生物技术制药习题答案夏焕章版

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生物制药复习题(有答案)

生物制药复习题(有答案)

《生物技术制药》习题(课后作业)一、下列概念:⑴生物制药:⑵生物药物:包括生物技术药物,天然生化药物,微生物药物,海洋药物和生物制品。

(3)生物技术制药:采用现代生物技术,借助某些微生物、植物、动物生产医药品。

(4)生物技术药物:采用DNA重组技术或其他生物新技术研制的蛋白质或核酸类药物。

(5)现代生物技术:以现代生命科学为基础, 把生物体系与工程学技术有机结合在一起,按照预先的设计,定向地在不同水平上改造生物遗传性状或加工生物原料, 产生对人类有用的新产品(或达到某种目的)之综合性科学技术。

(6)基因表达:⒈转录:在RNA聚合酶的催化下以DNA为模板合成mRNA的过程。

2、翻译:以mRNA为模板,tRNA作为运载工具,将活化的氨基酸在核糖体上合成蛋白质的过程(7)质粒的分裂不稳定:基因工程菌分裂时产生一定比例不含质粒的子代菌的现象,即重组分子从受体细胞中逃逸。

(8)质粒的结构不稳定:DNA从质粒上丢失或碱基重排、缺失所致工程菌性能的改变。

重组DNA分子某一区域发生变异,导致表观生物学功能的丧失;(9)显微注射:显微注射就是借助光学显微镜的放大作用,利用显微操作仪,直接把DNA注射到动物早期胚胎、胚胎干细胞、体细胞或卵母细胞中,然后生产动物个体的技术。

经过显微注射DNA发育而成的动物中,有少数整合了被注射的DNA分子,成为转基因动物。

(10)悬浮细胞:(11)补料分批培养:是指分批培养过程中,间歇或连续地补加新鲜培养基的培养方法。

(12)连续培养行下去的一种培养方法。

(13)接触抑制:细胞在生长分裂时达到相互接触而停止分裂的现象,称为接触性抑制(14)单克隆抗体:由一个抗原决定簇刺激的、单一的B细胞和骨髓瘤细胞融合增殖后所产生的、高度均一的抗体。

(15)多克隆抗体:一种抗原具有多个抗原决定簇,每个抗原决定簇都能刺激一个B细胞产生一种抗体。

这样所获得的免疫血清是多种抗体的混和物。

(16)人-鼠嵌合抗体:人一鼠嵌合抗体是将鼠源单抗的可变区与人抗体的恒定区融合而得到的抗体。

生物技术制药习题及答案

生物技术制药习题及答案

一、选择填空题1.酶的主要来源是什么?微生物生产。

2.第三代生物技术是什么?基因组时代。

3.基因治疗最常用的载体是什么?质粒载体和λ噬菌体载体。

4.促红细胞生长素基因可在大肠杆菌中表达。

但不能用大肠杆菌工程菌生产人的促红细胞生产素为什么?因为大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化,人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用。

5.菌体生存所需能量已菌有氧代谢所需能量在什么情况下产生代谢产物乙酸?菌体生长所需能量(大于)菌体有氧代谢所能提供的能量时,菌体往往会产生代谢副产物乙酸。

6.cDNA第一链所合成所需的引物是什么?cDNA第一条链合成所需引物为PolyT。

7.基因工程制药在选择基因表达系统时首先考虑什么?表达产物的功能。

8.为了减轻工程菌代谢负荷,提高外源基因表达水平可采取什么措施?将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段。

9.根据中国生物制品规定要求,疫苗出厂需要经过哪些检验?理化检定、安全检定、效力检定。

10.基因工程药物化学本质是什么?蛋白质。

11.PEG诱导细胞融合?PEG可能与可能与临近膜的水分相结合,使细胞之间只有微笑空间的水分被PEG取代,从而降低了细胞表面的极性,导致双脂层的不稳定,使细胞膜发生融合。

12.以大肠杆菌为目的基因表达系统的表达产物,产物位置是什么?胞内、周质、胞外。

13.人类第一个基因工程药物是什么?重组胰岛素。

14.动物细胞培养的条件是什么?温度:哺乳类37昆虫25~28,ph7.2~7.4,通氧量:使co2培养箱,不同动物比例不同。

防止污染,基本营养物质:三大营养物质+维生素,激素,促细胞生长因子,渗透压:大多数260~320。

15.不属于加工改造抗体的是什么?单域抗体。

16.第三代抗体是什么?利用基因工程技术制备的基因工程抗体。

17.现代生物技术的标志是什么?DNA重组技术。

18.获得目的基因最常用的方法是什么?化学合成法、PCR法(最常用)、基因文库法、cDNA文库法。

生物技术制药课后习题答案

生物技术制药课后习题答案

第一章绪论1生物技术是以生命科学为基础,利用生物体(或生物组织、细胞及其组分)的特性和功能,设计构建有预期性状的新物种或新品系,并与工程相结合,进行加工生产,为社会提供商品和服务的一个综合性的技术体系。

2生物技术的主要内容:P1基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程蛋白质工程:运用基因工程全套技术改变蛋白质结构的技术。

染色体工程:探索基因在染色体上的定位,异源基因导入、染色体结构改变。

生化工程:生物反应器及产品的分离、提纯技术。

3生物技术制药采用现代生物技术人为创造条件,借助微生物、植物或动物来生产所需的医药品过程被称为4生物技术药物采用DNA重组技术或其它生物新技术研制的蛋白质或核酸类药物才能被称为5生物药物生物技术药物与天然生化药物、微生物药物、海洋药物和生物制品一起归类为PPT复习题第二章基因工程制药1、简述基因工程制药的基本程序。

P162、说明基因工程技术用于制药的三个重要意义。

P15第一段第一行3、采用哪两种方法来确定目的cDNA克隆?P18(7目的基因cDNA的分离和鉴定)①核酸探针杂交法用层析法或高分辨率电泳技术(蛋白质双向电泳技术或质谱技术)分离出确定为药物的蛋白质,氨基酸测序,按照密码子对应原则合成出单链寡聚核苷酸,用做探针,与cDNA文库中的每一个克隆杂交。

这个方法的关键是分离目的蛋白,②免疫反应鉴定法(酶联免疫吸附检测)4、说明用大肠杆菌做宿主生产基因工程药物必须克服的6个困难。

①原核基因表达产物多为胞内产物,必须破胞分离,受胞内其它蛋白的干扰,纯化困难;②原核基因表达产物在细胞内多为不溶性(包含体, inclusion body),必须经过变性、复性处理以恢复药物蛋白的生物学活性,工艺复杂;③没有翻译后的加工机制,如糖基化,应用上受到限制;④产物的第一个氨基酸必然是甲酰甲硫氨酸,因无加工机制,常造成N-Met冗余,做为药物,容易引起免疫反应;⑤细菌的内毒素不容易清除;⑥细菌的蛋白酶常常把外源基因的表达产物消化;5、用蓝藻做宿主生产基因工程药物有什么优越性?蓝藻:很有前途的药物基因的宿主细胞①有内源质粒,美国Wolk实验室已构建1200种人工质粒,可用做基因载体。

(完整版)生物技术制药习题答案(夏焕章版)

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(完整版)生物技术制药习题答案(夏焕章版)第一章绪论填空题1. 生物技术制药的特征高技术、高投入、高风险、高收益、长周期。

2. 生物药物广泛应用于医学各领域,按功能用途可分为三类,分别是治疗药物、预防药物、诊断药物。

3.现代生物药物已形成四大类型:一是应用DNA重组技术制造的基因重组多肽、蛋白质类治疗剂;二是基因药物;三是来自动物植物和微生物的天然生物药物;四是合成与部分合成的生物药物;4.生物技术的发展按其技术特征来看,可分为三个不同的发展阶段,传统生物技术阶段;近代生物技术阶段;现代生物技术阶段。

