拟南芥种植及处理基本方法
绿萝栽种方法
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绿萝栽种方法
绿萝(又名拟南芥)是一种热带植物,生长在地表上会有不同的形状和色泽,一旦放在室内,它就会完美展现出它的美丽。
绿萝的种植是很容易的,下面就介绍一下绿萝的栽种方法:
首先,先在室内准备绿萝的穴盆,可以使用旧的或者新的穴盆,里面应该填充一定量的泥土和有机肥料,以保证穴盆里的土壤质量。
然后,将绿萝的苗木放入穴盆,使表面排列在搅拌好后的土壤上,把多余的土壤补充到穴盆中,双手轻轻按压平坦即可,避免了尖刺,后期浇水时能够更轻松些。
最后,完成了穴盆的装填,绿萝会慢慢吸收养分,准备为它浇水,一般使用温开水适量和每次浇水的时间控制在5-10分钟内,也可以在短时间后补充少量水分,保证小苗身上的水分稳定。
在季节更替之前,每隔一段时间添加有机肥料及腐熟的肥料到穴盆,以增加养分,使植物更加健康鲜艳,同时需要注意穴盆土壤千万不要过湿以及植物两边不要暴晒,长时间避免曝晒,保持穴盆温暖干燥,每隔一段时间对穴盆进行除虫,以保护植物的安全。
绿萝是应季节温度变化而发生变化的植物,如果是冬季,它新的叶片会慢慢地休眠,如果是夏季,则会有繁盛的叶片,所以每一季顺应环境的变化,及时调整浇水的频率,才能让绿萝生长得茁壮。
通过以上简单的步骤就可以轻松的栽种绿萝。
拟南芥盆栽方案
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拟南芥盆栽方案拟南芥(学名:Arabidopsis thaliana)是一种小型的一年生植物,因其生命周期短、易于培养和遗传实验的可行性,被广泛应用于植物科学研究中。
在本文中,我们将提供一个拟南芥盆栽方案,以帮助那些对这一植物进行自家种植的人。
1. 材料准备- 拟南芥种子:可在植物学实验室、种子公司或在线购买。
- 盆:选择适宜大小的盆,保证拟南芥根系能够充分扩展。
- 泥土:使用适宜的培养土,可在花草市场或园艺店购买。
- 平底盘或托盘:用于放置盆,以避免水滴在室内滴落。
2. 盆栽步骤2.1 准备盆土选择质地疏松、排水良好的培养土。
可以将培养土轻轻湿润,但避免过于湿润,以免引发根部腐烂。
2.2 播种将拟南芥种子均匀撒在培养土表面上,并轻轻压实,不要完全覆盖种子。
拟南芥种子较小,所以要小心操作,以确保均匀分散。
2.3 浇水使用喷壶或水壶从顶部轻轻喷洒水,保持培养土湿润。
避免使用喷头过大或水流过大的工具,以免种子被冲走。
2.4 光照与温度控制拟南芥适宜在温度适宜、充足的光照下生长。
将盆栽置于明亮的窗户旁或人工照明设备下。
室温保持在20-25摄氏度之间。
2.5 生长环境调节拟南芥对于光照的要求较高,因此要经常转动盆栽,以保证植株各个方向都能得到充足的光照。
如果环境光线不足,可以补充使用植物专用灯。
2.6 浇水与施肥保持培养土湿润,但避免过度浇水,以免引发根系病害。
约每周浇水一次,根据环境湿度和季节的变化做适当调整。
在生长过程中可以适时施加适量的植物营养液,以促进拟南芥的生长和发育。
3. 生长管理3.1 害虫防治定期检查拟南芥植株,如发现害虫如蚜虫、螨虫等,可以使用适量的杀虫剂进行处理,但要遵循产品说明。
3.2 避免拥挤随着拟南芥生长,植株之间可能会产生拥挤。
在植株茁壮成长后,适当间隔并摘除较弱的植株,以保证光照和营养的充足供给。
3.3 测量和记录生长数据观察拟南芥的生长情况,使用尺子或其它测量工具记录植株的高度、叶片数量等数据,以便后续分析比较。
拟南芥种植方法.doc
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培养基上点种子:1.种子处理1.1 种子消毒处理在培养基中点样前,必须对种子进行消毒,防止感菌,具体方法为:先将种子倒在干净的纸上,挑去大的杂质,再将种子倒入EP管中,加入1mL70%酒精,振荡10min,将种子放在超净台中吹干。
1.2 点样将消毒处理后的种子,可以利用牙签点到培养基上,每次仅点一粒种子,根据培养皿的大小,确定一个里面能够点多少个种子,每个90mm培养皿上大约种30粒种子,防止植株长大后影响根与子叶的发育。
1.3 春化种子点样完毕后,将培养基密封,置于4℃冰箱里放置72h后,放回温室。
土培法:1.种种子前,要将营养土用自来水混匀后,121℃灭菌30min,待土冷却后,装入种植拟南芥的方盒中,再将方盒放入红色托盘中。
2.将要点的种子平铺在称量纸上,用牙签蘸取一粒种子点在营养土上,每点一个小盒时都用牙签做标记,以免遗种某个盒子。
(每个小盒子种5粒种子,每个大方盒子种9粒种子)3.将点了拟南芥种子的托盘置于22℃温室,并用一个干净的托盘盖在上面,大约两天后就可以打开上面的托盘,待植物长出4片叶子时,可以根据自己的实验需求对植物的幼苗进行取舍。
4.植株生长条件的控制幼苗移植后将花盆置于温室内,保证温室温度恒定在22℃,空气湿度70—80%,光照强度100—150μmol/m2/s,每天浇两次纯净水,上午9点左右一次,下午5点左右一次;一周浇一次营养液(1平匙溶于1L水中),营养液要灌在盆底。
