生物参考区间建立与验证参考幻灯片

合集下载

参考区间及临界值如何验证或建立

检验科
2
检验报告单：需要关注
1. 我们提供的参考区间、临界值或临床决定值是否合适？ 2. 最好能提供检验方法、试剂厂商的信息！
3
内容
• 参考区间的验证和建立
1
• 临界值的验证和建立
2
4
参考区间的验证和建立
参考文献 1. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Defining, Establishing, and Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline-Third Edition CLSI Document EP28-A3c (ISBN 1-56238-682-4). Clinical and Laboratory Standards Institute,940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA, 19087-1898, USA, 2010. 2. 临床实验室检验项目参考区间的制定 WS/T 402-2012.
6. 特殊情况：若通过招募受试者来选择参考个体有困难，则可从查体人群中选择临床诊断基本正常者作为参考个体。
《生物参考区间和临床决定值评价程序》（PKUPHL-2-PF-033-V2）
13
参考区间的验证和建立
标本采集、运输、检测和存储：按SOP操作。
《生物参考区间和临床决定值评价程序》（PKUPHL-2-PF-033-V2）
4. 入选受试者：获取临床资料，主要包括：年龄、性别、身高、体重、血压、心率、性别、吸烟，心电图检查结果，实验室检测指标等。入选受试者各项相关实验室指标无异常，保留受试者体检结果。

高中生物PPT课件验证性、探究性实验可修改文字

二、探究性实验与验证性实验的比较 1.区别
项目
探究性实验
验证性实验
概念
指实验者在不知晓实验结果指实验者针对已知的实验结果而
的前提下，通过自己实验、进行的以验证实验结果、巩固和
探索、分析、研究得出结论，加强有关知识内容、培养实验操
从而形成科学概念的一种认作能力为目的的重复性实验
知活动
实验目探究研究对象的未知属性、验证已知对象的已知属性、特征
实验结变量无影响；知实验结果，并对实
果预测 ②实验组比对照组好，实验变量有利；验结果进行准确描述
③实验组比对照组差，实验变量不利
(如果是相互对照，也分类讨论)
实验结论
根据可能的实验结果，进行分析
对应实验目的作出肯定结论
2.举例
项目
探究性实验
验证性实验
实验名称
鉴定某人是否出现糖尿
验证某糖尿病患者尿液中含葡萄糖
解析
答案
1234
2.(2013·浙江，31)某同学为研究甲状腺的功能，提出以下实验思路：
①将若干只未成年小鼠分为2组：
甲组：不切除甲状腺(假手术) 乙组：切除甲状腺
②实验开始时和实验中每隔一段时间，分别测定每只小鼠的耗氧量和体长，
并记录。
③对测得的数据进行统计分析。
(要求与说明：假手术指进行手术但不切除甲状腺；耗氧量用单位时间的氧
1234
请回答下列问题： (1)实验思路 ①_取__试__管__若__干__支__,将__质__量__分__数__为__1_._3_%_N__a_C_l溶__液__由__高__到__低__进__行__浓__度__梯__度__稀__释__ 。 ②_向__各__支__试__管__中__分__别__加__入__肝__细__胞__悬__液__，__放__置__一__定__时__间__________________ 。 ③_取__各__试__管__中__的__肝__细__胞__悬__液__，__分__别__滴__加__到__血__细__胞__计__数__板__上__，__在__显__微__镜__下__ 计__数__并__测__量__细__胞__直__径__，__记__录__实__验__结__果______。 ④_对__实__验__数__据__进__行__统__计__分__析________________________________________ 。气消耗量表示；实验持续时间合来自；实验条件均适宜)请回答：

参考区间及临界值如何验证或建立ppt课件

26
临界值的验证和建立
参考文献
1. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline-Second Edition. CLSI document EP12-A2 (ISBN 1-56238-654-9). Clinical and Laboratory Standards Institute, 940 West Valley Road, Suit 1400, Wayne, Pennsylvania 19087-1898 USA, 2008.
（CHM.13750）
注：此要求不适用于按照预定临界值报告定性结果的 FDA 认证/批准的体外诊断实验。仅适用于某些实验，即在定量测定的基础上报告定性结果，使用自行建立的阈值（临界值）区分阳性和阴性临床解释。（IMM.33905 ）
整理版课件
28
临界值：CAP认可的要求
在初次运行检验时，应确定区分阳性结果与阴性结果的临界值，并且此后每六个月验证一次。如果校验品或校准验证材料的值位于临界值附近，则校准或校准验证的过程符合本核查表的要求。如果实验室不能从仪器中获得实际数值，则该核查表要求不适用。
5. 分组标准：原则上根据试剂说明书进行分组。对于参考范围不受年龄和性别影响的项目：年龄范围可包括：18～ 70岁；性别：男女各占一半。验证时每组至少20例，建立时每组一般至少120例。
6. 特殊情况：若通过招募受试者来选择参考个体有困难，则可从查体人群中选择临床诊断基本正常者作为参考个体。
《生物参考区间和临床决定值评价程序》（PKUPHL-2-PF-033-V2）

生化检测系统性能验证PPT课件

基本概念
误差（error）指对于真值或对于可接受的、预期真值或参考值的偏离，分为随机误差和系统误差。
总误差（total error）指某实验室用某方法在多次独立检验中分析某样品所得各个结果值与靶值之差在一定置信区间内的最大值。包括随机误差和系统误差，是不准确度的估计值。
文件依据
CLSI 颁布的EP15-A文件《用户对精密度和准确度性能的核实指南》
通常是生产厂家完成。
什么是性能验证？
对他人或厂商的评价资料中的几个主要性能进行证实。
通常由实验室自己完成。
性能验证试验
对配套系统，一般验证下列指标： ―准确度(accuracy)---EP15 -A ―精密度(precision)---EP5-A2 ―线性范围（linear range )---EP-6 ―可报告范围(reportable range)---EP-6 ―参考区间(reference interval)---C28-A2
基本概念
3. 不同测量系统可使用不同测量程序。 4. 应在实际程度上给出改变或不改变条件的说明。
基本概念
中间精密度
在一组测量条件下的测量精密度，这些条件包括相同的测量程序、相同地点并且对相同或相似的被测对象在一长时间段内重复测量，但可包含其它相关条件的改变。
1. 应在实际程度规定改变和未改变的条件，特别是如校准物、试剂批号、设备系统、操作者和环境条件等变量。
文件依据
CLSI 颁布的EP-17A文件进行灵敏度性能评价。
功能灵敏度实验程序
将校准品或质控品稀释后，在仪器上分别对不同浓度的样品连续测定20次，
计算均值、标准差和变异系数，以不精密度（CV）≤ 20%时对应检测

