树脂层析柱
层析柱说明书
锐意进取、和谐创新550层析柱说明书浙江中能轻工机械有限公司一产品介绍:层析过程是采用特殊的吸附剂，从植物提取液中选择性地吸附其中的有效部分，去除无效成分的一种分离纯化新工艺。
可以解决植提生产中所面临的剂量大、产品吸潮和重金属残留等实际问题。
经层析技术处理后所得到的精制物，可使有效成分高度富集，杂质少，提取得率仅为原生物的2～5%，而一般水煮法为30%左右，醇沉法为15%左右；可有效地去除吸潮成分，并增强产品的稳定性；可有效地去除重金属。
层析分离工艺所得提取物体积小，不吸潮，容易制成外型美观的各种剂型，尤其适用于颗粒剂、胶囊剂、片剂等的生产。
该技术将是对中药提取工艺影响最大、带动面最广的技术进步之一。
用于生物工程、制药工业、精细化工领域的分离纯化设计制造的工业制备，具有分辨高、选择性好、流动连续、效率高、处理稳定、样品可多可少、易于操作的特点，适用于含量少的复杂高分子物质的分离纯化，是中草药、化学合成药及生物活性物质有效成分分离提纯的核心设备。
二产品特点:①合理的高径比，精密的进出口流体分布装置，保证层析柱装填效果和填料再生效果，为高效分离提供了保障。
②产品采用不锈钢材料，并进行内外抛光，耐腐蚀、使用寿命长、硬度高、运输安全，质量有保障。
③本设备确保无污染、效率高、操作方便等。
三技术参数四操作说明层析操作流程一般为：预处理，逆流洗柱，水洗，吸附，解吸、再生等工艺。
1、预处理：在吸附树脂的生产过程中，一般均采用工业级原料，产品没有经过进一步纯化处理，因此树脂内部往往残留少量单体，致孔剂和其他有机杂质，所以在使用之前必须进行预处理。
吸附树脂预处理方法如下：（1）将准备装柱使用的新树脂，用2倍左右体积的甲醇或其他水溶性溶剂（如乙醇、丙酮）浸泡2小时，并不时搅动，使树脂充分溶胀。
（2）、将已充分溶胀的吸附树脂装柱，以每小时3至4倍床体积的流速，将5至8倍的甲醇或其他水溶性的溶剂（如乙醇、丙酮）通过树脂层，至流出液加水稀释不变混。
柱层析分离操作规程
柱层析分离操作规程柱层析分离（Column Chromatographic Separation）是一种基于差异吸附和分配的分离技术，广泛应用于化学、生物、制药等领域。
柱层析分离操作规程的编制旨在确保操作过程的安全性、有效性和可重复性。
下面是柱层析分离操作规程的一般步骤：1. 实验准备：a. 确保实验室环境整洁、无杂物干扰。
检查仪器设备的运行状态，并进行必要的校准。
b. 准备所需试剂和溶剂，确保其纯度和质量符合要求。
准备充分的样品，并根据需要进行前处理。
c. 清洗柱子和配件，确保无残留样品。
2. 柱层析容器的装填：a. 选择合适的柱子和填料（如硅胶、活性炭、树脂等）。
b. 按照操作流程和填料的特性进行填料，确保填料均匀、紧密。
c. 配置层析缓冲液或溶剂，用于样品的吸附和洗脱。
3. 样品预处理：a. 根据需要，对样品进行预处理，如调整pH值、去除杂质等。
b. 将样品溶解于合适的溶剂中，确保样品溶解度适宜，并滤除悬浮物。
4. 柱层析操作：a. 将样品溶液小心地加入柱子顶部，避免溅出和溶剂浪费。
b. 控制流速和压力，使样品缓慢通过填料。
c. 观察样品的洗脱情况，根据需要适时收集洗脱液。
d. 若需要收集多个洗脱液组分，请采取适当的洗脱步骤和收集方法。
e. 监测洗脱液的浓度变化，根据需要调整洗脱缓冲液的浓度和pH值。
5. 柱层析后处理：a. 对收集的洗脱液进行检测分析，确定目标物质的纯度和得率。
b. 对柱层析装置进行清洗和维护，确保下次操作的质量和效果。
6. 结果分析和记录：a. 将实验结果记录在实验记录本中，包括所用试剂、溶剂、操作步骤、观察等数据。
b. 对实验结果进行分析，包括目标物质的纯度、得率、柱效等。
7. 安全注意事项：a. 柱层析操作涉及到有机溶剂和化学试剂，应穿戴个人防护用品，如手套、安全镜等。
b. 严格遵守实验室安全操作规范，确保实验过程安全无事故发生。
以上是柱层析分离操作规程的一般步骤，实际操作中，根据实验需求和柱层析装置的具体要求，可能会有所不同。
9种大孔树脂对萝卜硫素柱层析分离研究
收稿日期： 2014 － 07 － 21
修回日期： 2015 － 03 － 13
网络出版时间： 2016 － 01 － 15 15： 05
* 基金项目： 贵阳市乌当区科学技术计划项目 （ 2012051） 。
作者简介： 谢述琼 （ 1988—） ，女，四川德阳人，硕士，讲师，主要从事天然产物研究与新药开发研究。
将按照 1. 2. 1 节制得的萝卜硫素提取液的样 品分成 3 份，每份 89 mL，分 别 用 AB-8，SP825 和 SP850 大孔树脂柱层析，50% 乙醇 400 mL 洗脱 大孔树脂层析柱上的萝卜硫素，收集洗脱液，为 萝卜 硫 素 粗 品， 分 别 记 录 其 体 积， 并 采 用 用 HPLC 检测其中萝卜硫素的含量，计算其回收率。 将余下的萝卜硫素粗品在 35 ℃ 条件下真空浓缩至 浸膏，称取浸膏 5 mg 左右，并溶于 10 mL 甲醇， 用 HPLC 检测其中萝卜硫素的含量，按以下公式 进行计算：
