做了几年的电镜经验
TEM透射电镜衍射斑点标定深入浅出
TEM透射电镜衍射斑点标定深入浅出衍射斑点的标定目的是什么呢？这是大家首先遇到的问题。
作为骨灰级的TEM爱好者，我告诉你，目前段位的虫友可以通过衍射标定达到以下两个目的：1装X。
2辅助进行物相鉴定。
装X是很容易理解的，目前的文章要是少了透射实验那也是被别人甩了好几条街，审稿人没兴趣，同行看不起，很没面子。
因为凡涉及到TEM都显得高大上。
也许第二个目的才是大家真正关心的问题。
注意我这里说的是“辅助”进行物相鉴定，之所以是“辅助”是由于物相鉴定是一个相当复杂的且技术含量高的工作。
鉴定的难度来源于以下几个方面。
1、微观层面的物相太小，如果用打能谱分析元素的办法，很可能打到的区域会有偏离或区域偏大，能谱的结果不够准确。
2、物相太小又无法做XRD（X射线衍射，照顾一下小白虫友）。
3、通过相貌观查判断，这个太主观，而且经验要求极高，不从事个十来年的研究很难做出准确的推断。
所以物相鉴定非常困难，不能凭借上面一种手段给出有说服力的证明。
所以就有了多种手段辅助联合证明提升说服力的策略。
衍射斑点标定也是众多辅助手段中的一种，它也不能作为鉴定物相一招制敌的法宝，是因为，标定过程中会引入多种误差（拍摄系统误差，测量误差，计算误差），没法百分百保证标定的精度，所以结果也就是在误差范围内参考。
看了这些，你是不是感觉很泄气，不过没关系，圈内人士都会有一个约定俗称的共识，也就是说，只要你从多个方面联合这证明物相，达到80%的说服力，也就默认你的证明是对的了。
审稿人也一般确实这么做的。
接下来的问题是我该怎么标定我的衍射斑点呢？这是一个大问题，咱先从宏观上对这个问题进行把握。
打一个简单的比方，警察要查找犯罪嫌疑人是谁，在犯罪现场找到了作案者的小拇指的指纹，要查到此人的信息就需要将该小拇指指纹拿到公安局的数据库中进行比对，一旦该小拇指与其中一个人的小拇指指纹对上了，很可能就是这个人作案。
衍射斑点标定的过程与此相同，也是利用物相留下的衍射斑点得到晶面数据，再和标准物相库进行对比，在物相库里面如果有比较吻合的晶面数据，就很可能是这个物相了。
电镜原理及其应用
明场像（BF）：选用直射电子形成的像（透射束），像清晰。 ∨ 暗场像（DF）：选用散射电子形成的像（衍射束），像有畸变、分辨率低。
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中间镜： 放大物镜所产生的像和衍射谱。 投影镜： 是把经中间镜形成的二次中间像及衍射谱放大到 荧光屏上，形成最终放大的电子像和衍射谱。 电镜总的放大倍数： M=M物×M中×M投
JEM-2100F主体的剖面图
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1)电子枪：
热阴极、栅极、阳极 作用：为电镜提供照明源
热阴极：发射电子 栅 极：控制电子束的形状和强度； 阳 极：加速电子。
钨(W)灯丝
LaB6灯丝
场发射灯丝
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热电子发射 W
亮度(200KV)/A· cm2· str-1 光源尺寸 能量发散度/eV 使用条 件 发射 真空度/Pa 温度/K 电流/μA 电流效率 维修 约5×105 50 μm 2.3 10-3 2,800 约100 100% 无需
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1931年，德国学者诺尔(Knoll)和鲁斯卡(Ruska)获得了放大12 ～17倍的电子光学系统中的光阑的像，证明可用电子束和电 磁透镜得到电子像； 1934年，电子显微镜的分辨率已达到500Å，鲁斯卡也因此获 得了1986年的诺贝尔物理学奖； 1939年德国西门子公司造出了世界第一台商品透射电子显微 镜；分辨率优于100Å；并投入生产。 1952年，英国工程师Charles Oatley制造出了第一台扫描电子 显微镜(SEM)。 随后，电子显微镜的质量不断提高。迄今，其分辨本领和放 大率分别可达0.14nm和100万倍。 1960’S, 透射电子显微镜的加速电压越来越高，可透视越来 越厚的物质。这个时期电子显微镜达到了可以分辨原子的能 力。
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透射电子，透射电子信号是由微区的厚度、成分和晶体结构 来决定。 a. 能量和入射电子相当的弹性散射电子；(TEM) b. 各种不同能量损失的非弹性散射电子，特征能量损失Δ E 的非弹性散射电子(即特征能量损失电子)和分析区域的成分 有关，可以利用特征能量损失电子配合电子能量分析器来进 行微区成分分析(EELS)。
专检工作专长及能熟练掌握专业知识方面的自我评述
专检工作专长及能熟练掌握专业知识方面的自我评述一、专检工作专长1. 掌握各类专检技术：我在专检方面有着丰富的实践经验，熟练掌握金相显微镜、扫描电镜等专检设备的使用方法和技术要领。
能够准确操作设备，获取高质量的专检数据。
2. 分析能力强：在专检工作中，我能够快速准确地对样品进行分析，发现其中的微小缺陷和问题。
对于不同材料的专检要求，我也能够做出相对准确的判断和分析。
3. 经验丰富：我在专检工作中积累了大量的经验，对于常见的材料和工件，都能够轻松地进行专检分析，准确判断其质量状况。
4. 专业知识扎实：我在专检相关领域的知识扎实，对于金属材料、非金属材料的特性和特点有深入的理解。
能够根据不同材料的特性，灵活应用专检技术，取得理想的专检效果。
二、熟练掌握专业知识1. 学术背景扎实：我具有材料科学与工程专业背景，对于材料学、金属学、热处理等专业知识有深入理解，能够将学术理论与实际工作相结合，提高专检工作的效率和准确性。
2. 持续学习专业知识：我持续关注专业领域的最新动态和研究成果，不断学习新知识、新技术，提升自身的综合素养和专业水平。
3. 良好的分析能力：我在研究专业知识的过程中，能够深入分析专业问题，发现其中的规律和规范，对于学术上的疑难问题也能够进行深入的钻研和探讨。
4. 丰富的实践经验：我在专业知识方面有着丰富的实践经验，参与过多项材料实验和专业研究项目，在实践中不断积累经验、总结经验、提高专业水平。
三、总结评述：通过对自身在专检工作专长及专业知识掌握方面的自我评述，我深感自豪和自信。
在专检工作方面，我具有技术娴熟、经验丰富、分析能力强的优势；在专业知识方面，我具有学术背景扎实、持续学习进取、分析能力突出的优势。
综合来看，我具备较高的专业素养和综合能力，具备独立开展专检工作和进行专业研究的能力和水平。
在今后的工作和学习中，我将不断提升自身的专业素养和能力，积极参与各类专业实践和研究项目，为公司和专业领域的发展贡献自己的力量。
TUNEL法检测细胞凋亡成功的经验与失败的教训总结
TUNEL法检测细胞凋亡成功的经验与失败的教训总结TUNEL法检测细胞凋亡成功的经验与失败的教训总结1. ⼏种细胞凋亡检测⽅法中TUNEL法的优点和缺点是什么？2. TUNEL法的实验原理是什么？3. TUNEL实验中⼏个关键步骤是什么？4. 如何减弱⾮特异性染⾊？5. 细胞通透的时间如何选择？6. 内源性过氧化物酶的封闭时间和封闭液的浓度如何确定？7. TUNEL反应混合液的孵育时间可以调整吗？8. DAB的显⾊时间和条件如何把握？9. ⾸次做TUNEL实验的注意事项？10. PBS浸洗在TUNEL法中的作⽤和⽅法分别是什么？11. 脱蜡和⽔化在TUNEL法中的作⽤和⽅法分别是什么？针对问题3（TUNEL实验中⼏个关键步骤是什么？）：1. 充分脱蜡和⽔化。
脱蜡可以先60度20min，再⽤⼆甲苯两次5~10min；⽽⽔化⽤梯度⼄醇从⾼浓度到低浓度浸洗，这些以便后⾯的结合反应充分、均匀；2. 把握好细胞通透的时间。
⼀般根据切⽚的厚薄，选择蛋⽩酶k的孵育时间，常⽤10~30min，⼏um切⽚⽤短时间；⼏⼗um切⽚⽤长时间，通过摸索达到既不脱⽚，有能够使后⾯的酶和抗体进⼊胞内。
3. 适当延长TUNEL反应液的时间。
⼀般是37度1h，你也可以根据你的凋亡损伤程度，选择更长的时间，可长⾄2h，但要结合你最终的背景着⾊。
4. DAB显⾊条件的选择。
⼀般DAB反应10分钟左右，结合镜下控制背景颜⾊，最长不超过30min；我不喜欢⽤promega公司提供的DAB液（桃红⾊），不利于辨认棕褐⾊。
5.PBS的充分清洗。
我个⼈认为，在TUNEL反应后和酶标反应后的清洗应⼗分严格，可增加次数达5次，因为这些清洗直接决定最后切⽚的⾮特异性着⾊。
6. 此外，内源性POD的封闭也⼗分关键。
对于肝脏、肾脏等⾎细胞含量多的组织，我的经验是适当延长封闭时间和升⾼过氧化氢的浓度，可以达到很好的封闭效果，且不影响最终的特异性染⾊。
针对问题2（ TUNEL法的实验原理是什么？）：基本原理：对不同组织切⽚先增加细胞膜通透性，然后让rTDT和bio标记的dTUTP进⼊细胞内，在rTDT的辅助下dTUTP与核断裂的DNA 3’-OH结合，再⽤HRP标记的链霉亲和素与dTUTP上的biotin结合（每个链霉亲和素⾄少可以再结合3个biotin分⼦），最后⽤DAB、过氧化氢与SP上的辣根过氧化物酶HRP发⽣氧化、环化反应，形成苯⼄肼聚合物⽽呈现棕褐⾊，最终通过计数每张切⽚上不同视野中TUNEL阳性细胞的⽐例来判断细胞凋亡发⽣情况。
扫描电镜调研经验分享
