血凝分析PPT课件
合集下载
化验单解读(血凝分析)-PPT
– shortening of APTT – hypercoagulability e.g. in the early phase of DIC, acute
myocardial infarction, inflammation due to increased FVIII
APTT相关的一些问题
• 监测肝素治疗 (必须检测出≥0.5u/ml的抗Xa;对LMWH不敏感)
因子XIII缺乏。 血管性疾病。
血小板计数 正常 大血管损伤或止血正常的
出血。
纤溶性疾病，如抗凝血酶 或PAI-1缺乏。
实验室筛选试验结果分析
模式2
可能存在的原因
• PT 延长 因子VII缺乏。
• APTT 正常 • TT 正常
开始口服抗凝 剂治疗。
• 纤维蛋白原 正常 3. 轻型因子II、 • 血小板计数 正常 V或X缺乏。
PT APTT
TT Fib/Fg
DD
AT/PC
vＷＦ
PLG
纠正试验
3P
FDP
内源性因子 红细胞碎片
外源性因子
plt
提纲
1.凝血基础理论 2.血凝分析五项临床意义 3.血凝分析异常结果模式分析及举例
常用的血栓筛查试验 血液凝固试验
以枸橼酸盐抗凝的乏血小板血浆为检测样本
PT体外模拟体内组
APTT体外模 织因子引起的凝血
• 遗传或后天出血筛选(如血友病A,B中型以上)
– in patients who actually bleed(如DIC，但也是 以分期价值为大)
– screening before surgery
– coagulation factor assays
• one-stage APTT-based assays in combination with factor deficient plasmas
myocardial infarction, inflammation due to increased FVIII
APTT相关的一些问题
• 监测肝素治疗 (必须检测出≥0.5u/ml的抗Xa;对LMWH不敏感)
因子XIII缺乏。 血管性疾病。
血小板计数 正常 大血管损伤或止血正常的
出血。
纤溶性疾病，如抗凝血酶 或PAI-1缺乏。
实验室筛选试验结果分析
模式2
可能存在的原因
• PT 延长 因子VII缺乏。
• APTT 正常 • TT 正常
开始口服抗凝 剂治疗。
• 纤维蛋白原 正常 3. 轻型因子II、 • 血小板计数 正常 V或X缺乏。
PT APTT
TT Fib/Fg
DD
AT/PC
vＷＦ
PLG
纠正试验
3P
FDP
内源性因子 红细胞碎片
外源性因子
plt
提纲
1.凝血基础理论 2.血凝分析五项临床意义 3.血凝分析异常结果模式分析及举例
常用的血栓筛查试验 血液凝固试验
以枸橼酸盐抗凝的乏血小板血浆为检测样本
PT体外模拟体内组
APTT体外模 织因子引起的凝血
• 遗传或后天出血筛选(如血友病A,B中型以上)
– in patients who actually bleed(如DIC，但也是 以分期价值为大)
– screening before surgery
– coagulation factor assays
• one-stage APTT-based assays in combination with factor deficient plasmas
凝血四项解读PPT课件
1、内源性凝血途径：指参与凝血的因子全部来自 血液，带负电荷的血管内皮下胶原暴露于血液而启 动。
2、外源性凝血途径：来自血液之外的组织因子暴 露于血液而启动。
凝血的过程
凝血因子按一定顺序相继激活生成凝血酶，最终使 纤维蛋白原变为纤维蛋白
凝血四项：
1、凝血酶原时间（PT） 2、活化部分凝血活酶时间（APTT） 3、凝血酶时间（TT） 4、纤维蛋白原（FIB）
管血栓而消耗大量凝血因子
d、新生儿自然出血症、先天性凝血酶原缺
乏抗凝治疗。
血浆凝血酶原时间（PT)
二、缩短见于：
a、血液呈高凝状态时、为弥散性血管内凝
血早期。
b、血栓性疾病
凝血酶时间（TT）
简介：是指在血浆中加入标准化的凝血酶后血液凝 固的时间。在共同凝血途径中，所生成的凝血酶使 纤维蛋白原转化为纤维蛋白，可用凝血酶时间（TT） 来反映。由于纤维蛋白（原）降解产物（FDP）能 使TT延长，故也有人将TT作为纤溶系统的筛选试验。
疾病状态
预防静脉血栓形成；治 疗静脉血栓形成；治疗 肺栓塞；预防体循环栓 塞；生物瓣换瓣；急性 心肌梗死（预防体循环 栓塞）；瓣膜病房颤
机械瓣换瓣（高危）； 急性心肌梗死（预防心 肌梗死复发）；某些血 栓病人和抗磷脂抗体综 合征
主动脉双叶机械性瓣膜
INR INR 2.0-3.0
INR 2.5-3.5 INR 2.0-3.0
情况。
血栓性疾病：心肌梗死、不稳定性心绞痛、脑血管病变、
糖尿病伴血管病变、肺梗死、深静脉血栓形成。
关于APTT的评价：