5.生物技术所含的主要技术范畴有基因工程;细胞工程;酶工程;发酵工程;蛋白质核酸工程和生化工程;选择题1.生物技术的核心和关键是(A )A 细胞工程B 蛋白质工程C 酶工程D 基因工程2. 第三代生物技术( A )的出现,大大扩大了现在生物技术的研究范围A 基因工程技术B 蛋白质工程技术C 海洋生物技术D细胞工程技术3.下列哪个产品不是用生物技术生产的(D )A 青霉素B 淀粉酶C 乙醇D 氯化钠4. 下列哪组描述(A )符合是生物技术制药的特征A高技术、高投入、高风险、高收益、长周期B高技术、高投入、低风险、高收益、长周期C高技术、低投入、高风险、高收益、长周期D高技术、高投入、高风险、低收益、短周期5. 我国科学家承担了人类基因组计划(C )的测序工作A10% B5% C 1% D 7%名词解释1.生物技术制药采用现代生物技术可以人为的创造一些条件,借助某些微生物、植物或动物来生产所需的医学药品,称为生物技术制药。

2.生物技术药物一般说来,采用DNA重组技术或其它生物新技术研制的蛋白质或核酸来药物称为生物技术药物。

3.生物药物生物技术药物是重组产品概念在医药领域的扩大应用,并与天然药物、微生物药物、海洋药物和生物制品一起归类为生物生物药物。

简答题1.生物技术药物的特性是什么?生物技术药物的特征是:(1)分子结构复杂(2)具有种属差异特异性(3)治疗针对性强、疗效高(4)稳定性差(5)免疫原性(6)基因稳定性(7)体内半衰期短(8)受体效应(9)多效应和网络效应(10)检验特殊性2.简述生物技术发展的不同阶段的技术特征和代表产品?(1)传统生物技术的技术特征是酿造技术,所得产品的结构较为简单,属于微生物的初级代谢产物。

生物制药习题库及参考答案

生物制药习题库及参考答案

生物制药习题库及参考答案一、单选题(共130题,每题1分,共130分)1.三氧化二砷属于()。

A、有机毒害品B、有机剧毒品C、无机剧毒品D、无机毒害品正确答案:C2.微生物发酵pH值范围为( )。

A、1~3B、5~8C、9~10D、4~5正确答案:B答案解析:微生物发酵pH值范围为5~8。

3.高空采风、两次冷却、两次分油水、适当加热流程的特点是(A)A 高空采风、两次冷却、两次分油水、适当加热。

()A、A高空采风、两次冷却、两次分油水、适当加热。

B、两次冷却、高空采风、两次分油水、适当加热。

C、两次冷却、两次分油水、高空采风、适当加热。

D、两次冷却、两次分油水、适当加热、高空采风。

正确答案:A4.为了提高培养的灵敏度,也可以将需要检查的样品先置于( )条件下培养6小时,使杂菌迅速增殖后再划线培养。

A、24℃B、37℃C、28℃D、42℃正确答案:B答案解析:为了提高培养的灵敏度,也可以将需要检查的样品先置37℃条件下培养6小时,使杂菌迅速增殖后再划线培养。

5.生产1Kg成品所消耗种原材料的公斤数称为()A、消耗定额B、原料成本C、操作工时D、生产周期正确答案:A6.( )指被介质层捕集的尘埃颗粒与空气中原有颗粒之比A、过滤效率B、穿透率C、相对湿度D、填充系数正确答案:A答案解析:过滤效率指被介质层捕集的尘埃颗粒与空气中原有颗粒之比7.以下哪项20世纪70年底发现的技术为基因工程发展提供有力的工具A、DNA双螺旋结构模型B、限制性内切酶C、遗传信息中心法则D、重组人胰岛素正确答案:B8.菌种选育的方法包括()A、自然选育和人工育种B、诱变育种和杂C、自然选育和基因工程育种正确答案:A9.溶氧浓度是( )。

A、DO值B、OD值C、COD值D、BOD值正确答案:A10.含有酯键但不易发生水解反应的药物是()A、毛果芸香碱B、对乙酰氨基酚C、盐酸哌替啶D、阿托品E、布比卡因正确答案:C11.下列不属于按照培养基的用途划分的是()。

生物技术制药试题(打印版)

生物技术制药试题(打印版)

生物技术制药试题1. 生物技术制药:生物技术制药是指运用微生物学、生物学、医学、生物化学等的研究成果,从生物体、生物组织、细胞、体液等,综合利用微生物学、化学、生物化学、生物技术、药学等科学的原理和方法进行药物制造的技术。

2. 基因表达:基因表达(gene expression)是指细胞在生命过程中,把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译,转变成具有生物活性的蛋白质分子.生物体内的各种功能蛋白质和酶都是同相应的结构基因编码的。

3. 质粒的分裂不稳定:通常将质粒不稳定性分为两类:一类是结构不稳定性,也就是质粒由于碱基突变、缺失、插入等引起的遗传信息变化;另一类是分离不稳定性,指在细胞分裂过程中质粒不能分配到子代细胞中,从而使部分子代细胞不带质粒(即P-细胞)。

在连续和分批培养过程中均能观察到此两类现象发生。

一般情况下具有质粒的细胞(即P+细胞)需要合成较多的DNA、RNA和蛋白质,因此其比生长速率低于P-细胞,从而P-细胞一旦形成能较快速地生长繁殖并占据培养物中的大多数。

4. 补料分批培养:发酵培养基发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。

它既要使种子接种后能迅速生长,达到一定的菌丝浓度,又要使长好的菌体能迅速合成需产物。

因此,发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外,还要有产物所需的特定元素、前体和促进剂等。

但若因生长和生物合成产物需要的总的碳源、氮源、磷源等的浓度太高,或生长和合成两阶段各需的最佳条件要求不同时,则可考虑培养基用分批补料来加以满足。

5. 人-鼠嵌合抗体:嵌合抗体( chimeric atibody )是最早制备成功的基因工程抗体。

它是由鼠源性抗体的 V 区基因与人抗体的 C 区基因拼接为嵌合基因,然后插入载体,转染骨髓瘤组织表达的抗体分子。

因其减少了鼠源成分,从而降低了鼠源性抗体引起的不良反应,并有助于提高疗效。

6. 悬浮培养:非贴壁依赖性细胞的一种培养方式。

生物制药第二版

生物制药第二版

(第2版Biotechnological Pharmaceutics)(夏焕章熊宗贵,主编北京:高等教育出版社,2006年)复习思考题第一章绪论(4学时)一、目的要求:1、掌握生物技术制药、生物技术的概念。

2、了解生物技术的组成及其在各个领域的应用。

3、了解医药生物技术的新进展与发展展望。

二、复习思考题1、生物技术制药的概念?2、生物技术可分为哪几个发展阶段?3、生物技术药物有哪些类型?有什么特点?3、生物技术制药有哪些特征?4、生物技术在制药中有哪些应用?第二章基因工程制药(18学时)一、目的要求:1、掌握基因工程技术的概念及基因工程制药的基本过程。

2、理解目的基因的获得,基因在宿主细胞中的表达。

3、理解基因工程菌的生长代谢特点,其质粒不稳定产生的原因及提高质粒稳定性的方法。

4、理解基因工程药物的分离纯化。

5、理解基因工程菌的培养方式,发酵工艺及培养设备。

6、了解基因工程药物的质量控制。

二、复习思考题1、基因工程制药的基本过程是什么?2、逆转录法获得目的基因的过程是什么?3、影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素有哪些?4、质粒不稳定产生的原因及提高质粒稳定性的方法是什么?5、影响基因工程菌发酵的因素有哪些?如何控制发酵的各种参数?6、什么是高密度发酵?影响高密度发酵的因素有哪些?采取哪些方法实现高密度发酵?7、分离纯化常用的色谱分离方法有哪些?各原理是什么?8、对基因重组技术所获得的蛋白质药物产品进行鉴定时,常作哪些项目分析?第三章动物细胞制药(10学时)一、目的要求:1、掌握细胞工程的概念。

