交叉污染分进阶篇
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该种类型的交叉污染无法分出是试剂针还是搅拌杆携带进的污染对测试结果的影响，是两者的 综合影响，且一般比较明显。
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目录
1 关于交叉污染 2 交叉污染类型
3 如何解决
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携带污染实验方案
目前大部分实验室开展的生化检测项目至少都有20项以上，评价全项 目之间的携带污染会非常耗时，试剂成本消耗量大。且不同仪器的动 作原理不完全相同，设计一个较为简单，合理的实验方法是需要重点 考虑的 内容。
不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
4.比色杯/清洗系统携带污染
在每日早晨刚开机时对所有项目做试剂空白测定， 试剂空白吸光度高（终点法）或者试剂空 白吸光度变化率高（速率法） 特点： ✓TBA（循环酶速率法）经常偶发出现负值或异常高值 ✓蛋白项目、血脂项目结果偏高
原因：塑料比色杯划痕较深较多，清洗系统清洗不彻底。 石英杯长时间不维护也会出现
试剂针携带污染实验方案原理：通过设置特定的标本检测顺序，每个 样本只做一个项目的检测，可以控制不同项目的先后吸取顺序，实现 任何一个 项目都能与其他项目相遇。为了有效评价项目之间携带污染 影响程度，污染实验所用病人样本的混合血清应尽量包含医学决定水 平浓度
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生化交叉污染分析
临床应用部
生化交叉污染研究现状
目录
1 关于交叉污染 2 交叉污染类型
3 如何解决
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如何理解交叉污染
在生化检测过程中，各种原因导致A项目测定中所使用的试剂、 样本、反应产物、清洗剂等存在残留对B项目的测定产生不良影响， 而导致B项目结果增高、降低或结果重复性差的现象。一般单独测 试时转好。A项目与B项目不一定是相邻项目。 A为污染源，B为被污染项目。
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
1. 样本针携带污染 样本针吸取完样本后冲洗循环使用，当样本针在清洗不完全， 或黏附力增加时，样本残留可能会对下一相邻样本的检测结果造成 影响。
原因：样品针尖弯曲，针堵塞，针外壁物质附着，冲洗水冲洗 不充分
特点：携带污染率主要是体现样品之间的污染程度
不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
3.搅拌棒携带污染
表象：混合测试出现重复性差
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
3.搅拌棒携带污染
搅拌棒污染：试剂与样本、第一试剂与第二试剂的混 匀需要搅拌棒，而搅拌 棒如果清洗不完全，或黏附力增加时，残留试剂可能会对下一检测结果造成影响。 鉴别
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
2. 试剂针携带污染 试剂针吸取完试剂后冲洗循环使用，当试剂针在清洗不完全， 或黏附力增加时，上一试剂残留可能会对下一相邻试剂的检测结果 造成影响。
原因：试剂针尖弯曲，针堵塞，针外壁物质附着，冲洗水冲洗 不充分
所有验证实验时，应该取消相关的交叉污染对设置，以免软件自动插入强化清洗。同
时应该取消样本针间隔强化清洗的勾选项，避免反应杯号错位。
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试剂常见污染
1. 前一测试项目试剂中含有紧跟其后测试项目所要测定的底物。
此时残留的污染物被带入下一测试中，与该测试的试剂反应，可能会导致结果异常。引起这类 交叉污染产生的物质明确，并且可以定量分析。主要项目有： 1. ALT(IFCC法),AST(IFCC法)含高活性的LDH,会影响其后的LDH结果。 2. CK、CK-MB酶偶联测定试剂含高浓度Glucose,会干扰其后的HK血糖测定 3. Glu(GOD)、UA、a-HBDH、 TG、 Ca(偶氮胂III法)、 TC等均采用磷酸盐缓冲液,会干扰位 于其后无机盐(P)的结果。 4. ALP(IFCC-AMP法)，CK,CK-MB,TG(GPO法)试剂均含高浓度Mg2+会影响紧Mg的结果。 5. TC、HDL-C、HDL-C、CR-S等采用胆固醇氧化酶法的试剂含胆酸钠，会干扰TBA偏高。 6.（4NP-G7)为底物的AMY试剂含Ca2+浓度高会影响其后测Ca2+的准确性。 7. TG，TC试剂中有LIP，会导致LIP的测试结果不真实。
对同一份血清标本重复测定GGT 或ALT或AST20次以上，结果重复性较差且有 走高趋势。
原因：搅拌棒特富龙涂层剥落，搅拌棒表面有顽固性污渍；冲洗水冲洗不充分, 可用无水乙醇擦洗搅拌棒