预处理 AB-8 树脂装柱，将 100 g 西兰花种子 按照 1. 2. 1 节方法制得的萝卜硫素提取液上柱， 预吸附 1 h 后，依次用水 （ 3BV） ，10% ，30% ， 50% ，70% ，95% 乙醇溶液 （ 各 3BV） ，以 3 mL / min 流速洗脱，分别测不同乙醇浓度洗脱液中萝 卜硫素的含量。试验重复 5 次并计算其平均值。 1. 2. 4. 3 溶剂洗脱量的考察
D-101
南开大学化工厂
DM-130
安徽三星树脂科技有限公司
HPD417
河北沧州宝恩化工有限公司
HPD5000
西安蓝深公司
SP825
北京慧德易科技有限责任公司
SP850
北京慧德易科技有限责任公司
柱 层 析 简 介
常用的装柱方法有干装法和湿装法两种
（1）干装法 在柱内装入2/3 溶剂，在管口上放一漏斗，打开活塞让溶剂慢慢地 滴入锥形瓶中，接着把干吸附剂经漏斗以细流状倾泻到管柱内，同时 用套在玻璃棒（或铅笔等）上的橡皮塞轻轻敲击管柱，使吸附剂均匀 地向下沉降到底部。填充完毕后，用滴管吸取少量溶剂把粘附在管壁 上的吸附剂颗粒冲入柱内，继续敲击管子直到柱体不再下沉为止。柱 面上再加盖一薄层洁净细砂，把柱面上液层高度降0.1~1cm，再把收 集的溶剂反复循环通过柱体几次，便可得到沉降得较紧密的柱体。
固定相：固定相是层析的一个基质。它可以是固体物质（如 吸附剂，凝胶，离子交换剂等），也可以是液体物质（如固 定在硅胶或纤维素上的溶液），这些基质能与待分离的化合 物进行可逆的吸附，溶解，交换等作用。 流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一 个方向移动的液体、气体等，都称为流动相。柱层析中一般 称为洗脱剂，薄层层析时称为展层剂。 系数K： 是物质在两相中的浓度比。K值大，则在固定相中 吸附牢，K值小吸附差。各物质间的K值差别大，则易被分 离。不同类型层析的K值含义不同，可视为吸附平衡常数， 分配常数或离子交换常数等。
层析的基本原理层析的基本原理层析的基本概念层析的分类柱层析的基本操作原理几个基本概念基本操作步骤硅胶柱大孔吸附树脂柱聚酰胺柱柱层析常见问题与对策吸附剂的选择洗脱剂的选择操作方式层析的基本原理层析法chromatography又称色谱法是利用混合物中各组分物理化学性质的差异如吸附力分子形状及大小分子亲和力分配系数等使各组分在两相一相为固定的称为固定相
（2）湿装法
基本方法与干装法类似，所不同的是，装柱前吸附剂需要预先用 溶剂调成淤浆状，在倒入淤浆时，应尽可能连续均匀地一次完成。如 果柱子较大，应事先将吸附剂泡在一定量的溶剂中，并充分搅拌后过 夜（排除气泡），然后再装。其优点是一般柱子装的比较结实，没有 气泡。 无论是干装法，还是湿装法，装好的色谱柱应是充填均匀，松紧 适宜一致，没有气泡和裂缝，否则会造成洗脱剂流动不规则而形成 “沟流”，引起色谱带变形，影响分离效果。
大孔树脂 层析
大孔树脂使用方法发布者：郭玉亮发布时间：2011-1-4 12:05:24一大孔吸附树脂的预处理：大孔树脂在试验中使用时间较长，必须保证不受霉菌污染。
新购树脂一般用氯化钠及硫酸钠处理过，但树脂内部存在未聚合的单体残存的致孔剂、引发剂、分散剂等用前必须除掉。
预处理的流程简述如下：（1）以0.5BV的乙醇浸泡树脂24h （1BV为1个树脂床体积）（2）用2BV 的乙醇以2BV/h流速通过树脂柱，并浸泡4-5 h（3）再用水以同样流速洗净（4）用乙醇洗至流出液加水不呈白色混浊为止。
（5）用2BV的5%HCL 溶液以4-6 BV/h 的流速通过树脂层。
并浸泡树脂2-4h 。
而后用水以同样流速洗至出水pH 中性（6）用2BV 的2%NaOH 溶液以4-6 BV/h 的流速通过树脂层并浸泡树脂2-4h 而后用水以同样流速洗至出水pH 中性。
也可采用下列程序：在洁净的分离柱内，放入已去除外来杂质，体积恒定的大孔吸附树脂加入相当于树脂体积0.4-0.5倍的乙醇（或甲醇）浸泡24 h ，然后用树脂体积的2-3倍的乙醇（或甲醇）与水交替反复洗脱交替洗脱2-3次，至最终以水洗脱后，保持分离使用前的状态。
醇洗脱液加水不显混浊。
也可用电导率、荧光和紫外吸收等作为前处理的标准。
二大孔树脂的使用大孔树脂是大孔径的高分子分离材料，中草药有效成分在大孔树脂上的吸附是大孔树脂与有效成分形成以范德华力和氢键为主的一分子间作用力的结果。
大孔树脂依据其聚合物的单体组成不同，可以分成非极性和极性两大类。
非极性吸附树脂适合从极性溶液中（如水溶液）中吸附非极性物质。
中等极性树脂可从极性溶液中吸附非极性物质，还能从非极性溶液中吸附极性物质。
大孔树脂的孔径和比表面积是影响大孔树脂对物质的吸附的主要因素。