2、理解动物细胞的形态和生理特点。

3、理解生产用动物细胞的要求和获得。

4、理解动物细胞的培养条件和培养基。

5、了解动物细胞生物反应器及其检测控制系统。

6、了解动物细胞制药的前景与展望。

二、复习思考题1、离体培养的动物细胞分哪些类型?2、生产用动物细胞分哪些类型?各有何特点?3、简述动物细胞的培养基种类和培养基对动物细胞培养的影响。

生物技术制药(第三版,夏焕章)复习重点

生物技术制药(第三版,夏焕章)复习重点

1.绪论1.1首次代表性药物——第一个动物疫苗药(美—基因工程药—DNA重组技术生产—1982欧洲被批用):重组人胰岛素1.2(名词解释1)生物技术药物:采用DNA重组技术/其他生物新技术研制的蛋白质/核酸药物。

(包括——细胞因子、重组蛋白质药物、抗体、疫苗、寡苷酸药物…….)生物技术制药:以生物体、组织、细胞等为原料,利用物理、化学、生物化学、生物技术、微生物学、药学等科学的原理和方法进行药物制造的技术。

生物技术制药特性/特点:高技术、高投入、长周期、高风险、高收益2.基因工程制药2.1基因工程技术的优点:①大量生产,为临床使用建立有效的保障。

②提供足够数量的生理活性物质③挖掘更多内源生理活性物质④获得新型化合物,扩大药物筛选来源2.2什么叫基因工程药(技术)?将目的基因插入载体、拼接、转入新宿主细胞,构建工程菌/细胞,实现遗传物质的重新组合,并使目的基因在工程菌内进行复制和表达的技术。

基因工程:将外源基因经体外重组后导入受体细胞内,使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。

2.3工作流程上游——(实验室)——分离目的基因,构建工程菌/细胞下游——(实验室产品产业化)——(大规模培养)产品分离纯化,质量控制等2.4目的基因获得——反转录法(制取真核生物目的基因常用方法)①mRNA纯化——得到目的基因的mRNA特点:真核细胞中mRNA的3’端常含有一多聚腺苷酸polyA②cDNA第一链合成模板:蛋白质真核细胞的mRNA;反转录酶作用下,合成互补的DNA③cDNA第二链合成模板:cDNA(只反映基因表达转录及加工后产物携带信息—只与基因编码序列相关,不含内含子)反转录酶/DNA聚合酶1/Klenow酶大片段作用下,最终合成双链DNA序列得蛋白质多肽的DNA序列④cDNA克隆载体:质粒DNA/噬菌体DNA连接方法:加同聚尾;加人工接头⑤重组体导入宿主细胞⑥cDNA文库鉴定——表型筛选⑦目的cDNA克隆的分离与鉴定方法:核酸探针杂交法;免疫反应鉴定法2.5基因表达①常用宿主菌细胞及优缺点(目前最常用——大肠杆菌、酿酒酵母)1)原核细胞(大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、链霉素-可糖基化)P222)真核细胞(酵母、丝状真菌、哺乳动物细胞)优点:可糖基化缺点:合成复杂②宿主菌的要求1)具有高浓度、高产量、高产率2)能利用廉价原料而得3)不致病、不产生内毒素4)发热量低、需氧低,适当发酵温度和细胞形态(培养条件温和)5)易代谢调控、易进行重组DNA技术6)产物易提取纯化③影响基因在大肠杆菌中表达的因素:1)表达质粒的拷贝数和稳定性(一定范围内,表达和拷贝数成正比;载体越小,稳定性越好)2)外源基因的表达效率3)表达产物的稳定性4)细胞代谢负荷5)工程菌的培养条件2.6(名词解释2)基因工程的不稳定性:传代过程中出现的质粒不稳定现象,质粒不稳定分为分裂不稳定和结构不稳定,(稳定性至少维持25代),分裂不稳定指工程菌分裂时出现一定比例的不含质粒的子代菌现象(整个重组DNA分子从受体细胞中逃逸);结构不稳定指DNA从质粒上丢失/碱基重排、缺失所致工程菌性能改变(导致其表观生物学功能丧失)。

生物技术制药复习题(含答案),推荐文档(2021年整理)

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生物技术制药复习一、名词解释:1、生物药物:是指利用各种生物材料,综合采用各种生物技术的原理和方法制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。

2、抗生素:由微生物产生,在低浓度下能杀灭和抑制病原体,但对宿主不会产生严重的副作用的物质,或使用化学方法半合成的衍生物和全合成的仿制品。

广义的抗生素还包括一些抗肿瘤药、杀虫剂和除草剂。

3、补料分批发酵:是指将种子接入发酵反应器进行培养,经过一段时间之后,间歇式地、或者连续地补加新鲜培养基,使菌体进一步生长的方法.4、限制性内切酶:生物体内能识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶.它是可以将外来的DNA 切断的酶,即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力,但对自己的DNA却无损害作用,这样可以保护细胞原有的遗传信息。

由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性内切酶。

5、载体:将外源目的DNA导入受体细胞,并能自我复制和增殖的工具。

6、转化细胞系:正常细胞经过某个转化过程,失去正常细胞的特点而获得无限增殖能力的细胞系.7、微载体培养:将细胞吸附于微载体表面,再在培养液中进行悬浮培养,使细胞在微载体表面生长成单层的方法称为微载体培养法。

8、毛状根: 受到发根农杆菌感染后形成的根组织,易于培养,改变了植物的次生代谢。

生物技术制药课后习题答案

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第一章绪论1生物技术‎是以生命科‎学为基础,利用生物体‎(或生物组织‎、细胞及其组‎分)的特性和功‎能,设计构建有‎预期性状的‎新物种或新‎品系,并与工程相‎结合,进行加工生‎产,为社会提供‎商品和服务‎的一个综合‎性的技术体‎系。

2生物技术‎的主要内容‎:P1基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程蛋白质工程‎:运用基因工‎程全套技术‎改变蛋白质‎结构的技术‎。

染色体工程‎:探索基因在‎染色体上的‎定位,异源基因导‎入、染色体结构‎改变。

生化工程:生物反应器‎及产品的分‎离、提纯技术。

3生物技术‎制药采用现代生‎物技术人为‎创造条件,借助微生物‎、植物或动物‎来生产所需‎的医药品过‎程被称为4生物技术‎药物采用DNA‎重组技术或‎其它生物新‎技术研制的‎蛋白质或核‎酸类药物才‎能被称为5生物药物‎生物技术药‎物与天然生‎化药物、微生物药物‎、海洋药物和‎生物制品一‎起归类为PPT复习‎题第二章基因工程制‎药1、简述基因工‎程制药的基‎本程序。

P162、说明基因工‎程技术用于‎制药的三个‎重要意义。

P15第一‎段第一行3、采用哪两种‎方法来确定‎目的cDN‎A克隆?P18(7目的基因‎c DN A的‎分离和鉴定‎)①核酸探针杂‎交法用层析法或‎高分辨率电‎泳技术(蛋白质双向‎电泳技术或‎质谱技术)分离出确定‎为药物的蛋‎白质,氨基酸测序‎,按照密码子‎对应原则合‎成出单链寡‎聚核苷酸,用做探针,与cDNA‎文库中的每‎一个克隆杂‎交。