性能验证PPT课件

18
性能验证的内容
定量项目验证内容
精密度（Precision）验证（包括批内和总精密度）正确度（Trueness）验证分析测量范围（AMR）验证临床可报告范围（CRR）验证自动稀释（Auto-dilution）验证参考区间（Reference Interval）验证空白限（LOB）验证检出限（LOD）验证定量检测限（LOQ）验证污染携带（Carryover）验证方法学比对（Method Comparison）分析干扰（Interference）性能评价测量不确定度（Measurement Uncertainty）评定
应用准则对方法学性能的通用要求(1)
检验程序需文件化；实验室负责人或指定的人员应在开始即对程序评审并定期评审。评审通常每年一次。评审应文件化。性能验证：定量试验：正确度、精密度、可报告范围、（携带污染率）定性试验：阴性符合率、阳性符合率、重复性、最低检出限等半定量试验：重复性生物参考区间验证及评审：20份健康人标本，生物参考区间的评审还应该有临床医生的参与。评审内容：生物参考区间的来源、针对的人群、生物参考区间验证结果、与临床诊断的符合性等。生物参考区间建立：120份健康人标本
5.3.2.7试剂和耗材-记录
应保存影响检验性能的每一试剂和耗材的记录，包括但不限于以下内容： h) 证实试剂或耗材持续可使用的性能记录。
微生物专业要求：5.3.2.3 试剂和耗材验收试验应符合如下要求：（a）新批号及每一货次试剂和耗材使用前，应通过直接分析参考物质、新旧批号平行实验或常规质控等方法进行验证，并记录；（b）新批号及每一货次试剂和耗材，如吲哚试剂，杆菌肽，奥普托辛，X、V、XV 因子纸片等应使用阴性和阳性质控物进行验证；（c）新批号及每一货次的药敏试验纸片使用前应以标准菌株进行验证；（d）新批号及每一货次的染色剂（革兰染色、特殊染色和荧光染色）应用已知阳性和阴性（适用时）的质控菌株进行验证；（e）新批号及每一货次直接抗原检测试剂（无论是否含内质控）应用阴性和阳性外质控进行验证；（f）培养基外观良好（平滑、水分适宜、无污染、适当的颜色和厚度，试管培养基湿度适宜），新批号及每一货次的商品或自配培养基应检测相应的性能，包括无菌试验、生长试验或与旧批号平行试验、生长抑制试验（适用时）、生化反应（适用时）等，应以质控菌株进行验证；（g）一次性定量接种环每批次应抽样验证。

生物参考区间验证指南

生物参考区间验证指南咱这生物参考区间验证啊，就像是一场神秘又严谨的探秘之旅。

我每天就在这一堆的样本啊、数据啊中间捣鼓，就盼着能把这事儿给弄个明明白白。

我这模样啊，普普通通，戴着个有点旧的眼镜，眼镜腿儿都有点掉色了。

眼睛不大，但是一瞅着那些数据就放光。

头发乱得像个鸟窝，为啥啊？心思都在这验证上了，哪有闲工夫管头发啊。

咱这工作环境啊，到处都是瓶瓶罐罐，还有那些仪器，滴滴答答响个不停，就像一群小虫子在那小声嘀咕。

灯光白晃晃的，照得人眼睛直发涩，可咱也不能闭眼啊，数据还瞅着呢。

有一回啊，我那年轻的小徒弟过来问我：“师傅，这生物参考区间验证咋这么麻烦呢？”我瞅了他一眼，慢悠悠地说：“这就像你找对象，你得把人家的脾气秉性啥的都摸透了，这参考区间验证也是，得把每一个细节，每一个数据的脾气都摸准了才行。

”小徒弟似懂非懂地点点头，眼睛里还是透着迷糊。

我跟他说：“你看啊，这些样本就像是一群性格各异的人。

有的样本的数据特别听话，规规矩矩的，就像那些老实巴交的人。

可有的呢，调皮捣蛋，偏离正常范围，就像那些调皮的小娃娃。

咱就得像家长一样，找出它为啥调皮，是真有问题呢，还是只是暂时的小情绪。

”这验证过程啊，得特别仔细。

我有时候拿着一个样本，就像捧着个宝贝似的，眼睛都不敢眨一下。

心里想着啊，这小小的样本背后，可能就是一个大大的真相呢。

要是出了错，那可不得了，就像在战场上给错了情报一样，后果不堪设想。

有时候数据跟我作对，我就对着那些数字嘟囔：“你们这群小崽子，到底想咋样啊？快把你们的秘密告诉我。

”这时候啊，旁边的同事就会笑着说：“你看你，跟数据较啥劲呢？”我就会白他一眼说：“你懂啥，这数据就像女人的心，得慢慢琢磨。

”咱做这行的啊，乐趣也不少。

当你终于找到一个数据的规律，就像解开了一个超级难的谜题一样，那种兴奋啊，就想蹦起来。

我就会拉着同事说：“你看，我就说这数据有猫腻吧，被我找着了。

”同事也会凑过来，一边看一边点头，嘴里还念叨着：“行啊你，真有两下子。

C28实验室如何确信和成立生物参考区间,核准指南――第二版

临床实验室如何确信和成立生物参考区间（核准指南――第二版）1 内容简介此指南是专为指导临床诊断实验室、诊断仪器试剂制造商和临床查验工作者在定量实验检测中确信参考值和参考区间而制定的。

它包括在临床医学实验室中成立靠得住的参考区间所用的方式步骤和推荐程序。

而该推荐程序的要紧内容是如何用最简便和最务实的方式去成立一个能保证足够靠得住性和有效性的参考区间的草案。

此文献不可能每一种情形都面面俱到，因此有些内容需要通过指南外来充实。

但在特定的区域内，额外的步骤或尽力能够提高参考区间的可信度和精准度。

目前的现状是，临床实验室科研人员和仪器试剂制造商缺乏统一的搜集数据及操作方式去成立参考区间，故小组委员会希望此文献能为成立靠得住的参考区间提供最大体的、统一的实验草案，并为进一步的研究夯实基础。