（1）因APTT对肝素的敏感性高，目前已广泛用于 普通肝素的抗凝治疗监测中（倍为宜），但对于低 分子肝素的监测，APTT不敏感。
2、外源性凝血途径：来自血液之外的组织因子暴 露于血液而启动。
凝血的过程
凝血因子按一定顺序相继激活生成凝血酶，最终使 纤维蛋白原变为纤维蛋白
凝血四项：
1、凝血酶原时间（PT） 2、活化部分凝血活酶时间（APTT） 3、凝血酶时间（TT） 4、纤维蛋白原（FIB）
管血栓而消耗大量凝血因子
d、新生儿自然出血症、先天性凝血酶原缺
乏抗凝治疗。
血浆凝血酶原时间（PT)
二、缩短见于：
a、血液呈高凝状态时、为弥散性血管内凝
血早期。
b、血栓性疾病
凝血酶时间（TT）
简介：是指在血浆中加入标准化的凝血酶后血液凝 固的时间。在共同凝血途径中，所生成的凝血酶使 纤维蛋白原转化为纤维蛋白，可用凝血酶时间（TT） 来反映。由于纤维蛋白（原）降解产物（FDP）能 使TT延长，故也有人将TT作为纤溶系统的筛选试验。
疾病状态
预防静脉血栓形成；治 疗静脉血栓形成；治疗 肺栓塞；预防体循环栓 塞；生物瓣换瓣；急性 心肌梗死（预防体循环 栓塞）；瓣膜病房颤
机械瓣换瓣（高危）； 急性心肌梗死（预防心 肌梗死复发）；某些血 栓病人和抗磷脂抗体综 合征
主动脉双叶机械性瓣膜
INR INR 2.0-3.0
INR 2.5-3.5 INR 2.0-3.0
情况。
血栓性疾病：心肌梗死、不稳定性心绞痛、脑血管病变、
糖尿病伴血管病变、肺梗死、深静脉血栓形成。
关于APTT的评价：
（1）因APTT对肝素的敏感性高，目前已广泛用于 普通肝素的抗凝治疗监测中（倍为宜），但对于低 分子肝素的监测，APTT不敏感。
课2凝血检测 ppt课件-精选文档
优势： 能在较接近受检者体内情况的条件下测定血小板功能 不受其他种类细胞或碎片的干扰。 可检测出活化的血小板聚集亚群 劣势： 检测费用高 仪器操作复杂 无法在床旁完成检测
检测内容
血栓及出血、止血检测是临床血液学检查中重要组成 部分，一般包括： 血管壁检测 血小板检测 凝血因子检测 纤溶活性检测 血流变学检测
VerifyNOW属床旁检测设备，整个检测过程只需3min
VerifyNOW的优势与劣势
系统诊断的血小板反应性和临床预后关系尚待更大规模的随机 对照观察 此方法目前最大的劣势在于其阿司匹林反应性的诊断标准是基 于单剂量 325mg阿司匹林口服后光比浊法测定的肾上腺素诱 导血小板聚集，故此标准尚需进一步的验证
血管壁和血小板相互作用
高度怀疑血管因素异常时才做！
[参考值]BT测定器法
为延长
6.9±2.1min >9min
出血时间意义
BT延长 血小板明显 <50109/L 血小板功能异常：血小板无力症或药物 影响（如阿斯匹林、潘生丁） 血管壁异常：遗传性毛细血管扩张症 严重缺乏血浆某些凝血因子，血管性假性血友病（VWD）、 DIC
凝血相关检测
掌握：各种检测名称,临床用途
熟悉：各种检测对应检测内容，优缺点
了解：各种检测方法学原理
检查目的
止凝血障碍疾病的诊断 抗凝治疗监测 溶栓治疗效果判断 术前检查
检测内容
血栓及出血、止血检测是临床血液学检查中重要组成 部分，一般包括： 血管壁检测 血小板检测 凝血因子检测 纤溶活性检测 血流变学检测
临床意义： 可分别评价阿司匹林以及氯吡格雷的抗血小板效应
透光率比浊法血小板聚集仪 优势与劣势
检测内容
血栓及出血、止血检测是临床血液学检查中重要组成 部分，一般包括： 血管壁检测 血小板检测 凝血因子检测 纤溶活性检测 血流变学检测
VerifyNOW属床旁检测设备，整个检测过程只需3min
VerifyNOW的优势与劣势
系统诊断的血小板反应性和临床预后关系尚待更大规模的随机 对照观察 此方法目前最大的劣势在于其阿司匹林反应性的诊断标准是基 于单剂量 325mg阿司匹林口服后光比浊法测定的肾上腺素诱 导血小板聚集，故此标准尚需进一步的验证
血管壁和血小板相互作用
高度怀疑血管因素异常时才做！
[参考值]BT测定器法
为延长
6.9±2.1min >9min
出血时间意义
BT延长 血小板明显 <50109/L 血小板功能异常：血小板无力症或药物 影响（如阿斯匹林、潘生丁） 血管壁异常：遗传性毛细血管扩张症 严重缺乏血浆某些凝血因子，血管性假性血友病（VWD）、 DIC
凝血相关检测
掌握：各种检测名称,临床用途
熟悉：各种检测对应检测内容，优缺点
了解：各种检测方法学原理
检查目的
止凝血障碍疾病的诊断 抗凝治疗监测 溶栓治疗效果判断 术前检查
检测内容
血栓及出血、止血检测是临床血液学检查中重要组成 部分，一般包括： 血管壁检测 血小板检测 凝血因子检测 纤溶活性检测 血流变学检测
临床意义： 可分别评价阿司匹林以及氯吡格雷的抗血小板效应
透光率比浊法血小板聚集仪 优势与劣势
血凝(HA)和血凝抑制试验(HI) ppt课件
ppt课件
6
1.3 原理
血凝的原理因不同的病毒而有所不同,如:
