细胞线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书中文版

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纯化线粒体呼吸控制率（RCR）定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

纯化线粒体呼吸控制率（RCR）定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途纯化线粒体呼吸控制率（RCR）定量检测试剂是一种旨在通过极谱法检测系统（polarographic system）测定新鲜活体线粒体在ADP存在（III态呼吸）与否（IV态呼吸）的情况下溶解氧（dissolved oxygen）的消耗差异，即呼吸控制率（RCR），以评价线粒体结构和功能完整性以及氧化磷酸化效率的权威而经典的技术方法。

该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。

可以被用于线粒体生理功能和药物作用机制等的研究。

产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定。

技术背景线粒体是细胞呼吸链和氧化磷酸化的中心。

电子传递和ATP合成通过质子梯度偶联成一体。

线粒体结构完整，功能正常，底物充分，电子传递形成的质子梯度不断被消耗，电子得以顺畅传递，氧气快速消耗，其耗氧率大，为III态呼吸。

ADP耗竭，质子梯度不能消耗，阻碍电子传递，氧气消耗减少，为IV态呼吸。

呼吸控制率（respiratory control ratio或respiratory control index；RCR），又称呼吸调节比，是指III态（加入ADP）的呼吸速率与IV态（ADP耗竭）的呼吸速率之比。

正常线粒体的RCR为3至10：RCR降低意味着线粒体ATP 合成功能损伤，呼吸障碍；RCR增高意味着细胞活动旺盛，代谢加快。

产品内容介质液（Reagent A）毫升态底物液（Reagent B）微升态底物液（Reagent C）微升产品说明书 1份保存方式保存在－20℃冰箱里，有效保证6月用户自备CLARK氧电极仪：用于测定溶解氧浓度实验步骤实验开始前，制备好新鲜的线粒体置于冰槽里备用；同时将－20℃冰箱里的试剂融化，并预热氧电极仪到25℃。

然后进行下列操作。

1．加入xx毫升介质液（Reagent A）到反应玻璃槽2．使用微型磁力子搅拌，充分混匀3．密封反应槽4．开始记录氧浓度：起始饱和氧浓度值为0.240微摩尔分子氧/毫升（25℃）5．持续记录1分钟后，注射加入xx微升待测的线粒体（总量2毫克）（注意：氧浓度可能瞬时增加5％）6．持续记录1分钟后，注射加入xx微升态底物液（Reagent B）――开始IV态呼吸（注意：参见注意事项9）7．持续记录2分钟：出现氧浓度缓慢下降）（8．继续注射加入xx微升态底物液（Reagent C注意：氧浓度在10秒钟内开始下滑）――开始III态呼吸（注意：参见注意事项9）9．持续记录直至出现线性下行斜线出现拐点10．分别测算III态呼吸速率和IV态呼吸速率：氧浓度降低值÷实际时间（分钟）11．计算呼吸控制率：III态呼吸速率÷IV态呼吸速率注意事项1．本产品为20次操作2．操作时，须戴手套3．确保反应玻璃槽洁净，密闭，以免氧气流入4．线粒体样品须新鲜制备，建议不要冻存；制备的线粒体膜须完整，非常重要；建议使用GENMED线粒体分离试剂盒－GMS10006.15．注射加入反应槽时，避免气泡和空气注入6．避免乙醇污染；乙醇增加氧浓度；如果底物或抑制剂须使用乙醇溶解，则加注10微升7．保持反应槽温度恒定，温度降低，氧浓度升高8．反应液充分混匀，和环境氧保持平衡9．加注态底物液（Reagent B）和态底物液（Reagent C）前，须充分冻融和混匀10．严格按照规定加注试剂，切莫增加加注试剂容量11．本公司提供系列线粒体检测试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定检测敏感。

FLIPR 钙6 检测试剂盒(Molecular Devices)

FLIPRTETRA 高通量实时荧光成像分析系统应用系列（8）
钙流高效筛选的不二之选 ——FLIPR 钙 6 检测试剂盒
Molecular Devices 公司生产的FLIPR® 钙离子检测试
剂盒采用了钙离子敏感的指示剂以及专利的屏蔽染料以确保研究者进行高灵敏的用于 G 蛋白偶联受体、离子通道和其它钙离子敏感的靶标的荧光筛选。采用新型的染料构成进一步的提升了钙流结果的检测窗口和实验稳健性，同时实验方案更灵活。如图 1 所示，FLIPR 钙 6 试剂含有的屏蔽成分不进入细胞内部，但显著性的降低胞外钙离子指示染料残留、培养基和其它成分引起的背景荧光。FLIPR 钙 6-QF 检测试剂盒成分（也如图 1 所示）不含有屏蔽组分，对淬灭剂敏感靶标或多通道应用试验提供了一种新的、灵活的选择。另外的应用便利之处在于试验中要求很小的或不加入丙磺舒也可以。许多细胞（例如 CHO）具有阴离子交换蛋白，需要加入阴离子再摄取抑制剂，例如丙磺舒，以保持细胞内钙离子指示染料不被转出。
Part number R6133
公司简介 FLIPR®Calcium6-QF Assay Sample Kit
(2) vials of component A*
(1) bottle of dilution buffer (Component B) (2) vials of component C
R6134
FLIPR 钙 6 试剂盒可用于大部分的细胞株。图4所示， “实验就绪”的1321N1冻存细胞在FlexStation® 3微孔读板机上进行检测，其表达了内源性组胺1受体（来自 ECACC，Porton Down, Salisbury, UK）。使用FLIPR 钙 5 试剂盒、Fluo-4 Direct试剂盒、FLIPR 钙 6 试剂盒和FLIPR 钙 6-QF试剂盒检测到组胺浓度增加引起的组胺受体效应变化的对比结果表明了FLIPR 钙 6 试剂盒可得到最大的信号窗口。SoftMax Pro软件计算得到的 EC50 值在预期数值对数一半以内。