该程序指南的关键在于决定“相对健康”群体参考值或参考区间时所选择的样品组是不是来源于健康良好的人群，这也是此文献的谈论的重点。

固然，关于其他类型诸如生理或病理情形下的参考值的成立，也应该采纳相似的方式。

此程序概要适用于任何类型的参考区间的确信，因为它充分考虑了适合的参考个体的选择及各类分析方式阻碍因素等情形。

但是，这份文献没有专门地谈到如何成立诊断域值（如危急值或各类医学决定值）。

这些值的决定方式各异，部份还常常要在特定医学条件下由诊断方式的灵敏性和特异性来决定。

不同情形下的参考值研究的各类需求本指南也将涉及，包括：新分析物的测量用新的或不同的分析方式测量事前已明确明白的分析物或已标准化测定的生理学的数据和参考值。

用相同或有可比性的方式去测量同一分析物，并利用其他实验室或试剂生产商提供的参考值作比较研究（参考值的挪用）。

被称为“参考值挪用”的最后一项议题是比较复杂的。

因为尔后所有的临床诊断实验室将会不断地碰到挪用参考值的验证和随后的采纳它那个问题，而试剂生产商和其他实验室所提供的参考值是不能直接应用的。

这一问题的解决方式至今仍然不是超级严格。

参考区间及临界值如何验证或建立课件

参考区间及临界值的确定与发布
确定参考区间及临界值
01
根据数据分析结果，结合专业知识和实践经验，确定参考区间
及临界值。
验证参考区间及临界值
02
通过实验或临床实践等方式，对确定的参考区间及临界值进行
验证，确保其准确性和可靠性。
发布与更新
03
将确定的参考区间及临界值进行发布，并根据新的研究和临床
实践结果进行定期更新和维护。
在选择统计方法时，应考虑其适用性、可靠性和准确性，并避免使用那些可能产生偏差或误导的统计方法。同时，应遵循国际和国内的相关指南和建议，以确保统计方法的合理性和规范性。
06
案例分析
案例一：血糖参考区间的建立
总结词
血糖参考区间的建立需要基于大量健康人群的血糖数据，通过统计分析得出正常范围。
详细描述
05
参考区间及临界值验证与建立的注意事项
数据来源的可靠性
确保数据来源的可靠性是验证和建立参考区间及临界值的重要前提。数据应来自经过严格质量控制和标准化的检测系统，并且应定期进行校准和质量控制检验，以确保数据的准确性和可靠性。
VS
对于临床实验室，应采用经过批准的试剂和仪器，并遵循相关操作程序，以确保数据的可靠性和准确性。同时，实验室应定期参加外部质量评估计划，以监测其数据的质量和准确性。
案例三：血常规指标参考区间的验证
总结词
血常规指标参考区间的验证需要基于大量健康人群的血常规数据，通过统计分析得出正常范围。
详细描述
首先，收集一定数量健康人群的血常规数据，这些数据应包括红细胞、白细胞、血小板等指标。然后，对这些数据进行统计分析，如计算均值、标准差等统计量。根据统计分析结果，确定血常规指标的正常范围。最后，将建立的参考区间应用于临床实践，不断收集数据并更新参考区间。同时，应注意不同年龄、性别和种族的差异对血常规指标的影响。

