测定原花青素含量(硫酸香草醛法)1
红米原花青素的测定方法
红米原花青素的测定方法红米原花青素的提取及测定方法1、标准曲线的配置标准溶液的配制，用甲醇配制原花青素母液2mg/mL标准液配制：母液：2ml 3ml 4ml 5ml 6ml 7ml 8ml甲醇：8ml 7ml 6ml 5ml 4ml 3ml 2ml2、试剂试剂a：10g/L香草醛甲醇溶液，10g香草醛溶于1L甲醇溶液试剂b：245ml浓硫酸（18.4mol/L）溶于500ml甲醇溶液，并用甲醇定容直1L。
3、提取方法将红米磨粉后称0.5g，放入15ml试管中，加入8ml的80%甲醇溶液，至于黑暗的地方，每隔2h左右振荡一次，一直浸泡提取8小时。
4、测定方法吸取1ml提取液或标准液，加入10ml离心管中，然后依次加入2.5ml试剂a和2.5ml试剂b，混匀后35℃下水浴20min，水浴结束后8000rm离心10min，用移液器取上清液测定其在500nm下的吸光值。
5、参考文献：1、Sun B, Ricardo-da-Silva JM, Spranger I Critical Factors of Vanillin Assay for Catechins and Proanthocyanidins. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 1998, 46: 4267-42742、Gunaratne A, Wu K, Li D, et al. Antioxidant activity and nutritional quality of traditional red-grained rice varieties containing proanthocyanidins. Food Chemistry, 2013, 138: 1153-1161。
葡萄籽中分离提取原花青素的研究
葡萄籽中分离提取原花青素的研究花青素是一类多酚类化合物，其具有高效的清除自由基的功能，是一种新型、高效、低毒的天然抗氧化剂。
本实验通过浸提的方法从葡萄籽中提取原花青素，考察了不同溶剂、浸提时间、浸提温度、乙醇体积分数和料液比等单因素对浸提效果的影响，确定了最佳的单因素水平。
研究结果表明：本项目产品投资费用少，操作费用低，产品附加值高；原料为废物利用，变废为宝符合国家相关产业政策；几乎没有“三废”排放，使用的溶剂全部回收利用，废渣可以作为造纸或者饲料综合利用。
标签：花青素；葡萄籽；提取；正交实验1 概述原花青素是广泛存在于植物中的一类天然多酚类化合物，多以糖苷的形式存在，也称花色苷。
属于缩合鞣质或黄烷醇类。
最早而最丰富的花青素是从红葡萄渣中提取的葡萄皮红。
它于1879年在意大利上市。
由于原花青素的多种功效，由葡萄籽提取的原花青素已被我国卫生部批准为保健原料。
目前对原花青素的提取研究及保健作用研究已非常成熟。
已经将其应用到工业化产业，开发出多种原花青素的保健产品和化妆产品。
原花青素的产品已被广大消费者普遍接受。
2 葡萄籽中花青素的提取本实验通过浸提的方法从葡萄籽中提取原花青素，考察了不同溶剂、浸提时间、浸提温度、乙醇体积分数和料液比等单因素对浸提效果的影响，确定了最佳的单因素水平。
并通过设计正交实验，得出原花青素提取最佳工艺条件。
2.1 实验方法2.1.1 葡萄籽中原花青素的提取本实验采用甘肃紫轩酒业葡萄酒厂生产葡萄酒产生的葡萄籽下脚料作为本实验的原材料。
在生产葡萄酒压榨葡萄汁的糟粕和葡萄酒生产前和发酵后压榨的榨粕，所得的这些榨渣中，以换成干品计，约有50%的葡萄皮，45%的葡萄籽和少量的梗等，将该榨渣经粗选分离出葡萄籽，作为提取的原料。
所得的葡萄籽用粉碎机粉碎后，过20目筛，于磨口三角瓶中，经石油醚脱脂脱水份，得脱脂葡萄籽粉，用一浸提液在50℃的恒温水浴中回流浸提，离心后取上清液，反复提取若干次，最后洗涤残渣，将上清液和洗涤液合并，加入固体无水硫酸钠脱水，倾出上层溶液，在真空度为0.095MPa，温度为40℃的条件下真空浓缩，浓缩液冷却至室温，得到原花青素粗提液，干燥，制得粗提物。
原花青素含量检测的概述
科技 嚣向导
２ ０ １ ４ 年Ｏ ８ 期
原花青素含量检测的概述
ｆ 保山学院
张 星和 云南 保山
６ ７ ８ ０ ０ ０ ）
【 摘 要】 对目 前 原花青素常 用的检测 方法进行 了对比并阐述了各种 方法的优缺 点， 为探 索更好 的原花青素的测定方法奠定基础。 【 关键 词】 原花青素； 检测 ； 含量
