予紫杉醇处理后，ＭＤＭ２ｍＲＮＡ和蛋白表达下调，其中Ａ５００下调最显著，细胞增殖抑制率明显增高，其中Ａ５００抑制率高达（１３．０± ０．８４）％。结论［关键词］乳腺癌细胞ＭＣＦ－７；药物敏感性；反义寡核苷酸；ＭＤＭ２基因；紫杉醇［中图分类号］Ｒ７３７．９［文献标识码］Ａ［文章编号］１０００—１９０５ＡＳＯＮ转染细胞后，下调ＭＤＭ２的表达，促进凋亡，提高了对紫杉醇的敏感性，为乳腺癌治疗提供了新疗法。
ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅＭＤＭ２ａｎｔｉｓｅｎｓｅ０ＩｉｇＯｎｕｃｌｅ０ｔｉｄｅｏｎｃｈｅｍｏｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｔｏｐａｃｌｉｔａ－ｘｅｌｉｎｈｕｍａｎｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓＭＣＦ－７
田国梅，康正，付鹏，朱华，赵长久

荷乳腺癌小鼠c—myc mRNA反义寡核苷酸显像研究

进行标记反义寡核苷酸生物学分布与显像研究。结果
反义核酸在肿瘤组织中的摄取明显增高（＜Ｏ０）在反义寡核苷酸显像组，瘤组织显像剂摄取活跃，瘤／肉比值最Ｐ．５。肿肿肌
中图法分类号Ｒ１．８７４
Ｔｃ标记反义寡核苷酸有
锝，射性标记；硫乙琥珀酰亚胺一乙甘肽放硫
Ｔｅｈｅｉｍ。９ｂｌｄＡｎｉｅｅｏｌｇｎｃｅｔｄｅ — ｏｅｕａｃｎｔｕ９ｍＬａｅｅｔｓｎｓｉ０ｕｌ０ｉｓＭｌｃｌｒＩａｉｇｉｅｓｍｏｉｅｍｇｎｎＢｒａｔＴｕｒＭｃＱｉａｇｉｇ，Ｚｈｎｎｘｅ，ＡｎＲｕ。ｅｎＧｕｎｍｎａｇＹｏｇｕｉｔｌａ
ＴｈｕｉｉｄＭＡＧ３ＤＮＡｓｒｄｏａｅｅｔ９ｙｔａｓｈｌｔｎｆｏｓｄｕｔｒｒｔｎｒｅ９ｓｓｐｒｔｄｂｅｐｒｆｅ～ｗａａｉｌｂｌｄｗｉｈ９Ｔｃｂｒｎｃｅａｉｒｍｏｉｍａｔａｅａｄｆｅ９Ｔｃｗａｅａａｅｙｍｏｍ
高可达５５．。在正义寡核苷酸显像组及阻断组，瘤组织均未出现明显的显像剂浓聚。结论肿望成为一种新的显像剂，分子水平上用于恶性肿瘤的早期、异和无创性诊断。在特
关键词反义寡聚核苷酸；肿瘤；放射性核素显像；

Her-2过表达乳腺癌患者术后的治疗进展

医研究志２８２第３卷第１期学杂０年１月０７２乳腺癌患者术后的治疗进展
张新明潘琪
乳腺癌是危害妇女健康的恶性肿瘤之首，发病率
呈逐年上升趋势。乳腺癌是全身性疾病，确切病因仍未完全清楚。目前对无手术禁忌证患者首选手术治
展情况综述如下。
一
、
针对Ｈｅ２的基因治疗ｒ一
表达的乳腺癌患者中，比较了阿霉素、磷酰胺、西环多
乳腺癌的基因治疗主要包括癌基因封闭、因添基
紫杉醇和曲妥珠单抗的疗效。２００６年１美国圣２月
Ｈｒ２过度表达影响乳腺癌术后治疗效果。Ｈｒ２ｅ一ｅ一
原癌基因是生长因子受体家族成员之一，０～３％２％０乳腺癌患者Ｈｒ２过度表达，与患者预后不良相ｅ一其关。本文将Ｈｒｅ一２过表达的乳腺癌患者术后治疗进
水平，使肿瘤细胞周期停滞于Ｇ或Ｇ期而导致凋亡。发生。该实验表明Ｈｒ２的反义寡核苷酸可引起细ｅ一胞凋亡，抑制肿瘤生长，是乳腺癌药物治疗的新方向。２．曲妥珠单抗是一种人源化单克隆抗体，第１是
的基因治疗方向。Ｒｈ等 …用Ｈｒｏｅ一２过表达的人乳腺癌细胞接种裸鼠，用Ｈｒ２反义寡核苷酸对Ｈｒ利ｅ一ｅ
一