郑州地区表观健康人群sdLDL-C生物参考区间的建立与验证

㊃8㊃检验医学与临床2024年1月第21卷第1期 L a b M e d C l i n,J a n u a r y2024,V o l.21,N o.1㊃论著㊃D O I:10.3969/j.i s s n.1672-9455.2024.01.002郑州地区表观健康人群s d L D L-C生物参考区间的建立与验证*刘凤珍,郭凤霞,毋小玉,魏晓霞,崔发财ә河南省人民医院检验科,河南郑州450003摘要:目的采用过氧化物酶法检测并建立郑州地区表观健康人群血清小而密低密度脂蛋白胆固醇(s d L D L-C)活性值参考区间,并进行验证㊂方法选取2019年6月至2022年6月在该院特需中心体检健康的785例成年人为研究对象,并按照性别和年龄(18~<30岁㊁30~<40岁㊁40~<50岁㊁50~<60岁和ȡ60岁)进行分组㊂采用过氧化物酶法检测血清s d L D L-C活性值,采用K o l m o g o r o v-S m i r n o v(K-S)法对各组数据进行正态性检验,采用双侧95%C I进行s d L D L-C活性值参考区间上下限的设定㊂另收集100例体检健康者血清样本进行参考区间验证,当比率值(R)ȡ90%,判断验证通过㊂结果郑州地区表观健康人群s d L D L-C活性值呈正态分布,男性为(0.700ʃ0.151)mm o l/L,女性为(0.670ʃ0.137)mm o l/L,男女比较,差异有统计学意义(P<0.01)㊂女性各年龄组间血清s d L D L-C活性值比较,差异无统计学意义(P>0.05),男性各年龄组间血清s d L D L-C活性值比较,差异有统计学意义(P<0.05),进一步分析显示18~<30岁组㊁30~<40岁组和40~< 50岁组间差异无统计学意义(P>0.05),50~<60岁组与ȡ60岁组间差异无统计学意义(P>0.05),因此将男性合并为18~<50岁组和ȡ50岁组㊂郑州地区表观健康人群血清s d L D L-C活性值参考区间为女性(18~80岁)0.400~0.938mm o l/L㊁男性(18~<50岁)0.440~1.004mm o l/L㊁男性(ȡ50岁)0.368~0.976mm o l/L㊂100例体检健康者的比率值为0.98,新建立的参考区间验证通过㊂结论该研究初步建立和验证了郑州地区表观健康人群血清s d L D L-C活性值参考区间,为心血管疾病的发病风险评估以及诊断治疗提供参考依据㊂关键词:小而密低密度脂蛋白胆固醇;参考区间;表观健康人群;验证;郑州中图法分类号:R-331文献标志码:A文章编号:1672-9455(2024)01-0008-04E s t a b l i s h m e n t a n d v e r i f i c a t i o n o f s d L D L-C a c t i v i t y v a l u e b i o l o g i c a l r e f e r e n c e i n t e r v a l a m o n ga p p a r e n t l y h e a l t h y p e o p l e i n Z h e n g z h o u a r e a*L I U F e n g z h e n,G U O F e n g x i a,WU X i a o y u,WE I X i a o x i a,C U I F a c a iәD e p a r t m e n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y,H e n a n P r o v i n c i a l P e o p l e's H o s p i t a l,Z h e n g z h o u,H e n a n450003,C h i n aA b s t r a c t:O b j e c t i v e T o d e t e c t s e r u m s m a l l d e n s e l o w d e n s i t y l i p o p r o t e i n c h o l e s t e r o l(s d L D L-C)b y p e r-o x i d a s e m e t h o d a m o n g t h e a p p a r e n t l y h e a l t h y p e o p l e i n Z h e n g z h o u a r e a t o e s t a b l i s h i t s a c t i v i t y v a l u e r e f e r e n c e i n t e r v a l,a n d t o c o n d u c t t h e v e r i f i c a t i o n.M e t h o d s A t o t a l o f785h e a l t h y a d u l t s b y p h y s i c a l e x a m i n a t i o n i n t h e S p e c i a l N e e d s C e n t e r o f t h i s h o s p i t a l f r o m J u n e2019t o J u n e2020w e r e s e l e c t e d a s t h e s t u d y s u b j e c t s a n d g r o u p e d a c c o r d i n g t o s e x a n d a g e(18-<30y e a r s o l d,30-<40y e a r s o l d,40-<50y e a r s o l d,50-<60y e a r s o l d a n dȡ60y e a r s o l d).T h e a c t i v i t y v a l u e o f s e r u m s d L D L-C w a s d e t e c t e d b y t h e p e r o x i d a s e m e t h o d.T h e K o l m o g o r o v-S m i r n o v(K-S)t e s t w a s u s e d t o c o n d u c t t h e n o r m a l i t y t e s t o f t h e d a t a i n e a c h g r o u p,a n d t h e u p-p e r a n d l o w e r l i m i t s o f s d L D L-C a c t i v i t y v a l u e r e f e r e n c e i n t e r v a l s w e r e s e t w i t h b i l a t e r a l95%c o n f i d e n c e i n-t e r v a l s(C I).T h e o t h e r100s e r u m s a m p l e s f r o m h e a l t h y p h y s i c a l e x a m i n a t i o n s u b j e c t s w e r e c o l l e c t e d t o c o n-d u c t t h e r e f e r e n c e i n t e r v a l v e r i f i c a t i o n.W h e n t h e r a t i o v a l u e(R)ȡ90%,t h e v e r i f i c a t i o n w a s j u d g e d t o b e p a s s e d.R e s u l t s T h e s e r u m s d L D L-C a c t i v i t y v a l u e s a m o n g t h e a p p a r e n t l y h e a l t h y p e o p l e i n Z h e n g z h o u a r e a s h o w e d t h e n o r m a l d i s t r i b u t i o n,w h i c h w a s(0.700ʃ0.151)mm o l/L f o r m a l e s a n d(0.670ʃ0.137)mm o l/L f o r f e m a l e s,a n d t h e d i f f e r e n c e b e t w e e n t h e m a l e s a n d f e m a l e s w a s s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t(P<0.01).T h e r e w a s n o s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e o f s d L D L-C a c t i v i t y v a l u e s i n f e m a l e s a m o n g t h e v a r i e d a g e g r o u p s(P>0.05), w h i l e w h i c h i n m a l e s h a d s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e s a m o n g t h e v a r i e d a g e g r o u p s(P<0.05).F u r t h e r a n a l y s i s s h o w e d t h a t t h e r e w a s n o s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e a m o n g t h e a g e g r o u p s o f18-<30y e a r s o l d, 30-<40y e a r s o l d a n d40-<50y e a r s o l d(P>0.05),a n d b e t w e e n t h e a g e g r o u p s o f50-<60y e a r s o l d a n dȡ60y e a r s o l d(P>0.05),t h e r e f o r e,t h e m a l e s w e r e c o m b i n e d i n t o t h e18-<50y e a r s o l d g r o u p a n dȡ*基金项目:国家自然科学基金项目(82002199)㊂作者简介:刘凤珍,女,主管技师,主要从事临床生化检验及肿瘤早期诊断相关研究㊂ә通信作者,E-m a i l:c u i f a c a i1@163.c o m㊂50y e a r s o l d g r o u p.T h e r e f e r e n c e i n t e r v a l o f s e r u m s d L D L-C a c t i v i t y v a l u e i n a p p a r e n t l y h e a l t h y p e o p l e i n Z h e n g z h o u a r e a w e r e0.400-0.938mm o l/L f o r f e m a l e s(18-80y e a r s o l d),0.440-1.004mm o l/L f o r m a l e s (18-<50y e a r s o l d),0.368-0.976mm o l/L f o r m a l e s(ȡ50y e a r s o l d).T h e R v a l u e o f100h e a l t h y a d u l t s i n p h y s i c a l e x a m i n a t i o n w a s0.98a n d t h e n e w l y e s t a b l i s h e d r e f e r e n c e i n t e r v a l o f s e r u m s d L D L-C p a s s e d t h e v e r i-f i c a t i o n.C o n c l u s i o n T h e r e f e r