N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定标准操作程序
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)试剂盒使用说明书.
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)试剂盒使用说明书(酶法·液体双试剂)用途本试剂盒用以测定尿液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)的活力。
原理在第一反应中用己糖激酶(HK)消去血清中内源性葡萄糖的影响，在第二反应中，NAG作用于基质P-硝基苯酚-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(PNP-NAG)，生成N-乙酰氨基葡萄糖，此N-乙酰氨基葡萄糖在N-乙酰氨基葡萄糖氧化酶(NAGOD)的作用下生成H2O2。
此H2O2在过氧化物酶(POD)的作用下与高灵敏的发色剂双〔3-双(4-氯酚)甲基-4-•二甲氨苯基〕胺(BCMA)反应，生成绿色色素。
通过测定此色素可求得NAG的活力。
第一反应：HK葡萄糖+ A TP ─────────→葡萄糖-6-磷酸+ ADP第二反应：NAGPNP-NAG + H2O ──────→N-乙酰氨基葡萄糖+ p-硝基苯酚NAGODN-乙酰氨基葡萄糖+ O2 + H2O ───→N-乙酰氨基葡萄糖酸+ H2O2PODH2O2 + BCMA + H+────→绿色色素+ 2H2O试剂━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━试剂成份含量──────────────────────────────────R-1A1(冻干) NAGOD ≥3000U/LPOD ≥12500U/LHK ≥8000U/LA TP·2Na ≥5mg/mlR-1A2(冻干) PNP-NAG 10.5mmol/LR-1B 2-吗啉乙烷磺酸(MES) 30mmol/L──────────────────────────────────R-2A(冻干) BCMA 0.17mmol/LR-2B MES 30mmol/L──────────────────────────────────标准酶NAG 约为50U/L标准酶溶解液MES 30mmol/L ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━标本尿液试剂配制R-1：以一瓶R-1B溶解一瓶R-1A2，再以此溶液溶解一瓶R-1A1。
人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)酶联免疫试剂盒使用说明书
氨基葡萄糖苷酶(NAG)酶联免疫试剂盒【试剂配制】洗液工作液：洗液需提前配制，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制。
取出洗液浓缩液，浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
浓洗涤液按1:20倍进行稀释。
例如用量筒量取285ml去离子水，倒入烧杯或其他洁净容器中，再量取15ml浓洗涤液，均匀加入，搅拌混匀。
【注意事项】1.实验开始前，请提前配置好所有试剂。
试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。
2.用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。
3.如样品浓度过高时，用合适的溶液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
【操作步骤】1.将各种试剂移至室温（18-25℃）平衡至少30分钟，按前述方法配制试剂，备用。
2.将酶标板取出，设一个空白对照孔、不加任何液体；每个标准点依次各设两孔，每孔加入相应标准品50μl；其余每个检测孔直接加待测标本50μl。
3.每孔加入酶结合物50μl（空白对照孔除外），充分混匀，贴上不干胶封片，置37℃温育1小时。
4.手工洗板，弃去孔内液体。
洗涤液注满各孔，静置10秒甩干，重复三次后拍干；洗板机洗板，选择洗涤三次程序，洗板后拍干。
5.每孔加显色剂A液50μl，显色剂B液50μl，振荡混匀后，37℃避光显色15分钟，每孔加终止液50μl。
6.用酶标仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。
在反应终止后10分钟内进行检测。
【操作要点】1.为保证检测结果的准确性，建议标准品及样品均设双孔测定。
每次检测均需做标准曲线。
2.如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时再乘以相应的稀释倍数。
3.加样时，请使用一次性的洁净吸头，避免交叉污染。
加样时应尽量轻缓，避免起泡，将样品加于酶标板孔底部，切勿沿孔壁加样。
4.为防止样品蒸发，温育过程中酶标板必须覆上板贴，任何时候都应避免酶标板处于干燥的状态。
5.洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性，在每次洗涤过程中，需要将孔内液体完全甩干，并在吸水纸上拍干，切勿将吸水纸直接放入反应孔中吸水，或用枪在孔中吸取液体。
土壤n-乙酰-β-d-氨基葡萄糖苷酶
土壤n-乙酰-β-d-氨基葡萄糖苷酶
土壤n-乙酰-β-d-氨基葡萄糖苷酶（soil N-acetyl-β-D-glucosaminidase，简称soil NAGase）是一种广泛存在于土壤中的酶类。
它参与了土壤中的有机质分解和氮循环，是研究土壤生态系统功能的重要指标。
土壤NAGase主要催化N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖的加氢水解，将其转化成氨和N-乙酰葡萄糖胺。
该酶的作用可以释放出土壤中的氮元素，同时还能够提高土壤中的碳和氮的利用率。
土壤NAGase对土壤的有效性质和成分有很强的响应能力。
在不同类型的土壤中，土壤NAGase的活性与土壤机械组分、有机物含量、土壤pH值等有密切的关系。
同时，土壤NAGase活性还可以受到生物和非生物因素的影响，如土壤温度、湿度、植被覆盖、土壤分层等。
研究表明，土壤NAGase活性可以作为土壤健康和生态功能的指标。
在不同的土地利用方式、土地管理方法和自然灾害后，土壤NAGase活性都会发生不同程度的变化。
