马铃薯茎尖脱毒培养关键因素研究

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我国马铃薯茎尖培养脱毒和脱毒试管苗微繁研究进展

发现污染后最好请微生物研究人员作鉴定后对症下药为避免抗药性产生最好轮流使用抗生素如对杆菌而言青霉素庆大霉素头孢唑啉钠都有效在用抗生素处理后试管苗长足后尽快接种以防抗生素失效后细菌重新发作故用抗生素处理应每批接种使用抗同一种细菌的不同抗生素处理连续处理次后方可不经处理接入新培养基尤其是单独使用抑菌抗生素即只能杀死活跃分裂期细菌而对静止期细菌无效
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内蒙古农业科技
职教专辑
霉素类植物生长物质，多数研究者采用 !"# ，且浓度在 $% $& ’ $% ($)* + , 的居多，少数人采用 $% &)* + , 或 -% $)* + ,. 笔者以 /0 1 2""$% -)* + , 1 3 4 5"$% -)* + , 1 !"# $% -)* + , 诱导 6 个生产用种，均获成功。先将茎 -77& 年肖玉兰采用分阶段培养方案：尖接种在分化培养基 8 /0 1 泛酸钙 ()* + , 1 肌醇 &$)* + , 1 !"$% 6)* + , 1 蔗糖 (&* + , 1 琼脂 3* + ,9， #$: 后转入茎尖生长培养基 8 /0 1 5"$% &)* + , 1 !"$% 6)* + , 1 2""$% $$()* + , 1 蔗糖 (&* + , 1 琼脂 3* + , 9 ；李静华等则采取先以 - + (/0 1 ;< "" -)* + , 1 (= 6 4 > 丁酯 $% &)* + , 1 ?@ -)* + , 培养，泛绿后转入 - + (/0 1 A@ -)* + , 1 (= 6 4 > 丁酯 $% &)* + , 。茎尖成活率一般在 (6B ，成活株中脱毒苗占 &$B 。 -% -% # 培养条件液体培养的以 (- ’ (&C ，光照 #$$$ ’ 6$$$DE 进行培养；固体培养的多采用 (&C 或上下浮动不超过 (C ，稍宽一点的范围是 -F ’ (&C 或 ($ ’ (&C 。光照强度多为 ($$$DE 或以 ($$$DE 为中心上下浮动不超过 -$$$DE，也有严格限定在 (&$$ ’ #$$$DE 的。光周期则多采用 -3G + :，也有用 -(G + :，少有用 -$G + : 的。若以滤纸桥法液体培养，在光照强度 -$$$ ’ #$$$DE 、光照 -3G + : 的条件下，经 -($: 的培养，茎尖即可长成小苗。 -77F 年李天然认为：马铃薯茎尖在 -$$DE 下培养 (F:，然后扩大为 ($$DE ，而在芽长到 -H) 左右时必须扩大光量达 6$$$DE ，否则生长不好。 -% -% 6 病毒种类依司怀军所述，马铃薯茎尖培养脱毒按从易到难的顺序为： I,JK、 IK"、 IKL、 I"/ K、 IK/、 IKM、 IK0，另有类病毒 I0@K: 较 IK0 更难脱去，而很多实验证明有些病毒也可（烟草花叶病毒）侵入分生组织，如 IKM、均 @/K 可侵入茎尖，所以顶端分生组织可以汰除病毒，但并不是所有的均可汰除，因而必须采用与热处理结合的顶端分生组织培养方法，先热处理母株，然后切取顶芽进行培养。二法相结合处理可除去部分单用茎尖培养难以汰除的病毒。 /N,,NO 和 0PQHN ’ 0)RPG 以 ## ’ #SC 热处理长根的茎 6( ’ &3: 后剥取 $% - ’ $% #)) 茎尖培养去除了 F&B IKM 和 3(B IK0= 这一方法适用于以未能完全脱除病毒的试管苗的再脱毒处理。其他以块茎为处理对象的研究，恒温处理温度中间值分别为 ##% &C = #S% &C = #FC ，在此范围内，选择

马铃薯茎尖脱毒技术体系优化研究

马铃薯茎尖脱毒技术体系优化研究马铃薯是一种粮、菜、饲、工业原料兼用型经济作物,其产量高、营养丰富、适应性强、分布广。

但是在马铃薯的连年种植过程中,产量和品质逐年下降,退化是造成这一后果的主要原因,而解决退化的有效措施就是生产脱毒种薯。

马铃薯茎尖培养脱毒苗是马铃薯脱毒种薯产业的基础,优质快速地茎尖培养为以后脱毒苗和脱毒薯的生产赢得了时间和效益,当前脱毒马铃薯茎尖培养效率低,成苗率和脱毒率达不到预期目的,因此优化马铃薯茎尖脱毒培养方法非常必要。