１ ２６．
［ ３ ］ 申烨华 ， 刘 海英， 李 娜． Ｋ Ｍ ｎ Ｏ 分光 光度法测定 葡萄籽 原花青 素ｆ Ｊ １ ． 分 析实验
室． ２ ０ ０ ６ ． ２ ５ （ １ １ ） ： ５ １ — ５ ３ ． ［ ４ ］ 洪新 ， 唐克 ， 牟晓刚． 葡萄籽 中原 花青素铁盐催化 比色法 的测 定条件研 究『 Ｊ １ ｌ 河
原花青素是一 类广泛存在 于植物 中的黄 烷醇单体及 其聚合体 的 ３ ． 原 子 吸 收 法 多酚类 混合 物． 具有抗 氧化和 自由基清 除能力等生物活性 自２ ０ 世纪 原子吸收分光光度法 自身并 不能直接用来 测定 原花青索 ． 它是借 ６ ０年代 以来 ， 在保健 品、 医药 和化妆 品领域获得 了广泛应用 。研究表 助于原花青素与金属离子的反应 ． 然后通过测定 生成的络合物中金属 明＿ １ ． 儿 茶素 和表儿茶 素是构成原花青素 的结构基础 。 继而形成缩合成 离 子或剩余 的金属离子 的量 而间接测定… 】 马亚军等旧根据原花青素 二聚体 、 三聚体 至高聚体 。 且单体具有旋光性 ， 因此要想测定每一种成 在中性介质中能与 Ｃ ｕ 发生络合 ， 生成难溶 的棕 黄色沉淀 ． 经过滤后 ， 分 的含量非常 困难 目前 国内外 对原花青素含量 的测定方 法 尚未统 用 原子吸 收法测定滤液 中过量 的 ｃ ｕ “．从 而间接测定 出原花青 素的 现介绍几种 常用 的方法 量。
原花青素HPLC测定方法研究进展
从高效液相色谱法（HPLC）及其与其他方法的联用 等各种检测方法的基本原理入手，对各种方法的研究领域 进行总结。
收稿日期：2014-03-24 基金项目：宁夏回族自治区科技支撑基金项目（2013-ZYS162）；银川能源学院科研基金项目（2012-KY-Z-03、2012-KY-P-01） 作者简介：格日勒（1971-），女，高级工程师，本科，研究方向为天然产物分离与分析。 *通讯作者：亓 伟（1963-），女，高级工程师，本科，研究方向为药品、保健食品研发。
中图分类号：TS201.2
文献标识码：A
文章编号：0254-5071（2014）06-0006-04
葡萄籽原花青素含量测定
葡萄籽原花青素含量测定赵平;宋学娟;张月萍;贾宏海;于国强【期刊名称】《河北化工》【年(卷),期】2007(30)1【摘要】酸性条件下,原花青素与香草醛反应生成红色产物,由红色产物的吸光度可确定原花青素的含量.实验首先考察了酸对显色的影响,确定以较低浓度的硫酸作催化剂.在此基础上,进一步考察了其他因素的影响,确立了稳定的比色条件:硫酸30%、香草醛4%、反应温度30℃、反应时间15 min,并得出了标准曲线.【总页数】3页(P46-48)【作者】赵平;宋学娟;张月萍;贾宏海;于国强【作者单位】河北科技大学化学与制药工程学院,河北,石家庄,050018;河北科技大学化学与制药工程学院,河北,石家庄,050018;河北科技大学化学与制药工程学院,河北,石家庄,050018;张家口华源葡萄酒有限公司技术科,河北,张家口,075600;河北科技大学化学与制药工程学院,河北,石家庄,050018【正文语种】中文【中图分类】R2【相关文献】1.葡萄籽原花青素对羔羊瘤胃发酵、血清炎症及抗氧化指标的影响 [J], 郝小燕;牟春堂;乔栋;张暄梓;杨文军;赵俊星;张春香;张建新2.饲粮中添加葡萄籽原花青素对羔羊生长性能和营养物质消化代谢的影响 [J], 杨文军;牟春堂;刘笑梅;崔乔;白齐昌;郝小燕;张建新3.葡萄籽原花青素对大鼠C6胶质瘤细胞活性氧线粒体去极化和STAT3、Bcl-2、P53P21表达的影响 [J], 陈恒三;路安庆;梁金;金明;魏祎;于向阳;尚银武;黄铭;陈天立4.巨峰葡萄籽原花青素的纯化与抗氧化活性分析 [J], 伍勇;邹蝶;卢倩;程驰;夏珊;冯媛媛;邱成书;薛飞龙;张晓娟;刘红玲5.葡萄籽原花青素对牙龈上皮细胞炎症介质表达的影响 [J], 张秀娟;吴伟;陈欣;房芷纯;叶金香;欧晓艳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
硫酸-香草醛法测定葡萄籽原花青素含量
硫酸-香草醛法测定葡萄籽原花青素含量
孙芸;谷文英
【期刊名称】《食品与发酵工业》
【年(卷),期】2003(029)009
【摘要】以硫酸作为香草醛法的酸性介质,测定葡萄籽提取物水溶液中原花青素含量,对硫酸浓度、香草醛浓度、反应温度及时间等影响比色反应的因素进行了研究,选择出较适宜的反应条件.
