AKTA 设备常见问题及解决方法--气泡
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AKTA设备常见问题及解决方法--气泡
AKTA purifier以及AKTA avant系列液相色谱系统均采用柱塞泵作为液体传输的动力系统,柱塞泵具有精度高并能提供较高压力等优点。
为了让设备能长期正常使用,就需要我们日常对设备尤其是系统泵做一些简单的维护保养并及时解决一些常见问题。
AKTA 设备柱塞泵的泵头分为前后两个腔体,前腔是正常缓冲液的流路;后腔是泵后润洗流路,后腔润洗液为20%乙醇。
为保证柱塞泵长期正常运转,就需要保证后腔润洗液正常循环并定期更换。
为了保证日常的分离纯化工作正常进行,我们建议大家对所有用于AKTA纯化设备的缓冲液以及20%乙醇溶液都需要进行过滤以及脱气处理,避免层析系统以及层析柱堵塞及进气泡,影响层析效果。
一般建议缓冲液脱气处理的方法有负压抽滤,超声脱气等。
气泡从哪里来?
具体使用AKTA进行实验过程中,当我们所用到的缓冲液未经脱气处理时,实验过程中会有小微气泡逐渐从缓冲液中释放出,聚集在管路当中,小微气泡聚集多了以后会进入泵腔甚至层析柱,导致纯化效率降低;另外由于缓冲液更换、层析柱的拆卸和安装等操作可能也会使AKTA泵腔或层析柱出现进气泡的情况,大家也不必过分担心,可以通过一些操作排除泵腔和层析柱气泡。
怎么来排气泡?
1、当系统上未连接层析柱时,我们发现设置了一定泵流速,但是系统出口看不到有液
体流出或液体流出速度明显低于设置的流速,这很可能就是泵腔进气泡了,我们可以先分别拧松泵头上黑色的排气阀口,然后将注射器插入抽气发口,快速抽动注射器,这时注射器抽出液体的同时会带走泵腔中的气泡,也可以重复抽几次确保气泡排除。
2、当系统上连接层析柱运行但又没有样品进柱子时,我们观察到280nm的紫外检测信
号出现快速剧烈的波动,这时就是有气泡进入到层析柱中了。
这将会导致层析填料利用率下降,纯化效果下降。
如果您使用的层析柱为Hitrap 层析柱、XK层析柱或Hiscale层析柱,您可以将902限流阀(反压阀)连接到紫外流通池后部,然后将报警压力设置为层析填料的压力+0.2Mpa或层析柱压力限值中较小一个,然后用不超报警压力但尽可能快的液体流速就可以将气泡排除层析柱。
但对于自装的比较大的层析柱或者层析柱中进入的气泡过多,就需要重新装填层析柱。
泵后润洗如何排气泡?
泵后腔润洗液具有两个作用,一个作用是作为润滑剂,保证柱塞的正常运转,另一个作用是将泵后腔残余的离子及时去除,保证不会存在盐结晶损伤柱塞的密封圈。
因此需要保证泵后润洗液正常循环,并定期更换。
泵后腔润洗液为20%乙醇,新鲜配制的20%乙醇会一直产生气泡,小气泡聚集就会形成较大的气泡。
因此,20%乙醇最好也需要进行脱气处理。
当我们发现泵后腔润洗管路中有一些气泡存在,我们就需要注意观察一下。
如果泵后腔循环管路的入口(白色管路)处于20%乙醇液面以下,泵后腔润洗管路的回流口(黑色注射器接头)可以滴出液体,这属于正常情况,不必担心。
但有时润洗管路会有长段气泡存在,泵后腔润洗管路的回流口(黑色注射器接头)不能滴出液体时,就需要用注射器从泵后腔润洗回流口(带黑色注射器接头)快速抽20%乙醇溶液,将气泡带出,保证泵后腔润洗管路液体可以循环即可。
此时另一端润洗管路必须存在于20%乙醇液面以下。
但是,有时我们可能会忘记更换泵后润洗的20%乙醇。
泵后腔润洗管路中润洗液长期不循环。
当我们发现这种情况再用注射器快速抽20%乙醇溶液时,发现次循环管路不能抽通。
发生以上情况主要是因为在A泵和B泵间单向阀门(单向阀为灰白色)由于长期没有液体循环而堵塞。
解决方法:单向阀上有箭头,需要记住箭头方向,以便处理完单项阀门后再将阀门安装回原位;将单向阀连同前后管路从泵头上拆下来,然后将单向阀拧开;在有平面一侧滴一滴水或20%乙醇,接着将单向阀螺丝拧紧,重新复原单向阀;接着将单向阀门在桌面或墙面轻轻摔打约10次,再用注射器沿着单向阀箭头方向抽液体或推液体,此时单向阀堵塞问题就可以解决了,如果没有解决,重复操作一次;最后将单向阀按原来方向安装回原位,用注射器抽通泵后腔的泵后润洗液(20%乙醇)即可。
但如果发现泵后腔单向阀门及管路中有褐色、绿色等其他颜色,并且采用以上方法也不能解决阀门堵塞问题。
可能是因为泵后腔润洗管路长期不保养导致,出现细菌污染堵塞单向阀门,此时就需要联系GE healthcare维修工程师了。