常见tag蛋白标签介绍
常见tag蛋白标签介绍讲课讲稿
常见t a g蛋白标签介绍蛋白标签蛋白标签（proteintag）是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。
随着技术的不断发展，研究人员相继开发出了具有各种不同功能的蛋白标签。
目前，这些蛋白标签已在基础研究和商业化产品生产等方面得到了广泛的应用。
美国GeneCopoeia（复能基因）为客户提供50多种蛋白标签，可以满足客户的不同需求，包括各种最新型的标签，如：SNAP-Tag™、Halo Tag™、AviTag™、Sumo等；也提供齐全的各种常用标签，如eGFP、His、Flag等等标签。
•标签的分子量小，只有~0.84KD，而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD，一般不影响目标蛋白的功能；•His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时特别有用，用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析去除杂蛋白，使复性不受其它蛋白的干扰，或进行金属螯和亲和层析复性；•His标签融合蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用研究；•His标签免疫原性相对较低，可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫并制备抗体。
•可应用于多种表达系统，纯化的条件温和；•可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。
Flag标签蛋白Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽（DYKDDDDK），同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
FLAG作为标签蛋白，其融合表达目的蛋白后具有以下优点：•FLAG作为融合表达标签，其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质，这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。
•融合FLAG的目的蛋白，可以直接通过FLAG进行亲和层析，此层析为非变性纯化，可以纯化有活性的融合蛋白，并且纯化效率高。
2020年各种蛋白标签汇总(精选干货)
各种蛋白标签汇总蛋白标签蛋白标签（pｒoteｉntag）是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白,以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。
随着技术的不断发展，研究人员相继开发出了具有各种不同功能的蛋白标签。
目前,这些蛋白标签已在基础研究和商业化产品生产等方面得到了广泛的应用。
...文档交流仅供参考...标签纯化促进溶解度抗体效价细胞标记Hiｓ6＋+／-+／-Flag++/-+GST＋+＋MBP++＋+His—MＢP+＋＋+HA+ｅGFP／ＣＦP／+++ＹFPＭyc+His-Ｍyｃ+＋Ｈiｓ—ＡｖiＴ+++＋＋+ａg™Sｕmo+++＋Hｉs－Sｕmｏ++++ +SNAＰ－Tag™+＋＋+＋＋Halo Tａg™++++++ TrxHISHis６是指六个组氨酸残基组成的融合标签,可插入在目的蛋白的Ｃ末端或N末端。
当某一个标签的使用,一是能构成表位利于纯化和检测；二是构成独特的结构特征（结合配体）利于纯化。
组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力,可用于固定化金属螯合层析(IＭAC）,对重组蛋白进行分离纯化. 使用Hｉｓ—ｔａｇ有下面优点：...文档交流仅供参考... •标签的分子量小，只有～0．84KD,而GST和蛋白A 分别为～26KD和～30ＫＤ,一般不影响目标蛋白的功能；...文档交流仅供参考...•His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用,后者在纯化包涵体蛋白时特别有用,用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析去除杂蛋白，使复性不受其它蛋白的干扰,或进行金属螯和亲和层析复性；...文档交流仅供参考...•His标签融合蛋白也被用于蛋白质—蛋白质、蛋白质-ＤNA相互作用研究；•Hｉs标签免疫原性相对较低，可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫并制备抗体。
•可应用于多种表达系统,纯化的条件温和；•可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签. Flag标签蛋白Ｆlａｇ标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽（DYＫDDDDＫ）,同时载体中构建的Kozａｋ序列使得带有FＬＡＧ的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
蛋白标签技术简介及常用蛋白标签
蛋白标签技术简介及常用蛋白标签蛋白质作为生命活动的主要执行者，人们对其功能和生物学机能的研究逐步深入。
那么如何分离和研究某一特定蛋白呢？蛋白标签技术的广泛应用可以有效的解决这令许多研究者颇为头疼的问题。
目前，一些肽类和蛋白质被广泛的用于大量生产重组蛋白，它们与目的蛋白融合表达，以便于目的蛋白表达、检测、示踪和纯化。
这类多肽或蛋白，被称为蛋白标签（Protein Tag）。
例如MyC、His、GST、HA等。
而标签抗体可以高特异地结合对应的标签融合多肽或蛋白，籍以分离纯化和分析检测目的蛋白。
目前，云克隆推出了一系列蛋白标签抗体，让您从容面对蛋白实验。
先简单介绍一下系列蛋白标签。
HA标签蛋白，标签序列YPYDVPDYA，源于流感病毒的红细胞凝集素表面抗原决定簇，9个氨基酸，对外源靶蛋白的空间结构影响小,容易构建成标签蛋白融合到N端或者C端。
易于被Anti－HA抗体检测和ELISA检测。
MYC标签蛋白，MYC标签蛋白是一个含11个氨基酸的小标签，标签序列Glu-Gln-Lys-Leu-Ile-Ser-Glu-Glu-Asp-Leu，这11个氨基酸作为抗原表位表达在不同的蛋白质框架中仍可识别其相应抗体。
Myc tag已成功应用在Western-blot杂交技术、免疫沉淀和流式细胞计量术中,可用于检测重组蛋白质在靶细胞中的表达。
FLAG，Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽（DYKDDDDK），同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
GST，谷胱甘肽巯基转移酶在解毒过程中起到重要作用，它的天然大小为26KD。
由于GST高度可溶，可增加外源蛋白的可溶性，另外GST融合表达系统广泛应用于各种融合蛋白的表达，可提高表达量。
GST标签蛋白可直接从细菌裂解液中利用含有还原型谷胱甘肽琼脂糖凝胶(Glutathione sepharose)亲和树脂进行纯化。
而且，GST标签蛋白可在温和、非变性条件下洗脱，因此保留了蛋白的抗原性和生物活性。
各种蛋白标签
蛋白标签蛋白标签（proteintag）是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。