因此，利用土壤NAGase作为生态系统功能的监测指标，可以为土地的精准管理提供科学的依据。
总之，土壤NAGase是一种重要的土壤酶类，它参与了土壤中的有机质分解和氮循环过程。
它的活性还可以反映土壤生态系统的健康状态和功能。
因此，研究土壤NAGase的作用和响应机制，对于保护生态环境、实现可持续土地利用具有重要意义。
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)测定试剂盒(MPT法)产品技术要求利德曼
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）测定试剂盒（MPT法）适用范围：本产品用于体外定量测定人尿液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的含量。
1.1 规格试剂1（R1):2×45mL、试剂2（R2): 2×15mL；校准品（选配）：1×2mL；质控品（选配）：1×2mL。
1.2 组成试剂盒由试剂、质控品（选配）和校准品（选配）组成。
试剂1(R1)：柠檬酸缓冲液（PH=4.5），200mmol/L。
试剂2(R2)：6－甲基－2吡啶－N－乙酰－1－硫代－β－D－氨基葡萄糖苷，6mg/dl。
校准品：冻干品，含NAG：（100～200）IU/L、磷酸盐缓冲液：50mM、乳糖：5％、酶稳定剂：1％。
质控品：冻干品，含NAG：（5～25）IU/L、磷酸盐缓冲液：50mM、乳糖：5％、酶稳定剂：1％。
2.1 外观液体双试剂：R1：无色澄清液体；R2：无色或淡黄色液体。
校准品：冻干品，溶解后为无色液体。
质控品：冻干品，溶解后呈黄色匀质液体。
2.2 装量:不得低于标示体积。
2.3 溯源性：根据GB/T 21415及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容，该校准品溯源至Inner standard。
＜1.5ABS ( 1cm；340nm；37℃)。
2.4 空白吸光度： A（空白）2.5 灵敏度：浓度为100IU/L时，吸光度变化△A/min＞0.01 ABS。
2.6 线性：测定结果在(0,200]IU/L范围内r≥0.996；测定结果(5,200] IU/L 时相对偏差应≤15%，测定结果(0,5] IU/L时绝对偏差应<0.75 IU/L。
2.7 精密度：用（5～12）IU/L和（15～25）IU/L的样本各重复检测10次，其变异系数CV<5%。
2.8 批间差：取三个批号试剂，分别测定浓度接近正常值上限的样本，每个批号测3次，不同批号之间测定结果的相对极差应<10%。
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)测定试剂盒(MPT底物法)产品技术要求sainuopu
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）测定试剂盒（MPT底物法）适用范围：用于体外定量测定人体尿液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的活性。
1.1试剂盒包装规格试剂1：1×15ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×54ml，试剂2：2×18ml；试剂1：3×39ml，试剂2：3×13ml；试剂1：4×54ml，试剂2：4×18ml；试剂1：2×300ml，试剂2：1×200ml；试剂1：2×30ml，试剂2：2×10ml。
校准品（选配，冻干品）：1×1ml；1×2ml。
质控品（选配，冻干品）：1×1ml；1×2ml。
1.2试剂盒主要组成成分2.1 外观试剂1：无色澄清液体；试剂2：无色或淡黄色液体。
校准品：冻干品，溶解后为无色至黄色液体。
质控品：冻干品，溶解后为无色至黄色液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于1.5。
2.3.2试剂空白吸光度变化率在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度变化率（△A/min）应不大于0.05。
2.4 分析灵敏度测定活性为100U/L样本时，吸光度变化率（ΔA/min）应不小于0.01。
2.5 线性范围在（0，200）U/L线性范围内，线性相关系数r应不小于0.996。
在（20，200）U/L范围内的线性相对偏差应不大于±15%；在（0，20] U/L范围内的线性绝对偏差应不大于±3U/L。
2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于10%。
06 NAG
复星长征体外诊断试剂标准操作规程试剂名称：N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定试剂盒（MPT 底物法）上海复星长征医学科学有限公司目录1 试剂盒概况2 方法学原理3 试剂主要组分4 样本准备5 试剂准备6 校准要求7 质量控制8 计算方法9 参数设定10 参考范围11 试剂性能概要12 超出可报告范围的处理13 其他必须说明的内容14 参考文献1 试剂盒概况1．1 货号：1.02.5001/1.02.5002/1.02.5003/1.02.5005。
1．2 包装规格：试剂1（R1）：4×45mL 试剂2（R2）：2×30mL。
试剂1（R1）：2×60mL 试剂2（R2）：2×20mL。
1．3 医疗器械注册证编号/产品技术要求编号沪械注准20172400274/沪械注准201724002742 方法学原理试剂采用6-甲基-2硫代吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷（MPT-NAG）为底物。
MPT-NAG在N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷（NAG）的作用下分解生产6-甲基-2-巯基吡啶（MPT）,使波长340nm处的吸光度值的上升速率进行监测，即可测得样本中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷（NAG）的活性。
NAGMPT-NAG+H2O N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷+MPT3 试剂主要组分3．1 试剂1（R1）柠檬酸盐缓冲液200mmol/L3．2 试剂2（R2）6-甲基-2硫代吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷15mmol/L3．3 储存条件3．3 . 1 在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起效期12个月。
