糖类、蛋白质、脂肪的鉴定

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检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质的方法

检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质的方法糖类的检测方法：1.放射免疫法：利用放射性同位素标记的抗体或反应物与目标糖类结合，通过测量放射同位素的放射性强度来定量糖类。

2.高效液相色谱法：利用高效液相色谱仪将样品中的糖类分离，并通过检测器测定糖类的浓度。

3.还原糖法：通过还原糖的特性，将还原糖与试剂反应生成有色化合物，通过测量其吸光度来定量糖类的浓度。

4.酶法：利用具有特异性的酶针对特定的糖类进行酶解反应，生成可测定的产物，通过检测产物的浓度来定量糖类。

脂肪的检测方法：1.水解法：将样品中的脂肪水解为脂肪酸和甘油，再通过酶法或化学法测定脂肪酸或甘油的浓度。

2.胆固醇氧化酶法：利用脂肪样品中的胆固醇通过酶催化反应生成可测定的产物，通过测量产物的浓度来定量脂肪。

3.紫外吸收法：利用脂肪样品中的化学结构特性，通过紫外光谱测量脂肪的吸光度来定量脂肪的含量。

4.气相色谱法：通过气相色谱仪将样品中的脂肪分离，并通过检测器测定脂肪的浓度。

蛋白质的检测方法：1.低里氏法：利用低里氏试剂与蛋白质发生反应，形成可测定的复合物，通过测量复合物的吸光度来定量蛋白质的浓度。

2.高效液相色谱法：利用高效液相色谱仪将样品中的蛋白质分离，并通过检测器测定蛋白质的浓度。

3.毛细管电泳法：将样品中的蛋白质在电场作用下在毛细管中分离，根据蛋白质的电荷、大小和形状的差异来测定蛋白质的浓度。

4.射流显色法：利用射流试剂将蛋白质样品中的蛋白胺基酸与试剂反应生成有色产物，通过测量产物的吸光度来定量蛋白质的浓度。

需要注意的是，以上方法中的每一种都有其适用范围和局限性，具体选择方法时需根据实验要求、样本特性和实验设备等因素进行合理选择。

此外，还可结合多种方法进行确认和校准以提高检测结果的准确性和可靠性。

检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质

检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质引言生物组织是多种不同类型细胞的集合体，其中包含着大量的糖类脂肪和蛋白质。

这些生物分子在细胞的正常功能以及许多疾病的发生和发展中起着重要的作用。

因此，准确、可靠地检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质是科学研究和医学诊断的关键。

检测方法糖类的检测糖类是生物组织中常见的一类生物分子，包括单糖、双糖、多糖等多种形式。

常用的糖类检测方法包括：1.纸层析法：将样品和标准溶液分别点于纸层析板上，通过上升色谱将样品中的糖类分离，并通过特定显色剂反应显示糖类的位置和含量。

2.高效液相色谱（HPLC）：通过色谱柱和流动相的相互作用，将混合物中的糖类分离，并通过检测器测量各组分的峰面积或浓度。

3.质谱法：利用质谱仪对样品中的糖类进行离子化和质量分析，根据质谱图谱确定糖类的结构和含量。

脂肪的检测脂肪是生物组织中重要的能量储存物质，包括甘油三酯、磷脂等多种类型。

常用的脂肪检测方法有：1.色谱法：通过将样品中的脂肪分离，并通过色谱柱和检测器测量各组分的峰面积或浓度来定量。

2.光谱法：利用紫外-可见吸收光谱或红外光谱测量样品中脂肪的吸收或振动特征，从而确定脂肪的含量。

3.核磁共振（NMR）：利用核磁共振技术对样品中的脂肪进行分析和定量。

蛋白质的检测蛋白质是生物组织中的重要成分，不仅参与细胞的结构和功能，还承担信号传导、酶催化等多种生物过程。

常用的蛋白质检测方法包括：1.分光光度法：通过测量蛋白质溶液中的吸收或荧光强度来确定蛋白质的含量。

2.凝胶电泳法：将蛋白质溶液分离成不同带电性质的组分，通过电泳进行分离，并通过染色或荧光标记检测蛋白质的位置和含量。

3.质谱法：利用质谱仪对蛋白质进行离子化和质量分析，根据质谱图谱确定蛋白质的结构和含量。

应用检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质在不同领域具有广泛的应用，例如：•医学诊断：通过检测生物组织中特定糖类脂肪和蛋白质的异常水平，可以帮助医生确定特定疾病的诊断和治疗方案。

糖类脂质蛋白质的鉴定实验.