痘病毒对鸡的红细胞发生凝集并非是病毒本身，而 是痘病毒的产物--类脂蛋白的作用。
流感病毒的血凝作用是病毒囊膜上的血凝素与红细 胞表面的受体糖蛋白相互吸附而发生的。
ppt课件
7
ppt课件
8
2、血凝抑制试验(HI)
2.1定义
ppt课件
15
3 抗原血凝效价测定（HA试验，微量法）
3.1 在微量反应板的1孔～12孔均加入25μLPBS，换滴头。 3.2吸取25μL病毒悬液加入第l孔，混匀。 3.3从第1孔吸取25μL病毒液加入第2孔，混匀后吸取25μL加入第3 孔，如此进行对倍稀释至第11孔，从第11孔吸取25μL弃之，换滴 头。 3.4每孔再加入25μL PBS。 3.5每孔均加入25μL体积分数为1%鸡红细胞悬液（将鸡红细胞悬液 充分摇匀后加入） 3.6振荡混匀，在室温（20～25℃）下静置40min后观察结果（如 果环境温度太高，可置4℃环境下反应1小时）。对照孔红细胞将 呈明显的钮扣状沉到孔底。
血清和阴性对照血清验证处理的彻底性
用于消除除鸡以外的其它禽类的血清非特异性反应。
ppt课件
22
2、RDE（受体裂解酶）消除法 2.1试剂： RDE：用20mL无菌PBS稀释，小量分装，-20℃保存一周，注意避
免反复冻融；
PBS： pH7.5，4℃保存； 阳性对照血清； 阴性对照血清。 2.2方法： 2.2.1鸡血清 加3倍体积的RDE到1倍体积的血清中； 充分混合； 56℃水浴30-60min; 加入6倍体积于血清体积的PBS。 2.2.2其它禽类血清 依据用RDE处理鸡血清方法处理后，继续按下列方法进行：用25-
血凝基本知识-PPT课件
肾脏疾病患者容易出现血栓形成和栓塞并发症，如肾静脉血栓形成、下肢深静脉 血栓形成等。
05
血凝的调节与治疗
抗凝治疗
抗凝治疗是指通过药物或物理方法，降 低血液的凝固能力，从而预防血栓形成
和减少血栓栓塞事件。
常用的抗凝药物包括肝素、华法林、利 伐沙班等，这些药物通过抑制凝血酶或 抑制凝血因子的活性，达到抗凝效果。
血小板
血小板是血液中的重要成分，负责止 血和血栓形成。
血小板还参与了血液凝固和损伤修复 过程，对于维持身体健康具有重要意 义。
当身体受到损伤时，血小板会迅速到 达受损部位并发挥作用，通过释放出 生理活性物质和化学反应来止血。
纤维蛋白溶解系统
纤维蛋白溶解系统由纤维蛋白溶 解酶、抑制物和底物组成，主要 功能是溶解血栓和清除纤维蛋白。
纤维蛋白溶解治疗
常用的纤维蛋白溶解药物包括尿激酶、链激酶等，这 些药物通过激活纤维蛋白溶解酶原，促进纤维蛋白溶 解酶的生成，达到溶解血栓的效果。
纤维蛋白溶解治疗是指通过药物或物理方法，促进纤 维蛋白溶解酶的活性，从而溶解血栓。
纤维蛋白溶解治疗过程中需监测纤维蛋白原和D-二 聚体的水平，以避免出血风险。
抗凝治疗过程中需监测凝血功能，以避 免出血风险。
抗血小板治疗
抗血小板治疗是指通过药物或物理方法，抑制血小板聚集，从而预防血 栓形成和减少血栓栓塞事件。
常用的抗血小板药物包括阿司匹林、氯吡格雷、替格瑞洛等，这些药物 通过抑制血小板表面的受体或抑制血小板释放的活性物质，达到抗血小 板效果。
抗血小板治疗过程中需监测血小板计数和功能，以避免出血风险。
血栓的危害
血栓形成可能导致血管堵 塞，引起组织缺血、缺氧 甚至坏死，如心肌梗死、 脑梗塞等疾病。
05
血凝的调节与治疗
抗凝治疗
抗凝治疗是指通过药物或物理方法，降 低血液的凝固能力，从而预防血栓形成
和减少血栓栓塞事件。
常用的抗凝药物包括肝素、华法林、利 伐沙班等，这些药物通过抑制凝血酶或 抑制凝血因子的活性，达到抗凝效果。
血小板
血小板是血液中的重要成分，负责止 血和血栓形成。
血小板还参与了血液凝固和损伤修复 过程，对于维持身体健康具有重要意 义。
当身体受到损伤时，血小板会迅速到 达受损部位并发挥作用，通过释放出 生理活性物质和化学反应来止血。
纤维蛋白溶解系统
纤维蛋白溶解系统由纤维蛋白溶 解酶、抑制物和底物组成，主要 功能是溶解血栓和清除纤维蛋白。
纤维蛋白溶解治疗
常用的纤维蛋白溶解药物包括尿激酶、链激酶等，这 些药物通过激活纤维蛋白溶解酶原，促进纤维蛋白溶 解酶的生成，达到溶解血栓的效果。
纤维蛋白溶解治疗是指通过药物或物理方法，促进纤 维蛋白溶解酶的活性，从而溶解血栓。
纤维蛋白溶解治疗过程中需监测纤维蛋白原和D-二 聚体的水平，以避免出血风险。
抗凝治疗过程中需监测凝血功能，以避 免出血风险。
抗血小板治疗
抗血小板治疗是指通过药物或物理方法，抑制血小板聚集，从而预防血 栓形成和减少血栓栓塞事件。
常用的抗血小板药物包括阿司匹林、氯吡格雷、替格瑞洛等，这些药物 通过抑制血小板表面的受体或抑制血小板释放的活性物质，达到抗血小 板效果。
抗血小板治疗过程中需监测血小板计数和功能，以避免出血风险。
血栓的危害
血栓形成可能导致血管堵 塞，引起组织缺血、缺氧 甚至坏死，如心肌梗死、 脑梗塞等疾病。
血凝ppt课件
见表2-75。
【方法学评价】Fg检测的方法学评价见表2-76。