随着技术的不断发展，研究人员相继开发出了具有各种不同功能的蛋白标签。
目前，这些蛋白标签已在基础研究和商业化产品生产等方面得到了广泛的应用。
美国GeneCopoeia（复能基因）为客户提供50多种蛋白标签，可以满足客户的不同需求，包括各种最新型的标签，如：SNAP-Tag™、Halo Tag™、AviTag™、Sumo等；也提供齐全的各种常用标签，如eGFP、His、Flag等等标签。
TrxHISHis6是指六个组氨酸残基组成的融合标签，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。
当某一个标签的使用，一是能构成表位利于纯化和检测；二是构成独特的结构特征（结合配体）利于纯化。
组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力，可用于固定化金属螯合层析(IMAC)，对重组蛋白进行分离纯化。
使用His-tag有下面优点：•标签的分子量小，只有~0.84KD，而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD，一般不影响目标蛋白的功能；•His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时特别有用，用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析去除杂蛋白，使复性不受其它蛋白的干扰，或进行金属螯和亲和层析复性；•His标签融合蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用研究；•His标签免疫原性相对较低，可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫并制备抗体。
•可应用于多种表达系统，纯化的条件温和；•可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。
Flag标签蛋白Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽（DYKDDDDK），同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
FLAG作为标签蛋白，其融合表达目的蛋白后具有以下优点：•FLAG作为融合表达标签，其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质，这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。
常见蛋白质标签
常见蛋白质标签总结2008-12-08 22:06Protein tags are peptide sequences genetically grafted onto a recombinant protein. Often these tags are removable by chemical agents or by enzymatic means, such as proteolysis or intein splicing. Tags are attached to proteins for various purposes.一、氨基酸标签（含小肽标签）A stretch of amino acids is added to the protein and enables the recovery of the labelled protein by its unique affinity. Usually its easiest to add the tag to either end of the protein to ensure its accessibility and not to disturb the protein folding.组氨酸标签（His tag）一般为6个组氨酸，用Ni2+ （Cu2+）亲和层析纯化FLAG tag ：N-DYKDDDDK-C ，recovered with specific antibodyHA tag：an epitope derived from the Influenza protein haemagglutinin (HA，禽流感病毒血凝素)，e.g. N-YPYDVP-C，recovery with an HA antibodyMYC tag：an epitope derived from the human proto-oncoprotein MYC，e.g.N-ILKKATAYIL-C, N-EQKLISEEDL-C，recovery with an MYC antibodySBP tag：Streptavidin Binding Peptide，链霉亲合素结合肽，38 amino acid tag (MDEKTTGWRGGHVVEGLAGELEQLRARLEHHPQGQREP)，更多参考在SigmaCBP tag：钙调蛋白结合肽（CBP; 26aa）钙调蛋白结合肽与钙调素结合是Ca2+依赖的，这种结合不受标签所处的位置影响（N端和C端均可），在中性pH条件下使用2mM EGTA可以很方便的将目标蛋白洗脱下来。
常见蛋白质标签
常见蛋白质标签总结2008-12-08 22:06Protein tags are peptide sequences genetically grafted onto a recombinant protein. Often these tags are removable by chemical agents or by enzymatic means, such as proteolysis or intein splicing. Tags are attached to proteins for various purposes.一、氨基酸标签（含小肽标签）A stretch of amino acids is added to the protein and enables the recovery of the labelled protein by its unique affinity. Usually its easiest to add the tag to either end of the protein to ensure its accessibility and not to disturb the protein folding.组氨酸标签（His tag）一般为6个组氨酸，用Ni2+ （Cu2+）亲和层析纯化FLAG tag ：N-DYKDDDDK-C ，recovered with specific antibodyHA tag：an epitope derived from the Influenza protein haemagglutinin (HA，禽流感病毒血凝素)，e.g. N-YPYDVP-C，recovery with an HA antibodyMYC tag：an epitope derived from the human proto-oncoprotein MYC，e.g.N-ILKKATAYIL-C, N-EQKLISEEDL-C，recovery with an MYC antibodySBP tag：Streptavidin Binding Peptide，链霉亲合素结合肽，38 amino acid tag (MDEKTTGWRGGHVVEGLAGELEQLRARLEHHPQGQREP)，更多参考在SigmaCBP tag：钙调蛋白结合肽（CBP; 26aa）钙调蛋白结合肽与钙调素结合是Ca2+依赖的，这种结合不受标签所处的位置影响（N端和C端均可），在中性pH条件下使用2mM EGTA可以很方便的将目标蛋白洗脱下来。