解析：选D。本题在于考查学生的动手能力，实验操作是否正确、规范。正确回答这类题目除了要亲自动手完成实验外，熟记实验过程的操作程序是解题的关键。脂肪的检测选用的材料是花生子叶，切片后，染色制片用显微镜观察。可溶性还原糖和蛋白质的检测都是将生物材料制成样液，然后检测，不用显微镜。需要隔水加热的是检测可溶性还原糖的实验；斐林试剂的甲液和乙液要先混合再使用，且要现配现用；双缩脲试剂中的A 液和B液不需混合，但也要现配现用。实际上，该实验中有许多可对比记忆的知识点，同学们在平时学习中要善于去归纳总结。
• 2．方法步骤： • (1)制备生物组织样液
• (2)实验操作方法和观察 • ①向试管内注入组织样液 2 mL( 或蛋白稀释液2 mL)
• (3)结论：组织样液加入双缩脲试剂A后，颜色变化为无色，再加双缩脲试剂B后，颜色的变化是紫色。这说明组织样液中含有蛋白质。从而鉴定黄豆组织中或者蛋白稀释液中或新鲜的肝脏中有蛋白质。 • 注意：做鉴定蛋白质的实验时，在鉴定之前，要留出一些黄豆组织样液，以便用来与化学试剂发生反应后的颜色作对比，增强说服力。 • 若不用豆浆，用蛋白稀释液或新鲜肝脏提取液做实验材料，应稀释到一定程度，如果稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管的内壁上，使反应不容易彻底，并且试管不易刷干净。
• 在脂肪的鉴定实验中，花生种子浸泡的时间是 ( ) • A．1～2 h B．3～4 h • C．6～7 h D．8～9 h • 答案：B • 解析：实验前将供实验的花生种子浸泡的目的是容易切成完整的薄片，浸泡时间短了，不容易切成片(易碎)；浸泡时间过长，则组织太软，切下的薄片不易成形。经实验证明适宜的浸泡时间为3～4 h。
双缩脲试剂 A液 B液

糖类脂肪蛋白质的检测

NaOH + CuSO4
Cu(OH)2 蓝色沉淀 + … …
Cu(OH) 2 + 还原糖
Cu 2 O 砖红色沉淀 + … …
3.为什么要用新配制的试剂？因为斐林试剂稳定性较差，要现用现配，混合使用。
二、脂肪的鉴定 A:实验原理: 脂肪+苏丹III染液
橘黄色
脂肪+苏丹IV染液
红色
B:实验步驟选材:花生种子最好,浸泡.
制备样液: 大豆----研磨------过滤
鉴定步驟:
0.01 g/ml的CuSO4溶液
b 再加双缩脲试剂B液
a 先加双缩脲试剂A液
0.1 g/ml的NaOH溶液, 先为实验制造碱性环境.
豆浆
蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应
① B液要求量适中，否则多余的B液将会与A液发生反应生成Cu(OH)2显色而遮盖原有的颜色。
制备样品:花生去皮------切薄片.
鉴定:
d 显微镜观察
c 制片
花生切片
b 50%酒精漂洗 a 苏丹III染色
实验现象:脂肪+苏丹III染液
橘黄色
脂肪+苏丹IV染液
红色
显微镜
三、蛋白质的鉴定
A: 实验原理：蛋白质+双缩脲试剂
紫色反应
B: 实验步驟:
选择:大豆豆浆或鸡蛋蛋白(稀释) ,鲜肝提取液.
葡萄糖果糖麦芽糖蛋白质斐林试剂苏丹染液双缩脲试剂橘黄色紫色蓝色水浴加热待检有机物颜色变化砖红色沉淀苏丹染液红色一还原糖的鉴定可溶性还原糖斐林试剂砖红色沉淀水浴加热葡萄糖果糖麦芽糖是
一、还原糖的鉴定
A:实验原理：
可溶性还原糖+斐林试剂