扫描电镜调研及使用经验分享本人刚进入博士阶段，近期课题组买了一台台式场发射扫描电镜，整个过程纠结万分，现分享我们的经验以及各种扫描电镜的使用对比。
目前扫描电镜作为研究材料形貌的基础表征，每个组都会用的上，且使用频率很高，如果课题组没有，样品拿到外面测，还需要排队就很影响实验进度。
我的导师最近拿了一些不大不小的项目，经费还比较充足，于是让我调研一下扫描电镜的厂家，然后最终选择一家，购买一台。
我本科实验室有日立扫描电镜，当时自己没法上手操作，但是使用也是很频繁的；飞纳呢，由于我们在外面开会有看到了关于飞纳电镜的介绍；而日本电子是老牌扫描电镜公司，之前课题组去其他课题组拍摄电镜时所用的就是这个品牌，所以我们同样进行了调研。
这三家在上海都有办事处，于是我主要调研的是这三家。
最终我们买了飞纳的台式扫描电镜，当然不是主流老牌公司产品不行，而是我们结合自身实验室情况出发买了飞纳。
自我感觉买电镜有两个最主要的要点：买电镜要结合自身实验室的情况以及自己上手去操作扫描电镜的拍摄。
实验室制备的材料都是纳米级别的材料，所以基本上只考虑场发射的扫描电镜，场发射又分为冷场和热场，冷场扫描电镜清晰度要高于热场扫描电镜，当然也看实际需求。
对比过多个产品之后，最终锁定在日立S4800和SU5000、日本电子IT200以及飞纳Pharos，以下是部分产品的图（S4800比其他的贵太多了，很早就被导师给毙掉了，给大家做个参考吧）：样品：S4800的是冷场扫描电镜，其他的是热场扫描电镜。
清晰度上来说的话，冷场扫描电镜确实要占优，而且，S4800拍摄拥有立体形貌的样品能用BSD模式拍出较为立体的形貌。
当然我们去实地考察后发现，其实这几个电镜拍出的照片都很清晰，S4800就只是略胜一筹（这个图丢失了，但是大抵上也如此）。
实验室情况：我们实验室主要研究的都是二维片层材料，这些照片的清晰度我们都是可以接受的。
测试：除了拍摄材料形貌图片以外，当然缺不了检测，如EDS等。
电镜售后项目的思路和工作安排
电镜售后项目的思路和工作安排全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：我们需要明确电子显微镜售后项目的目标和范围。
电子显微镜售后项目的主要目标是保证设备的正常运行，提高用户的满意度和体验，并延长设备的使用寿命。
售后项目的范围主要包括设备故障排查和维修、设备培训和指导、设备保养和维护等内容。
制定电子显微镜售后项目的工作流程和标准操作规范。
在工作流程中，我们可以将售后项目分为接受用户反馈、设备排查维修、设备培训指导、设备保养维护等多个环节。
在每个环节中，制定标准的操作规范，保证售后服务的顺利进行和质量保障。
接着，建立健全的售后服务团队。
售后服务团队是电子显微镜售后项目的重要支撑。
团队成员需要具备专业的技术知识和丰富的工作经验，能够及时有效地解决用户遇到的问题。
团队成员需要有良好的沟通能力和服务意识，能够与用户建立良好的关系，提高用户体验。
然后，建立完善的售后服务管理制度。
在售后服务管理制度中，可以包括售后服务流程、责任分工、工作报告、客户反馈等内容。
通过制度的建立，可以规范售后服务的开展，提高服务的效率和质量。
持续改进和优化售后服务工作。
售后服务工作是一个不断改进和优化的过程。
通过收集用户反馈意见和不断总结经验，可以发现不足和问题，并及时进行改进和调整，提高售后服务的水平和质量。
电子显微镜售后项目的思路和工作安排是一个复杂而细致的过程。
在此过程中，需要明确目标和范围，建立工作流程和规范操作，建立健全的售后服务团队，建立完善的售后服务管理制度，持续改进和优化售后服务工作。
只有如此，才能保证电子显微镜设备的正常运行和用户的满意度。
【此文2000字，中文】第二篇示例：一、项目思路1. 完善售后服务体系：建立一支专业的电镜售后服务团队，包括技术支持人员、维修工程师和客户服务人员，确保用户可以及时获取到售后服务。
2. 定制化服务方案：针对不同用户的需求，制定个性化的售后服务方案，包括维修保养、升级改造、培训学习等服务内容。
冷冻扫描电子显微镜冷冻断裂法在生
第 28 卷第 4 期分析测试技术与仪器Volume 28 Number 4 2022年12月ANALYSIS AND TESTING TECHNOLOGY AND INSTRUMENTS Dec. 2022分析测试经验介绍(433 ~ 438)冷冻扫描电子显微镜冷冻断裂法在生物样品观察中的应用黄克让，王 珍，陈 蕾，崔凤展，彭潔莹，张 敏（西北农林科技大学实验室安全与条件保障处食品科学与工程学院，陕西杨凌 712100）摘要：冷冻扫描电子显微镜（Cryo-SEM）具有能在高真空状态下观察含水样品、分辨率高、制样简单快速、可对样品进行断裂刻蚀等优点，是生命科学研究中的有力工具. 利用Cryo-SEM冷冻断裂法进行生物类样品表面形貌观察，既能观察到表面结构信息，又可观察样品内部结构信息. 以沙漠梭梭成熟分支中上部同化枝的植物样品和乳清蛋白纤维（WPIF）的液体样品为试验材料，对样品进行冷冻断裂处理，观察并对比冷冻断裂处理前后样品的结构. 结果表明：植物样品冷冻断裂后在升华温度为−100 ℃、升华时间10 min、冷台温度为−175 ℃、观察电压5 kV 的试验条件下可以观察到植物细胞的叶绿体和细胞之间的细毛组织. WPIF冷冻断裂后在升华温度为−100 ℃、升华时间5 min、冷台温度为−175 ℃、观察电压5 kV的试验条件下可以观察到中链甘油三酯和蛋白纤维堆积而成的片层结构. 未冷冻断裂处理的样品无法观察到以上结果.关键词：冷冻扫描电子显微镜；冷冻断裂；形貌观察；生物样品中图分类号：O657; TN16 文献标志码：B 文章编号：1006-3757（2022）04-0433-06DOI：10.16495/j.1006-3757.2022.04.011Application of Freeze Fracture Method of Cryo-Scanning Electron Microscopy in Observation of Biological SamplesHUANG Ke-rang， WANG Zhen， CHEN Lei， CUI Feng-zhan， PENG Jie-ying， ZHANG Min （Division of Laboratory Safety and Services College of Food Science and Engineering of Northwest A & FUniversity, Yangling 712100, Shaanxi China）Abstract：Cryo-scanning electron microscopy (Cryo-SEM) is a powerful tool in the life science research because of its advantages such as observing aqueous samples under high vacuum condition, high resolution, simple and rapid sample preparation, fracture etching of samples, etc. Through the surface morphology observation of biological samples using Cryo-SEM's freeze fracture method, both the surface structural information and the internal structural information of the samples can be observed. The plant samples from the upper and middle assimilated branches of Haloxylon Ammodendron and the liquid samples of whey protein fiber (WPIF) were taken as the experimental materials, and the samples were subjected to a freeze fracture treatment to observe and compared the structures of the samples before and after the freeze fracture treatment. The results showed that the chloroplasts of plant cells and the fine hairs between the cells could be observed under the test conditions of a sublimation temperature of −100 ℃, a sublimation time of 10 min, a cold platform temperature of −175 ℃, and an observation voltage of 5 kV. And the lamellar structure of medium chain triglyceride and收稿日期：2022−05−12； 修订日期：2022−10−24.