本试验对茎尖培养的培养基和脱毒方法对脱毒效果的影响进行了系统研究,得出了以下主要结果: 1.激素对马铃薯茎尖分化成苗的影响本试验以MS培养基为基础培养基,添加不同种类及不同浓度的植物生长调节剂,共24个处理组合,研究了不同植物生长调节剂及不同浓度配比对茎尖分化成苗的影响。

结果表明,诱导茎尖分化的成苗不仅与植物生长调节剂的绝对浓度有关,又与不同种类植物生长调节剂的配比有关。

其他条件相同的情况下,添加GA3浓度为0.1mg/L时的成苗率比浓度为0.2mg/L时的成苗率高,且差异显著,说明GA3的浓度对马铃薯的成苗具有极大影响。

试验得出,培养基中加入0.1mg/LGA3有助于马铃薯茎尖更好的生长和分化,0.2mg/L GA3对茎尖分化的成苗率有抑制效应。

同等条件下培养基中添加0.1mg/L的IAA和0.2mg/L的IAA相比较,0.2mg/L IAA的成苗率较高,达50%,0.05 mg/L的NAA和0.1mg/L的NAA相比较,0.05mg/L NAA的成苗率较高,可达56.98%,但0.05mg/L的NAA比0.2mg/LIAA成苗率更高,说明使用0.05mg/LNAA作为生长素对马铃薯茎尖的分化生长有较好的促进作用。

马铃薯茎尖脱毒技术研究

马铃薯茎尖脱毒技术研究本试验以马铃薯茎尖分生组织为实验材料,应用单一试剂和组合试剂法对马铃薯茎尖进行消毒预处理,消毒试剂包括酒精、漂白粉、氯化汞、次氯酸钠、次氯酸钙和过氧化氢六种试剂。

通过分析植株染菌和成活等生长情况来判断消毒的效果。

在消毒时长与无菌水冲洗次数上进一步优化,采取酒精处理30s、60s和120s,无菌水冲洗2、4和6次,氯化汞处理2min、3.5min和5min构成三因素三水平正交实验,依据染菌和成活情况确定最优的灭菌组合,结果表明氯化汞处理 3.5min,酒精处理120s,无菌水冲洗6次,马铃薯的脱毒苗无菌成活率可达90%以上采用黄皮薯“中薯一号”、白皮薯“早大白”、紫皮薯“紫薯”,研究不同品种的茎尖分生组织经脱毒培养后的成活情况,结果表明中薯一号的成活率可达到70%,而紫薯的成活率为0%,表明不同品种的茎尖脱毒效果和效率存在显著的差异。

研究了“中薯1号”不同类型的外植体茎尖的脱毒培养情况,包括母薯上、自然环境下植株上的侧芽和培养箱中脱毒幼苗的侧芽茎尖三种。

结果表明母薯上茎尖脱毒培养出的苗染菌率较高,生长情况比较差的,成活率只有50%；培养箱中的是经过脱毒预处理且在无菌环境下生长的侧芽,虽没有自然环境下的苗长势旺盛,但成活率能达到80%,所以采用无菌苗的侧芽尖进行脱毒培养效果最好。

进行了培养基组分的优化,设计了在MS培养基中加入不同浓度的激素PIX以及不同果汁添加物的试验,结果表明激素PIX对促进马铃薯脱毒苗缩短节间,增加茎粗,抑制徒长,促进壮苗有着显著的效果。

当PIX浓度为0.5mg/1和1.Omg/l时,马铃薯的脱毒苗长得最壮,分枝最多,叶子最多,且颜色为绿色,有的是墨绿色。

不同浓度的果汁添加物对脱毒苗均有促进或抑制作用,它们能提供脱毒苗在生长过程中所需要一些微量营养成分、生理活性物质和生长物质等,其中低浓度的水萝卜汁最有助于马铃薯脱毒苗的生长。