线粒体膜电位检测试剂盒 (JC-10)使用说明

线粒体膜电位检测试剂盒（JC-10）使用说明产品货号：CA1310产品规格：100T产品内容：产品名称包装JC-10（200×）100µL/管，共5管超纯90mLJC-10染缓冲液（5×）80mLCCCP20µL保存条件：-20℃避光保存，尽量避免反复冻融，有效期一年。

超纯水和JC-10染色缓冲液（5×）也可4℃保存。

产品简介：线粒体膜电位检测试剂盒（JC-10）是一种以JC-10为荧光探针，快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒，可以用于早期的细胞凋亡检测。

JC-10是一种广泛用于检测线粒体膜电位Ψm△的理想荧光探针。

可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。

在线粒体膜电位较高时，JC-10聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，可以产生红色荧光；在线粒体膜电位较低时，JC-10不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-10为单体，可以产生绿色荧光。

这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。

常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。

线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。

通过JC-10从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同时也可以用JC-10从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。

JC-10单体的最大激发波长为515nm，最大发射波长为529nm；JC-10聚合物的最大激发波长为585nm，最大发射波长为590nm。

实际观察时，使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。

本试剂盒提供了CCCP作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。

对于六孔板中的样品，本试剂盒共可以检测100个样品；对于12孔中的样品，本试剂盒共可以检测200个样品。

操作步骤：1、JC-10染色工作液的配制：六孔板每孔所需JC-10染色工作液的量为1mL，其他培养器皿的JC-10染色工作液的用量以此类推；对于细胞悬液每50～100万细胞需0.5mL JC-10染色工作液。

活体细胞线粒体膜通道孔(MPTP)红色荧光(TMRM)检测

活体细胞线粒体膜通道孔（MPTP）红色荧光（TMRM）检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途活体细胞线粒体膜通道孔（MPTP）红色荧光（TMRM）检测试剂是一种旨在通过四甲基罗丹明甲酯染料，选择性地聚集在线粒体内呈现荧光染色，一旦释放到细胞浆，即刻发生荧光淬灭，来分析和观察线粒体膜通道孔活性的权威而经典的技术方法。

该技术经过精心研制、成功实验证明的。

其适用于各种活体细胞线粒体（动物、人体、昆虫等）膜通道孔活性（开放状态）的检测。

产品严格无菌，即到即用，活体检测，分辨率高，操作简捷，性能稳定。

技术背景线粒体膜通道孔（mitochondrial permeability transition pore；MPTP）是由线粒体内外膜成分构成的非特异性且钙离子依赖性通道。

在细胞凋亡或坏死时，线粒体内容物通过膜通道孔释放到胞浆中。

线粒体膜电位的去极化（depolarization），导致膜通道孔的开放，显著改变线粒体的通透性，使之线粒体膨胀（swelling），内容物释放。

其中钙离子过度进入、线粒体谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等导致膜通道孔的持续开放，而造成细胞色素C的释放和线粒体膜电位的消失。

四甲基罗丹明甲酯（tetramethylrhodamine methyl ester；TMRM），为罗丹明衍生物阳离子染料，作为电势测定（potentiometric）荧光探针：第一，具有亲脂性的；第二，与线粒体内膜负电极结合而聚集；第三，容易进入细胞及其线粒体。

四甲基罗丹明甲酯进入细胞后，被细胞内酯酶切离，产生四甲基罗丹明。

四甲基罗丹明进入线粒体后，被线粒体俘获，呈现强烈荧光。

一旦线粒体膜通道孔开放，四甲基罗丹明释放出来而在胞浆重新分布，其荧光性显著降低。

线粒体内荧光的变化，表明膜通道孔的开放状态。

产品内容清理液（Reagent A）毫升染色液（Reagent B）微升稀释液（Reagent C）毫升产品说明书1份保存方式保存染色液（Reagent B）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月用户自备24孔细胞培养板：用于贴壁细胞染色的容器1.5毫升离心管：用于染色工作液配制和细胞染色的容器微型台式离心机：用于沉淀细胞培养箱：用于染色孵育（共聚焦）荧光显微镜：用于细胞荧光分析荧光分光光度仪或荧光酶标仪：用于细胞荧光定量分析细胞流式仪：用于细胞荧光分析实验步骤实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（Reagent B）置入冰槽里融化，稀释液（Reagent C）放进37℃恒温水槽里预热。

GENMED线粒体功能詹纳斯绿B染色试剂盒产品说明书范文(中文版)

GENMED线粒体功能詹纳斯绿B染色试剂盒产品说明书范文(中文版)GMS10015v.A主要用途GENMED线粒体功能詹纳斯绿B染色试剂是一种旨在通过一种毒性较小的碱性染料特异性地使具有活性功能的线粒体呈现蓝绿色，从而判断线粒体功能的完整性的权威而经典的技术方法。

