安捷伦液相使用方法
安捷伦液相工作站操作
安捷伦液相工作站操作安捷伦(Agilent)液相工作站(LC workstations)是一种用于高效液相色谱(HPLC)操作的设备。
它提供了一个集成的系统,可用于样品准备、柱装载、方法开发和数据分析等各个方面。
以下是关于安捷伦液相工作站操作的详细说明,总字数超过1200字。
1.准备工作2.样品准备3.柱装载4.方法开发与优化5.数据采集与分析1.准备工作在开始使用液相工作站之前,需要进行准备工作以确保设备和耗材的正常运作。
首先,检查液相工作站的供电情况,确保电源接地良好。
然后,检查各个部件的接口连接是否紧固,并根据需要更换各种液相耗材,如进样针头、柱、连接管等。
此外,还需确认液相工作站是否已经经过了正确的校准和验证。
2.样品准备样品准备是液相工作站操作的关键步骤之一、首先,将待分析的样品进行准备,包括样品的稀释、过滤和提取等步骤,以确保样品处于适合分析的状态。
其次,根据样品的性质和分析要求,选择适当的进样方法。
常见的进样方法包括自动进样器和手动进样器,用户可以根据需要选择合适的进样方式。
在进行样品进样之前,还需要选择适当的固定相和流动相,以满足样品的分离要求。
3.柱装载柱装载是将柱和连通装置安装到液相工作站上的过程。
首先,选择适当的固定相和柱,然后将柱安装到液相工作站的柱槽上,并确保柱和连通装置之间的连接紧固可靠。
在进行柱装载之前,还需要确保柱和液相工作站的温度控制系统正常运作,并根据需要设置适当的柱温。
4.方法开发与优化方法开发与优化是为了实现样品的高效分离和准确分析。
在进行方法开发之前,需要进行一系列的优化步骤。
首先,根据样品的性质和分析要求,选择适当的分析模式,包括梯度洗脱、等温洗脱和等流速洗脱等。
然后,进行柱平衡和调整流速等步骤,以达到最佳的分离效果。
在进行方法开发的过程中,可以利用液相工作站的自动化功能,通过改变流速、梯度条件和柱温等参数,来寻找最佳的分析条件。
同时,还可以通过监测峰面积、保留时间和分辨率等指标来评估方法的优劣。
安捷伦1260全自动高效液相操作规程
安捷伦1260全自动高效液相操作规程
1.样品的准备:最好使用流动相溶解样品;进样前样品需过滤膜,除去悬浮不溶杂质。
2.流动相的选择和处理:使用高纯度试剂,所有含盐或含水溶剂必须膜过滤,100%色谱纯有机试剂,滤膜过滤后方可使用;流动相现配现用,剩余的流动相(水相)及时清理,实验间隔>2天,建议倒掉;任何溶剂,如果有可见悬浮物、菌丝,不可使用;更换流动相之前,必须事先阅读色谱柱的说明书;除非有说明,反相柱不得使用100%水。
3.开机注意事项:先开HPLC仪器开关、脱气机、泵和紫外检测电源;等各电源开启后(30s),打开在线软件;冲柱子和平衡时,暂不开紫外灯;平衡完后,打开紫外灯,设置梯度和波长或引用方法。
4.实验结束:C18反相柱应用色谱甲醇保存,不能含任何酸、盐;用甲醇替换通道,四个过滤头均存放于有机溶剂瓶中,以防长菌;流速调零,再关闭软件,最后依次关闭脱气机、泵和紫外检测器的电源。
安捷伦高效液相色谱仪操作流程及注意事项
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简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项
简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项
安捷伦高效液相色谱仪(Agilent HPLC)是一种常用的分析仪器,广泛应用于化学、生物、环境等领域。
其操作流程和注意事项如下:
操作流程:
1. 准备样品溶液:根据分析目的选择适当的溶剂,将样品溶解或稀释至所需浓度。
2. 准备色谱柱:根据分析需求选择合适的色谱柱,并按照柱床规定的要求进行预处理,如洗涤、调pH等。
3. 连接系统:将色谱柱安装在仪器上,连接好进样器、泵、检测器和废液收集器等组件,确保连接紧密无漏。
4. 设置方法参数:根据分析需求,设置泵的流速、进样器的进样量、检测器的波长和灵敏度等方法参数。
5. 系统平衡:启动泵和检测器,运行空白试验,确保色谱柱和系统内部达到平衡状态。
6. 样品进样:将样品进样器插入样品瓶中,抽取足够的样品并注入进样器,按下进样按钮进行进样。
7. 进行分离:启动泵,使流动相通过柱床,样品分离过程中不断采集检测器的信号。
8. 数据处理:分析和处理检测器输出的信号,得出对应的峰面积、峰高度等结果,进行数据分析和解释。
注意事项:
- 严格按照使用手册和方法要求操作仪器,遵循操作规程,避免误操作和事故发生。
- 确保色谱柱、进样器及连接部分的密封性良好,防止泄漏和污染。
- 选择适当的溶剂和流动相,避免与柱材和样品相互作用,影响分析结果。
- 定期检查和维护仪器,如泵的排气、封头的更换、泄漏点的处理等,确保仪器正常运行。
- 样品处理过程中,注意避免光线、温度和湿度的影响,尽量保持稳定的分析环境。
- 使用仪器前,需提前熟悉相关方法和仪器操作,做好实验前的准备工作。
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、仪器介绍二、前期准备1.打开仪器电源,待仪器自检完成后,确保所有指示灯都亮起。
2.检查溶剂瓶的液位,确保足够的溶剂供给。
3.清洁好色谱柱并连接到系统中。
三、仪器启动1.打开色谱软件,选择相应的方法。
2.点击“系统”菜单,选择“启动系统”命令,系统开始进行初始化。
3.在系统初始化完成后,点击“准备”菜单,选择“准备系统”命令,系统开始进行一系列的自动化准备工作,比如冲洗和平衡柱子。
4.检查系统的压力和温度,确保在正常范围。
四、样品进样1.准备好待测样品和标准品。
2.将样品装入进样瓶中,注意不要超过瓶口。