马铃薯茎尖脱毒及组培快繁技术研究

用量非常少，不易溶于水，以采用特殊的配置方法，且所
配置成５０ｇＬ的溶液待用。当两个品种的种薯芽长０／ｍ
到２３ｃ～ｍ时．选生长健壮的芽，清水冲洗芽部表挑用
面污物．在无菌操作室采用ｌ种不同的方法进行表面２消毒，最近制作的蒸馏水冲洗四五次，表面消毒剂用将彻底清除，同表面消毒剂处理时间见表１不。
２１０２年第１６期
马铃薯茎尖脱毒及组培快繁技术研究
田成津
（海大通县农业生态环境与可再生能源工作站，海大通青青８００）１１０
摘要：以下寨６５和青薯１８为实验对象，用不同培养基，６采对马铃薯两个品种进行脱毒及组培，对培养基及关键技术措施进行了分析，结果表明：与青薯１８不同培养中生长表现不同，６在下寨６５茎尖组织在ＭＳ中加入Ｂ２Ａｍ／ｇＬ的培养基中生长表现突出，而青薯１８茎尖组织在Ｍ６ｓ中加入Ｂ２ｍ／ＡｇＬ的培养基中成苗率较高。同等条件下，在加入ＩＡ．０ｇＬ的培养基宜用于下寨６脱毒苗的组织快繁，加入ＩＡ０３ｍ／Ａ５ｍ／０５Ａ．０ｇＬ的培养基宜用于青薯１８脱毒６
厂化生产提供帮助。
１材料和方法
１１供试材料．
１２１催芽于１月中旬左右，拣表皮光滑、常．．１挑正薯形、小均匀、病害和无损伤薯块，置在有供暖的大无放房间，内温度２室４℃ 左右进行催芽。催芽前薯块正处在于休眠期，用００～０１ｇＬ的Ｇ３处理薯块，采．５．０／ｍＡ来浸没于Ｇ３溶液中１￣２ｉ，Ａ００ｎ以打破休眠［。ｍ４］１２２种薯处理．．采用Ｍ培养基，入不同配比的激Ｓ加素，备Ｂ、Ａ、Ａ、Ｂ准ＡＮＡＧ。ＩＡ和ＩＡ由于激素在培养基中Ａ，

马铃薯茎尖脱毒培养技术研究

在４０Ｘ解剖镜下剥离茎尖，一手用镊子将芽按住，一手用无菌解剖针将叶片逐层剥掉，直至露出圆滑的生长点，用解剖针切取带１～２个叶原基的０．３ｍｍ茎尖，接种到培养瓶内，保证切面接触培养基；同时在剥离过程中，操作要敏捷准确，防止茎尖在空气中暴露时间长，水分蒸发使茎尖变干；将接种的培养瓶置于培养箱进行培养，定期观察其生长状态和污染情况。３茎尖脱毒的影响因素
马铃薯茎尖脱毒就是利用该原理，把茎尖剥离接种到培养基上，进而培养马铃薯种薯或微型薯。２操作方法
剪取促芽后的马铃薯块茎上合适大小的芽若干个，冲洗干净后放于烧杯内用纱布封口，置于自来水下反复冲洗４０分钟，吸干表面水分放进超净工作台进行深层消毒；先用７５％酒精浸泡２０～４５ｓ，无菌水冲洗３次；再用ｏ．１％的升汞浸泡８￣１０ｍｉｎ，无菌水冲洗５次，冲洗时轻轻晃动烧杯时消毒剂彻底被漂洗掉，之后置于无菌滤纸待用。
毒效果的因素进行了详细分析，进一步阐述了对病毒检测的常用方法。
关键词：马铃薯；茎尖脱毒；病毒检测
中图分类号：￥５３２
文献标识码：Ａ
文章编号：１６７４—０４３２（２０１３）一１０—２３—２
马铃薯是我国重要的粮食作物，近年来，政府加大力度发展现代马铃薯产业，促进了马铃薯产业的快速发展，种植面积和鲜薯产量均居世界首位，产业链条逐步拓展，经济效益稳步提升。但是，马铃薯是通过块茎进行的无性繁殖，在连年种植过程中土壤和种薯本身携带的病害逐年严重，导致品种退化，严重降低了马铃薯的产量和品质。１９５５年法国Ｍｏｎｅｌ通过剥离马铃薯茎尖获得了不带病毒的马铃薯脱毒苗，引起了科学界的广泛关注，世界各地纷纷采用马铃薯茎尖脱毒快繁应用于大田生产，提高马铃薯产量，改善其品质。１马铃薯茎尖脱毒原理