浇水注意事项:1)水不可以浇的过多或过少,用手捏起一些土能挤出水来说明就有点太湿;2)水要浇均匀,托盘四个角的方向如果喷壶喷不到,可以用挤瓶均匀地喷一些水;3)用喷壶浇水时,喷壶的水柱不可以太大,以免把植物连根拔起;4)当植株出现花芽时,一定要保证水分的供应,促进果实的发育。
当植株结有豆荚时,可以适当的减少供水量,每两三天浇一次水便可,以利于种子的成熟。
开花后的植物不能再用喷壶浇水,要从盆底灌水,但不可以一次性灌太多水;5)在盆底灌水后,待植物吸收完水后,可以将盆底多余的水分倒出来;6)拟南芥受到胁迫判断标准:叶柄发紫,叶片发黄,开花期提前等;7)如果做生理实验,植物一旦受到胁迫,需要把植物丢弃,重新种植,以免实验数据不准确。
拟南芥植物组织培养
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拟南芥植物组织培养 WTD standardization office【WTD 5AB- WTDK 08- WTD 2C】拟南芥组织培养一、种子消毒:方法一:将拟南芥种子置于1 .5 ml eppendorf 管(微量离心管)中,加入1 ml 蒸馏水,4C春化3 d,70 %(v/v )乙醇1mi n、7 %(v/v )次氯酸钠10 mi n 浸泡消毒,并用无菌水冲洗5 次。
方法二:在超净工作台内,用无菌蒸馏水浸泡1 min,然后用80%乙醇消毒90s,最后用无菌蒸馏水冲洗3~5次备用。
消毒完毕的种子可以用200ul的tips吸去洗涤液,然后在超净工作台上挥发掉残余水分、洗涤液。
方法三、取野生型拟南芥种子放人离心管内,75%乙醇清洗后,无菌蒸馏水清洗1—2次,转入无菌离心管;5%次氯酸钠溶液浸泡5—6 min,用无菌蒸馏水清洗3~4次,加入1 ml无菌水,用移液枪接种。
二、选用的培养基选用1/2MS培养基对种子进行培养。
(MS和1/2MS都可以,1/2MS就是大量元素减半,其他东西和ms培养基是一样的量。
糖可以加,会长得比较好,但是也很容易污染。
如果在平板上要生长时间比较长,需要做一些实验的,比如根的发育,最好不要加。
)也可以用MS+30 g/L蔗糖的固体培养基。
(我想两种培养基都接种上,比作对比确定好坏)。
MS培养基配料表:三:接种方法拟南芥种子消毒后,用移液枪吸取拟南芥种子和水的混合物,均匀地在MS 生长培养基的培养皿平板上滴落,并使之形成两条平行的直线。
(如不行,可适当添加琼脂)。
四、培养得无菌苗接种后置于光照培养箱(型号:GXZ.500C;培养光照条件为16小时光照,8小时黑暗,培养温度为22℃中竖直培养。
3天后即可取材用于器官离体再生实验。
萌发5天后,在超净工作台中,用镊子将苗移栽到装有1/2 MS培养基的50ml三角瓶中(每瓶4--6棵,视情况而定),于短日照条件下培养30天左右获得无菌苗。
拟南芥植物组织培养
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拟南芥植物组织培养 WTD standardization office【WTD 5AB- WTDK 08- WTD 2C】拟南芥组织培养一、种子消毒:方法一:将拟南芥种子置于1 .5 ml eppendorf 管(微量离心管)中,加入1 ml 蒸馏水,4C春化3 d,70 %(v/v )乙醇1mi n、7 %(v/v )次氯酸钠10 mi n 浸泡消毒,并用无菌水冲洗5 次。
方法二:在超净工作台内,用无菌蒸馏水浸泡1 min,然后用80%乙醇消毒90s,最后用无菌蒸馏水冲洗3~5次备用。
消毒完毕的种子可以用200ul的tips吸去洗涤液,然后在超净工作台上挥发掉残余水分、洗涤液。
方法三、取野生型拟南芥种子放人离心管内,75%乙醇清洗后,无菌蒸馏水清洗1—2次,转入无菌离心管;5%次氯酸钠溶液浸泡5—6 min,用无菌蒸馏水清洗3~4次,加入1 ml无菌水,用移液枪接种。
二、选用的培养基选用1/2MS培养基对种子进行培养。
(MS和1/2MS都可以,1/2MS就是大量元素减半,其他东西和ms培养基是一样的量。
糖可以加,会长得比较好,但是也很容易污染。
如果在平板上要生长时间比较长,需要做一些实验的,比如根的发育,最好不要加。
)也可以用MS+30 g/L蔗糖的固体培养基。
(我想两种培养基都接种上,比作对比确定好坏)。
MS培养基配料表:三:接种方法拟南芥种子消毒后,用移液枪吸取拟南芥种子和水的混合物,均匀地在MS 生长培养基的培养皿平板上滴落,并使之形成两条平行的直线。
(如不行,可适当添加琼脂)。
四、培养得无菌苗接种后置于光照培养箱(型号:GXZ.500C;培养光照条件为16小时光照,8小时黑暗,培养温度为22℃中竖直培养。
3天后即可取材用于器官离体再生实验。
萌发5天后,在超净工作台中,用镊子将苗移栽到装有1/2 MS培养基的50ml三角瓶中(每瓶4--6棵,视情况而定),于短日照条件下培养30天左右获得无菌苗。
拟南芥种植方法
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培养基上点种子:1.种子处理1.1种子消毒处理在培养基中点样前,必须对种子进行消毒,防止感菌,具体方法为:先将种子倒在干净的纸上,挑去大的杂质,再将种子倒入EP管中,加入1mL70%酒精,振荡10min,将种子放在超净台中吹干。
