脐带间充质干细胞制备原理
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
脐带间充质干细胞制备原理
一、概述
脐带间充质干细胞(Wharton's jelly mesenchymal stem cells,WJ-MSCs)是一种来源于新生儿脐带的干细胞。与其他来源的干细胞相比,WJ-MSCs具有易于获取、无伦理争议、低免疫原性和多向分化潜能等优点,因此在临床应用中具有广泛的前景。本文将就WJ-MSCs制备
原理进行详细介绍。
二、脐带间充质干细胞的来源
脐带是连接胎盘和新生儿的管道,其中包含了丰富的干细胞资源。在
脐带中,除了血液造血干细胞外,还存在着一种特殊类型的干细胞——脐带间充质干细胞。这种干细胞主要存在于脐带Wharton's jelly (WJ)中,与周围组织隔离。
三、WJ-MSCs制备方法
1. 脐带获取
制备WJ-MSCs首先需要获取新生儿脐带组织。通常情况下,在新生
儿出生后不久即可进行采集。采集过程中需要注意消毒和无菌操作。
2. 分离WJ组织
将采集到的脐带组织进行分离,去除血管和外层膜等部分,得到WJ
组织。WJ组织是一种透明的胶状物质,通常呈现出白色或浅黄色。
3. 制备单细胞悬液
将WJ组织切成小块,并加入胶原酶等消化酶进行消化。消化后,用PBS等缓冲液洗涤多次,最后制备成单细胞悬液。
4. 培养和扩增
将制备好的单细胞悬液接种在干细胞培养基中,并放置于37℃、5% CO2的培养箱内进行培养和扩增。在培养过程中需要定期更换培养基,并对干细胞进行观察和评估。
5. 鉴定和纯化
经过一段时间的培养,可以通过流式细胞术等方法对干细胞进行鉴定
和纯化。通常情况下,WJ-MSCs表达CD73、CD90、CD105等特征性标志物,并且不表达CD34、CD45等血液细胞特征性标志物。
6. 冻存
经过纯化和鉴定后,WJ-MSCs可以进行冻存。在冻存过程中需要使用特殊的冻存液,并在低温下保存。
四、WJ-MSCs的应用前景
WJ-MSCs具有广泛的应用前景。目前已经有多项临床试验显示,WJ-MSCs可以用于治疗多种疾病,如心血管疾病、神经系统疾病、肝脏
疾病等。此外,WJ-MSCs还可以用于组织工程学和再生医学领域,如骨髓移植、软骨修复等。
五、总结
WJ-MSCs是一种来源于新生儿脐带的干细胞,具有易于获取、无伦理争议、低免疫原性和多向分化潜能等优点,在临床应用中具有广泛的
前景。制备WJ-MSCs需要采集新生儿脐带组织,并进行分离、消化、培养和纯化等步骤。未来随着技术的不断发展,相信WJ-MSCs将会
在更多领域得到应用。