各种蛋白标签汇总
各种蛋白标签汇总 Company number：【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】各种蛋白标签汇总蛋白标签蛋白标签（proteintag）是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。
随着技术的不断发展，研究人员相继开发出了具有各种不同功能的蛋白标签。
目前，这些蛋白标签已在基础研究和商业化产品生产等方面得到了广泛的应用。
•标签的分子量小，只有~，而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD，一般不影响目标蛋白的功能；•His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时特别有用，用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析去除杂蛋白，使复性不受其它蛋白的干扰，或进行金属螯和亲和层析复性；•His标签融合蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用研究；•His标签免疫原性相对较低，可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫并制备抗体。
•可应用于多种表达系统，纯化的条件温和；•可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。
Flag标签蛋白Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽（DYKDDDDK），同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
FLAG作为标签蛋白，其融合表达目的蛋白后具有以下优点：•FLAG作为融合表达标签，其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质，这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。
•融合FLAG的目的蛋白，可以直接通过FLAG进行亲和层析，此层析为非变性纯化，可以纯化有活性的融合蛋白，并且纯化效率高。
•FLAG作为标签蛋白，其可以被抗FLAG的抗体识别，这样就方便通过Western Blot、ELISA等方法对含有FLAG的融合蛋白进行检测、鉴定。
几种常用的蛋白标签
⼏种常⽤的蛋⽩标签后台有同学在问看⽂献时遇到很多的标签蛋⽩，不知是啥。
其实，在我们研究某个蛋⽩的功能的时候，我们期待能够定位它或研究蛋⽩相互作⽤，有⼀种⽅法就是将⼀个通过各种⽅法可以检测到的标签蛋⽩的基因和⽬标蛋⽩的基因进⾏重组融合，那产⽣的融合蛋⽩除了⽬标蛋⽩本⾝，同时会带上可检测的标签蛋⽩，这样⽬标蛋⽩也被⼀并检测到，今天我们⼀起来盘点那些标签蛋⽩。
♣GST标签蛋⽩GST(⾕胱⽢肽巯基转移酶) 标签蛋⽩本⾝是⼀个在解毒过程中起重要作⽤的转移酶，天然⼤⼩为26KD。
应⽤于原核表达的原因有两个，⼀是因为它是⼀个⾼度可溶的蛋⽩，可以⽤来增加外源蛋⽩的可溶性；另⼀原因是它可以在⼤肠杆菌中⼤量表达，提⾼表达量。
GST融合表达系统⼴泛应⽤于各种融合蛋⽩的表达，可以在⼤肠杆菌和酵母菌等宿主细胞中表达。
结合的融合蛋⽩在⾮变性条件下⽤10mM 还原型⾕胱⽢肽洗脱。
在⼤多数情况下，融合蛋⽩在⽔溶液中是可溶的，并形成⼆体。
GST标签可⽤酶学分析或免疫分析很⽅便的检测。
标签有助于保护重组蛋⽩免受胞外蛋⽩酶的降解并提⾼其稳定性。
在⼤多数情况下GST融合蛋⽩是完全或部分可溶的。
纯化：该表达系统表达的GST标签蛋⽩可直接从细菌裂解液中利⽤含有还原型⾕胱⽢肽琼脂糖凝胶(Glutathionesepharose)亲和树脂进⾏纯化。
GST标签蛋⽩可在温和、⾮变性条件下洗脱，因此保留了蛋⽩的抗原性和⽣物活性。
GST在变性条件下会失去对⾕胱⽢肽树脂的结合能⼒，因此不能在纯化缓冲液中加⼊强变性剂如：盐酸胍或尿素等。
如果要去除GST融合部分，可⽤位点特异性蛋⽩酶切除。
检测：可⽤GST抗体或表达的⽬的蛋⽩特异性抗体检测。
♣His6标签蛋⽩His6标签蛋⽩是六个组氨酸残基组成的融合标签，可插⼊在⽬的蛋⽩的C末端或N末端。
当某⼀个标签的使⽤，⼀是能构成表位利于纯化和检测；⼆是构成独特的结构特征（结合配体）利于纯化。
组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引⼒，可⽤于固定化⾦属螯合层析(IMAC)，对重组蛋⽩进⾏分离纯化。
各种蛋白标签汇总
各种蛋白标签汇总蛋白标签蛋白标签(ｐroｔeinｔag)就是指利用DＮＡ体外重组技术,与目得蛋白一起融合表达得一种多肽或者蛋白,以便于目得蛋白得表达、检测、示踪与纯化等。
随着技术得不断发展,研究人员相继开发出了具有各种不同功能得蛋白标签。
目前,这些蛋白标签已在基础研究与商业化产品生产等方面得到了广泛得应用。
•标签得分子量小,只有~０、84KD,而GSＴ与蛋白Ａ分别为～26KＤ与~3０KD,一般不影响目标蛋白得功能;•Ｈis标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在得条件下或变性条件下纯化,前者在纯化疏水性强得蛋白得到应用,后者在纯化包涵体蛋白时特别有用,用高浓度得变性剂溶解后通过金属螯与亲与层析去除杂蛋白,使复性不受其它蛋白得干扰,或进行金属螯与亲与层析复性;•Ｈis标签融合蛋白也被用于蛋白质—蛋白质、蛋白质－DＮA相互作用研究;•His标签免疫原性相对较低,可将纯化得蛋白直接注射动物进行免疫并制备抗体。
•可应用于多种表达系统,纯化得条件温与;•可以与其它得亲与标签一起构建双亲与标签、Flag标签蛋白Flag标签蛋白为编码8个氨基酸得亲水性多肽(DＹKDＤDDK),同时载体中构建得Ｋoｚak序列使得带有FL ＡG得融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
ＦLAG作为标签蛋白,其融合表达目得蛋白后具有以下优点:•FLＡG作为融合表达标签,其通常不会与目得蛋白相互作用并且通常不会影响目得蛋白得功能、性质,这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。
•融合FLAG得目得蛋白,可以直接通过FＬAG进行亲与层析,此层析为非变性纯化,可以纯化有活性得融合蛋白,并且纯化效率高、•FLAG作为标签蛋白,其可以被抗FＬＡG得抗体识别,这样就方便通过WｅｓterｎBｌot、ELＩSA等方法对含有FLAＧ得融合蛋白进行检测、鉴定。
•融合在N端得FLAG,其可以被肠激酶切除(DＤＤＫ),从而得到特异得目得蛋白。
因此现ＦＬAG 标签已广泛得应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域。
收藏：几种常用的蛋白标签
收藏：⼏种常⽤的蛋⽩标签后台有同学在问看⽂献时遇到很多的标签蛋⽩，不知是啥。
其实，在我们研究某个蛋⽩的功能的时候，我们期待能够定位它或研究蛋⽩相互作⽤，有⼀种⽅法就是将⼀个通过各种⽅法可以检测到的标签蛋⽩的基因和⽬标蛋⽩的基因进⾏重组融合，那产⽣的融合蛋⽩除了⽬标蛋⽩本⾝，同时会带上可检测的标签蛋⽩，这样⽬标蛋⽩也被⼀并检测到，今天我们⼀起来盘点那些标签蛋⽩。
♣GST标签蛋⽩GST(⾕胱⽢肽巯基转移酶) 标签蛋⽩本⾝是⼀个在解毒过程中起重要作⽤的转移酶，天然⼤⼩为26KD。