该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。

其适用于各种线粒体（动物、人体、植物、昆虫等）制备物的功能检测。

产品严格无菌，即到即用，活体检测，操作简捷，性能稳定。

技术背景线粒体是细胞中重要的细胞器，其主要功能是提供细胞内各种物质代谢所需要的能量。

线粒体大量存在于代谢旺盛的细胞中，如动物的心肌、肝、肾等器官和组织的细胞中。

大量制备线粒体就是从这些器官组织中提取，或从组织培养细胞中提取。

在光学显微镜下线粒体呈现为颗粒状、棒状或弯曲细线。

詹纳斯绿B（JanugreenB），是一种毒性较小的碱性染料。

它可以对活细胞进行直接染色，在细胞质内可以看到被染成蓝绿色的线状或颗粒小体的线粒体。

线粒体所以能显示出蓝绿色，是由于线粒体中具有细胞色素氧化酶系统，它是染料始终处于氧化状态呈蓝绿色，而在周围的细胞质中的染料被还原呈无色。

产品内容毫升毫升毫升份保存方式保存在－20℃冰箱里；GENMED染色液(ReagentB)，避免光照；有效保证6月用户自备毫升离心管：用于线粒体染色的容器光学显微镜：用于线粒体染色观察分析实验步骤实验开始前，将℃冰箱里的试剂盒中的GENMED染色液（ReagentB）置于冰槽里融化，并放在暗室里。

然后进行下列操作。

一、纯化线粒体染色1．从纯化的线粒体样品中移出至微升（含细胞中提取的线粒体）到新的预冷的毫升离心管，置于冰槽里（注意：线粒体须均匀分布，没有聚集成团）2．加入等量微升的GENMED染色液（ReagentB），轻柔混匀3．放进暗室里，在室温下孵育1分钟4．即刻移取微升到载玻片上，放上盖玻片5．在光学显微镜油镜下进行观察：功能完整的线粒体呈现蓝绿色圆形或椭圆形颗粒（注意：可见蓝绿色渐渐变淡现象）6．篮绿色强度显著减弱或呈现无色，表明线粒体细胞色素氧化酶系统功能不全或功能丧失二、活体细胞染色1．将待测细胞（某细胞）移入到1.5毫升离心管2．放进微型台式离心机离心1分钟，速度为500g（或2000RPM；例如eppendorf5415）3．小心抽去上清液4．加入微升GENMED清理液（ReagentC）或GENMED保存液（ReagentA）5．加入微升GENMED染色液（ReagentB），充分混匀6．放进暗室里，在冰槽里孵育分钟7．即刻移取微升到载玻片上，放上盖玻片8．在光学显微镜油镜下进行观察：功能完整的线粒体呈现蓝绿色线状或颗粒小体9．篮绿色强度显著减弱或呈现无色，表明线粒体细胞色素氧化酶系统功能不全或功能丧失注意事项1．本产品为20次（活体细胞）或400次（纯化线粒体）操作2．所有操作均须无菌状态下进行3．线粒体样品操作须在低温下进行，且操作快速4．操作时，须戴手套5．建议染色完成后，即刻进行显微镜观察分析6．孵育时，须避免光照7．本公司提供系列线粒体试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能长期稳定2．本产品经鉴定显色清晰使用承诺友情提醒IFITDOESN’TWORK，RECHECKYOURE某PERIMENTTOSEEWHATYOUDIDWRONG。

线粒体钙离子荧光探针

线粒体钙离子荧光探针引言：线粒体是细胞内的一个重要器官，负责细胞能量代谢和调节细胞死亡等过程。

线粒体功能障碍与多种疾病的发生发展密切相关。

钙离子是线粒体内重要的调节离子，对细胞的生理功能起着重要作用。

因此，研究线粒体钙离子荧光探针对于揭示线粒体功能及其在疾病发生中的作用具有重要意义。

一、线粒体钙离子的重要性线粒体是细胞内的能量中心，通过氧化磷酸化产生ATP，维持细胞正常的能量供应。

而钙离子是细胞内重要的信号分子，在细胞生理活动中起着重要作用。

线粒体钙离子的高浓度可以调节线粒体的能量代谢、细胞呼吸和氧化磷酸化。

线粒体内的钙离子浓度调节紊乱与多种疾病的发生发展密切相关，如心脏病、中风和神经退行性疾病等。

因此，研究线粒体钙离子荧光探针对于理解线粒体功能和疾病机制具有重要意义。

二、线粒体钙离子荧光探针的原理线粒体钙离子荧光探针是一种用于监测线粒体内钙离子浓度的工具。

目前常用的线粒体钙离子荧光探针有Rhod-2、Fluo-4和Cyt-2等。

这些探针通过与线粒体内的钙离子结合，发生荧光增强或猝灭反应，从而实现对钙离子浓度的监测。

其中，Rhod-2是一种具有强荧光信号的探针，广泛应用于线粒体钙离子的研究。

三、线粒体钙离子荧光探针的应用1. 线粒体功能研究：线粒体钙离子荧光探针可以用于研究线粒体的功能状态。

通过监测线粒体内钙离子的浓度变化，可以了解线粒体的能量代谢、呼吸和氧化磷酸化等过程，进而揭示线粒体在细胞生理活动中的作用机制。

2. 疾病机制研究：线粒体功能障碍与多种疾病的发生发展密切相关。

线粒体钙离子荧光探针可以用于研究疾病发生机制。

通过监测线粒体内钙离子的浓度变化，可以了解线粒体在疾病发生过程中的作用，如心脏病、中风和神经退行性疾病等。

3. 药物筛选：线粒体钙离子荧光探针可以用于药物筛选。

通过监测线粒体内钙离子的浓度变化，可以评估药物对线粒体功能的影响，进而筛选出具有线粒体保护作用的药物。

四、线粒体钙离子荧光探针的优势与局限性线粒体钙离子荧光探针具有以下优势：1. 高灵敏度：线粒体钙离子荧光探针可以灵敏地监测线粒体内钙离子的浓度变化，能够提供准确的实验数据。

