血液分析仪散点图和直方图解读_20160813

血液分析仪散点图和直方图解读
希森美康医用电子（上海）有限公司 学术应用部
目录
• 检测原理 • 散点图和直方图解读 • 案例分析及问题解答
目录
• 检测原理 • 散点图和直方图解读 • 案例分析及问题解答
检测原理
核酸荧光 • DIFF
染色术
鞘流直流 • RBC 阻抗法 • PLT
SLS血红蛋白 • HGB
血小板聚集? 触发规则：在散点图上特定的区域，散点达到一定数量
聚集血小板
血小板聚集(S)？
• 触发规则： • PLT# > 60 x109/L & PDW > 20 fl & PU (%) >
20% or
• P-LCR >45% & MPV >13fl & PU>24fl
10fl 20fl 30fl
纵坐标：侧向荧光（SFL）
反映核酸含量
横坐标：侧向散射光（SSC）
反映细胞内容物复杂程度
IG%# / OTHER%#(研究)
•异型淋巴细胞
异型淋巴
幼稚粒细胞
•幼稚粒细胞
单核 淋巴
嗜碱
中性 嗜酸
WBC报警信息
意义
<Abnormal>
WBC Abn Scattergram
Neutropenia Neutrophilia Lymphopenia Lymphocytosis Monocytosis Eosinophilia W Basophilia B Leukocytopenia C Leukocytosis
红细胞直方图异常 双形性细胞群
红细胞大小不同 小球性红细胞 大球性红细胞 低色素 贫血 红细胞增多
RL,RU,MP,DW Flag MP(直方图的双峰性)
RDW-SD,RDW-CV MCV MCV MCHC HGB RBC
判定方法/判定式
对分析参数进行代数计算和数量比较 在高和低点有间距并成“峰形”分布 RDW-SD>65fL or RDW-CV>20% MCV<70fL MCV>110fL MCHC<290g/L HGB<100g/L RBC>6.50x1012/L
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•检测原理 •散点图和直方图解读 •案例分析及问题解答
•通过挤或刮的方式采血导致细胞聚集和破坏，散点图异常
在散点图右上方 有大量异常散点 （非IG），引 起IG假性报警
解决方法：用毛 细管采集末梢血
采集末梢血混匀后立即上机检测，血小板会偏低是怎么回事？
因为血液抗凝需要一个过程，大概放置5分钟，再次混匀 检测，结果就会比较准确且稳定了
3.50 x 1012/L
or
MCHC > 40.0g/dL & MCH > 40pg & RU% > 4%
•缺铁? •触发规则： • MCHC < 31.0g/dL & MCV < 75fl & RDW-CV > 15,0%
PLT报警信息
<Abnormal> P LT Abn Distribution
标本如何混匀，检测才能得到比较好的结果？
•前面讲过轻轻地混匀，往往导致抗凝不充分 •用力混匀后马上检测，重复性又不太好 •比较合理的混匀方式是：
1.采血后，立即用力混匀，让抗凝剂与血液成分充分接触 2.放置5分钟后（让标本充分抗凝），再次用力混匀，然后 用手轻轻搓动试管半分钟，让细胞颗粒均匀分布（标本在大 幅度运动时，其中的颗粒分布不是很均匀）。 3.然后再上机检测，就可以得到较好的结果
散射图 散射图 散射图 散射图 散射图 散射图
从DIFF散射图上来判断 从DIFF散射图上来判断 从DIFF散射图上来判断 从DIFF散射图上来判断 从DIFF散射图上来判断 从DIFF散射图上来判断
更多的信息：报警原理
侧向荧光(SFL) 异型淋巴细胞
DIFF散点图
原始细胞
幼稚粒细胞
单核细胞
淋巴细胞
异型淋巴细 胞
异常淋巴细胞
•注意：异常淋巴主 要是指幼稚淋巴， 白血病时出现的病 理淋巴细胞等
异常淋巴
有核红细胞
有核红细胞
RBC/PLT通道
RDW-SD
假设峰值高度为100%，
双鞘流阻抗法
在20%频率水平上的分 布宽度即为RDW-SD。
单位用fL 表示。
浮动界标
RDW-CV
点L1和L2在总分布区域 中的出现频率为68.26%， 使用下列方程计算
PU
& PU > 24fl or
100 %
PU < 23fl & PU > 20% or
PL (%) > 10 % or
• PU (%) > 40 % or
• PDW-SD 无法计算 or
20 %
• PDW > 20fl or • RL(%) > 9%
10 fl 20 fl 30 fl 40 fl
1分钟
5分钟
10分钟
直方图粗糙 血小板聚集
直方图光滑
直方图光滑
标本混匀不充分会对结果有什么影响
轻轻混匀：一手抓 住试管上部，通过 碗关节摇动试管混 匀标本。混匀不充 分，抗凝效果不好
轻轻地混匀，散点图杂乱，不分类
用力混匀：左手抓 住试管上部，右手 食指弹试管底部， 让标本产生上下翻 滚的效果
用力混匀，散点图正常
R <Suspect>
B RBC Agglutination? Turbidity/HGB
C Interference? Iron Deficiency?