这个方法的‎关键是分离‎目的蛋白,②免疫反应鉴‎定法(酶联免疫吸‎附检测)4、说明用大肠‎杆菌做宿主‎生产基因工‎程药物必须‎克服的6个‎困难。

①原核基因表‎达产物多为‎胞内产物,必须破胞分‎离,受胞内其它‎蛋白的干扰‎,纯化困难;②原核基因表‎达产物在细‎胞内多为不‎溶性(包含体, inclu‎si on body),必须经过变‎性、复性处理以‎恢复药物蛋‎白的生物学‎活性,工艺复杂;③没有翻译后‎的加工机制‎,如糖基化,应用上受到‎限制;④产物的第一‎个氨基酸必‎然是甲酰甲‎硫氨酸,因无加工机‎制,常造成N-Met冗余‎,做为药物,容易引起免‎疫反应;⑤细菌的内毒‎素不容易清‎除;⑥细菌的蛋白‎酶常常把外‎源基因的表‎达产物消化‎;5、用蓝藻做宿‎主生产基因‎工程药物有‎什么优越性‎?蓝藻:很有前途的‎药物基因的‎宿主细胞①有内源质粒‎,美国Wol‎k实验室已‎构建120‎0种人工质粒,可用做基因‎载体。

(完整版)生物技术制药课后习题..

(完整版)生物技术制药课后习题..

(完整版)生物技术制药课后习题..生物技术制药课后习题by ×× Yuan1、生物技术制药分为哪些类型?生物技术制药分为四大类:(1)应用重组DNA技术(包括基因工程技术、蛋白质工程技术)制造的基因重组多肽,蛋白质类治疗剂。

(2)基因药物,如基因治疗剂,基因疫苗,反义药物和核酶等(3)来自动物、植物和微生物的天然生物药物(4)合成与部分合成的生物药物2、生物技术制药具有什么特征?(1)分子结构复杂(2)具有种属特异性(3)治疗针对性强,疗效高(4)稳定性差(5)基因稳定性(6)免疫原性(7)体内的半衰期短(8)受体效应(9)多效性(10)检验的特殊性3、生物技术制药中有哪些应用?应用主要有:(1)基因工程制药:包括基因工程药物品种的开发,基因工程疫苗,基因工程抗体,基因诊断与基因治疗,应用基因工程技术建立新药的筛选模型,应用基因工程技术改良菌种,产生新的微生物药物,基因工程技术在改进药物生产工艺中的应用,利用转基因动植物生产蛋白质类药物(2)细胞工程制药:包括单克隆抗体,动物细胞培养,植物细胞培养生产次生代谢产物(3)酶工程制药(4)发酵工程制药4、基因工程药物制造的主要程序有哪些?基因工程药物制造的主要步骤有:目的基因的克隆,构造DNA重组体,构造工程菌,目的基因的表达,外源基因表达产物的分离纯化产品的检验5、影响目的的基因在大肠杆菌中表达的因素有哪些?(1)外源基因的计量(2)外源基因的表达效率:a、启动子的强弱b、核糖体的结合位点c、SD序列和起始密码的间距d、密码子组成(3)表达产物的稳定性(4)细胞的代谢付荷(5)工程菌的培养条件6、质粒不稳定分为哪两类,如何解决质粒不稳定性?质粒不稳定分为分裂分为分裂不稳定和结构不稳定。

质粒的分裂不稳定是指工程菌分裂时出现一定比例不含质粒的子代菌的现象;质粒的结构不稳定是DNA从质粒上丢失或碱基重排,缺失所致工程菌性能的改变。

提高质粒稳定性的方法如下:(1)选择合适的宿主细菌(2)选择合适的载体(3)选择压力(4)分阶段控制培养(5)控制培养条件(6)固定化7、影响基因工程菌发酵的因素有哪些?如何控制发酵的各种参数?影响因素:(1)培养基(2)接种量(3)温度(4)溶解氧(5)诱导时机的影响(6)诱导表达程序(7) PH值8、什么是高密度发酵?影响高密度发酵的因素有哪些?可采取哪些方法来实现高密度发酵?高密度发酵:是指培养液中工程菌的菌体浓度在50gDCW/L以上,理论上的最高值可达200gDCW/L影响因素:(1)培养基(2)溶氧浓度(3)PH(4)温度(5)代谢副产物实现高密度发酵的方法:(1)改进发酵条件:a、培养基 b、建立流加式培养基 c、提高供养能力(2)构建出产乙酸能力低的工程菌宿主菌:a、阻断乙酸产生的主要途径 b、对碳代谢流进行分流 c、限制进入糖酵解途径的碳代谢流d、引入血红蛋白基因(3)构建蛋白水解酶活力低的工程化宿主菌9、分离纯化常用的色谱分离方法有哪些?它们的原理是什么?方法有离子交换色谱、疏水色谱、反相色谱、亲和色谱、凝胶过滤色谱及高压液相色谱。

生物制药复习题(有答案)

生物制药复习题(有答案)

《生物技术制药》习题(课后作业)一、下列概念:⑴生物制药:⑵生物药物:包括生物技术药物,天然生化药物,微生物药物,海洋药物和生物制品。

(3)生物技术制药:采用现代生物技术,借助某些微生物、植物、动物生产医药品。

(4)生物技术药物:采用DNA重组技术或其他生物新技术研制的蛋白质或核酸类药物。

(5)现代生物技术:以现代生命科学为基础, 把生物体系与工程学技术有机结合在一起,按照预先的设计,定向地在不同水平上改造生物遗传性状或加工生物原料, 产生对人类有用的新产品(或达到某种目的)之综合性科学技术。

(6)基因表达:⒈转录:在RNA聚合酶的催化下以DNA为模板合成mRNA的过程。

2、翻译:以mRNA为模板,tRNA作为运载工具,将活化的氨基酸在核糖体上合成蛋白质的过程(7)质粒的分裂不稳定:基因工程菌分裂时产生一定比例不含质粒的子代菌的现象,即重组分子从受体细胞中逃逸。

(8)质粒的结构不稳定:DNA从质粒上丢失或碱基重排、缺失所致工程菌性能的改变。

重组DNA分子某一区域发生变异,导致表观生物学功能的丧失;(9)显微注射:显微注射就是借助光学显微镜的放大作用,利用显微操作仪,直接把DNA注射到动物早期胚胎、胚胎干细胞、体细胞或卵母细胞中,然后生产动物个体的技术。

经过显微注射DNA发育而成的动物中,有少数整合了被注射的DNA分子,成为转基因动物。

(10)悬浮细胞:(11)补料分批培养:是指分批培养过程中,间歇或连续地补加新鲜培养基的培养方法。

(12)连续培养行下去的一种培养方法。

(13)接触抑制:细胞在生长分裂时达到相互接触而停止分裂的现象,称为接触性抑制(14)单克隆抗体:由一个抗原决定簇刺激的、单一的B细胞和骨髓瘤细胞融合增殖后所产生的、高度均一的抗体。

(15)多克隆抗体:一种抗原具有多个抗原决定簇,每个抗原决定簇都能刺激一个B细胞产生一种抗体。

这样所获得的免疫血清是多种抗体的混和物。

(16)人-鼠嵌合抗体:人一鼠嵌合抗体是将鼠源单抗的可变区与人抗体的恒定区融合而得到的抗体。

生物技术制药实验

生物技术制药实验

生物技术制药实验(供生物工程和生物技术专业使用)夏焕章编写沈阳药科大学生物技术与生物制药教研室2006年6月目 录实验一 细菌感受态的制备和质粒的转化…………………… 实验二 碱变性法提取质粒DNA ……………………………… 实验三 水平式琼脂糖凝胶电泳法检测DNA …………………实验四 DNA 的限制性内切酶酶切…………………………… 实验五 DNA 的回收与连接 …………………………………… 实验六 基因的 PCR 扩增(聚合酶链式反应)…………… 实验七 用温度敏感型启动子表达系统表达目的基因… 实验八 基因组合生物合成新化合物 ………………………(1) (5) (10)(14) (18) (23) (29) (36)生物秀-专心做生物 生物秀-专心做生物w w w .b b i o o .c o m实验一细菌感受态的制备和质粒的转化实验目的通过实验学会感受态细胞的制备方法和DNA转化的最基本操作,以及如何提高转化效率的思路。