应⽤于原核表达的原因有两个，⼀是因为它是⼀个⾼度可溶的蛋⽩，可以⽤来增加外源蛋⽩的可溶性；另⼀原因是它可以在⼤肠杆菌中⼤量表达，提⾼表达量。
GST融合表达系统⼴泛应⽤于各种融合蛋⽩的表达，可以在⼤肠杆菌和酵母菌等宿主细胞中表达。
结合的融合蛋⽩在⾮变性条件下⽤10mM 还原型⾕胱⽢肽洗脱。
在⼤多数情况下，融合蛋⽩在⽔溶液中是可溶的，并形成⼆体。
GST标签可⽤酶学分析或免疫分析很⽅便的检测。
标签有助于保护重组蛋⽩免受胞外蛋⽩酶的降解并提⾼其稳定性。
在⼤多数情况下GST融合蛋⽩是完全或部分可溶的。
纯化：该表达系统表达的GST标签蛋⽩可直接从细菌裂解液中利⽤含有还原型⾕胱⽢肽琼脂糖凝胶(Glutathionesepharose)亲和树脂进⾏纯化。
GST标签蛋⽩可在温和、⾮变性条件下洗脱，因此保留了蛋⽩的抗原性和⽣物活性。
GST在变性条件下会失去对⾕胱⽢肽树脂的结合能⼒，因此不能在纯化缓冲液中加⼊强变性剂如：盐酸胍或尿素等。
如果要去除GST融合部分，可⽤位点特异性蛋⽩酶切除。
检测：可⽤GST抗体或表达的⽬的蛋⽩特异性抗体检测。
♣His6标签蛋⽩His6标签蛋⽩是六个组氨酸残基组成的融合标签，可插⼊在⽬的蛋⽩的C末端或N末端。
当某⼀个标签的使⽤，⼀是能构成表位利于纯化和检测；⼆是构成独特的结构特征（结合配体）利于纯化。
组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引⼒，可⽤于固定化⾦属螯合层析(IMAC)，对重组蛋⽩进⾏分离纯化。
常见蛋白质标签总结
常见蛋白质标签总结（Flag、HA、cMyc、CBP等）Protein tags are peptide sequences genetically grafted onto a recombinant protein. Often these tags are removable by chemical agents or by enzymatic means, such as proteolysis or intein splicing. Tags are attached to proteins for various purposes.一、氨基酸标签（含小肽标签）A stretch of amino acids is added to the protein and enables the recovery of the labelled protein by its unique affinity. Usually its easiest to add the tag to either end of the protein to ensure its accessibility and not to disturb the protein folding.1.组氨酸标签（His tag）一般为6个组氨酸，用Ni2+（Cu2+）亲和层析纯化2.FLAG tag ：N-DYKDDDDK-C ，recovered with specific antibody3.HA tag： an epitope derived from the Influenza protein haemagglutinin(HA，禽流感病毒血凝素)，e.g. N-YPYDVPDYA-C，recovery with anHA antibody4.MYC tag： an epitope derived from the human proto-oncoprotein MYC，e.g.N-ILKKATAYIL-C, N-EQKLISEEDL-C，recovery with an MYCantibody5.SBP tag：Streptavidin Binding Peptide，链霉亲合素结合肽，38 amino acidtag (MDEKTTGWRGGHVVEGLAGELEQLRARLEHHPQGQREP)，更多参考在Sigma6.CBP tag：钙调蛋白结合肽（CBP; 26aa）钙调蛋白结合肽与钙调素结合是Ca2+依赖的，这种结合不受标签所处的位置影响（N端和C端均可），在中性pH条件下使用2mM EGTA可以很方便的将目标蛋白洗脱下来。
常见tag蛋白标签介绍
常见tag蛋白标签介绍在分子生物学和生物化学领域中，蛋白质标签是进行蛋白质表达、纯化和定位的重要工具。
其中，tag蛋白质标签是通过在蛋白质的N端或C端结合不同的蛋白质标签，可用于检测、纯化和追踪蛋白质。
下面，我们将介绍几种常见的tag蛋白标签。
His-TagHis-Tag是由6个组氨酸序列（His-His-His-His-His-His）组成，并且容易被许多金属离子亲和树脂（如Ni-NTA矩阵）捕捉。
这使得His-Tag成为常用的纯化标签之一。
此外，His-Tag蛋白标签具有中性对目标蛋白质溶解压力的作用，能够在蛋白质纯化的过程中保持目标蛋白原始的构象和生物活性。
GST-TagGST-Tag是由谷氨酸（G）-丝氨酸（S）-硫氨酸（T）三个氨基酸，以及谷氨酸二肽（DGP）组成的标签。
GST-Tag主要用于增强蛋白质的溶解和稳定性，并且也常用于纯化蛋白质。
此外，由于GST-Tag蛋白标签对多种酶具有亲和性，也可以用于显微镜研究中的指示标记。
FLAG-TagFLAG-Tag标签由Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys（DYKDDDDK）组成，通常用于识别和高效表达蛋白质。
FLAG-Tag的鉴定方法是通过利用抗体识别FLAG标签，从而对FLAG标签的蛋白产物进行检测分析。
由于其广泛应用和成功的用例，它成为了最常用的蛋白质标记之一。
HA-TagHA-Tag标签由YPYDVPDYA序列组成，被广泛用于病毒插入物好转载体的制备。
HA-Tag蛋白标签可以将蛋白质捕捉到表面上的抗HA抗体上，并通过其特异性快速检测引入的基因。
Myc-TagMyc-Tag通常由EQKLISEEDL序列组成，并且通常被用于稳定的表达和检测。
当蛋白质连接到Myc-Tag标签时，它与特异性抗体反应，从而实现检测。
Myc-Tag 标签是许多流行的促进反应的标记中最新的标记之一。
GFP-TagGFP-Tag由最常见的荧光蛋白质GFP（Green Fluorescence Protein）制成。
常见tag蛋白标签
蛋白标签（protein tag）是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。
常用的蛋白标签有6xHIS、Flag、GST、Myc、eGFP/eCFP/eYFP/mCherryeGFP、HA、SUMO等。
TrxHISHis6是指六个组氨酸残基组成的融合标签，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。
当某一个标签的使用，一是能构成表位利于纯化和检测；二是构成独特的结构特征（结合配体）利于纯化。
组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力，可用于固定化金属螯合层析(IMAC)，对重组蛋白进行分离纯化。
使用His-tag有下面优点：•标签的分子量小，只有~0.84KD，而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD，一般不影响目标蛋白的功能；•His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时特别有用，用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析去除杂蛋白，使复性不受其它蛋白的干扰，或进行金属螯和亲和层析复性；•His标签融合蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用研究；•His标签免疫原性相对较低，可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫并制备抗体。