【质量保证】
【参考区间】成人：2.00～4.00g/L。新生儿： 1.25～3.00g/L。 【临床意义】
（五）凝血酶时间
凝血酶时间（TT）是反映血浆中纤维蛋白原转变为 纤维蛋白的筛检指标之一。TT延长主要反映Fg浓度减少
或功能异常以及血液中存在相关的抗凝物质（肝素、类肝
图2-58 PT检测原理
目前，PT测定已普遍使用血液凝固仪，它是通过仪器连续记录 血浆凝固过程中的一系列变化，并将这些变化信号转变成数据，用 计算机收集、处理数据后得出检测结果。血液凝固仪对PT测定的3种 方法与检测原理见表2-71。
【方法学评价】PT测定的方法学评价见表2-72。
【质量保证】血液标本采集和处理、仪器和试剂、 检测温度等各种因素都对PT的检测结果产生影响。因 此，全面质量控制对保证PT检测结果的准确性十分重
差异。因此，每个实验室必须建立相应的参考区间。
【临床意义】
1．TT延长
①低（无）纤维蛋白原血症和异常纤维
蛋白原血症，其中更多见于获得性低纤维蛋白原血症。② 肝素或类肝素抗凝物质，如肝素治疗、肿瘤和SLE等。原 发性或继发性纤溶亢进时（如DIC），由于FDP增多对凝血 酶有抑制作用，可导致TT延长。
2．TT缩短
一般无临床意义。
（七）D-二聚体
D-二聚体（D-D）是交联纤维蛋白的降解产物之
一。因为继发性纤溶中纤溶酶的主要作用底物是纤
维蛋白，生成特异性FDP即为D-D，所以D-D是继发
性纤溶特有代谢产物。用D-D免疫动物可获得抗D-D
抗体，因此，通过免疫学方法检测血浆D-D浓度。
【检测原理】DD检测原理见表2-77-1。 【方法学评价】与FDP测定相同。 【质量保证】DD检测的质量保证见表2-77-2。
血凝和血凝抑制实验课件PPT
7
抗原效价测定
12345
67
8
9
10
11 12
2 4 8 16 32 64 128 ×××× × × ×
生 25 25 25 25 25
理 盐 水
抗 25 25 25 25 25
原
生
理 25 25 25 25 25
盐 水
红 25 25 25 25 25
细 胞
结 ＋＋ ＋＋ ＋＋ ＋＋ ＋＋ 果 ＋＋ ＋＋ ＋＋ ＋ ＋ ＋ ＋
2021/3/10
3
2021/3/10
4
实验原理
1、HA原理：某些病毒或病毒的血凝素能选择性地 使某种动物地红细胞发生凝集，这种凝集红细胞的 现象称为血凝（HA）,也称直接血凝反应（红细胞 不流淌）。
病
毒
红
颗
细
粒
胞
2021/3/10
5
2、HI原理：当病毒的悬液中加入特异性抗体，且这 种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素时，则红细 胞表面的受体就不能与病毒颗粒或血凝素直接接触。 这时红细胞的凝集现象就被抑制，称为红细胞凝集抑 制（HI）反应，也称血凝抑制反应。
3、每孔再次加入生理盐水25ul
4、每孔加入1％鸡红细胞悬液25ul
5、在振荡器上振荡均匀后，放于室温（20-25°C） 下静置30分钟，或2-8℃45-60分钟，红细胞对照孔 呈纽扣状时判定结果。
6、结果判定。将反应板倾斜60°，观察红细胞有无
泪滴状流淌，完全凝集无泪珠状流淌（100%）的最
2高021/稀3/10 释倍数为抗原血凝价。
6、 振荡，放于室温静置30分钟，或2-8℃45-60分钟； 7、 结果判定。以完全抑制的4个单位抗原的最高稀释倍数为该
凝血解读ppt课件
PTR：报告凝血酶原时间比值比值（浓度PT或R者）活。性百PT分R比=受检值/正常值。 PA：百分活动度：由PT的标准曲线（凝血时间v（s百对数分）活动度）读取。
PA为PT的相对值指标,其临床意义基本同PT INR：国际标准化比值（INR）。INR= PTRISI
ISI值为国际敏感度指数，由试剂厂商提供。ISI越高表示试剂的灵 敏度越
凝血因子是参与血液凝固过程的各种蛋白质组分。它的生理作用是， 在血管出血时被激活，和血小板粘连在一起并且补塞血管上的漏口。 这个过程被称为凝血。它们部分由肝生成。可以为香豆素所抑制。
为统一命名，世界卫生组织按其被发现的先后次序用罗马数字编号， 有凝血因子Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅶ，Ⅷ，Ⅸ，Ⅹ，Ⅺ，Ⅻ，Ⅻi等。
因子Ⅰ(纤维蛋白原fib) 当纤维蛋白原被凝血酶水解掉两个肽段后形 成纤维蛋白单体，通过因子ⅩⅢa的转酰胺作用，最终形成交联纤维 蛋白网状结构。
因子Ⅴ：(易变因子) ：辅助因子 Ⅹa参与共同凝血途径的激活。因 子Ⅴ在体外最不稳定。
因子Ⅷ(抗血友病球蛋白AHG) 是因子Ⅸa的辅因子，参与内源牲凝血 途径的激活。FⅧ先天缺乏时患血友病甲。
④ 4.血循环中有肝素.FDP, DIC,原发性纤溶症
⑤ 5.用于香豆素类等口服抗凝剂的监测，维持在PT参考值的2倍左右，
INR在2.0～3.0为宜。 世界卫生组织（WHO）规定应用口服抗凝剂