3.将进样瓶插入样品进样系统中,按照方法设置的条件进行进样。
4.点击软件界面上的“进样”按钮,开始进样。
五、色谱柱选择1.根据待测样品的性质和分离特点,选择合适的色谱柱。
2.将色谱柱连接到色谱仪系统中。
3.检查色谱柱的压力和温度,确保在正常范围。
六、色谱条件设置根据分析方法的要求,设置好色谱条件,包括流量、温度、柱温等参数。
七、检测器设置1.根据需要选择合适的检测器,比如紫外检测器、荧光检测器等。
2.设置检测器的工作参数,如波长、增益、基线噪声等。
八、开始分析1.在样品进样后,点击软件界面上的“开始”按钮,开始进行色谱分析。
2.监控检测器输出的信号,根据需要可以对信号进行放大或调整。
九、结果解析1.根据所用方法的要求,对分析结果进行解析。
2.可以通过软件导出结果并进行后续处理。
十、仪器关机1.关闭色谱仪软件。
2.关闭色谱柱进样系统。
3.关闭色谱仪电源。
此为安捷伦1260高效液相色谱仪的操作规程,希望能对使用者提供一定的参考和帮助。
在操作过程中,应严格按照安全操作规范进行,并及时进行维护和保养,以保证仪器的正常运行。
安捷伦高效液相色谱仪的规范操作
安捷伦高效液相色谱仪的规范操作安捷伦高效液相色谱仪 (Agilent High Performance Liquid Chromatography,简称HPLC) 是一种常用的色谱分析仪器,广泛应用于化学、生物、药学等领域中的分析和研究工作。
为了确保正确、可靠地操作 HPLC 仪器,以下是一些规范操作的步骤和注意事项。
1.仪器准备-开启仪器电源,并等待仪器自检完成。
-检查仪器的梯度系统、进样系统、柱温控制系统、检测系统等是否正常。
-检查注射器、柱、检测器等是否清洁干净,并按需更换柱筒。
2.试剂准备-准备所需的溶剂、标准品和样品,并确保其纯度和浓度符合实验要求。
-制备规范的稀释液或内标溶液,以便进行质量控制和校准。
3.方法设置-设置流速、梯度、柱温、检测器波长等实验参数。
-设定样品进样量、进样方式和柱温控制方式。
-根据实验要求选择合适的检测器(如紫外检测器、荧光检测器等)。
4.柱的装置和平衡-根据实验需求选取合适的柱,并将柱安装在柱底座上。
-将导线连接到柱温控制系统,并设置柱温。
-选择适当的流动相溶剂,用它们预平衡柱,以确保柱达到稳定状态。
5.校正与质控-使用标准品进行系统灵敏度和线性范围的校正。
-定期进行质控分析,以检验仪器的准确性和精确性。
-根据需要,进行合适的质量控制和校正操作。
6.样品进样-根据实验要求选择合适的进样方式(如自动进样器、手动进样器等)。
-通过进样器吸取样品,并确保进样量准确无误。
-进行一定的进样准备,如过滤、稀释等。
7.开始分析-确保所有仪器参数正确设置,样品进样准备完毕,并进行柱的平衡。
-点击“开始”按钮,启动分析程序。
-监测分离曲线或结果,确保分析结果的准确性与可靠性。
8.数据分析与存储-持续监测和记录实时分析结果。
-对结果进行后处理和数据分析,如绘制色谱图、峰面积计算等。
-存储数据,以备后续分析和查阅。
9.仪器维护与清洁-使用完毕后,关闭仪器并断开电源。
-清洗注射器和柱等关键部位,以防止残留的样品引起交叉污染。
安捷伦1260操作规程
安捷伦1260操作规程安捷伦(Agilent)1260操作规程一、仪器概述安捷伦1260高效液相色谱仪是一种用于液相色谱分析的仪器,具有高灵敏度、高分辨率和高效率的特点。
该仪器由进样器、色谱柱、色谱泵、检测器等组成。
二、仪器准备1. 确保仪器的电源已连接并接通。
2. 检查进样器、色谱柱和检测器是否安装正确。
3. 检查液相色谱仪的液相系统是否已进行适当的液相填充,以及是否有足够的溶剂。
三、方法设置1. 打开色谱软件,并选择合适的方法模板。
2. 根据分析需求,在方法设置中输入样品信息、进样量、流速等参数。
3. 设置检测器的波长、增益和测量范围。
四、进样操作1. 打开进样器的盖子,将待测样品加入样品瓶中。
2. 点击软件中的进样按钮,设置样品名称和进样量。
3. 将样品瓶放入进样器,并关闭盖子。
4. 点击软件中的进样按钮,开始进样。
5. 进样完成后,从进样器中取出样品瓶,并将它放入垃圾桶中。
五、色谱柱操作1. 打开色谱柱的阀门,并将柱端与色谱柱连接。
2. 检查色谱柱是否没有泄漏,如果有泄漏,则需重新连接。
3. 检查色谱柱的温度,确保它处于合适的温度范围内。
六、液相泵操作1. 打开液相泵的电源,并连接到电脑上。
2. 设置合适的流速和梯度梯度。
3. 点击软件中的启动按钮,开始进行分析。
七、数据分析1. 使用色谱软件进行数据采集和分析。
2. 根据需要选择适当的数据处理方法,如峰面积计算、定量分析等。
3. 导出分析结果并保存。
八、仪器维护1. 分析结束后,关闭液相泵、进样器、色谱柱和检测器等设备的电源。
2. 清洗色谱柱和进样器,保持其清洁。
3. 定期检查仪器的连接线和电源线是否有松动或损坏。
九、安全操作1. 在操作仪器时,注意安全,避免接触到有害化学品。
2. 在操作过程中,严禁随意触摸仪器或移动连接线。
3. 在操作过程中,如遇到异常情况,请及时停止分析并向管理员报告。
通过以上操作规程,可以有效地使用安捷伦1260高效液相色谱仪进行样品分析。
安捷伦1260液相操作规程
安捷伦1260液相操作规程一开机1 打开计算机,登录windows操作系统。
2 打开主机各模块电源(从上至下),待各模块完成自检后,双击桌面“仪器1联机”图标,进入化学工作站,出现进样器,泵,检测器,柱温箱四个图标。
若没有出现,从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”选项。
二排气1 把各流动相放入溶剂瓶中2 旋开排气阀(逆时针),右单击“四元泵”图标出现快捷键,点击“方法”选项进入泵编辑画面。
