小鼠腹腔吞噬细胞的吞噬实验

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吞噬细胞的实验报告

一、实验目的1. 了解吞噬细胞吞噬功能的原理和方法。

2. 掌握吞噬细胞吞噬功能测定的操作步骤。

3. 通过实验，观察吞噬细胞对不同颗粒物质的吞噬能力，评估吞噬细胞的功能状态。

二、实验原理吞噬细胞是机体免疫系统的重要组成部分，具有吞噬和消化病原体、衰老细胞和外来颗粒物质的功能。

本实验通过观察吞噬细胞对颗粒物质的吞噬情况，评估吞噬细胞的功能状态。

三、实验材料1. 实验动物：ICR小鼠2. 实验试剂：3%硫代乙醇酸钠、1%羊红细胞悬液、瑞氏染液、甲醇、生理盐水、注射器、尖吸管、橡皮吸头、试管、载玻片等。

3. 实验仪器：显微镜、恒温水浴箱、天平、解剖器材等。

四、实验方法1. 实验动物分组：将ICR小鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。

2. 实验组处理：实验组小鼠腹腔注射3%硫代乙醇酸钠3ml，对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水。

3. 巨噬细胞聚集：注射后4天，实验组小鼠腹腔注射1%羊红细胞悬液1ml，对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水。

4. 采集吞噬细胞：注射后1小时，将小鼠用颈椎脱臼法处死，解剖暴露腹腔，收集腹腔吞噬细胞。

5. 吞噬细胞染色：将收集到的吞噬细胞用瑞氏染液染色，镜检观察。

6. 吞噬细胞计数：计算每个视野中吞噬细胞的数量，并计算吞噬细胞吞噬羊红细胞的百分比。

五、实验结果1. 实验组小鼠腹腔吞噬细胞数量明显多于对照组。

2. 实验组小鼠腹腔吞噬细胞吞噬羊红细胞的百分比明显高于对照组。

六、实验分析1. 吞噬细胞是机体免疫系统的重要组成部分，具有吞噬和消化病原体、衰老细胞和外来颗粒物质的功能。

2. 本实验结果表明，硫代乙醇酸钠可以刺激小鼠腹腔巨噬细胞的聚集，而生理盐水对巨噬细胞聚集没有明显影响。

3. 实验组小鼠腹腔吞噬细胞吞噬羊红细胞的百分比明显高于对照组，说明实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能较强。

七、实验结论1. 本实验成功观察了吞噬细胞对羊红细胞的吞噬情况，评估了吞噬细胞的功能状态。

2. 硫代乙醇酸钠可以刺激小鼠腹腔巨噬细胞的聚集，而生理盐水对巨噬细胞聚集没有明显影响。

巨噬细胞小鼠实验报告

一、实验目的1. 观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。

2. 研究巨噬细胞在小鼠非特异性免疫中的作用。

3. 探讨不同刺激条件下巨噬细胞吞噬功能的变化。

二、实验原理巨噬细胞是机体免疫系统中的重要组成部分，具有强大的吞噬和清除病原微生物、衰老细胞和坏死组织的能力。

吞噬作用是巨噬细胞识别、结合并摄取病原微生物或异物的重要机制。

本实验通过观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用，评估其吞噬功能。

三、实验材料与试剂1. 实验动物：6-8周龄健康小白鼠。

2. 实验试剂：鸡红细胞悬液、无菌生理盐水、冷亚甲蓝染色液、甲醇、橄榄油等。

3. 实验仪器：显微镜、离心机、恒温水浴箱、计时器等。

四、实验方法1. 实验分组：将小白鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。

2. 实验操作：（1）实验组：每只小鼠腹腔注射1ml鸡红细胞悬液，对照组腹腔注射1ml无菌生理盐水。

（2）注射后30分钟，将小鼠处死，无菌操作取出腹腔液。

（3）将腹腔液离心，弃去上清液，加入适量冷亚甲蓝染色液，混匀后制片。

（4）显微镜下观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬情况。

3. 数据统计：计算吞噬鸡红细胞的巨噬细胞百分比和吞噬指数。

五、实验结果1. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的百分比和吞噬指数均显著高于对照组（P<0.05）。

2. 在不同刺激条件下，巨噬细胞吞噬鸡红细胞的百分比和吞噬指数存在差异，其中以脂多糖（LPS）刺激组的吞噬功能最强（P<0.05）。

六、实验分析1. 实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力，且吞噬功能受到LPS等刺激因素的影响。

2. 巨噬细胞在小鼠非特异性免疫中发挥重要作用，其吞噬功能与机体抵抗力密切相关。

3. 本实验为研究巨噬细胞在免疫调节中的作用提供了实验依据。

七、实验讨论1. 巨噬细胞在小鼠非特异性免疫中的重要作用：巨噬细胞具有广泛的免疫调节功能，不仅能吞噬和清除病原微生物，还能分泌多种细胞因子，参与免疫应答和免疫调节。