本实验综合因素较多,难度较大,是分子生物学中的一个很关键的实验手段。

实验原理转化是指某一细胞系由于接受了外源DNA,而导致其原来的遗传性状发生改变,这种遗传性状包括遗传型和表型的改变。

感受态是受体菌能接受外源DNA能力的一种生理状态。

用CaCl2处理细菌,改变细胞膜的结构,使质粒DNA能够穿过细菌细胞膜进入细胞。

然后在选择性培养基中培养转化处理过的细菌,转化成功的细菌可以在选择性培养基上生长形成菌落。

本实验采用质粒pUC118转化大肠杆菌DH-5,通过氨苄青霉素抗性筛选转化子。

图1-1质粒pUC118/pUC119图谱实验材料和试剂(一)实验材料 大肠杆菌DH-5质粒pUC118(ampicillin ,Amp R ) (二)培养基和试剂 1. LB 液体培养基(%)胰蛋白胨(Tryptone ) 0.5 酵母浸出粉(Yeast extract ) 1.0NaCl 0.5pH 7.2~7.4(用2mol/L NaOH 调节)(分装:20ml/250ml 三角瓶,每组2瓶。

生物技术制药试题及答案

生物技术制药试题及答案

生物技术制药试题及答案一、单项选择题(每题2分,共20分)1. 生物技术制药中,以下哪种技术不属于基因工程技术范畴?A. DNA重组技术B. 基因克隆技术C. 细胞培养技术D. 基因编辑技术答案:C2. 以下哪种生物反应器不适合用于大规模生产生物药物?A. 动物细胞培养反应器B. 微生物发酵罐C. 植物细胞培养反应器D. 动物体答案:D3. 在生物技术制药中,以下哪种蛋白质药物是通过基因工程技术生产的?A. 胰岛素B. 干扰素C. 抗体D. 所有以上答案:D4. 以下哪种细胞不适用于生产重组蛋白药物?A. 酵母细胞B. 哺乳动物细胞C. 植物细胞D. 肿瘤细胞答案:D5. 生物技术制药中,以下哪种技术可以用于提高重组蛋白的表达量?A. 基因优化B. 基因沉默C. 基因突变D. 基因删除答案:A6. 在生物技术制药中,以下哪种方法不用于蛋白质的纯化?A. 色谱法B. 电泳法C. 离心法D. 免疫沉淀法答案:B7. 以下哪种物质不是生物技术制药中常用的生物反应器?A. 微生物发酵罐B. 动物细胞培养反应器C. 植物细胞培养反应器D. 塑料容器答案:D8. 在生物技术制药中,以下哪种物质可以作为重组蛋白的稳定剂?A. 盐B. 糖C. 氨基酸D. 所有以上答案:D9. 以下哪种技术不用于生物技术药物的质量控制?A. 高效液相色谱(HPLC)B. 质谱分析C. 核磁共振(NMR)D. 放射性同位素标记答案:D10. 在生物技术制药中,以下哪种因素不会影响重组蛋白的表达?A. 宿主细胞类型B. 表达载体C. 培养条件D. 重组蛋白的分子量答案:D二、多项选择题(每题3分,共15分)1. 生物技术制药中,以下哪些因素可以影响重组蛋白的表达量?A. 启动子的强度B. 密码子的优化C. 宿主细胞的生长状态D. 培养基的组成答案:ABCD2. 在生物技术制药中,以下哪些技术可以用于重组蛋白的纯化?A. 离子交换色谱B. 亲和色谱C. 凝胶过滤色谱D. 密度梯度离心答案:ABC3. 以下哪些因素可以影响生物反应器中细胞的生长和代谢?A. 温度B. pH值C. 氧气供应D. 营养物质的浓度答案:ABCD4. 在生物技术制药中,以下哪些方法可以用于重组蛋白的活性测定?A. ELISAB. Western blotC. 酶联免疫吸附测定D. 细胞活性测定答案:ACD5. 以下哪些因素可以影响重组蛋白的稳定性?A. 蛋白质的氨基酸序列B. 蛋白质的三维结构C. 蛋白质的糖基化修饰D. 蛋白质的磷酸化修饰答案:ABCD三、判断题(每题2分,共10分)1. 基因工程技术可以用于生产重组蛋白药物。

中国医科大学生物技术制药期末考试复习题及参考答案

中国医科大学生物技术制药期末考试复习题及参考答案

--------------------------------------------------------------------------------说明:作业练习。