基金项目：西北农林科技大学试验技术研究与实验室管理创新项目（22800/A1070221004）[Northwest A&F University Technology Research and Laboratory Management Innovation Project (22800/A1070221004)]作者简介：黄克让（1990−），男，本科，助理实验师，主要从事电子显微镜相关实验，E-mail：通信作者：张敏（1987−），女，博士，硕士生导师，主要从事食品中营养素及有毒有害污染物的快速检测技术及其相关基础理论研究，E-mail：protein fiber can be observed under the test conditions of a sublimation temperature of −100 ℃, a sublimation time of 5 min, a cold stand temperature of −175 ℃, and observation voltage of 5 kV after freeze fracture of WPIF. However, the above results could not be observed for the samples without a frozen fracture treatment.Key words：Cryo-SEM；freeze fracture；morphology observation；biological sample冷冻扫描电子显微镜（Cryo-scanning electron microscope，Cryo-SEM）是在常规扫描电子显微镜上加装冷冻样品台、传输及超低温冷冻制样系统的低温样品微观形貌表征高端平台[1]，该平台无需对样品进行干燥处理，可以直接观察动植物[2-6]、乳液[7]、泡沫[8]等含水样品. Cryo-SEM能够规避空气自然干燥法导致的严重皱缩和变形，同时可弥补常规处理方法的一些缺点，如临界点干燥或冷冻干燥法中存在一定程度的皱缩失真、易溶成分丢失、制备过程慢、不能制作液体和半液体以及对电子束敏感的样品等问题. 同时，采用先进的Cryo-SEM方法，样品无需经过临界点干燥等处理过程，直接冷冻观察，是一个快速高效地解决方法，是国内外较为重视的一种电子显微镜技术发展方向[9]. 但由于仪器的价格昂贵，其应用还不广泛. 且Cryo-SEM的制样和操作过程对技术人员的试验技术要求较高，需要其熟悉各类样品的升华温度、升华时间、冷态温度、观察电压等试验条件，能根据研究目的快速高效地选择合适的操作条件，以捕捉快速变化的样品表面信息. 目前尚未见到Cryo-SEM相关的制样方法手册和图集，仅能从文献中获得少量信息[10]，Cryo-SEM 冷冻断裂法观察生物样品的相关试验方法和图集更少. 结合近5年Cryo-SEM试验经验，本文以液体[以乳清蛋白纤维（WPIF）为例]和植物（以沙漠梭梭成熟分支中上部同化枝为例）为试验材料，对样品进行冷冻断裂，并通过扫描电子显微镜观察，希望可以为相关研究者提供试验技术参考.1 Cryo-SEM及其冷冻断裂法的基本原理Cryo-SEM的关键是超低温冷冻制样和冷冻传输技术. 超低温快速冷冻制样技术包括超低温样品固定和低温样品处理，超低温样品固定是物理固定.水除了气态、液态和固态外，还有玻璃态，水大约在166 K可以转变成玻璃态. 玻璃态是一种过冷的液态，即液态水在零下摄氏度不结冰保持液态. 玻璃态的水和冰不一样，它无固定形状，不存在晶体结构. 与固态相比，它更像种极端粘滞、呈现固态的液体. 水的玻璃态密度与液态密度相同[11]. 超低温快速冷冻制样可使水呈玻璃态，避免冰晶的产生对样品本身结构产生破坏，利用超低温快速冷冻完成样品的固态化，保持生物样品在生物体原来状态，相对于化学固定具有固定速度快、效果好、无需使用戊二醛及锇酸等有毒化学试剂等优点. 样品处理在低温样品处理舱室进行冷冻断裂、升华（刻蚀）、镀膜处理. 冷冻传输系统是在真空状态下将处理好的样品转移到电子显微镜样品舱中的冷台以供观察.冷冻断裂法是低温冷冻制样关键技术，在处理舱室，采用冷刀切断. 低温断裂是一种脆性断裂，断裂过程中基本上不发生塑弹性变形. 通过冷冻断裂可以观察样品断口和样品内部结构信息，广泛的应用于生物样品和含水软组织样品，断裂角度和部位是保证试验是否成功的关键.2 试验部分2. 1 仪器与试剂Nano SEM-450扫描电子显微镜[美国赛默飞（FEI）公司]配PP3010T型号冷冻传输（英国Quorum 公司）；梭梭种子采于新疆古尔班通古特沙漠边缘；冷冻保护剂生产厂家为Scigen Scientific Gardena；石墨烯生产厂家为Agar Scientific；乳清蛋白生产厂家为Southwest Cheese Company；中链甘油三酯MCT生产厂家为北京易秀博谷生物科技有限公司.2. 2 Cryo-SEM的操作流程Cryo-SEM的操作流程如图1所示：（1）样品采用冷冻保护剂和石墨烯按1∶1混合装载于样品托上. （2）将装有样品的样品台装载到传输装置上.（3）对固定样品的预冷室抽真空，使液氮变过冷液氮（−210 ℃雪泥状）. 将样品插入−210 ℃的过冷液氮雪泥中快速冷冻固定，水转化为玻璃态，避免形成冰晶. （4）继续抽真空至再次出现雪泥，将样品提至转移仓，真空下转移. （5）将样品转移安装在扫描电子显微镜样品舱端口上的制样舱中的冷台上，与制434分析测试技术与仪器第 28 卷备腔室气锁对接. （6）根据需要进行冷冻断裂、冷冻升华刻蚀和溅射镀膜等处理. （7）在真空条件下，将样品转移至扫描电子显微镜样品舱中的冷台上.（8）进行超微结构观察和拍照.3 Cryo-SEM冷冻断裂在生命科学研究中的应用3. 1 Cryo-SEM观察WPIF3. 1. 1 乳清分离蛋白的制备称取4.0 g乳清分离蛋白（WPI）溶解于200 mL 的超纯水中，配制成质量浓度为20.0 mg/mL的蛋白分散液，磁力搅拌2 h使其充分溶解，在4 ℃、8 000 r/min下离心15 min去除不溶性物质. 上清液采用4.0 mol/L HCl调节pH为2.0，4 ℃下磁力搅拌水合过夜. 水合后的分散液置于85 ℃的水浴条件下孵育22 h（300 r/min的磁力搅拌）. 加热结束后的样品立即在冰水浴中冷却至室温，制备得到WPIF分散液，测定加热后WPIF的初始pH值，4 ℃条件下储存备用.3. 1. 2 乳清分离蛋白纤维稳定乳液的制备将20.0 mg/mL的WPIF分散液（初始pH值为2.5）作为乳化剂相，中链甘油三酯（MCT）作为油相，添加体积分数为20%，使用高速剪切机于14 000 r/min 下剪切3 min，制备得到乳液.3. 1. 3 样品处理及试验条件将冷冻后样品进行冷冻断裂和未冷冻断裂对比，具体采用的试验条件如表1所列.表 1 乳清蛋白纤维样品冷冻断裂和未冷冻断裂的试验条件Table 1 Experimental conditions of frozen and unfrozen fracture of whey protein fiber samples升华温度/℃升华时间/min冷台温度/℃镀膜电流/mA镀膜时间/s观察电压/kV 未冷冻断裂−10010−17510605冷冻断裂−10010−17510605 3. 1. 4 试验结果由图2可见，冷冻断裂后能看到乳液内部截面结构，包括连续相和液滴的表面. 未断裂只能看到冷冻样品的平整外表面，无法观察内部结构. 如图2（a）所示，只能看到油相被包裹在内部，纤维堆积无法观察到. 图2（b）中乳液液滴内部的油相（中样品托冷冻固定室样品处理室电镜冷台转移仓图1 冷冻扫描电镜工作流程Fig. 1 Workflow of Cryo-SEM第 4 期黄克让，等：冷冻扫描电子显微镜冷冻断裂法在生物样品观察中的应用435链甘油三酯）表面形貌清楚可见，可以观测到乳液液滴内部的油相（中链甘油三酯）排列结构，油滴形貌及大小. 图2（c）是连续相中的乳清分离蛋白纤维堆积而成的片层结构，可以观察到乳清分离蛋白纤维的堆积方式和堆积形状. 通过观察乳清分离蛋白纤维内部的超微结构，可以为科研工作者提供改变其内部结构的依据，进而改变其性质，并将其作为乳化剂应用于食品胶体[12]领域.中链甘油三酯10 μm50 μm10 μm蛋白纤维堆积层图2 冷冻断裂前后乳清分离蛋白乳液内部结构（a）未进行冷冻断裂（13 000×，Bar=10 µm），（b）冷冻断裂处理（2 000×，Bar=50 µm），（c）冷冻断裂（12 000×，Bar=10 µm）Fig. 2 Internal structure of whey protein isolate emulsion before and after freezing fracture (a) before freezing fracture (13 000×, Bar=10 µm), (b) performing freeze fracture (2 000×, Bar=50 µm),(c) after freezing fracture (12 000×，Bar=10 µm)3. 2 Cryo-SEM观察植物样品3. 2. 1 材料制备选取饱满、大小均匀的梭梭种子播种于花盆中，以清水冲洗后的干净河沙为培养基质，于科研温室培养（14 h自然光照/10 h黑暗，昼夜温度为28 ℃/ 20 ℃，相对湿度为45%）. 待子叶出土后，每两天浇灌1/2 Hoagland营养液（pH为6.6~6.8），子叶伸长生长一周后采集样本. 