【总页数】4页(P43-46)
【作者】孙芸;谷文英
【作者单位】江南大学食品学院,无锡,214036;江南大学食品学院,无锡,214036【正文语种】中文
【中图分类】TS20
【相关文献】
1.香草醛/硫酸比色法测定两种原花色素含量的比较 [J], 樊金玲;陶冠军;朱文学
2.香草醛硫酸法测定榆黄喷雾剂中缩合鞣质含量 [J], 王建平;颜耀东;杨云;张兰欣;惠金玲;马长勇;张学慧;迟平;刘茵;张娟
3.香草醛-硫酸测定甘草浸膏中甘草酸含量 [J], 张慧慧;刘明言;凌宁生
4.硫酸-香草醛法测定葡萄籽原花青素含量 [J],
5.硫酸-香草醛法测定地黄总环烯醚萜苷含量 [J], 孙鹏;马军政;段晨晨;付娜娜;黄勇;李先恩
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玫瑰花中原花青素提取工艺的优化
玫瑰花中原花青素提取工艺的优化摘要】本实验通过改变微波的提取时间、提取料液比等以考察其对玫瑰花中原花青素提取效果的影响，并且比较了溶剂浸提法和微波浸提法的提取效果，以确定最佳提取工艺。
结果表明玫瑰花中原花青素的最佳提取工艺为：微波条件：50℃，5.00v，提取溶剂为60%乙醇，提取时间为20min，料液比为1：20 ，在此条件下，玫瑰花中原花青素提取率较高。
【关键词】玫瑰花原花青素提取工艺【中图分类号】R931.4 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）11-0038-02原花青素(Proanthocyandins,，PC)是植物中广泛存在的一大类双黄酮衍生物的天然多酚化合物，由不同数量的儿茶素或表儿茶素结合而成[1]。
经多年药理学研究和临床应用发现，原花青素具有保护心血管系统、清除自由基、抗氧化、抗突变、抗癌、抗辐射、促进细胞增殖等多种生物学活性[2]，是目前国际上公认最有效的天然抗氧化剂[3]，实验证明，其抗自由基氧化的能力是维生素E的50倍，维生素C的20倍。
目前已被广泛应用于食品、药品和保健品等领域[4]。
玫瑰花是蔷薇科植物玫瑰(Rosa rugosa Thumb)的干燥花蕾，其性味甘温，具有行气活血、开窍化淤、疏肝醒脾的功效[5]。
作为一种具有较高药用价值、食用价值和观赏价值的植物，玫瑰花含有挥发油、黄酮类、氨基酸、多糖等多种化学成分，但对于原花青素成分的研究报道却很少。
本实验通过微波浸提法探索和优化了玫瑰花中原花青素的提取工艺条件，为以后玫瑰花原花青素的开发利用提供理论依据。
1 分析方法的建立1.1 材料和仪器材料：玫瑰花，杭州药店；儿茶素，天津尖峰天然产物研究有限公司。
试剂：硫酸、香草醛、甲醇、无水乙醇等试剂均为分析纯。
仪器：数显恒温水浴锅HH-4，国华电器有限公司；紫外分光光度计SP-2000UV，上海光谱仪器有限公司； Mettler Toledo AL104电子天平，Mettler Toledo Group。
测定原花青素含量(硫酸香草醛法)1
香草醛法测定原花青素的含量说明：原花青素的抗氧化性受到聚合物的影响，以乙酸为溶剂，香草只与原花青素中的末端的黄烷-3-醇发生缩合生成红色产物，由红色产物吸光度测定原花青素含量。
通过正交实验和单因素实验考查了硫酸香草醛法测定原花青素含量的合适条件，比色条件为硫酸浓度30%，香草醛浓度1%，反应T为30℃，反应时间为30分钟。
以儿茶素为标准品绘制标准曲线测定原花青素含量。
一、器材/试剂紫外分光光度计恒温水浴锅电子天平儿茶素标准品（浓度＞＝98%）；香草醛 ( 分析纯) ；硫酸 ( 分析纯) ；冰乙酸 ( 分析纯) ；实验用水为二级反渗透去离子水。
二、实验步骤1.配制试剂( 1 )配制儿茶素标准品溶液：称取一定量的儿茶素标准品，分别用去离子水定容至一定体积，配制成物质的量浓度为0.025~0.25 mm o l · mL 的儿茶素标准品溶液；( 2 )配制香草醛乙酸溶液：称取一定量的香草醛，分别用乙酸定容至一定体积，配制成浓度为1 ％；( 3 )配制硫酸乙酸溶液：量取一定体积的浓硫酸，分别用乙酸定容至一定体积，配制成浓度为3 0 ％的硫酸乙酸溶液。
（4）样品溶液：原花青素溶液以火棘果为原料，按液固比 6：1加入 4 0 ％乙醇溶液，4 5 ℃下浸提 1.5 h，问歇搅拌，连提3次，过滤，滤液旋蒸，回收溶剂。
浓缩液经过预处理好的AB一8树脂吸附，用去离子水洗涤、6 0％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，6 0％乙醇洗脱液即为样品溶液。
2、扫描最大吸收波长取0．5mL儿茶素标准品溶液，加入2．5mL30％的硫酸乙酸溶液，2.5mL 1％的香草醛乙酸溶液，混合均匀，30℃水浴中避光反应15min。
以无水乙酸做参比，在可见光区(400～800nm)进行光谱扫描。
确定最大吸收波长，以后在此波长下测定样品的含量。
3、绘制标准曲线（在最大波长吸收处测得吸光度）浓度0.025 0.035 0.045 0.055 0.065 0.075 0.085 0.095A（儿茶素）0.105 0.115 0.125 0.135 0.145 0.155 0.165 0.175A（儿茶素）0.185 0.195 0.205 0.215 0.225 0.235 0.245A（儿茶素）测原花青素样品的吸光度，通过以上标准曲线所得的标准曲线回归线方程计算得样品浓度。