单选题:1.动物细胞大规模培养生产中常见的操作是A.分批式操作B.补料式操作C.搅拌式操作D.一次性混合操作E.分次添加操作正确答案:"A"2.现代生物技术的标志是A.DNA重组技术B.蛋白质重组技术C.PCR技术D.青霉素发酵技术E.DNA测序技术正确答案:"A"3.下列关于发酵设备的说法错误的是A.发酵罐的罐身越高,则氧的利用率越低B.种子罐在接种前要经过严格的灭菌C.发酵罐内尽量减少死角避免藏垢积污D.发酵罐的通风搅拌装置能使液气充分混合,实现传热传质作用,从而保证发酵过程中所需的溶解氧E.以上都不对正确答案:"A"4.发酵制药的培养基依据组成物质的化学纯度可分为A.液体培养基、固体培养基、半固体培养基B.合成培养基、天然培养基、半合成培养基C.孢子培养基、种子培养基、发酵培养基D.基础培养基、鉴别培养基、选择培养基E.以上都不是正确答案:"B"5.发酵过程中的化学参数有A.空气流量B.基质浓度C.菌丝形态D.黏度E.以上都不是正确答案:"B"6.促性腺激素的获得方式主要有几种A.1B.2C.3D.4E.5正确答案:"B"7.TNF-β主要是由哪种细胞产生A.单核-巨噬细胞B.T淋巴细胞C.B淋巴细胞D.树突状细胞E.以上都不是正确答案:"B"8.以下哪项不是常用的酶的抽提方法A.低浓度盐提取B.高浓度盐提取C.稀碱提取D.稀酸提取E.低温有机溶剂提取正确答案:"B"9.多肽药物的制备有多种方法,目前主要的制备方式是A.分离纯化法B.化学合成法C.基因工程法D.色谱法E.质谱法正确答案:"B"10.以下不属于目的基因的制备方法的是A.化学合成法B.物理合成法C.聚合酶链式反应法D.基因文库法E.cDNA文库法正确答案:"B"11.以细胞为单位,在体外条件下研究基因导入、染色体导入、细胞核移植、细胞融合、细胞大规模培养等技术属于A.基因工程B.细胞工程C.酶工程D.发酵工程E.抗体工程正确答案:"B"12.具有高投入、高风险、高收益的产业特性,技术依赖、知识密集、产品多样等特点突出,国内外医药制造业中发展最快、活力最强、技术含量最高的领域是A.化学合成药物B.生物技术药物C.微生物药物D.天然药物E.疫苗正确答案:"B"13.以下哪项不是胰岛素类似物的优点A.模拟正常胰岛素分泌B.不能避免血糖波动C.模拟胰岛素的生物学功能D.活性更强E.减少低血糖风险正确答案:"B"14.下面关于细胞因子的叙述,错误的是A.细胞因子是由细胞产生的B.一种细胞只能产生一种细胞因子C.单一细胞因子可具有多种生物学活性D.细胞因子的作用不是孤立存在的E.细胞因子多为分子量小于25kDa的糖蛋白正确答案:"B"15.三联疫苗是指A.由三种血清型制成的一种疫苗B.由三种病原体制成的一种疫苗C.由同一种类的三个毒株制成的一种疫苗D.由三种方法制成的一种疫苗E.以上都不是正确答案:"B"16.下列不属于种子扩大培养的目的是A.满足发酵罐接种量的要求C.无菌操作的需要D.缩短发酵时间,保证生产水平E.以上都不是正确答案:"C"17.利用微生物(或细胞)的特定性状,通过现代工程技术手段在生物反应器中生产药用物质的技术属于A.基因工程B.细胞工程C.酶工程D.发酵工程E.蛋白质工程正确答案:"D"18.生物药物检验要求包括A.要求有理化检验指标B.生物活性指标C.药代动力学指标D.理化指标和生物活性指标缺一不可E.以上都不是正确答案:"D"19.动物细胞融合和植物体细胞杂交技术的比较中,正确的是A.诱导融合的方法完全相同B.所用的技术手段基本相同C.培养基成分相同D.都能形成杂种E.以上都不是正确答案:"D"20.关于蛋白质多肽类药物的理化性质,错误的叙述是A.蛋白质大分子是一种两性电解质B.蛋白质大分子在水中表现出亲水胶体的性质C.蛋白质大分子具有旋光性D.蛋白质大分子具有紫外吸收E.蛋白质大分子生物活性的高级结构主要是由肽键来维持的正确答案:"E"21.生物技术药物根据其来源分类不包括A.动物来源B.植物来源C.海洋生物D.微生物来源正确答案:"E"22.下列哪项不仅提供了CDR的空间构象环境,有时还参加抗体结合位点正确构象的形成,甚至参加与抗原的结合A.可变区B.超变区C.恒定区D.互补决定区E.框架区正确答案:"E"23.以下哪项不是根据重组DNA结构特征的筛选法A.快速裂解菌落比较重组DNA的大小B.限制性核酸内切酶分析C.印记杂交法D.聚合酶链式反应法E.蛋白质免疫印迹法正确答案:"E"24.从研究的发展历史看,动物细胞培养基可以分成四类,其中不包括A.天然培养基B.合成培养基C.无血清培养基D.化学限定性培养基E.营养添加物正确答案:"E"25.以下不属于工具酶的是A.限制性核酸内切酶B.DNA连接酶C.DNA聚合酶D.末端转移酶E.酸性磷酸酶正确答案:"E"26.以下细胞破碎的方法属于生物法的是A.珠磨法B.超声法C.渗透冲击D.增溶法E.酶溶法正确答案:"E"27.请从下列各项中选出首次暴露后正确的狂犬病疫苗接种程序A.0、3、7、14、28天各注射1个剂量B.1、7、14、28、35天各注射1个剂量C.3、7、14、28、35天各注射1个剂量D.0、3、7、14天各注射1个剂量E.0、3、7、28天各注射1个剂量正确答案:"A"28.以下哪一项是原核生物表达系统最常用的系统A.大肠埃希菌表达系统B.酵母表达系统C.哺乳动物细胞表达系统D.昆虫细胞表达E.植物细胞表达系统正确答案:"A"29.微RNA(MicroRNA或miRNA)是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的A.非编码双链RNA分子B.非编码双链RNA分子C.单链RNA前体D.非编码单链RNA分子E.非编码单链DNA分子正确答案:"D"30.以一定速率将培养基料液连续输入发酵罐,同时以相同速率放出含有产品的发酵液,使发酵罐内料液体积维持恒定,促使微生物在基质浓度、产物浓度、pH等近似恒定状态下生长代谢的发酵方式是A.分批发酵B.半连续发酵C.连续发酵D.补料分批发酵E.以上选项均不正确正确答案:"C"31.动物细胞培养技术的主要要求是A.无菌B.模拟体内生存环境C.适当温度D.适当酸碱度E.一定营养条件正确答案:"A"32.成年后出现hGH分泌过多会导致的疾病是A.侏儒症B.巨人症C.肢端肥大症D.高血糖症E.糖尿病正确答案:"C"33.酶活力是指酶在一定条件下,催化某一化学反应能力,可用该反应的反应速率来表示,测定温度为A.25℃B.27℃C.30℃D.32℃E.35℃正确答案:"A"34.TNF-α主要是由哪种细胞产生A.单核-巨噬细胞B. 静止T淋巴细胞C. B淋巴细胞D. 树突状细胞E. 以上都不是正确答案:"A"35.动物细胞在体内生存条件下,对氧气的需求一般低于空气中氧饱和值的A.40%B.60%C.70%D.80%E.90%正确答案:"B"36.以下不属于常用的抗生素筛选剂的是A.氨苄青霉素B.青霉素C.氯霉素D.卡那霉素E.四环素正确答案:"B"37.下列方法不属于非病毒介导基因转移的物理方法的是A.电穿孔法B. 脂质体法C. DNA直接注射法D. 显微注射法E. 基因枪技术正确答案:"B"38.人类历史上的第一支疫苗为A.卡介疫苗B. 牛痘疫苗C. 乙肝疫苗D. 炭疽疫苗E. 流脑疫苗正确答案:"B"39.1961年,国际生物化学联合会酶学委员会根据酶所催化的反应类型和机制,把酶分为()大类A.四B.五C.六D.七E.八正确答案:"C"40.下列属于非裂解性接头的是A.腙键接头B. 缬氨酸-瓜氨酸(vc)的二肽接头C. 二硫键接头D. Kadcyla(T-DM1)中硫醚键接头E. 以上都不是正确答案:"D"41.不属于常用的动物细胞生物反应器的是A.搅拌式生物反应器B.气升式生物反应器C.填充床生物反应器D.膜式生物反应器E.喷射式生物反应器正确答案:"E"42.载体按照功能可以划分成哪两类A.克隆载体B.表达载体C.质粒载体D.噬菌体载体E.病毒载体正确答案:"AB"43.基因工程的三大要素分别是A.供体B.宿主细胞C.载体D.工具酶E.目的基因正确答案:"ABC"44.具有不同末端结构的DNA片段之间不能直接连接,但是可以对其进行适当的加工修饰后再进行连接。

生物技术制药知到章节答案智慧树2023年宁夏大学

生物技术制药知到章节答案智慧树2023年宁夏大学

生物技术制药知到章节测试答案智慧树2023年最新宁夏大学第一章测试1.生物技术的核心和关键是()参考答案:基因工程2.第三代生物技术()的出现,大大扩大了现在生物技术的研究范围参考答案:基因工程技术3.下列哪个产品不是用生物技术生产的()参考答案:氯化钠4.我国生物技术制药产业的方向有中草药及其有效活性成分的发酵生产。

()参考答案:对5.与传统的生物技术相伴随而产生的次级发酵产品。

()参考答案:错第二章测试1.在工程菌发酵过程中,选用那种糖会对lac启动子有阻遏作用。

()参考答案:甘油2.可用于医药目的的蛋白质和多肽药物都是由相应的()合成的参考答案:基因3.用反转录法获得目的基因,首先必须获得()参考答案:mRNA4.溶解氧的浓度过高或过低都会影响细菌的代谢,因而对菌体生长和产物表达影响很大。

要保持适宜的溶氧浓度,需要确定发酵罐的通气量和搅拌速度。

()参考答案:对5.大肠杆菌在发酵过程中都会产生一些有害的代谢副产物,这些副产物积累到一定量会抑制菌体的生长和蛋白的表达,可通过填加某些物质如氨基酸可减轻某些有害物质如乙酸的抑制作用。