将泵流速设到5ml/min,溶剂瓶A设到100%,开泵,排出管线的气体3分钟,柱压<10bar。
3 依次切换到B,C,D溶剂瓶排气,待排气结束,关泵。
4 将泵的流速设到1.0ml/min,将多元泵设置成做样时的溶剂配比,关闭排气阀(顺时针)。
5 开泵,待柱压稳定后,基线平衡后方可进样。
三设置方法和调用方法1 设置进样量,在“进样器”的模块中,点击鼠标右键,在“方法”中,设定进样量。
在进样模式中输入进样量。
“标准进针”——只能输入进样体积。
“针清洗后进样”——可以输入进样体积和洗瓶位置。
2 在“检测器”模块中,点击鼠标右键,点击“控制”,打开检测器的灯,点击“确认”。
3 在“检测器”模块中,点击鼠标右键,点击“方法”,一般选择“与泵,进样器一致”。
4 紫外检测器参数设定:在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长。
5 以上模块设置好后,从“方法”菜单中,选中“方法另存为”,输入方法名,点击“确认”。
6 从“方法”菜单中,选择“调用方法”,单击确认。
四设置序列和调用序列1 从“序列”菜单中,选中“序列参数”,选择数据文件路径和输入子目录名称,这样数据会自动保存在指定的文件夹中,方便查找。
2 从“序列”菜单中,选中“序列表”,在样品盘中依次放置好样品,命名样品的名称和批号,选择“方法”,点击“确认”。
3 从“序列”菜单中,选中“调用序列表”,把序列表改好后,点击保存当前序列模板。
点击“文件”,另存为序列模板。
4 点击“进样器”图标上的“序列”或者点击序列表中的“运行”,仪器进样。
安捷伦高效液相色谱操作程序(校正曲线制作和样品测定)
安捷伦高效液相色谱操作程序(校正曲线制作和样品测定)安捷伦高效液相色谱操作程序(校正曲线制作和样品测定) 1. 将手动进样阀放置至Load状态,微量注射器吸取所需量的溶液后插入手动进样阀的进样口。
2. 切换手动进样阀,由Load状态改变为Inject状态进样。
3. 当实时色谱图中的色谱峰完全出现后,点击RunControl,在下拉菜单中点击Stop Run/Inject/Sequence,结束一次进样的测定。
打印色谱图。
4. 按1~3的步骤,注射浓度不同的标准溶液获得相应的色谱图。
5. 点击View,下拉后点击Data Analysis。
6. 点击图标,将标准定量方法确定为外标法ESTD。
7. 点击欲进行校正曲线制作所需色谱图的第一张图号。
8. 点击Calibration,下拉后点击Add Peaks。
9. 在Default Amount框中输入相应的含量(浓度)后点击OK。
10. 将不准备定量的信号峰浓度均改为0。
11. 点击Calibration Table中的OK,从表格中删去这些峰信号。
返回CalibrationTable,进行待测峰确认。
12. 在Calibration Table框中的Compound下方输入化合物的英文名称,在RT下方根据色谱图中的保留时间数据输入相应的值。
13. 点击欲进行校正曲线制作所需色谱图的第二张图号。
14. 点击Calibration,下拉后点击Add Levels,在Default Amount框中输入相应的含量(浓度)后点击OK。
15. 重复8.和9.的步骤,直到输入完成所需制作校正曲线的相应色谱图数据,完成多点校正曲线的制作。
点击Calibration Table框中的OK,存储校正曲线数据。
16. 按1~3的步骤,注射样品溶液,获得的色谱图由校正曲线自动给出相应成分的含量。
打印色谱图。
安捷伦1260液相操作规程
安捷伦1260高效液相操作规程及注意事项一开机1)打开主机各模块电源(从下至上),待各模块完成自检后,再双击桌面“仪器2联机”图标,进入化学工作站,2)把过滤白头放入流动相溶剂瓶中。
3)旋开排气阀(逆时针),右单击“四元泵”图标出现快捷键,点击“方法”选项进入泵编辑画面。
将泵流量从1mL/min梯度上升至5mL/min,排出管路中的气体2—3分钟,直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力(若大于10bar,则应更换排气阀内过滤白头),关闭排气阀。
4)重复上述步骤,依此切换到B、C、D溶剂分别排气。
5)将泵的流量设到实验用流速,按照色谱柱使用说明用相应溶液冲洗色谱柱20—30分钟。
6)点击四元泵下面的瓶图标,输入溶剂的实际体积和瓶体积,点击“确定”。
7)把缓冲液换成流动相,待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯,观察基线情况,进入平衡系统。
二数据采集方法编辑若已创建方法,可在“方法”菜单选择“调用方法”,选择相应的方法。
若无,需按下面步骤建立:(1)从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”,钩选“方法信息”、“仪器/采集”、“运行时选项表”三项,点击确定;(2)出现“方法信息”对话框,如有需要可将方法的描述信息输入,也可选择不输入任何信息,点击确定;(3)泵参数设定:在“流量”处输入流量,如1ml/min,在“溶剂B”处输入80.0,(A=100-B-C-D) ,也可“插入”一行“时间表”,编辑梯度。
在“压力限”处输入柱子的最大耐高压,如300bar,以保护柱子。
点击“确定”进入下一参数设定。
(4)柱温箱参数设定:手动输入规定的温度即可。
(5)紫外检测器(VWD)参数设定:在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm,在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式箭头,选择合适的响应时间, 如>0.1min(2s)。