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
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带污染, 先在生化仪中输入样本测试号码和选择项目，每个样本号码只选择一个
项目，目的是使试剂针吸取项目的顺序 完全按照样本测试号码的先后 顺序进行，五个项目的测试 顺序见表1。测试完成后，将数据输入到处 理表格2和表格3中，按照一定的判断标准，寻找可能存在的污染项目 组合。
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试剂常见污染
2.前一测试项目试剂中的某种（些）成份干扰紧随其后测试项目所要测定的底物。
引起这类交叉污染产生的物质明确，但和第一类不同的是，前一测试残留并带入下一测试的 污染物并非待测物本身，而是能与待测物进行其他的反应或显色物质波段重叠或引起测试条件 的变化如PH值改变等，从而带来对测试过程的干扰，主要项目有： 1. TC、HDL-C、HDL-C、LDL-C等都属Trinder反应，因此这些项目间会相互干扰。 2. ALB（BCG）检测原理是形成的蓝绿色复合物在578nm有强吸收，且在整个500nm700nm都有较强吸收，因此ALB试剂会干扰紧随其后的500nm-700nm波段的终点法显色测 定（如UA等）。
交叉污染解决方案
1. 做好机器维护 2. 合理设置实验项目的排列顺序，并制订清洗程序，避免试剂交叉污染。BS系列除BS2000 外都内置防交叉染污测试顺序和清洗程序。 ALT 、AST、 TBIL、 DBIL 、TBA、ALP、GGT 、CHE 、TP、 Alb、Urea、 UA 、Cr、 CK 、 CK-MB、α–HBDH 、LD、 Glu 、TG 、TC、 HDL-C、 LDL-C、APOAI、APOB、 Amy 、CO2 、 P 、 Fe、Ca、 Mg。 (仅供参考)
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
实验方案：
同一检测项目浓度相差较大的a标本（高浓度），b标本（低浓度）。 检测顺序：a 1 , a 2 , b 1 ,b 2 , b3
计算：
评价： 以q小于0.5%为判断标准，我们一般目测后面的低值是否受污染即可。 局限性：结果与选择的标本浓度有关系
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
4.比色杯/清洗系统携带污染
验证方法：A污染B（A为污染源，B为被污染项）。先测试20次B项目基准值，再按照
“186次其它测试（如水）--20次A测试--186次其它测试（如水）—20次B测试”的方式申请 测试。如果一圈反应杯测试中进行多对交叉污染的验证，应该确保上一圈的污染源的反应杯和 下一圈的被污染项目的反应杯号相同；BS2000一圈的反应杯为206个，可根据实际的测试量 更改验证方案。分别计算B1相对A1的绝对和相对偏差……、b20相对a20的绝对和相对偏差， 只要一个反应杯有偏差，即有交叉污染。
3. 当交叉污染程序较重时，应对仪器做大保养和维修，更换相应部件。
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交叉污染解决方案
4.每个实验项目所需的样本量、试剂量不要随意同比例降低，以保证反应液保持较大的缓冲 能力。
5. 选用具有抗交叉污染的试剂盒：如胆固醇试剂中胆酸钠被替换，以减少胆酸钠总胆汁酸测 定的污染。 6. 部分大型全自动生化分析仪有多个模块或通道，可以将有化学污染干扰的项目排在不同的
1 关于交叉污染 2 交叉污染判断
3 如何解决
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工作流程
样本针污染
试剂针污染
比色杯\清洗系统污染
试剂针污染 搅拌杆污染
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搅拌杆污染
交叉污染发生概率
❖ 试剂针携带污染 ❖ 搅拌棒携带污染 ❖ 样本针携带污染 ❖ 比色杯\清洗系统携带污染 ❖ ……
不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
试剂针携带污染确认实验
由携带污染初实验筛选出怀疑有污染的项目组合， 假设 (A→B) 同(D→E) 即A项目对B项目（A项目做好后紧接着做B项目），D项目对E项目（D项目做好后紧接着做E 项目）怀疑有污染。 由于初实验的项目交叉结果只是一次测试的结果， 可能有偶然因素，还必须进行确认实验。 以(A→B)为例，(D→E)的情况相同 先单独做A项目，紧接着连续测试3次B项目，第一个B项目的结果受A项目影响最大，第三个B 项目的结果因为有2次自身冲洗，结果应比较准确。比较第一个B项目检测结果同第三个B项目 检测结果，如果影响百分比同初试结果影响趋势和程度相近，可以判断 A项目对B项目有携带 污染。 确认实验检测顺序以(A→B ）, (D→E)为例 确认实验步骤（表4） A B1 B2 B3 D E1 E2 E3