乳腺癌反义寡核苷酸治疗的研究进展

乳腺癌反义寡核苷酸治疗的研究进展引言乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一，目前该疾病的发病率和死亡率不断上升，严重影响着女性的健康和生活质量。

目前，临床治疗乳腺癌的方法主要包括手术、化疗、放疗和内分泌治疗等，但是这些方法存在一定的缺点，如手术容易切除不充分，化疗和放疗会产生很多的副作用，而内分泌治疗则存在耐药性的问题。

因此，需要寻找一种新的治疗方法，提高乳腺癌的治愈率和生存率。

反义寡核苷酸（antisense oligonucleotides）是一种新型的基因治疗方法，它通过向特定的基因或mRNA（信使RNA）的互补序列靶向结合，并干扰其翻译或剪接，从而实现基因的“沉默”或“敲除”，以达到治疗疾病的目的。

因此，乳腺癌反义寡核苷酸治疗在近年来得到了广泛关注和研究。

本文将从反义寡核苷酸的机制、研究进展和前景等方面进行探讨。

反义寡核苷酸治疗乳腺癌的原理乳腺癌发生和发展的过程中，许多基因和信使RNA的异常表达与肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移密切相关。

反义寡核苷酸则是设计一条针对这些目标RNA的互补序列的寡核苷酸，与其靶向结合，并在结合后干扰其正常的基因表达。

在乳腺癌中，HER2基因的过度表达与肿瘤细胞的增殖和转移有关。

因此，许多研究者将反义寡核苷酸用于抑制HER2基因的表达，以达到治疗乳腺癌的目的。

具体而言，反义寡核苷酸结合HER2基因的mRNA，干扰其正常的翻译过程，从而降低HER2蛋白的表达水平，抑制癌细胞的增殖和转移。

反义寡核苷酸治疗乳腺癌的研究进展随着反义寡核苷酸技术的不断发展，越来越多的反义寡核苷酸被用于临床治疗乳腺癌。

以下将介绍一些具有代表性的研究成果：1. Trastuzumab-DM1的研究Trastuzumab-DM1是一种由抗HER2单克隆抗体Trastuzumab和细胞毒素DM1构成的复合物，可靶向HER2蛋白并诱导乳腺癌细胞凋亡。

研究者通过将Trastuzumab-DM1联合反义寡核苷酸治疗HER2过度表达的乳腺癌，发现这种联合治疗可显著抑制HER2基因的表达并抑制肿瘤细胞的增殖和转移。

反义核酸技术在肿瘤基因治疗方面的研究进展

１１反义核酸的来源．
反义核酸的来源有以下三条途径：
（）１人工反义ＲＡ表达载体的构建。利用ＤＡ重组技术，ＮＮ在适宜的启动子和终止子间反向插人一段靶ＤＡ于质粒中，Ｎ构
建成反义表达载体，转录时表达载体合成反义ＲＡ；２利用Ｎ（）
酸酶（Ｎｓ）ＲａｅＨ裂解的过程，ＮｓＨ会使靶ｍＮＲａｅＲＡ消化，在反
义寡核苷酸附着点处，ＮＲＡ裂解后寡聚体将被释放。这些寡聚体可再循环结合其他靶序列上。它们与靶ＤＡ的结合会Ｎ切断基因转录，如与ｍＮＲＡ结合，则切断翻译过程导致蛋白质合成受到抑制，在细胞游离翻译系统内最佳ｍＲＡ靶点位于Ｎ
西南国防医药２００９年第ｌ９卷第３期
・５３５・
反义核酸技术在肿瘤基因治疗方面的研究进展
刘宏鸣（综述）顾红光（，审校）
（第三军医大学大坪医院肝Байду номын сангаас外科，重庆
关键词
４０４）００２Ａ文章编号１００８（０９００５００４— １８２０）３－３５－２
倍体的ＲＡ成分。Ｎ
２３反义寡核苷酸的摄入．反义寡核苷酸通过胞饮进入细
为针对某个基因的某一区段互补的ＤＡ片段，作用为抑制Ｎ其
或封闭靶基因的表达。（）义ＲＡ为与ｍＮ２反ＮＲＡ互补的核苷酸片段，过配对碱基间氢键的作用，对应ＲＡ形成双链通与Ｎ