硫酸_香草醛法测定葡萄籽原花青素含量
硫酸-香草醛法测定葡萄籽原花青素含量孙 芸 谷文英(江南大学食品学院,无锡,214036)摘 要 以硫酸作为香草醛法的酸性介质,测定葡萄籽提取物水溶液中原花青素含量,对硫酸浓度、香草醛浓度、反应温度及时间等影响比色反应的因素进行了研究,选择出较适宜的反应条件。
关键词 葡萄籽,原花青素,硫酸-香草醛法第一作者:博士研究生(谷文英为通讯作者)。
收稿时间:2003-04-17,改回时间:2003-09-03原花青素是一类由黄烷-3-醇缩合而成的聚多酚类物质,具有很强的生物活性,作为防癌、抗突变、防治心血管疾病药物的有效成分和用作安全无毒的新型天然抗氧化剂,在医药、保健食品等领域具有广泛的用途。
原花青素的定量测定方法,除比较经典的H PLC 法外,更多的是比色测定方法,包括Folin -Ciocateau (FC )法[1]、酸化香草醛(Vanillin)法[2,3]、盐酸-正丁醇(BuOH -H Cl)法[4]及紫外吸收法[5],其中FC 法测定的是总酚含量,对原花青素缺乏专一性,Vanillin 法可同时测定原花青素单体及聚合体的总含量,BuOH -H Cl 法只测定聚合原花青素含量,儿茶素单体不反应,但与香草醛法相比,反应中易形成副产物,且受结构影响较大,同时比色测定法反应的条件要求较高,重复性较差,原花青素的紫外吸收法一般用于经HPLC 纯化分离后组分的定性及定量检测(270~280nm)。
从测定方法的灵敏度、专一性及简便性来讲,目前应用比较多的是酸化香草醛法。
盐酸及硫酸均可作为其酸性介质,但在不同含量的葡萄籽原花青素含量测定过程中发现,传统的以盐酸为酸性介质的香草醛法在测定原花青素含量较低的葡萄籽提取物水溶液时,体系透明度较低,干扰较大。
而据报道[6],在测定甲醇溶液中原花青素含量的香草醛反应体系中,以硫酸催化的反应灵敏度高于盐酸。
据此,本实验以硫酸作为香草醛法的酸性介质,探索出了测定葡萄籽提取物水溶液中原花青素含量的硫酸-香草醛比色法。
硫酸香草醛法测定葡萄籽原花青素含量
硫酸香草醛法测定葡萄籽原花青素含量一、本文概述本文旨在探讨硫酸香草醛法在测定葡萄籽原花青素含量中的应用。
原花青素作为一种重要的天然抗氧化剂，在葡萄籽等植物中含量丰富，具有显著的生物活性，对人体健康具有积极作用。
因此，准确测定葡萄籽中原花青素的含量对于评估其营养价值和开发相关健康产品具有重要意义。
硫酸香草醛法作为一种常用的原花青素测定方法，具有操作简便、灵敏度高、重现性好等优点，在食品、药品等领域得到了广泛应用。
本文将详细介绍硫酸香草醛法的原理、操作步骤、影响因素及注意事项，并通过实验验证该方法的准确性和可靠性，为葡萄籽原花青素含量的测定提供科学依据。
二、材料与方法硫酸香草醛、葡萄籽提取物、原花青素标准品（纯度≥98%）、甲醇、乙醇、丙酮、盐酸等均为分析纯，购自国内外知名试剂公司。
紫外可见分光光度计、电子天平、恒温水浴锅、离心机、超声波清洗器等。
准确称取葡萄籽粉末适量，加入一定比例的甲醇-水-盐酸混合溶液，置于恒温水浴锅中进行回流提取。
提取液经过离心、过滤后，得到原花青素提取液。
精确称取原花青素标准品，用甲醇溶解并定容，得到不同浓度的标准溶液。
分别取各浓度标准溶液，加入硫酸香草醛试剂，摇匀后在一定温度下反应一定时间，测定其吸光度。
以吸光度为纵坐标，原花青素浓度为横坐标，绘制标准曲线。
取适量葡萄籽原花青素提取液，加入硫酸香草醛试剂，摇匀后在相同条件下进行反应，测定其吸光度。
根据标准曲线计算样品中原花青素的含量。
所有数据均以平均值±标准差表示，采用SPSS等统计软件进行数据分析，采用单因素方差分析（ANOVA）比较不同处理组之间的差异，显著性水平设为P<05。
通过以上方法和步骤，可以准确测定葡萄籽中原花青素的含量，为进一步研究葡萄籽的营养价值和开发利用提供依据。
三、实验结果与分析在本次研究中，我们采用硫酸香草醛法测定了葡萄籽原花青素含量。
此方法基于原花青素在特定条件下与硫酸香草醛发生显色反应，通过测定反应后溶液的光密度值，可推算出原花青素含量。
柳树叶中原花青素含量测定
柳树叶中原花青素含量测定陈洪玉;迟彩霞;王德新;王佩华【摘要】采用紫外-可见分光光度法测定柳树叶中的原花青素的含量,酸化香草醛比色法,测定波长为500nm,浓盐酸1.5mL,4％香草醛3mL,反应时间为20min.结果表明,该方法的线性范围为4.0～100.0μg/mL,相关系数R2=0.9991,平均加标回收率为94.87％,相对标准偏差(RSD)1.38％.该法操作简便、准确、稳定,适用于原花青素含量的测定.%Spectrophotometric method was used for analysis of proanthocyanidin from willow leaves. Vanillin assay was carried out, under the conditions of wavelength at 500 nm, concentrated hydrochloric acid 1.5 mL,4%vanillin 3 mL,reaction time 20 min.The linear range of 4.0 ~ 100.0 μg/mL,the correlation coefficient was R2 = 0. 