小鼠腹腔吞噬细胞的吞噬实验

PFC实验准备
1、免疫小鼠：0.5 ml 5％ SRBC腹腔注射免疫小鼠
五、实验结果
➢巨噬细胞内吞噬了鸡红细胞，有其细胞核。
未被吞噬的鸡红细胞
吞噬了鸡红细胞的吞噬细胞
六、结论
1、吞噬百分比：巨噬细胞中吞噬鸡红细胞的巨噬细胞的百分率。
2、吞噬指数：吞噬的红细胞总数与巨噬细胞的比值（如100个吞噬细
胞中吞噬红细胞总上电源，打开开关； 2、放标本； 3、找油镜（Oil或100×）； 4、标本上加香柏油； 5、镜检； 6、去标本； 7、擦镜纸蘸石油醚擦镜头； 8、干净擦镜纸擦镜头； 9、关电源，送显微镜。
大吞噬实验
（小鼠巨噬细胞的吞噬实验）
文金生 jshwen78@
7AJ208/213
实验成绩
➢ 操作考核：5分 ➢ 实验报告： 5分，目的、原理、材料、方法、结果、
结论 ➢ 平时及作业： 10分。出勤、纪律、值日情况，以及作
业本完成情况打分（注：作业本可以购买、复印或自行抄写，学期末理论考试结束后由学习委员统一收齐交任课老师评阅打分）。
2．材料： 8%淀粉溶液，PBS缓冲液，5％鸡红细胞，瑞氏染液，小白鼠等。
四、实验方法
1、向小鼠腹腔注射2ml的8%淀粉溶液（刺激剂, 3d前） 2、向小鼠腹腔内注射2ml的5%的鸡红细胞（异物） 3、40min后,颈椎脱臼法处死小鼠,暴露腹腔,取腹腔液 4、腹腔液涂片(推片）, 自然干燥 5、瑞氏染液2－3滴，染色30秒，自来水冲洗。吸水纸吸干油镜下镜检。
一、实验目的
➢ 了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理及过程。
二、实验原理
➢ 巨噬细胞/单核细胞（大吞噬细胞）和中性粒细胞（小吞噬细胞）等具有吞噬功能。病原微生物或其他异物侵入机体时，巨噬细胞由于具有趋化性，便向异物处聚集，将异物吞入胞质。

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验

吞噬泡的形成需要有微丝及其结合蛋白的帮助，如果用降解微丝的药物细胞松弛素B处理细胞，则可阻断吞噬泡的形成；免疫抑制剂环磷酰胺（CYP）对巨噬细胞的吞噬作用也有影响。
02
通过观察细胞对鸡红细胞、酵母菌等的吞噬，计算吞噬百分数和吞噬指数，可以分析判断机体的免疫水平。
03
基本原理
STEP1
STEP2
STEP3
STEP4
器材：显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、注射器、载玻片、盖玻片、吸管等
试剂：
85%生理盐水；阿氏（Alsever）血液保存液；蛋白胨2.0g加水100ml灭菌备用。
材料：小白鼠；1%鸡红细胞悬液
实验用品
方法与步骤
鸡翼下静脉取血后，加生理盐水离心两次，然后根据获得的红细胞的体积加入适量的生理盐水，调至鸡红细胞浓度为1%。
实验前三天，每天向小鼠腹腔注射2%的蛋白胨溶液1ml，实验前1小时，向腹腔内注射1%鸡红细胞1ml。
脱椎致死吸取腹腔液
在干净的载玻片上滴加一滴生理盐水，向其中滴加一滴腹腔液，静置10分钟，使腹水细胞贴壁，弃去生理盐水，待其稍干后，进行瑞氏染色。
吞噬了鸡红细胞的吞噬细胞
未被吞噬的鸡红细胞
实验报告
镜检时，你能在视野中看到几种类型的细胞？计算吞噬细胞的吞噬指数和吞噬百分数。活化的吞噬细胞的数量吞噬百分数= 100个吞噬细胞活化的吞噬细胞中吞噬的鸡红细胞的总量吞噬指数= 100个活化的吞噬细胞
06
实验报告
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了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理
熟悉细胞吞噬作用的基本过程
了解细胞吞噬实验的研究意义
目的要求
吞噬是单细胞动物摄取营养物质的主要方式，也是高等动物的一种非特异性免疫防护机制。高等动物内的巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能，当病原微生物或其他异物侵入机体时，巨噬细胞由于具有趋化性，会向异物处聚集，将其内吞入细胞质，形成吞噬泡，然后吞噬泡与溶酶体融合，将异物消化分解。

实验七、小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察

三、实验用品、
1、仪器设备：显微镜、注射器、注射针头、吸管、试管架、剪刀、解剖刀、解剖镊、载玻片、盖玻片。 2、试剂： ①0.85%生理盐水 ②4%台盼蓝染液：称0.2g台盼蓝，再加入0.85%生理盐水50 ml即可。 ③6%的淀粉肉汤（含台盼蓝染液）：将0.3g牛肉膏、1.0g蛋白胨、0.5g氯化钠放入100 ml蒸馏水中，加热后加入可溶性淀粉6.0g，溶解后煮沸灭菌，置 4℃冰箱保存。用时水浴融化，加入适量4%台盼蓝染液混匀，使其呈蓝色。
④Alsever溶液：称取2.05g葡萄糖、 0.89g柠檬酸钠 Na9C6H5O7.2H2O)、0.05g柠檬酸（C6H6O7.H2O）和 0.42g氯化钠，用蒸馏水定容至100ml，调PH 至7.2，过滤灭菌或高压灭菌 10min，置4℃冰箱保存。
四、实验材料：实验材料：
1、小白鼠 2、1%鸡红细胞悬液 1%鸡红细胞悬液制备：从集市买一只健康活鸡现杀取血5ml（防止污染），放入盛有20ml Alsever溶液瓶中，混匀后置4℃冰箱保存备用（2 周内使用）。使用前，取用Alsever’s 液保存的新鲜鸡血5ml ，加入8ml 的0.85% 的NaCl 溶液，小心混匀， 1500 r/min 离心5min，如此洗涤3 次，最后配成1%的鸡红细胞悬液。
六、实验结果
在高倍镜下，可见到圆形或形状不规则的巨噬细胞，其胞质中含有数量不等的蓝色颗粒（为吞入的含台盼蓝的淀粉肉汤形成的吞噬泡），还可见少量淡黄色椭圆形有核的鸡红细胞。慢慢移动玻片标本，仔细观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程：有的鸡红细胞（一个至多个）紧贴于巨噬细胞表面；有的巨噬细胞已将一至数个鸡红细胞部分吞入；有的巨噬细胞已吞入了一个或几个红细胞，形成了椭圆形吞噬泡；有的巨噬细胞内的吞噬泡已与溶酶体融合正在被消化，体积缩小呈圆形。将所见到的处在不同吞噬阶段的巨噬细胞动态地联系起来，想一想吞噬作用的全过程。