e n c e i n t e r v a l s o f s e r u m s d L D L-C a c t i v i t y v a l u e s a m o n g t h e a p p a r e n t l y h e a l t h y a d u l t s i n Z h e n g z h o u a r e a a r e p r e l i m i n a r i l y e s t a b l i s h e d a n d v e r i f i e d,w h i c h p r o v i d e s t h e r e f e r e n c e b a s i s f o r t h e r i s k a s s e s s m e n t,d i a g n o s i s a n d t r e a t m e n t o f c a r d i o v a s c u l a r d i s e a s e s o n s e t.K e y w o r d s:s m a l l d e n s e l o w d e n s i t y l i p o p r o t e i n c h o l e s t e r o l;r e f e r e n c e i n t e r v a l;a p p a r e n t l y h e a l t h y a-d u l t s;v a l i d a t i o n;Z h e n g z h o u冠心病(C H D)是世界范围内引起人类死亡的主要原因,而动脉粥样硬化是导致C H D发生的主要危险因素[1]㊂小而密低密度脂蛋白胆固醇(s d L D L-C)属于低密度脂蛋白胆固醇(L D L-C)亚型,它与低密度脂蛋白(L D L)受体亲和力低且不易被降解代谢,在循环系统中停留时间长且易被氧化,因此更易渗入动脉血管壁堆积并介导泡沫细胞的形成[2],参与动脉粥样硬化过程㊂多项研究结果表明,体内高s d L D L-C水平与C H D的发病风险密切相关,且s d L D L-C检测的敏感性高于传统的L D L-C检测[3-4]㊂s d L D L-C检测方法众多,不同试剂厂家提供的参考区间存在差异,参考区间的不适用将会对患者的诊断和治疗造成影响㊂截至目前,国家卫生健康委员会已陆续更新㊁发布了10个部分的‘临床常用生化检验项目参考区间“行业标准,但s d L D L-C参考区间尚未包含在内㊂为此,本研究拟采用过氧化物酶法检测郑州地区表观健康人群血清s d L D L-C活性值,并初步建立和验证适合本地区的参考区间㊂1.1一般资料随机选取2019年6月至2022年6月在本院特需中心体检健康的785例成年人为研究对象1,用于建立血清s d L D L-C活性值参考区间,其中男性18~<30岁70例,30~<40岁74例,40~< 50岁64例,50~<60岁84例,ȡ60岁77例;女性18~<30岁87例,30~<40岁94例,40~<50岁97例,50~<60岁78例,ȡ60岁60例㊂将其按照性别和年龄(18~<30岁㊁30~<40岁㊁40~<50岁㊁50~<60岁和ȡ60岁)进行分组㊂另选取2022年8月在本院特需中心体检健康的100例成年人为研究对象2,用于验证新建立的血清s d L D L-C活性值参考区间㊂纳入标准:健康人群分布覆盖郑州市六区六县且居住1年以上,血压正常,体质量指数(B M I) 18.5~<23.9k g/c m2,血常规㊁尿常规㊁血脂和血糖均正常,胸部X线片或胸部C T㊁心电图及B超检查均正常㊂排除标准:有吸烟史㊁饮酒史㊁糖尿病史㊁家族遗传病史和慢性病史,既往或目前患心脑血管疾病㊁肾脏疾病㊁内分泌系统疾病㊁消化系统疾病㊁代谢和营养性疾病㊁风湿性疾病㊂本研究经本院医学伦理委员会审批通过[审批号:(2020)伦审第76号]㊂1.2仪器与试剂血清s d L D L-C活性值检测试剂盒及配套校准品和质控品均购自宁波美康生物科技股份有限公司,检测仪器为A B B O T T A R C H I T E C T c16000全自动生化分析仪㊂1.3方法1.3.1标本采集及检测采集所有研究对象空腹8 h外周静脉血3m L于含分离胶无抗凝剂的真空采血管中,2h内离心(2980ˑg,5m i n)并分离血清,保存于-80ħ超低温冰箱㊂样本检测前应确保检测系统处于在控状态,采用过氧化物酶法检测健康体检者血清s d L D L-C活性值㊂1.3.2参考区间的建立和验证根据美国临床实验室标准化协会(N C C L S)C28-A2文件‘医学实验室参考区间的定义㊁建立和确认“[5]进行参考区间的建立,收集研究对象1血清s d L D L-C活性值数据,采用狄克逊(D i x o n)检验法剔除离群值,对有效数据进行正态性检验并计算95%C I㊂根据W S/T402-2012文件‘临床实验室检验项目参考区间的制定“[6]进行参考区间验证,检测研究对象2血清s d L D L-C活性值,以新建参考区间内样本数与总样本数比值为比率值(R),Rȡ0.90判定参考区间验证合格㊂1.4统计学处理采用S P S S19.0统计软件进行数据分析,正态性检验采用K o l m o g o r o v-S m i r n o v(K-S)法,符合正态分布的计量资料采用xʃs表示,两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析㊂若资料符合正态分布,采用正态分布法建立s d L D L-C活性值的参考区间,以xʃ1.96s作为参考区间的上下限㊂以P<0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1正态性检验 K-S法检验结果显示,郑州地区表观健康人群血清s d L D L-C活性值服从正态分布(P>0.05),进一步按照性别和年龄进行分组后,各组血清s d L D L-C活性值也均服从正态分布(P>0.05)㊂2.2血清s d L D L-C活性值的性别及年龄组间比较男性表观健康人群血清s d L D L-C活性值显著高于女性(P<0.01),提示需按照性别设置参考区间㊂单因素方差分析结果显示,女性各年龄组间血清s d L D L-C活性值比较,差异无统计学意义(P> 0.05)㊂男性各年龄组间血清s d L D L-C活性值比较,差异有统计学意义(P<0.05)㊂男性18~<50岁各㊃9㊃检验医学与临床2024年1月第21卷第1期 L a b M e d C l i n,J a n u a r y2024,V o l.21,N o.1年龄组间s d L D L-C活性值比较,差异无统计学意义(P>0.05),但显著高于ȡ50岁各年龄组s d L D L-C 活性值(P<0.05),提示男性需按照18~<50岁和ȡ50岁设置参考区间㊂见表1㊂表1不同年龄的表观健康成年人血清s d L D L-C活性值比较(xʃs,mm o l/L)性别年龄(岁)n s d L D L-C女18~804160.670ʃ0.13718~<30870.641ʃ0.13430~<40940.681ʃ0.13540~<50970.674ʃ0.13050~<60780.686ʃ0.138ȡ60600.663ʃ0.155F1.445P0.218男18~893690.700ʃ0.151ә18~<30700.702ʃ0.177*#30~<40740.732ʃ0.119*#40~<50640.743ʃ0.126*#50~<60840.682ʃ0.158ȡ60770.661ʃ0.152F3.894P0.004注:与18~80岁女性比较,әP<0.01;与50~<60岁男性比较,*P<0.05;与ȡ60岁男性比较,#P<0.05㊂2.3血清s d L D L-C活性值参考区间的建立郑州地区表观健康人群血清s d L D L-C活性值服从正态分布,选取正态分布图双侧95%C I(xʃ1.96s)作为参考区间的上限和下限㊂参考区间为女性(18~80岁)0.400~0.938m m o l/L,男性(18~<50岁)0.440~1.004m m o l/L,男性(ȡ50岁)0.368~0.976m m o l/L㊂2.4血清s d L D L-C活性值参考区间的验证100例健康人群中,有98例的血清s d L D L-C活性值在新建立参考区间内,有2例超出参考区间,R=0.98> 0.90,参考区间验证合格㊂3讨论L D L-C是临床用于预防C H D高风险人群发病的首选干预指标[7],然而近年研究报道,部分C H D患者发病前L D L-C水平未见异常,另有部分C H D高风险人群通过饮食或药物治疗降低体内L D L-C水平后,C H D事件发生风险仍未降低[8-9]㊂因此,单纯的L D L-C检测并不能完全反映C H D患者真实的血脂水平㊂s d L D L-C属于L D L-C亚型,多项研究显示s d L D L-C水平与C H D发病风险密切相关[10-12],其作为预测和评估C H D发病风险的指标比L D L-C更敏感,已被美国国家胆固醇教育计划成人治疗组列入新发现的主要心血管疾病危险因素之一㊂目前,越来越多的实验室已经开展了s d L D L-C检测,过氧化物酶法具有操作简便㊁检测时间短㊁易于大批量样本检测等优点,已成为常用的检测方法,然而基于该方法的各试剂厂家提供的s d L D L-C参考区间存在差异,且厂家建立参考区间时纳入的研究对象受地域限制,不具有代表性㊂为了更好地发挥s d L D L-C的临床应用价值,建立适合本地区的s d L D L-C参考区间尤为重要㊂本研究结果显示,血清s d L D L-C活性值在郑州地区表观健康人群中呈正态分布,男性整体高于女性,女性不同年龄段间血清s d L D L-C活性值差异无统计学意义(P>0.05),男性18~<50岁的3个年龄组间s d L D L-C活性值差异无统计学意义(P>0.05),但显著高于ȡ50岁各年龄组s d L D L-C活性值,提示男性需按照18~<50岁和ȡ50岁分段设置参考区间㊂根据数据分析结果,本研究初步建立了郑州地区表观健康人群血清s d L D L-C活性值参考区间,并参考W S/T402-2012文件进行了参考区间的验证㊂我国目前已建立s d L D L-C活性值参考区间的地区有成都[13]㊁兰州[14]和呼和浩特[15],其研究结果均表明s d L D L-C活性值在人群中的分布具有性别差异,男性整体均值高于女性,这与本研究结果一致㊂然而s d L D L-C活性值在表观健康人群中的分布状态以及在各年龄段间的差异性表现与上述地区存在差异,这可能与地域㊁气候环境及生活习惯等因素有关,也可能与纳入研究的样本量有关,后续笔者将进一步扩大样本量进行验证,同时本研究结果也有待得到本地区其他医疗机构的验证㊂综上所述,本研究初步建立和验证了郑州地区表观健康人群血清s d L D L-C活性值参考区间,有助于筛查心脑血管疾病高风险人群,便于临床采取有效的干预手段来降低心脑血管疾病的发生率和病死率㊂参考文献[1]L U X,L I U Z,C U I Q,e t a l.A p o l y g e n i c r i s k s c o r e i m-p r o v e s r i s k s t r a t i f i c a t i o n o f c o r o n a r y a r t e r y d i s e a s e:a l a r g e-s c a l e p r o s p e c t i v e C h i n e s e c o h o r t s t u d y[J].E u rH e a r t J,2022,43(18):1702-1711.[2]台润东,黄淑田,马娇婷,等.小而密低密度脂蛋白与冠状动脉粥样硬化相关性研究进展[J].中西医结合心脑血管病杂志,2021,19(11):1841-1843.[3]I S H I I J,K A S H I W A B A R A K,O Z A K I Y,e t a l.S m a l l d e n s el o w-d e n s i t y l i p o p r o t e i n c h o l e s t e r o l a n d c a r d i o v a s c u l a r r i s k i n s t a t i n-t r e a t e d p a t i e n t s w i t h c o r o n a r y a r t e r y d i s e a s e[J].J A t h-e r o s c l e r T h r o m b,2022,29(10):1458-1474.