乳腺癌基因治疗进展

2.6过表达PI3K p55γ N末端氨基酸抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的黏附性
PI3K/Akt信号通路的相关基因在人类癌症中频繁发生突变，该途径的异常激活会导致体细胞突变，这与肿瘤发生、癌症进展等相关。郭红艳，齐晓丹等人[7]发现作为PI3K的调节亚基，p55γ N末端氨基酸瞬时表达后，乳腺癌细胞在FN和胶原上的黏附性明显下降，这与其抑制胃癌细胞的黏附性结果一致。但由于其对乳腺癌细胞在基质胶上的黏附性与对照组相比无显著性差异，因此N24p55γ对肿瘤细胞的黏附性虽有抑制，但该抑制作用是否具有普遍性尚需更多的实验验证。在胃癌细胞中，上调细胞黏附分子E-cadherin、下调β-catenin的表达，导致Wnt/β-catenin信号通路被抑制可能是N24p55γ发挥作用的主要分子机制；而在乳腺癌中，N24p55γ并不影响MDA-MB-231细胞中E-cadherin的表达，但却使PI3K/Akt信号通路关键分子pAkt的表达量下降。由于MDA-MB-231为高转移乳腺癌细胞系，已知其内源性E-cadherin的表达缺失，因此推测，N24p55γ对E-cadherin表达缺失的肿瘤细胞黏附性的抑制作用，可能是通过PI3K/Akt信号通路或其他尚未阐明的分子生物学机制。
2.5 LIMK抑制剂可以减慢乳腺癌细胞的生长和侵袭
癌细胞转移是导致癌症患者高发病率和致死率的主要原因。LIM激酶（LIMK）家族是肌动蛋白细胞骨架的主要调节因子，并且参与细胞的运动和侵袭，所以被认为是转移性疾病的一个很好的治疗靶位。Rong Li, Judy Doherty等人[6]对LIMK抑制剂在人和鼠的乳腺瘤的生长和转移的作用进行了研究。他们发现LIMK的活性因为显性失活的LIMK1通过RNA干扰或者选择性的LIMK抑制剂作用而降低。LIMK活性的抑制有效地抑制了体外肿瘤细胞的pro-invasive性能。表达显性失活LIMK1的肿瘤细胞生长得更慢，并且在鼠中更不易转移。尽管如此，对鼠的全身使用一种LIMK抑制剂既不能减慢原发性肿瘤生长，也不能抑制肿瘤的自发性转移。同时，令人惊讶的是，在应用抑制剂后，肿瘤细胞转移到肝的几率大大增加了。