马铃薯茎尖脱毒培养技术的研究

危害马铃薯的病毒有30种之多，如 X病毒、S病毒、Y病毒、M病毒、A 病毒、花叶病毒、纺锤形块茎病毒等。由于马铃薯是无性繁殖作物，病毒逐代积累，日益严重，引起严重退化。马铃薯病毒可使块茎产量减少50%~80%。
一、马铃薯脱毒技术:
马铃薯在营养繁殖时易受病毒的浸染，当条件适合时，病毒就会在植株内增殖，转运和积累，随着世代传递，病毒危害逐年加重，一般可造成减产50％以上。研究发现，有30多种病毒易感染马铃薯，并引起品种退化，严重影响马铃薯的生产。通过微茎尖组织培养技术能从马铃薯体内脱除PLRV、PVY、PVA、PAF、 PVG、PVM、PSW等病毒。
因此，采用组织培养技术，通过一定良种繁殖体系，生产优质种薯，是保证马铃薯高产、稳产的一项有效措施。
1．脱毒种薯生产程序
采用微茎尖组织培养的方法，诱导出苗，采用联免疫吸附试验法或指示植物方法鉴定马铃薯病毒和类病毒，经鉴定后，无主要病毒及类病毒的试管苗可定为脱毒试管基础苗。
试管基础苗在无菌条件下，采用固体、液体培养基相结合的方法，进行扩繁基础苗，在防虫网室栽植或封闭温室扦插，生产出原原种（或称脱毒小薯）。用原原种在一定隔离条件下产生原种1代，以后逐级称为原种2代、良种1代、良种 2代。
培养条件：温度21~25℃、光量20003000 lx(勒克斯)、光照12h/d。 2-3周愈伤，4-5周绿点，3--6月长成2-3 厘米小芽，越慢越好，出芽很快的扔掉。
（2）继代和生根
培养成功的马铃薯脱毒苗，经ELISA（试剂盒）鉴定后（试管苗应每3月检测一次，每年4次）鉴定后，采用固体、液体培养基相结合方法扩繁。取试管苗单节切段扦插在（或平放）固体培养基上，每瓶可插20个左右茎段，经20d左右发育成5~10cm高小植株，继续进行切段繁殖，此法速度快，每月可繁殖5~8倍，试管苗多节接种在液体培养基上，进行浅层静止液体培养。

马铃薯茎尖脱毒及组培快繁技术研究

马铃薯茎尖脱毒及组培快繁技术研究摘要：以下寨65和青薯168为实验对象，采用不同培养基，对马铃薯两个品种进行脱毒及组培，对培养基及关键技术措施进行了分析，结果表明：与青薯168在不同培养中生长表现不同，下寨65茎尖组织在MS中加入BA2 mg/L 的培养基中生长表现突出，而青薯168茎尖组织在MS中加入BA2 mg/L的培养基中成苗率较高。

在同等条件下，加入IAA 0.50 mg/L的培养基宜用于下寨65脱毒苗的组织快繁，加入IAA 0.30 mg/L的培养基宜用于青薯168脱毒苗的组织快繁。

关键词：马铃薯；茎尖脱毒；组织快繁我国是马铃薯生产第一大国，2008年种植面积达到573.33万hm2，鲜薯总产达8 800万t，平均单产约15.45t／hm2，总产位居世界第一[1]。

马铃薯是无性繁殖作物，体内病毒的积累可使品种种性退化、品质和产量降低，对其生产造成严重危害[2]。

因为大部分病毒不能感染马铃薯茎尖组织，通过茎尖脱毒，生产脱毒种薯用于生产是防止马铃薯退化的切实可行的措施[3]。

马铃薯脱毒及组培快繁中所用基质和培养条件等关键技术方面的报道较多，但对下寨65和青薯168报道较少，本文既通过对马铃薯下寨65和青薯168两个品种进行脱毒及组培试验研究，为西部高原地区当家品种脱毒种薯的工厂化生产提供帮助。

1材料和方法1.1供试材料采用当家品种下寨65和青薯168。

1.2试验方法1.2.1催芽于11月中旬左右，挑拣表皮光滑、正常薯形、大小均匀、无病害和无损伤薯块，放置在有供暖的房间，室内温度24 ℃左右进行催芽。

在催芽前薯块正处于休眠期，采用0.05～0.l0 mg/L的GA3来处理薯块，浸没于GA3溶液中10～20 min，以打破休眠[4]。

1.2.2种薯处理采用MS培养基，加入不同配比的激素，准备BA、NAA、GA3、IBA和IAA，由于激素在培养基中用量非常少，且不易溶于水，所以采用特殊的配置方法，配置成500 mg/L的溶液待用。

马铃薯茎尖脱毒培养关键因子探析

ＴｈｅＫｅｙＦａｃｔｏｒｏｆＰｏｔａｔｏＳｈｏｏｔ－ｔｉｐＣห้องสมุดไป่ตู้ ｌｔｕｒｅ
（ＰｏｔａｔｏＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＷｕｌａｎｃｈａｂｕＣｏｃａｔｉｏｎｌａＣｏｌｌｅｇｅ，Ｗｕｌａｎｃｈａｂｕ０１２０００，Ｃｈｉｎａ）
题，提出了结合化学处理提高脱毒率的有效措施，指出茎尖脱毒培养中尚存在的一些问题以及相应对策。关键词：马铃薯；茎尖脱毒；组织培养
中图分类号：Ｓ５３２文献标识码：Ａ１０．３９６９／ｊ．ｊｓｓｎ．１００７ — ０９０７．２０１３．０４．０１９文章编号：１００７ — ０９０７｛２０１３）４－０００３６ — ０２
操作流程如下：
国第一２０１２年种植面积有所下降．但仍然保持在６６．７９万
ｈｍ０．总产可达１０００万ｔ左右
１．２．１选材
于马铃薯生长季在田间选取生长健壮、品种特性
马铃薯产业对我国农村经济发展、国家粮食安全起到了非常重要的作用由于马铃薯栽培属于无性繁殖，导致马铃薯如果自身携带有病毒的话．多代无性繁殖可以导致病毒的积累．造成产量以及品质的逐年下降，也就是品种退化。目前．病毒病是制约马铃薯产业发展的主要因素。马铃薯茎尖脱毒培养手段是解决马铃薯病毒病最常使用的方法之一。通过分离茎尖分生组织