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交叉污染Biblioteka Baidu危害
1、这结果怎么报？ 2、你们这什么试剂？ 3、你们这什么机器？ 4、我们这什么机器、试剂？
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引发交叉污染的原因
生化仪的发展变化 ①多项目,多样本处理 ②处理能力的提高(高速化)
模块或通道中检测。 7. 迈瑞生化仪针对配套试剂已经内置好交叉污染程序，避免交叉污染
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污染 是检验工作中的麻烦制造者 (偶发性 ,无可预测性 )
清洗程序设定过多
样本处理速度降低
不运用清洗程序
浪费仪器功能
通过污染实验,了解实际污染现状 ,运用 ,设定清洗程序
特点：从各个项目设置的参数可知，试剂体积量远大于样本体
积量。因此试剂针携带污染影响程度会高于样本针携带污染
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
携带污染初实验 假设本次实验以A, B, C, D, E五个项目来考察各个项目之间的试剂针携
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
2.试剂针携带污染
常见污染源： CREA-S、TG、TC、LIP、FUN对TBA HDL、LDL对TC CK、GLU-H、TB-V、ALP、TP对MG
详细请参考BS2000项目分配原则或机器内置染污对
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
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表3中显示了试剂之间携带污染初实验 后的结果: a 将表格内测试顺序号代表的位置处输 入该项目对应的测试结果， b 对每个测试顺序号下面对应的测试结 果和该项目单独5次重复结果的均值相 比 比值以百分比形式表示，通过考察百分 比的大小来初步判断携带污染的可能性。 目前的判断标准以正负百分之五作为判 断标准，超过范围时怀疑有携带污染。
设计共用机械部分 ①样本针,试剂针 ②比色杯 ③搅拌棒
生化仪状态不良,使用不当 ①清洗力的低下(日常维护欠缺, 仪器老化) ②生化仪内污垢的积聚 ③测试顺序安排不当 ④常规清洗不能有效消除污染
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目录
1 关于交叉污染 2 交叉污染类型
3 如何解决
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携带污染实验方案
目前大部分实验室开展的生化检测项目至少都有20项以上，评价全项 目之间的携带污染会非常耗时，试剂成本消耗量大。且不同仪器的动 作原理不完全相同，设计一个较为简单，合理的实验方法是需要重点 考虑的 内容。
不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
4.比色杯/清洗系统携带污染
在每日早晨刚开机时对所有项目做试剂空白测定， 试剂空白吸光度高（终点法）或者试剂空 白吸光度变化率高（速率法） 特点： ✓TBA（循环酶速率法）经常偶发出现负值或异常高值 ✓蛋白项目、血脂项目结果偏高
原因：塑料比色杯划痕较深较多，清洗系统清洗不彻底。 石英杯长时间不维护也会出现
试剂针携带污染实验方案原理：通过设置特定的标本检测顺序，每个 样本只做一个项目的检测，可以控制不同项目的先后吸取顺序，实现 任何一个 项目都能与其他项目相遇。为了有效评价项目之间携带污染 影响程度，污染实验所用病人样本的混合血清应尽量包含医学决定水 平浓度
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生化交叉污染分析
临床应用部
生化交叉污染研究现状
目录
1 关于交叉污染 2 交叉污染类型
3 如何解决
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如何理解交叉污染
在生化检测过程中，各种原因导致A项目测定中所使用的试剂、 样本、反应产物、清洗剂等存在残留对B项目的测定产生不良影响， 而导致B项目结果增高、降低或结果重复性差的现象。一般单独测 试时转好。A项目与B项目不一定是相邻项目。 A为污染源，B为被污染项目。
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
1. 样本针携带污染 样本针吸取完样本后冲洗循环使用，当样本针在清洗不完全， 或黏附力增加时，样本残留可能会对下一相邻样本的检测结果造成 影响。
原因：样品针尖弯曲，针堵塞，针外壁物质附着，冲洗水冲洗 不充分
特点：携带污染率主要是体现样品之间的污染程度