1.2点样将消毒处理后的种子,可以利用牙签点到培养基上,每次仅点一粒种子,根据培养皿的大小,确定一个里面能够点多少个种子,每个90mm培养皿上大约种30粒种子,防止植株长大后影响根与子叶的发育。
1.3春化种子点样完毕后,将培养基密封,置于4℃冰箱里放置72h后,放回温室。
土培法:1.种种子前,要将营养土用自来水混匀后,121℃灭菌30min,待土冷却后,装入种植拟南芥的方盒中,再将方盒放入红色托盘中。
2.将要点的种子平铺在称量纸上,用牙签蘸取一粒种子点在营养土上,每点一个小盒时都用牙签做标记,以免遗种某个盒子。
(每个小盒子种5粒种子,每个大方盒子种9粒种子)3.将点了拟南芥种子的托盘置于22℃温室,并用一个干净的托盘盖在上面,大约两天后就可以打开上面的托盘,待植物长出4片叶子时,可以根据自己的实验需求对植物的幼苗进行取舍。
4.植株生长条件的控制幼苗移植后将花盆置于温室内,保证温室温度恒定在22℃,空气湿度70—80%,光照强度100—150μmol/m2/s,每天浇两次纯净水,上午9点左右一次,下午5点左右一次;一周浇一次营养液(1平匙溶于1L水中),营养液要灌在盆底。
浇水注意事项:1)水不可以浇的过多或过少,用手捏起一些土能挤出水来说明就有点太湿;2)水要浇均匀,托盘四个角的方向如果喷壶喷不到,可以用挤瓶均匀地喷一些水;3)用喷壶浇水时,喷壶的水柱不可以太大,以免把植物连根拔起;4)当植株出现花芽时,一定要保证水分的供应,促进果实的发育。
当植株结有豆荚时,可以适当的减少供水量,每两三天浇一次水便可,以利于种子的成熟。
开花后的植物不能再用喷壶浇水,要从盆底灌水,但不可以一次性灌太多水;5)在盆底灌水后,待植物吸收完水后,可以将盆底多余的水分倒出来;6)拟南芥受到胁迫判断标准:叶柄发紫,叶片发黄,开花期提前等;7)如果做生理实验,植物一旦受到胁迫,需要把植物丢弃,重新种植,以免实验数据不准确。
拟南芥种植方法
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培养基上点种子:1.种子处理1.1 种子消毒处理在培养基中点样前,必须对种子进行消毒,防止感菌,具体方法为:先将种子倒在干净的纸上,挑去大的杂质,再将种子倒入EP管中,加入1mL70%酒精,振荡10min,将种子放在超净台中吹干。
1.2 点样将消毒处理后的种子,可以利用牙签点到培养基上,每次仅点一粒种子,根据培养皿的大小,确定一个里面能够点多少个种子,每个90mm培养皿上大约种30粒种子,防止植株长大后影响根与子叶的发育。
1.3 春化种子点样完毕后,将培养基密封,置于4℃冰箱里放置72h后,放回温室。
土培法:1.种种子前,要将营养土用自来水混匀后,121℃灭菌30min,待土冷却后,装入种植拟南芥的方盒中,再将方盒放入红色托盘中。
2.将要点的种子平铺在称量纸上,用牙签蘸取一粒种子点在营养土上,每点一个小盒时都用牙签做标记,以免遗种某个盒子。
(每个小盒子种5粒种子,每个大方盒子种9粒种子)3.将点了拟南芥种子的托盘置于22℃温室,并用一个干净的托盘盖在上面,大约两天后就可以打开上面的托盘,待植物长出4片叶子时,可以根据自己的实验需求对植物的幼苗进行取舍。
4.植株生长条件的控制幼苗移植后将花盆置于温室内,保证温室温度恒定在22℃,空气湿度70—80%,光照强度100—150μmol/m2/s,每天浇两次纯净水,上午9点左右一次,下午5点左右一次;一周浇一次营养液(1平匙溶于1L水中),营养液要灌在盆底。
浇水注意事项:1)水不可以浇的过多或过少,用手捏起一些土能挤出水来说明就有点太湿;2)水要浇均匀,托盘四个角的方向如果喷壶喷不到,可以用挤瓶均匀地喷一些水;3)用喷壶浇水时,喷壶的水柱不可以太大,以免把植物连根拔起;4)当植株出现花芽时,一定要保证水分的供应,促进果实的发育。
当植株结有豆荚时,可以适当的减少供水量,每两三天浇一次水便可,以利于种子的成熟。
开花后的植物不能再用喷壶浇水,要从盆底灌水,但不可以一次性灌太多水;5)在盆底灌水后,待植物吸收完水后,可以将盆底多余的水分倒出来;6)拟南芥受到胁迫判断标准:叶柄发紫,叶片发黄,开花期提前等;7)如果做生理实验,植物一旦受到胁迫,需要把植物丢弃,重新种植,以免实验数据不准确。
拟南芥种植
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拟南芥种植方法
一.拟南芥生长条件
拟南芥生长的适宜温度白天为22-24℃左右,夜温最好比日温低2℃。
拟南芥在日照长于12小时下才会开花,一般拟南芥生长室的日照长度定于14-16h为佳,土壤湿度70%—80%,营养土:蛭石=1:1,3—4天浇一次营养液,从底盘浸入。
二.种子处理
1.取适量种子置于标记好的1.5ml离心管中,加入1 ml 70%乙醇轻微振1 min;
2.去乙醇,加入1 ml体积分数为10%的NaClO (次氯酸钠), 消毒5~10 min;
3.吸去NaClO, 用无菌水冲洗种子5次后, 加入600μl无菌水;
4.取适量拟南芥种子至10 ml 离心管中,加入0.05%的琼脂悬浮,置于4℃冰箱低温春化处理2-3 天。