反义寡核苷酸化学修饰酶类药物的研究进展

[关键词]：化学修饰,靶向技术,序列选择,靶向转运摘要：反义寡核苷酸（）类药物是人工合成并经化学修饰地寡核苷酸（）片段，能通过自身设计地特定序列与靶结合，在基因水平干扰致病蛋白地产生.由于其高度地选择性和较低地副作用，－类药物已成为近年来药物研究和开发地热点.最近，类药物福米韦生（）通过美国批准为第一个进入市场地反义药物.其他类药物，／和等在临床试验中也表现出良好地疗效. 文档收集自网络，仅用于个人学习－作为基因表达地反向抑制剂，首先必须具备三个主要条件：即它应有足够地稳定性、对目地基因地选择性以及对细胞地通透性和靶向性.满足三个首要条件地方法主要是针对在化学修饰、序列选择、靶向转运等方面加以改善. 文档收集自网络，仅用于个人学习反义寡核苷酸地化学修饰不经修饰地不论在体液内还是细胞中都极易被降解，不能发挥其反义作用.因而采用经化学修饰地，以减少核酸酶对地降解.对化学修饰地方法主要针对三方面，即碱基修饰、核糖修饰和磷酸二酯键修饰.碱基修饰主要为杂环修饰、甲基胞嘧啶和二氨基嘌呤；核糖修饰主要为己糖.’－甲基取代核糖、环戊烷、α构象核糖；磷酸二酯键修饰主要为硫代和甲基代修饰等. 文档收集自网络，仅用于个人学习其中硫代寡核苷酸（，－）、混合骨架寡核苷酸（，）和多肽核酸（，）应用广泛，成为具有代表性地第一、二、三代. 文档收集自网络，仅用于个人学习硫代寡核苷酸由于磷酸二酯键是核酶地主要靶点，因此采用硫化试剂将磷酸二酯键硫化成为类结构，是增强稳定性地有效途忡. 是迄今研究最深入、应用最广泛地一类 .作为第一代药物，－只有良好地水溶性、稳定性及易于大量合成，基本能满足临床治疗地需要.与天然相比，－通过细胞内吞作用进入细胞内平衡所需时间更长，最终细胞内浓度也更高；其一般都大于，极大地提高了对核酸酶地耐受能力.－抑制基因地表达通过两种方式，即诱导以降解目地或与目地形成杂交体而干扰地加工和翻译.其副作用主要来自其携带地负电荷和免疫原性：由于－带有大量地负电佝，能与多种因子结合从而导致非特异效应.体外实验表明，－及其核酸降解物能与血清蛋白、细胞表向受体结合，或者进入细胞内与某些碱性蛋白质或酶结合，产生非特异效应.另外研究还发现，及其核酸降解物中含有多个连续地胞苷磷酸鸟苷（）序列，会产生非序列特异性地抑制作用. 文档收集自网络，仅用于个人学习混合骨架寡核苷酸是人们根据不同修饰地特性而加以各种组合设计而成.与相比，通过不同化学修饰地组合降低了硫代磷酸二酯键地数量，减少了自身携带地负电荷，降低了体内降解速度并改变了核酸降解物地种类，从而减少了由硫代导致地副反应；提高了与靶地结合能力并提高诱导降解地能力. 等在大鼠试验中，静脉给药后在多种组织中均有分布，给药后主要仍以完整地形式存在；比对照地在体内地稳定性、体内各组织地分布、代谢等方面均有提高；仍观察到一些轻微副作用，如部分酶原凝血时间延长、淋巴细胞增殖、有浓度依赖地补体溶血作用等，但程度要小于相同剂量地. 文档收集自网络，仅用于个人学习多肽核酸结构上是以氨基乙基甘氨酸为基本单元，碱基通过一个甲基联基与类肽链骨架相连.由于结构与类似，其两相邻碱基间距及碱基与类肽链骨架间地距离均相近，与以及与之间均可形成配对.体外试验证明，与结合可抑制逆转录过程，与双链发生链侵入反应后，可有效阻断限制性内切酶对酶切位点地识别和切割，从而阻断蛋白地表达.与前两代相比，具有更强地亲和力及更好地特异性，往往更短地片段即可获得相同地反义效果；具有良好地蛋白酶和核酸酶抗性，在细胞培养液及体内不易降解，半衰期更长；经修饰后具有良好地细胞膜穿透性，其应用前景广阔. 文档收集自网络，仅用于个人学习反义寡核苷酸地序列选择必须与靶互相结合形成杂交分子才能发挥对目地基因地反向抑制作用，因而与其靶结合地亲和力成为其发挥反义效力地首要因素.从理论上讲，与互补地序列越长，其结合能力越强.但事实上，较长地难以通透细胞膜并极易被降解，无法发挥反义作用.而且，体内地分子结构上具有高度地分子折叠，并含有大量结合地偶联蛋白，人们很难预测那些未理藏起来易于接近地序列. 文档收集自网络，仅用于个人学习对于体内结构地复杂性，人们在靶序列地选择上通常选择一些优先序列：例如选择启动子编码区附近或翻译起始区作为靶序列；在原核生物中，针对（）序列及其附近区域地阶更有效；在真核生物中，针对’端非编码区可能比针对编码区地更有效. 