9991, the average recovery of standard addition was 94. 87% , RSD was 1.38%. This method is simple, accurate, stable and can be used for assay of procyanidins.【期刊名称】《应用化工》【年(卷),期】2012(041)008【总页数】3页(P1456-1457,1461)【关键词】柳树叶;原花青素;含量测定【作者】陈洪玉;迟彩霞;王德新;王佩华【作者单位】绥化学院食品与制药工程学院,黑龙江绥化152061;绥化学院食品与制药工程学院,黑龙江绥化152061;绥化学院食品与制药工程学院,黑龙江绥化152061;绥化学院食品与制药工程学院,黑龙江绥化152061【正文语种】中文【中图分类】R927.2;O657.7原花青素是植物中广泛存在的一大类由黄烷-3-醇缩合而成的聚多酚类化合物，具有多种生理活性，是一种很强的抗氧化剂，具有抗氧化、抗癌、抗过敏等作用。
香草醛_硫酸比色法测定两种原花色素含量的比较
香草醛/硫酸比色法测定两种原花色素含量的比较作者：樊金玲， 陶冠军， 朱文学， FAN Jin-ling， TAO Guan-jun， ZHU Wen-xue作者单位：樊金玲,朱文学,FAN Jin-ling,ZHU Wen-xue(河南科技大学食品与生物工程学院,河南,洛阳,471003)， 陶冠军,TAO Guan-jun(江南大学分析测试中心,江苏,无锡,214036)刊名：食品科学英文刊名：FOOD SCIENCE年，卷(期)：2007,28(9)被引用次数：10次1.DESHPANDE S S;CHERYAN M;SALUNKHE D K Tannin analysis of food products 19862.SARKAR S K;HOWARTH R E Specificity of the vanillin test for flavanols 1976(02)3.PRICE M L;BUTLER L G Rapid visual estimation of tannin content of Sorghum grain 19774.BROADHURST R B;JONES W T Analysis of condensed tannins using acidified vanillin 19785.PRIC M L;SCOYOC S V;BUTLER L G A critical evaluation of the vanillin reaction as an assay for tannin in sorghum grain 1978(05)6.GARCIA PARILLA M C;HEREDI F J;TRONCOSO A M Spectrophotometric determination of total procyanidins in wine vinegar[外文期刊] 19977.DESHPANDE S S;CHERYAN M Evaluation of vanillin analysis of dry beans 19858.SWAIN B T;HILLIS W E The phenolic constituents of Prunus Domestic a,L-The quantitative analysis of constituents 19599.SCHOFIELD P;MBUGUA D M;PELL A N Analysis of condensed tannins:a review 200110.SUN B;RICARDO-da-SILVA J M;SPRANGER I Critical factors of vanillin assay for catechins and proanthocyanidins[外文期刊] 1998(06)11.GINER-CHAVEZ B I;SOEST P J V;ROBERTSON J B A method for isolation condensed tannins from crude plant extracts with trivalent ytterbium[外文期刊] 199712.LIWEI G;KELM M;HAMMERSTONE J F Fractionation of polymeric procyanidins from lowbush blueberry and quantification of procyanidins in selected foods with an optimized normal-phase HPLCMS fluorescent detection method[外文期刊] 2002(17)13.