含量含有关物质方法总结计划学验证方案.docx

一般项目方法学验证方案

表一原料药检测项目及方法学验证方案

名称检测项目方法学验证

起始原料性状、溶解度、鉴别、比旋度（手残留溶剂、有关物质、含量

性中心）、干燥失重、炽灼残渣、

残留溶剂、重金属、有关物质、

含量

中间体性状、有关物质、纯度有关物质、纯度

API性状、溶解度、引湿性、熔点、残留溶剂、粒度、有关物质、含

比旋度（手性中心）、鉴别、干量

燥失重或水分、硫酸盐、氯化物、

重金属、炽灼残渣、残留溶剂、

粒度、晶型、有关物质、含量

表二片剂检测项目及方法学验证方案

名称检测项目方法学验证

片剂性状、鉴别、水分、重量差异、有关物质、溶出度、含量均匀度、

有关物质、溶出度、含量均匀度、含量、微生物限度

含量、微生物限度

表三有关物质方法学验证内容

名称有关物质色谱条件有关物质方法学验证HPLC

摸索

起始原料检测波长的初选、分分离度、仪器精密度、不加校正因子的主成

离度、检测波长的确LOD、溶液稳定性、空白分自身对照法

定干扰

中间体检测波长的初选、分分离度、仪器精密度、面积归一化法

离度、检测波长的确LOD、溶液稳定性、空白

定干扰

API检测波长的初选、分分离度、强制降解试验、不加校正因子的主成

离度、检测波长的确仪器精密度、 LOD、溶液分自身对照法

定稳定性、空白干扰、耐

用性

分离度、强制降解试验、加校正因子的主成分

系统适用性、仪器精密自身对照法

度、 LOD、LOQ、线性、

溶液稳定性、空白干扰、

耐用性

分离度、强制降解试验、外标法

系统适用性、仪器精密

度、方法精密度、中间

精密度、溶液稳定性、

空白干扰、 LOD、LOQ、

线性、回收率

表四有关物质色谱条件摸索

名称试验内容备注

检测波长的初选分别取各杂质及供试品加甲醇（或乙腈）溶解溶剂：能溶解供试品或各杂质的单一溶剂（可并稀释制成各约含 XXug/ml（一般 10ug/ml ）的向合成咨询溶剂及供试品或各杂质的溶解情

溶液，进行 UV扫描（ 200nm～400nm）况）

浓度：吸光度读数以在～之间为宜

色谱条件摸索（流动先查文献或各国药典API 的保留时间一般在 5～15min，主峰峰型好，相、色谱柱的摸索）理论板数 5000 以上。

API 的配制浓度：根据扫描结果

分离度分别取各杂质及供试品配成一定浓度，分别进杂质与主峰的分离度应大于

样。

分离度溶液：配制成含 API 的浓度及各杂质浓

度为 1%（ API 的有关物质测定浓度）（进 6 针）

检测波长的确定在流动相条件下进行 UV扫描

表五有关物质方法学验证具体内容

试验内容溶液配制方法溶液配制份数进样针数评定标准备注

系统适用性分别取供试品、各杂质适量，供试液 1份进 6 针杂质峰峰面积 RSD≤ %；杂质为订入标准中的加流动相超声溶解，并稀释保留时间 RSD≤ %；杂质

配制成约含供试品XXmg/ml杂质峰的拖尾因子≤；

和含杂质各 1%（相当于供试分离度及理论塔板数应符合质

品浓度 XXmg/ml）的混合溶液量标准的规定

作为系统适用性溶液。

方法专属性 1精密量取流动相供试液 1份每份各 1 针空白溶剂应无干扰；

精密度在规定的测试条件下，同一均质供试品，经多次取样进行一系列检测所得结果之间的接近程度（离散程度）

仪器精密度供试液及自身对照液自身对照液 1 份进 6 针峰面积 RSD≤ %

供试液仪器精密度供试液 1 进 6 针峰面积 RSD≤ %；

份保留时间 RSD≤ %

检测限供试品或杂质适量，用流动供试品溶液 1 份检测限 2 针；S/N ≥3 或 2。研究的所有杂质相溶解并逐级稀释

定量限供试品或杂质适量，用流动供试品溶液 1 份定量限 6 针；S/N ≥10。主成分及杂质峰保留外标法测定的杂质相溶解并逐级稀释时间的相对标准差应不大于%，

峰面积的相对标准差应不大

于 %。

溶液稳定性供试液供试液 1 份0、 1 、2、4、6 、8、24主成分的含量变化的绝对值

小时各进 1 针≤ %；

杂质含量的绝对值在±％以

内，

并不得出现新的大于报告限度

的杂质

峰面积及峰面积的归一化含量

耐用性供试液调流动相 pH 变化±1份供试液和 1 份系统主峰的拖尾因子不得大于；

系统适用性溶液调流动相配比变化±5 %适用性溶液，各条件下进主峰与杂质峰必须达到基线分

柱温± 5℃（如有柱温）2针离；主峰与杂质峰分离度符合质

不同（批号）色谱柱量标准；

流速相对值变化± 20％各条件下的峰面积 RSD 符合规

缓冲液中盐的浓度± 10％定；

杂质含量的绝对值在±％以内

方法精密度供试液供试液 6 份供试品进 1 针报告限以上的杂质个数一致，外杂质对照品溶液杂质对照品溶液 1 份杂质对照品溶液进 3 针标法计算杂质的含量， RSD不得

大于 15%。

中间精密度供试液供试液 6 份（另一个人员、不供试品进 1 针报告限以上的杂质个数一致，外杂质对照品溶液同仪器、不同时间）杂质对照品溶液进 6 针标法计算杂质的含量， 12个数

杂质对照品溶液 1 份据 RSD不得大于 20%。

线性不同浓度的各杂质对照品溶至少 5 个浓度（ LOQ～限度的各进 2 针相关系数（ R）不得小于， Y 轴液150%）截距应在 100%响应值的 25%以

内，响应因子的相对标准差应不

大于 10%。

回收率供试液供试液 9 份（三个浓度： 50%、供试液各进 2 针各浓度下的平均回收率应在杂质对照品溶液限度、 120%各 3 份）杂质对照品进 6 针80%-120%（低浓度为定量限，放

杂质对照品溶液 1 份宽至 70%-130%）， RSD(%)不大

于 %

强制降解试验供试液控制溶液、空白溶液、酸破坏、各进 1 针空白不干扰降解产物的检出，

碱破坏、光破坏、氧化破坏、