GENMED纯化线粒体溶解试剂盒产品说明书(中文版)

线粒体外膜功能检测试剂盒纯化线粒体细胞色素 C 氧化酶活性测定试剂盒细胞/组织悬液细胞色素 C 氧化酶活性测定试剂盒
纯化细胞色素 C 氧化酶活性测定试剂盒真菌/酵母细胞色素 C 氧化酶活性测定试剂盒
植物细胞色素 C 氧化酶活性测定试剂盒线粒体功能詹纳斯绿 B（JGB）染色试剂盒细胞内氧化应激活性氧（ROS）高质荧光测定试剂盒细胞内氧化应激活性氧（ROS）初级荧光测定试剂盒活体组织氧化应激活性氧（ROS）高质荧光测定试剂盒活体组织氧化应激活性氧（ROS）初级荧光测定试剂盒冰冻切片氧化应激活性氧（ROS）高质荧光测定试剂盒冰冻切片氧化应激活性氧（ROS）初级荧光测定试剂盒真菌/酵母细胞内氧化应激活性氧（ROS）高质荧光测定试剂盒真菌/酵母细胞内氧化应激活性氧（ROS）初级荧光测定试剂盒活体细胞氧化应激活性氧（ROS）染色试剂盒冰冻切片氧化应激活性氧（ROS）染色试剂盒活体细胞氧化应激活性氧（ROS）比色法定量检测试剂盒细胞内氧化应激活性氧（ROS）红色荧光测定试剂盒
4
GMS50004 GMS30034.1 GMS30034.2 GMS30034.3 GMS30034.4 GMS30034.5 GMS30034.6 GMS50005 GMS50006 GMS50007
GMS50008 GMS50009
GMS50010
GMS50083
GMS10063.1 GMS10063.2 GMS10063.3 GMS10095 GMS12198 GMS50067 GMS50068.1
名称动物细胞/组织线粒体粗提分离试剂盒动物细胞/组织活性线粒体分离试剂盒动物细胞/组织高质纯化线粒体分离试剂盒
动物硬组织线粒体粗提分离试剂盒动物硬组织活性线粒体分离试剂盒动物硬组织高质纯化线粒体分离试剂盒纯化线粒体内膜功能/膜电位测定试剂盒活体细胞线粒体内膜功能/膜电位测定试剂盒完全线粒体内膜功能/膜电位测定试剂盒活体组织线粒体内膜功能/膜电位测定试剂盒真菌/酵母细胞线粒体内膜功能/膜电位测定试剂盒

线粒体的染色方法(红色荧光)

2、细胞染色 2.1 对于贴壁细胞
1）培养皿/培养板准备细胞样本。 2）待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量 37℃预热的含探针工作液。于
生长状态下孵育 15 分钟～45 分钟（具体孵育时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
【注】: 也可以将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基，使其爬片生长。
技术支持：产品技术问题可发邮件至 bestbio@ 咨询。如果您有任何关于产品性能或者新应用和技术的建议，欢迎您随时联系我们。
产品简介：贝博 TM BBcellProbeTM M11 线粒体染色试剂盒是利用 BBcellProbeTM M 系列探针进行线
粒体特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的 BBcellProbeTM M11 线粒体染色探针为红色荧光标记的线粒体探针，具有 579/599nm 的最大激发/发射波长。本品适合双标实验，因其红色荧光与其他的绿色荧光探针具有良好的分辨率。
虽然传统的线粒体荧光探针如 TMR 和罗丹明 123，也能很容易的聚集在功能线粒体上，但是一旦线粒体膜电位丧失即会被洗掉，从而在一些需要细胞进行醛类固定或者包含线粒体能量状态影响因子的实验中，使其应用大受限制，而 BBcellProbeTM M 系列探针不受线粒体膜电位影响。
BBcellProbeTM M 系列线粒体探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的红色荧光探针，贝博还可以提供绿色、蓝色、橙色等颜色的染色
BBcellProbeTM M 系列探针是一种细胞渗透型的对活细胞中的线粒体体进行选择性染色的一类新型荧光染料，该系列探针可以选择性标记线粒体，包含标记线粒体的弱巯基反应性
的氯甲基官能团。只需简单孵育细胞，即可穿过细胞膜并直接聚集在活性线粒体上。可有效

线粒体提取试剂盒说明书

线粒体提取试剂盒说明书货号：SM0020规格：50T/100T保存：四周内使用可4℃储存，长期保存请置于-20℃。

产品内容：组份SM0020-50T SM0020-100TLysis Buffer50mL100mLMito-Wash Buffer25mL50mLStore Buffer5mL10mL产品简介：线粒体提取试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体。

适合于动物软组织（肝或脑组织）和硬组织（肌肉）以及培养细胞的线粒体的制备。

其制备物产量高，可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。

操作步骤：1.样本处理a.组织匀浆：称取100~200mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等，PBS或生理盐水冲洗，洗净血水，滤纸吸干，用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。

加入1.0mL冰预冷的Lysis Buffer，0℃冰浴上下研磨组织20次；b.培养细胞匀浆：消化细胞，PBS洗涤，800g离心5~10min收集细胞，计数。

每次提取需要5×107个细胞，加入1.0mL冰预冷的Lysis Buffer重悬细胞，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，0℃冰浴研磨30~40次。