()参考答案:对第三章测试1.传统的微生物发酵工程不能生产下列哪个产品()参考答案:青霉素2.发酵生产使用的菌种必须以休眠状态保存,一般保存温度范围是()参考答案:0-4℃3.发酵一般在不锈钢制的釜式反应罐内进行,菌种的接种量一般为()参考答案:5-20%4.对某些特殊的放线菌进行富集和分离,可选择性地添加一些抗生素(如新生霉素)。

在分离真菌时,利用低碳/氮比的培养基可使真菌生长菌落分散,利于计数、分离和鉴定。

()参考答案:对5.一般次级代谢产物的生源都是来自于微生物代谢过程中的初级代谢产物。

()参考答案:错第四章测试1.接触抑制现象指细胞在基质上分裂增殖,汇合成片,每个细胞与其周围的细胞相互接触时不会停止增殖。

()参考答案:错2.哺乳动物细胞是比较高级的表达系统,产生的药物更接近于人类蛋白质。

生物技术制药(第三版)练习题

生物技术制药(第三版)练习题

生物技术制药(第三版,夏焕章)题目1. 下列培养方式()适用于生物制药大规模细胞培养。

A. 悬滴培养B. 灌注室培养C. 培养瓶培养D. 生物反应器E. 培养板培养正确答案:D2. 生物技术的核心是()A.酶工程B.细胞工程C..基因工程D.发酵工程E.蛋白质工程正确答案:C3. 第一个被FDA批准上市的基因工程药物是什么?A. 乙肝疫苗B. 赫赛汀C. 重组人胰岛素D. 重组人干扰素正确答案:C4. 基因工程菌的稳定性至少要维持在()代以上A. 20B. 30C. 40D. 25正确答案:D5. 下列哪个产品不是用生物技术生产的A. 青霉素B. 淀粉酶C. 乙醇D. 氯化钠正确答案:D6. 与动物细胞和微生物细胞相比,植物细胞具有A. 细胞壁、线粒体和质体B. 细胞壁、液泡和质体C. 细胞壁、线粒体和中心体D. 细胞壁、内质网和质体正确答案:B(中心体动物细胞特有:溶酶体)7. 下面哪种不是植物组织培养的表面的消毒剂A. 青霉素B. 氯化汞C. 次氯酸钙D. 次氯酸钠正确答案:A植物培养细胞重量增加——主要取决于对数期;次级代谢产物累积——主要在稳定期;常用灭菌剂:次氯酸钙5~30min、次氯酸钠、氯化汞;过氧化氢、溴水、硝酸银、抗生素8. 国内首个新冠疫苗属于()A. 灭活疫苗B. 减毒活疫苗C. 联合疫苗D. 亚单位疫苗E. 基因工程疫苗正确答案:A9. 凝胶过滤法是依赖()来分离蛋白组分。

A. 分子大小B. 带电状态C. 解离状态D. 分子质量正确答案:A10. 动物细胞培养的最适PH为A.6.5-6.8B.7.0-7.2C.6.8-7.0D. 7.2-7.4正确答案:D大多数微生物生长的PH值范围:3~611. 用反转录法获得目的基因,首先必须获得A. tRNAB. cDNAC. rRNAD. mRNA正确答案:D12. 那一类细菌不属于原核细胞( )A. 大肠杆菌B. 枯草芽孢杆菌C. 酵母D. 链霉菌正确答案:C13. 影响植物次级代谢产物产生和累积的主要因素有哪些?A. 物理条件:温度、光(光照时间、光强、光质)、通气(氧气)、酸度和渗透压B. 化学条件:无机盐、碳源、物质生长调节剂、维生素、氨基酸、核酸、抗生素、天然物质和前体等;C. 生物条件:外植体、季节、休眠、分化等D. 工业培养条件:培养罐类型、通气、搅拌和培养方式。

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第一章绪论填空题1. 生物技术制药的特征高技术、高投入、高风险、高收益、长周期。

2. 生物药物广泛应用于医学各领域,按功能用途可分为三类,分别是治疗药物、预防药物、诊断药物。

3.现代生物药物已形成四大类型:一是应用DNA重组技术制造的基因重组多肽、蛋白质类治疗剂;二是基因药物;三是来自动物植物和微生物的天然生物药物;四是合成与部分合成的生物药物;4.生物技术的发展按其技术特征来看,可分为三个不同的发展阶段,传统生物技术阶段;近代生物技术阶段;现代生物技术阶段。

5.生物技术所含的主要技术范畴有基因工程;细胞工程;酶工程;发酵工程;蛋白质核酸工程和生化工程;选择题1.生物技术的核心和关键是( A )A 细胞工程B 蛋白质工程C 酶工程D 基因工程2. 第三代生物技术( A )的出现,大大扩大了现在生物技术的研究范围A 基因工程技术B 蛋白质工程技术C 海洋生物技术 D细胞工程技术3.下列哪个产品不是用生物技术生产的( D )A 青霉素B 淀粉酶C 乙醇D 氯化钠4. 下列哪组描述( A )符合是生物技术制药的特征A高技术、高投入、高风险、高收益、长周期B高技术、高投入、低风险、高收益、长周期C高技术、低投入、高风险、高收益、长周期D高技术、高投入、高风险、低收益、短周期5. 我国科学家承担了人类基因组计划( C )的测序工作A10% B5% C 1% D 7%名词解释1.生物技术制药采用现代生物技术可以人为的创造一些条件,借助某些微生物、植物或动物来生产所需的医学药品,称为生物技术制药。

2.生物技术药物一般说来,采用DNA重组技术或其它生物新技术研制的蛋白质或核酸来药物称为生物技术药物。

3.生物药物生物技术药物是重组产品概念在医药领域的扩大应用,并与天然药物、微生物药物、海洋药物和生物制品一起归类为生物生物药物。

简答题1.生物技术药物的特性是什么?生物技术药物的特征是:(1)分子结构复杂(2)具有种属差异特异性(3)治疗针对性强、疗效高(4)稳定性差(5)免疫原性(6)基因稳定性(7)体内半衰期短(8)受体效应(9)多效应和网络效应(10)检验特殊性2.简述生物技术发展的不同阶段的技术特征和代表产品?(1)传统生物技术的技术特征是酿造技术,所得产品的结构较为简单,属于微生物的初级代谢产物。

代表产品如酒、醋、乙醇,乳酸,柠檬酸等。

(2)近代生物技术阶段的技术特征是微生物发酵技术,所得产品的类型多,不但有菌体的初级代谢产物、次级代谢产物,还有生物转化和酶反应等的产品,生产技术要求高、规模巨大,技术发展速度快。

代表产品有青霉素,链霉素,红霉素等抗生素,氨基酸,工业酶制剂等。

(3)现代生物技术阶段的技术特征是DNA重组技术。

所得的产品结构复杂,治疗针对性强,疗效高,不足之处是稳定性差,分离纯化工艺更复杂。

代表产品有胰岛素,干扰素和疫苗等。

3.生物技术在制药中有那些应用?生物技术应用于制药工业可大量生产廉价的防治人类重大疾病及疑难症的新型药物,具体体现在以下几个方面:(1)基因工程制药,利用基因工程技术可生产出具有生理活性的肽类和蛋白质类药物,基因工程疫苗和抗体,还可建立更有效的药物筛选模型,改良现有发酵菌种,改进生产工艺,提供更准确的诊断技术和更有效的治疗技术等。

随着基因技术的发展,应用前景会更广阔。

(2)细胞工程和酶工程制药该技术的发展为现代制药技术提供了更强大的技术手段,使人类可控制或干预生物体初次生代谢产物和生物转化等过程,使动植物能更有效的满足人类健康方面的需求。