孙芸葡萄籽原花青素聚合度与功效关系的研究 200414.CABANNES J A Le PH pondéréet ses possibilities (Weighed pH and its possibilities) 195315.SCALBERT A;MONTIES B;JANIN G Tannins in wood:Comparison of different estimation methods 19891.硫酸-香草醛法测定葡萄籽原花青素含量[期刊论文]-中外食品加工技术2003(12)2.高铁盐-铁氰化钾分光光度法测定葡萄籽原花青素的含量[期刊论文]-中外食品加工技术2003(4)3.赵文恩.陈雷.韩雅珊.何为华.张劲强葡萄皮渣原花色素提取分离的初步研究[期刊论文]-食品科学2000,21(12)4.鲍俊竹.陈月坤.徐桂花.Bao Junzhu.Chen Yuekun.Xu Guihua测定葡萄籽提取物中原花青素含量的方法[期刊论文]-农业科学研究2005,26(1)5.赵文恩.韩桂花.焦凤云葡萄籽原花色素提取工艺研究[期刊论文]-食品科学2002,23(8)1.李华磊.曾小青.赵骏正交试验优化金荞麦抗癌成分提取工艺的研究[期刊论文]-现代中药研究与实践 2011(2)2.郭敏.张宝善.徐辉艳.赵建新.陈卫.张灏柿酒发醇过程中酚类物质的变化规律研究[期刊论文]-食品工业科技2010(10)3.潘芝梅.徐金刚.卢刚.郑维桃.张大伟李果实发育期矿质元素和果皮花青素含量的变化规律及相关性分析[期刊论文]-浙江林业科技 2009(4)4.梅金龙.胡长鹰.唐年初.徐德平沙棘籽粕原花青素提取纯化工艺研究[期刊论文]-中国油脂 2010(7)5.张寒俊.汪海波.习羽改进香草醛法测定葡萄提取物中的原花青素[期刊论文]-中国酿造 2010(8)6.徐德平.梅金龙.胡长鹰.唐年初.裘爱泳沙棘籽粕原花青素的提取与抗心肌细胞缺氧活性研究[期刊论文]-中国油脂 2009(11)7.孟玉彩.赵文.李慧玲.张会彦蔷薇红景天中原花青素含量的测定方法[期刊论文]-食品研究与开发 2009(4)8.赵先明茶叶儿茶素总量的硫酸-香荚兰素检测方法研究[期刊论文]-安徽农业科学 2010(18)9.单虹丽.卿钰.杜晓.刘东娜茶叶儿茶素总量比色测定的盐酸(硫酸)香草醛显色反应能力评价[期刊论文]-林产化学与工业 2012(3)10.杨依姗.李春美.陈美红香草醛/硫酸法测定柿子单宁含量条件的优化[期刊论文]-食品科技 2010(12)本文链接：/Periodical_spkx200709113.aspx。
香草醛法测定紫山药中原花青素的方法建立
香草醛法测定紫山药中原花青素的方法建立王彦平;杨会会;徐方延;赵峥嵘;古洋;陈月英【摘要】建立香草醛-盐酸法测定紫山药中原花青素含量的方法.主要从光照影响、反应时间、反应温度、香草醛用量和盐酸浓度5个方面对试验条件进行优化,结果表明测定的最佳条件为:紫山药提取液1 mL,10 g/100 mL香草醛溶液5 mL,浓盐酸3mL,而后用甲醇定容至10 mL,在20℃下静置10 min,于500 nm处测定其吸光度.经测定该方法线性范围为4 μg/mL～24 μg/mL,相对标准偏差RSD为1.10％,回收率为98.06 ％～103.89％,可以作为紫山药中原花青素的测定方法.%The vanillin method to determine the concentration of procyanidins in purple yam was established.The experimental conditions were optimized from five aspects:effect of illumination,reaction time,reaction temperature,the amount of vanillin and concentration of hydrochloric acid.The experimental results showed that when 1 mL extracting solution of purple yam was injected to volumetric flask,the optimal reaction conditions were as the following:5 mL of 10 g/100 mL vanillin solution,3 mL of concentrated hydrochloric acid.After diluted to 10 mL,the volumetric flask was placed in 20 ℃ for 10 minutes,and then the absorbance was detected at 500 nm.According to the results,the line of range was from 4 μg/mL to 24 μg/mL,the relative standard deviation was 1.10 ％,and the recoveries were from 98.06 ％ to 103.89 ％.The results proved that this method could be used for the determination of proanthocyanidins in purple yam.