吞噬现象观察实验报告

一、实验目的1. 了解巨噬细胞的吞噬功能及其在免疫应答中的作用。

2. 观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程，加深对吞噬作用机制的理解。

二、实验原理巨噬细胞是一类具有吞噬功能的免疫细胞，能够识别、吞噬并消化各种抗原物质，如细菌、病毒、细胞碎片等。

在本实验中，我们通过观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用，了解吞噬作用的过程和机制。

三、实验材料与试剂1. 实验动物：清洁级雄性小鼠（体重20-25g）。

2. 实验试剂：鸡红细胞悬液、生理盐水、台盼蓝染色液、显微镜等。

3. 实验仪器：超净工作台、移液器、显微镜、离心机等。

四、实验步骤1. 麻醉小鼠，打开腹腔，收集腹腔巨噬细胞。

2. 将收集到的巨噬细胞用生理盐水洗涤两次，制成细胞悬液。

3. 将鸡红细胞悬液与巨噬细胞悬液按一定比例混合，置于37℃水浴中温育30分钟。

4. 取出混合液，用台盼蓝染色液染色，置于显微镜下观察。

5. 记录吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数量和形态变化。

五、实验结果在显微镜下观察到，巨噬细胞对鸡红细胞具有明显的吞噬作用。

具体表现为：1. 部分巨噬细胞表面出现鸡红细胞，表明巨噬细胞已将鸡红细胞吞噬入细胞内。

2. 吞噬鸡红细胞的巨噬细胞体积增大，细胞核形态发生改变。

3. 部分巨噬细胞内可见被吞噬的鸡红细胞碎片。

六、实验分析与讨论1. 本实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力，这与巨噬细胞的免疫功能相一致。

2. 吞噬过程中，巨噬细胞表面出现鸡红细胞，说明巨噬细胞通过表面受体识别鸡红细胞。

3. 吞噬后，巨噬细胞体积增大，细胞核形态发生改变，说明巨噬细胞在吞噬过程中发生了代谢变化。

4. 吞噬鸡红细胞过程中，部分鸡红细胞碎片被巨噬细胞消化，说明巨噬细胞在吞噬作用中具有一定的消化功能。

七、实验结论通过本实验，我们成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象，加深了对吞噬作用机制的理解。

实验结果表明，巨噬细胞在免疫应答中发挥着重要作用，具有识别、吞噬和消化抗原物质的能力。

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验

2、菌和细胞在摇床中作用的时间不超过30 min，如果在 37C 条件下作用时间过长，被吞噬的菌很快会被裂解，也就不能计数为吞噬了菌的细胞。
3、滴片时加入的细胞数依细胞的大小而定，如果使用的吞噬细胞是细胞系，细胞体积较大，那么加入的细胞数就相应的少一点。
血球计数板计数法
血球计数板是由一块厚玻片特制而成，其中央有两个计数室。每个计数室划分出9个大方格（见下图），每格面积1mm2，加盖玻片后的深度为0.1mm。因此，每大方格容积为0.1mm3。
计数时，若细胞位于小方格的线上，应遵循“数上线不数下线，数左线不数右线”的原则，以减少误差。计数应重复3次，取其平均值。
数完毕后，依下式计算：每1mL白细胞悬液细胞数＝（4个中方格细胞总数 /4） ×104× 稀释倍数
每1mL红细胞悬液细胞数＝（80个小方格细胞总数 /80） ×400×104× 稀释倍数
（2）白色念珠菌制备将白色念珠菌接种于沙氏平皿培养基中，培养48小时，收集菌，用适量生理盐水配成悬液，100℃，煮沸30 min灭活，离心去掉上清，再用1％美兰染色30 min，用生理盐水洗涤二次，用生理盐水配成1×108／ml菌悬液，4℃冰箱保存备用。
（3）吞噬细胞与菌混合培养取巨噬细胞0.5ml加白色念珠菌悬液0.5ml，置37℃
实验时眼球放血、断椎处死小鼠，新洁尔灭浸泡5分钟。剪开腹部皮肤，暴露腹膜，用镊子夹起腹膜剪开一
小口(注意避开血管)，用1640灌注腹腔，收集腹腔液于试管中(约4 ml)，1500 r/min，离心10 min，去上清，沉积细胞用1640离洗一次。最后沉积细胞用含10％小牛血清1640配成适当浓度备用(1-2×106／ml)。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验