检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质

考点三（实验）检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（5年6考）检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.检测原理(1)糖类的检测(2)脂肪的检测：脂肪＋⎩⎨⎧苏丹Ⅲ染液―→橘黄色苏丹Ⅳ染液―→红色 (3)蛋白质的检测：蛋白质＋双缩脲试剂―→紫色2.实验步骤3.实验成功关键点(1)三个实验中都不宜选取有颜色的材料，否则会干扰实验结果的颜色变化。

(2)由于苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液易溶于酒精，故可用体积分数为50%的酒精洗去浮色。

(3)蛋白质鉴定中，若用大豆作材料，必须提前浸泡；若用蛋清作材料，必须稀释，防止其黏在试管上不易刷洗。

(4)物质鉴定实验一般可预留部分样液作对照实验，若需进一步设立对照实验，对照组应加入成分已知的物质，如验证唾液淀粉酶是蛋白质，对照组可加入稀释的鸡蛋清溶液。

1.下图是检测还原糖的实验(1)如下图示的处理，2 min后试管内将呈现何种颜色？试加以分析说明。

(2)向某试管内无色液体中加入斐林试剂，经加热若出现砖红色沉淀，则表明试管内含有葡萄糖，对吗？提示(1)应为蓝色(斐林试剂的颜色，因未经水浴加热，只有将试管置于50～65 ℃温水中，经水浴加热后，方可呈现“砖红色沉淀”)。

(2)不对。

只能证明含有“还原糖”，不能具体证明是哪种还原糖。

2.下图为某种物质鉴定方案，请推测：(1)图示的实验方案用于鉴定何类物质，其中“某试剂”是什么？A液、B液分别指什么？(2)若溶液中有被检测物质则右侧试管“摇匀后”变成何种颜色？提示(1)蛋白质及多肽化合物；双缩脲试剂；A为0.1 g/mL NaOH溶液；B为0.01 g/mL CuSO4溶液。

(2)紫色。

糖类、脂肪与蛋白质的检测1.(2016·海南卷，15)下列实验中，加入试剂后不能产生特定颜色的是()A.取成熟香蕉匀浆，用斐林试剂检测还原糖B.黑暗中生长24 h的天竺葵叶片，用碘液检测淀粉C.玉米根尖经甲基绿染色后，在显微镜下观察细胞核D.花生子叶经苏丹Ⅲ染色后，在显微镜下观察脂肪颗粒解析成熟香蕉中含有较多葡萄糖，用斐林试剂检测会出现砖红色沉淀；黑暗中生长24 h的天竺葵叶片，淀粉被消耗，加入碘液不会产生蓝色；玉米根尖经甲基绿染色后，在显微镜下观察细胞核呈绿色；花生子叶经苏丹Ⅲ染色后，在显微镜下观察脂肪颗粒呈橘黄色。

检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质(教学案]

检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质(教学案]
1. 糖类检测：可以采用苏丹红反应法和不定量蓝色磷钼酸法。

苏丹红反应法基于苏丹红与糖类产生的红色复合物，颜色深浅程度可以反映糖类的含量；不定量蓝色磷钼酸法则是利用蓝色磷钼酸与糖类生成蓝色复合物，再根据颜色深浅程度进行糖含量的定量。