不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
3.搅拌棒携带污染
表象：混合测试出现重复性差
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
3.搅拌棒携带污染
搅拌棒污染：试剂与样本、第一试剂与第二试剂的混 匀需要搅拌棒，而搅拌 棒如果清洗不完全，或黏附力增加时，残留试剂可能会对下一检测结果造成影响。 鉴别
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
2. 试剂针携带污染 试剂针吸取完试剂后冲洗循环使用，当试剂针在清洗不完全， 或黏附力增加时，上一试剂残留可能会对下一相邻试剂的检测结果 造成影响。
原因：试剂针尖弯曲，针堵塞，针外壁物质附着，冲洗水冲洗 不充分
所有验证实验时，应该取消相关的交叉污染对设置，以免软件自动插入强化清洗。同
时应该取消样本针间隔强化清洗的勾选项，避免反应杯号错位。
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试剂常见污染
1. 前一测试项目试剂中含有紧跟其后测试项目所要测定的底物。
此时残留的污染物被带入下一测试中，与该测试的试剂反应，可能会导致结果异常。引起这类 交叉污染产生的物质明确，并且可以定量分析。主要项目有： 1. ALT(IFCC法),AST(IFCC法)含高活性的LDH,会影响其后的LDH结果。 2. CK、CK-MB酶偶联测定试剂含高浓度Glucose,会干扰其后的HK血糖测定 3. Glu(GOD)、UA、a-HBDH、 TG、 Ca(偶氮胂III法)、 TC等均采用磷酸盐缓冲液,会干扰位 于其后无机盐(P)的结果。 4. ALP(IFCC-AMP法)，CK,CK-MB,TG(GPO法)试剂均含高浓度Mg2+会影响紧Mg的结果。 5. TC、HDL-C、HDL-C、CR-S等采用胆固醇氧化酶法的试剂含胆酸钠，会干扰TBA偏高。 6.（4NP-G7)为底物的AMY试剂含Ca2+浓度高会影响其后测Ca2+的准确性。 7. TG，TC试剂中有LIP，会导致LIP的测试结果不真实。
对同一份血清标本重复测定GGT 或ALT或AST20次以上，结果重复性较差且有 走高趋势。
原因：搅拌棒特富龙涂层剥落，搅拌棒表面有顽固性污渍；冲洗水冲洗不充分, 可用无水乙醇擦洗搅拌棒
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
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带污染, 先在生化仪中输入样本测试号码和选择项目，每个样本号码只选择一个
项目，目的是使试剂针吸取项目的顺序 完全按照样本测试号码的先后 顺序进行，五个项目的测试 顺序见表1。测试完成后，将数据输入到处 理表格2和表格3中，按照一定的判断标准，寻找可能存在的污染项目 组合。
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试剂常见污染
2.前一测试项目试剂中的某种（些）成份干扰紧随其后测试项目所要测定的底物。
引起这类交叉污染产生的物质明确，但和第一类不同的是，前一测试残留并带入下一测试的 污染物并非待测物本身，而是能与待测物进行其他的反应或显色物质波段重叠或引起测试条件 的变化如PH值改变等，从而带来对测试过程的干扰，主要项目有： 1. TC、HDL-C、HDL-C、LDL-C等都属Trinder反应，因此这些项目间会相互干扰。 2. ALB（BCG）检测原理是形成的蓝绿色复合物在578nm有强吸收，且在整个500nm700nm都有较强吸收，因此ALB试剂会干扰紧随其后的500nm-700nm波段的终点法显色测 定（如UA等）。
交叉污染解决方案
1. 做好机器维护 2. 合理设置实验项目的排列顺序，并制订清洗程序，避免试剂交叉污染。BS系列除BS2000 外都内置防交叉染污测试顺序和清洗程序。 ALT 、AST、 TBIL、 DBIL 、TBA、ALP、GGT 、CHE 、TP、 Alb、Urea、 UA 、Cr、 CK 、 CK-MB、α–HBDH 、LD、 Glu 、TG 、TC、 HDL-C、 LDL-C、APOAI、APOB、 Amy 、CO2 、 P 、 Fe、Ca、 Mg。 (仅供参考)
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
实验方案：
同一检测项目浓度相差较大的a标本（高浓度），b标本（低浓度）。 检测顺序：a 1 , a 2 , b 1 ,b 2 , b3
计算：
评价： 以q小于0.5%为判断标准，我们一般目测后面的低值是否受污染即可。 局限性：结果与选择的标本浓度有关系
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
4.比色杯/清洗系统携带污染
验证方法：A污染B（A为污染源，B为被污染项）。先测试20次B项目基准值，再按照