时INR的允许范围如下：预防静脉血栓形成、非髋部外科手术前 1.5—2.5 髋部外科手术前 2.0—3.0 深静脉血栓形成 2.0—3.0 治疗肺梗塞 2.0—4.0 预防动脉血栓形成 3.0—4.0 人工瓣膜手术 3.0—4.0
纤维蛋白丝所需时间。
（二）参考范围：14-21s （三）临床意义：
PA为PT的相对值指标,其临床意义基本同PT INR：国际标准化比值（INR）。INR= PTRISI
ISI值为国际敏感度指数，由试剂厂商提供。ISI越高表示试剂的灵 敏度越
凝血因子是参与血液凝固过程的各种蛋白质组分。它的生理作用是， 在血管出血时被激活，和血小板粘连在一起并且补塞血管上的漏口。 这个过程被称为凝血。它们部分由肝生成。可以为香豆素所抑制。
为统一命名，世界卫生组织按其被发现的先后次序用罗马数字编号， 有凝血因子Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅶ，Ⅷ，Ⅸ，Ⅹ，Ⅺ，Ⅻ，Ⅻi等。
因子Ⅰ(纤维蛋白原fib) 当纤维蛋白原被凝血酶水解掉两个肽段后形 成纤维蛋白单体，通过因子ⅩⅢa的转酰胺作用，最终形成交联纤维 蛋白网状结构。
因子Ⅴ：(易变因子) ：辅助因子 Ⅹa参与共同凝血途径的激活。因 子Ⅴ在体外最不稳定。
因子Ⅷ(抗血友病球蛋白AHG) 是因子Ⅸa的辅因子，参与内源牲凝血 途径的激活。FⅧ先天缺乏时患血友病甲。
④ 4.血循环中有肝素.FDP, DIC,原发性纤溶症
⑤ 5.用于香豆素类等口服抗凝剂的监测，维持在PT参考值的2倍左右，
INR在2.0～3.0为宜。 世界卫生组织（WHO）规定应用口服抗凝剂
时INR的允许范围如下：预防静脉血栓形成、非髋部外科手术前 1.5—2.5 髋部外科手术前 2.0—3.0 深静脉血栓形成 2.0—3.0 治疗肺梗塞 2.0—4.0 预防动脉血栓形成 3.0—4.0 人工瓣膜手术 3.0—4.0
纤维蛋白丝所需时间。
（二）参考范围：14-21s （三）临床意义：
化验单解读(血凝分析)幻灯片课件
• 合成场所：大部分且主要在肝脏，其他内皮细 胞，巨核细胞
9凝血因子的一般特性 Nhomakorabea• 依赖维生素Ｋ凝血因子：因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ｘ •
• 接触系统因子：因子Ⅻ、Ⅺ、PK、HMWK • 凝血酶敏感因子：因子Ｉ、Ｖ、Ⅷ、XIII
10
11
纤维蛋白
12
凝血基础理论
• 内源性途径:指参与凝血的因子全部来自 • 正常血液中存在的凝血蛋白和Ca＋＋ • 外源性途径：指参与凝血的因子不完全
PT延长见于先天性因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏 症和低（无）纤维蛋白原血症或见于DIC、 原发性纤溶症、维生素K缺乏症、肝脏疾病、 口服抗凝剂等；
PT缩短见于先天性因子Ⅴ增多症，口服避孕 药，高凝状态和血栓形成性疾病等；
23
PT相关的一些问题
凝血因子 ◆FVII, FX, FV 和凝血酶原
PT延长可发生在 < 30 %凝血酶原,或其他相关因子 < 10 % 肝病导致凝血蛋白合成能力一过性下降，或总合 成能力在50%以下时 ◆ 纤维蛋白原 中度肝脏病变就可以导致纤维蛋白原合成减少 或 发生获得性异常纤维蛋白血症 纤维蛋白原＜1 g/L 可以导致凝血实验结果严重影 响 ◆ Other factors PRP 和 温度(冷血浆待测缩短)
FXIIIa Ca+
+
Fg
Fb
14
PT
APTT
TT
DD 15
凝血基础理论
• 机体的止血和凝血功能主要由血管、血小板、 凝血因子、抗凝物质及纤维蛋白溶解系统共同 完成。
• 止血功能主要由血管、血小板参与；
• 凝血功能主要由凝血因子参与；
• 抗凝血功能主要由抗凝物质和纤溶系统参与。
16
9凝血因子的一般特性 Nhomakorabea• 依赖维生素Ｋ凝血因子：因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ｘ •
• 接触系统因子：因子Ⅻ、Ⅺ、PK、HMWK • 凝血酶敏感因子：因子Ｉ、Ｖ、Ⅷ、XIII
10
11
纤维蛋白
12
凝血基础理论
• 内源性途径:指参与凝血的因子全部来自 • 正常血液中存在的凝血蛋白和Ca＋＋ • 外源性途径：指参与凝血的因子不完全
PT延长见于先天性因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏 症和低（无）纤维蛋白原血症或见于DIC、 原发性纤溶症、维生素K缺乏症、肝脏疾病、 口服抗凝剂等；
PT缩短见于先天性因子Ⅴ增多症，口服避孕 药，高凝状态和血栓形成性疾病等；
23
PT相关的一些问题
凝血因子 ◆FVII, FX, FV 和凝血酶原