2. 脂肪检测：可以采用苏丹三染色法和乙醇提取法。

苏丹三染色法是将组织切片染色，然后进行显微镜观察，染色深的部位表示脂肪含量高；乙醇提取法是用乙醇将脂肪溶解，然后通过温度恒定、有机溶剂飘移法进行脂肪量的测定。

3. 蛋白质检测：可以采用比色法和光度法。

比色法根据蛋白质与某种化学试剂生成的色素深度，来反映蛋白质的含量；光度法则是利用蛋白质与特定光源产生的光学反应，通过光密度来测定蛋白质含量。

需要注意的是，具体选择哪种检测方法要根据样本的类型和检测的目的确定。

同时，检测前要进行适当的样本处理和前处理，以保证检测的准确性和重复性。

高中生物必修1 实验：检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质

斐林试剂与双缩脲试剂的比较
斐林试剂双缩脲试剂
鉴定物质成分
可溶性还原性糖甲液
0.1g/ml NaOH溶液
蛋白质或多肽 A液
0.1g/ml NaOH溶液
乙液
0.05g/ml CuSO4溶液
B液
0.01g/ml CuSO4溶液
添加顺序
甲、乙两液等量混合均匀后再注入 (即现配现用) 水浴加热
实验原理

显色反应
有机物糖类淀粉
染色剂颜色反应碘液蓝色
还原糖斐林试剂苏丹Ⅲ/Ⅳ 脂肪双缩脲试剂蛋白质
砖红色
橘黄的检测
（1）取一支试管1，注入2mL梨匀浆；（2）另取一支试管2，注入1mL斐林试剂甲液和1mL斐林试剂乙液，振荡，混合均匀，制成斐林试剂；（3）将试管2中刚配制好的斐林试剂注入试管1中，振荡混匀；（4）将试管放入烧杯中水浴加热，观察颜色变化。
2、脂肪的检测
（1）取材：取一片花生切片，选择最薄切片放在载玻片中央；（2）染色：滴加2-3滴苏丹Ⅲ染液染色3分钟，用吸水纸吸去染液；（3）去浮色：再滴加1-2滴体积分数50%的酒精溶液，洗去浮色；（4）制片与观察：吸去酒精，滴加一滴清水，盖上盖玻片，制成临时装片，在显微镜下找到子叶最薄处，寻找橘黄色脂肪颗粒
蛋白质鉴定原理
鉴定生物组织中是否含有蛋白质，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。在碱性溶液中，双缩脲能与Cu2+作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反应叫双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。
紫色
注意双缩脲试剂A：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液双缩脲试剂B：质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液使用时，先加入2ml双缩脲试剂A，振荡摇匀；再加入3—4滴双缩脲试剂B。

检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质实验报告

检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质实验报告实验报告：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一、实验目的本实验旨在通过生化实验的方法，检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质，以了解这些物质在生物组织中的分布和含量，为生物组织代谢研究提供基础数据。

二、实验原理1.糖类检测：糖类物质在生物组织中广泛存在，包括单糖、低聚糖和多糖。

其中，还原性糖如葡萄糖、果糖等可与斐林试剂发生氧化还原反应，产生砖红色沉淀。

非还原性糖如淀粉、纤维素等则不能与斐林试剂反应。

2.脂肪检测：脂肪是生物组织中重要的储能物质。

在酸性条件下，脂肪可被脂酶分解为脂肪酸和甘油，脂肪酸可与热硫酸反应生成硫酸酯，产生绿色荧光。

3.蛋白质检测：蛋白质是生物组织中功能多样性的基础。

在碱性条件下，蛋白质可与双缩脲试剂发生紫色反应。

三、实验步骤1.准备试剂和样品：分别准备斐林试剂、脂酶、硫酸、双缩脲试剂；选取具有代表性的生物组织样品，如动物肝脏、植物叶片等。

2.制备样品溶液：将生物组织样品研碎，加入适量溶剂制成样品溶液。

3.检测糖类：取样品溶液适量，加入斐林试剂，加热至沸腾，观察颜色变化。

4.检测脂肪：取样品溶液适量，加入脂酶，在酸性条件下加热一定时间，加入热硫酸，观察颜色变化。

5.检测蛋白质：取样品溶液适量，加入双缩脲试剂，搅拌均匀，观察颜色变化。

四、实验结果与分析1.实验结果：通过上述实验步骤，我们得到了生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的检测结果。