[4]庞晓彬.血清小而密低密度脂蛋白胆固醇表达水平与冠心病的关系分析[J/C D].中西医结合心血管病电子杂志, 2020,8(7):66-67.[5]N a t i o n a l C o mm i t t e e f o r C l i n i c a l L a b o r a t o r y S t a n d a r d s.H o w t o d e f i n e a n d d e t e r m i n e r e f e r e n c e i n t e r v a l s i n t h ec l i n i c a l l a b o r a t o r y,a p p r o v ed g u i de l i n e:C28-A2[S].W a y n e,P A,U S A:N C C L S,2000.(下转第15页)㊃01㊃检验医学与临床2024年1月第21卷第1期 L a b M e d C l i n,J a n u a r y2024,V o l.21,N o.1[4]F L O R I O W,MO R I C I P,G H E L A R D I E,e t a l.R e c e n t a d-v a n c e s i n t h e m i c r o b i o l o g i c a l d i a g n o s i s o f b l o o d s t r e a m i n-f e c t i o n s[J].C r i t R e v M i c r o b i o l,2018,44(3):351-370.[5]S O N G Y,G Y A R MA T I P.O p t i m i z e d d e t e c t i o n o f b a c t e r i ai n b l o o d s t r e a m i n f e c t i o n s[J].P L o S O n e,2019,14(6): e0219086.[6]E V A N S L,R HO D E S A,A L HA Z Z A N I W,e t a l.S u r v i-v i n g s e p s i s c a m p a i g n:i n t e r n a t i o n a l g u i d e l i n e s f o r m a n a g e-m e n t o f s e p s i s a n d s e p t i c s h o c k2021[J].I n t e n s C a r e M e d,2021,47(11):1181-1247.[7]L O O N E N A J,D E J A G E R C P,T O S S E R AM S J,e t a l.B i o m a r k e r s a n d m o l e c u l a r a n a l y s i s t o i m p r o v e b l o o d-s t r e a m i n f e c t i o n d i a g n o s t i c s i n a n e m e r g e n c y c a r e u n i t [J].P L o S O n e,2014,9(1):e87315.[8]包相华,刘文文,邹茹,等.革兰阴性菌血流感染脓毒症患者炎性因子和免疫功能及其诊断价值[J].中华医院感染学杂志,2023,33(12):1795-1799.[9]上海市微生物学会临床微生物学专业委员会,上海市医学会检验医学专科分会,上海市医学会危重病专科分会.血流感染临床检验路径专家共识[J].中华传染病杂志, 2022,40(8):457-475.[10]HAMA D E B,HU A N G D T.P r o c a l c i t o n i n:w h e r e a r e w en o w[J].C r i t C a r e C l i n,2020,36(1):23-40. [11]X U H G,T I A N M,P A N S Y.C l i n i c a l u t i l i t y o f p r o c a l c i-t o n i n a n d i t s a s s o c i a t i o n w i t h p a t h o g e n i c m i c r o o r g a n i s m s [J].C r i t R e v C l i n L a b S c i,2022,59(2):93-111. [12]陈凤萍,刘玲,赵友云.降钙素原在革兰阴性菌感染败血症中的早期诊断价值[J].国际检验医学杂志,2020,41(9):1112-1115.[13]Z HA N G Y,L A M,S U N J,e t a l.D i a g n o s t i c v a l u e a n dp r o g n o s t i c s i g n i f i c a n c e o f p r o c a l c i t o n i n c o m b i n e d w i t h c-r e a c t i v e p r o t e i n i n p a t i e n t s w i t h b a c t e r i a l b l o o d s t r e a m i n-f e c t i o n[J].C o m p u t M a t h M e t h o d s M e d,2022,2022:6989229.[14]陈曦,崔丽丽,张然,等.C反应蛋白检测与应用的研究进展[J].检验医学与临床,2023,20(8):1139-1142. [15]K UM A R A S A M Y C,S A B A R I M U R U G A N S,M A D U R A N-T A K A M R M,e t a l.P r o g n o s t i c s i g n i f i c a n c e o f b l o o d i n f l a m-m a t o r y b i o m a r k e r s N L R,P L R,a n d L M R i n c a n c e r:a p r o t o-c o l f o r s y s t e m a t i c r e v i e w a n d m e t a-a n a l y s i s[J].M e d i c i n e, 2019,98(24):e14834.[16]J I A N G J,L I U R,Y U X,e t a l.T h e n e u t r o p h i l-l y m p h o c y t ec o u n t r a t i o a s ad i a g n o s t i c m a r ke rf o r b a c t e r a e m i a:a s y s-t e m a t i c r e v i e w a n d m e t a-a n a l y s i s[J].A m J E m e rg M e d, 2019,37(8):1482-1489.[17]刘霞,陈慧敏,朱文俊,等.血清P C T㊁C R P及中性粒细胞百分比辅助诊断血流感染的临床价值[J].中华医院感染学杂志,2022,32(16):2416-2419.[18]孙天文,杨柯.血清P C T㊁C R P及N L R联合检测在细菌性血流感染诊断中应用研究[J].罕少疾病杂志,2023, 30(1):101-102.(收稿日期:2023-06-20修回日期:2023-10-16)(上接第10页)[6]中华人民共和国卫生部.临床实验室检验项目参考区间的制定:W S/T402-2012[S].北京:中华人民共和国卫生部,2012.[7]MA C H F,B A I G E N T C,C A T A P A N O A L,e t a l.2019E S C/E A S g u i d e l i n e s f o r t h e m a n a g e m e n t o f d y s l i p i d a e-m i a s:l i p i d m o d i f i c a t i o n t o r e d u c e c a r d i o v a s c u l a r r i s k[J].A t h e r o s c l e r o s i s,2020,41(1):111-188.[8]R O C HA V Z,S A N T O S R D.B a s e l i n e L D L-C l e v e l s a n d r i s k o f c a r d i o v a s c u l a r e v e n t s:i s t h e r e a n y r o o m f o r q u e s-t i o n s[J].I n t J C a r d i o l,2019,286:166-167.[9]沙琬婧,柳雨亭,瞿惠燕,等.小而密低密度脂蛋白在冠心病中西医治疗中的研究进展[J].中西医结合心脑血管病杂志,2021,19(16):2768-2770.[10]HO O G E V E E N R C,G A U B A T Z J W,S U N W,e t a l.S m a l l d e n s e l o w-d e n s i t y l i p o p r o t e i n-c h o l e s t e r o l c o n c e n-t r a t i o n s p r e d i c t r i s k f o r c o r o n a r y h e a r t d i s e a s e:t h e A t h-e r o s c l e r o s i s R i s k I n C o mm u n i t i e s(A R I C)s t u d y[J].A r-t e r i o s c l e r T h r o m b V a s c B i o l,2014,34(5):1069-1077.[11]H I G A S H I O K A M,S A K A T A S,HO N D A T,e t a l.S m a l ld e n s e l o w-d e n s i t y l i p o p r o t e i n c h o l e s t e r o l a n d t h e r i s k o f c o r o n a r y h e a r t d i s e a s e i n a j a p a n e s e c o mm u n i t y[J].JA t h e r o s c l e r T h r o m b,2020,27(7):669-682.[12]Q I Y,L I U J,WA N G W,e t a l.H i g h s d L D L c h o l e s t e r o lc a n b e u s ed t o re c l a s s if y i n d i v i d u a l s w i t h l o w c a r d i o v a s c u-l a r r i s k f o r e a r l y i n t e r v e n t i o n:f i n d i ng s f r o m th e C hi n e s e m u l t i-p r o v i n c i a l c o h o r t s t u d y[J].J A t h e r o s c l e r T h r o m b, 2020,27(7):695-710.[13]李静,全晖,曾志荣,等.成都地区表观健康者小而密低密度脂蛋白胆固醇参考区间建立[J].检验医学,2021,36(6):609-614.[14]吴燕,何津春,朱槿宏,等.兰州市健康人群小而密低密度脂蛋白胆固醇生物参考区间的建立[J].国际检验医学杂志,2019,40(13):1619-1621.[15]王美英,韩艳秋.酶法检测呼和浩特地区蒙汉人群血清s d L D L-C水平的调查[J].标记免疫分析与临床,2018,25(2):195-198.(收稿日期:2023-04-11修回日期:2023-10-30)㊃51㊃检验医学与临床2024年1月第21卷第1期 L a b M e d C l i n,J a n u a r y2024,V o l.21,N o.1。