初生真叶采于刚发生两片子叶之间的同化枝（0.5 cm左右，10~15 d），整株成熟期采集生长3个月大的梭梭幼苗，取成熟分支中上部同化枝为待分析样本.3. 2. 2 样品处理及试验条件将冷冻后样品进行冷冻断裂和未冷冻断裂对比，具体采用的试验条件如表2所列.3. 2. 3 试验结果图3（a）是锋利刀片割断后冷冻放大200倍的图像，可以看出使用锋利的刀片割断存在机械损伤，断裂处细胞皱缩，细胞破损细胞液流失. 图3（b）为冷冻断裂后放大500倍观察到的Cryo-SEM图像，可以看出冷冻断裂属于冷冻脆断，断裂后组织和细胞饱满，除冷刀接触的部位有小部分机械损伤外，其它部分不会受损. 图3（c）为冷冻断裂后13 000倍放大下植物细胞内部亚细胞器图像，可以清晰观察到细胞内部的叶绿体及叶绿体内的内囊体等超微结构，之前都是通过透射电子显微镜才能观察. 图3（d）为冷冻断裂后15 000倍放大下的植物细胞外形态，可以观察到细胞间的细毛组织栩栩如生. 因此冷冻断裂法可以为科研工作者在观察及研究植物组织细胞间及细胞内超微结构方面提供帮助.表 2 梭梭成熟分支中上部同化枝样品冷冻断裂和未冷冻断裂的试验条件Table 2 Experimental conditions of frozen and unfrozen fracture of middle and upper assimilation branches of mature branches of Haloxylon Ammodendron升华温度/℃升华时间/min冷台温度/℃镀膜电流/mA镀膜时间/s观察电压/kV 未冷冻断裂−10010−17510605冷冻断裂−10010−175106054 结论Cryo-SEM可以直接观察含水或其它液体成分样品，是研究高度含水生物和材料样品的强有力工具. 能否高效获得高质量的Cryo-SEM图像，取决于合理的样品制样方式和制样条件[13-15]. 冷冻断裂法主要应用于断口和样品内部结构观察. 相比未断裂样品，液体样品断裂时，升华（刻蚀）温度较低，升华时间较短，一般升华温度为−80~ −100 ℃，升华时间在1~20 min之间. 若样品含水量较高，温度应适当升高，时间也应适当增加. 植物样品断裂时，升华温度均为−100 ℃，升华时间为10 min.Cryo-SEM的样品制备快速简单且可以直接观436分析测试技术与仪器第 28 卷察含水样品，是研究高度含水生物材料的强有力工具. 能够直接观察液体和半液体以及对电子束敏感的样品，弥补生物样品在空气中因自然干燥法导致的严重皱缩和变形的缺点. 常规处理方法（如临界点干燥或冷冻干燥法）仍存在一定程度的皱缩失真、易溶成分丢失、制备过程慢等缺点. 图4（a）（c）是临界点干燥处理的植物叶片和菌丝，观察发现样品有严重的皱缩失真. 图4（b）（d）是Cryo-SEM 观察的植物叶片和菌丝, 观察发现与图4（a）（c）相比，其形态饱满、无塌陷皱缩，表面自然状态形貌清晰可见.500 μm300 μm10 μm10 μm图3 冷冻断裂前后梭梭成熟分支中上部同化枝图像（a）锋利刀片割断后梭梭真叶（200×，Bar=500 µm），（b）冷冻断裂后梭梭真叶（500×，Bar=300 µm），（c）冷冻断裂后梭梭真叶内部亚细胞器（13 000×，Bar=10 µm），（d）冷冻断裂后冷梭梭子叶（15 000×，Bar=10 µm）Fig. 3 Images of middle and upper assimilation branches of mature branches of HaloxylonAmmodendron before and after freezing fracture(a) euphylla of Haloxylon Ammodendron after cutting by sharp blade (200×, Bar=500 µm), (b) euphylla of HaloxylonAmmodendron after freezing fracture (500×, Bar=300 µm), (c) internal subcellular organelles of euphylla of Haloxylon Ammodendron after freezing fracture (13 000×，Bar=10 µm), (d) cotyledon of Haloxylon Ammodendron afterfreezing fracture (15 000×，Bar=10 µm)300 μm200 μm20 μm20 μm图4 生物样品不同制样方法的SEM图像（a）叶片临界点干燥（800×，Bar=200 µm），（b）叶片Cryo-SEM（500×，Bar=300 µm），（c）菌丝临界点干燥（6 000×，Bar=20 µm），（d）菌丝Cryo-SEM（6 000×，Bar=20 µm）Fig. 4 SEM images of biological samples using different preparation methods(a) critical point dried leaves (800×, Bar=200 µm), (b) Cryo-SEM of leaves (500×, Bar=300 µm), (c) critical point driedmycelia (6 000×，Bar=20 µm), (d) Cryo-SEM of mycelia (6 000×, Bar=20 µm)第 4 期黄克让，等：冷冻扫描电子显微镜冷冻断裂法在生物样品观察中的应用437Cryo-SEM 作为观察微观世界的“科学之眼”，是生命科学研究重要仪器设备之一. 冷冻扫描实验技术是生命科学研究的关键技术，结合 Cryo-SEM 冷冻断裂法进行生物类样品表面形貌观察，既能观察到表面结构信息，又可观察样品内部结构信息.例如，冷冻断裂可观察样品内部超微结构及动植物组织的亚细胞结构，具有能在高真空状态下观察含水样品、分辨率高、制样简单快速、可对样品进行断裂刻蚀等优点，是生命科学研究中的有力工具.本文通过对乳清蛋白纤维（WPIF ）液体样品、植物样品观察以及临界干燥和冷冻样品处理比较，为科研工作者在冷冻扫描电子显微镜研究中提供技术参考.参考文献：莫家媚, 张少鸿, 苏秋成, 刘芬. 一种新型冷冻扫描电镜专用样品台的研制及其在小球藻微观形貌表征中应用[J ]. 电子显微学报，2021，40（3）：294-300.[MO Jia-mei, ZHANG Shao-hong, SU Qiu-cheng,LIU Fen. A new cryo-scanning electron microscopy sample stage and its application in morphology charac-terization of chlorella [J ]. Journal of Chinese Electron Microscopy Society ，2021，40 （3）：294-300.]［ 1 ］Stoláriková-Vaculíková M, Romeo S, Minnocci A,Luxová M, Vaculík M, Lux A, Sebastiani L. Anatom-ical, biochemical and morphological responses of pop-lar Populus deltoides clone Lux to Zn excess [J ]. En-vironmental and Experimental Botany ，2015，109 ：235-243.［ 2 ］Johnson D M, Meinzer F C, Woodruff D R, McCullohK A. Leaf xylem embolism, detected acoustically and by Cryo-SEM, corresponds to decreases in leaf hy-draulic conductance in four evergreen species [J ].Plant, Cell & Environment ，2009，32 （7）：828-836.［ 3 ］Barnes W J, Baum M, Peisker H, Gorb S N. Compar-ative Cryo-SEM and AFM studies of hylid and rhaco-phorid tree frog toe pads [J ]. Journal of Morphology ，2013，274 （12）：1384-1396.［ 4 ］Fujikawa S, Endoh K. 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Journal of Colloid and Interface Science ，2019，552 ：153-165.［ 8 ］戴大临, 文艺. 南方大口鲇(Silurus meridioma1 is)鳃小片细微结构的冷冻扫描电镜观察[J ]. 电子显微学报，2006，25（S1）：261-262.［ 9 ］肖媛, 李婷婷, 周芳, 左艳霞. 冷冻扫描电镜及其在生命科学研究中的应用[J ]. 