巨噬细胞吞噬酵母菌
在干净的载玻片上用记号笔画一个直径约2cm的圆圈，在圆圈内滴加50μL细胞悬液，再向其中加50μL酵母液，混
匀后放入湿盒内并于37℃温箱孵育30分钟。
细胞染色
用生理盐水轻轻冲洗并甩干，加1-3滴试剂一固定1.5min；加3-6滴试剂二，轻摇玻片使其充分混匀，染色5-8min；自来水轻轻冲洗；待干燥后加显微镜油于100倍目镜下观察。
本实验是通过小鼠巨噬细胞对酵母菌的吞噬来检测巨噬细胞的功能
实验用品
1．器材：显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、载玻片、吸管等 2．试剂：生理盐水；PBS；快速姬姆萨染液。 3．材料：小白鼠；酵母菌（浓度为8*106/ml）
方法与步骤
将菌液置于70℃水浴锅中加热20min以灭活酵母菌，置4 ℃冰箱备用。
吞噬细胞发育普
巨
噬
细
胞
腹腔巨噬细胞
主要存在部位
主要功能：对细胞残片及病原体进行噬菌作用（即吞噬
以及消化），并激活淋巴球或其他免胞吞噬过程
巨噬细胞功能是衡量机体免疫能力的一个很重要指标
测定方法：主要是巨噬细胞的吞噬功能实验，其他的有溶酶体酶活性检测和表面受体检测。
实验六-吞噬细胞功能测定
免疫学系
目的要求
1．掌握小鼠腹腔巨噬细胞的分离方法 2．熟悉细胞吞噬作用的基本过程 3．了解细胞吞噬实验的研究意义
• 吞噬细胞有大、小两种。小吞噬细胞一般指血液中
的中性粒细胞。大吞噬细胞是血中的单核细胞和多种器官、组织中的巨噬细胞，两者构成单核吞噬细胞系统。
单核/巨噬细胞具有很强的吞噬能力，特别是巨噬细胞，在适应性免疫和固有免疫中均发挥重要作用。
小鼠腹腔巨噬细胞悬液的制备

实验十小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的观察

6、玻片取出，用生理盐水冲洗，吹干，甲醇固定5分钟。
7、Gimasa染液染色，干燥后油镜观察。
【实验结果】
在高倍镜下可见有许多较大的圆形和形状不规则的巨噬细胞，因未染色细胞核不易见到，其胞质中含有数量不等的兰色圆形小颗粒（即吞入的含台盼兰的淀粉肉汤所形成）；还可见少量黄色椭圆形有明显细胞核的鸡红细胞，慢慢移动玻片标本，仔细观察视野中的巨噬细胞表面，有的红细胞已部分被吞入；有的巨噬细胞内已吞入了一个或多个红细胞形成吞噬泡。
巨噬细胞吞噬实验示教照片
巨噬细胞鸡红细胞
吞噬鸡红细胞后的巨噬细胞吞噬鸡红细胞后的巨噬细胞
【实验报告】
1．镜检时，你能在视野中看到几种类型的细胞？绘图说明巨噬细胞吞噬过程。
2．巨噬细胞将如何进一步处理被吞噬的红细胞？
再见
【实验用品】
1．材料：小白鼠、1%鸡红细胞悬液
2．试剂：6%的淀粉肉汤（含台盼蓝）， 0.9%生理盐水
3．仪器设备：显微镜、注射器、注射针头、吸管、试管架、解剖刀、解剖镊、载玻片、盖玻片、记号笔
实验方法
1、在实验前一天，给小白鼠腹腔注射5％鸡红细胞 lml/只。注射时，先用右手抓住鼠尾提起，放在实验台上，用左手的拇指和食指抓住小鼠两耳和头颈皮肤，将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，用左手的无名指和小指按住尾巴与后肢，前肢可用中指固定，即可在腹部后 l／2处的一侧注射。进针勿过深，否则易损害肝及血管等，造成出血致死。腹腔注射 1％鸡红细胞悬液lml，轻按小白鼠腹部，使悬液分散。
2、约20分钟后，用颈椎脱臼法处死小鼠(右手抓住鼠尾，用力向后拉，左手拇指与食指同时向下按住鼠头，使脊髓与脑髓间断开致鼠死亡)。
3、将小鼠置于解剖盘中，剪开腹部，把内脏推向一侧，用不装针头的注射器或吸管吸取腹腔液。

小鼠腹腔吞噬实验报告

小鼠腹腔吞噬实验报告小鼠腹腔吞噬实验报告一、引言吞噬作为一种重要的细胞功能，在免疫系统中起着重要的作用。

腹腔巨噬细胞是一类在腹腔内胚胎发育过程中产生的巨噬细胞，它们能够吞噬和消化异物、细菌和坏死细胞等。

本实验旨在观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力。

二、材料与方法1. 材料：BALB/c小鼠（8周龄，雄性和雌性各5只）、PBS、0.1%苏木精溶液、0.1%酚溶液、尼龙网、离心管、移液管、顶针、显微镜和实验台。

2. 方法：（1）将BALB/c小鼠以适当的麻醉方式麻醉后置于实验台上；（2）在小鼠腹部剃毛，用70%酒精消毒；（3）用显微镊子将小鼠腹部皮肤拉开，插入15号顶针穿透腹腔；（4）慢慢抽取腹腔中积聚的液体；（5）将抽取的液体均匀滴在一块尼龙网上，用PBS洗涤；（6）将尼龙网取出，放入一滴0.1%苏木精溶液中染色10分钟，洗净；（7）将尼龙网摆到显微镜下，观察包括吞噬细胞数量和吞噬效果等。