在“时间表”中可以“插入”一行,输入随时间切换的波长,如1min,波长=300nm。
安捷伦1260高效液相操作规程
安捷伦液相 1260 高效液相色谱操作规程1.前期工作查找资料(最好是外文文献)了解别人做该样品时常用的流动相和固定相。
如果还不清晰样品是什么物质,最起码也应该对其极性进行了解,为选择合适的流动相和固定相打好基础。
流动相选择注意事项:① 避免使用高粘度的溶剂作为流动相;② 所选用的流动相一定要与样品相溶;③ 各流动相之间可以很好的相溶;固定相选择注意事项:a. 正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团,如(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或者其他极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组分的极性大小,即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对照固定相低,如正已烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
b. 反向色谱反向色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。
反向色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出,而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反向填料有:C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等。
2.准备工作① 用于液相色谱分析的样品溶液使用前要经过0.15µm 过滤器过滤,必须达到均匀而无颗粒的状态;② 流动相一定要选用色谱级别的(最好是默克、飞世尔、时联等牌子的),并且在使用之前一定要使用0.4µm 过滤器过滤,再用超声波清洗仪脱气处理20-30min;③ 在连接柱子和色谱仪之前,阀件或者管路一定要清洗干净,(一般用异丙醇将管路清洗)3.仪器操作(一)将所选择的流动相加入相应的试剂瓶中:棕色瓶对应A 泵,该瓶中只能加双蒸水或者娃哈哈纯净水;B、C、D 泵根据需要添加。
安捷伦液相色谱仪正确安装及使用方法 液相色谱操作规程
安捷伦液相色谱仪正确安装及使用方法液相色谱操作规程安捷伦液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分构成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;也是液相色谱工获得正确牢靠的试验数据的必经之路。
*:安捷伦液相色谱仪安装条件一、环境要求:1、温度:15~30℃2、日温差:3℃3、相对湿度:20%~85%4、地面:平滑、不易起尘5、安装场所:无震动、四周无腐蚀性介质、无电磁场干扰,操作台纵深尺寸60cm以上,避开空调直吹风,避开直射阳光。
6、推举液相色谱仪工作台:长2米、宽0.8米,承重点于80公斤。
建议离墙距离0.3米以上。
一般在安装的实际空间上,还要考虑:与其它仪器间距大于60cm,仪器后面板应留有不小于50cm的空间,前面板至操作台边缘距离不小10cm;仪器安装平稳坚固,接入了UPS电源,仪器外壳与地线连接。
二、电源要求:1、单相交流220V,(+5%~—10%),50~60Hz,有单独的良好接地。
2、若电压不稳,需配置稳压电源,功率大于2.5千瓦。
3、准备1个合格的万用接线板,总数不小于5个扁平三角接线插座。
4、断电续电本领:断电情形,设备能持续运行1小时以上。
5、接地:安装场所应有牢靠接地线装置三、溶剂要求:1、二次重蒸馏水,1000毫升以上(建议用0.45微米水相滤膜过滤)。
2、乙腈或甲醇(色谱纯或优级纯),1500毫升以上(建议用0.45微米有机相滤膜过滤)。
四、操作系统:Windows XP 操作系统硬件要求:内存不低于2G;硬盘不低于160G;配有网络适配器(2个网卡);带光区驱动第二、安捷伦液相色谱仪安装方法:1、液相色谱柱的结构:a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。
柱接头接受低死体积结构,柱接头是两端螺纹组件,一端是为7/16英寸外螺纹,另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。
7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(6.35mm)连接,中心放置压坏用于密封。
安捷伦液相操作方法
安捷伦液相操作方法
安捷伦官网提供以下常见操作方法供参考:
1. 样品制备
(1)将样品溶解在有机溶剂中,使样品完全溶解。
(2)将溶液过滤,去除悬浮固体和大分子。
(3)根据需要用纯化柱、弱离子、强离子或其他柱纯化样品。
2. 样品装载
(1)通过注射器或进样器将样品送入流动相中。
(2)流动相的选择根据柱类型和样品特性而定。
(3)保持流速低于柱的最大运行压力。
3. 补偿溶液
(1)根据实验需要选择适当的补偿溶液。
(2)将补偿溶液通过补偿管加入到进样器中,与样品混合。
(3)注意不要过度稀释样品。
4. 柱温度
(1)根据柱的材料和分离条件选择合适的柱温。
(2)柱温过高可能会导致溶剂气化和柱效率下降。
5. 流速
(1)根据柱的尺寸和材料选择适当的流速。
(2)保持流速低于柱的最大运行压力。
6. 检测器设置