电子显微学报，2015，34（5）：447-451. [XIAO Yuan, LI Ting-ting, ZHOU Fang, ZUO Yan-xia. Cryo-scanning electron micro-scopy and its application in the research of life sci-ence [J ]. Journal of Chinese Electron Microscopy So-ciety ，2015，34 （5）：447-451.]［ 10 ］朱善华. 水的玻璃态[J ]. 科学，2002，54（1）：55.［ 11 ］袁莉民, 周天阳. 用于扫描电镜观察的水凝胶样品薄层制备技术[J ]. 电子显微学报，2022，41（3）：329-334. [YUAN Li-min, ZHOU Tian-yang. Preparation of thin-layer hydrogel samples for scanning electron microscopy [J ]. Journal of Chinese Electron Micro-scopy Society ，2022，41 （3）：329-334.]［ 12 ］Tay J Y L, Zotz G, Gorb S N, Einzmann H J R. Get-ting a grip on the adhesion mechanism of epiphytic orchids-evidence from histology and cryo-scanning electron microscopy [J ]. Frontiers in Forests and Glob-al Change ，2021，4 ：764357.［ 13 ］Gillis J D, Holt W V, Penfold L M, Woad K J, Gra-ham J K, Watts J A, Gardner D S, Yon L. Cryo-scan-ning electron microscopy demonstrates that ice mor-phology is not associated with the post-thaw survival of domestic boar (Sus domesticus) spermatozoa: A comparison of directional and conventional freezing methods [J ]. Cryobiology ，2022，108 ：10-18.［ 14 ］Fujikawa S, Endoh K. Cryo-scanning electron micro-scopy to study the freezing behavior of plant tissues [M ]. New York, NY: Springer US, 2020:99-117.［ 15 ］438分析测试技术与仪器第 28 卷。
电镜随谈之三：能谱(EDS)
还在为没有好的仪器设备发愁？小木虫最新版块！仪器设备互助上线啦 欢迎虫友互帮互助做科研开学啦！导师／师哥／师姐都在，你呢？欢迎邀请新生加入小木虫论坛 邀请成功一个，得50个金币哦小木虫 | 木虫之家 | 论文范文 | 期刊杂志 | 考研考博题库 | SCI期刊点评(New!) | 学术网址征集SCI投稿大牛点评期刊小木虫SCI点评系统上线 参与点评得金币页码，1/4(W)每天都访问送10个金币连续7天访问论坛并领取红包 将获得10个金币的大礼包设为首页 | 加入收藏我的短消息 我的话题 我的记事本 金币中心 个人设置 站内搜索 统计 邀请好友 帮助 退出 tt.yao (虫号: 606992 , 金币: 506 , 银虫 升级) 科研经验 基金申请 学术会议 教师之家 博后专家教授 公务员 | 硕博家园 考研 考博 找工作 外语 English Cafe | 文献求助 外文书籍 专利 标准 检索知识 代理 论文投稿综合 论文道贺祈福 翻译互助 | 公派出国 留学DIY 海外博后 留学生活 签证指南 出国考试 | 课件资源 课件求助 | SCI期刊点评 帖子排行 考研考博题库 有机综合 有机资源 催化 环境 化工 精细化工 分析 电化学 高分子 化学综合 | 科研工具 工具求助 计算基础 量子化学 分子模拟 第一性原理 仿真模拟 程序语言 金属 生物材料 晶体 无机非金属 微米纳米 物理 | 生物科学 药学 新药研发 医学 | 地学 食品 数学 理工农林 信息科学 | 人文学科 理财 经济 管理 | 手机版 休闲灌水 有奖问答 虫友互识 原创文学 影音娱乐 健康生活 | 电脑资源 精粹资源 | 新手上路 论坛事务 版主交流(红包) | 木虫之家 每日新闻 捐助 今日红包 科研广而告之: SW论文三审翻译 SW英文论文修改 SW留学文书润色 | ES英文论文修改 | 有时间去旅游吧 | 仪器设备互助上线啦小木虫论坛 » 微米&纳米 » 查看主题内容赞助商链接161 1/17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 下一页 末页全部主题 作者:合成表征temedx 专家顾问 (著名写手)贵宾: 0.85 金币: 4062.9 帖子: 1523 在线: 26.7小时 虫号: 297942 注册: 2006-11-18 状态: 离线 性别: GG 专业: 化学性能应用 学术讨论 前沿热点 资源交流 微纳加工 微纳器件 综合其他 VIP资源 论文投稿 专题橱窗 版内事务添加到IE收藏夹 | 只看楼主 | 可打印版本 | 推荐给朋友 | 收藏主题 |【奖励】 本帖被会员评价109次，作者temedx增加金币 100 个【专家一席谈】电镜随谈之三：能谱（EDS）的一些问题 ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ... caosw2001(金币+10,VIP+0):3x again! popsheng(金币+20,VIP+0):呵呵，TEM水很深啊，虽然总结的都是些基本问题，不过系统整理出来也显专业风范 popsheng(金币+0,VIP+0.1):VIP奖励关于能谱的一些问题无论扫描电镜还是透射电镜，现在购置的时候能谱几乎成了标配，因为价格相对电镜来说只有五分之一甚至六分之一，而且 分析速度快，可以在线分析微区内样品组分，给出半定量或者定量结果，如果透射电镜有扫描附件，也和扫描电镜一样能给 出漂亮的元素分布map，这对于实验结果来说，是一个很有益而且很直观的支持。
电镜室装修心得
电镜室装修心得电镜室作为实验室中重要的组成部分，其装修设计直接影响到实验的准确性和实验室的整体环境。
在装修电镜室的过程中，我积累了一些心得体会，分享如下：1.合理规划空间：电镜室需要放置大型的电子显微镜和其他相关设备，因此，合理规划空间至关重要。
在设计之初，就要明确设备的尺寸和所需的工作空间，确保空间布局既方便操作又不影响设备的正常运行。
2.注重采光与通风：电镜室需要良好的自然光线以保证基本的照明，同时通风也要良好，以维持室内空气的新鲜。
为此，可以考虑设置大面积的窗户和通风设备。
3.材料选择：电镜室的装修材料应选择耐腐蚀、易清洁的材质，以便于维护和管理。
同时，为了确保设备的稳定运行，应避免使用可能产生电磁干扰的材料。
4.防尘与噪音控制：电镜室的电子设备和镜头对尘埃非常敏感，因此防尘工作必须到位。
可以考虑设置空气过滤系统和专门的尘埃防护罩。
同时，为了创造一个安静的工作环境，噪音控制也非常重要。
5.安全考虑：考虑到电镜室可能涉及高压和危险化学品，因此，安全设施如灭火器、紧急喷淋装置等应一应俱全。
同时，电源插座和电线布局也需符合安全规范。
6.人性化设计：为了提高工作效率和舒适度，电镜室的布局和家具设计应充分考虑人性化因素。
例如，合理设置工作台、储物柜和休息区等。
7.遵循规定与标准：装修过程中应遵循国家和实验室的相关规定与标准，确保装修工程的安全合法性。
8.通过这次电镜室的装修，我深刻体会到了细节决定成败的道理。
从规划到施工，每一个环节都需要精心策划和严格执行。
同时，与团队成员的沟通协作也是成功的关键。
未来，我将继续总结经验教训，努力提升自己的专业素养和实践能力。
科研仪器设备管理方法与经验探讨
技术 研究 中心 ，００年 ５月 申报 成功 土 肥 资 源高 效 ２１
利用 国家工程 实验 室 三 个 国家级 科 研 平 台 ， 助 于 借 国家 级科 研 平 台 ， 现 了校 内仪 器设 备 的共 享 、 实 联
据 ２ １ 山东农 业大 学期 中教 学 、 研检 查 中 ０ ０年 科
中 ， 器设 备管 理人 员进 行巡 回检 查 ， 仪 发现 问题及 时 解决 。 由于对 仪器设 备 实行 预约 登记 和使用 登记 管
操作 水平 不高 ， 维修 和保 养跟不 上去 ， 仪器 设备 的功
能开 发相对 薄弱 。 １２ 使用 方 向单 一 、 ． 仪器 设 备 等 资 源 共 享低 ， 台 单
！！ ＝
Ｃ ２一ｌ ５ ／ Ｎ１ ３ ２ Ｎ
实
验
室
科
学
第１ ４卷
第 １期
２１ ０ １年 ２月
Ｆｂ ２ ｌ ｅ ． ０１
Ｌ ＡＢ ＯＲＡ ＴＯＲＹ Ｓ Ｉ Ｃ ＥＮＣ Ｅ
Ｖｏ．１ Ｎｏ １ ４ ．１
科 研 仪 器设 备管 理 方 法 与 经验 探 讨
毕建杰 ，王淑静 ，叶 宝兴 ，祝 丽香 ，王建华
Ｍａ ａ ｅ ｎ ｔ ｏ ｓ ａ ｄ ｅ ｐ ｒｅ ｃ ｆｒ ｓ ａ ｃ ｑ ｉ ｍｅ ｔ ｎ ｇ ｍｅ ｔｍｅ ｈ ｄ ｎ ｘ ｅ ｉｎ ｅ ｏ ｅ ｅ ｒ ｈ ｅ ｕ ｐ ｎ