马铃薯茎尖脱毒组织培养技术研究综述

马铃薯茎尖脱毒组织培养技术研究综述作者：杨小琴李善才李增伟胡晓燕孙利军来源：《现代农业科技》2009年第22期摘要综述了近几年来马铃薯茎尖脱毒技术的研究进展,从马铃薯生产概况及危害马铃薯的主要因素、茎尖剥离发展历史及原理、茎尖脱毒技术要点、影响马铃薯茎尖脱毒效率的因素方面作了概述并对其发展前景进行了展望,以为马铃薯茎尖脱毒技术发展奠定基础。

关键词马铃薯;茎尖;脱毒;组织培养中图分类号S532文献标识码A文章编号 1007-5739(2009)22-0085-02ReasarchReviewOn Virus-freeTechnology ofPotatoStep-tip Tissue CultureYANG Xiao-qinLI Shan-caiLI Zeng-weiHU Xiao-yanSUN Li-jun(Yulin Institution of Agricultural Sciences,Yulin Shaanxi 719000)AbstractIn the paper,the recent studies on step-tip tissue culture of potato were reviewed. The respects about potato production situation,factors of potato production,historical development, theory and outline of virus-free on step-tip,and influencing factors on virus-free on step-tip tissue culture were summaried.Then the development prospect was presented so as to lay a foundation for the development of potato step-tip virus-free tissue culture.Key wordspotato;step-tip;virus-free;tissue culture马铃薯栽培分布较广,世界上共有148个国家栽培,主要分布在欧洲和亚洲。

马铃薯茎尖组织培养脱毒技术要点

实践技能练习马铃薯茎尖组织培养脱毒技术要点1.马铃薯茎尖组织培养脱毒技术1.1脱毒方法1.1.1选择优质健康的材料所选的植株必须是表现典型品种特性的植株,符合脱毒品种的特征包括株型、叶形、花色等植物学性状及成熟期等农艺性状;植株生长健壮,无明显的病毒性、真菌性、细菌性病害症状;单株产量和大薯率高;适时早收,选择符合品种特性,无病斑、虫蛀和机械创伤的大薯块。

1.1.2选择培养基MS培养基适用于大多数双子叶植物,B5和N6适合大多数单子叶植物,马铃薯茎尖培养基以MS+GA3 0.05mg/l +6-BA0.5～0.1mg/l +NAA0.1～0.2mg/l+2%蔗糖+0.9%琼脂配方效果比较好。