(1)根据样品的特性选择合适的检测器。
(2)检测器设置包括波长选择、灵敏度、峰宽等参数。
7. 数据处理
(1)数据处理包括样品峰面积、峰高、保留时间、分辨率等参数的测定。
(2)根据结果进行数据分析和报告撰写。
安捷伦液相色谱仪操作规程
安捷伦液相色谱仪操作规程1. 引言安捷伦液相色谱仪是一种常用的分析仪器,广泛应用于药物分析、食品检测、环境监测等领域。
本文档旨在介绍安捷伦液相色谱仪的操作规程,以帮助用户正确、高效地使用该仪器。
2. 仪器准备在正式操作前,需要进行以下仪器准备工作:1.检查仪器及附件是否正常运行,如有故障应及时联系维修人员。
2.检查系统电源是否接通,并确保电源稳定。
3.打开色谱柱热水浴,使其预热至设定温度。
4.检查溶剂储液罐中溶剂余量,如不足应及时更换。
5.检查进样器和检测器,确保其完好并调整到正确位置。
3. 样品处理对于待分析的样品,需要进行以下处理:1.准备样品溶液,确保溶解度适当并不含有干扰物质。
2.使用准确的量筒或移液管,取适量样品溶液放入进样器。
3.注意避免气泡的产生,可以轻轻敲击进样器以排除气泡。
4. 方法设定在进行样品分析之前,需要根据实际需求设定合适的方法参数:1.打开仪器控制软件,选择相应的方法模板。
2.根据样品性质和分析要求,设置进样量、流动相浓度、流速等参数。
3.点击确认,保存方法设定。
5. 进样操作在方法设定完成后,进行样品进样操作:1.将进样器连接至样品溶液,确保连接部位密封良好。
2.打开进样器注射阀,注入样品溶液。
3.操作软件,点击进样按钮,进行样品进样。
6. 色谱柱选择根据样品性质及分析要求,选择适当的色谱柱:1.通过试验和经验,选择合适的色谱柱类型和尺寸。
2.将色谱柱安装到色谱仪上,并调整其位置和方向。
3.使用手轮或电动调节色谱柱的流动方向和速度。
7. 检测器调整确保检测器能够正确检测和记录样品的信号:1.打开检测器的电源,确认其正常运行。
2.根据检测器类型,调整检测器的灵敏度、波长等参数。
3.使用标准样品进行校准和调试,确保检测器输出准确可靠。
8. 数据采集与处理在检测完样品后,需要进行数据采集和处理:1.点击软件界面上的数据采集按钮,开始采集样品的色谱图数据。
2.使用软件提供的数据处理功能,对样品的色谱图进行处理和分析。
安捷伦液相色谱使用的流程
安捷伦液相色谱使用的流程1. 背景介绍安捷伦液相色谱(Agilent liquid chromatography)是一种常用的分析技术,广泛应用于药物分析、环境监测、食品检验等领域。
本文档将介绍安捷伦液相色谱的基本使用流程。
2. 实验准备在进行安捷伦液相色谱实验前,需要进行以下准备工作: - 确定实验目的和样品类型 - 准备液相色谱仪和相关设备 - 准备色谱柱和固定相 - 准备样品和标准品 - 准备溶剂和流动相3. 操作步骤3.1. 仪器预操作•打开液相色谱仪电源,并确保仪器处于正常工作状态;•打开色谱数据采集软件,设置相关参数;•校准色谱仪,包括流速、温度等参数。
3.2. 样品处理•根据实验目的,进行样品提取、预处理等操作;•针对不同样品类型,可以选择合适的样品处理方法,如固相萃取、前处理等。
3.3. 准备流动相•根据实验要求,选择合适的溶剂和流动相进行配制;•确保溶剂和流动相的纯度和质量。
3.4. 色谱条件设置•设置柱温、流速、检测器波长等;•根据样品类型和实验要求,选择合适的柱和固定相。
3.5. 样品进样•使用微量注射器将样品进样到进样口处;•控制进样量,确保样品量在合理范围内。
3.6. 运行实验•打开进样器,将样品注入色谱柱;•设置色谱仪运行参数,如流速、梯度等;•启动色谱仪,开始实验运行。
3.7. 数据采集和分析•实时监测色谱图,并记录实验过程中的数据;•根据实验要求和目的,分析色谱图,判断样品成分及浓度。
3.8. 结果解读和报告•结合实验结果和样品特性,对实验数据进行解读;•撰写实验报告,包括实验原理、方法、结果和讨论。
4. 实验注意事项•操作前仔细阅读仪器说明书和实验方法;•注意安全操作,避免接触有毒或有害物质;•保持实验环境整洁和整齐。
5. 结论安捷伦液相色谱是一种常用的分析技术,通过本文档的介绍,希望能够使使用者了解安捷伦液相色谱的基本使用流程,并正确进行实验操作。
在实验过程中,重要的是遵循操作规程、注意安全并正确解读实验结果,以确保实验的准确性和可靠性。
安捷伦LC1260液相色谱操作规程及使用注意事项
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程及使用注意事项一、操作规程㈠开机1.把经过滤、脱气的各流动相装入贮液瓶中。
2.打开计算机,打开主机各模块电源(从上至下),再双击桌面“LC1260(联机)”图标,进入化学工作站。
3.旋开排气阀(逆时针),右键单击“四元泵”图标出现快捷键,点击“方法”选项进入泵编辑画面。
将泵流量设为“5mL/min”,溶剂A设为“100%”,打开泵,排出管路中的气体,直到由贮液瓶到泵入口整个管路中无气泡为止,此过程约需要5min。
4.依次切换到溶剂B、C、D,分别排气。
㈡数据采集1. 编辑样品信息:由“运行控制”进入“样品信息”,设定操作者姓名,样品数据,文件名等。
2. 编辑完整方法:从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项,单击“确定”进入“方法注释”,编辑好单击“确定”。
在“选择进样源”中选择“手动进样”单击“确定”,在“设置方法”中进行参数设定。
3. 四元泵参数设定:在“流速”处输入流量,如1mL/min,在“溶剂”处依据需要选中B、C、D并输入相应的百分数,在右侧注释栏中标明各溶剂的名称;设置“停止时间”和“后运行时间”,在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子,在“时间表”添加编辑梯度。