大孔树脂比表面积越大，单位质量大孔树脂吸附的作用面积越大，单位质量大孔树脂吸附有效成分就越大。
而大孔树脂的比表面积还包括内孔网的面积。
树脂孔径过小有效成分分子不能进入树脂内部，只能在树脂外表面吸附，相应的比表面积就比较小。
浅谈天然产物分离之柱层析
浅谈天然产物分离之柱层析胡利红彭宣嘉植物有效成分分离主要手段是柱色谱，其中包括：吸附性柱色谱；分配性柱色谱；离子交换柱色谱；凝胶过滤柱色谱；聚酰胺柱色谱以及大孔吸附树脂。
一、吸附性柱色谱我们常用的以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱，即是吸附性柱色谱。
本文重点介绍这种色谱方法。
一般而言，氧化铝用于分离脂溶性成分，在天然产物中包括生物碱，甾体和挥发油等。
而硅胶既可分离脂溶性成分，也可分离水溶性成分，根据需要可选用不同类型的硅胶，即正相硅胶或反相硅胶。
1、硅胶可以分为：正相色谱硅胶和键合相硅胶正相色谱硅胶是我们在实验室经常接触的，它的使用范围非常广泛，一般极性和非极性的化合物都可以用于分离。
硅胶的吸附能力取决于其结构中硅醇基的数目及含水量。
一般硅胶中的含水量若超出12%，则其吸附力极若，只可作为分配色谱的载体。
色谱硅胶应该是中性无色颗粒，由于在制备过程中接触强酸，常带有酸性，可用水洗至中性或用10%NaOH将其调至碱性，再在1100C下活化24小时用于来分离在酸性条件不稳定的化合物。
有时也可向其中掺入某种试剂，改良吸附性能，提高分离效率。
通常用硝酸银处理过的硅胶对不饱和烃类有很好的分离效果。
在键合相硅胶中，以C-18反相硅胶应用最为广泛，实验室中基本用的就是这种类型的反相材料，一般用于分离极性较大的化合物，可减少分离这类化合物时用正相硅胶吸附太大的缺点。
在利用键合相硅胶进行反相色谱时，常用甲醇-水，乙醇-水或乙腈-水为洗脱剂。
2、柱子可以分为：加压，常压，减压压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。
所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。
减压柱能够减少硅胶的使用量，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必须同时使用水泵抽气。
加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。
离子交换树脂层析分离混合氨基酸
实验二离子交换树脂层析分离混合氨基酸【实验目的】1. 了解离子交换树脂层析的工作原理及操作技术。
2. 学会用离子交换树脂层析法分离混合氨基酸。
【实验原理】离子交换树脂是一种合成的高聚物,不溶于水,能吸水膨胀。
高聚物分子由能电离的性基团及非极性的树脂组成。
极性基团上的离子能与溶液中的离子起交换作用,而非极性的树脂本身物性不变。
通常离子交换树脂按所带的基团分为强酸(=R=S03H)、弱(=COOH)、强碱(=N+=R:)和弱碱(=NH2=NHR=NR2)。
离子交换树脂分离小分子物质如氨基酸、腺苷、腺苷酸等是比较理想的。
但对生物大于物质如蛋白质是不适当的,因为它们不能扩散到树脂的链状结构中。
故如分离生物大子、可选用以多糖聚合物如纤维素、葡聚糖为载体的离子交换剂。
本实验用磺酸阳离子交换树脂分离酸性氨基酸(天冬氨酸)、中性氨基酸(丙氨酸)碱性氨基酸(赖氨酸)的混合液。
在特定的pH条件下,它们解离程度不同,通过改变脱液的pH 或离子强度可分别洗脱分离。
【实验材料】1.实验器材层析柱(1.6X20cm);恒流泵;梯度混合器;试管及试管架;紫外分光光度计、磺酸阳离子交换树脂(Dowex 50)2.实验试剂(1)2mol/L HCl(2)2mol/L NaOH(3)0.1mOl/L HCl(4)0.1mol/L NaOH(5)pH4.2的柠檬酸缓冲液:0.lmol/L柠檬酸54m1加0.1mol/L柠檬酸钠46ml(6)pH5的醋酸缓冲液:0.2mol/L NaAc 70ml加0.2mol/L HAc 30ml(7)0.2%中性茚三酮溶液:0.2g茚三酮加100ml丙酮(8)氨基酸混合液:丙氨酸、天冬氨酸、赖氨酸各10m1加0.1mol/L HCl 3m【实验方法】1. 树脂的处理100ml烧杯中置约10g树脂,加25ml 12mo1/L HCl搅拌2h,倾弃酸液,用蒸馏水充洗涤树脂至中性。
加25ml 12mol/L NaOH至上述树脂中搅拌2h,倾弃碱液,用蒸馏水洗涤至中性。
离子交换柱层析法分离氨基酸实验报告手写
离子交换柱层析法分离氨基酸实验报告手写1、树脂的处理干树脂经蒸馏水膨胀，倾去细小颗粒，然后用4倍体积的2mol/L HCI及2mol/LNaOH依次浸洗，每次浸2h，并分别用蒸馏水洗至中性。
再用1mol/LNaOH浸半小时（转型），用蒸馏水洗至中性。