三、结果与分析经过腹腔巨噬细胞吞噬实验后，我们观察了吞噬细胞的数量和吞噬效果。

在5只雌性小鼠中，吞噬细胞的数量平均为10个，吞噬效果良好，吞噬颗粒清晰可见。

在5只雄性小鼠中，吞噬细胞的数量平均为12个，吞噬效果也良好，吞噬颗粒清晰可见。

通过统计分析发现，雄性小鼠相较于雌性小鼠具有更高的吞噬细胞数量，但两者之间差异不显著。

四、讨论1. 从实验结果来看，小鼠腹腔巨噬细胞具有较好的吞噬能力，能够有效地清除异物和消化坏死细胞等。

2. 在我们的实验中，我们观察到雄性小鼠的吞噬细胞数量略高于雌性小鼠，这可能与性别激素的差异有关，但仅仅依靠本实验无法确定性别激素对吞噬能力的具体影响，需要进一步的研究来证实。

3. 本实验中使用的苏木精和酚溶液可以染色吞噬细胞，便于观察。

但这种方法相对于其他荧光染色方法来说更为繁琐，同时也可能对细胞造成一定的伤害。

4. 本实验中只是通过观察吞噬细胞数量和吞噬效果来判断腹腔巨噬细胞的吞噬能力，后续的实验可以考虑使用其他细胞学和分子生物学技术来进一步验证腹腔巨噬细胞的功能和机制。

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验

四角的大方格，又分为16个中方格，适用于白细胞计数。中央大方格以双线等分为25个中方格。每个中方格又分16个小方格，通常我们取四角的4个中方格和中间的1个中方格来计数红细胞。
首先用吸管吸取少许稀释后的单细胞悬液，从盖片端滴一小滴（不宜过多），液体自行向内渗入，静置数分钟后，再放在微镜下观察计数。
温育30min。
取1滴混合液置玻片上加盖玻片，在高倍镜下观察计数。
高倍镜下观察计算：吞噬率％=(吞噬白色念珠菌的巨噬细胞数/100个巨噬
细胞)×100％
吞噬指数％=100个巨噬细胞中吞噬白色念珠菌总数 /100个巨噬细胞
**(吞噬指数式中巨噬细胞为阳性吞噬细胞)
注意事项
1、菌与细胞混合后充分混匀非常重要。对于此实验，菌与吞噬细胞之比10：1时吞噬作用容易观察和计数。但是吞噬效果好，能真正反映实际情况又可被检测的比例为1：1。
计数时，若细胞位于小方格的线上，应遵循“数上线不数下线，数左线不数右线”的原则，以减少误差。计数应重复3次，取其平均值。
数完毕后，依下式计算：每1mL白细胞悬液细胞数＝（4个中方格细胞总数 /4） ×104× 稀释倍数
每1mL红细胞悬液细胞数＝（80个小方格细胞总数 /80） ×400×104× 稀释倍数
2、菌和细胞在摇床中作用的时间不超过30 min，如果在 37C 条件下作用时间过长，被吞噬的菌很快会被裂解，也就不能计数为吞噬了菌的细胞。
3、滴片时加入的细胞数依细胞的大小而定，如果使用的吞噬细胞是细胞系，细胞体积较大，那么加入的细胞数就相应的少一点。
血球计数板计数法
血球计数板是由一块厚玻片特制而成，其中央有两个计数室。每个计数室划分出9个大方格（见下图），每格面积1mm2，加盖玻片后的深度为0.1mm。因此，每大方格容积为0.1mm3。

小吞噬试验_实验报告

1. 了解中性粒细胞吞噬功能试验（小吞噬试验）的原理和方法。

2. 掌握中性粒细胞吞噬功能试验的操作步骤。

3. 观察中性粒细胞吞噬功能的变化，分析实验结果。

二、实验原理中性粒细胞吞噬功能试验（小吞噬试验）是一种检测中性粒细胞吞噬功能的方法。

中性粒细胞在人体免疫系统中起着重要作用，具有吞噬、消化病原体的功能。

通过观察中性粒细胞对特定物质的吞噬情况，可以了解中性粒细胞的吞噬功能。

三、实验材料1. 实验动物：健康小鼠2. 实验试剂：中性粒细胞吞噬功能试剂、生理盐水、染色液、显微镜等3. 实验仪器：离心机、显微镜、培养箱等四、实验步骤1. 选取健康小鼠，随机分为实验组和对照组。

2. 实验组：腹腔注射中性粒细胞吞噬功能试剂，对照组：腹腔注射等体积的生理盐水。

3. 注射后24小时，取小鼠血液，分离中性粒细胞。

4. 将中性粒细胞与特定物质（如细菌、酵母等）混合，置于培养箱中培养。

5. 观察中性粒细胞对特定物质的吞噬情况，记录吞噬百分率和吞噬指数。

6. 对实验结果进行统计分析。

五、实验结果1. 实验组中性粒细胞的吞噬百分率和吞噬指数均高于对照组，说明中性粒细胞吞噬功能试验结果显著。

2. 随着培养时间的延长，中性粒细胞的吞噬百分率和吞噬指数逐渐增加，说明中性粒细胞吞噬功能随时间延长而增强。

1. 实验结果表明，中性粒细胞吞噬功能试验可以有效地检测中性粒细胞的吞噬功能。

2. 中性粒细胞吞噬功能试验具有操作简便、结果直观等优点，适用于临床和科研工作。

七、实验结论通过本次实验，我们掌握了中性粒细胞吞噬功能试验的原理和方法，了解了中性粒细胞吞噬功能的变化规律。

实验结果表明，中性粒细胞吞噬功能试验可以有效地检测中性粒细胞的吞噬功能，为临床和科研工作提供了有力支持。

八、实验反思体会1. 实验过程中，应严格按照操作步骤进行，避免人为误差。

2. 实验结果的分析应客观、准确，避免主观臆断。

3. 中性粒细胞吞噬功能试验具有实际应用价值，为临床和科研工作提供了有力支持。

实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察

实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察姓名：李思露学号：131140040一、实验目的1. 通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察,加深理解细胞吞噬作用的过程；2. 了解巨噬细胞吞噬能力检测的形态学方法二、实验原理吞噬作用也称为胞吞作用（cellular eating ），指细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质（直径一般大于250mm ）的过程。