•可应用于多种表达系统，纯化的条件温和；•可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。
•eCFPeCFP标签蛋白为增强型青色荧光蛋白eCFP，激发波长为433nm或453nm，发射波长为475nm或501nm，其是由野生型青色荧光蛋白CFP通过氨基酸突变和密码子优化而来的。
相对于CFP，eCFP荧光强度更强、荧光性质更稳定。
同时载体中构建的Kozak序列使得含有eCFP的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
eCFP作为标签蛋白，其融合表达目的蛋白后具有以下优点：•不用破碎组织细胞和不加任何底物，直接通过荧光显微镜就能在活细胞中发出绿色荧光，实时显示目的基因的表达情况，而且荧光性质稳定，被誉为活细胞探针。
常用蛋白标签
表9 His-tag 被认为是蛋白纯化的首选标签的五个因素原文检索：/info/infoSupplyView.htm?id=50c 35b 041b 977f 34011b 97c 7de 673b 66h t t p ://w w w.h o p e b i o.c o m /n e w E b i z 1/E b i z P o r t a l F G /p o r t a l /h t m l /I n f o C o n t e n t.h t m l ?I n f o C o n t e n t 150_action=show&InfoPublish_InfoID=c 373e 90ab 872ab 868ffaaf 954792611cLos, G. V. et al. (2005) HaloTag™ Interchangeable Labeling Technology for cell imaging and protein capture. Cell Notes 11, 2-6.Puck T T, et al. Genetics of somatic mammalian cells III. Long-term cultivation of euploid cells from human and animal subjects. J. Exp. Med. 108: 945-956, 1958. PubMed: 13598821CHO-K 1细胞CHO-K 1细胞是实验中十分常用的一个细胞株，在生物制药中的应用也非常广泛。
该细胞株培养条件简单，贴壁强度适中，比较容易转染，很适合用它来研究一般哺乳动物基因的功能。
来源：中国仓鼠（Cricetulus griseus ）卵巢形态：表皮细胞生长特性：贴壁CHO-K 1由CHO 衍生而来，CHO 是T. T. Puck 在1957年从一只成年中国仓鼠的卵巢中获得的。
蛋白标签汇总
蛋白标签汇总蛋白标签（protein tag）是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。
随着技术的不断发展，研究人员相继开发出了具有各种不同功能的蛋白标签。
目前，这些蛋白标签已在基础研究和商业化产品生产等方面得到了广泛的应用。
美国GeneCopoeia（复能基因）为客户提供50多种蛋白标签，可以满足客户的不同需求，包括各种最新型的标签，如：SNAP-Tag™、Halo Tag™、AviTag™、Sumo 等；也提供齐全的各种常用标签，如eGFP、His、Flag等等标签。
以下是部分蛋白标签的特性介绍，更加详细的介绍可在查询克隆产品的结果列表里面看到各种推荐的蛋白标签和载体。
TrxHISHis6是指六个组氨酸残基组成的融合标签，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。
当某一个标签的使用，一是能构成表位利于纯化和检测；二是构成独特的结构特征（结合配体）利于纯化。
组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力，可用于固定化金属螯合层析(IMAC)，对重组蛋白进行分离纯化。
使用His-tag有下面优点：标签的分子量小，只有~0.84KD，而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD，一般不影响目标蛋白的功能；His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时特别有用，用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析去除杂蛋白，使复性不受其它蛋白的干扰，或进行金属螯和亲和层析复性；His标签融合蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用研究；His标签免疫原性相对较低，可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫并制备抗体。
可应用于多种表达系统，纯化的条件温和；可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。
Flag标签蛋白Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽（DYKDDDDK），同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
各种蛋白标签汇总
各种蛋白标签汇总之相礼和热创作蛋白标签蛋白标签（proteintag）是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一同交融表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等.随着技术的不竭进展，研讨人员相继开发出了具有各种分歧功能的蛋白标签.现在，这些蛋白标签已在根底研讨和商业化产品消费等方面得到了广泛的运用.TrxHISHis6是指六个组氨酸残基组成的交融标签，可拔出在目的蛋白的C末端或N末端.当某一个标签的运用，一是能构成表位利于纯化和检测；二是构成独特的结构特征（结合配体）利于纯化.组氨酸残基侧链与固态的镍有猛烈的吸收力，可用于固定化金属螯合层析(IMAC)，对重组蛋白进行分离纯化.运用His-tag有上面优点：•标签的分子量小，只要~0.84KD，而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD，一样平常不影响目的蛋白的功能；•His标签交融蛋白可以在非离子型概况活性剂存在的条件下或变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到运用，后者在纯化包涵体蛋白时特别有用，用高浓度的变性剂溶解后经过金属螯和亲和层析往除杂蛋白，使复性不受别的蛋白的干扰，或进行金属螯和亲和层析复性；•His标签交融蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA互相作用研讨；•His标签免疫原性绝对较低，可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫并制备抗体.