PT延长可发生在 < 30 %凝血酶原,或其他相关因子 < 10 % 肝病导致凝血蛋白合成能力一过性下降，或总合 成能力在50%以下时 ◆ 纤维蛋白原 中度肝脏病变就可以导致纤维蛋白原合成减少 或 发生获得性异常纤维蛋白血症 纤维蛋白原＜1 g/L 可以导致凝血实验结果严重影 响 ◆ Other factors PRP 和 温度(冷血浆待测缩短)
FXIIIa Ca+
+
Fg
Fb
14
PT
APTT
TT
DD 15
凝血基础理论
• 机体的止血和凝血功能主要由血管、血小板、 凝血因子、抗凝物质及纤维蛋白溶解系统共同 完成。
• 止血功能主要由血管、血小板参与；
• 凝血功能主要由凝血因子参与；
• 抗凝血功能主要由抗凝物质和纤溶系统参与。
16
凝血异常结果分析 ppt课件
+
Fg
Fb
抗凝、溶栓药物对凝血试验影响
PLT TT PT APTT FIB
肝素 N/I I N/I I N
华法令 溶栓药物
N
NNIIIN/IIN
D
一、常见凝血试验原理及意义
1、血浆凝血酶原时间（PT） 外源凝血系统筛选试验
2、活化部分凝血活酶时间（APTT） 内源凝血系统筛选试验
3、血浆凝血酶时间（TT ) 与抗凝物及FIB浓度有关
IX、X VK
Ca++
磷脂膜
在肝合成必须依赖VK，否则无凝血活性
VK缺乏可导致新生儿出血或获得性成人出血性疾病
（五）
PT
延长
APTT
延长
TT
延长
纤维蛋白原 正常/异常
血小板计数 正常
可能存在的原因：
1. 大量肝素。 2. 低-，无-和异纤
维蛋白血症。 3. 某些肝病。 4. 原发性高纤溶。
肝素的抗凝原理：
由血管内皮细胞棒管小体合成 ，当血管内皮 细胞损伤时在血液中表达增高，为血管内皮损 伤的标志物。缺乏可导致FVIII活性降低，引起 出血，称血管性血友病（vWD)。
主要生理功能：
①促进血小板在内皮下的粘附，起到架桥作用； ②保护血浆凝血因子Ⅷ的活性，与FⅧ形成复合物； ③促进凝血因子Ⅷ的合成和分泌，稳定FⅧmRNA。
肝素+AT→（构型改变暴露活性中心）精氨酸 +IIa、Xa、XIIa、XIa、IXa (丝氨酸蛋白酶) （1：1形成复合物）
从而使这些酶失去活性 VIIa 不被AT抑制
PT为外源凝血系统的筛选试验，其启动因子 VIIa APTT为内源凝血系统的筛选试验，其启动因子 XIIa
血凝四项实验室检验PPT课件
11/20/2019
凝血机制
抗凝机制 血管壁（vessel wall）
血小板（platelet）
凝血系统（coagulation system） 抗凝及纤溶系统（anticoagulation
and fibrinolytic）
4
（一）血管壁的止血作用
1.血管壁的完整性
是防止出血的重要保证 血管内皮细胞之间及内皮下胶原
正常情况下，所有因子都处于无活性状态
11/20/2019
24
[内源性途径]
胶原等带负电荷表面
PKa PK
XII——————XIIa HMWK （凝血旁路）
XI
XIXIa
IXa IIa
Ca2+
VIII--------------- VIIIa
Plt------------------ PF3IIa X
促进血小板粘附 启动内源性凝血途径
11/20/2019
10
血管内皮细胞合成
前列环素(PGI2) 扩张血管、抑制plt功能 纤溶酶原激活物(PA) 激活纤溶酶、清除小凝块 血栓调节素(thrombomodulin TM) 参与蛋白C
系统的抗凝作用
肝素或类肝素物质 具有多种抗凝活性
11/20/2019
11/20/2019
7
Von Willebrand Factor vWF (vW 因子) Fibronectin Fn (纤维结合蛋白) Tissue Factor TF (组织因子 FIII) Endouthelin ET (内皮素)
11/20/2019
8
Ⅰ.神经反射 管腔收缩 血流变慢 出血/停止
原发性血小板增多症
《正向间接血凝试验》课件
案例二
某地区爆发伤寒疫情，通过采用正向间接血凝试验进行快速检测，及时控制了疫情的传 播。
06
结论与展望
正向间接血凝试验的优势与局限性
优势
正向间接血凝试验是一种快速、敏感、特异 的血清学检测方法，可用于检测抗原或抗体 ，尤其适用于大规模样本的筛查。
局限性
正向间接血凝试验的准确度受多种因素影响 ，如试剂质量、操作方法、环境温度等，且
不同温度下，抗原和抗体的活性不同，也会影响试验结果 。在适宜的温度范围内，提高温度可以加快血凝反应速度 ，但过高的温度可能导致抗原和抗体失活，从而影响试验 结果。
pH值对试验的影响
pH值是影响血凝试验的重要因素之一。在适宜的pH值范围内，红细胞和抗原抗体的活性才能得到充 分的发挥。pH值过高或过低都可能导致试验结果不准确。
自身免疫性疾病诊断中的应用
检测自身抗体
正向间接血凝试验可用于检测多种自身抗体 ，如抗核抗体、类风湿因子等，有助于诊断 自身免疫性疾病。
辅助诊断
该试验可为自身免疫性疾病的诊断提供辅助 依据，帮助医生更好地了解患者的病情。
案例分析
案例一