具体数据如下：2.结果分析：从实验结果可以看出，该生物组织中糖类含量较高，这可能与该生物组织的能量需求有关；脂肪含量相对较低，这可能与该组织的生理功能有关；蛋白质含量适中，表明该组织具备一定程度的生物活性。

此外，通过对不同物质含量的比较分析，我们可以初步推断该生物组织的代谢类型和生理功能。

五、结论本实验通过生化实验方法成功地检测了生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质含量，得到了较为可靠的实验数据。

这些数据为进一步研究生物组织的代谢过程提供了基础资料。

糖类、蛋白质、脂肪的鉴定 (共15张PPT)-经典教学教辅文档

2步骤：（1）试管中加样液2mL （2）加双缩脲试剂A液2mL（造成碱性环境），摇匀（3）加双缩脲试剂B液3-4滴，摇匀（4）观察颜色变化（紫色）注：①若用蛋清液作材料，必须稀释，防止其黏在试管上不易刷洗。
②B液不能过量，多余的B液会与A液反应成蓝色，而掩盖生成的紫色。
比较斐林试剂和双缩脲试剂
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实验生物组织中糖类脂肪和蛋白质鉴定
一、糖类鉴定（1）实验原理：化学试剂+有机化合物→特定的颜色
还原糖 + 斐林试剂水浴加热砖红色沉淀斐林试剂：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液
乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液使用注意事项：等量混合，现配现用（ NaOH+CuSO4）
淀粉 + 碘→蓝色用试管取2mL待测组织样液，向试管内滴加1～2滴碘液，观察颜色变化。
GK
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检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质

1 实验二、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
一、实验原理
生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生特定的颜色反应。

还原糖中的醛基被
Cu(OH)2氧化，Cu(OH)2被还原为Cu 2O （砖红色）；具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu
2+反应生成络合物（紫色）。

2.脂肪+苏丹Ⅲ染液→橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ染液→
红色
3.蛋白质+双缩脲试剂→紫色
（二）主要实验材料：
1.苹果或梨匀浆，马铃薯匀浆，花生种子、花生种子匀浆，豆浆，鲜肝提取液
2. 斐林试剂（甲液：质量浓度为0.1g/ml 的NAOH 溶液，乙液：0.05g/ml 的CuSO 4溶液），苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，双缩脲试剂（A 液：质量浓度为0.1g/ml 的NaOH 溶液，B 液：0.01g/ml 的CuSO 4溶液），体积分数为50%的酒精溶液，碘液，蒸馏水。

（三）方法与步骤：
1.还原糖的检测和观察
注：溶液颜色的变
化过程为浅蓝色
→棕色→砖红色
2. 脂肪的检测和观察
3.蛋白质的检测和观察（四）注意事项 1.使用斐林试剂时要现用现配，以免放置过久产生Cu(OH)2沉淀影响实验效果；试管要用水浴加热，
不能直接接触酒精灯。

2.使用双缩脲试剂时要先加入NaOH 创设碱性环境，然后再加入CuSO 4。

3.实验不宜选择有颜色的材料，否则会干扰实验结果的颜色变化。

检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质

实验一检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一．实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质，阐明实验原理—颜色反应，识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握鉴定上述化合物的基本方法,学会描述实验现象，掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法.二．实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。

1．生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。

前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖;蔗糖分子内没有，为非还原糖。

实验中所用的斐林试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原糖。

可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O沉淀。

如：葡萄糖+ 2Cu2+ + 4OH—加热葡萄糖酸+ Cu 2O↓(砖红色）+ H 2O 即Cu 2+被还原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。

用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色沉淀淀粉遇碘变蓝色(直链）或紫（红)色(支链）。

2．脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类.它是构成人体组织的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。