Ｂ ｉ —ｉ ，ＷＡ Ｇ Ｓ ｕ ｊ ｇ ， Ｅ Ｂ ｏ ｘ ｇ ， Ｈ ｉｘａ ｇ ，ＷＡ Ｇ Ｊ ｎ ｈ ａ Ｉ ａ ｊ Ｊｎ ｅ Ｎ ｈ —ｉ Ｙ ａ — ｉ Ｚ Ｕ Ｌ— ｉｎ ｎ ｎ Ｎ ｉ — ｕ ａ
１ １ 科研 项 目多 、 的作 物生 物 学 国家 重 点 实 验室 于 ２ ０ ０ ７年
拍摄高质量透射电镜照片的经验
２ 电镜 操 作
照相前 ， 要调 好 电压 对 中 、 电流对 中 、 亮度 对 中 ， 消 除像散 ， 使物 镜光 阑孔 与 中心 透射 斑点 同心 ５ 的 用 倍 双 目镜协助 ， 图像 聚焦 。 选择亮 度 均匀 的区域作 为 对 要 拍摄 对象 ， 可 能使 图像充满 拍摄 区域 ， 主要 的观察 尽 把 对象 放在荧 光屏 中心 Ｆ ， ＨＡＩ （ Ｕ１Ｉ ｜ 全张 半 张 ） 换 Ｆ 转 旋钮 要旋转 到位 ， 如果 不到位 ， 出现 图像分 割不 均现 会 象， 底片无 法正 常使用 。
去 空 白处 对 亮 度 的 贡 献
Hale Waihona Puke 粉末 样 品先用 低档加 速 电压 ， 烘烤一 下支持 膜 ， 待 支 持膜稳 定 以后 ， 提高加 速 电压 。 再 只要亮 度能 满 足要 求， 就应尽 量 采用低 的加 速电 压 照相时 ， 如果 发 现支 持膜不稳 定 ， 不要 急于拍 照 ． 以免 照 出的像 不 清晰 。因 为电镜像 放 大倍数 达数 万倍 ， 尽管 试样有 很小 的漂 移 ， 在 照片 中误差 也 会很 ｌ 丈 （ 下转第 ６ ０页）
是 选 择 合 适 的 电 解 液 ， 满 足 电 解 液 所 需 的 温 度 要 并 需
明场 ２ ５ ５ ； ． ～ ｓ 暗场 ５ ｓ 衍 射花样 １ ～ ３ｓ 拍 摄 明 ～８ ； ０ ６ 场时， 如果 荧光 屏 中有空 白（ 图像 没 有充满 荧光屏 ） ， 时
曝光时 间要 按 曝光 表 的 指示 值增 加 一 挡 ， 实际 上 是 减
绍 拍 摄 出一 张 高质 量 的 连 射 电镜 照 片 的 经 验
＆ 关 键 词 ： 射 电 子 显 微 镜 ； 射 电子 显 微 镜 照 片 ； 室 操 作 逢 透 暗
浅谈扫描电镜实验教学的体会
浅谈扫描电镜实验教学的体会扫描电镜是一种能够以高分辨率观察微观结构的工具，它的应用广泛，不仅在科学研究领域有重要作用，也在教学实验中扮演着重要的角色。
近年来，随着科技的发展和教学手段的更新，扫描电镜实验教学也得到了很大的发展，许多学校和实验室都开始引入扫描电镜来进行实验教学。
在我参与的扫描电镜实验教学中，积累了一些体会和经验，下面将就此进行一番浅谈。
扫描电镜实验教学需要充分准备。
因为扫描电镜是一种高科技仪器，操作相对复杂，所以在进行实验教学前，教师需要对仪器的操作原理、操作方法、维护保养等进行充分的了解和准备。
还需要针对不同的实验内容和教学目标来设计实验方案和教学材料，确保实验的顺利进行和教学效果的达到。
还需要对学生进行相关的知识培训和安全教育，使他们能够正确地操作扫描电镜，并且保证实验过程中的安全。
扫描电镜实验教学需要注意引导学生的主动参与。
在实验教学过程中，教师需要引导学生主动参与实验，让他们亲自操作仪器，观察样品，并且进行相关的数据记录和分析。
通过这样的方式，可以增强学生的实践能力和动手能力，提高他们对实验内容的理解和把握。
也可以激发学生的学习兴趣，增强他们的学习动力和积极性。
在实验教学中，教师还可以设计一些互动环节和小组讨论，让学生之间进行交流和合作，共同探讨实验中的问题，从而促进他们的思维发展和能力培养。
扫描电镜实验教学需要注重实验数据的分析和实验结果的讨论。
在实验结束后，教师可以组织学生对实验数据进行整理和分析，并且对实验结果进行讨论和总结。
通过这样的方式，可以帮助学生加深对实验内容的理解，同时也可以培养他们的数据分析能力和科学思维能力。
对于一些比较复杂或者有争议性的实验结果，教师可以引导学生展开进一步的探讨和研究，激发他们的独立思考和创新能力。
扫描电镜实验教学需要注意与其他学科知识的融合。
因为扫描电镜涉及的实验内容较多，可以与生物学、化学、材料科学等多个学科进行结合。
在实验教学过程中，教师可以引导学生深入思考扫描电镜在不同学科领域的应用和意义，从而拓宽他们的知识面和视野。
扫描电镜-能谱仪实验技术在《材料分析方法》课程教学中的应用
扫描电镜-能谱仪实验技术在《材料分析方法》课程教学中的应用一、引言材料分析方法是材料科学与工程学科中的重要课程之一，通过该课程的教学可以使学生掌握材料分析的基本原理和方法，提高他们的实验操作能力和分析问题的能力。
在材料分析方法课程中，扫描电镜-能谱仪实验技术是一项重要的实验内容，它可以帮助学生了解材料的微观形貌和化学成分，为他们深入理解材料的结构和性能奠定基础。
二、扫描电镜-能谱仪实验技术概述扫描电镜-能谱仪实验技术是一种利用电子束与物质相互作用的技术，通过扫描电镜对材料的形貌进行观察和分析，并通过能谱仪对材料的化学成分进行分析。
其主要特点包括分辨率高、成像清晰、分析快速等优点。
通过该技术，可以观察到材料的表面形貌和结构，同时还可以了解材料的元素组成和化学成分，对于材料的分析和研究具有非常重要的意义。
在《材料分析方法》课程中，扫描电镜-能谱仪实验技术通常作为重要的实验内容进行教学。
通过该实验，学生可以学习到扫描电镜的工作原理和操作方法，了解能谱仪的原理和使用技巧，并通过实际操作获得扫描电镜-能谱仪的应用经验。
1. 学生通过实际操作掌握扫描电镜的使用方法在课程中，老师可以通过实验教学的方式，让学生亲自操作扫描电镜，掌握其使用方法和操作技巧。
学生可以通过观察样品的不同部位，了解到材料的微观形貌和表面结构，对于材料的特性和性能有更加直观的认识。
2. 学生通过实验操作了解能谱仪的原理和分析方法在实验过程中，学生还可以学习到能谱仪的工作原理和分析方法，了解能谱仪是如何对样品进行化学成分分析的。
通过操作能谱仪，学生可以获取到样品的化学成分信息，从而对材料的成分和结构有深入的了解。
3. 学生通过实验获得扫描电镜-能谱仪的应用经验通过实验操作，学生可以获得扫描电镜-能谱仪的应用经验，掌握这一重要实验技术。
这对于提高学生的实验操作能力、培养他们的分析问题能力和创新能力具有重要意义。
1. 提高学生的实验操作能力通过观察样品的形貌和化学成分，学生可以对材料的特性和性能进行分析，提高了他们的分析问题能力。
电镜专业技术人员面试问题
电镜专业技术人员面试问题
电镜专业技术人员在医学、生物、材料等领域有着广泛的应用。
在面试过程中，面试官通常会对应聘者的专业知识和操作技能进行考察。
下面是一些常见的电镜专业技术人员面试问题：
1. 请介绍一下您对电镜的了解。
2. 您使用过哪些类型的电镜？有没有使用过扫描电子显微镜（SEM）或透射电子显微镜（TEM）？
3. 您对电子束制备样品的过程有多少了解？
4. 您会如何处理电镜样品？
5. 您是否掌握了数据分析和图像处理的相关技能？
6. 您有没有操作过自动化电镜系统？
7. 您是否掌握了电镜样品的制备、测量和分析的相关技能？
8. 您是否掌握了电镜的维护和维修的相关知识？
9. 您是否有组织过电镜实验的经验？
10. 您是否有在科学期刊上发表过电镜相关的论文？
在回答这些问题时，应该尽量详细地讲述自己的实际经验和技能。
同时，应注意，在回答问题时要保持谦虚，如果不确定答案可以简要说明自己的想法，并表示愿意努力学习。
同时，也可以谈谈对电镜的热爱以及对未来工作的期望，以展示自己的积极性和专业精神。
在回答问题时，还可以尝试谈论自己的发明或创新，以突出自己的创造力和与众不同的思考方式。
同时，也可以举例说明自己在实验中遇到的困难，以及如何克服这些困难的经历。
这样既可以展示自己的实际能力，又可以给人留下良好的印象。
(本文部分内容搜集自网络，仅供参考)。
免疫组化经验总结
免疫组化经验总结做过病理实验的人都知道，实验看似容易，但真想把它做好，还是需要花上很长一段时间去积累和摸索经验。
我从事病理实验已有6年多了，在这段时间里，我做过许许多多病理相关实验，刚开始啥也不懂，一味按照网上操作流程来做，但做的结果往往并不是十分理想，最终结果未能达到预期的效果。
经过一段时间的浏览和学习，从一些在论坛内学习、请教，并结合实践操作，我经历了初级——查找资料和摸索方法；中级——问题求助和不断总结；高级——难题解答和经验分享这三个阶段，也学到了不少知识，积累了很多宝贵经验，与大家一起分享下。
以免疫组化实验为例来详述。
从我接触的很多本科生和研究生中发现，他们的确是免疫组化“新手”，他们只注重如何做和最终的结果，但对为什么这样做不太感兴趣。
他们常按照网上所说的方法，摸索好的抗体浓度和条件后做出很漂亮的染色结果后，他们就认为自己已经掌握了免疫组化方法了，结果不求上进，更换一种新抗体后或实验出现异常结果后就很难做出来了。
当然，免疫组化对于我来说，做过很多，但也不能说什么都会，只不过我做的多了，失败多了和思考多了，可能比新手多了解一些其中的诀窍，拿来与大家进行分享。
此外，我个人经验不可能面面俱到，还需要更多有经验的高手一起分享、纠正和补充。
在这里，我需要感谢中华病理网、丁香通、小木虫论坛给我很大的帮助，还有上海舜田生物技术人员花老师给我实验很多指导和帮助，让我受益匪浅。