某医院采用正向间接血凝试验检测流感病毒，成功诊断出多名流感患者，并采取了有效 的治疗措施。
pH值对血凝试验的影响主要体现在两个方面：一方面，pH值的变化会影响红细胞和抗原抗体的电荷 数，从而影响它们之间的相互作用；另一方面，pH值的变化会影响抗原抗体的构象，进一步影响它们 之间的结合能力。
红细胞浓度对试验的影响
红细胞浓度是影响血凝试验结果的重 要因素之一。在一定范围内，红细胞 浓度越高，血凝反应速度越快，但当 浓度达到一定值后，血凝反应速度将 不再增加。
监测疫苗接种效果
流行病学调查
某地区爆发伤寒疫情，通过采用正向间接血凝试验进行快速检测，及时控制了疫情的传 播。
06
结论与展望
正向间接血凝试验的优势与局限性
优势
正向间接血凝试验是一种快速、敏感、特异 的血清学检测方法，可用于检测抗原或抗体 ，尤其适用于大规模样本的筛查。
局限性
正向间接血凝试验的准确度受多种因素影响 ，如试剂质量、操作方法、环境温度等，且
不同温度下，抗原和抗体的活性不同，也会影响试验结果 。在适宜的温度范围内，提高温度可以加快血凝反应速度 ，但过高的温度可能导致抗原和抗体失活，从而影响试验 结果。
pH值对试验的影响
pH值是影响血凝试验的重要因素之一。在适宜的pH值范围内，红细胞和抗原抗体的活性才能得到充 分的发挥。pH值过高或过低都可能导致试验结果不准确。
自身免疫性疾病诊断中的应用
检测自身抗体
正向间接血凝试验可用于检测多种自身抗体 ，如抗核抗体、类风湿因子等，有助于诊断 自身免疫性疾病。
辅助诊断
该试验可为自身免疫性疾病的诊断提供辅助 依据，帮助医生更好地了解患者的病情。
案例分析
案例一
某医院采用正向间接血凝试验检测流感病毒，成功诊断出多名流感患者，并采取了有效 的治疗措施。
pH值对血凝试验的影响主要体现在两个方面：一方面，pH值的变化会影响红细胞和抗原抗体的电荷 数，从而影响它们之间的相互作用；另一方面，pH值的变化会影响抗原抗体的构象，进一步影响它们 之间的结合能力。
红细胞浓度对试验的影响
红细胞浓度是影响血凝试验结果的重 要因素之一。在一定范围内，红细胞 浓度越高，血凝反应速度越快，但当 浓度达到一定值后，血凝反应速度将 不再增加。
监测疫苗接种效果
流行病学调查
血凝和血凝抑制ppt课件
可编辑课件PPT
9
血凝实验步骤
1.取96孔V型反应板1块置于水平实验台上，在第1排
1-10孔内加入25ulPBS缓冲液，第11孔不加。第12孔
加25ulPBS缓冲液 2.在第1孔内加入血凝素25ul，混匀后吸出25ul加入第
2孔内，再混匀后吸出25ul加入第3孔内，依次类推
至第10孔时弃掉25ul。第12孔不加作阴性对照孔。 3.在1-12孔均加入25ul的生理盐水。 4.在每孔内加入25ul1%的鸡红细胞悬液，震荡，室温静止感
• RBC对照孔：无自凝
• 血凝抑制试验效价：呈完全血凝抑制使的最高血
清稀释度。
可编辑课件PPT
14
可编辑课件PPT
15
可编辑课件PPT
16
可编辑课件PPT
17
• 思考题 1、病毒凝集红细胞是不是一种特异的抗原体反
应？为什么？ 2、血凝抑制实验是不是特异的抗原抗体反应?
为什么？ 3、血凝试验中为什么要加补充液？ 4、为什么加病毒液和红细胞悬液时要反向加？ 5、血凝试验和血凝抑制试验中空白对照的意义？
素
1%鸡红 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25
细胞
结果预测 -
--
-
可编辑课件PPT
-
++ +++ +++ +++ +++ -
19
++++
此课件下载可自行编辑修改，此课件供参考！ 部分内容来源于网络，如有侵权请与我联系删除！感谢你的观看！
正确判定试验结果
可编辑课件PPT
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
纤维蛋白
12 11
凝血途径 （简化）
3 7
98
1 纤维蛋白原：
10+5
2 凝血酶原
Fibrin
第二节 仪器检测原理
• 血凝仪可进行血栓与止血的实验室检查。
• 可为出血性和血栓性疾病的诊断、溶栓以 及抗凝治疗的监测及疗效观察提供有价值 的指标。
• 血栓与止血的基本检测指标 ：
PT APTT FIB TT D-Dimer AT-Ⅲ ⅡⅤⅦⅩ ⅧⅣⅥⅫ
样本及试剂分配系统通常包括：样本臂、试剂臂及样本 注射器、试剂注射器，样本及试剂针，冲洗池。
4.检测系统 仪器检测系统通常包括两种以上的检测方法：
双磁路磁珠法、散射比浊法、透射比浊法、底物 显色法等等。
5.计算机系统 系统软件控制凝血仪的所有工作过程，并将
检测到的数据进行分析处理最终得到测试结果。 对检测结果进行存储、质控统计等工作
出血与凝血机制
生理性止血过程示意图
5HT：5羟色胺，TXA2:血栓烷A2
二:凝血过程
凝血酶原酶复合物 可通过内源性 凝血途径和外 源性凝血途径 生成。
胶原 内源性IIa 激活
VIIa 组织因子
激活
XIa