2.将组织或细胞匀浆物转移到离心管，4℃，1000g离心5min。

3.取上清，转移至新的离心管中，4℃，1000g再次离心5min。

4.取上清，转移至新的离心管中，4℃，12,000g离心10min。

离心后的上清含胞浆成分，可从中提取胞浆蛋白。

将上清转移到新离心管，线粒体沉淀在管底。

5.往线粒体沉淀中加入0.5mL Wash Buffer重悬线粒体沉淀，4℃，1000g离心5min。

6.取上清，转移至新的离心管中，4℃，12,000g离心10min。

弃上清，高纯度的线粒体沉淀在管底。

7.用50-100μL Store Buffer或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀，立即使用或-70℃保存。

注意事项：1.为保证获得完整的线粒体，务必做到：第一，全程低温操作；第二，快速；第三，在不破坏亚细胞器的情况下破碎细胞，这是制备线粒体的最关键环节。

荧光分光光度f7000细胞内钙离子浓度测定

荧光分光光度f7000细胞内钙离子浓度测定荧光分光光度法是一种常用的细胞内离子浓度测定方法之一，特别适用于测定细胞内钙离子浓度。

在本文中，将介绍荧光分光光度法测定细胞内钙离子浓度的原理、步骤和应用。

一、原理荧光分光光度法利用荧光探针与目标离子之间的相互作用，通过检测荧光强度来测定细胞内离子浓度。

荧光探针是一种能够与特定离子结合的化合物，当与离子结合时，荧光探针的荧光性质会发生改变，从而可以测量到荧光信号的强弱。

对于细胞内钙离子浓度的测定，通常会使用钙选择性荧光探针Fura-2或Fluo-3。

这两种荧光探针在与钙离子结合后，荧光发射峰会发生位移。

其中，Fura-2在结合钙离子后的荧光发射峰位移从380 nm至500 nm，而Fluo-3在结合钙离子后的荧光发射峰位移从510 nm至540 nm。

二、步骤1. 细胞处理：将待测细胞种植在培养皿中，使其附着于培养皿底部。

然后，用含有钙选择性荧光探针的培养基处理细胞，使荧光探针能够进入细胞内。

2. 荧光探针染色：将细胞孵育在荧光探针染色溶液中一段时间，确保荧光探针能够与细胞内的钙离子结合。

3. 荧光信号测定：使用荧光分光光度仪进行荧光信号测定。

将含有染色细胞的培养皿放置在荧光分光光度仪样品舱中，选择相应的激发波长和检测波长，然后开始记录荧光信号。

4. 数据分析：使用荧光分光光度仪软件对测得的荧光信号进行数据分析。

根据荧光信号的强度，可以计算出细胞内钙离子的浓度。

三、应用荧光分光光度法测定细胞内钙离子浓度在许多生物学研究领域都有广泛的应用。

1. 生物医学研究：钙离子是细胞内重要的信号转导分子，参与调节许多生理过程，如细胞增殖、迁移、分化等。

测定细胞内钙离子浓度可以揭示这些生理过程的调节机制。

例如，在研究神经元突触传递过程中，测定细胞内钙离子浓度可以了解神经元活动的程度和时间。

2. 药物筛选：荧光分光光度法可以在药物筛选过程中用于测定药物对细胞内钙离子浓度的影响。

普利莱基因技术线粒体提取试剂盒说明书

升级版线粒体提取试剂盒C0010描述：线粒体制备试剂盒(Mitochondria Isolation Kit)用于从组织或培养细胞中分离线粒体和细胞胞浆成分。

加入分离溶液，匀浆破碎组织细胞，经过数次800g和12000g离心，在60分钟内即可分离出完整的线粒体和胞浆成分。

制备的线粒体具有很高的生物学活性，可进行各种功能研究如酶学测定，更可用于Western Blot、2D-胶、线粒体蛋白或DNA提取、蛋白质组学等研究。

严格按照说明操作，总是能制备获得高纯度线粒体。

一篇方法学研究论文发现，用普利莱试剂盒制备线粒体的得率、活性、纯度优于蔗糖密度梯度离心法和Invotrogen/Pierce线粒体提取试剂盒方法。

适用：从组织、培养细胞制备高纯度线粒体，同时分离细胞胞浆成分。

组成：Mito Solution100ml for50次制备200ml for100次制备储存：−20ºC12个月有效操作步骤：以下所有操作均在4ºC进行1.组织匀浆：100~200mg新鲜组织如肝、脑、肾、心肌等，剪为0.5cm2碎块放入小容量玻璃匀浆器内。

估计组织块总体积。

加入1.5ml冰预冷的Mito Solution。

用间隙严紧的研杵上下研磨组织20次。

培养细胞匀浆：800×g5min离心收集细胞。

单次提取需2-5×107个细胞。

加入1.5ml冰预冷Mito Solution 重悬细胞，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，用间隙严密的研杵研磨细胞30次。