免疫组化个人感悟：1、其实免疫组化，我个人感觉方法和操作都不是很难，关键是结果出现异常时该如何去解决？我认为首先需要掌握好免疫组化实验的原理，知道每一个操作步骤的目的，这样你才能大胆地去改革和纠正一些错误的步骤，如抗体孵育条件主要是抗体浓度、温度、时间，这三者一般是相互成反比的（相对），其中浓度是最重要的先决条件，温度决定反应的速度、时间决定反应的量。
比如温度有4℃、室温、37℃。
我推荐4℃最佳，反应最温和，背景较浅；而37℃反应速度较快，时间较短；室温我不太提倡，除非你每次都把环境温度控制在一定的范围，否则，尽量选择前两者。
出科的自我鉴定7篇
出科的自我鉴定7篇（经典版）编制人：__________________审核人：__________________审批人：__________________编制单位：__________________编制时间：____年____月____日序言下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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【VIP专享】做了几年的电镜经验
做了几年的电镜，最近总结了一些经验和大家分享一下，希望对新人有用，也希望大家指导，呵呵1、做HRTEM之前，样品一般都需先做XRD，并用Jade找出相应的PDF卡片。
去测中做TEM的时候，要带着该卡片，主要用于测的过程中可以直接对照d值，以便确定物相及带轴等。
同时要带上实验记录本，以便记下拍摄过程中碰到的问题，如果有相关的文献也最好能带上，作为参考。
2、拍摄HRTEM照片的时候，同时需要拍摄低倍的TEM照片，并在低倍的TEM照片上标明HRTEM的位置。
（如下图）为了便于自己回来进行处理，所有EM的原始数据，即*.dm3格式的文件都要拷回来，特别是HRTEM。
关于图标的说明：上面左图中，圆圈是SAED的位置（如果是2007年4月3日做的，那么ED12就会对应底片编号：0740312，年月日编号，其中月用1-9、0、A、B来表示1-12月。
我们学校是这样定义的，不知其他地方怎么样），方框则是HRTEM的位置（如果开始你的样品名输入的时候是CTO，则他们在对这个样品拍照的时候，所存的照片文件名，一般都会自动按次序，如CTO-01、CTO-02….，所以，这里方框编号17，就指的是CTO-17.dm3文件，即右图）。
为了避免数据混乱，如果有做SAED或HRTEM的，一定要在低倍的TEM上标明清楚。
一般先拍HRTEM，再拍低倍的TEM，因为在拍HRTEM之前需要转带轴，在转的过程中，样品低倍的TEM会发生相应的变化。
但是，如果样品不是很稳定，不耐电子束的辐照，拍HRTEM需要转动的角度不是很大，也可以先拍低倍的TEM。
透射电子显微镜实验课讲义第一部分：仪器介绍透射电子显微镜用高能电子束作为照明源。
利用从样品下表面透出的电子束来成像。
原理上及结构上与透射式光学显微镜一样。
世界上第一台透射电子显微镜是德国人鲁斯卡1936年发明的。
他与发明扫描隧道显微镜的一起获得1982 年的诺贝尔物理奖。
目前透射电子显微镜的生产厂家有日本的日立（HITACHI）、日本电子（JEOL）、美国的（FEI）、德国的（LEO）。
扫描电镜制样经验分享---生物样品
四 氧 化 锇 是 一 种 很 强 的 氧 化 剂 ， 一 般 配 制 浓 度 为 0.5-2.0% ， 常 用 浓 度 为 0.5-1.0% （PH7.2-7.4）。它具有很强的毒性，四氧化锇气体对呼吸系统有刺激，对眼睛有严重的破 坏作用，因此在使用时应特别小心，尽可能在通风橱中进行，并且严格控制用量。但它作 为固定剂拥有一些独特的优点：
燥方法
品有可能被金属锈、
油及其他杂质 ( 混入
液态 CO2 中) 污染; 干 燥后的样品很脆易碎
冷冻干燥 法
利用低温使样 品冰冻硬化， 然后在高真空 中通过升华去
除水分
所有生物样品
避免了气相和液相之 需要专门的冷冻设备
间表面张力对样品的 或专用试剂; 可能有
损害; 可干燥较大量
冷冻损伤
的样品
真空干燥 法
1. 四氧化锇可以与脂类、糖类和蛋白质反应。其对脂类的固定作用可以补充醛类固定剂对 脂类固定不足的缺点。
2. 用四氧化锇固定材料时，被还原的锇能沉积在样品表面上，能增加膜的反差，起到"电 子染色"作用，往往细胞膜结构比较清晰。
因此，含脂类物质比较少的生物样品（如植物类），采用戊二醛固定，将采取的样品泡入 2.5%的戊二醛溶液中浸泡超过 4 h 即可。对于含脂类物质较多的样品（如细胞膜），我们 采用戊二醛和四氧化锇双重固定，先在 2.5%的戊二醛溶液中浸泡 3 h 以上，再浸泡在 1% 的四氧化锇 1h。
下面，我们就对目前被公认干燥效果最好的临界点干燥法进行详细介绍。
表 1： 五种常用生物样品干燥方法比较Biblioteka 干燥方法 基本原理适用生物样品
优点
缺点
临界点干 利用了物质的 燥法 临界状态特性
所有生物样品
扫描电镜的分辨能力适用表征尺度范围
扫描电镜的分辨能力适用表征尺度范围扫描电子显微镜'>显微镜分析系统在工业材料研发制造和应用过程中必不可少，越来越多的事实证明，制约最终产品质量的关键因素往往是材料性能相对落后。
通过现代科学仪器进行材料的分析和表征，控制和提高基础材料的可靠性能以满足工业需要，得到了中国乃至世界业内广泛的共识。
世友创业扫描电镜分析系统项目，由具有十几年的扫描电镜业内经验专业人士承担，为用户提供一流的产品和技术服务，并且为普及扫描电镜知识经验而努力。
在一般人的印象里，都可以看到纳米尺度，可以表征纳米材料。
但在实践应用过程中，电子显微镜分成几类，分辨表征能力有较大差异。
为了广大用户准确了解和使用，特作如下总结。
电子显微镜类别一类透射电子显微镜，这里不作说明。
一类扫描电子显微镜，扫描电子显微镜主要演化分类：场发射大型扫描电子显微镜------------极限分辨率1-亚纳米级六硼化镧电子枪大型扫描电镜--------极限分辨率2nm钨灯丝大型扫描电子显微镜--------极限分辨率3nm小型桌面台式扫描电镜(目前商品化主要是钨灯丝)---极限分辨率20nm假使只关心样品形貌，不考虑其他探测器的性能发挥，各类型扫描电镜在良好状态条件下，分辨能力适用范围。
1、扫描电镜的极限适用表征形貌尺度--结构特征放大到3-6mm ，能看出基本形状和结构特征。
仪器观测条件需要发挥到相对极限。
操作难度高，需要丰富的操作经验。
场发射大型扫描电镜有效表征：20nm-40nm 对应倍数15万-30万倍六硼化镧大型扫描电镜有效表征： 40nm-80nm 对应7.5万-15万倍钨灯丝大型扫描电镜有效表征： 60nm-120nm 对应5万-10万倍小型桌面台式扫描电镜有效表征：400nm-800nm 对应 7500x-15000x2、扫描电镜中等潜能适用表征形貌尺度--结构特征放大到3-6mm，能看出基本形状和结构特征。
仪器观测条件设置在中等水平，操作难度适中，一般经过系统培训可以实现。
扫描电镜低电压操作的经验体会
扫描电镜低电压操作的经验体会
扫描电镜（ScanningElectronMicroscope，简称 SEM）是一种高精度的显微成像技术，可以用来观察极小的结构，使用它可以获得更多的科学信息。
使用扫描电镜要注意操作安全，这也是一个重要的知识点，特别是低电压操作。
低电压操作是指在使用扫描电镜时，电压值必须保持在安全的范围。
由于低电压操作直接影响样品损坏，因此只有在操作正确时，才能保证拍摄出来的图片质量高。
首先，在操作扫描电镜前，一定要确保室内温度、湿度、电压值等所有参数都在安全的范围内。
另外，当操作时，一定要注意控制好扫描电镜的电压值，避免过高或过低，以免后期影响到样品的质量。
此外，在低电压操作时，为了保证拍摄出来的图片尽可能清晰，需要使用多个模式，即：聚焦，测量，拉力等模式，以及增强成像等都可以增强图像的清晰度和色彩，从而获得优质的图片。
此外，在操作扫描电镜时，一定要注意防护，不要接触易燃物品，并且要每一次操作前检查仪器的状态，确保它的安全性和可靠性。
总而言之，低电压操作是在使用扫描电镜时非常重要的一步，一定要注意安全和操作正确，确保拍摄出来的图片质量高。
只有在操作正确的前提下，我们才能从中获得有价值的信息。
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做了几年的电镜，最近总结了一些经验和大家分享一下，希望对新人有用，也希望大家指导，呵呵1、做HRTEM之前，样品一般都需先做XRD，并用Jade找出相应的PDF卡片。
去测中做TEM的时候，要带着该卡片，主要用于测的过程中可以直接对照d值，以便确定物相及带轴等。
同时要带上实验记录本，以便记下拍摄过程中碰到的问题，如果有相关的文献也最好能带上，作为参考。
2、拍摄HRTEM照片的时候，同时需要拍摄低倍的TEM照片，并在低倍的TEM照片上标明HRTEM的位置。
（如下图）为了便于自己回来进行处理，所有EM的原始数据，即*.dm3格式的文件都要拷回来，特别是HRTEM。
关于图标的说明：上面左图中，圆圈是SAED的位置（如果是2007年4月3日做的，那么ED12就会对应底片编号：0740312，年月日编号，其中月用1-9、0、A、B来表示1-12月。
我们学校是这样定义的，不知其他地方怎么样），方框则是HRTEM的位置（如果开始你的样品名输入的时候是CTO，则他们在对这个样品拍照的时候，所存的照片文件名，一般都会自动按次序，如CTO-01、CTO-02….，所以，这里方框编号17，就指的是CTO-17.dm3文件，即右图）。
为了避免数据混乱，如果有做SAED或HRTEM的，一定要在低倍的TEM 上标明清楚。