1.1.3剥离和接种薯块休眠后进行室内催芽,待芽长至1～2cm还未展叶时,将芽剪下,然后放入烧杯,用纱布封口,在自来水下冲洗半个小时,取出放到操作台上进行消毒。

消毒方法是将芽在75%的酒精中过一遍(约20秒),然后用次氯酸钠溶液稀释为2%～3%,浸泡2分钟,然后用无菌水清洗3～5次。

将消毒过的芽放在垫有吸水纸的培养皿上,每次消毒的芽不要太多,以防放置时间过长,茎尖褐变(消毒过程中所用器具均已事先高温灭菌)。

在操作台使用前先打开紫外线消毒30分钟,然后关闭紫外线灯,打开风机。

实验前换专用服装,双手用75%酒精擦拭消毒,取消毒处理过的芽,以无菌镊子固定,在30～40倍解剖镜下进行茎尖分生组织剥离。

用解剖针小心地除去茎尖周围的叶片组织,暴露出顶端圆滑的生长点,用解剖针切取0.1～0.3mm,带有1～2个叶原基。

茎尖剥离时为防止解剖镜近距离灯光烤伤茎尖分生组织,解剖镜光源要用冷光源照明。

切取的茎尖分生组织随即接种到培养基上,切面接触琼脂,置于培养室进行离体培养。

1.1.4培养条件将已接种外植体的试管置温度23℃～25℃,光照3000lx、在光周期13～16小时/天的培养室中培养2～4周即可成苗。

2.茎尖培养的关键技术环节2.1剥取适当大小的茎尖通常培养茎尖越小,产生幼苗的无毒率越高,但成活率越低。

马铃薯茎尖脱毒组培的理论依据及技术要点

马铃薯茎尖脱毒组培的理论依据及技术要点脱毒马铃薯具有很大的增产潜力，应使其尽快应用于生产。

马铃薯是以块茎作为繁殖器官举行无性繁殖，在育种上是采纳有性杂交、无性繁殖的程序。

首先按照育种任务挑选性状符合要求的亲本，举行杂交授粉。

采得实生种子后，播种育苗，从杂种实生苗中挑选符合育种任务的、综合性状优良的单株举行单独心得，再用其块茎举行无性繁殖。

在无性系里经比较、鉴定并继续挑选，直至挑选出适合在生产中推广的优良品种。

因为马铃薯经杂交后均采纳块茎举行无性繁殖，不再经过有性世代，所以目前生产中推广的优良品种均为杂种一代。

因为马铃薯在其无性繁殖过程中易受病毒感染，病毒随着无性世代在块茎中堆积，导致马铃薯病毒性退化，失去原有种薯的技术讨论，此项技术已在国内举行了推广。

脱毒种薯在国内生产上已大面积应用。

但在无性繁种过程中，还会受到病毒的再侵染，因此要在繁种过程中实行措施举行预防。

下面将马铃薯茎尖脱毒组培技术及马铃薯良种繁育技术作一介绍。

寄生在马铃薯块茎中的病毒，随着块茎芽眼萌发长成植株的生长过程，也在马铃薯植株体内举行病毒粒子的复制繁殖，但病毒在马铃薯植株内的分布是不匀称的。

据讨论，在代谢活跃的茎尖分生组织中没有病毒。

可能是因为茎尖分生组织中的细胞分裂速度很快。

超过病毒粒子的复制速度，使病毒粒子在复制过程中得不到养分而受到抑制。

也可能是因为分生组织中某些高浓度的激素抑制了病毒。

以上缘由的机理尚未搞清，但利用对茎尖(带有l～2个叶原基，小于0.2毫米)组培苗举行病毒检测末发觉带有病毒，而大于0.2毫米的茎尖却常能检测出病毒。

这点便成为茎尖脱毒组培繁殖无病毒株的重要依据。

马铃薯脱毒技术就是通过茎尖部分没有病毒的特性、利用延续切茎尖，在无菌环境条件下，通过人工配置的培养基，哺育出无毒试管苗，然后通过试管苗在防虫温室或网室内繁殖微型薯原原种。

在人工隔离或自然隔离条件下，通过原原种繁殖一级原种和二级原种。

二级原种在自然隔离条件(高纬度或高海拔冷凉地区、风速大的海岛等地)繁殖一级良种供生产中使用。

榆林市马铃薯茎尖脱毒培养探究

着的培养基，短较长的根系，剪去掉太多的叶片，
然后用多菌灵溶液蘸根，刚移栽的试管苗最主刚要的就是保湿、光。一般下午４遮 —５点移栽，— ７１０ｄ可以缓苗，周后可以去掉遮阳网及塑料膜，２
植物茎尖脱毒培养的成败不仅与培养基的组
分有关，且与块茎的选择、化、芽处理、尖而钝催茎剥离、接种也有直接关系。３１培养基的配置．培养基的成份有６大类，包括无机养分（大量
２可行性
首先，榆林位于陕西省最北部，地处毛乌素沙
薯病毒病最有效的方法就是培育和推广脱毒种薯，
就是通过对马铃薯块茎进行病毒钝化、芽处理，催通过茎尖剥离、生组织培养而脱去ＰＳＰ分Ｖ、ＶＹ、
Ｐ、ＬＶ和ＰＴ等病毒、病毒后培育试管ＶＳＰＲＳＶ类
附加ＣＰ０１／）明显提高茎尖脱毒ＰＵ（． —１ｍｇ１可
（下转第１０页）０
收稿日期：０１１１ｌ２１－４
作者简介：成文（９５）男，西横山人，学本科学历，师。汪１７一，陕大讲
陕
西
农
业
科
学
榆林市马铃薯茎尖脱毒培养探究
汪成文
（林农业学校，西榆林榆陕
７９０１００）