在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。

脂类的主要功能是氧化供能.脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。

在病理检验中，脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。

脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ,苏丹黑及油红O等。

脂肪被染色,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。

经研究认为组织中脂质在液态或半液态时，对苏丹染料着色效果最好。

根据这一原理，适当提高温度(37℃—60℃）对组织切片染色效果是有好处的。

脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固,如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。

糖类、蛋白质、脂肪的鉴定

检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
1.实验原理
生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
实验原理
鉴定物质还原性糖
脂肪
蛋白质淀粉
试剂斐林试剂
苏丹Ⅲ 苏丹Ⅳ 双缩脲试剂
碘
实验现象
砖红色沉淀橘黄色红色紫色蓝色
方法步骤： 1．实验材料、仪器和试剂的选择 2．设计记录表格，记录预测结果 3．检测的方法步骤 (1)还原糖的检测和观察; (2)脂肪的检测和观察; (3)蛋白质的检测和观察;
D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用
第二章组成细胞的分子网络构建
蛋白质的结构和功能
细胞的分子组成
核酸的结构和功能
水和无机盐的作用
糖类的种类和作用
脂质的种类和作用
C、H、O、N 种类
20种
氨基酸脱水缩合多肽化学键名称肽键
氨基酸种类、数目、排列顺序、空间结构
蛋白质结构的多样性
蛋白质7~10%
显微观察：先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察
现象：有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒
脂肪的检测结果
3.蛋白质的鉴定
选材与制备黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液）组织样液：［黄豆浸泡 →去皮→切片→研磨→过滤→滤液］
显色反应现象：
(创设碱性条件)
(提供Cu2+)
无色
紫色或紫红色
而后立即使用。
砖红色沉
0.05g/mL
淀
在碱性
NaOH 浓度为
蛋白质的鉴定
双缩脲试剂NaOH和
CuSO4
环境下的Cu2+
0.1g/mL
CuS04 浓度为
先加入Na0H 1mL，然后再加CuS04 4滴，摇匀。 (不能过量)

糖类脂肪蛋白质的鉴定

一层，形成平面。
③刀口向内，与花生断面平行，以均匀的动作，
自左前方向右后方快速拉刀，滑行切片（注意要整个臂部用力，而不要腕部用力。）如此连
续动作，切下一些薄片。
（2）染色
用毛笔将最薄的几片材料移至洁净的载玻片的中央→滴苏丹Ⅲ溶液2-3滴于花生子叶薄片上→21min后，吸去染液→滴50%的酒精洗去浮色→吸去多余酒精→再滴1-2滴蒸馏水→盖上盖玻片，制成临时装片。
R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O
2.实验材料
做可溶性还原糖的鉴定实验，还原糖的含量、生物组织有无色素是影响实验结果及其观察的最重要因素。
因此要选用可溶性还原糖含量高、白色或近于白色的植物组织，其中以苹果、梨最好，也可用白萝卜替代。
3.试剂配制甲液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）
2.实验材料做蛋白质的鉴定实验，一般选用蛋白质
含量较高的大豆(可用豆浆替代）或鸡蛋清。 3.试剂配制
A液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）双缩脲试剂
B液（0.01g/mL的硫酸铜溶液）
4.实验步骤：
（1）制备生物组织样液（教师制备）（2）鉴定
先加 2mL组织样液
再加 2mL双缩脲试剂A液
（3）镜检鉴定
在低倍镜下观察，找到花生子叶切片的最薄处（最好只有1-2层细胞），移至视野的中心→换用高倍镜观察，调焦至最清晰。可发现细胞内橘黄色的圆形小颗粒，这就是脂肪滴（油滴）。若发现观察物外围也有许多橘黄色小颗粒，则是脂肪跑了出来。
脂肪检测实验的实验结果
若用物理方法如何鉴定脂肪的存在?
斐林试剂乙液（0.05g/mL的硫酸铜溶液）
甲液乙液等量混合，现用现配，切不可分开滴加，或者久置后才用。