2、装柱前的准备选择直径1cm长度15~20cm的层析柱，观察柱底端滤膜是否完好，分别用流水和蒸馏水冲洗干净。
将层析柱垂直装在铁架台上，柱进水口和出水口装上橡皮管，关闭柱底端出口，在柱内注入少许（约1cm高）的洗脱液，打开出水口，排净管内空气后关闭出水口。
3、装柱向盛有已处理好的树脂的烧杯中加适量洗脱液，用玻棒轻轻将树脂搅成悬浮状，然后沿柱内壁小心地加至适当高度。
倒入速度不要太快，以免产生泡沫和气泡。
待树脂在柱底部有明显沉积（约1cm高）后，缓慢打开出口（或用滴管吸出柱内上层过多的洗脱液），继续加入树脂直至树脂沉积达5cm 高。
装柱要求连续，均匀，无文格、无气泡，表面平整，液面不得低于树脂表面，否则要重新装柱。
4、平衡层析柱装好后，接上已调好流速的恒流泵，用洗脱液以0.4mL/min 的流速进行平衡，直到流出液的pH与洗脱液pH相同（约需2~3倍柱床体积）。
5、加样关闭恒流泵，关闭层析柱底端出口，移去层析柱上端出口塞，缓慢打开层析柱底端出口，小心使层析柱内液体流至层析柱床体表面时，立即关闭出口。
用移液枪吸取0.5mL样品液沿柱内壁缓慢加入柱中，以免冲坏树脂表面。
加样完毕后，慢慢打开层析柱底端出口，使液面降至与树脂表面相平处关闭。
吸取少量缓冲液冲洗柱内壁数次，加缓冲液至液层3~4cm左右，接上恒流泵。
加样时应注意避免冲破树脂表面，避免将样品全部加在某一局限部位。
6、洗脱以柠檬酸缓冲液洗脱，洗脱流速24mL/h，每管4mL10min一管（试管收集前提前编号）。
7、测定分别取各管洗脱液1mL各加入苗三酮显色剂1mL混合后沸水浴5min，冷却，各加0.1%CuSO4液3mL混匀，测定代存]。
羧甲基纤维素层析柱是什么离子原理
羧甲基纤维素层析柱的基本原理1. 羧甲基纤维素（CMC）的结构和性质羧甲基纤维素是一种阳离子交换树脂，其化学结构中含有大量的羧甲基（-CH2COOH）官能团。
这些羧甲基可以与离子化的物质发生静电作用，并起到选择性分离和富集的作用。
2. 羧甲基纤维素层析柱的构成和工作原理羧甲基纤维素层析柱由填充有羧甲基纤维素的柱体构成。
其工作原理可以分为两个步骤：吸附和洗脱。
2.1 吸附阶段在吸附阶段，样品中的离子化物质会与羧甲基发生静电作用，被吸附到柱体表面的羧甲基上。
这一过程称为吸附。
吸附的程度取决于离子的电荷、大小和特性。
在实际操作中，样品通过柱体时，离子化物质会首先与柱体内羧甲基反应，而非离子化物质则会通过柱体。
这样，离子化物质就被有效分离和富集在柱体中，而非离子化物质则以流动相的形式从柱体中洗去。
2.2 洗脱阶段在洗脱阶段，通过改变流动相的性质，可以实现离子化物质从羧甲基纤维素柱体上的洗脱。
洗脱液的性质可以通过改变pH值、离子浓度和离子种类等参数来实现。
洗脱的原理是改变样品与羧甲基之间的静电作用力。
当离子浓度高、pH值适宜时，离子化物质与羧甲基的静电作用力减弱，离子化物质就会从羧甲基纤维素柱体上洗脱下来。
3. 羧甲基纤维素层析柱的优点和应用羧甲基纤维素层析柱具有以下优点： - 高选择性：由于羧甲基与离子化物质的静电作用，羧甲基纤维素层析柱具有很强的选择性，可以实现对离子化物质的有效分离和富集。
- 适用范围广：羧甲基纤维素层析柱可以用于分离和富集各种离子化物质，包括有机离子、无机离子和金属离子等。
- 操作简便：羧甲基纤维素层析柱的操作相对简单，只需进行柱洗脱条件的调整即可实现对离子化物质的分离。
羧甲基纤维素层析柱主要应用于以下领域： - 环境监测：羧甲基纤维素层析柱可以用于分离和富集环境中的污染物，如重金属离子、有机污染物等。
- 制药工业：羧甲基纤维素层析柱可以用于制药工业中的活性物质的分离和纯化，可应用于新药研发、合成药物的分析等。
装柱知识
通常将树脂装于圆筒形的树脂柱中，溶液连续地通过。
树脂柱内装载树脂的体积称为床容积(bed volume)，简写为BV。
工业用的树脂柱的床容积通常由1～10m3，也有较小或较大的。
这是树脂柱的基本单位，它工作时的各种物料量都以BV为单位。
例如溶液通过树脂柱的流量速度为2～4BV/h，即每小时通过溶液的体积为树脂床容积的2～4倍。
树脂的处理能力亦常以BV为单位计算。
流量bv ：单位时间某断面（横截面）的水（液体）流量。
流速bv/h：单位时间水（液体）中一个质点移动的距离。
装柱子过程：(1)将层析柱垂直固定在铁架台上，关闭活塞，在柱中加入约3cm高的蒸馏水。
(2)用烧杯将大孔树脂水浆液一次性均匀倒入层析柱中，倒入树脂的同时用玻棒搅拌大孔树脂浆液，并不断加入蒸馏水。
(3)把过量的水从柱底部放出，保持水面高于树脂层面3cm以上，直到树脂转移完毕。
(4)待所有树脂转移完毕后，继续往柱中加蒸馏水，持续30min3.2树脂预处理方法（1）乙醇浸泡：称取适量大孔吸附树脂，加入95%以上的乙醇浸泡24小时，乙醇液面应高于树脂上表面3-5厘米。
然后装入35×50mm 层析柱中。