4. TCC(柱箱)参数设定:在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度,并选中它,右侧选中“与左侧相同”,使柱箱的温度左右一致。
5. VWD检测器参数设定:在“波长”右侧的空白处输入所需的检测波长,在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间,再设置“停止时间”和“后运行时间”。
6. 仪器曲线设置:默认即可。
7. 关闭排气阀(顺时针),冲洗色谱柱20~30min,待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯,观察基线情况。
8. 将进样器转动手柄逆时针转到LOAD位置,在环路全量进样时(定量环体积为20uL),用50~100 uL的液相进样针将2~5倍定量环体积的样品缓慢注入进样器中,再将进样器转动手柄顺时针方向迅速转到INJECT位置,将定量环中样品引入系统中。
安捷伦1260液相色谱仪操作流程
安捷伦1260液相色谱仪操作流程及注意事项1、配制流动相,水相置于棕色玻璃瓶中,有机相置于相应无色玻璃瓶中。
水相和有机相必须过滤,滤膜选用0.45有机系滤膜(尼龙)。
注意:过夜的流动相必须重新过滤。
2、流动相过滤后,置超声仪中超声20min。
3、将已超声的流动相轻轻换上,动作不要太剧烈,会产生气泡,注意不要把有机相和水相换反了(A是有机相,B是水相)。
4、将色谱柱接上,注意:流动相的流动方向必须和色谱柱上的箭头方向一致。
5、打开计算机电源、显示器开关,并输入密码。
6、依次从上往下打开液相色谱仪上的所有开关。
7、打开液相色谱在线工作站(online),输入密码。
8、打开的液相工作站上分为四个小部分,依次为进样器、泵、柱温箱及检测器。
在第二个部分设置流动相的体积及溶剂瓶的总体积。
9、脱气:旋开purge阀开关,右击泵部分,选择“method”,选择B相100%,流速1ml/min,选择确定;右击泵部分,选择“control”,选择pump “on”,10秒后,调节流速为3ml/min,10秒后,调节流速5ml/min,开始水相脱气3min,水相脱气结束后,将流速按照5ml/min-3ml/min-1ml/min的流程往下调。
然后开始有机相脱气,步骤同上,注意流速不可一下子从1ml/min调到5ml/min,需慢慢调节。
流动相脱气结束后,旋紧purge阀开关。
10、建立样品的色谱方法:设置进样体积,选择洗针进样,注明洗针位置;设置流动相比例、流速及梯度洗脱条件,序列进样时设置样品运行时间和后运行时间;打开柱温箱,设置柱温;打开紫外检测灯,设置检测波长。
全部设置好后,保存方法,不要覆盖别人的方法。
11、谱图保存路径的设置:View—preferences—data path(第二个选项)—remove旧的文件夹,add自己的文件夹。
再打开Sequence—Sequence parameter—选择Data path为自己的文件夹即可。
安捷伦液相色谱仪操作及原理
安捷伦液相色谱仪操作及原理一、概述安捷伦液相色谱仪是一种高效、快速、准确的分离分析仪器,广泛应用于化学、生物、制药等领域。
本文将详细介绍安捷伦液相色谱仪的基本操作及原理,帮助用户更好地理解和使用该仪器。
二、安捷伦液相色谱仪操作1. 样品准备在进行液相色谱分析前,需要准备好待测样品。
样品应尽可能纯净,以避免杂质对分析结果的干扰。
根据不同的分析需求,可使用不同的样品处理方法,如萃取、沉淀、离心等。
2. 柱子安装柱子是液相色谱分析的核心部件,需要根据不同的分离需求选择合适的柱子。
安装柱子时,需确保柱子与仪器连接处紧密,无气泡产生。
柱子安装好后,需进行平衡操作,以确保分析结果的准确性。
3. 流动相配置液相色谱分析中,流动相是携带样品通过柱子的介质。
根据不同的分离需求,需选择合适的流动相。
配置流动相时,需注意比例、pH值等参数,以保证分析结果的准确性。
4. 样品进样将处理好的样品注入液相色谱仪中进行分析。
进样时,需注意进样量、进样速度等参数,以保证分析结果的准确性。
5. 检测器设置检测器是液相色谱仪的重要组成部分,用于检测样品中的组分。
根据不同的分析需求,需选择合适的检测器。
设置检测器时,需注意检测波长、灵敏度等参数,以保证分析结果的准确性。
6. 数据处理与分析液相色谱仪在完成样品分析后,会产生一系列数据。
这些数据需要通过相应的软件进行处理和分析,以得出最终的分析结果。
常用的数据处理软件有Agilent ChemStation等。
数据处理过程中,需注意数据清洗、峰识别、定量分析等步骤,以保证分析结果的准确性。
三、安捷伦液相色谱仪原理1. 色谱分离原理色谱分离是一种基于不同物质在固定相和流动相之间的分配平衡差异的分离方法。
在液相色谱中,固定相是涂布在担体表面的高分子化合物,如硅胶、氧化铝、凝胶等。
流动相是携带样品通过柱子的介质,如有机溶剂、水和缓冲溶液等。
当流动相带着样品通过固定相时,由于不同组分在固定相和流动相之间的分配平衡不同,因此会以不同的速度通过柱子,从而实现各组分的分离。
安捷伦高效液相色谱仪操作说明
资料范本本资料为word版本,可以直接编辑和打印,感谢您的下载安捷伦高效液相色谱仪操作说明地点:__________________时间:__________________说明:本资料适用于约定双方经过谈判,协商而共同承认,共同遵守的责任与义务,仅供参考,文档可直接下载或修改,不需要的部分可直接删除,使用时请详细阅读内容安捷伦高效液相色谱仪操作说明一、校枪及样品处理1. 校枪仪器:两个小烧杯、分析天平、移液枪1000μL、100μL步骤:打开分析天平预热,一只烧杯放到称量盘上调零,一只装入纯水。