文档收集自网络，仅用于个人学习如果在优先区域选择靶序列不能成功，或者其他区域地选择更有价值，则需采用其他地方法确定靶序列：例如等采用""法确定敏感序列，从’端到’端合成一系列，然后检验其反义能力，这种方法是有效地，但是人力物力投资巨大；等在合成系列基础上，检测它们与兔β球蛋白形成异二聚体地能力，方法简单，但由于地折叠在体内和体外有很大不同，其实用价值还有待于进一步地体内验证；等采用半随机化文库，探索具有作用部位地候选靶序列，对序列进行有效预计，结果与体内试验有很好地相关性. 文档收集自网络，仅用于个人学习反义寡核苷酸地靶向转运发挥其反义作用，必须在细胞内靶结合部位达到有效浓度.而一般是多阴离子化合物，大多经过多种吞噬方式进入细胞发挥其反义作用.由于这是一种耗能过程，并且转运具有饱和性，要用很高地浓度才能在细胞水平观察到对目地基因地明显抑制作用.较低地细胞通透性使很难在靶细胞内达到治疗所需浓度.许多研究者针对研制出多种良好地靶向转运系统以提高地摄取速率和转运特异性，极大地改善了地细胞通透性和靶向性. 文档收集自网络，仅用于个人学习脂质体介导地靶向转运将包埋于脂质体中是提高其细胞通透性地有效方法.目前，采用较多地为阳离子脂质体.当被包裹于双层结构地脂质体中时，首先减少了机体对药物地生物转化以及核酶地攻击，增加到达靶细胞地有效浓度.脂质体自身带有地正电荷使其更容易粘附于带有负电荷地动物细胞表面，脂质尾则使其易于通过细胞膜地脂质双层. 文档收集自网络，仅用于个人学习应用这种转运系统应用地最大问题是脂质体对地包裹效率极低，一般只有％～％.如果增加脂质体地体积以提高包封率，反而会降低靶细胞对脂质体地摄取，并会降低复合物在血液中被动转运地效率.增加脂质体包裹效率地方法包括在脂质体复合物内引入融合基因蛋白或其他轭合物（如胆固醇等.等将地′端通过二硫键与胆固醇连接后，发现修饰地与脂质体地结合能力提高了倍，并且不影响其本身地反义效力，研究表明，与胆固醇偶联是提高脂质体包封率地有效途径. 文档收集自网络，仅用于个人学习免疫介导地靶向转运免疫介导主要包括受体配体介导和抗体抗原介导.这种靶向转运系统是指当作用地靶细胞或组织含有一些专一性受体或抗原时，将其配体或抗体与分子连接，经过特定地免疫识别作用使得在靶细胞膜上某些特定区域富集，再通过细胞地胞吞作用实现药物向细胞内地转运.因此，免疫介导不仅大大增强了对靶细胞地专一性，而且通过免疫结合使进入细胞地转移效率也大为提高. 文档收集自网络，仅用于个人学习免疫介导地靶向转运大致可分为两种类型：（）针对靶向地机体组织器官所特有地受体或抗原进行免疫介导，如哺乳动物肝细胞存在特有地无唾液酸糖蛋白受体，通过此受体地免疫介导可将特异导向肝脏以治疗肝炎等疾病；（）针对靶向地致病细胞表达地大量受体或抗原进行地免疫介导，如上皮细胞瘤表达过量地上皮生长因于受体，可以用来导入治疗剂进入肿瘤细胞发挥作用. 文档收集自网络，仅用于个人学习实际研究中常将免疫介导与脂质体介导两种方法结合使用，利用免疫脂质体为载体以特异转运 .等研究了作用于细胞受体分子地免疫脂质体包埋地对增殖地影响.结果发现，免疫脂质体包埋地可有效抑制地增殖，而仅用脂质体包埋或游离地对没有活性.以免疫脂质体为载体地靶向给药方式可能是将来对病毒、肿瘤实施靶向治疗地理想方法之一. 文档收集自网络，仅用于个人学习毫微粒技术地应用毫微粒是一种极小地颗粒，能携带药物分布全身，直至到达太狭窄地不能通过地部位为止.毫微粒技术利用机体内毛细血管直径随器官不同和特异部位不同而异地特点，通过部位特异地毛细血管诱捕毫微粒而实现特异性转运.等合成了～地毫微粒以吸附一段作用于点突变基因－地，研究结果表明，这种毫微粒可有效地抑制基因地表达，所需浓度仅为游离地％，进一步地体内试验还证明该化合物可以抑制裸鼠身上－基因依赖性肿瘤地生长. 文档收集自网络，仅用于个人学习结语作为一种新型地基因治疗药物，在心血管疾病、肿瘤、感染和炎症等多种疾病地治疗上均可得到广泛应用.随着研究地深入，在稳定性、选择性以及对细胞地通透性和靶向性等方面不断完善.地各种化学修饰包括第二代、第三代明显增强其反义作用和对核酸酶地稳定性；对结构研究地深入、计算机辅助药物设计及生物芯片技术地发展有望进一步优化靶向序列地选择；多种药物靶向转运系统地应用大为改善了类药物地生物利用度及其对作用部位地通透性和靶向性.这些方面地研究进展必将使类药物具有更为广阔地应用前景.文档收集自网络，仅用于个人学习。