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2017(038)015【总页数】4页(P152-155)【关键词】香草醛-盐酸法;原花青素;紫山药【作者】王彦平;杨会会;徐方延;赵峥嵘;古洋;陈月英【作者单位】河南农业职业学院食品工程学院,河南郑州451450;河南农业职业学院食品工程学院,河南郑州451450;河南农业职业学院食品工程学院,河南郑州451450;河南农业职业学院食品工程学院,河南郑州451450;河南农业职业学院食品工程学院,河南郑州451450;河南农业职业学院食品工程学院,河南郑州451450【正文语种】中文原花青素（Proanthocyandins）是一种多酚类化合物，本身富含抗氧化性物质，可以缓解视疲劳[1]、延缓衰老、有效保护高血压引起的心肌纤维化[2]，并且对公认的神经毒素和致癌物丙烯酰胺具有非常好的抑制作⒚[3]。
葡萄籽原花青素检测方法的比较
葡萄籽原花青素检测方法的比较张晶莹;胡文效;高德艳;李彦奎;蒋锡龙【摘要】本研究通过对原花青素的结构分析，选取香草醛法、铁盐催化比色法两种方法对葡萄籽中的原花青素进行了检测对比。
结果表明，两种方法均能稳定、有效地对原花青素进行检测。
香草醛法的检测结果数值较低，且线性范围较窄，适宜用于检测黄烷-3-醇单体、低聚体酚类化合物含量；铁盐催化比色法线性范围较宽，适宜用于黄烷-3-醇不同聚合度范围的酚类化合物总量检测。
%The vanillin assay method and ferric ion catalytic colorimetric method had been chosen to detect the procyanidins content on grape seed. The results showed that both of the detection methods were stable and effective. The datum from Vanillin method indicated lower values and narrower linear range than from the ferric ion catalytic colorimetric method. Vanillin method suited to detect the content of flavan-3-alcohol monomer and oligomeric phenolic compounds;The Ferric ion catalytic colorimetric method had a wider linear range, and was suitable for the detection of the total content of flavan-3-alcohol which has a different polymerization degree.【期刊名称】《中外葡萄与葡萄酒》【年(卷),期】2013(000)006【总页数】3页(P18-20)【关键词】葡萄籽;原花青素;香草醛法;铁盐催化比色法【作者】张晶莹;胡文效;高德艳;李彦奎;蒋锡龙【作者单位】山东省葡萄研究院，济南 250100;山东省葡萄研究院，济南 250100;齐鲁工业大学，济南 250353;山东省葡萄研究院，济南 250100;山东省葡萄研究院，济南 250100【正文语种】中文【中图分类】R284.1葡萄籽中含有丰富的亚油酸、蛋白质、原花青素等成分，其中原花青素现已被证明具有显著的抗氧化和清除自由基的活性，具有广阔的开发前景。
原花青素测定方法
原花青素测定方法1.电化学法原理:原花青素易以氢供体的形式捕捉其它开朗的自由基构成多酚自由基。
邻苯三酚在碱性水溶液中快速出现自水解链式反应，产生中间产物超氧阴离子自由基-(o2)。
分子量大的多酚所形成的自由基较为稳定，可以发生偶合，形成聚合的多酚分子，同时出现竟之争反应，并使稳步引起邻苯三酚自由基链式反应的趋势弱化或消失，整体表现为具备较强的去除自由基能力，且去除能力在一定的条件下与原花青素的重新加入量存有线性关系，并随体系碱度的减小，羟基氢离子电离而减小。
超氧阴离子自由基(o2-)被去除，自水解链式反应被切断，反应中止，使邻苯三酚在-0.96v(vs.sce)的自水解峰电流增大，故可以作为原花青素的定量测定方法。
试验方法：于5ml比色管中，加入适量浓度的原花青素鞭叶液，0.5ml0.5mol/l的tris-hci(ph=8.33)缓冲溶液，1.0ml5.00mmol/l邻苯三酚，定容刻度，容器。
在1min-6min内，记录读取电位在(-0.8)―(-1.2v)范围内-0.96±0.02v处的二阶导数极谱波。
2.定量核磁共振法原理:定量核磁共振法以被测成分的特征氢核的共振吸收信号为目标进行分析，分析结果直观且准确性好。
原花青素通常就是由表中儿茶素及儿茶素通过4→8位或4→6位的碳-碳键连接，分解成聚合度相同、空间结构十分复杂的混合物。
但每个原花青素分子中只有一个末端单元，并且它的h-4加速度变化不显著，因此可以用它去表观样品中原花青素分子的数量。