三.土壤培养
将已春化处理的拟南芥种子,用消过毒的牙签或者移液枪将种子,点播在土壤中,一盆2—3颗即可,将花盆放入有水的底盘中,框中的水就会通过花盆底部的孔渗上来,待花盆中的基质湿透后即可点播。
用保鲜膜覆盖1-2天后揭膜,如果苗很弱,则在此基础上还需多覆盖1天。
当到4叶期时,要适当移苗,每盆一株。
小心轻轻用镊子拨开周围土壤,连根取出小苗(注意不要伤害根部)。
苗期不使用营养液,移栽后3-4天使用一次营养液,期间视情况浇水,但不要在底盘中始终保持水层。
在开始收籽期,不再需要过多的水分,可保持底盘干燥,此时每隔7-10天加一次水即可。
在种荚变黄,变干时可以收籽。
将种子抖落在纸上,用金属滤网过一下以除去杂质,将种子装入写了标记的小纸袋中,放于干燥的环境中让种子进一步干燥后,封存于1.5ml试管中,切记越干越好,长期保存的种子必需要干燥保存到4℃。
拟南芥的实验方案种植
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拟南芥的实验室种植方案————蛭石培养法一.实验原理拟南芥是十字花科植物,个体小,生活周期短,种植和生长不受季节限制,自花传粉,是植物实验常用的模式植物。
蛭石是一种天然、无毒的矿物质,在高温作用下会膨胀的矿物。
它是一种比较少见的矿物,属于硅酸盐。
有离子交换的能力,它对土壤的营养有极大的作用。
栽培介质需要有良好的排水性和透气性,以防止过湿引起真菌和昆虫幼虫的滋生。
使用泥炭土,蛭石,珍珠岩的混合土壤作培养介质能达到良好的效果。
二.实验材料和试剂花盆、铲子、小型喷水壶、薄膜、橡胶手套、尖嘴洗瓶、滤纸、烧杯、营养液、蛭石、泥炭土、珍珠岩、人工培养箱、4︒C冰箱。
三.实验步骤(2)种子处理春化种子:将种子放置于烧杯内,4︒C冰箱下,保持3-4天。
(3)土壤混合物的配置泥炭土:蛭石:珍珠岩=1:1:1。
用铲子放入花盆中,用营养液浇灌至湿润。
2.播种:将种子倒在滤纸上,轻轻震荡纸张,可均匀播撒,用薄膜(既保证所需温度又保证所需湿度)封住花盆口,薄膜扎孔(以便后继浇灌营养液)。
3.培养:(1)人工培养箱,温度23︒C,光强240 µmol·m-2·s-1,16h光照, 8 h 黑暗, 相对湿度60%~70%。
(2)在培养时浇培养液,用尖嘴洗瓶浇灌,1-2天浇一次。
(3)种子发芽后,及时揭开薄膜,幼苗生长过程中及时浇灌营养液和适宜的水分。
四. 实验结果预测3-4天后种子可发芽,此时,及时揭去薄膜,继续培养植株,作实验观察。
五.注意事项(1)实验过程中佩戴橡胶手套。
(2)幼苗浇灌水分不易过量,以避免根部缺氧死亡。
(3)种子播种时要均匀。
(4)配置土壤混合物时,要保持珍珠岩完整和土质蓬松。
五. 参考文献和资料翟中和,丁明孝,王喜中.细胞生物学(第四版).高等教育出版社。
刘金亮. 拟南芥实验室常用的种植方法.西北师范大学,生命科学学院,730070。
张庆友,孙新月,兰伟,许树成,祝雪兰. 拟南芥实验室种植栽培要领. 生物学通报. 2015年第50卷第七期。
种拟南芥的步骤
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种拟南芥的步骤
1、紫外线照实验台15-20分钟。
准备:1/2MS培养基;平皿;枪;灭菌水;
0.1%Agar溶液(高温高压灭菌);灭菌枪头(黄枪头要剪);marker笔;无
水乙醇;95%乙醇;封口膜。
2、数种子于1.5ml的EP管中,做好标记。
3、微波炉化1/2MS培养基,倒板。
需要加抗生素的要加抗生素(潮霉素:每
100ml培养基加56ul;卡纳:每100ml培养基加100ul),无菌操作。
4、洗种子:
A、向盛种子的EP管中加1ml 75%的乙醇(250ul的无菌水加750ul的无水
乙醇,现配现用,且要先加无菌水),剧烈晃动8分钟。
【或者洗两次,每次4分钟】
B、将上述酒精倒出后,加入95%的乙醇冲洗5遍。
【3遍也可以】
C、用无菌水清洗2遍,倒掉水。
【1遍也可以】
5、将种子悬起。
加入100—200ul的0.1%的Agar溶液,将种子用枪吹起。
【Agar
的量要视情况而定】
6、点种子。
用200ul的枪和剪过的黄枪头吸取种子,在培养基上依次点种,尽
量分散均匀,晾干。
7、封皿,并做好标记。
8、层化。
放于4度的冰箱处理3天。
9、将层化的种子置于光照培养箱中育苗一周,培养皿要倾斜放置。
10、移栽于土中。
拟南芥培育方法
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拟南芥培育方法—通用指南一、原理拟南芥作为高等植物的模式生物被全世界的植物生物学实验室广泛研究。
然而,照顾好这种小植物可能不是那么容易。
这里介绍一个马里兰大学帕克学院的HevenSze实验室的通用指南。
Sze实验室及其他实验室的成员为建立这个在实验室培育拟南芥的通用指南做出了许多努力。
二、步骤1. 准备种植用土我们使用Miracle-Gro混合土(2立方英尺一袋)与Miracle-Gro珍珠岩(8夸脱一袋)来培养拟南芥,在一个可以放下2袋混合土的大容器中和土,1袋混合土(2立方英尺)混入半袋珍珠岩(4夸脱)。