•可运用于多种表达零碎，纯化的条件和气；•可以和别的的亲和标签一同构建双亲和标签.Flag标签蛋白Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽（DYKDDDDK），同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的交融蛋白在真核表达零碎中表达服从更高. FLAG作为标签蛋白，其交融表达目的蛋白后具有以下优点：•FLAG作为交融表达标签，其通常不会与目的蛋白互相作用而且通常不会影响目的蛋白的功能、性子，这样就有利用研讨人员对交融蛋白进行卑鄙研讨.•交融FLAG的目的蛋白，可以直接经过FLAG进行亲和层析，此层析为非变性纯化，可以纯化有活性的交融蛋白，而且纯化服从高.•FLAG作为标签蛋白，其可以被抗FLAG的抗体辨认，这样就方便经过Western Blot、ELISA等方法对含有FLAG 的交融蛋白进行检测、鉴定.•交融在N端的FLAG，其可以被肠激酶切除（DDDK），从而得到特异的目的蛋白.因而现FLAG标签已广泛的运用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研讨及其蛋白互相作用等相关领域.MBP（麦芽糖结合蛋白）MBP（麦芽糖结合蛋白）标签蛋白大小为40kDa，由大肠杆菌K12的malE基因编码.MBP可添加在细菌中过量表达的交融蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白.MBP标签可经过免疫分析很方便地检测.有必要用位点埋头的蛋白酶切割标签.假如蛋白在细菌中表达，MBP可以交融在蛋白的N端或C端.纯化：交融蛋白可经过交联淀粉亲和层析一步纯化.结合的交融蛋白可用10mM麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱.结合亲和力在微摩尔范围.一些交融蛋白在0.2% Triton X-100或0.25%Tween 20存在下不克不及无效结合，而其他交融蛋白则不受影响.缓冲条件为pH7.0到8.5，盐浓度可高达1M，但不克不及运用变性剂.假如要往除MBP交融部分，可用位点特异性蛋白酶切除.检测：可用MBP抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测.GST(谷胱甘肽巯基转移酶)GST(谷胱甘肽巯基转移酶) 标签蛋白本人是一个在解毒过程中起到紧张作用的转移酶，它的自然大小为26KD.将它运用在原核表达的缘故原由大致有两个，一个是由于它是一个高度可溶的蛋白，盼看可以利用它添加外源蛋白的可溶性；另一个是它可以在大肠杆菌中大量表达，起到进步表达量的作用.GST交融表达零碎广泛运用于各种交融蛋白的表达，可以在大肠杆菌和酵母菌等宿主细胞中表达.结合的交融蛋白在非变性条件下用10mM 还原型谷胱甘肽洗脱.在大多数状况下，交融蛋白在水溶液中是可溶的，并构成二体.GST标签可用酶学分析或免疫分析很方便的检测.标签有助于呵护重组蛋白免受胞外蛋白酶的降解并进步其波动性.在大多数状况下GST交融蛋白是完全或部分可溶的.纯化：该表达零碎表达的GST标签蛋白可直接从细菌裂解液中利用含有还原型谷胱甘肽琼脂糖凝胶(Glutathione sepharose)亲和树脂进行纯化.GST标签蛋白可在和气、非变性条件下洗脱，因而保存了蛋白的抗原性和生物活性.GST在变性条件下会失往对谷胱甘肽树脂的结合才能，因而不克不及在纯化缓冲液中加入强变性剂如：盐酸胍或尿素等.假如要往除GST交融部分，可用位点特异性蛋白酶切除.检测：可用GST抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测.HAHA标签蛋白，标签序列YPYDVPDYA，源于流感病毒的红细胞凝集素概况抗原决定簇，9个氨基酸，对外源靶蛋白的空间结构影响小, 容易构建成标签蛋白交融到N端或者C端.易于用Anti－HA抗体检测和ELISA检测.c-MycC-Myc 标签蛋白，是一个含11个氨基酸的小标签，标签序列Glu-Gln-Lys-Leu-Ile- Ser-Glu-Glu-Asp-Leu，这11个氨基酸作为抗原表位表达在分歧的蛋白质框架中仍可辨认其相应抗体.C-Myc tag已成功运用在Western-blot杂交技术、免疫沉淀和流式细胞计量术中, 可用于检测重组蛋白质在靶细胞中的表达.eGFPeGFP标签蛋白，是加强型绿色荧光蛋白eGFP,激发波长为488nm，发射波长为507nm，其是由野生型绿色荧光蛋白GFP 经过氨基酸渐变和密码子优化而来的.绝对于GFP，eGFP荧光强度更强、荧光性子更波动.同时载体中构建的Kozak序列使得含有eGFP的交融蛋白在真核表达零碎中表达服从更高. eGFP作为标签蛋白，其交融表达目的蛋白后具有以下优点：•不必破碎组织细胞和不加任何底物，直接经过荧光显微镜就能在活细胞中发出绿色荧光，实时表现目的基因的表达状况，而且荧光性子波动，被誉为活细胞探针.•其自发荧光，不需用目的基因的抗体或原位杂交技术就可推知目的基因在细胞中的定位等状况.•同时细胞内的别的产品不会干扰标签蛋白检测，从而使其检测更显得快速、简便、灵敏度高而且重现性.•其低斲丧、高灵敏度检测，非常适用于高通量的药物挑选.因而现eGFP 表达标签被广泛地运用于基团表达调控、转基因功能研讨、蛋白在细胞中的功能定位、迁移变更及药物挑选等方面.此外由我公司提供的IRES双顺反子载体，可同目的基因共表达eGFP，用于目的基因的体内蛋白示踪研讨.eYFPeYFP标签蛋白为加强型黄绿色荧光蛋白eYFP，激发波长为513nm，发射波长为527nm，其是由野生型黄绿色荧光蛋白YFP经过氨基酸渐变和密码子优化而来的.绝对于YFP，eYFP 荧光强度更强、荧光性子更波动.同时载体中构建的Kozak序列使得含有eYFP的交融蛋白在真核表达零碎中表达服从更高. eYFP作为标签蛋白，其交融表达目的蛋白后具有以下优点：•不必破碎组织细胞和不加任何底物，直接经过荧光显微镜就能在活细胞中发出绿色荧光，实时表现目的基因的表达状况，而且荧光性子波动，被誉为活细胞探针.•其自发荧光，不需用目的基因的抗体或原位杂交技术就可推知目的基因在细胞中的定位等状况.•同时细胞内的别的产品不会干扰标签蛋白检测，从而使其检测更显得快速、简便、灵敏度高而且重现性.•其低斲丧、高灵敏度检测，非常适用于高通量的药物挑选.因而现eYFP 表达标签被广泛的运用与基团表达调控、转基因功能研讨、蛋白在细胞中的功能定位、迁移变更及药物挑选等方面.此外由我公司提供的IRES双顺反子载体，可同目的基因共表达eYFP，用于目的基因的体内蛋白示踪研讨.eCFPeCFP标签蛋白为加强型青色荧光蛋白eCFP，激发波长为433nm或453nm，发射波长为475nm或501nm，其是由野生型青色荧光蛋白CFP经过氨基酸渐变和密码子优化而来的.绝对于CFP，eCFP荧光强度更强、荧光性子更波动.同时载体中构建的Kozak序列使得含有eCFP的交融蛋白在真核表达零碎中表达服从更高. eCFP作为标签蛋白，其交融表达目的蛋白后具有以下优点：•不必破碎组织细胞和不加任何底物，直接经过荧光显微镜就能在活细胞中发出绿色荧光，实时表现目的基因的表达状况，而且荧光性子波动，被誉为活细胞探针.•其自发荧光，不需用目的基因的抗体或原位杂交技术就可推知目的基因在细胞中的定位等状况.•同时细胞内的别的产品不会干扰标签蛋白检测，从而使其检测更显得快速、简便、灵敏度高而且重现性.•其低斲丧、高灵敏度检测，非常适用于高通量的药物挑选.因而现eCFP 表达标签被广泛的运用与基团表达调控、转基因功能研讨、蛋白在细胞中的功能定位、迁移变更及药物挑选等方面.Avi TagAviTag标签蛋白是一个15 个氨基酸的短肽，具有一个单生物素化赖氨酸位点，与已知自然可生物素化序列完全分歧，可以加在目的蛋白的N端和C端.