参考区间及临界值如何验证或建立 PPT

参考区间： CNAS认可的要求
1. 实验室应规定生物参考区间或临床决定值，将此规定的依据文件化，并通知用户。
2. 当特定的生物参考区间或决定值不再适用服务的人群时，应进行适宜的改变并通知用户。
3. 如果改变检验程序或检验前程序，实验室应评审相关的参考区间和临床决定值（适用时）。
参考区间的验证和建立
数据分析：验证
≤2个结果超出待验证区间
Pass
≤2个结果超出待验证区间
Pass
20个结果
3个或4个结果超出待验证区间
20个结果
≧3个结果超出待验证区间
≥5个结果超出待验证区间
检查分析程序，参考人群差异，自行建立
《生物参考区间和临床决定值评价程序》（PKUPHL-2-PF-033-V2）
17
前期准备工作： 1. 新仪器新项目：仪器校准、人员培训、熟悉仪器操作； 2. 对检验程序进行验证：包括精密度、正确度、定量限、
分析测量范围、干扰等； 3. 制定参考区间验证方案和计划； 4. 提交伦理审查申请。
《生物参考区间和临床决定值评价程序》（PKUPHL-2-PF-033-V2）
11
参考区间的验证和建立
参考区间的验证和建立
数据分析：首先检查看有无离群值，即最大值和次大值或次小
值和最小值的差值是否超过1/3极差，如有离群值，须先去除离群值，再选择参考个体，补齐20例（验证）或120 例（建立），且无离群值。
《生物参考区间和临床决定值评价程序》（PKUPHL-2-PF-033-V2）
16
参考区间的验证和建立
大家应该也有点累了，稍作休息
大家有疑问的，可以询问和交流
参考区间：CAP认可的要求