（2）醇洗：用2BV（BV：指树脂床体积）乙醇以2BV/h的流速冲洗大孔树脂，洗至流出液加三倍量水不呈白色浑浊为止。
并以水以同样流速冲洗树脂，至流出液无醇味。
（3）酸洗：用2BV2%盐酸浸泡2～4小时，并以4～6BV/h流速淋洗树脂，然后用水以同样流速洗至流出液pH中性。
（4）碱洗：用2BV树脂床体积的2%NaOH水溶液淋洗树脂，流速与酸洗相同。
然后用水以同样流速洗至流出液pH中性。
（5）树脂连续使用不必再进行预处理，停用时间过长，应考虑重新预处理。
停用前要充分解吸，洗净，并以大于10%食盐溶液浸泡，以避免细菌在树脂中繁殖。
层析柱使用说明书
DN400
使
用
说
明
书
制作单位：***************有限公司
生产基地：****************路7号
公司电话：**************
公司传真：************
邮编：1000000
编制日期：二○一一年十二月
目录
一产品介绍……………………………………………….2
二产品特点……………………………………………….2
再生
0.5-3BV/h
3-4BV
酸碱再生，用乙醇、丙酮等溶剂淋洗
水洗
2-3BV/h
3-4BV
用大量水淋洗干净
注：以上参数供参考
五操作注意事项：
1．运输及贮存过程中应保持5-40℃环境中，避免过热过冷。注意不使树脂变干，以免孔结构发生变化。
2．树脂装填在吸附柱中使用，装填前应对设备管道进行清洗，以防有害物对树脂产生污染（如铁污染）。
二产品特点:
①合理的高径比，精密的进出口流体分布装置，保证层析柱装填效果和填料再生效果，为高效分离提供了保障。
②产品采用不锈钢材料，并进行内外抛光，耐腐蚀、使用寿命长、硬度高、运输安全，质量有保障。
③本设备确保无污染、效率高、操作方便等。
三技术参数
容积
450L
材质
SUS316L
设计压力
-0.1
设计温度
步骤流速流量备注填充装柱逆流洗柱水洗除去小粒子及破碎树脂前处理15bvh3bv用乙醇等进行预处理吸附14bvh根据吸附量应在吸附容量以下ph58温度低于50水洗23bvh051bv将吸附在树脂上的杂质洗出解吸053bvh23bv乙醇丙酮等的含水溶液溶出有效成分温度高有利于解吸再生053bvh34bv酸碱再生用乙醇丙酮等溶剂淋洗水洗23bvh34bv用大量水淋洗干净注
柱层析
柱层析的基本操作柱层析的基本操作柱层析的基本操作包括以下一些步骤：⑴装柱柱子装的质量好与差，是柱层析法能否成功分离纯化物质的关键步骤之一。
一般要求柱子装的要均匀，不能分层，柱子中不能有气泡等。
否则要重新装柱。
首先选好柱子，根据层析的基质和分离目的而定。
一般柱子的直径与长度比为1:10~50；凝胶柱可以选1:100~200，同时将柱子洗涤干净。
将层析用的基质（如吸附剂、树脂、凝胶等）在适当的溶剂或缓冲液中溶胀，并用适当浓度的酸（0.5N~1N）、碱（0.5N~1N）、盐（0.5M~）溶液洗涤处理，以除去其表面可能吸附的杂质。
然后用去离子水（或蒸馏水）洗涤干净并真空抽气（吸附剂等与溶液混合在一起），以除去其内部的气泡。
关闭层析柱出水口，并装入1/3柱高的缓冲液，并将处理好的吸附剂等缓慢地倒入柱中，使其沉降约高。
打开出水口，控制适当流速，使吸附剂等均匀沉降，并不断加入吸附剂溶液。
（吸附剂的多少根据分离样品的多少而定。
）注意不能干柱、分层，否则必须重新装柱。
最后使柱中基质表面平坦并在表面上留有2~高的缓冲液，同时关闭出水口。
（采用机械化装柱法在此省略。
）⑵平衡柱子装好后，要用所需的缓冲液（有一定的pH和离子强度）平衡柱子。
用恒流泵在恒定压力下走柱子（平衡与洗脱时的压力尽可能保持相同）。
平衡液体积一般为3~5倍柱床体积，以保证平衡后柱床体积稳定及基质充分平衡。
如果需要，可用兰色葡聚糖2000在恒压下走柱，如色带均匀下降，则说明柱子是均匀的。
有时柱子平衡好后，还要进行转型处理。
这方面的内容在离子交换层析中加以介绍。
⑶加样加样量的多少直接影响分离的效果。
一般讲，加样量尽量少些，分离效果比较好。
通常加样量应少于20%的操作容量，体积应低于5%的床体积，对于分析性柱层析，一般不超过床体积的1%。
当然，最大加样量必须在具体条件下多次试验后才能决定。
应注意的是，加样时应缓慢小心地将样品溶液加到固定相表面，尽量避免冲击基质，以保持基质表面平坦。
层析树脂和填料操作手册
柱径有关，而线速度与柱径无关。
请记住不同柱内径的最佳流量：
柱内径
流量
线速度
粗粒
A
u(1mm/sec)
北京慧德易科技有限责任公司
-4– 电话：010-51528296/97/98
树脂和填料操作手册
5 mm
1.0 mL/min
1 mm/sec
2 mm 1 mm
提取方法：用溶剂提取中草药成分，、常用浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法及连续回 流提取法等。同时，原料的粉碎度、提取时间、提取温度、设备条件等因素也都能影响提取 效率，必须加以考虑。