红细胞抗凝 浑浊/HGB 受干扰１ 1 缺铁性贫血
1 MCHC,MCH,RBC,RU(%) MCHC 1 MCV,MCHC,RDW-CV
1 对分析参数进行代数计算和数量比较 MCHC < 365g/L 1 对分析参数进行代数计算和数量比较
当血细胞通过检测部小孔时，电阻信号・・・ ①信号的大小与通过的细胞体积呈正比 ②电阻变化的次数＝细胞数
直流电
电阻值
红细胞
时间
血小板
电阻值
感应区域(感应电阻变化的区域）
时间
原理：鞘流法
RBC/PLT通道
试剂喷头
鞘液
小孔
回收管
电阻法的优点
・计数粒子较多，重复性好 ・正确测定体积信息
原理：鞘流法
RBC/PLT通道
NEUT#<1.00x109/L,(or 设定的%） NEUT#>11.00x109/L, (or 设定 的%） LYMPH#<0.80x109/L,(or 设定 的%） LYMPH#>4.00x109/L,(or 设定的%） MONO#>1.00x109/L,(or 设定 的%） EO#>0.70x109/L,(or 设定 的%） BASO#0.20x109/L,(or 设 定的%） WBC#<2.50x109/L WBC#>18.00x109/L
内部形态－透射电子显微镜－
淋巴细胞
单核细胞 中性粒细胞 嗜酸粒细胞
WDF试剂 反应后
WDF试剂 反应前
内部构造；淋巴细胞＜单核细胞＜中性粒细胞＜嗜酸性粒细胞
通道 试剂反应
Monocyte
Lymphocyte
Neutrophil
Eosinophil
发表在 2011年自动化学会
基本原理：电阻法
血细胞通过→电阻值发生变化→脉冲被检测
PLT
血小板增加
PLT
PLT < 60x109/L PLT > 600x109/L
血小板聚集 血小板凝集
DIFF散射图
从DIFF散射图上来判断
PDW,PL(%),PU(%),PMF 对分析参数进行代数计算和数
V,PLT,PLCR,MPV,PU 量比较
血小板直方图异常? 触发规则：
P-LCR > 45% & MPV > 13fl PL 12 fl
RDW-CV=（L2 - L1）/ （L2 +L1）
红细胞报警信息
意义
判定项目
<Abnormal> RBC Abn Distribution Dimorphic Population
Anisocytosis Microcytosis Macrocytosis Hypochromia Anemia Erythrocytosis
・
原理： SLS-血红蛋白法
HGB通道
血红蛋白（四聚体）
亲水基
疏来自百度文库基
珠蛋白
亚铁血红素
（月桂基硫酸钠）
珠蛋白的
结构改变
（变性）
SLS的疏水基作用于
亚铁血红素的铁（Fe2+）
珠蛋白
被氧化（Fe2+→Fe3+）
（第2阶段）
（第3阶段）
SLS的亲水基与Fe3+结合 （第4阶段）
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•检测原理 •散点图和直方图解读 •案例分析及问题解答
杆状核粒细胞
有核红 细胞
影细胞
中性粒细 嗜碱性 胞 粒细胞
血小板聚集
嗜酸性粒 细胞
侧向散射光(SSC)
原始细胞
原始细胞
未成熟粒细胞
幼稚粒细胞
核左移
杆核
异型淋巴细胞
• 注意：
• 当成熟白细胞能较好的分类， 一般OTHER区域为异型淋巴 细胞
• 当结果出现不分类的情况， 一般OTHER区域主要是原始 细胞
有用户抱怨：为什么人家的五分类都能分类，你们的仪器有 时候就是不能分类呢？
• XS不分类的标本主要有抗凝不充分或白血病病人的 标本。
• 这些异常标本在主屏没有分类结果，在研究界面是 有分类结果的，但不能传输和打印，因为这些分类 结果可信度的很低，要求用户去镜检确认，并且出 于保护用户的考虑，这些分类结果只能在实验室内 部做参考，不能报告，避免误导医生和病人。
原始细胞 未成熟粒细胞 核左移 异常淋巴细胞 有核红细胞 异型淋巴细胞
判定项目
判定方法/判定式
从DIFF散射图上来判断
NEUT#,NEUT% NEUT#,NEUT% LYMPH#,LYMPH% LYMPH#,LYMPH% MONO#,MONO% EO#,EO% BASO#,BASO% WBC# WBC#
HGB Defect? F ragments ?