3．3 . 2 试剂启用后，在2～10℃避光的条件下可稳定20 天。
4 样本准备样本要求：血清或者尿液标本新鲜，应不溶血，避光保存。
5 试剂准备试剂为液体双试剂形式，无须特别准备，可直接上机使用。
6 校准要求6．1 校准品：使用与试剂配套使用的复星长征N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶校准血清对测定进行校。
肾脏纤维化检查正常值
标本采集：空腹安静状态采血单独一管（促凝管）4ml-5ml参考值：1.血清β2-MG（β2微球蛋白) 0-3mg/L（0。
8-2.0）是反映肾小球滤过功能的较好指标肾小球滤过率（GFR）及肾血流量降低,则血清β2-MG升高。
尿液β2-MG（β2微球蛋白）↑1、是反映近端小管受损的非常灵敏和特异性的指标；2、鉴别上下尿路感染：上尿路感染时，β2—MG明显增高，而下尿路感染则正常。
2。
血清hsCRP（C反应蛋白(CRP））0-3mg/L是反应炎症的敏感指标3。
血清Cys C (半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白C）肾移植术后肾功能的检测、监测化疗药物对肾功能的损害、诊断肾脏纤维化判断纤维化程度的一个重要指标1-14岁 0.51—0。
95mg/L14—50岁男0。
63—1.25mg/L女0。
54-1.15mg/L50岁以上 0。
60—1。
55mg/L4。
血清HA （血清透明质酸） 0—110ng/ml血清HA浓度的变化，对鉴别急、慢性肾病及对肾病综合征与单部位损害的部位和程度 ,反映肾脏的病情变化有重要意义，对肾脏疾病诊断具有重要意义5.血清LN（层粘连蛋白) 0—95ng/ml肝纤维化、肿瘤转移的最新指标6.血清PCⅢ（血清Ⅲ型前胶原） 0—90ng/ml联合检测血清Ⅲ型前胶元（ＰＣⅢ）、透明质酸(ＨＡ）、层粘连蛋白（ＬＮ）三项指标升高与肝纤维组织增生呈同步性,显示出良好的正相关（Ｐ＜０．０１）结论三项指标的联合检测可极大增加临床诊断7.血清C—Ⅳ（血清Ⅳ型胶原) 0—85 ng/ml8。
血清TIMP-1（血清组织金属蛋白酶抑制物—1） 53-153pg/ml血清TIMP—1水平反映了慢性肝病肝内炎症和纤维化的一些重要特征，在目前情况下是一种较好的肝脏纤维化无创诊断和随访指标.肾小管三项，包括尿β2—MG、尿NAG、尿GGT/尿Cr肾纤维化标记物至少包括ECM成分及其裂解物、ECM代谢相关的酶、纤维化相关细胞因子和其他相关检测等四大类。
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)测定试剂盒(MPT法)产品技术要求百奥泰康
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)测定试剂盒（MPT法）适用范围：该产品用于体外定量测定人尿液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的活性。
1.1 产品规格1.2 组成成分1.2.1 试剂组成试剂1：柠檬酸缓冲液（PH=4.5），200mmol/L试剂2：6－甲基－2吡啶－N－乙酰－1－硫代－β－D－氨基葡萄糖苷，6mg/dL。
1.2.2 校准品的组成冻干品，含NAG（30IU/L）、磷酸盐缓冲液（50mM）、乳糖（50g/L）。
定值范围为：20-50U/L。
1.2.3质控品的组成冻干品，含NAG（10IU/L）、磷酸盐缓冲液（50mM）、乳糖（50g/L）。
定值范围为：5-25U/L。
2.1 外观液体双试剂：试剂1：无色至淡黄色液体；试剂2：无色至淡黄色液体。
校准品：冻干品，溶解后为无色至淡黄色液体。
质控品：冻干品，溶解后呈黄色匀质液体。
2.2 装量不得低于标示体积。
2.3 空白吸光度空白吸光度应≤1.02.4 空白吸光度变化率空白吸光度变化率应≤0.05。
2.5 灵敏度浓度为100IU/L时，吸光度变化（△A/min）应≥0.01 。
2.6 线性：在(0,200.0]IU/L线性范围内，线性相关系数r 应≥0.990；在(0,50]IU/L范围内绝对偏差不超过5IU/L；在(50,200]U/L范围内的相对偏差不超过±10%。
2.7 精密度：变异系数CV应≤5%。
2.8 批间差：不同批号之间测定结果的相对极差应≤10%。
2.9 准确度回收试验：回收率在90%-110%之间。
2.10 质控品赋值有效性测定值在质控靶值范围内。
2.11瓶间重复性（均一性）校准品、质控品瓶间重复性CV≤5%。
2.12校准品溯源性根据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)试剂盒说明书
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）试剂盒说明书土壤N乙酰βD葡萄糖苷酶（SolidNacetylβDglucosidase, SNAG）试剂盒说明书微量法100管/48样注意：正式测定前务必取23个预期差异较大的样本做预测定测定意义：SNAG是溶酶体中的一种酸性水解酶，由土壤微生物分泌。
SNAG活性变化与机体某些病理状态密切相关。
测定原理：SNAG分解βN乙酰氨基葡萄糖苷生成对硝基苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算NAG活性。
自备用品：可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
试剂组成和配制：试剂一：甲苯5mL×1瓶，4℃保存；（自备）试剂二：粉剂×1瓶，20℃保存；临用前加入10mL蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂仍20℃保存；试剂三：液体20mL×1瓶，4℃保存；试剂四：液体15mL×1瓶，4℃保存；样品处理：新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过30~50目筛。
测定步骤：1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。
2、加样表试剂名称测定管对照管风干土样（g）0.020.02试剂一（μL）1010室温振荡混匀15min90℃振荡混匀15min试剂二（μL）130蒸馏水130试剂三（μL）160160混匀，37℃振荡反应1h后，90℃水浴5min（盖紧，防止水分散失），流水冷却。