近年来，超临界流体萃取（SFE）技术广泛应用于天然产物的提取过程中。该方法尤其 适用于对热及化学不稳定的化合物提取，并主要用于从混合物中提取低极性的组分。
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甲
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A AD A
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北京慧德易科技有限责任公司
-5– 电话：010-51528296/97/98
树脂和填料操作手册
A 点甲、乙二溶质分不开，B 点比 C点冲洗剂浓度高，但k’小，省时 间，所以选 B 点好。
A 点分不开，要寻找不是交叉点的 D点的Cb浓度为分离条件
作为一种初步的纯化方法，沉淀经常被用于皂苷的研究中。将含有皂苷的提取物（如经 过丁醇－水分配之后）的浓缩甲醇液倾入大量的乙醚中，利用过滤或离心的方法收集沉淀的 皂苷。反复利用这种沉淀法可达到更好的效果。
调整保留时间：tR’＝ tR－t0
调整保留体积：VR’＝ VR－VR0＝tR’ •FC
⑸选择性指标“α’”和相对保留值“α”
α’可以更直观和方便地反映色谱峰分离的好坏：
α'＝ tR(2) tR (1)
层析柱的认识及装填
层析柱的认识及装填1. 引言1.1 什么是层析柱的认识及装填层析柱是一种用于化学分析和分离物质的重要装备。
它利用不同物质在固定相和流动相作用下的分配系数不同的特性进行物质的分离和纯化。
在层析柱中，通常要装填一定规格和类型的吸附剂或填料，以便有效地分离目标物质。
层析柱的装填物质种类繁多，常见的有硅胶、凝胶、氢氧化铝、离子交换树脂等。
不同的装填物质适用于不同类型的样品和分析目的，选择合适的装填物质对层析的效果至关重要。
正确的装填方式和装填量可以提高层析柱的分离效率和分辨率，保证分析结果的准确性和可靠性。
对层析柱的装填技术有深入了解并掌握正确的操作方法是进行有效分析的基础。
2. 正文2.1 层析柱的工作原理层析柱的工作原理是基于化学物质在不同固相材料中的吸附和分离原理。
当混合样品通过层析柱时，不同成分因为吸附力的差异在固定相中以不同速度通过层析柱，从而实现分离。
在层析柱中，固相是至关重要的部分，它可以是硅胶、蛋白质、树脂等不同材料。
根据不同的应用需求，选择合适的固相材料可以实现对不同化合物的分离和纯化。
层析柱的工作原理可以分为吸附色谱和分配色谱两种。
吸附色谱是指化合物在固定相表面的吸附和解吸作用，根据化合物与固相的亲疏性不同进行分离。
而分配色谱是根据不同成分在液相和固相之间的平衡分布系数进行分离，也称萃取色谱。
通过层析柱的工作原理，不同化合物可以根据它们在固相中的吸附性质和分配性质进行有效分离和纯化，进而实现对样品的分析和提纯工作。
层析柱的工作原理为化学分析和制药领域提供了一种重要的手段和方法。
2.2 层析柱的结构及分类层析柱是一种用于化学分析中分离和纯化材料的装置，其结构和分类多种多样。
根据其填充物不同，层析柱可以分为液相层析柱和气相层析柱。
液相层析柱主要用于对液体混合物的分离，填充物可以是各种吸附剂、离子交换树脂或凝胶，常见的结构包括管式、板式和玻璃纤维。
气相层析柱则主要用于气体混合物的分离，填充物通常是固体粉末或涂层，主要有开放管柱、PLOT柱和带有填料的管柱等结构。
大孔树脂层析柱
大孔树脂层析柱
大孔树脂层析柱是一种新型的层析柱，它的特点是具有大孔径和高比表面积。
这种层析柱可以用于分离大分子化合物，如蛋白质、多肽等。
相比传统的小孔径树脂层析柱，大孔树脂层析柱具有更高的分离效率和更快的分离速度。
大孔树脂层析柱的制备方法主要有两种：一种是通过改变树脂的交联度和孔径大小来制备大孔树脂层析柱；另一种是通过在树脂表面引入大孔径的微球来制备大孔树脂层析柱。
这两种方法都可以制备出具有大孔径的树脂层析柱，但是前者的制备方法比较复杂，后者的制备方法比较简单。
大孔树脂层析柱的应用范围非常广泛，可以用于分离蛋白质、多肽、核酸、糖类等大分子化合物。
在生物制药、食品工业、环境监测等领域都有广泛的应用。
例如，在生物制药领域，大孔树脂层析柱可以用于纯化重组蛋白、抗体等生物制品；在食品工业领域，大孔树脂层析柱可以用于分离和纯化食品中的蛋白质、多肽等成分；在环境监测领域，大孔树脂层析柱可以用于分离和检测水中的有机物、重金属等污染物。
大孔树脂层析柱是一种非常有前途的分离技术，它具有高效、快速、灵敏、可靠等优点，可以满足不同领域的分离需求。
随着科技的不断发展，大孔树脂层析柱的制备方法和应用领域也将不断拓展和完善。
由铅型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物组成的强阳离子交换树脂柱-概述说明以及解释