马铃薯茎尖脱毒培养影响因素研究

ｐｒｅｔｇｆｒｇｎｒｔｄｐａｔｔ．ｂｔｈｆｉａｙｏｉｓｅｉｎｔｎｗａｏｒＯｆｓｘｍｅｉｅｔｈｅｉｍｅｃｎａｅｏｅｅｅａｅｌｎｌｓｕｅｅｃｃｆｖｒｌｅｔｕｍｉａｉｓｐｏ．ｉｄａｔｓｅｔｅｍｄｕＭＳ＋ｏｄ
ｗｅｅｓｕｉｄｆｒｅｉａｙｏｉｓｅｉｎｔｎＴｈｍａｌｒｔｅｍｅｉｔｍｉｅｔｅｈｇｅｈｉｓｆｅｅｅｅａｅｌｎｌｔｒｔｄｅｏｆｃｃｆｖｒｌｕｍｉａｉ．ｅｓｏｌｒｅｓｚ．ｈｉｈｒｔｅｖｒ－ｅｒｇｎｒｔｄｐａｔｅｈｓｕｒｅ
（甘肃省定西市旱作农业科研推广中心，甘肃定西７３０４００）
摘
要：以马铃薯茎尖为外植体，通过组织培养研究了不同的茎尖大小、不同浓度和配比的细胞分裂素和生长素
对脱毒效果的影响。结果表明：茎尖越小，脱毒率越高但成活率和成苗率越差；茎尖越大，成活率和成苗率高但脱毒率差。６种培养基中以ＭＳ＋ＮＡ０１ｇＬ效果最好，成苗率为３．％，为本试验中茎尖诱导分化成苗的最优培养基。Ａ．ｍ・－３５７关键词：马铃薯；茎尖培养８－，女，研实员，主要从事马铃薯组织培养及遗传育种研究。｛通信作者：潘晓春，副研究员，主要从事马铃薯遗传育种研究，Ｅｍｉｐｃ８０２．ｏ－ａｌｘ０２＠１６ｃｍ。：
进行Ｎ、Ｋ与产量的回归分析，成功率较高，因、Ｐ此最佳施肥量均是通过一元二次模型获得的。阴山南麓区虽然是内蒙古的重要马铃薯产区，

马铃薯茎尖脱毒原理

马铃薯茎尖脱毒原理
马铃薯茎尖脱毒是一种繁殖马铃薯无病毒种薯的方法，其原理主要包括以下几个方面：
1. 选择健康的无病毒马铃薯株作为原材料：无病毒种薯是实施茎尖脱毒的前提，必须从健康无病毒的马铃薯植株中取得茎尖。

2. 茎尖提取：通过将马铃薯植株的茎尖分离出来，使得其中的细胞组织含有较少或无病毒。

3. 培养无菌苗：将茎尖放入含有适当培养基的无菌环境下，使其进行快速繁殖，得到无菌苗。

4. 消毒处理：在培养过程中，对无菌苗进行适当的消毒处理，使用消毒剂来杀灭任何可能存在的病原体。

5. 体外繁殖：对于无菌苗进行多次体外繁殖，通过分化、分裂和再生形成较多的植株。

6. 茎切：将培养好的植株的茎部进行切割，得到茎片。

7. 反复培养：将茎片放在培养基上进行反复培养，使其再次繁殖和生长。

8. 移植至土壤：将培养好的茎片移植至含有营养适当的土壤中，进行生长和发育。

通过上述步骤，茎尖脱毒的原理在于采取无菌培养的方式，通过对茎尖进行多次培养和消毒处理，从而去除或大幅降低马铃薯植株中可能存在的病毒污染，最终获得无病毒状况的种薯。

这样的种薯具有较高的健康度和繁殖性，能够保证马铃薯植株的高产高质。

马铃薯种薯的茎尖脱毒培养技术.

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5．茎尖培养与病毒检测
5．2 培养 5.2.1外植体培养
从已催出芽（芽长一般2—4cm）的干净健康马铃薯块茎上掰下芽，用自来水冲洗干净，放入0.1—0.15%的升汞溶液中浸泡8—10分钟，在超净工作台上消毒完后，放入无菌水中浸泡6次，每次5分钟，然后接种到 MS＋6－BA1.5mg/L（毫克/升）＋GA3 0.5mg/L＋IBA0.5mg/L＋琼脂8g/L ＋蔗糖30g/L（PH值为5.8）的培养基上，每个培养瓶接种1—5个外植体。
任务二马铃薯种薯的茎尖脱毒培养技术
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1．材料的选择
选择具有该品种典型特性、生长健壮的单株（或无性系），结合产量情况，选择高产、大薯率高、无病斑的单株作为茎尖脱毒的基础材料，以提高脱毒效果。
马铃薯种薯
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4．剥离茎尖和接种
在超净工作台上，将消毒过的芽置于40X的解剖镜下，一手用一把眼科镊子将芽按住，一手用灭过菌的解剖针将叶片一层一层仔细剥掉，直至露出圆亮的生长点，用锋利的无菌解剖针小心切取0.3毫米以下的带12个叶原基的茎尖，随即将茎尖接种于已准备好的马铃薯茎尖培养基上，以切面接触琼脂。
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5．茎尖培养与病毒检测
5．3病毒检测
病毒检测的目的，是鉴定所获得的试管苗是否完全脱除所有病毒。
病毒检测方法一般采用指示植物鉴定法、电镜检测法或抗血清鉴定法。
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谢谢 / THANKS