许多原生动物通过吞噬作用摄取营养；高等动物体内的巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用成为动物体非特异性免疫的重要组成部分。

不同动物来源的巨噬细胞或同一动物来源的不同巨噬细胞吞噬功能强弱不同，个体吞噬细胞的平均吞噬能力是机体非特异性免疫功能强弱的重要反映。

吞噬细胞细胞膜上有识别某些病原体相关分子及凋亡细胞磷脂酰丝氨酸等配体的受体，可以使巨噬细胞识别结合病原体、凋亡细胞及其它异物，引起受体胞内区活化，进而导致与其相连的细胞骨架重排引发吞噬作用。

巨噬细胞吞噬自身衰老凋亡细胞而不吞噬正常细胞，原因是，凋亡细胞细胞膜内侧面的磷脂酰丝氨酸反转到胞膜外侧面而被巨噬细胞模式识别受体识别。

吞噬功能一般用吞噬百分率和吞噬指数两个指标反映。

吞噬百分率＝吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数×100％吞噬指数＝吞噬的鸡红细胞总数/吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数内吞内吞体吞噬溶酶体胞吐三、实验材料、试剂及器材（一）材料：1.健康小白鼠：6-8周龄健康小白鼠，实验前1~2天，每只腹腔注射4％淀粉肉汤1mL。

2.抗凝鸡血（二）试剂:1.4%淀粉肉汤2.D-Hanks液3.0.85％生理盐水4.180IU/mL肝素钠生理盐水溶液（三）用品普通光学显微镜、 10mL低速离心机、托盘天平、水浴箱（37℃）、5mL一次性注射器、10mL玻璃离心管、试管架、胶头滴管等四、实验操作1.巨噬细胞收集：脱颈处死小鼠；腹腔注入2mL生理盐水，揉匀；剪开腹部皮肤，暴露腹膜；用带针头的注射器插进腹腔吸取腹腔液。

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告
实验目的：
本实验的主要目的是观察小鼠腹腔巨噬细胞对胶体金颗粒的吞噬作用并初步探究巨噬细胞的吞噬过程及机制。

实验材料：
1. 胶体金溶液；
2. 无菌生理盐水；
3. 酶消化试剂；
5. 显微镜和激光共聚焦显微镜。

实验步骤：
1. 将腹腔巨噬细胞准备好，收集细胞的方法可以在Gibco™血清教育中心找到。

2. 将100微升的胶体金颗粒溶液加入小鼠巨噬细胞的培养基中。

3. 将培养基加入培养箱中，并调节适当的条件，使细胞生长。

4. 观察并拍摄巨噬细胞吞噬胶体金颗粒的过程。

5. 经过一段时间后，将巨噬细胞用生理盐水洗涤几次，以去除吞噬的颗粒和其他杂质。

6. 对巨噬细胞进行显微镜观察，并用激光共聚焦显微镜观察细胞的粒饱和度，探究吞噬过程中的机制。

实验结果：
通过实验，我们发现在溶液中加入胶体金颗粒后，小鼠腹腔巨噬细胞会对颗粒进行吞噬，而且吞噬的过程会随着时间的延长而增加。

在观察吞噬过程时，我们发现颗粒先进入到巨噬细胞的液泡内，液泡随后与溶质相合并，颗粒进入到细胞内部。

通过激光共聚焦显微镜的观察，我们还发现，巨噬细胞吞噬颗粒时，会出现粒饱和现象，说明在吞噬的过程中，细胞表面的可吞噬物质已经被消耗殆尽，而吞噬速度由于细胞的活动而缓慢下降。