注意:Sze实验室在装土之前经常将土灭菌!(方法如下)(1)将干土放入灭菌容器中,直至与顶部相差一英寸,将土拍实。
(2)用铝箔纸将容器封住,在每一个容器上放一张灭菌用胶带,缠好。
确保容器外没有土,放入灭菌锅。
(3)用常规/秒速/快速模式灭菌30~50 min,灭菌模式及时间取决于灭菌的容器数量。
(4)当温度降至室温,将土放入花盆,轻轻压实。
记住将灭菌土保存好,避免种子或菌类污染。
灭过菌的土至少可以使用两星期,如无需要请不要多次灭菌。
(5)将花盆用去离子水浸没(不要超过土表面)用humidomes覆盖,使其吸水3-6小时或过夜。
吸水后应该还保存约1英寸高的水,如果没有请添水。
(6)此时的土可以用于种植拟南芥。
2. 种子消毒方法A(1)取适量种子(野生型、突变体或互补株系)置于一个EP管中,加1 ml 消毒溶液。
消毒溶液:20%Chlorox消毒液0.05%Tween-20用新灭过菌的无菌水配制。
(2)用振荡器以最大速度震荡20-30秒。
(3)放置7-10 min,偶尔震荡一下。
(4)8 000 rpm 离心5秒。
(5)仔细将水倒出。
(6)加1 ml 无菌水,震荡重旋种子。
(7)8 000 rpm 离心5秒,倒去上清。
(8)重复步骤6-7,重复四次。
(9)将灭菌的种子移到底部铺有无菌滤纸的小Fisher盘(100×15 mm)中。
拟南芥的种植
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一、拟南芥播种种子装入dorf管内,20μl种子加1ml 75% 乙醇消毒1分钟;吸去乙醇,加入1ml 50%次氯酸钠:50%无菌水:0.05%吐温(or 5%漂白粉),震荡洗涤15-20分钟;稍离心使种子沉于下部,吸去次氯酸钠或漂白粉,加入无菌蒸馏水清洗(清洗3次,每次洗完后稍离心,吸净水分);将种子用接种环均匀铺于MS培养基上,用封口膜封口,放入4℃冰箱内冷处理2-3天(春化)。
MS培养基的用量:直径为9cm的培养皿用25ml,直径为6cm的培养皿用12.5ml。
二、MS固体培养基制备1.培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的20倍或200倍分别称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液。
这样每次使用时,取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL),加水稀释,制成培养液。
现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出,供配制时使用。
大量元素(母液Ⅰ,20×) mg/LNH4NO3 33 000KNO3 38 000CaCl2·2H2O 8 800MgSO4·7H2O 7 400KH2PO4 3 400微量元素(母液Ⅱ,200×) mg/LKI 166H3BO3 1 240MnSO4·4H2O 4 460ZnSO4·7H2O 1 720Na2MoO4·2H2O 50CuSO4·5H2O 5 CoCl2·6H2O 5铁盐(母液Ⅲ,200×) mg/LFeSO4·7H2O 5 560Na2-EDTA·2H2O 7 460有机成分(母液Ⅳ,200×) mg/L ⅣA肌醇20 000ⅣB烟酸100盐酸吡哆醇(维生素B6) 100盐酸硫胺素(维生素B1) 100甘氨酸400上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。
吊冬瓜的栽培与种植技术
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吊冬瓜的栽培与种植技术吊冬瓜,又称为拟南芥,是一种常见的蔬菜。
它原产于中南半岛地区,具有浓郁的芳香味道和独特的口感,深受人们喜爱。
本文将为您介绍吊冬瓜的栽培与种植技术,帮助您在家中成功种植出美味的吊冬瓜。
一、环境要求吊冬瓜喜欢光照充足、温暖湿润的环境,最适宜生长温度为20-25℃。
在种植吊冬瓜时,需要选择阳光充足、排水良好、土壤肥沃的地方进行种植。
如果土壤过于干燥或缺乏养分,可以在种植前进行肥料施用和土壤改良。
二、育苗吊冬瓜的育苗期为3-4周,一般在春季进行。
育苗时需要选用透气性好、保水能力强的培养土,并在温室内进行育苗。
在育苗期间,需要注意保持土壤湿润,避免过度干燥或过度湿润。
三、移栽吊冬瓜的移栽期为育苗期结束后,一般在5-6周时进行。
移栽时需要选择天气晴朗、气温适宜的日子进行。
将育苗好的吊冬瓜移植到事先准备好的土坑中,每株吊冬瓜之间保持50cm的距离。
移栽后,需要及时浇水,保持土壤湿润。
四、管理吊冬瓜在生长过程中需要定期浇水、施肥和除草。
在浇水时,需要注意避免过量浇水,以免导致根部腐烂。
在施肥时,可以选择有机肥或复合肥,每隔10天左右进行一次施肥。
在除草时,需要注意不要伤及吊冬瓜的根部。
五、病虫害防治吊冬瓜容易受到白粉病、炭疽病、蚜虫和螨虫等病虫害的侵袭。
为了防治病虫害,可以在移栽后每隔10天左右进行一次喷药。
在喷药时,需要选择有效的农药,并注意保护好自己的身体健康。