HGB异常 红细胞碎片
RDW-CV,MCV
RDW-SD,PU,PU(%), MCV,RL
对分析参数进行代数计算和数量比较 对分析参数进行代数计算和数量比较
红细胞直方图异常
RL
100 %
• 触发规则：
• RL (%) > 10 % or
• RU (%) > 5 % or
WBC总数
• CBC模式: • FSC(前向散射光) • 反映细胞大小
• CBC+DIFF: • Ssc(侧向散射光) • 反映细胞内容物复杂程度
• Sfl(侧向荧光) • 反映细胞核酸含量
WBC=NEUT#+LYMPH#+MONO#+EO#+BASO#
聚集
的血 小板
白细胞分类：DIFF通道
4DL 完全溶解红细胞血小板 在白细胞膜上打孔 4DS 对核酸染色
白细胞散射图异常
中性粒细胞减少 中性粒细胞增多 淋巴细胞减少 淋巴细胞增多 单核细胞增多 嗜酸细胞增多 嗜碱细胞增多 白细胞减少 白细胞增多
<Suspect>
Blasts ? Immature Gran? Left Shift? Abn Lympho? NRBC ? Atypical Lympho?
法
4
基本原理：流式细胞术/DNA/RNA荧光染色
DIFF通道
分色镜
侧向荧光
侧向散色 光
FSC
前向散射光：细胞大小
SSC
侧向散射光：内部复杂 程度
SFL
侧向荧光：核酸含量和 种类
前向散色 光
表面形态－扫描显微镜－
淋巴
单核
中性粒细胞 嗜酸细胞
试剂 反应后
试剂 反应前
试剂的作用，细胞纹理结构丧失、细胞膜损伤
P Thrombocytopenia L Thrombocytosis T
<Suspect> PLT Clumps ? PLT Clumps (S )?
意义
判定项目
判定方法/判定式
血小板直方图异 常
PDW,PL(%),PU(%),PLT, P-LCR,MPV,PU
对分析参数进行代数计算和数 量比较
血小板减少
•问题
有用户问：为什么有些标本在XS上面不能分类，而在一些 三分类上面能分类呢？
一些三分类白细胞直方图只有 两个峰，在中间用两个界标硬 分割出一块区域作为中间细胞， 这种三分类不能敏感筛选出异 常标本，容易漏检
因为XS是荧光五分类，对于异 常标本更加敏感，对于异常标 本的筛选能力更强，有些异常 标本里面异常细胞，导致散点 图异常分布，仪器判断该标本 为异常标本，此外仪器会有异 常细胞报警，不分类是为了要 求用户必须去镜检确认，从而 避免异常标本的漏检
PL
PU
PU(%)
分析思路：PLT直方图出现大幅度 抬高，MCV值为53.2，并报警有红 细胞碎片，从PLT直方图目测其高 值鉴别线在25-30fl 之间，怀疑是 高值鉴别线较高原因把部分小红细 胞和红细胞碎片计入了血小板里， 出现PLT-I假性增高。
镜检
解决方案： 显微镜镜检发现有红细胞大小不 均，有大量红细胞碎片存在。血 小板散在分布，数量正常。
• RDW-SD 无法计算 or • 多峰 or
5% 100
• RU < 225 fl 或 WBC# > 50 x109/L
RL
100 %
RU RBC
200 250 fl
RU
双峰
• 触发规则： • 红细胞直方图不止出现一个峰
20 %
S
100
L
200 250 fl
红细胞聚集?
触发规则：
MCHC > 40.0g/dL & MCH > 40pg & RBC <