“186次其它测试（如水）--20次A测试--186次其它测试（如水）—20次B测试”的方式申请 测试。如果一圈反应杯测试中进行多对交叉污染的验证，应该确保上一圈的污染源的反应杯和 下一圈的被污染项目的反应杯号相同；BS2000一圈的反应杯为206个，可根据实际的测试量 更改验证方案。分别计算B1相对A1的绝对和相对偏差……、b20相对a20的绝对和相对偏差， 只要一个反应杯有偏差，即有交叉污染。
3. 当交叉污染程序较重时，应对仪器做大保养和维修，更换相应部件。
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交叉污染解决方案
4.每个实验项目所需的样本量、试剂量不要随意同比例降低，以保证反应液保持较大的缓冲 能力。
5. 选用具有抗交叉污染的试剂盒：如胆固醇试剂中胆酸钠被替换，以减少胆酸钠总胆汁酸测 定的污染。 6. 部分大型全自动生化分析仪有多个模块或通道，可以将有化学污染干扰的项目排在不同的
1 关于交叉污染 2 交叉污染判断
3 如何解决
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工作流程
样本针污染
试剂针污染
比色杯\清洗系统污染
试剂针污染 搅拌杆污染
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搅拌杆污染
交叉污染发生概率
❖ 试剂针携带污染 ❖ 搅拌棒携带污染 ❖ 样本针携带污染 ❖ 比色杯\清洗系统携带污染 ❖ ……
不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
试剂针携带污染确认实验
由携带污染初实验筛选出怀疑有污染的项目组合， 假设 (A→B) 同(D→E) 即A项目对B项目（A项目做好后紧接着做B项目），D项目对E项目（D项目做好后紧接着做E 项目）怀疑有污染。 由于初实验的项目交叉结果只是一次测试的结果， 可能有偶然因素，还必须进行确认实验。 以(A→B)为例，(D→E)的情况相同 先单独做A项目，紧接着连续测试3次B项目，第一个B项目的结果受A项目影响最大，第三个B 项目的结果因为有2次自身冲洗，结果应比较准确。比较第一个B项目检测结果同第三个B项目 检测结果，如果影响百分比同初试结果影响趋势和程度相近，可以判断 A项目对B项目有携带 污染。 确认实验检测顺序以(A→B ）, (D→E)为例 确认实验步骤（表4） A B1 B2 B3 D E1 E2 E3
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交叉污染Biblioteka Baidu危害
1、这结果怎么报？ 2、你们这什么试剂？ 3、你们这什么机器？ 4、我们这什么机器、试剂？
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引发交叉污染的原因
生化仪的发展变化 ①多项目,多样本处理 ②处理能力的提高(高速化)
模块或通道中检测。 7. 迈瑞生化仪针对配套试剂已经内置好交叉污染程序，避免交叉污染
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污染 是检验工作中的麻烦制造者 (偶发性 ,无可预测性 )
清洗程序设定过多
样本处理速度降低
不运用清洗程序
浪费仪器功能
通过污染实验,了解实际污染现状 ,运用 ,设定清洗程序
特点：从各个项目设置的参数可知，试剂体积量远大于样本体
积量。因此试剂针携带污染影响程度会高于样本针携带污染
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
携带污染初实验 假设本次实验以A, B, C, D, E五个项目来考察各个项目之间的试剂针携
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
2.试剂针携带污染
常见污染源： CREA-S、TG、TC、LIP、FUN对TBA HDL、LDL对TC CK、GLU-H、TB-V、ALP、TP对MG
详细请参考BS2000项目分配原则或机器内置染污对
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不同类型交叉污染的鉴别方法及原因
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表3中显示了试剂之间携带污染初实验 后的结果: a 将表格内测试顺序号代表的位置处输 入该项目对应的测试结果， b 对每个测试顺序号下面对应的测试结 果和该项目单独5次重复结果的均值相 比 比值以百分比形式表示，通过考察百分 比的大小来初步判断携带污染的可能性。 目前的判断标准以正负百分之五作为判 断标准，超过范围时怀疑有携带污染。
设计共用机械部分 ①样本针,试剂针 ②比色杯 ③搅拌棒
生化仪状态不良,使用不当 ①清洗力的低下(日常维护欠缺, 仪器老化) ②生化仪内污垢的积聚 ③测试顺序安排不当 ④常规清洗不能有效消除污染
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