六、采收吊冬瓜的采收期一般在种植后60-70天左右。
采收时需要注意不要损伤吊冬瓜的果皮,以免影响口感。
采收后,可以将吊冬瓜放置在通风干燥的地方进行保存。
总之,吊冬瓜的栽培与种植技术并不复杂,只要注意环境要求、育苗、移栽、管理、病虫害防治和采收等方面,就可以在家中成功种植出美味的吊冬瓜。
希望本文能够对您有所帮助。
拟南芥种植及处理基本方法
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.'1培养基MS培养基( Sigma公司)B5培养基( pH 5.5)Content mg/L Content mg/L Content mg/LKNO2500. 2.0Nicotinic1 3ZnSO4 7H2O.150H3BO3 3.0Thiamine HCl10CaCl 2H O22.250KI0.75Pyrindoxine1 MgSO4 7H2O.150.NaH2PO4 H2O Na2MoO4 2H2O.27.8.FeSO4 7H2O CoCl 2 6H2O.10Na2EDTAMnSO4 H2O.0.025CuSO 5H O42改良的 1/4 Hoagland 培养液( mM, pH6.0 ):Content mM ContentKNO 31.25ZnSO40.25m-Inositol1000.025Glycine20037.3Kinetin0.1IAA0.1-1mM0.002Ca(NO3)21.500.050H3BO3MgSO40.75KCl0.050KH 2PO40.5(NH 4)6Mo0.0757O24FeSO40.0720.0015CuSO4Na2EDTA 0.0720.1Na2SiO32植物材料的常规种植拟南芥种子均匀地播撒于1/3 B5液体培养基浸润的蛭石上,塑料膜遮盖至种子萌o 发,揭开膜,让其自然生长,适当间苗,烤苗至蛭石表面干燥后加水。
置于 23 C,16/8 h的光照培养间中生长。
3拟南芥种子的表面灭菌处理1)拟南芥种子在 4 C 下春化 3-5 天。
2)在超净台上用 70%酒精处理种子 2-5 分钟。
3)弃去酒精,用无菌水洗1-2 次。
4)将种子用 15% Bleach (KAO 公司)处理15分钟,间歇振荡。
5)用无菌水洗 4-6 次,每次充分振荡混匀。
6)将种子悬浮在灭菌的0.1% Agar 中。
7)均匀地将种子播撒在B5 培养基平皿中。
4植物材料的水培体系拟南芥种子经表面灭菌处理后均匀播撒于1/2 MS固体培养基上,10-15粒 /皿,生长 2周后,小心地将其转入水培体系中。
拟南芥培养攻略
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拟南芥培养攻略The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 2020拟南芥培养全攻略拟南芥又名阿拉伯芥,属十字花科,为二年生草本植物。
具有植株形态小,平铺直径5cm,高30cm;生长区域小,易于培养;基因组小,只有5条染色体,15700万个碱基对,27000个基因;生长速度快,周期短,一个世代大约只需要6周的时间;可自花授粉,也可以在不同种质系间杂交,种子多,每株每世代可产数千粒种子等特点。
因此,拟南芥是植物科学,包括遗传学和植物发育研究中的模式植物之一(图1)。
在2000年,拟南芥成为了第一个基因组被完整测序的植物。
尽管拟南芥生长周期短,且易于培养,但根据不同的实验需求,在培养过程中,对光照、水分及湿度等各种条件的控制有所差别,利用PERCIVAL AR 系列拟南芥培养箱可设置不同的生长环境,满足不同的实验需求。
一、正常培养简单的拟南芥培养,可用于基因表达、器官发育、基因突变等研究。
1、首先把拟南芥种子放到滤纸上,用70%酒精进行消毒处理,再用无水酒精进行处理(也可选择20%漂白剂以及% Triton X-100 非离子表面活性剂做杀菌处理20分钟)。
用无菌水冲洗5遍,然后将种子点到MS培养基上,,另加%琼脂以及2%蔗糖。
2、把种子放到4℃黑暗条件下进行春化48h-72h左右,AR系列培养箱图在长日照或短日照条件下催芽,然后转到PERCIVAL AR 系列培养箱中(图2)。
利用Intellus 控制器,编辑简单的昼夜模式,设定光照时间16小时(黑暗8小时)或者光照14小时(黑暗10小时);选配Q22连续光强调节装置,设定光照强度为100-150umol/;设定箱体内温度为光照条件下20-22℃,黑暗条件下18-20℃;选配湿度控制系统,设定箱体内相对湿度70%。
3、 出苗大约7~10天,然后移入土中培养,采用底部灌溉方式浇水(利用土壤的毛细作用)。
拟南芥养殖注意事项
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拟南芥养殖注意事项嘿,想养拟南芥的小伙伴们看过来呀!今天咱们就好好唠唠拟南芥养殖的注意事项呢!首先哇,这光照可是相当重要的呢!拟南芥是一种比较喜光的植物呀,但是呢,它又不能被那种特别强烈的直射光长时间照射哦。