将移液枪1000μL、100μL调至950μL、50μL,分别吸取纯水称质量,如偏大或偏小,调节移液枪直至准确到0.001g。
(如枪使用过久或气密性不好,可以准备一个小烧杯装入纯水,每次先轻轻沾湿枪口,甩掉水或在用卫生纸吸取口上的水,再插上枪头使用。
)注意慢吸慢放,不要挂珠。
2. 样品处理:用1.5mL离心管取0.5mL发酵液,取出样品后,首现在离心机上离心(13000rap/min 3min)。
然后将样品稀释20倍,取950μL纯水、50μL发酵液于离心管中。
混匀后在离心机上离心(13000rap/min 3min)。
准备自动进样瓶(瓶中放上内衬管),取200μL待测液盖紧盖子。
按顺序放到自动进样盘中。
二、开机1、仪器各组件将在线脱气器、泵:四元、进样器:自动进样器(六通阀)、柱温箱、检测器:示差折光检测器开关打开。
打开计算机,进入Windows XP 画面,并运行CAC Server程序,打开色谱仪各组件电源,待显示已联上各组件的信息及各模块自检完成后,双击Instrument 1 Online ,图标打开工作站。
化学工作站自动与1200LC通讯。
流动相:将流动相(一般不主张使用偏酸、偏碱的流动相)放入溶剂瓶中,打开冲洗阀,设流速为2ml/min,单击确定,再依次单击泵→控制,选中启动,单击确定,则系统开始冲洗,至管路无气泡为止,切换管路反复操作至所需管路均无气泡。
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高效液相色谱仪的使用方法2008-05-11 20:24仪器名称:高效液相色谱仪仪器型号:Agilent 1100生产厂家:Agilent使用方法:(一)、开机:1、打开计算机,进入Windows NT (或Windows 2000)画面,并运行Bootp Server程序。
2、打开1100 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后,双击Instrument 1 Online图标,化学工作站自动与1100LC通讯,进入的工作站画面如下所示。
4、从“View”菜单中选择“Method and Run control”画面, 单击”View”菜单中的“Show Top Toolbar”,“Show status toolbar”,“System diagram”,”Sampling diagram”,使其命令前有“√”标志,来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开Purge阀。
7、单击Pump图标,出现参数设定菜单,单击Setup pump选项,进入泵编辑画面。
8 、设Flow:5ml/min,单击OK。
9、单击Pump图标,出现参数设定菜单,单击Pump control选项,选中On,单击OK,则系统开始Purge,直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止,切换通道继续Purge,直到所有要用通道无气泡为止。
10、单击Pump图标,出现参数设定菜单,单击Pump Control选项,选中Off,单击Ok关泵,关闭Purge valve。
11、单击Pump图标,出现参数设定菜单,单击Setup pump选项,进入Pump编辑画面,设Flow:1.0ml/min。
12、单击泵下面的瓶图标,如图所示(以二元泵为例),输入溶剂的实际体积和瓶体积。
也可输入停泵的体积。
单击Ok。
(二)数据采集方法编辑:1、开始编辑完整方法:从“Method”菜单中选择“Edit entire method”项,如上图所示选中除“Data analysis ”外的三项,单击Ok,进入下一画面。
2、方法信息:在“Method Comments”中加入方法的信息(如:方法的用途等)。
单击Ok 进入下一画面。
3、泵参数设定:(以二元泵为例)在“Flow”处输入流量,如1ml/min,在“Solvent B”处输入70.0,(A=100-B) ,也可Insert 一行”Timetable”,编辑梯度。
在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。
单击Ok进入下一画面。
4、自动进样器参数设定:选择合适的进样方式, 如图所示,进样体积1.0ul ,洗瓶位置为6号。
“Standard Injection”----只能输入进样体积,此方式无洗针功能。
“Injection with Needle Wash”----可以输入进样体积和洗瓶位置,此方式针从样品瓶抽完样品后,会在洗瓶中洗针。
“Use injector program”---可以点击Edit 键进行进样程序编辑。
点击Ok进入下一画面。
5、柱温箱参数设定:●在”Temperature”下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击”more>>”键,如图所示,选中”Same as left”---使柱温箱的温度左右一致。
●点击ok进入下一画面。
6、VWD检测器参数设定:●在”Wavelength”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在”Peak width (Response time)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间, 如>0.1min (2s)。
●在Timetable 中可以“Insert”一行,输入随时间切换的波长,如1min ,波长=300nm。