2.将匀浆液转移到离心管中，800×g，4ºC离心5min。

（胞核、膜碎片、未裂解细胞等在管底，弃去）3.收集上清液并转移到新的离心管。

再次800×g离心5min at4ºC，弃沉淀。

4.将上清液转移到新的离心管。

10,000×g离心10min4ºC。

线粒体沉淀在管底。

离心后的上清含胞浆成分，可收集用于对照实验。

纯化线粒体呼吸控制率RCR定量检测试剂盒说明书

活体细胞线粒体形态/活性荧光染色试剂盒
植物组织线粒体形态/活性荧光染色试剂盒
真菌/酵母细胞线粒体形态/活性荧光染色试剂盒
活体细胞线粒体跟踪试剂盒活体细胞线粒体长期跟踪试剂盒
全血线粒体 DNA 萃取试剂盒纯化线粒体 DNA 萃取试剂盒细胞/组织线粒体 DNA 萃取试剂盒细胞/组织基因组/线粒体 DNA 同步萃取试剂盒动物血小板线粒体 DNA 萃取试剂盒真菌/酵母细胞线粒体 DNA 萃取试剂盒植物线粒体 DNA 萃取试剂盒动物硬组织线粒体 DNA 萃取试剂盒非突触体脑组织线粒体分离试剂盒植物线粒体粗提分离试剂盒植物活性线粒体分离试剂盒植物高质纯化线粒体分离试剂盒真菌/酵母细胞线粒体粗提分离试剂盒真菌/酵母细胞活性线粒体分离试剂盒真菌/酵母细胞高质纯化线粒体分离试剂盒细胞 ATP 生物发光法定量检测试剂盒纯化线粒体蛋白质浓度定量测定试剂盒动物血小板线粒体粗提分离试剂盒动物血小板活性线粒体分离试剂盒动物血小板高质纯化线粒体分离试剂盒动物全血线粒体粗提分离试剂盒动物全血活性线粒体分离试剂盒动物全血高质纯化线粒体分离试剂盒超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒线粒体超氧化物歧化酶（Mn/Fe SOD）分离试剂盒超氧化物歧化酶（SOD）标准曲线测定试剂盒纯化线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒细胞/组织线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒真菌/酵母细胞线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒植物线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒全血线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒
技术背景
线粒体是细胞呼吸链和氧化磷酸化的中心。电子传递和ATP合成通过质子梯度偶联成一体。线粒体结构完整，功能正常，底物充分，电子传递形成的质子梯度不断被消耗，电子得以顺畅传递，氧气快速消耗，其耗氧率大，为III态呼吸。ADP耗竭，质子梯度不能消耗，阻碍电子传递，氧气消耗减少，为IV态呼吸。呼吸控制率（respiratory control ratio或respiratory control index；RCR），又称呼吸调节比，是指III态（加入ADP）的呼吸速率与IV态（ADP耗竭）的呼吸速率之比。正常线粒体的RCR为3至10：RCR降低意味着线粒体ATP 合成功能损伤，呼吸障碍；RCR增高意味着细胞活动旺盛，代谢加快。

Ionomycin (钙离子载体) 商品说明书

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线：400-168-3301或800-8283301订货e-mail：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站微信公众号Ionomycin (钙离子载体)产品编号产品名称包装S1672-250nmol Ionomycin (钙离子载体) 5mM×0.05mlS1672-1μmol Ionomycin (钙离子载体) 5mM×0.2mlS1672-5mg Ionomycin (钙离子载体) 5mg产品简介：本Ionomycin为Ionomycin calcium，是一种常用的钙离子载体，可以高度选择性结合钙离子(Ca2+> Mg2+>> Ba2+)，并且比A23187的效果要好很多。

Ionomycin在pH7.0和9.5直接可以结合钙离子，并产生较强的紫外吸收。

Ionomycin常用于转运钙离子穿过各种生物膜。

加入Ionomycin最常用于提高细胞内的钙离子水平。

通过提高细胞内钙离子水平，Ionomycin可以诱导神经细胞发生细胞凋亡，可以诱导一些细胞产生cell cycle arrest，也可以产生多种由于细胞内钙离子水平升高而产生的其它生物功能。

Ionomycin分子量为747.07，分子式为C41H70CaO9，CAS Number：56092-82-1。

本产品纯度大于98%。

本Ionomycin为进口分装，其中5mM包装产品用DMSO配制，有0.05ml和0.2ml两种包装。

5mg包装为粉末装。

包装清单：产品编号产品名称包装S1672-250nmol Ionomycin (钙离子载体) 5mM×0.05mlS1672-1μmol Ionomycin (钙离子载体) 5mM×0.2mlS1672-5mg Ionomycin (钙离子载体) 5mg—说明书1份保存条件：-20ºC避光保存，一年有效。

线粒体复合体Ⅰ活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4580

线粒体复合体Ⅰ活性检测试剂盒说明书微量法货号：UPLC-MS-4580规格：100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体75mL×2瓶4℃保存试剂一液体20mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1支4℃保存试剂三粉剂×1支-20℃保存试剂四粉剂×1瓶-20℃保存溶液的配制：1、试剂二：临用前加入1mL丙酮；2、试剂三：溶于1mL丙酮，可分装后-20℃保存。

临用前再用丙酮100倍稀释后使用，现用现配；3、试剂四：临用前加入2mL蒸馏水，现配现用；4、工作液的配制：临用前将试剂二和试剂三1:1混合，现配现用。

产品说明：复合体Ⅰ（EC1.6.5.3）又称NADH-CoQ还原酶或NADH脱氢酶，广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中，是线粒体内膜中最大的蛋白复合物。

该酶催化一对电子从NADH传递给CoQ，同时可使O2还原生成O2-，是呼吸电子传递链上产生O2-的主要部位。

测定该酶活性，不仅可以反映呼吸电子传递链（ETC）状态，而且可以反映活性氧（ROS）生成状态。

复合体Ⅰ能够催化NADH脱氢生成NAD+，在340nm下测定NADH的氧化速率计算出该酶活性的大小。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板（UV版）、研钵/匀浆器、丙酮、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1.称取约0.1g组织或收集500万细胞，加入1.0mL提取液，用匀浆器或研钵于冰上匀浆。