你要是把它放在大太阳底下暴晒,哎呀呀,那它可就受不了啦!所以呢,最好是把它放在有明亮散射光的地方,像那种靠近窗户但是又有东西稍微遮挡一下阳光直射的地方就很不错呢!这时候可能就有小伙伴问了,要是光照不足会怎么样呀?那拟南芥就可能会长得比较瘦弱,叶子也没那么绿,还可能会徒长呢!这可不好看了呀!接着说土壤的问题吧。
拟南芥对土壤也是有要求的呢!它比较喜欢疏松、透气、排水性良好的土壤哇。
那种很黏重的土壤,拟南芥在里面可就像被捂住了嘴巴和鼻子一样,难受得很呢!你可以自己调配土壤呀,比如说用腐叶土加上珍珠岩还有蛭石按照一定的比例混合起来,哇,这样的土壤就很适合拟南芥生长啦。
要是土壤排水不好,一旦积水了呢,拟南芥的根就很容易烂掉哦,这可就麻烦大了呀!还有温度呢!拟南芥比较适应凉爽一点的温度哦。
一般来说,15 - 25摄氏度之间是它比较舒服的温度范围呀。
如果温度太高了,超过30摄氏度,拟南芥可能就会打蔫儿,像是被热坏了的小娃娃一样呢!那如果温度太低,到了零下的话,那它也很可能就被冻坏啦!所以在夏天的时候呀,要给它适当遮遮荫降降温,冬天呢,要是在室内养的话,也要注意保暖呢!浇水也是一门学问呢!不能浇得太勤,也不能让它干着呀。
你要根据土壤的干湿情况来浇水哦。
可以用手指插到土壤里面去感受一下,如果感觉土壤比较干了,那就可以浇水啦。
但是哇,千万不要积水,每次浇水就浇透,让水从盆底流出来一点就好啦。
要是浇水太多,就像前面说的,根会烂掉;要是浇水太少呢,拟南芥就会缺水,叶子会发黄,看起来病恹恹的呢!施肥也不能马虎呀!拟南芥在生长期间呢,是需要一些养分的。
不过呢,不能施太多浓肥哦,薄肥勤施是比较好的原则呢。
可以用一些稀释过的液肥,每隔一段时间给它施一点。
北方地区拟南芥栽培技术及基因转化体系的构建
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试验研究北方地区拟南芥栽培技术及基因转化体系的构建摘要:从基质的配制、播种方法、栽培管理、基因转化及转化植株筛选等方面对北方地区拟南芥的栽培技术和基因转化体系的构建方法进行了介绍,旨在为拟南芥在北方种植和利用拟南芥展开植物的分子研究提供依据。
关键词:拟南芥;栽培技术;转化体系拟南芥(Arabidopsis thaliana)属十字花科植物,又名鼠耳芥、阿拉伯芥、阿拉伯草。
它具有植株小、每代时间短、结籽多、生活力强等特点,是研究有花植物的遗传、细胞、发育、分子生物学的模式植物,被誉为植物界的“果蝇”。
现在发现的拟南芥生态型共有750多个,其中最常用的三种是Landsberg erecta(Ler)、Columbia (Col)、Wassilewskija(Ws),其中Col生态型用于拟南芥的全基因组测序。
为了充分发挥这一模式植物的优点,掌握拟南芥在北方地区的培养技术就显得非常重要。
结合本地的试验条件和气候特点及实践经验,笔者着重在拟南芥的培养介质、播种方法、温湿度、光照条件及基因转化的常用方法等方面进行了概述。
1栽培基质的配制为了保证提供充足的营养与良好的通气透水性,将蛭石、草炭土按1∶1的比例混匀,180℃高温灭菌3h。
将灭菌的基质装入花盆中,然后将花盆放入盛有清水的托盘中,待水渗透到土壤表面后,将托盘中的水倒掉。
2拟南芥的播种播种前低温4℃处理2~3d(有助于种子萌发)。
由于拟南芥种子很小,一般采用蒸馏水悬浮种子,牙签点播的方法播种。
我们创新采用0.1%的琼脂粉溶液悬浮拟南芥种子,用200μl的移液枪配200μl枪头(将枪头剪掉0.5cm)反复吹吸几次,种子即可较均匀的悬浮且不沉降,调种子浓度为1~3粒/滴,用移液枪播入花盆。
每盘采用四周点播,中央一处的播种法,每点1滴。
播种后花盆覆保鲜膜,保持基质表面湿润,出苗后撤掉保鲜膜。
播种后的花盆放入人工气候箱。
3拟南芥的栽培管理拟南芥不耐旱,应及时浇水。
拟南芥培育方法
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拟南芥培育方法—通用指南一、原理拟南芥作为高等植物的模式生物被全世界的植物生物学实验室广泛研究。
然而,照顾好这种小植物可能不是那么容易。
这里介绍一个马里兰大学帕克学院的HevenSze实验室的通用指南。
Sze实验室及其他实验室的成员为建立这个在实验室培育拟南芥的通用指南做出了许多努力。
二、步骤1. 准备种植用土我们使用Miracle-Gro混合土(2立方英尺一袋)与Miracle-Gro珍珠岩(8夸脱一袋)来培养拟南芥,在一个可以放下2袋混合土的大容器中和土,1袋混合土(2立方英尺)混入半袋珍珠岩(4夸脱)。
注意:Sze实验室在装土之前经常将土灭菌!(方法如下)(1)将干土放入灭菌容器中,直至与顶部相差一英寸,将土拍实。
(2)用铝箔纸将容器封住,在每一个容器上放一张灭菌用胶带,缠好。
确保容器外没有土,放入灭菌锅。
(3)用常规/秒速/快速模式灭菌30~50 min,灭菌模式及时间取决于灭菌的容器数量。
(4)当温度降至室温,将土放入花盆,轻轻压实。
记住将灭菌土保存好,避免种子或菌类污染。
灭过菌的土至少可以使用两星期,如无需要请不要多次灭菌。
(5)将花盆用去离子水浸没(不要超过土表面)用humidomes覆盖,使其吸水3-6小时或过夜。
吸水后应该还保存约1英寸高的水,如果没有请添水。
(6)此时的土可以用于种植拟南芥。