点击ok进入下一画面。
7、DAD检测器参数设定:●检测波长: 254nm,BW=30nm, 参比波长=350nm,BW=100nm;●检测波长:一般选择最大吸收处的波长。
样品带宽BW:一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。
参比波长:一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域。
参比带宽BW:至少要与样品信号的带宽相等,许多情况下用100nm作为缺省值。
Peak width(Response time):其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。
Slit—狭缝窄,光谱分辨率高;宽时,噪音低。
同时可以输入采集光谱方式,步长,范围,阈值。
选中所用的灯。
●点击Ok进入下一画面。
8、RID检测器参数设定:●色谱条件:进样体积: 20ul 。
光学单元温度: Off 。
极性: 正。
峰宽(响应时间) : 4s 。
●如图所示: “Optical Unit Temperature”---若环境温度控制在±2℃,设定为Off, 若环境温度不稳定,则设定光学单元温度为高于环境温度5度,以防样品在池中沉淀。
“Peak width”---大多数分析设为4S,只有在高速分析下设为更短。
“Automatic recycling after analysis”---在不进行分析时可以让流动相循环,节省流动相,检测器连续运行,可随时投入使用。
●***** 点击RID图标,选择RID Control :Heater 设为On,若要循环流动相,必须将“Recycling Valve”设为ON。
手动purge 参比池,将其设为On,并输入Purge 时间。
9、FLD检测器参数设定:色谱条件:●样品:P/N 01018-68704 用甲醇稀释为1:10。
●进样体积:5ul。
●柱温箱: 30℃。
EX=246nm, EM=317nm ,PMT=10。
●响应时间=4s. 停止时间:出峰完毕。
●Excitation A: 激发波长:200-700nm,步长为1nm,或Zero Order。
●Emission: 发射波长: 280-900nm, 步长为1nm,或Zero Order。
●PMT: 大多数应用适当的设定值为10,若高浓度样品峰被切平头,则减少PMT 值。
●“Peak width”:大多数应用设为4s,只有快速分析采用小的设定值。
●Multi Ex :多波长及光谱(激发)。
●Multi Em:多波长及光谱(发射)。
●同时可以输入范围Range、步长step、采集光谱。
10、在“Run time checklist ”中选中“Data acquisition”,单击Ok。
11、单击“Method”菜单,选中“Save method as”,输入一方法名,如“test”,单击Ok。
12、从菜单“View”中选中”Online signal”,选中Windows 1,然后单击Change 钮,将所要绘图的信号移到右边的框中,点击Ok.(如同时检测二个信号,则重复12,选中Windows 2)。
13、从“Run control ”菜单中选择“Sample info”选项,如上图所示,输入操作者名称,在“Data file ”中选择“Manual”或“Prefix”。
区别: Manual--每次做样之前必须给出新名字,否则仪器会将上次的数据覆盖掉。
Prefix —在Prefix 框中输入前缀,在Counter 框中输入计数器的起始位,仪器会自动命名,如vwd0001,vwd0002……。
14、从Instrument 菜单选择System on。
15、等仪器Ready,基线平稳,从Method菜单中选择“Run method”,进样。
(DAD, VWD色谱图如下所示:)(三)、数据分析方法编辑:1、从“View”菜单中,单击“Data analysis”进入数据分析画面。
2、从“File”菜单选择“Load signal”,选中您的数据文件名,如下图所示。
单击Ok。
3、做谱图优化,从“Graphics”菜单中选择“Signal options”选项,。
从Ranges中选择Auto scale 及合适的显示时间,单击ok,或选择”Use Ranges”调整。
反复进行,直到图的比例合适为止。
4、积分:(1)、从“Integration”中选择“Auto integrate”,如积分结果不理想,再从菜单中选择“Integration Events”选项,选择合适的Slope sensitivity,Peak width,Area reject,Height reject。
(2)、从“Integration”菜单中选择“Integrate”选项,则数据被积分。
(3)、如积分结果不理想,则修改相应的积分参数,直到满意为止。
(4)、单击左边“√”图标,将积分参数存入方法。
5、打印报告:(1)、从“Report”菜单中选择“Specify report”选项,进入如上画面。
(2)、单击“Quantitative Results”框中Calculate右侧的黑三角,选中Percent(面积百分比),其它选项不变。
(3)、单击Ok.(4)、从“Report”菜单中选择“Print report”,则报告结果将打印到屏幕上,如想输出到打印机上,则单击Report 底部的“Print”钮。
(四)、关机:●关机前,用100%的水冲洗系统20分钟,然后用有机溶剂冲洗系统10分钟(如ACN),然后关泵,(适于反相色谱柱)。
[正相色谱柱用适当的溶剂冲洗]。