(3)发酵工程制药发酵工程制药的发展主要体现在对传统工艺的改进,新药的研制和高效菌株的筛选和改造等。

第二章基因工程制药填空题1.基因工程药物制造的主要步骤是:目的基因的获得;构建DNA重组体;构建工程菌;目的基因的表达;产物的分离纯化;产品的检验。

2.目的基因获得的主要方法是反转录法、反转录-聚合酶链反应法和化学合成法。

3.基因表达的微生物宿主细胞分为2大类。

第一类为原核细胞,目前常用的主要有大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、链霉素;第二类为真核细胞,常用的主要有酵母、丝状真菌。

4.基因工程菌在传代过程中经常出现质粒不稳定性的现象,质粒不稳定分为分裂不稳定性和结构不稳定性;基因工程菌的不稳定性至少维持25代以上。

5.基因工程菌的培养方式主要有分批培养;补料分批培养;连续培养;透析培养和固定化培养;6.高密度发酵一般是制培养液中工程菌的浓度在50g DCW/L以上,理论上的最高值可达200g DCW/L。

7.影响高密度发酵的因素有培养基;溶氧浓度;PH;温度和代谢副产物。

8.基因工程药物的分离纯化一般不应超过5个步骤,包括细胞破碎;固液分离;浓缩与初步纯化;高度纯化和成品加工。

9.在基因工程药物分离纯化过程中,分离细胞碎片比较困难,可用离心;膜过滤和双水相分配的方法,使细胞碎片分配在一相,目标药物分配在另一相从而达到初步分离的目的。

10.人工化学合成DNA新形成的核苷酸链的合成方向是 3’→5’,合成的DNA 5’末端是磷酸酯键, 3’末端是-OH选择题1、凝胶过滤法是依赖(A )来分离蛋白组分。

A、分子大小 B、带电状态 C、分子质量 D、解离状态2、在工程菌发酵过程中,选用那种糖会对lac启动子有阻遏作用。

(A )A、甘油 B、葡萄糖 C、甘露糖 D、饴糖3. 可用于医药目的的蛋白质和多肽药物都是由相应的( B )合成的A RNAB 基因C 氨基酸D 激素4. 用反转录法获得目的基因,首先必须获得(D)A tRNAB cDNAC rRNAD mRNA5.那一类细菌不属于原核细胞( C )A 大肠杆菌B 枯草芽孢杆菌C 酵母D 链霉菌6.基因工程菌的生长代谢与( D )无关A 碳源B RNA聚合酶C 核糖体 D产物的分子量7.基因工程菌的稳定性至少要维持在(B )以上A 20B 25C 30D 408.基因工程菌的高密度发酵过程中,目前普遍采用( A )作为发酵培养基的碳源A 葡萄糖B 蔗糖C 甘油 D甘露醇9. 基因工程药物多为胞内产物,分离提取时需破碎细胞。

化学破碎法是常用的方法,但( D )不是化学破碎细胞的方法。

A 渗透冲击B 增溶法C 脂溶法D 酶溶法10 下列那种色谱方法是依据分子筛作用来纯化基因工程药物(C)A 离子交换色谱B 亲和色谱C 凝胶色谱 D气相色谱名词解释1.基因工程技术也可称为DNA重组技术,将所要重组对象的目的基因插入载体、拼接、转入新的宿主细胞,构建工程菌,实现遗传物质的重新组合,并使目的基因在工程菌内进行复制和表达的技术。

2.基因工程药物利用DNA重组技术生产出来的药物被称为基因工程药物。

3.基因表达基因表达是指结构基因在生物体中的转录、翻译以及所有加工过程。

3.高密度发酵一般是指培养液中工程菌的菌体浓度在 50g DCW/L以上的发酵过程,理论上的最高值可达 200g DCW/L。

简答题1.简述基因工程生产药品的优点(1)利用基因工程技术可大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽,为临床使用建立有效的保障;(2)可以提供足够数量的生理活性物质,以便更深入的进行研究,从而扩大这些物质的应用范围;(3)可以挖掘更多的内源性生理活性物质;(4)可对内源性生理活性物质的不足之处进行改造;(5)可获得新型化合物,扩大药物筛选来源。

2. 根据真核基因在原核细胞中表达的特点,表达载体必须具备那些条件?表达载体必须具备下列条件:(1)能够独立的复制;(2)具有灵活的克隆位点和方便的筛选标记,以利于外源基因的克隆、鉴定和筛选;(3)应具有很强的启动子,能为大肠杆菌的RAN聚合酶所识别;(4)应具有阻遏子(5)应具有很强的终止子(6)所产生的mRNA必须具有翻译的起始信号。

3.简述影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素:(1)外源基因的剂量(2)外源基因的表达的表达效率(3)表达产物的稳定性(4)细胞的代谢负荷(5)工程菌的培养条件4.为了提高基因工程菌的质粒稳定性,可采用那些主要方法?为了提高基因工程菌的质粒稳定性,可采取:(1)选择合适的宿主菌;(2)选择合适的载体;(3)选择压力;(4)分阶段控制培养;(5)控制培养条件;(6)固定化技术。

5.影响基因工程菌培养工艺的主要因素有那些?主要因素有:(1)培养基的影响(2)接种量的影响(3)温度的影响(4)溶解氧的影响(5)诱导时机的影响(6)诱导表达程序的影响(7)PH的影响6.建立基因工程药物分离纯化工艺时,应该考虑那些因素?应考虑下列因素:(1)含目的的产物的初始物料的特点;(2)物料中杂质的种类和性质;(3)目的产物特性;(4)产品的质量要求7.基因工程技术生产的目标产物是多肽和蛋白质类化合物,这些产品有什么特点?(1)目的产物在初始物料中含量低(2)含目的产物的初始物料组成复杂(3)目的产物的的稳定性差,对酸碱热等外界因素敏感;(4)种类繁多(5)产品的质量要求9.分离纯化基因工程药物常用的色谱方法有那些?它们的原理是什么?分离纯化基因工程药物常用的色谱方法有:离子交换色谱,疏水色谱,亲和色谱和凝胶过滤色谱;离子交换色谱,以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子和交换剂上的平衡离子进行可拟交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种色谱方法;疏水色谱,利用蛋白质表面的疏水区域与固定相上疏水性基团相互作用力的差异对蛋白质组分进行分离的色谱方法;亲和色谱:利用固定化配体与目的蛋白质之间非常特异的生物亲和力进行吸附,这种结合既是特异的又是可逆的,改变条件可以使这种结合解除的原理分离纯化蛋白质;凝胶过滤色谱,是以多孔性凝胶填料为固定相,按分子大小对溶液中各组分进行分离的液相色谱方法。

10. 影响高密度发酵的因素有那些?(1)培养基为满足菌体生长和外源蛋白表达的需求,常需投入几倍于生物量的基质,为了达到理想的效果,需要对培养基的营养物质的配比进行优化。

(2)溶氧浓度溶解氧的浓度过高或过低都会影响细菌的代谢,因而对菌体生长和产物表达影响很大。

要保持适宜的溶氧浓度,需要确定发酵罐的通气量和搅拌速度。

(3)PH在高密度发酵的过程中,PH的改变会影响细胞的表达和基因产物的表达,因此一定要考虑细菌的最适PH范围。

(4)温度温度是影响细菌生长和调控细胞代谢的重要因素。

较高的温度有利于细菌的生长,提高菌体的生物量。

(5)代谢副产物大肠杆菌在发酵过程中都会产生一些有害的代谢副产物,这些副产物积累到一定量会抑制菌体的生长和蛋白的表达,可通过填加某些物质如氨基酸可减轻某些有害物质如乙酸的抑制作用。

第七章发酵工程技术概论填空题1. 发酵工业的生产水平取决于三个要素,分别是生产菌种、发酵工艺和发酵设备。

2.发酵工程产品开发的关键是筛选到高效菌株,一般优良菌种的选育方法主要有自然选育、诱变育种和原生质体融合。

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