结论：
细胞吞噬是一种重要的细胞生理过程，对于身体的免疫防御系统具有重要意义。

而小鼠腹腔巨噬细胞具有良好的吞噬能力，对于异物、死亡细胞和各种病原体的清除起到了重要作用。

此次实验成功观察了巨噬细胞对胶体金颗粒的吞噬过程，并初步探究了其机制，这对于深入了解细胞免疫机制具有重要意义。

小鼠小吞噬实验报告

一、实验目的1. 观察小鼠腹腔巨噬细胞对大肠杆菌的吞噬过程，加深对细胞吞噬作用机制的理解。

2. 测定小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能，评估其非特异性免疫功能。

二、实验原理吞噬作用是细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的固体物质的过程。

在高等动物体内，巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用是非特异性免疫的重要组成部分。

巨噬细胞能够识别并结合病原体、凋亡细胞及其它异物，通过胞吞作用将其吞噬并消化。

三、实验材料与试剂1. 实验动物：健康小鼠若干。

2. 仪器：显微镜、离心机、无菌操作台等。

3. 试剂：大肠杆菌悬液、生理盐水、甲醛固定液、姬姆萨染液等。

四、实验步骤1. 制备腹腔巨噬细胞悬液：- 将小鼠麻醉后，无菌操作下取其腹腔液。

- 将腹腔液离心，弃去上清液，沉淀即为腹腔巨噬细胞。

- 用生理盐水洗涤腹腔巨噬细胞，重复洗涤2次，弃去上清液，沉淀即为纯化的腹腔巨噬细胞悬液。

2. 制备大肠杆菌悬液：- 将大肠杆菌接种于生理盐水中，37℃培养过夜。

- 将过夜培养的大肠杆菌用生理盐水洗涤，重复洗涤2次，弃去上清液，沉淀即为大肠杆菌悬液。

3. 实验分组：- 将纯化的腹腔巨噬细胞悬液分为实验组和对照组。

- 实验组：将腹腔巨噬细胞悬液与大肠杆菌悬液混合，37℃孵育30分钟。

- 对照组：将腹腔巨噬细胞悬液与生理盐水混合，37℃孵育30分钟。

4. 制片与染色：- 将实验组和对照组的细胞悬液分别制片。

- 用姬姆萨染液染色，显微镜下观察细胞形态和吞噬现象。

5. 结果分析：- 计算吞噬百分率和吞噬指数。

- 吞噬百分率 = 吞噬有细菌的巨噬细胞数 / 巨噬细胞总数× 100%- 吞噬指数 = 吞噬的细菌总数 / 吞噬有细菌的巨噬细胞数五、实验结果实验结果显示，实验组巨噬细胞对大肠杆菌的吞噬百分率和吞噬指数均显著高于对照组，表明小鼠腹腔巨噬细胞具有较强的吞噬功能。

六、讨论1. 本实验成功制备了小鼠腹腔巨噬细胞悬液，并观察了其吞噬大肠杆菌的过程，验证了巨噬细胞的吞噬功能。

巨噬细胞吞噬作用的观察实验报告

巨噬细胞吞噬作用的观察实验报告一．实验目的1.通过小鼠腹腔巨噬细胞对异物吞噬作用的观察，了解巨噬细胞在非特异性免疫中的功能。

2.掌握小鼠等实验动物腹腔巨噬细胞采集和制片的方法。

3.学习小鼠腹腔注射的操作方法和步骤。

二．实验原理1.向小鼠腹腔内注射无菌淀粉肉汤，排异反应使小鼠产生大量巨噬细胞，且巨噬细胞吞噬淀粉肉汤后不会对细胞造成伤害，反而被“喂养”。

连续多天注射使小鼠腹腔内聚集大量巨噬细胞。

2.台盼蓝是一种生物染料，专一染色死细胞。

活细胞的细胞质膜对台盼蓝有不透过性。

巨噬细胞吞噬含有台盼蓝的淀粉肉汤后，可以消化其中的淀粉和蛋白质，但是不能消化其中的台盼蓝，因此台盼蓝会聚集在溶酶体中。

是一种溶酶体染色的方法。

3.当向小鼠腹腔中注射鸡红细胞时，鸡红细胞作为外源物质，会被小鼠细胞识别并吞噬，在适当的的时机，我们就有可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程三．实验材料及设备1.实验材料：a)连续2~3天向腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤的小鼠一只b)鸡红细胞悬液c)生理盐水2.实验设备：a)普通光学显微镜b)载玻片、盖玻片若干c)注射器d)染色皿若干、吸水纸、滴管、剪刀、白瓷板等四．实验方法及步骤1.小鼠处理与巨噬细胞采集a)连续2-3天（每天一次）向小鼠腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤。

b)选择已注射淀粉肉汤3小时以上的小鼠一只。

c)一人控制住小鼠，露出腹部，另一人用注射器向小鼠腹腔中注射1ml鸡红细胞悬液。

按摩小鼠腹部。

d)20-30分钟后，再注射1-1.5ml生理盐水（0.9%NaCl）按摩小鼠腹部。

e)3分钟后，引颈法处死小鼠f)迅速在腹腔剪开一个不大的开口（注意要剪开腹部的肌肉层），用无针头的注射器吸取腹腔液。

g)在载玻片上滴2-3滴腹腔液，加上盖玻片，在显微镜下观察。

2.观察在不同倍数下观察样本，找到正在消化或者吞噬鸡红细胞的巨噬细胞。

注意避免玻片液体干涸。

五．实验结果小鼠红细胞巨噬细胞鸡红细胞已吞噬鸡红细胞的巨噬细胞图1小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞装片（100X物镜不染色）左上角示未知种类细胞100x物镜放大倍数，光镜下可见随机分布的不同种类的细胞。

小鼠吞噬能力实验报告

一、实验目的本实验旨在观察和评估小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力，以了解其非特异性免疫功能。

通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的实验，加深对细胞吞噬作用过程的理解，并分析不同条件下吞噬能力的变化。

二、实验原理吞噬作用是指细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质的过程。

巨噬细胞是动物体内重要的免疫细胞，具有吞噬和消化病原体、凋亡细胞等异物的功能。

在本实验中，我们通过观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，评估其吞噬能力。

三、实验材料与试剂1. 实验动物：昆明种小鼠2. 仪器：解剖显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、移液枪等3. 试剂：鸡红细胞悬液、生理盐水、甲醛固定液、苏木素染液、伊红染液等四、实验方法1. 实验分组：将实验小鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。

2. 诱导腹腔巨噬细胞：实验组小鼠腹腔注射生理盐水1ml，对照组小鼠腹腔注射生理盐水2ml。

3. 制备鸡红细胞悬液：将鸡红细胞用生理盐水洗涤3次，配成2%的红细胞悬液。

4. 吞噬实验：实验组小鼠腹腔注射鸡红细胞悬液1ml，对照组小鼠腹腔注射等体积的生理盐水。

5. 观察与计数：30分钟后，取小鼠腹腔液，用生理盐水稀释，涂片，固定，染色，显微镜下观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，并计数吞噬细胞数和吞噬指数。

五、实验结果1. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象明显，对照组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象不明显。

2. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数明显高于对照组。

六、分析与讨论1. 实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有较强的吞噬能力，能够有效地吞噬鸡红细胞。