激活
激活
IXa 激活
VIIIa
Xa Va
激活
IIa
纤维蛋白原
仪器的数据处理部分连 续记录样品的吸光度变化曲线，计算出单 位时间内吸光度的变化量，并以每分钟吸光度的变化量来报告结果。
• 生物物理法
双磁路磁珠法
在待测血浆中加入小铁珠，如图 所示。测试杯两侧的驱动线圈产生一 恒定的交变电磁场，使杯内的小钢珠 保持等幅运动。凝血激活剂加入后， 纤维蛋白的产生增多，血浆的粘稠度 增加，迫使小钢珠的运动幅度逐步减 弱。当运动幅度衰减到先前的50%时， 可确定为凝固终点。
人工合成可以被待测凝血活酶催化裂解的多肽底 物，且多肽底物连接上产色物质。
在检测过程中产色物质可被解离下来，使被检样 品中出现颜色变化，根据颜色变化可推算出被检凝血 活酶的活性。
产色物质一般选用连接对硝基苯胺（PNA）。 游离的PNA呈黄色，其测定波长选用405nm。
• 生物化学法
凝血分析仪使用产色物质在检测血栓／止血指标时的生化反 应对酶的检测如下所示：
三、血凝仪的基本结构
1.半自动血凝仪的基本结构 样本预温槽 试剂预温槽 加样器 检测系统（光、磁） 微机
2、全自动血凝仪的基本结构
1.样本传送及处理装置 样本传送及处理装置通常包括：自动进样系统、自动穿
盖系统、及样本条形码扫描系统。 2.试剂冷藏及测试杯供应系统
试剂冷藏位可以提供几十个试剂位置并提供一个8-10度 低温环境。测试杯供应系统则为每一个测试提供测试杯， 并在测试完成后将测试杯自动抛弃。 3.样本及试剂分配系统
PC PS
凝血酶原时间 活化部分凝血活酶时间 纤维蛋白原 凝血酶时间 D-二聚体 抗凝血酶Ⅲ 内原性凝血因子 外原性凝血因子 蛋白C 蛋白S
血凝仪基本检测方法
凝固法
主要检测方法
底物显色法 乳胶凝集法
免疫法
电流法——纤维蛋白原——纤维蛋白——导电
血
（一）凝固法 生物物理法
光学法
散射比浊法——凝固过程中散射光变 浊度变化 化透射比浊法——凝固过程中吸光度变化 光度变化
在含酶的样品中直接加入合成物质，因为酶可裂解合成物质释放 PNA，监测由于PNA释放而导致被检样品在405nm处光吸收的变化， 就可推算样品中酶的活性。如对凝血酶、纤溶酶等的检测
合成物 质
凝血酶样本
光电比色
多肽+PNA
间接得到 酶的含量
• 免疫学方法
免疫学方法是以被检测物质作为抗原，然后用免疫 动物的方法制备相应的抗体，利用抗原抗体的特异性结 合反应来对被检测物质进行定量检测。自动凝血仪多采 用免疫比浊法。
血凝分析
.
第一节 血凝分析理论知识
• 一、血管壁的止血功能(P153) • 二、血小板的止血功能(P155) • 三、抗凝及纤溶系统(P156)
出血与凝血机制
一、生理性止血的基本过程 1、血管收缩 2、血小板血栓形成 3、血液凝固
血液凝固是由凝血因子按一定顺序相 继激活而生成的凝血酶最终使纤维蛋白原 变为纤维蛋白的过程。因此，凝血过程可 分为凝血酶原酶复合物的形成、凝血酶原 的激活和纤维蛋白的生成三个基本步骤。
凝
光电磁珠法——吸光度衰减程度判断终点
仪
检
双磁路磁珠法——钢珠振幅衰减程度判断终点
测 原 理
（二）底物显色法 ：以底物释放产色基团量的变化测定有关因子 生物化学法
免疫扩散法
（三）免疫学法 抗原抗体
火箭电泳
双向免疫电泳
免疫比浊 ELISA法
直接比浊 乳胶比浊
散射比浊 透射比浊
• 生物物理法
生物物理法亦可称为凝固法。通过检测血浆在凝血 激活剂的作用下光、电、机械运动等一系列变化，再由 计算机采集分析数据得出最终结果。由于是检测血浆在 凝固过程中的物理变化，因此该法 也可称为生物物理法。
电流法(已淘汰)
当一定时间后血浆中纤维蛋白形成，电极 向上移动时可钩起纤维蛋白丝。此时由于 纤维蛋白丝的存在，电路仍处于接通状态 即可判断为凝固终点。
• 生物物理法
光学法
光学测定法是通过测定血浆在加入激活剂后浊度的变化来测定 测定凝血时间的。可分为散射比浊法和透射比浊法两种。
散射比浊法
散射比浊法当待测血浆 中纤维蛋白凝块形成时， 来自发光二极管的光被 其散射。接收器接收散 射光并将其转变成电信 号。
散射比浊法
由经过放大处理后的电信号产生的血浆凝固曲线 如图所示。取整个测量过程中随时间变化的散射光强 度为 100 %，计算从测定开始至散射光强度增加到50% 时所对应的时间为凝固点。
透射比浊法
透射比浊法的光源与接收器呈直线排列。当待测血浆中纤维蛋白 凝块形成时，来自发光源的光强度被其吸收。接收器将变化的光强度 转变成电信号。
6.输出设备 通过计算机屏幕或打印机输出测试结果。
四、血凝仪的检测项目
•磁珠法检测系统简介
磁珠法检测用于凝固法是Stago的专利技术，如图所示。
一旦被测血浆开始凝固（ 加入激活试剂）血浆黏度增加 使钢球的运动速度减慢，振幅 减小。
测量线圈检测到此振幅的 变化并通过计算得到凝血时间。
• 生物化学法
这类方法主要是通过测定产色物质的吸光度变 化，以推算待测物质的含量。这类方法也称为底物显 色法。