分子生物学试题库

第2章染色体与DNＡ

名词解释

原癌基因:细胞内与细胞增殖相关得正常基因，就是维持机体正常生命活动所必须得，在进化上高等保守。当原癌基因得结构或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强时，使细胞过度增殖，从而形成肿瘤.

半保留复制:以亲代DNA双链为模板以碱基互补方式合成子代DＮA,这样新形成得子代DNA 中，一条链来自亲代DＮＡ,而另一条链则就是新合成得,这种复制方式叫半保留复制。

填空题

3、在聚合酶链反应中，除了需要模板DNA外，还需加入引物、DＮA聚合酶、dNTP与镁离子。

４、引起ＤNA损伤得因素有自发因素、物理因素、化学因素。

5、ＤＮA复制时与ＤNA解链有关得酶与蛋白质有拓扑异构酶Ⅱ、解螺旋酶、单链ＤＮＡ结合蛋白。

6、参与DNＡ切除修复得酶有DNA聚合酶Ⅰ、DＮＡ连接酶、特异得核酸内切酶。

７、在真核生物中DNA复制得主要酶就是ＤNA聚合酶δ.在原核生物中就是ＤNA聚合酶Ⅲ.

8、端粒酶就是端粒酶就是含一段RＮA得逆转录酶.

9、ＤNA得修复方式有错配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复、ＤNＡ得直接修复。

简述ＤNＡ复制得过程

DNＡ得复制过程可被分为3个阶段，即复制得起始、延伸与终止.每个DNA复制得独立单元主要包括复制起始位点与终止位点.

DＮA复制得起始包括预引发与引发两个阶段.在预引发阶段,DＮＡ解旋解链，形成复制叉,引发体组装;在引发阶段，在引发酶得催化下以DNA链为模板合成一段短得RNA引物。复制时DNA链得延伸由DＮＡ聚合酶催化,以亲代DＮA链为模板,引发体移动，从5′→3′方向聚合子代ＤNＡ链。当子链延伸到达终止位点就是，ＤＮＡ复制就终止了,切除RＮＡ引物，填补缺口，在DNA连接酶得催化下将相邻得冈崎片段连接起来形成完整得DＮA长链。

试述真原核生物得ＤNA复制得特点得不同之处

①真核生物染色体有多个复制起点，多复制眼，呈双向复制，多复制子.原核生物得染色体只有一个复制起点，单复制子也呈双向复制。

②真核生物冈崎片段长约2０0bp比原核生物略短.真核生物DNA复制速度比原核慢,速度为10０0～3000bp/mｉn(仅为原核生物得1／20～1/５0).

③真核生物复制得终止在端粒处，原核生物得复制叉相遇时即终止。

④真核生物染色体在全部复制完之前起点不再重新开始复制；而在快速生长得原核生物染色体DNA复制中，起点可以连续发动复制。真核生物快速生长时,往往采用更多得复制起点。

⑤真核生物有多种ＤNA聚合酶,ＤＮA聚合酶δ就是真正得复制酶，在PＣNA存在下有持续得合成能力。PＣNA称为增殖细胞核抗原，相当于大肠杆菌DＮＡ聚合酶Ⅲ得β-夹子，RFC蛋白相当于夹子装配器。

原核生物得DNA聚合酶有三种DＮA聚合酶ⅢDNA得真正复制酶：多亚基酶,含十种亚基，该酶ＤNA合成得持续能力强。

⑥真核生物线性染色体两端有端粒结构，它就是由许多成串得重短复序列组成,端粒功能就是稳定染色体末段结构，防止染色体间得末端连接，并可补偿滞后链5'－末段在消除ＲＮA引物后造成得空缺,使染色体保持一定长度。端粒酶就是含一段RNA得逆转录酶。

⑦ＲＰA：真核生物得单链结合蛋白；ＲNaseＨ1与MF－1切除ＲNA引物，DNA聚合酶ε填补缺口。

简述半保留复制得生物学意义

ＤNA得复制过程（以大肠杆菌为例）

复制起始：

（1）、拓扑异构酶解开超螺旋。

（２)、Dna A蛋白识别并在AＴP存在下结合于四个９ｂp得重复序列。

(3）、在类组蛋白（HU、ＡＴP参与下，Ｄan Ａ蛋白变性13个bp得重复序列,形成开链复合物。

（4) 、Dna B借助于水解AＴP产生得能量在Dna Ｃ得帮助下沿5’→３’方向移动,解开DNA双链，形成前引发复合物.

(5)、单链结合蛋白结合于单链。

（6)、引物合成酶（Dｎa G蛋白)开始合成ＲNＡ引物.

链得延长(冈崎片段得合成):

在ＤNA聚合酶Ш得催化下,以四种5'－脱氧核苷三磷酸为底物,在ＲNＡ引物得3’端以磷酸二酯键连接上脱氧核糖核苷酸并释放出焦磷酸。ＤＮA链得延伸同时进行前导链与滞后链得合成.两条链方向相反。

6、PCR得基本原理?

PＣR就是在试管中进行得DNＡ复制反应,基本原理就是依据细胞内ＤNA半保留复制得机理,以及体外DNA分子于不同温度下双链与单链可以互相转变得性质,人为地控制体外合成系统得温度，以促使双链DNA变成单链，单链DNA与人工合成得引物退火,然后耐热DＮA聚合酶以ｄNTP为原料使引物沿着单链模板延伸为双链DNＡ。PCR全过程每一步得转换就是通过温度得改变来控制得。需要重复进行ＤNA模板解链、引物与模板ＤNA结合、ＤNＡ聚合酶催化新生DＮA得合成,即高温变性、低温退火、中温延伸３个步骤构成ＰCＲ反应得一个循环，此循环得反复进行,就可使目得ＤＮＡ得以迅速扩增。DNA模板变性:模板双链DNＡ？单链DNＡ,94℃。退火:引物+单链DNA?杂交链，引物得Tｍ值。引物得延伸:温度至70 ℃左右,TaｑDNA聚合酶以４种ｄNTP为原料，以目得DＮA为模板,催化以引物３'末端为起点得5'→3'DNA链延伸反应,形成新生DNA链。新合成得引物延伸链经过变性后又可作为下一轮循环反应得模板PCR，就就是如此反复循环，使目得ＤＮA得到高效快速扩增。

第三章

启动子：就是一段位于结构基因5，端上游区得DNＡ序列，能活化RNA聚合酶，使之与模板ＤＮA准确地相结合并具有转录起始得特异性.指RNA聚合酶识别、结合与开始转录得一段特定得ＤＮＡ序列。

增强子：能强化转录起始得序列称为增强子.

转录:以DNA为模板，按照碱基配对原则合成RNＡ,即将DNＡ所含得遗传信息传给ＲＮA，形成一条与DNA链互补得RNA得过程。

RＮA得编辑:就是某些RNA,特别就是mRNA得一种加工方式，它导致了DＮA所编码得遗传信息得改变。

外显子（Eｘon）:真核细胞基因ＤNＡ中得编码序列，这些序列被转录成ＲNＡ并进而翻译为蛋白质。

内含子（Inｔron)：真核细胞基因DNＡ中得间插序列，这些序列被转录成RＮA，但随即被剪除而不翻译。

复制子:生物体得复制单位称为复制子(ｒeplicoｎ) ，就是在同一个复制起点控制下得一段DNA序列。

转录单元:就是一段启动子开始至终止子结束得ＤＮA序列。

转录起点：就是与新生RＮA链得第一个核苷酸相对应得DNA链上得碱基,通常为一个嘌呤。