交融表达后，可被生物素连接酶生物素化，为了纯化重组蛋白选用低亲和性的单体抗生物素蛋白或抗生物素蛋白衍生物，除了用于蛋白质分离纯化，还用于蛋白质互相作用研讨.Avi Tag标签零碎具有以下几大优点:•无论在体外或者体内，几乎全部的蛋白都可以在一个独特的Avi Tag位点随便且无效地被生物素化；•生物素化是经过酶和底物的反应来完成，反应条件相当和气而且标识表记标帜的埋头性极高；•生物素Avi Tag只要15个氨基酸，对蛋白空间结构的影响非常小.SNAP-TagSNAP-Tag是新一代的蛋白标签技术，不但埋头性极高而且波动，最大的优点是适用于多种环境下的蛋白质检测与纯化，如活细胞内、溶液中、或固态相(如SDS-PAGE gels)等. SNAP-Tag是从人的O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移（O6-alkylguanine-DNA- alkyltransferase）获得.无论体内还是体外，SNAP-Tag都能与底物高特异性地共价结合，使蛋白标识表记标帜上生物素或荧光基团（如荧光素和若丹明）.SNAP所带的活性巯基位点接受了苯甲基鸟嘌呤所携带的侧链苯甲基基团，释放出了鸟嘌呤.这种新的硫醚键共价结合使SNAP所带的目的蛋白携带上了苯甲基基团所带的标识表记标帜物.苯甲基鸟嘌呤在生化条件下波动，而且没有其他蛋白会和这类物质作用，以是SNAP标签反应是高特异的.检测：生物素或各种颜色荧光的底物（如荧光素、若丹明）可渗出进入细胞，方便快捷地进行活细胞内SNAP-Tag交融蛋白的标识表记标帜与检测.它们也可特异性地标识表记标帜大肠杆菌，酵母和哺乳动物等细胞抽提液或曾经纯化的蛋白液中的SNAP-tag交融蛋白.将纯化的或未纯化的SNAP-Tag交融蛋白与概况固定了苯甲基鸟嘌呤的基质混合，蛋白即可特异与底物作用，构成共价键，交融蛋白间接被固定在了基质概况上，可以达到更方便快捷地研讨蛋白功能或纯化蛋白的目的.Halo TagHaloTag™标签蛋白是一种脱卤素酶的遗传修饰衍生物，可与多种合成的HaloTag™配基无效地共价结合.这个分子量为33KDa的单体蛋白能交融在重组蛋白的N端或C 端，并在原核和真核零碎中表达.HaloTag™配基是小分子化学物，可以在体外或体内与HaloTag™蛋白共价结合.这些配基由两个关键组分组成：(1)一个通用的HaloTag™反应联合子，结合HaloTag™蛋白；(2)一个功能基团,例如荧光染料或亲和媒介.可以共价和特异性结合多种合成的陈述基团和亲和配基的特性，使得HaloTag™蛋白可以用于检测和亲和结合或固相化固定目的蛋白.SUMOSUMO标签蛋白是一种小分子泛素样修饰蛋白（Small ubiquitin-like modifier），是泛素(ubiquitin)类多肽链超家族的紧张成员之一.在一级结构上，SUMO与泛素只要18%的同源性，但是两者的三级结构及其生物学功能却非常类似.研讨发现SUMO可以作为重组蛋白表达的交融标签和分子伴侣，不单可以进一步进步交融蛋白的表达量，且具有抗蛋白酶水解以及促进靶蛋白正确折叠，进步重组蛋白可溶性等功能.此外SUMO还有一项紧张的运用，就是可用于完好地切除标签蛋白，得到自然蛋白.由于SUMO蛋白水解酶（我公司可提供）能辨认完好的SUMO标签蛋白序列，并能高效地把SUMO 从交融蛋白上切割上去.切除SUMO后，经过亲和层析，往除标签蛋白部分，就得到和自然蛋白一样的重组蛋白.以是SUMO标签也经常运用于和其他标签一同运用，作为特异酶切水解位点.。
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蛋白标签蛋白标签（proteintag）是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。
随着技术的不断发展，研究人员相继开发出了具有各种不同功能的蛋白标签。
目前，这些蛋白标签已在基础研究和商业化产品生产等方面得到了广泛的应用。
美国GeneCopoeia（复能基因）为客户提供50多种蛋白标签，可以满足客户的不同需求，包括各种最新型的标签，如：SNAP-Tag?、Halo Tag?、A viTag?、Sumo等；也提供齐全的各种常用标签，如eGFP、His、Flag等等标签。
以下是部分蛋白标签的特性介绍，更加详细的介绍可在查询克隆产品的结果列表里面看到各种推荐的蛋白标签和载体。
标签纯化促进溶解度抗体效价细胞标记His6 + +/- +/-Flag + +/- +GST + + +MBP + ++ +His-MBP ++ + +HA +eGFP/CFP/YFP +++Myc +His-Myc + +His-AviTag?++ ++ ++Sumo +++ +His-Sumo ++ ++ +SNAP-Tag?++ + +++Halo Tag?++ + +++TrxHISHis6是指六个组氨酸残基组成的融合标签，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。
当某一个标签的使用，一是能构成表位利于纯化和检测；二是构成独特的结构特征（结合配体）利于纯化。
组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力，可用于固定化金属螯合层析(IMAC)，对重组蛋白进行分离纯化。
使用His-tag有下面优点：?标签的分子量小，只有~0.84KD，而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD，一般不影响目标蛋白的功能；?His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时特别有用，用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析去除杂蛋白，使复性不受其它蛋白的干扰，或进行金属螯和亲和层析复性；?His标签融合蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用研究；?His标签免疫原性相对较低，可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫并制备抗体。
?可应用于多种表达系统，纯化的条件温和；?可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。
Flag标签蛋白Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽（DYKDDDDK），同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
FLAG作为标签蛋白，其融合表达目的蛋白后具有以下优点：?FLAG作为融合表达标签，其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质，这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。
?融合FLAG的目的蛋白，可以直接通过FLAG进行亲和层析，此层析为非变性纯化，可以纯化有活性的融合蛋白，并且纯化效率高。
?FLAG作为标签蛋白，其可以被抗FLAG的抗体识别，这样就方便通过Western Blot、ELISA等方法对含有FLAG的融合蛋白进行检测、鉴定。
?融合在N端的FLAG，其可以被肠激酶切除（DDDK），从而得到特异的目的蛋白。
因此现FLAG标签已广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域。
MBP（麦芽糖结合蛋白）MBP（麦芽糖结合蛋白）标签蛋白大小为40kDa，由大肠杆菌K12的malE基因编码。
MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。
MBP标签可通过免疫分析很方便地检测。
有必要用位点专一的蛋白酶切割标签。