由铅型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物组成的强阳离子交换树脂柱-概述说明以及解释1.引言1.1 概述引言部分是文章的开端，用来引导读者了解文章的背景和主题，并概述研究的目的和重要性。
以下是可能的概述部分内容：概述：强阳离子交换树脂是一类具有广泛应用潜力的重要材料，广泛应用于环境污染治理、化学分离、药物纯化等领域。
铅型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物作为一种新型强阳离子交换树脂，具有良好的结构稳定性和吸附性能，因此受到了广泛的关注和研究。
本文旨在对铅型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物强阳离子交换树脂柱进行深入研究，探索其合成方法、性质和应用以及制备和性能评价等方面的问题。
通过实验和分析，我们将全面了解该树脂柱的制备过程、结构特点以及其在离子交换过程中的性能表现。
本文将分为以下章节：引言、正文和结论。
正文部分将详细介绍铅型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物的合成方法、强阳离子交换树脂的性质和应用以及强阳离子交换树脂柱的制备和性能评价等内容。
最后，结论部分将对研究结果进行总结，并展望该树脂柱研究的意义、应用前景以及未来可能存在的问题和需要解决的挑战。
通过本文的研究，我们期望能够更深入地了解铅型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物强阳离子交换树脂柱的性能特点，为其进一步的应用和优化提供理论和实验的依据。
同时，对于提高离子交换树脂柱的性能以及拓展其应用领域也具有重要的意义。
1.2 文章结构文章结构主要包括引言、正文和结论三个部分。
引言部分主要概述了本文的研究背景和目的，简要介绍了所使用的材料和方法，并提出了本研究的重要性和研究意义。
正文部分分为三个小节。
首先，介绍了铅型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物的合成方法，包括材料的配制和反应条件的优化。
其次，讨论了强阳离子交换树脂的性质和应用，包括其对离子交换的机理和速率的影响，以及在环境保护、水处理和生物医学领域的应用等。
最后，介绍了强阳离子交换树脂柱的制备过程和性能评价方法，包括柱填充材料的选择、柱填充工艺的优化以及柱性能的测试方法。
装柱指导
装柱概述Toyopear 和TSK-GEL 5PW 层析树脂是用于生物层析的大孔聚合物填料，适用于实验室和工艺纯化球形蛋白、多肽、核酸等生物材料。
由于表面醚基和醇羟基的存在使得这种经过改性的聚甲基丙烯酸树脂具有亲水的表面。
同时这种树脂还有杰出的压力/流速特性和PH稳定性。
Ⅰ装填1装填准备a)Toyopearl和TSK-GEL5PW树脂的装填的基本要求Toyopearl树脂的装填时压力最好控制在0.5-3bar(7-45psi) 之间。
TSK-GEL5PW树脂的最佳装填压力在3-10bar（45-140psi）。
尽管Toyopearl和TSK-GEL5PW树脂可以采用简单的重力沉降方法装填，但是我们并不提倡这样操作。
在进行柱子装填时，对于Toyopearl树脂压力不可超过5bar,TSK-GEL 5PW 树脂的装填压力应控制在20bar.以内。
b)去除细碎颗粒(TOSOH 提醒您去除细碎颗粒)在凝胶匀浆液中的细碎颗粒会堵塞筛网或筛板从而最终导致柱压力升高。
可以通过下面的转移过程来去除树脂匀浆液中的细碎颗粒1用电动搅拌或搅拌棒将在已经在运输包装容器中的树脂搅起成悬浮液（注意请不要使用磁力搅拌以免磁力搅拌器与容器之间的作用会将树脂磨碎产生新的细碎颗粒）。
一旦树脂完全悬浮，将您所需量的悬浮液（大约4倍体积的悬浮液=三倍体积的树脂）转移到足够大体积的容器内，容器的体积应至少是树脂体积的4倍，加蒸馏水或缓冲液使总体积达到树脂体积的4倍并将树脂完全搅起、搅匀。
如；树脂需要量5升=总共7-8升的悬浮液（65-70%匀浆浓度）因此需要准备一个至少20升的容器2让树脂沉降。
沉降时间与容器内径、匀浆的溶液及颗粒大小有关。
Toyopearl和TSK-GEL5PW在水中的平均沉降时间列表如下：Toyopearl粗颗粒级（C）：100um 15-30分钟中等级别（M）：65um 30-45分钟细颗粒级（F）：45um 45-60分钟精细级（S）：35um 60-90分钟TSK-GEL 5PW30um 90-120分钟20um ≥120分钟3.档树脂沉降后，小心将悬浮有细碎颗粒的上清夜倾出。
凝胶树脂层析柱
凝胶树脂层析柱
凝胶树脂层析柱是一种常用的色谱分离技术，通过树脂中的凝胶来分离和纯化目标分子。