10000g 25℃离心10min，取上清液（在EP管或96孔板中加入下列试剂）上清液（μL）7070试剂四（μL）130130充分混匀，室温静置2min后， 400nm处测定吸光值A，计算ΔA=A测定管A对照管。
每个测定管设一个对照管。
SNAG活力计算：a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准条件下测定的回归方程为y = 0.00645x 0.0054；x为标准品浓度（μmol/L），y为吸光值。
医院检验中心N乙酰葡萄糖苷酶操作规程
医院检验中心N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)操作规程（1）试剂配制：1） NAG缓冲液： PH5．0 +β糊精含量10％2）基质干粉(CNP—NAG):5mg十6mlNAG缓冲液(PH6.0，柠檬酸缓冲液)．（2）方法：Beckman分析仪上操作．（3）计算公式：NAG测—NAG空NAG=───────×100(U／g.Cr)Cr×50/88.4注:此尿肌酐为50倍稀释．B12、腺苷脱氨酶(ADA)（1）试剂:宁波新芝（2）操作:BECKMAN CX9生化仪上自动检测，仪器参数按试剂说明书。
（3）计算：ADA＝Au—Aub／As—ab×30（4）参考植：0—25单位（5）临床意义：1.肝硬化，原发性肝癌，ADA均可升高。
2.测定胸水ADA及与血清ADA的比值对诊断结核性胸膜炎有很大的诊断价值，积液中的ADA活性结核的明显高于癌性和心衰性的，比值大于l是诊断结核性的一项可靠指标．3.伤寒病的ADA的活性显著升高，明显高于非伤寒的发热患者，据报道，ADA的敏感性达100%，特异性为92.3%，伤寒的发病初期可高于正常人2-4倍，极期及缓解期持续处于高水平，至病程第4周逐渐降低，所以ADA检测对伤寒病的早期诊断很有价值。
4．血液病血细胞中的ADA活性比血清中的ADA活性大40-70倍，在慢淋及白血病性网状内皮增生病，淋巴细胞中ADA活性明显下降，而急淋和急粒患者，其淋巴细胞中ADA活性比正常高1-10倍，各类恶性肿瘤患者，外周血淋巴细胞ADA活性明显降低。
5．其他一些疾病，如传单、栗粒性结核、风湿热、溶血性贫血、白血病、及部分肿瘤病人，血清ADA呈不同程度升高。
6.结核性脑膜炎ADA活性升高，其他脑膜炎不升高。
鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶ELISA试剂盒说明书
鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶ELISA试剂盒说明书鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶ELISA试剂盒说明书保存条件：2-8℃低温保存供应商：上海樊克生物有限公司保质期：6个月，所有试剂盒均提供最新批次。
ELISA试剂盒规格：(1) 规格：96T 可以测90个样，5个标准孔，1个空白孔(2) 规格：48T 可以测42个样，5个标准孔，1个空白孔【ELISA试剂盒种属】人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELISA试剂盒等。
【试剂盒检测目的】用于测定血清，血浆及相关液体等样本。
例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
【标本】血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
【用途】科研实验等领域科学研究，不得用于临床诊断。
elisa试剂盒价格，elisa试剂盒说明书，elisa检测试剂盒计算：To the standard concentration as the abscissa, OD value as the ordinate, draw the standard curve on coordinate paper, according to the OD value of samples from the standard curve found corresponding concentration; multiplied by the dilution multiple; or with the standard concentration and the OD value calculated straight line regression equation of the standard curve, the sample OD value in the equation, calculate the sample concentration, multiplied by the dilution factor is the actualconcentration of the sample.鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶ELISA试剂盒说明书Experimental principle:Determination of gonadotropin levels in mice chorionic specimens of the kit using double antibody sandwich method. Using purified mouse chorionic promote gonadal hormone antibody coated microtiter plate, made of solid phase antibody, to coated microporous monoclonal antibodies followed by adding collagenase, combined with HRP labeled collagenase antibody, the formation of antibody, antigen and enzyme labeled antibody complexes, after thorough washing, TMB substrate added color. TMB under the catalysis of the HRP enzyme into blue, and under the action of acid into the final yellow. Collagenase was positively related to the depth of color and samples. Enzyme standard instrument in 450 nm wavelength was used to measure the absorbance (OD), through the standard curve calculation of a small sample in chorionic gonadotropin concentration.