一般先拍HRTEM，再拍低倍的TEM，因为在拍HRTEM之前需要转带轴，在转的过程中，样品低倍的TEM会发生相应的变化。
但是，如果样品不是很稳定，不耐电子束的辐照，拍HRTEM需要转动的角度不是很大，也可以先拍低倍的TEM。
透射电子显微镜实验课讲义第一部分：仪器介绍透射电子显微镜用高能电子束作为照明源。
利用从样品下表面透出的电子束来成像。
原理上及结构上与透射式光学显微镜一样。
世界上第一台透射电子显微镜是德国人鲁斯卡1936年发明的。
他与发明扫描隧道显微镜的一起获得1982 年的诺贝尔物理奖。
目前透射电子显微镜的生产厂家有日本的日立（HITACHI）、日本电子（JEOL）、美国的（FEI）、德国的（LEO）。
我校的这台是1985年购买的。
型号是日本电子的JEM—2000EX。
透射电子显微镜主要由电子光学系统、真空系统、电源系统（包括高压系统）、附件系统组成。
电子光学系统一般就是指镜筒。
从上到下依次为电子枪、聚光镜、样品台、物镜、中间镜、投影镜、荧光屏、照相室。
电子枪的功能是产生高速电子。
它由灯丝（阴极，处于负高压，即加速电压）、栅极（电位比灯丝还要负几百到几千伏，数值可调）、阳极（处于0电位）组成。
根据加速电压的数值，透射电子显微镜一般分为低压电镜（小于120KV）、中压电镜（200~300KV）、高压电镜（大于400KV）。
低压电镜主要用在医学和生物学方面。
后面的两种主要用在材料科学上。
电子枪发出的电子束的亮度和尺寸与灯丝的类型有关。
从钨灯丝到六硼化镧单晶灯丝再到场发射电子枪，电子束的质量越来越好。
但价格及使用成本也同样越来越高。
由电子枪发出的电子束接着进入聚光镜系统。
它包括两个聚光镜和一个活动聚光镜光阑。
它们的作用是调节即将照到样品上的电子束的尺寸和亮度。
聚光镜是电磁透镜。
简单地讲，它的构造就是在铁筒外面绕线圈，线圈中有电流。
于是在筒内产生磁场。
该磁场能使电子偏转并聚焦，好比光学中的凸透镜。
光阑是在中央有小孔的钼片。
根据小孔的直径（100微米、200微米、400微米），从小到大依次称为小号、中号、大号。
现代高性能电镜可以将电子束斑最小聚到小于1nm。
电镜的样品台是用来放置装有样品的样品杆的。
为了不破坏镜筒的真空。
样品台都带有进样间。
它有内门和外门。
装样品杆时，内门关闭，外门开。
样品杆到一定位置时，关外门。
对样品间抽气。
待样品间抽完气，再开内门，把样品杆送到底。
电镜的样品台和样品杆是非常精密的装置。
因为电镜的放大倍数很高，外界对样品杆的微小干扰反映到荧光屏上就会很可观。
所以使用时要非常小心。
电镜的样品杆有单倾和双倾之分。
所谓单倾是指样品只能绕X 轴旋转，双倾则既可绕X轴又可绕Y轴旋转。
双倾杆是非常有用的东西，因为它可以让你从不同的方向观察样品。
另外还有加热台、低温台、拉伸台。
关于透射电子显微镜样品的制备见下一章。
现在假设样品已制备好并已装入电镜中。
从聚光镜来的电子束打到样品上。
与样品发生相互作用。
如果样品薄到一定程度，电子就可以透过样品。
透过去的电子分成两类。
一类是继续按照原来的方向前进，能量几乎没有改变。
我们称之为直进电子。
另一类是方向偏离原来的方向。
我们称之为散射电子。
这些电子中有的能量有比较大的改变。
我们称之为非弹性散射电子。
有的电子能量几乎没有改变。
我们称之为弹性散射电子。
所有这些电子通过物镜后在物镜的后焦面上会形成一种特殊的图象。
我们称之为夫琅禾费衍射花样。
如果被电子束照射的区域是非晶，则花样的特点是中央亮斑加从中央到外围越来越暗的光晕。
如果被电子束照射的区域是一块单晶，则花样的特点是中中央亮斑加周围其它离散分布、强弱不等的衍射斑。
如果被电子束照射的区域包括许多单晶，则花样的特点是中央亮斑加周围半径不等的一圈圈亮环。
至于为什么会形成这些花样。
可以从入射电子的散射来解释。
对非晶样品，从不同原子上散射出的同一方向上的电子波之间没有固定的相位差，且随着散射角的增大，散射的电子数量少，能量损失大，它们通过物镜后，直进的电子形成中央亮斑。
散射的电子形成周围的光晕。
越往外，光晕越来越弱。
对晶体样品，由于原子排列的规律性，不同原子的同一方向的散射波之间存在固定的相位差。
某些方向上相位差为2π的整数倍。
根据波的理论，在这些方向上的散射波会发生加强干涉。
我们称之为衍射。
同一方向的衍射波在物镜后焦面上形成一个亮斑。
我们称之为衍射斑。
直进的电子形成中央的透射斑。
整个后焦面的图象称之为电子衍射花样。
至于哪些方向上会出现衍射波，这可由布拉格公式决定。
详细内容见教材。
由于电子衍射花样与晶体的结构之间存在对应关系，如果我们记录下衍射花样，就可以对晶体结构进行分析。
这正是透射电子显微镜能够进行晶体结构分析的原因之一。
对多晶样品，每个单晶形成自己的衍射花样。
由于各个单晶的取向不同，每个单晶上相同指数的衍射波出现在以入射电子方向为中心线的圆锥上，它们通过物镜后形成衍射圈。
通过分析这些衍射圈的半径和亮度，也可以对多晶样品进行结构分析。
把透射电镜的工作方式切换到衍射模式，则在物镜后焦面上形成的花样在荧光屏上可以观察到，也可以用底片或相机记录下来。
仪器在物镜的后焦面位置有一个活动光阑。
我们称之为物镜光阑。
它是上面开有不同直径小孔的钼皮。
小孔的直径从小到大依次是50微米、100微米、200微米。
这个光阑的作用是控制到物镜像平面参与成像的电子束。
我们可以不插入物镜光阑，让所有电子束到像平面成像。
也可以插入光阑，让一束或多束电子到像平面成像。
这里就涉及到透射电子显微镜的两种成像模式。
只让一束电子通过物镜后焦面进而到像平面成像的模式称为衍射衬度（又称振幅衬度）模式。
让一束以上通过物镜后焦面进而到像平面成像的模式称为高分辨模式（也称相位模式）。
在衍射衬度模式中，如果让透射束到像平面成像，则称为明场像。
如果让衍射束到像平面成像，则称为暗场像。
对非晶样品，由于没有衍射束，所以一般也只有明场像之说。
对晶体样品，不但有暗场，根据光路的不同，还有中心暗场与弱束暗场之分。
中心暗场是让强衍射束通过。
弱束暗场是让弱衍射束通过。
通常观察样品的形貌、颗粒大小、组织结构、晶体缺陷等采用衍射衬度模式。
如果需要观察晶体的原子排列特征，如晶格像、原子结构像等，就要采用高分辨模式。
在衍射衬度模式中，像平面上图象的衬度来源于两个方面。
一是质量、厚度因素；一是衍射因素。
所谓质量因素，是指由于样品的不同部位的密度不同（其它都相同），同样强度的电子束打到该样品后，密度高的区域透过去的直进电子束弱于密度低的区域。
于是到达荧光屏上的效果是密度高的区域暗，密度低的区域亮。
这就形成了衬度。
所谓厚度因素，是指由于样品的不同部位的厚度不同（其它都相同），同样强度的电子束打到该样品后，厚区域透过去的直进电子束弱于薄的区域。
于是到达荧光屏上的效果是厚区暗，薄区亮。
这也形成了衬度。
所谓衍射因素，是指由于样品上不同的部位产生电子衍射的情况不同（其它都相同），同样强度的电子束打到该样品后，产生强衍射的区域透过去的直进电子束弱于产生弱衍射的区域。
于是到达荧光屏上时，产生强衍射的区域暗，弱衍射的区域亮（明场像）。
利用衍射因素，加上电子衍射花样，可以对材料中的许多内容进行研究，如晶界、位错、层错、孪晶、相界、反相畴界、析出相、取向关系等。
透射电子显微镜(TEM)是一种现代综合性大型分析仪器，在现代科学、技术的研究、开发工作中被广泛地使用。
顾名思义，所谓电子显微镜是以电子束为照明光源的显微镜。
由于电子束在外部磁场或电场的作用下可以发生弯曲，形成类似于可见光通过玻璃时的折射现象，所以我们就可以利用这一物理效应制造出电子束的“透镜”，从而开发出电子显微镜。
而作为透射电子显微镜(TEM)其特点在于我们是利用透过样品的电子束来成像，这一点有别于扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope，SEM)。
由于电子波的波长大大小于可见光的波长(100kV的电子波的波长为0．0037nm，而紫光的波长为400nm)，根据光学理论，我们可以预期电子显微镜的分辨本领应大大优于光学显微镜。
事实上，现代电子显微镜的分辨本领已经可达0．1nm。
TEM最常见的工作模式有两种，即成像模式和衍射模式(如图中所示)。
在成像模式下，我们可以得到样品的形貌、结构等信息，而在衍射模式下，我们可以对样品进行物相分析。
TEM 主要技术参数包括：a)加速电压。
常用TEM的加速电压在200-400仟伏范围内。
b)灯丝种类。
e)分辨率，又叫分辨本领。
分为点分辨率、线分辨率、信息分辨率等多个参数。
通常我们最为关心的是点分辨率。
d)放大倍率。
增加中间镜的数量，我们几乎可以无限制地增加电子显微镜的放大倍率。
但是，电子显微镜的分辨率是由其加速电压、物镜球差、色差系数等参量所决定的，无限制地增加放大倍率只能使我们得到一张模糊的图像。
同时，图像的亮度将随倍率的提高而降低，这对实验工作不利。
所以，现代TEM的最大放大倍率都只在一百万倍左右。
e)样品台倾转角。
倾转角的大小取决于样品台和物镜极靴种类。
增加一些现代知识：点分辨率对钨灯丝或LaB6灯丝最重要，但在场发射系统上，信息分辨率更为重要。
点分辨率代表了可直接解释的分辨率（详见我在论坛另外的帖子），如果你只关心样品中是否有缺陷，这就不显得那末重要了。
何况，场发射的信息分辨率远大于点分辨率，可以使用图像处理的办法提高点分辨率（北科大的讲习班玩儿的肯定包括这招，国内代表人物为物理所的李方华院士）。