检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质

约2min50~65℃水浴加热三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。

①还原糖+斐林试剂———————>砖红色沉淀②淀粉+碘液→蓝色③脂肪+苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）→橘黄色（或红色） ④蛋白质+双缩脲试剂→紫色2.实验步骤及实验现象：①还原性糖鉴定：取材→制备组织样液→加斐林试剂1ml →水浴加热煮沸→显色（浅蓝色→棕色→砖红色沉淀） ②淀粉鉴定：取材→制备组织样液（马铃薯匀浆）→滴加碘液→摇匀后变成蓝色③脂肪鉴定：方法一：取材与制备组织样液（花生种子匀浆）→滴加苏丹Ⅲ（苏丹Ⅳ）→摇匀后变成橘黄色（红色）方法二：取材、切片、制片：花生种子浸泡，将子叶切成薄片→滴加苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）→用50%酒精洗去浮色→镜检（看到橘黄色或红色的脂肪颗粒）④蛋白质鉴定：取材→制备组织样液（豆浆或蛋清稀释液）→加双缩脲试剂A 液1ml →摇匀→加双缩脲试剂B 液4滴→观察颜色（紫色）3.实验注意事项：（1）从植物器官中提取糖类、脂肪、蛋白质的方法：设法使细胞破碎（如研磨、挤压或切割等），再将这些物质提取出来。

（2）禾谷类的果实、种子中含淀粉较多；甘蔗的茎和甜菜的根含蔗糖较多；花生、芝麻的种子中含脂质较多；大豆种子中含蛋白质较多。

（3）显色反应材料选择时要注意：①材料本身应浅色，以免对实验结果的观察产生干扰； ②材料应含有丰富的相关物质，使现象更显著。

（4）还原性糖鉴定①常见的还原糖有葡萄糖、果糖、半乳糖、麦芽糖、果糖、乳糖等。

②实验材料要选含还原性糖量高，白色或近于白色的组织，如苹果和梨的匀浆。

③不能选用甜菜、甘蔗，因为它们所含的蔗糖属于非还原性糖。

④马铃薯含淀粉较多，也不能作为该实验材料。

⑤西瓜、血液、绿色叶片等材料本身的颜色会对实验结果造成干扰，也不能作为该实验材料。

⑥斐林试剂实际上是Cu(OH)2的悬液，不稳定，如果长时间放置，Cu(OH)2悬液会变成Cu(OH)2沉淀，不易和还原糖发生反应。

知识点-检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质_2

甲乙液等量混匀水浴加热约2min
变成砖红色
50----650C的温水
结论：可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过
程中生成砖红色沉淀，说明植物组织样液中含有还原糖。
注意事项：
①还原糖有葡萄糖，果糖，麦芽糖。 ②试剂：斐林试剂 . （甲液：0.1g/ml 的 NaOH , 乙液：0.05g/ml的 CuSO4 .）甲乙液必须等量混合均匀后再加入样液中，现配现用。 ③必须用水浴加热。
细胞和蒸馏水.上述四支试管中加入双
缩脲试剂振荡后,有紫色反应的是
( D)
A.甲、丁
B.甲、乙、丁
C.甲、乙、丙 D.甲、丙
Ｂ 2.下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是
Ａ．用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定Ｂ.脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴 C.鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液Ｄ．用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现配现用
④颜色变化：
浅蓝色棕色
砖红色
2、脂肪的检测和观察：
方法一：待测组织样液+苏丹Ⅲ染液→橘黄色
方法二：制作子叶临时切片，用显微镜观察子叶细胞的着色情况。
取材：花生种子(浸泡3～4h），将子叶削成薄片
制片
①取最理想的薄片
②在薄片上滴苏丹Ⅲ染液（2～3min） ③去浮色（用50﹪酒精） ④ 制成临时装片
知识点—— 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
一.实验原理：
某些化学试剂能够使生物组织中的有关有
机化合物产生特定的颜色反应。如：
①.还原性糖的鉴定： ▲
还原性糖+ 斐林试剂