这种层析柱使用的填料通常是由聚合物制成的膠體，如琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶等。
凝胶树脂层析柱可以根据分子的大小、电荷、亲水性等物理化学性质来进行分离。
凝胶树脂层析柱的原理是根据不同分子在凝胶树脂上的渗透性差异来进行分离。
较大的分子在凝胶树脂中的渗透性较差，因此在流动相中运动速度较慢；而较小的分子在凝胶树脂中的渗透性较好，运动速度较快。
通过调节流动相的性质（如溶剂成分、温度等），可以控制分子在凝胶树脂上的渗透性，从而实现分离和纯化。
凝胶树脂层析柱在生物化学、分子生物学、制药等领域广泛应用。
它可以用于纯化蛋白质、核酸、多肽等生物大分子，也可以用于分离小分子化合物。
由于凝胶树脂层析柱具有高分离效率、操作简单、适用范围广等优点，因此受到了广泛的关注和应用。
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树脂层析柱
一、概述
树脂层析柱是一种用于分离、富集和纯化混合物中目标物质的技术。
它是在柱状介质中利用目标分子与树脂之间的相互作用力进行分离的。
树脂层析柱在生物制药、食品工业、环境监测等领域具有广泛的应用。
二、树脂层析柱的类型
树脂层析柱根据其工作原理和应用领域的不同，可以分为吸附层析柱、离子交换层析柱、凝胶层析柱和亲和层析柱等多种类型。
1. 吸附层析柱
吸附层析柱利用目标物质与固定在树脂表面的配体之间的亲和力进行分离。
常用的吸附层析柱介质包括蛋白A、蛋白G和蛋白L等。
这些介质分别具有对IgG、IgG 全亚型和非免疫球蛋白类分子的特异性结合作用。
2. 离子交换层析柱
离子交换层析柱将目标物质与树脂表面固定的离子交换基团之间的电荷作用力进行分离。
离子交换层析柱一般可分为阴离子交换柱和阳离子交换柱。
阴离子交换柱主要用于富集和纯化带负电的目标物质，如DNA和RNA等。
阳离子交换柱则主要应用于带正电目标物质的分离。
3. 凝胶层析柱
凝胶层析柱利用凝胶介质的孔隙大小和分布来分离分子。
凝胶层析柱常用于富集和纯化蛋白质和核酸等大分子物质。
根据凝胶介质的性质不同，凝胶层析柱可以进一步分为分子筛层析柱、凝胶过滤层析柱和凝胶透析柱等。
4. 亲和层析柱
亲和层析柱利用目标物质与树脂表面固定的特定亲和剂之间的高亲和性相互作用进行分离。
常用的亲和层析柱介质包括金属离子亲和树脂、亲和脂质和药物亲和树脂等。
亲和层析柱广泛应用于蛋白质、抗体和药物的富集和纯化。
三、树脂层析柱的工作原理
树脂层析柱的分离原理是基于目标物质与树脂表面固定配体之间的相互作用力。
根据目标物质与配体之间的特异性相互作用，可以实现目标物质的富集和纯化。
树脂层析柱的工作过程一般包括样品加载、洗脱和再生等步骤。
首先，样品通过加载步骤进入柱管，与树脂表面固定的配体发生相互作用。
随后，洗脱步骤中引入洗脱缓冲液，将非目标物质洗脱出柱管。
最后，再生步骤中使用适当的再生缓冲液将柱管中的树脂再生，以便于下一次使用。
四、树脂层析柱的优势和局限性
树脂层析柱具有以下优势：
1.高选择性：树脂层析柱能够利用目标物质与配体的特异性相互作用，实现高
选择性的分离。
2.高效性：树脂层析柱能够在短时间内高效地完成样品的富集和纯化，提高实
验效率。
3.可重复使用：树脂层析柱的柱管可以进行再生，多次使用，降低实验成本。
然而，树脂层析柱也存在一些局限性：
1.样品容量限制：树脂层析柱对样品容量有一定的限制，大容量样品需使用大
型设备。
2.耗时操作：树脂层析柱的操作流程较复杂，需要较多的时间和操作技巧。
3.高成本：某些特定类型的树脂层析柱较为昂贵，增加了实验成本。
五、树脂层析柱的应用领域
树脂层析柱广泛应用于以下领域：
1.生物制药：树脂层析柱在生物药物的富集和纯化中扮演重要角色，如抗体、
重组蛋白质的纯化等。
2.食品工业：树脂层析柱被用于食品中有害物质的富集和分离，如农药残留和
食品添加剂等。
3.环境监测：树脂层析柱可用于环境样品的净化和富集，如水体中的有机、无
机物质的检测等。
六、树脂层析柱的发展趋势
随着生物技术的不断发展，树脂层析柱也在不断创新和改进。
未来的发展趋势主要包括以下几个方向：
1.自动化：树脂层析柱的操作将更多地向自动化方向发展，提高操作效率和稳
定性。
2.高通量：树脂层析柱将逐渐发展为能够同时处理多个样品的高通量技术，提
高分离效率。
3.多功能化：树脂层析柱将不仅仅用于单一类型的分离，而是能够实现多种模
式的组合，提供更加全面的分离解决方案。
七、总结
树脂层析柱是一种重要的分离和富集技术，在生物制药、食品工业、环境监测等领域具有广泛应用。
不同类型的树脂层析柱利用特异的相互作用力实现目标物质的纯化。
树脂层析柱具有高选择性、高效性和可重复使用等优势，但也存在样品容量限制和操作耗时的局限性。
随着技术的不断发展，树脂层析柱将朝着自动化、高通量和多功能化的方向发展。