▪鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶ELISA试剂盒说明书Operation steps▪ 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第 Tenth nine holes were added to the standard dilutionliquid 50 L, after mixing from tenth holes in the 50 to take ninth Mu L abandoned. (diluted sample amount for each hole concentration of 50 L, respectively 1800ng/L, 1200ng/L, 600ng/L, 300ng/L,▪- add sample: are respectively provided with a blank hole (blank control wells without sample and ELISA, the rest of the each step operation is same), sample hole to be measured. In the enzyme standard coated plate to be tested on a sample hole Zhongxian sample dilution of 40 g l, and then to be measured is added 10 mu l of sample (sample final dilution degrees for 5 times). The sample is added to the bottom of the enzyme labeled plate hole, as far as possible without touching the wall of the hole.▪Having incubation with closure plate membrane sealing plate rear 37 DEG C incubation for 30 minutes.▪Collaborated with liquid: 30 (20 times 48T) times concentrated washing liquid with distilled water 30 times (20 times 48T) dilution.▪- washing: be careful torn off the seal plate membrane, discard liquid, drying, washing liquid to fill each hole, standing for 30 seconds after the discard, repeat 5 times, pat dry.▪Falls: enzyme per hole adding enzyme reagent 50 L, except the blank hole.▪Having Incubation: operation with 3.▪- washing: operation with 5.▪- Color: each hole to join the chromogenic agent A50 Mu L, adding chromogenic agent B50 Mu L, gently shake mix and 37 DEG C to avoid light color for 15 minutes.▪Having terminated: per hole adding stop solution 50 L termination reaction (the blue color turn yellow).▪Having determined: the blank air conditioning zero absorbance at 450nm in order to measure the hole (OD). Should be measured 15 minutes after the stop solution and within.鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶ELISA试剂盒说明书1 standard products: series of dilution of the standard product should be prepared in theexperiment, can not be stored. Before dilution, the standard product is mixed evenly. Dilution ratio is carried out in the table:40 umol/L (standard 6) the original concentration of the concentration without dilutiondirectly into the 50ul.20 umol/L (standard 5) 100ul of the original times the standard to join the 100ul standarddilution10 umol/L (standard 4) 100ul 5 standard to join the 100ul standard dilution5 umol/L (standard 3) 100ul 4 standard to join the 100ul standard dilution2.5 umol/L (standard 2) 100ul 3 standard to join the 100ul standard dilution1.25 umol/L (standard 1) 100ul 2 standard to join the 100ul standard dilution0 umol/L (blank control) the original concentration is not diluted directly into the 50ul.2 washing buffer solution (50 *) dilution: distilled water 50 times dilution.上海樊克生物有限公司专业的提供elisa试剂盒，人elisa试剂盒，猪elisa试剂盒，大鼠 elisa试剂盒，小鼠elisa试剂盒，羊elisa试剂盒，植物elisa 试剂盒等等，更多优惠，来电咨询！谢谢！注：本产品只用于科研实验不用于临床诊断。