2.4℃600g离心10min。

将上清液移至另一离心管中，4℃11000g离心15min。

3.上清液即胞浆提取物，可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ（此步可选做，可以判断线粒体提取效果）。

活体细胞线粒体损伤氧化荧光测定试剂盒产品说明书中文版

12052胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（12024活体细胞线粒体损伤/氧化荧光测定试剂盒产品说明书（中文版）主要用途活体细胞线粒体损伤/氧化荧光测定试剂是一种旨在通过特异性染色剂分析线粒体膜心磷脂的变化来定性或定量测定线粒体内含质量以及自由基、氧化物等对细胞线粒体的毒性与损伤作用的权威而经典的技术方法。

该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。

可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。

产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定。

技术背景心磷脂（Cardiolipin ）是线粒体膜上的主要成分之一。

它对细胞氧化特别敏感。

线粒体脂类分解，致使心磷脂显著减少，最终造成线粒体的严重损害。

Nonyl-Acrydine Orange （NAO ）是一种可自由通过细胞膜的染色剂，特异性地染色线粒体上的心磷脂，并发出荧光。

一旦线粒体膜质量减少或受到损害以及被氧化，其荧光显著减弱。

产品内容清理液（Reagent A ）毫升染色液（Reagent B ）微升稀释液（Reagent C ）毫升保存液（Reagent D ）毫升产品说明书1份保存方式保存染色液（Reagent B ）在－20℃冰箱里，避免光照，其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月用户自备）：用于细胞脱离完全细胞培养液（）：用于细胞操作所需的培养基 15毫升锥形离心管：用于细胞操作的容器 1.5毫升离心管：用于细胞染色的容器血细胞计数仪：用于细胞计数台式离心机：用于沉淀细胞细胞流式仪：用于细胞荧光分析比色皿：用于细胞荧光分析的容器荧光显微镜：用于观察荧光细胞荧光分光光度仪或荧光酶标仪：用于细胞荧光定量分析ＨＬＨＬ实验步骤一、脱离或悬浮细胞分析实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（Reagent B）置入冰槽里融化，稀释液（Reagent C）放进37℃恒温水槽里预热。

然后移出xx微升染色液（Reagent B）到新的1.5毫升离心管，加入xx微升稀释液（Reagent C），混匀后，将染色工作液置入暗室里。

线粒体钙离子浓度检测方法

线粒体钙离子浓度检测方法简介线粒体是细胞内的一个重要细胞器，参与调控多种细胞生理过程。

其中，钙离子作为一个重要的细胞信号分子，在线粒体内发挥着重要的调控作用。

因此，准确测量线粒体内的钙离子浓度对于研究线粒体功能和疾病机制具有重要意义。

本文将介绍几种常用的线粒体钙离子浓度检测方法。

1. 荧光染料法荧光染料法是目前最常用的线粒体钙离子浓度检测方法之一。

该方法利用特定的荧光染料与钙离子结合后发生荧光信号变化，从而间接测量线粒体内的钙离子浓度。

1.1 常用的荧光染料常用的线粒体钙离子荧光染料有Rhod-2、Fluo-4、Calcium Green等。

这些荧光染料具有高选择性和敏感性，能够准确测量线粒体内的钙离子浓度。

1.2 染料进入线粒体的方法染料进入线粒体的方法有多种，常用的方法包括直接注射、细胞质外染料处理和细胞质内染料处理等。

其中，直接注射法是最常用的方法，可以直接将荧光染料注射到线粒体内，使其与线粒体内的钙离子结合。

1.3 荧光信号的检测与分析荧光信号的检测与分析通常使用荧光显微镜或流式细胞仪等设备进行。

荧光信号的强度与线粒体内钙离子浓度呈正相关关系，通过测量荧光信号的强度变化，可以间接测量线粒体内钙离子的浓度。

2. 电化学法电化学法是另一种常用的线粒体钙离子浓度检测方法。

该方法利用电化学技术测量线粒体内钙离子的浓度，具有高灵敏度和高特异性的优点。

2.1 利用电极测量电化学法中，常用的方法是利用电极测量线粒体内的钙离子浓度。

通过将电极插入细胞内，测量电极与线粒体内钙离子之间的电位差，可以间接测量线粒体内钙离子的浓度。

2.2 电化学信号的分析电化学信号的分析通常使用电化学仪器进行。

通过记录电极与线粒体内钙离子之间的电位差随时间的变化，可以推断线粒体内钙离子浓度的变化情况。

3. 光学显微法光学显微法是一种直接观察线粒体内钙离子浓度变化的方法。

该方法通过观察线粒体内钙离子与荧光染料结合后的荧光强度变化，直接反映线粒体内钙离子浓度的变化。

钙离子荧光指示剂——钙黄绿素说明书

钙离子荧光指示剂——钙黄绿素说明书
钙黄绿素（Calcein），也就是大家所熟知的fluorescein（钙黄绿素）、荧光素复合物；是一种激发光波长在495nm处，发射光波长在515nm处的钙离子荧光指示剂。

在其浓度大于100 mM时，钙黄绿色荧光自我淬灭。

它常被用做络合物指示剂，用来滴定EDTA螯合的钙离子，并且用荧光检测法测定钙离子浓度。

它具有非常好的水溶性，其质子解离常数（酸度系数）pKa1=2。

1，pKa2=2。

9，pKa3=4。

2，pKa4=5。

5，pKa5=10。

8和pKa6=11。

7。

Calcein-AM 是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，Calcein-AM由于在Calcein（钙黄绿素）的基础上加强了疏水性，因此能够轻易穿透活细胞膜。