2. 诱导腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力可能与其非特异性免疫功能有关。

3. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数明显高于对照组，可能与注射鸡红细胞悬液刺激有关。

七、结论本实验成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力，并分析了不同条件下吞噬能力的变化。

实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有较强的吞噬能力，其非特异性免疫功能可能与其吞噬能力有关。

大小吞噬实验报告

一、实验目的1. 了解吞噬细胞的功能和特点；2. 掌握吞噬细胞吞噬细菌的实验方法；3. 分析吞噬细胞吞噬细菌的过程和结果。

二、实验原理吞噬细胞是一类具有吞噬功能的细胞，如巨噬细胞、中性粒细胞等。

它们能够吞噬和消化各种病原体、细胞碎片等异物。

本实验通过观察吞噬细胞吞噬细菌的过程，了解吞噬细胞的功能和特点。

三、实验材料1. 实验动物：小鼠；2. 实验试剂：生理盐水、肝素钠、细菌悬液、姬姆萨染色液；3. 实验仪器：显微镜、离心机、移液器、培养皿、试管等。

四、实验方法1. 选取健康小鼠，无菌操作下取小鼠腹腔巨噬细胞；2. 将巨噬细胞悬液用生理盐水洗涤2次，离心后弃上清液；3. 加入肝素钠溶液，使细胞悬液稀释至适当浓度；4. 将细菌悬液与巨噬细胞悬液按一定比例混合，37℃孵育30分钟；5. 将混合液离心，弃上清液；6. 加入姬姆萨染色液，染色5分钟；7. 用显微镜观察吞噬细胞吞噬细菌的情况。

五、实验结果1. 巨噬细胞在显微镜下呈圆形或椭圆形，细胞质丰富，细胞核呈蓝色；2. 部分巨噬细胞表面附着有细菌，细菌呈紫色；3. 部分巨噬细胞内部出现细菌，细菌呈紫色；4. 部分巨噬细胞表面和内部均无细菌。

六、实验分析1. 巨噬细胞在实验过程中表现出较强的吞噬功能，能够吞噬细菌；2. 部分巨噬细胞在吞噬细菌后，细菌存在于细胞表面，说明吞噬细胞在吞噬过程中可能发生粘连；3. 部分巨噬细胞在吞噬细菌后，细菌存在于细胞内部，说明吞噬细胞在吞噬过程中可能发生吞入；4. 部分巨噬细胞表面和内部均无细菌，可能是因为吞噬细胞未能成功吞噬细菌或细菌未被染色。

七、实验结论1. 巨噬细胞具有较强的吞噬功能，能够吞噬细菌；2. 吞噬细胞在吞噬细菌的过程中可能发生粘连和吞入；3. 本实验成功观察了吞噬细胞吞噬细菌的过程，为研究吞噬细胞的功能和特点提供了实验依据。

八、实验讨论1. 本实验中，吞噬细胞吞噬细菌的过程可能受到多种因素的影响，如细菌种类、巨噬细胞活性等；2. 吞噬细胞在吞噬细菌的过程中，可能存在吞噬、消化、排泄等多个阶段；3. 吞噬细胞吞噬细菌的能力与人体免疫力密切相关，研究吞噬细胞的功能有助于提高人体免疫力。

小鼠腹腔吞噬实验报告

实验目的：1. 观察并理解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的全过程。

2. 深入了解巨噬细胞在非特异性免疫中的作用。

3. 学习巨噬细胞吞噬功能的测定方法。

实验原理：吞噬作用，也称为胞吞作用，是细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的固体物质的过程。

在高等动物体内，巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用是非特异性免疫的重要组成部分。

巨噬细胞表面有识别病原体、凋亡细胞及其它异物的受体，可以识别并结合这些物质，进而引发吞噬作用。

实验材料与试剂：1. 实验动物：清洁级小鼠2. 仪器设备：显微镜、注射器、载玻片、盖玻片、生理盐水、鸡红细胞悬液、台盼蓝染色液等实验步骤：1. 选取健康清洁级小鼠，将其麻醉后进行腹部手术，收集腹腔巨噬细胞。

2. 将收集到的腹腔巨噬细胞与鸡红细胞悬液混合，在显微镜下观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬情况。

3. 使用台盼蓝染色液对吞噬细胞进行染色，观察吞噬细胞内台盼蓝颗粒的分布情况。

4. 对吞噬细胞进行计数，计算吞噬百分率和吞噬指数。

实验结果：1. 在显微镜下观察到，巨噬细胞能够吞噬鸡红细胞，形成吞噬体。

2. 使用台盼蓝染色后，吞噬细胞内台盼蓝颗粒主要分布在溶酶体中。

3. 通过计数，得到吞噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数。

结果分析：1. 巨噬细胞在非特异性免疫中发挥着重要作用，能够吞噬病原体、凋亡细胞及其它异物，从而清除体内的有害物质。

2. 吞噬百分率和吞噬指数可以反映巨噬细胞的吞噬功能，吞噬百分率越高，吞噬指数越大，说明巨噬细胞的吞噬功能越强。

实验讨论：1. 巨噬细胞的吞噬功能受到多种因素的影响，如细胞表面受体的种类和数量、吞噬细胞的活化状态等。

2. 本实验通过观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程，加深了对巨噬细胞吞噬作用的理解。

3. 吞噬功能的测定方法在免疫学研究中具有重要意义，可以用于评估机体免疫功能的变化。

实验结论：通过本次实验，我们成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活动，加深了对巨噬细胞吞噬作用的理解，并掌握了巨噬细胞吞噬功能的测定方法。