2. 种子消毒方法A(1)取适量种子(野生型、突变体或互补株系)置于一个EP管中,加1 ml 消毒溶液。
消毒溶液:20%Chlorox消毒液0.05%Tween-20用新灭过菌的无菌水配制。
(2)用振荡器以最大速度震荡20-30秒。
(3)放置7-10 min,偶尔震荡一下。
(4)8 000 rpm 离心5秒。
(5)仔细将水倒出。
(6)加1 ml 无菌水,震荡重旋种子。
(7)8 000 rpm 离心5秒,倒去上清。
(8)重复步骤6-7,重复四次。
(9)将灭菌的种子移到底部铺有无菌滤纸的小Fisher盘(100×15 mm)中。
拟南芥生长过程
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拟南芥生长过程拟南芥生长过程拟南芥生长的适宜温度白天为22℃-24℃,夜温最好比日温低2℃,适宜的湿度为60-70%,生长期适宜的光强为150μmol·s-1·m-2.拟南芥在日照长于12小时下才会开花,一般拟南芥生长室的日照长度定于14-16h为佳。
1.准备发苗培养基:1/2 MS,Sucrose:10g/L,pH5.7,agar:0.7-0.8%.灭菌后,在超净台上分装入培养皿.2.种子消毒有两种方法:一种是湿法NaClO水溶液消毒:种子放在1.5ml试管中, 加入1ml10%NaClo,混匀,消毒5min,用无菌水洗5次以上(用移液枪吸),湿法消毒后的种子要马上播;另一种是干法8%NaClO 酒精溶液,此时需用95%的酒精来配制8%NaClO 酒精溶液。
在8%NaClO 酒精溶液中消毒6-8min。
然后用无水酒精洗种子5次以上,吸干无水酒精后,在超净工作台上吹干透后再密闭保存。
3.播种:对湿法NaClO水溶液消毒种子用移液枪将种子吸到培养皿上,可多加些水,将种子铺均匀(不要太密,太密根缠在一起不好移苗),用移液枪吸干水,在超净台上让培养皿干了;对干法消毒的种子,用无菌牙签将种子点播到培养基上。
用Parafilm密封盖子后,请用牙签或镊子在上下两处各打4个小孔以通气。
最好是在每皿<30株这样的密度下,让其生长两周后再移苗.4.移苗及后续管理:如果培养基质用花泥,将花泥装入花盆,将花盆放入有水的塑料周转框中,框中的水就会通过花盆底部的孔渗上来,待花盆中的基质湿透后即可移苗.小心轻轻用镊子从培养皿中连根取出小苗,把苗种入花泥中.移苗结束后,用保鲜膜覆盖1-2天后揭膜,如果苗很弱,则在此基础上还需多覆盖1天.在花泥中种植时,苗期不需要添加营养液,开始抽苔时请及时添加营养液,一般需要添加2次,每次加入1升拟南芥营养液,2次添加最好间隔一段生长时期(7-10天),由于花泥有较好的吸附缓释能力,对间隔时间长短没有严格要求。
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1 培养基
MS培养基(Sigma公司)
B5培养基(pH 5.5)
改良的1/4 Hoagland 培养液(mM, pH6.0):
2 植物材料的常规种植
拟南芥种子均匀地播撒于1/3 B5液体培养基浸润的蛭石上,塑料膜遮盖至种子萌
发,揭开膜,让其自然生长,适当间苗,烤苗至蛭石表面干燥后加水。
置于23 o C,
16/8 h的光照培养间中生长。
3 拟南芥种子的表面灭菌处理
1)拟南芥种子在4 C下春化3-5天。
2)在超净台上用70%酒精处理种子2-5分钟。
3)弃去酒精,用无菌水洗1-2次。
4)将种子用15% Bleach (KAO公司)处理15分钟,间歇振荡。
5)用无菌水洗4-6次,每次充分振荡混匀。
6)将种子悬浮在灭菌的0.1% Agar中。
7)均匀地将种子播撒在B5培养基平皿中。
4 植物材料的水培体系
拟南芥种子经表面灭菌处理后均匀播撒于1/2 MS固体培养基上,10-15粒/皿,生长2周后,小心地将其转入水培体系中。
水培体系是由培养皿及起支撑作用的锡箔纸组成。
培养皿中盛适当的液体培养基(通常用上述改良的1/4 Hoagland培养液);锡箔纸上留出相距适当的小洞后,盖于培养皿之上。
将拟南芥幼苗的根小心地经由锡箔纸上的小洞浸入培养液中。
塑料膜覆盖,2-3天后揭去。
整个体系置于光照培养间中生长,每3-6天更换一次培养液。
5 拟南芥T-DNA插入突变体的筛选方法
到网站/tdnaprimers.html输入salk号设计引物LP、RP
T-DNA LB:LBb1: GCGTGGACCGCTTGCTGCAACT
LBa1: TGGTTCACGTAGTGGGCCATCG
用于PCR扩增。
采用双引物法,分别用LP+RP,BP+RP扩增基因组DNA。
方法:
1)将拟南芥突变体种子播种于MS培养基平皿中,生长2周后,将其转入蛭
石中,待长至抽苔期准备DNA的提取。
2)DNA提取缓冲液的配制:
3)剪取一片叶于1.5 ml Eppendorf管中,液氮充分研磨。
4)加40 μl 提取缓冲液,涡旋充分混匀。
5)95℃中水浴20分钟,间或混匀几次。
6)12,000 rpm离心15分钟。
7)吸取上清于一新的Eppendorf管,取10 μl稀释50倍。
然后取稀释后的DNA
用于PCR扩增。
PCR扩增体系为(25 μl体系):
PCR反应程序:。