当其进入到细胞质后，酯酶会将其水解为Calcein（钙黄绿素）留在细胞内，发出强绿色荧光。

与其它同类试剂（如BCECF-AM和Carboxy-fluorescein diacetate）相比，Calcein-AM是最适合作为荧光探针去染活细胞的，因为它的细胞毒性很低。

AAT Bioquest Inc。

致力于光谱学检测领域，包括显色、荧光和生物发光技术。

帮助科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。

艾美捷科技是AAT 的中国代理商，为您提供优质的钙黄绿素。

细胞线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）

细胞线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）细胞线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途细胞线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂是一种旨在通过线粒体钙离子特异性荧光探针Rhod-2，与钙离子结合后，其荧光强度显著增强，在荧光分光光度仪下观察相对荧光峰值的变化，来测定细胞线粒体中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。

该技术经过精心研制、成功实验证明的。

其适用于各种活体细胞（动物、人体等）内线粒体钙离子的浓度检测。

产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。

技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质，占1150克。

其中99％的钙以氟磷灰石钙（calcium fluorophosphate apatite）形式存在于骨组织中。

非骨组织钙成分主要存在于细胞内。

钙具有两种主要形式：一种是非弥散型蛋白结合钙，其构成约40％至50％的血清中的总钙含量；另一种为弥散型游离钙，其进一步分成具有活性的复合钙（complexed calcium）和离子钙（ionized calcium）。

钙对神经肌肉兴奋性（neuromuscular excitability）、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。

在细胞内，钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。

其中线粒体钙离子在调节线粒体代谢、保持线粒体的A TP产量达到细胞需求，维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。

线粒体钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法（flame photometry）、原子吸收分光光度法等技术，但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰，或者受限于仪器的特殊的要求，以及需要线粒体纯化。

Rhod-2，罗丹明123（rhodamine 123）的衍生产物，一种与钙离子结合产生荧光，同时其正电荷特性，特异性地聚集在线粒体里，由此用于测定线粒体内钙离子水平。

在荧光分光光度仪下，激发波长550nm，散发波长590nm，来定量测定线粒体的钙浓度。

钙离子(Ca)测定试剂盒(邻甲酚酞络合酮法)产品技术要求利德曼

钙离子（Ca）测定试剂盒（邻甲酚酞络合酮法）适用范围：本产品用于体外定量测定人体血清中钙离子的含量。

1.1规格试剂1（R1）：2×60mL、试剂2（R2）：2×20mL；试剂1（R1）：2×60mL、试剂2（R2）：2×12mL；试剂1（R1）：4×60mL、试剂2（R2）：2×40mL；试剂1（R1）：3×40mL、试剂2（R2）：3×10mL；试剂1（R1）：2×300mL、试剂2（R2）：1×200mL；试剂1（R1）：2×80mL、试剂2（R2）：2×16mL；试剂1（R1）：5×60mL、试剂2（R2）：5×12mL；试剂1（R1）：2×45mL、试剂2（R2）：2×15mL；试剂1（R1）：1×60mL、试剂2（R2）：1×12mL；试剂1（R1）：1×45mL、试剂2（R2）：1×15mL；试剂1（R1）：1×15mL、试剂2（R2）：1×5mL；272T:【试剂1（R1）:48.96mL、试剂2（R2）：16.32mL】；68T:【试剂1（R1）:12.24mL、试剂2（R2）：4.08mL】。

校准品（选配）：1×3mL。

1.2 组成试剂盒由试剂、校准品（选配）组成。

试剂1：乙醇胺：0.5mol/L；稳定剂：0.1%；试剂2：盐酸： 50mmol/L；邻甲酚酞络合剂：0.35mmol/L；8-羟基喹啉：15.17mmol/L；校准品：单个水平的液体校准品，在水基质中添加碳酸钙（纯度：大于95%）。

定值范围：（2.0-3.0 ）mmol/L2.1 外观液体双试剂：R1：无色透明液体，R2：黄色透明液体。

校准品：无色澄清液体。

2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。

细胞内钙离子的检测方法

2、将 BBcellProbeTM F3 染色工作液加入细胞，在 37℃孵育 20 分钟。 3、加入 5 倍体积的含有 1%胎牛血清的 HBSS，再继续孵育 40 分钟。 4、用 PBS 或 HBSS 洗涤细胞 2-3 次。用 HBSS 重悬细胞 5、 37℃下孵育 10 分钟，然后用该细胞进行荧光钙离子检测。激发波长 488-506nm，发射
产品说明书
细胞内钙离子检测试剂盒（BBcellProbeTM F3 法）
产品组成：
产品编号规格
钙离子染色液
BB-48112-1 50 -500T 25ul
BB-48112-2 100 -1000T
50ul
储存条件： -20℃避光保存。
有效期：一年。
注意事项： ● 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。 ● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。 ● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。 ● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。 ● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。 ● 钙离子染色液为 DMSO 溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。 ● 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
定最佳条件。以下方法仅供参考。 ● 可以在染色溶液中加入等体积的 20% Pluronic F127 溶液，Pluronic F127 可以帮助 BBcellProbeTM
F3 更快进入细胞，不建议在 Pluronic F127 中长期保存 BBcellProbeTM F3 溶液。