如果蛋白在细菌中表达，MBP可以融合在蛋白的N端或C端。
纯化：融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化。
结合的融合蛋白可用10mM麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。
结合亲和力在微摩尔范围。
一些融合蛋白在0.2% Triton X-100或0.25% Tween 20存在下不能有效结合，而其他融合蛋白则不受影响。
缓冲条件为pH7.0到8.5，盐浓度可高达1M，但不能使用变性剂。
如果要去除MBP融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。
检测：可用MBP抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测。
GST(谷胱甘肽巯基转移酶)GST(谷胱甘肽巯基转移酶) 标签蛋白本身是一个在解毒过程中起到重要作用的转移酶，它的天然大小为26KD。
将它应用在原核表达的原因大致有两个，一个是因为它是一个高度可溶的蛋白，希望可以利用它增加外源蛋白的可溶性；另一个是它可以在大肠杆菌中大量表达，起到提高表达量的作用。
GST融合表达系统广泛应用于各种融合蛋白的表达，可以在大肠杆菌和酵母菌等宿主细胞中表达。
结合的融合蛋白在非变性条件下用10mM 还原型谷胱甘肽洗脱。
在大多数情况下，融合蛋白在水溶液中是可溶的，并形成二体。
GST标签可用酶学分析或免疫分析很方便的检测。
标签有助于保护重组蛋白免受胞外蛋白酶的降解并提高其稳定性。
在大多数情况下GST融合蛋白是完全或部分可溶的。
纯化：该表达系统表达的GST标签蛋白可直接从细菌裂解液中利用含有还原型谷胱甘肽琼脂糖凝胶(Glutathione sepharose)亲和树脂进行纯化。
GST标签蛋白可在温和、非变性条件下洗脱，因此保留了蛋白的抗原性和生物活性。
GST在变性条件下会失去对谷胱甘肽树脂的结合能力，因此不能在纯化缓冲液中加入强变性剂如：盐酸胍或尿素等。
如果要去除GST融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。
检测：可用GST抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测。
HAHA标签蛋白，标签序列YPYDVPDYA，源于流感病毒的红细胞凝集素表面抗原决定簇，9个氨基酸，对外源靶蛋白的空间结构影响小, 容易构建成标签蛋白融合到N端或者C端。
易于用Anti－HA抗体检测和ELISA检测。
c-MycC-Myc 标签蛋白，是一个含11个氨基酸的小标签，标签序列Glu-Gln-Lys-Leu-Ile- Ser-Glu-Glu-Asp-Leu，这11个氨基酸作为抗原表位表达在不同的蛋白质框架中仍可识别其相应抗体。
C-Myc tag已成功应用在Western-blot杂交技术、免疫沉淀和流式细胞计量术中, 可用于检测重组蛋白质在靶细胞中的表达。
eGFPeGFP标签蛋白，是增强型绿色荧光蛋白eGFP,激发波长为488nm，发射波长为507nm，其是由野生型绿色荧光蛋白GFP通过氨基酸突变和密码子优化而来的。
相对于GFP，eGFP荧光强度更强、荧光性质更稳定。
同时载体中构建的Kozak序列使得含有eGFP的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
eGFP作为标签蛋白，其融合表达目的蛋白后具有以下优点：?不用破碎组织细胞和不加任何底物，直接通过荧光显微镜就能在活细胞中发出绿色荧光，实时显示目的基因的表达情况，而且荧光性质稳定，被誉为活细胞探针。
?其自发荧光，不需用目的基因的抗体或原位杂交技术就可推知目的基因在细胞中的定位等情况。
?同时细胞内的其它产物不会干扰标签蛋白检测，从而使其检测更显得快速、简便、灵敏度高而且重现性。
?其低消耗、高灵敏度检测，十分适用于高通量的药物筛选。
因此现eGFP 表达标签被广泛地应用于基团表达调控、转基因功能研究、蛋白在细胞中的功能定位、迁移变化及药物筛选等方面。
此外由我公司提供的IRES双顺反子载体，可同目的基因共表达eGFP，用于目的基因的体内蛋白示踪研究。
eYFPeYFP标签蛋白为增强型黄绿色荧光蛋白eYFP，激发波长为513nm，发射波长为527nm，其是由野生型黄绿色荧光蛋白YFP通过氨基酸突变和密码子优化而来的。
相对于YFP，eYFP荧光强度更强、荧光性质更稳定。
同时载体中构建的Kozak序列使得含有eYFP的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
eYFP作为标签蛋白，其融合表达目的蛋白后具有以下优点：?不用破碎组织细胞和不加任何底物，直接通过荧光显微镜就能在活细胞中发出绿色荧光，实时显示目的基因的表达情况，而且荧光性质稳定，被誉为活细胞探针。
?其自发荧光，不需用目的基因的抗体或原位杂交技术就可推知目的基因在细胞中的定位等情况。
?同时细胞内的其它产物不会干扰标签蛋白检测，从而使其检测更显得快速、简便、灵敏度高而且重现性。
?其低消耗、高灵敏度检测，十分适用于高通量的药物筛选。
因此现eYFP 表达标签被广泛的应用与基团表达调控、转基因功能研究、蛋白在细胞中的功能定位、迁移变化及药物筛选等方面。
此外由我公司提供的IRES双顺反子载体，可同目的基因共表达eYFP，用于目的基因的体内蛋白示踪研究。
eCFPeCFP标签蛋白为增强型青色荧光蛋白eCFP，激发波长为433nm或453nm，发射波长为475nm或501nm，其是由野生型青色荧光蛋白CFP通过氨基酸突变和密码子优化而来的。
相对于CFP，eCFP荧光强度更强、荧光性质更稳定。
同时载体中构建的Kozak序列使得含有eCFP的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
eCFP作为标签蛋白，其融合表达目的蛋白后具有以下优点：?不用破碎组织细胞和不加任何底物，直接通过荧光显微镜就能在活细胞中发出绿色荧光，实时显示目的基因的表达情况，而且荧光性质稳定，被誉为活细胞探针。
?其自发荧光，不需用目的基因的抗体或原位杂交技术就可推知目的基因在细胞中的定位等情况。
?同时细胞内的其它产物不会干扰标签蛋白检测，从而使其检测更显得快速、简便、灵敏度高而且重现性。
?其低消耗、高灵敏度检测，十分适用于高通量的药物筛选。
因此现eCFP 表达标签被广泛的应用与基团表达调控、转基因功能研究、蛋白在细胞中的功能定位、迁移变化及药物筛选等方面。
Avi TagAviTag标签蛋白是一个15 个氨基酸的短肽，具有一个单生物素化赖氨酸位点，与已知天然可生物素化序列完全不同，可以加在目标蛋白的N端和C端。
融合表达后，可被生物素连接酶生物素化，为了纯化重组蛋白选用低亲和性的单体抗生物素蛋白或抗生物素蛋白衍生物，除了用于蛋白质分离纯化，还用于蛋白质相互作用研究。
Avi Tag标签系统具有以下几大优点:?无论在体外或者体内，几乎所有的蛋白都可以在一个独特的Avi Tag位点轻易且有效地被生物素化；?生物素化是通过酶和底物的反应来实现，反应条件相当温和而且标记的专一性极高；?生物素Avi Tag只有15个氨基酸，对蛋白空间结构的影响非常小。
SNAP-TagSNAP-Tag是新一代的蛋白标签技术，不仅专一性极高而且稳定，最大的优点是适用于多种环境下的蛋白质检测与纯化，如活细胞内、溶液中、或固态相(如SDS-PAGE gels)等。
SNAP-Tag是从人的O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移（O6-alkylguanine-DNA- alkyltransferase）获得。