浅谈马铃薯茎尖脱毒培养技术的研究进展

随着农业产业结构的调整，我国马铃薯的种植面积和总产量在不断的增加．但在连年的栽培过程中，由于病毒或类病毒（ＰＶＸ、ＰＶＹ、ＰＶＡ、ＰＶＳ、ＰＬＲＶ、ＰＳＴｖ等）的馒染和积累，造成了马铃薯质量退化和产量下降。马铃薯退化是由病毒侵染及其在块茎内积累引起，病毒一旦侵染植株或块茎．就表现为植株矮小、叶片失绿、叶片卷曲坏死，植株顶部叶片变色、卷缩，块茎表现为变小、龟裂、变尖，内部网状坏死等各种各样的退化。造成减产，一般减产２０～３０％，严重减产８０％以上¨］。病状逐年加剧，使得栽培面积及产量难以进一步提高。由于病毒在马铃薯植株中是系统感染．到目前为止，还没有像防治病虫害一样能有效防治植物病毒病的化学药剂。因此，生产健康脱毒种苗就成了马铃薯病毒病防治的主要手段。
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西昌农业科技
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的发育，但可以提高脱毒率．制剂对马铃薯茎尖培养脱毒是否有相同的效果，值得研究和探讨。刘华、冯高采用不同浓度高锰酸钾、过氧化氢、新洁尔灭、尿素稀释液对马铃薯进行浸种处理，发现病毒钝化明显。用处理过的薯块做种薯，产量明显提高。而Ｃａｓｓｅｌｌｓ，Ａ．Ｃ等（ｍ将病毒唑加入培养基中，培养马铃薯的分生组织和外植体，可脱除马铃薯的Ｘ、Ｙ、Ｓ和Ｍ病毒。２．３热处理的使用

马铃薯茎尖培养脱毒研究进展

组培课程论文题目马铃薯茎尖培养脱毒研究进展学院生命科学技术学院专业生物技术(制品方向)姓名刘小强指导教师李胜职称教授甘肃农业大学生命科学技术学院二〇一一年六月马铃薯茎尖培养脱毒研究进展刘小强（甘肃农业大学生命科学技术学院09级甘肃兰州 730070）摘要: 综述了马铃薯茎尖培养脱毒的原理,影响马铃薯茎尖培养脱毒的因素，马铃薯试管苗快繁技术与培养条件优化等方面的研究进展,指出了茎尖培养脱毒中尚存在的一些问题。

关键词: 马铃薯；茎尖培养脱毒；脱毒试管苗；前景马铃薯是世界上第四大粮食作物，属茄科茄属双子叶植物，其特点是产量高、营养丰富、适应性强、经济价值较高，又是重要的工业原料。

随着农业产业结构的调整和国内外马铃薯加工业的不断发展扩大，市场对马铃薯的需求也逐渐增多，近年来，我国马铃薯的栽培面积不断扩大，占世界第二位。

但是长期以来有“植物癌症”之称的病毒病一直困扰着马铃薯生产的发展。

马铃薯整个生育期均易感染多种病毒病，在我国马铃薯产区危害马铃薯的主要病毒和类病毒有：马铃薯X 病毒（PVX）、马铃薯Y 病毒（PVY）、马铃薯卷叶病毒（PLRV）、马铃薯A 病毒（PVA）、马铃薯S病毒（PVS），还有一种类病毒-马铃薯纺锤块茎类病毒（PSTVD）。

其中PVY、PLRV、PVX 是危害马铃薯最严重的病毒。

田间表现使植株矮小，叶片翻卷、花叶、皱缩，马铃薯品种种性退化，品质变劣，甚至失去种用价值。

目前主要通过茎尖脱毒获得脱毒试管苗的方法防治该病的发生。

目前,马铃薯茎尖培养脱毒的研究及在生产上的广泛应用取得了巨大的经济效益。

近年来, 这方面的研究又取得了不少研究成果, 现作一综述。

1 马铃薯病毒病及茎尖培养脱毒原理目前, 在马铃薯作物上已发现了多种病毒、类病毒以及植原体, 已报道的就有25 种之多, 但仅少数病毒危害严重, 如马铃薯Y 病毒( PVY) 、马铃薯卷叶病毒(PLRV) 、马铃薯A 病毒和 X 病毒(PVA、PVX) 以及马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVD) 等。