试验方法：用微量天平高精度称取内标物邻苯二甲酸氢钾约10mg、样品约40mg，重新加入dmso-d6为溶剂1ml并使其充份熔化，迁移至核磁管中展开1h五音nmr分析。
检测条件：5mmbbo接收器，600.192mhz，五音阔为12335.5hz，脉冲宽度为13μs，取样时间为17s，延迟时间为6s，取样次数为16次。
3.高效液相色谱串联质谱法原理:以液相色谱作为分离系统，质谱作为检测系统，经纯化后的样品在液相色谱和质谱部分经过分离和离子化，经由检测器得到质谱图，利用多重反应监测模式对原花青素组分进行定性和定量分析。
四种原花青素含量测定方法比较
四种原花青素含量测定方法比较石磊; 高哲; 刘丽南; 韩巍; 杨晓博; 崔同【期刊名称】《《食品工业科技》》【年(卷),期】2019(040)015【总页数】7页(P242-247,253)【关键词】原花青素; 硫酸-香草醛法; 钼酸铵法; 正丁醇-盐酸-HPLC法; 硫解-HPLC【作者】石磊; 高哲; 刘丽南; 韩巍; 杨晓博; 崔同【作者单位】河北农业大学食品科技学院河北保定071000; 河北省保定市满城中学河北保定071000【正文语种】中文【中图分类】TS201.2原花色素(proanthocyanidins,PC)是一类以黄烷-3-醇为主要结构单元的缩合多酚类成分[1],存在于葡萄[2]、苹果[3]、山楂[4-5]、草莓[6]、莲[7]、高粱[8]、花生[9-10]、可可[11]等多种食用材料中,大量研究结果表明PC具有优越的抗氧化[12]、清除自由基、心血管保护等一系列重要的保健生理作用[13-15],自上世纪80年代以来,PC提取物已经成为功能性食品和化妆品的重要原料被广泛应用。
然而由于PC的组成和结构非常复杂[16],其相关产品的客观表征始终是困扰市场质量评价的技术难题[17],在国际上仍未形成统一的PC含量分析方法[18]。
常见的分析方法包括分光光度法和高效液相色谱(HPLC)法,前者如基于PC酸解生成花青素的Bate-Smith法[19]、丁醇-盐酸法(Porter法)[20]、芳香醛显色的硫酸-香草醛法[21]、PC还原反应的Folin-Ciocalteau法[22]以及钼酸铵法等[23],后者包括侧重多组分同时定量分析的直接HPLC法、侧重组分识别分析的LC-MS法[24]、经酸解生成花青素然后再经HPLC定量的国标分析方法[25],以及亲核试剂苄硫醇存在下PC裂解后分析其降解产物的硫解-HPLC法[26]。
这些方法的分析目的不同,定量分析原理不同,使用的对照(标准)品通常也不尽相同,经常会给出彼此矛盾的分析结果[27-28],而以往的文献未见有针对不同方法进行较系统的评价和比较。
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香草醛法测定原花青素的含量
说明：原花青素的抗氧化性受到聚合物的影响，以乙酸为溶剂，香草只与原花青素中的末端的黄烷-3-醇发生缩合生成红色产物，由红色产物吸光度测定原花青素含量。
通过正交实验和单因素实验考查了硫酸香草醛法测定原花青素含量的合适条件，比色条件为硫酸浓度30%，香草醛浓度1%，反应T为30℃，反应时间为30分钟。
以儿茶素为标准品绘制标准曲线测定原花青素含量。
一、器材/试剂
紫外分光光度计恒温水浴锅电子天平
儿茶素标准品（浓度＞＝98%）；香草醛 ( 分析纯) ；硫酸 ( 分析纯) ；冰乙酸 ( 分析纯) ；实验用水为二级反渗透去离子水。
二、实验步骤
1.配制试剂
( 1 )配制儿茶素标准品溶液：称取一定量的儿茶素标准品，分别用去离子水定容至一定体积，配制成物质的量浓度为0.025~0.25 mm o l · mL 的儿茶素标准品溶液；
( 2 )配制香草醛乙酸溶液：称取一定量的香草醛，分别用乙酸定容至一定体积，配制成浓度为1 ％；
( 3 )配制硫酸乙酸溶液：量取一定体积的浓硫酸，分别用乙酸定容至一定体积，配制成浓度为3 0 ％的硫酸乙酸溶液。
（4）样品溶液：原花青素溶液
以火棘果为原料，按液固比 6：1加入 4 0 ％乙醇溶液，4 5 ℃下浸提 1.5 h，问歇搅拌，连提3次，过滤，滤液旋蒸，回收溶剂。
浓缩液经过预处理好的AB一8树脂吸附，用去离子水洗涤、6 0％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，6 0％乙醇洗脱液即为样品溶液。
2、扫描最大吸收波长
取0．5mL儿茶素标准品溶液，加入2．5mL30％的硫酸乙酸溶液，2.5mL 1％的香草醛乙酸溶液，混合均匀，30℃水浴中避光反应15min。
以无水乙酸做参比，在可见光区(400～800nm)进行光谱扫描。
确定最大吸收波长，以后在此波长下测定样品的含量。
3、绘制标准曲线（在最大波长吸收处测得吸光度）
浓度0.025 0.035 0.045 0.055 0.065 0.075 0.085 0.095
A（儿茶
素）
0.105 0.115 0.125 0.135 0.145 0.155 0.165 0.175
A（儿茶
素）
0.185 0.195 0.205 0.215 0.225 0.235 0.245
A（儿茶
素）
测原花青素样品的吸光度，通过以上标准曲线所得的标准曲线回归线方程计算得样品浓度。
注：实验须重复4次，。