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

? 急慢性感染 ? 动脉粥样硬化、血管病 ? 烧伤和肌肉创伤 ? 心脏病、高血压 ? 慢性肾病 ? 糖尿病 ? 肝胆管疾病 ? 自身免疫性疾病 ? 过敏性疾病
? 甲亢或甲减疾病 ? 血液系统疾病 ? 呼吸系统疾病 ? 吸烟量饮酒量 ? 2周内服用药物 ? 肥胖： BMI≥28 ? 怀孕或产后不足 1年 ? 6个月内做过手术 ? 4个月内献血或输血
募集人群来源分布知情同意：告知、自愿筛选标准：问卷、体检、实验室
标本采集
分析前质量控制，影响因素，标本类型
标本检测
性能验证、分析中质量控制
统计分析
离群值、建立参考区间、判断分组
参考区间验证
临床可接受
8
Your To三pi、c G参o考es区H间er的e建立方法
参考人群募集
? 参考人群来源：城市、农村、体检中心；性别比例；年龄分布 ? 样本量：每个组别至少120人，2倍于目标人群
济存在差异，生物学变异等存在决定不同国家和地区需建立符合本地人群特征的参考区间
?方法学和检测技术不断更新，人民生活水平提高，许多项
目参考区间不再适用
6
Your Top三ic、G参o考es区H间er的e 建立方法
? 2008 CLIS C28-A3 文件《 How to define and determine
血红蛋白(Hb)
红细胞比容(Hct)
平均红细胞容积(MCV) 平均红细胞血红蛋白量(MCH)
单位 ×109/L ×109/L ×109/L ×109/L ×109/L ×109/L
％％％％％
×1012/L
g/L
L/L
fl pg
性别
男/女男/女男/女男/女男/女男/女男/女男/女男/女男/女男/女
准，检测值可互换 ——多中心共同参考区间成为可能 ? 通用参考区间：人群、可比 ? 室间质评、检验标准化、医改检验结果一致性工作推进
，提供良好基础和技术保障
22
本标准参考区间基于中国人群多中心研究结果，检验结果可溯源至国际公认参考方法。
Your To三pi、c G参o考es区H间er的e建立方法
多中心实验室联合建立参考区间的趋势
男女男女男女男/女
男/女
参考区间
3.5～9.5 1.8～6.3 1.1～3.2 0.02～0.52 0～0.06 0.1～0.6 40～75 20～50 0.4～8.0
0～1 3～10 4.3～5.8 3.8～5.1 130～175 115～150 0.40～0.50 0.35～0.45 82～100
13
Your To三pi、c G参o考es区H间er的e建立方法
参考人群选择 ——实验室检查
? 尿检：正常 ? 免疫学排除：HBsAg 、HCV-Ab 、HIV-Ab ? 生化学排除：血糖、血脂等
14
Your To三pi、c G参o考es区H间er的e建立方法
标本采集 ——分析前质量控制
个体准备
Hale Waihona Puke 24Your To三pi、c G参o考es区H间er的e建立方法
中国成人血细胞分析项目的参考区间（仪器法）
项目白细胞(WBC) 中性粒细胞绝对值(Neut#) 淋巴细胞绝对值(Lymph#) 嗜酸性粒细胞绝对值(Eos#) 嗜碱性粒细胞绝对值(Baso#) 单核细胞绝对值(Mono#) 中性粒细胞百分数(Neut%) 淋巴细胞百分数(Lymph%) 嗜酸性粒细胞百分数(Eos%) 嗜碱性粒细胞百分数(Baso%) 单核细胞百分数(Mono%) 红细胞(RBC)
? 医学绝对水平
2
Your Topic一G、o参es考H区er间e的概念
? 参考个体 ( reference individuals ) 按明确标准选择的用作检验对象的个体。注：通常是符合特定标准的健康个体。 ? 参考人群 ( reference population ) 由所有参考个体所组成的群体。注：通常参考人群的个体数是未知的，因此参考人群是一个推想的实体。 ? 参考样本组 ( reference sample group ) 从参考人群中选择的用以代表参考人群的足够数量的个体。 ? 参考值 ( reference values ) 通过对参考个体某一特定量进行观察或测量而得到的值（检验结果）。注：参考值从参考样本组中获得。
? 抽样方法：多级随机整群抽样原则
城市、农村社区：分层（经济状况和卫生条件）
逐级随机抽取下一级（区、县）
体检中心：分层（职业）
单位
街道、乡社区、村
个体（性别 /年龄比例）
9
Your To三pi、c G参o考es区H间er的e建立方法
参考人群选择
? 何谓健康？相对、难定义 ? 主观感觉？ ? 潜在/亚临床疾病 ? 界定方法：疾病？健康生活方式？自我感觉（农村）？影像学（脂肪肝）？
? 正确度：使用新鲜冰冻血清及 NIST标物，重复测定 5次，连续2天；计算偏倚 (bias) 与1/2TEa 比较，超出，查找原因（试剂、校准、参数、仪器等）
? 室内质控：每天不同时段分析质控品 5次，连续 4天，计算质控品的均值和标准差，质控图，符合质控规则
16
Your To三pi、c G参o考es区H间er的e建立方法
Your To三pi、c G参o考es区H间er的e建立方法
中国成人肝脏功能项目和电解质项目的参考区间
项目
血清丙氨酸氨基转移酶（ALT ）
血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)
血清 γ -谷氨酰转移酶 (GGT)
血清碱性磷酸酶 (ALP)
单位 U/L U/L U/L U/L
血清总蛋白(TP) 血清白蛋白 (ALB) 血清球蛋白(GLB) 白蛋白/球蛋白(A/G) 血清钾离子(K＋) 血清钠离子(Na＋) 血清氯离子(Cl－)
18
Your To三pi、c G参o考es区H间er的e建立方法
统计分析 ——参考区间计算
? 建立参考区间：分布判断参考值95%的分布范围 x-1.96s ，x+1.96s P2.5—P97.5
19
Your To三pi、c G参o考es区H间er的e建立方法
统计分析 ——分组判断
? Z检验（正态分布，或接近正态分布）
妇女4.8-6.2% ；D-D妊娠妇女高；甲状腺激素不同孕期参考区间） ? 困难更大：人群募集、标本采集、情绪饮食控制
21
Your To三pi、c G参o考es区H间er的e建立方法
多中心实验室联合建立参考区间的趋势
? 工程浩大：数量、质量 ? 各医院参考区间不同：医生、患者、医疗资源 ? CLSI ：相同项目不用试剂仪器厂家、实验室参照相同标
reference intervals in the clinical laboratory —— Approved guidelines 》
? 2012 我国常用生化、血液项目参考区间建立和验证相关行
业标准起草
7
Your To三pi、c G参o考es区H间er的e建立方法
参考人群募集参考人群选择
生物参考区间的建立和验证
1
Your Topi一c 、Go参e考s H区e间re的概念
? 正常值 ? 参考范围 ? Expected values ? 参考区间（reference intervals ）
两参考限之间包括两参考限的区间。注：参考区间是指从参考下限到参考上限的值的区间，通常是参考分布中间95%区间，在某些情况下只有一个参考限具有临床意义，通常是参考上限，这时的参考区间可以是0到参考上限。
标本检测 ——血液项目质量保证
? 精密度：使用 3个浓度全血质控品，重复测定 4次/天，测定 5 天；计算 CV值（CLSI EP-15 ）
? 正确度： 5支新鲜血标本（ 8h内），每份新鲜血标本测定 2 次，计算 bias
? 室内质控： 3个浓度，连续 3天不同时间段测定，计算 10-20 次检验结果均值，至少用 13s，22s规则
g/L g/L g/L
mmol/L mmol/L mmol/L
性别
男女男女男女男女
男/女男/女男/女男/女男/女男/女男/女
参考区间
9～50 7～40 15～40 13～35 10～60 7～45 45～125 20-49岁：35～100 50-79岁：50～135 65～85 40～55 20～40 1.2～2.4 3.5～5.3 137～147 99～110
3
Your Topic一G、oe参s考H区er间e 的概念
? 参考分布 ( reference distribution ) 参考值的分布。注：参考人群的推想分布可用参考样本组的参考分布及合适的统计方法进行试验；参考人群推想分布的参数可用参考样本组的参考分布及合适的统计方法来估计。
? 参考限 ( reference limit ) 一个来自参考分布用于分类目的的值。注：参考限通常是使规定部分的参考值分别小于等于或大于等于的下侧或上侧限值，参考限将参考值分类；参考值可能与其他类型的决定限不同。
4
Your Topic一G、o参es考H区er间e 的概念
参考个体参考人群参考样本组参考值参考分布参考限参考区间
Comprise a From which is selected a On which are determined On which is observed a From which are calculated That may define
饮食空腹时间药物、烟、酒
运动应激
标本采集
环境时间体位标本类型技术
标本处理
运输凝块血清/血浆分离储存据检测时间