N-乙酰-β-D -葡萄糖苷酶(NAG)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（NAG）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC4290规格:50T/24S产品简介：N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（EC 3.2.1.52，N-acetyl-β-D-glucosidase,NAG）广泛分布于各种组织中，是一种细胞内溶体酶，测定NAG活性可用于肾小管间质性肾炎、尿路感染、糖尿病肾病综合症、高血压肾病、肾移植后的排异反应和肾病综合症的早期诊断NAG分解N-β-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定400nm下吸光度的变化来计算NAG活性。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP管。
产品内容：提取液：液体30mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入5mL蒸馏水溶解备用；可-20℃分装保存，避免反复冻融，-20℃可保存2周；试剂三：液体60mL×1瓶，4℃保存；标准品：液体1mL×1支，5μmol/mL的对硝基苯酚溶液，4℃保存。
临用前用蒸馏水将标准品稀释8倍得0.625μmol/mL的标准溶液。
操作步骤：一、粗酶液的提取：1、组织：按照组织质量（g）:提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆。
15000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
2、细菌、真菌：按照细胞数量104个：提取液体积（ml）500~1000:1的比例，建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（率300w，超声3s，间隔7s，总时间3min）然后15000g，4℃，离心10min，取上清置冰上待测。
3、血清（浆）等液体：直接测定。
二、测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。
小鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶-(NAG)-ELISA试剂盒说明书
小鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 (NAG)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书产品编号：E-EL-M0812（本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!）声明：尊敬的客户，感谢您选用本公司的产品。
本产品选用世界著名生产厂家的原料，采用专业ELISA kit生产技术制造。
适用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液中天然和重组NAG浓度。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分！如有疑问，请及时了解伊莱瑞特生物科技XXX。
*: [96T/48T]（打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整）检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。
用抗小鼠NAG抗体包被于酶标板上，实验时标本或标准品中的NAG会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。
依次加入生物素化的抗小鼠NAG抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。
抗小鼠NAG抗体与结合在包被抗体上的小鼠NAG结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。
加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色，加终止液后变黄。
用酶标仪在450nm波长处测OD 值，NAG浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线求出标本中NAG的浓度。
标本收集:1.血清：全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。
2.血浆：抗凝剂推荐使用EDTA.Na2，标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可检测。
避免使用溶血，高血脂标本。
3.组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，以去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。
将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样本对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。
推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定试剂盒(MPT底物法)产品技术要求丹大
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定试剂盒（MPT底物法）适用范围：本品用于体外定量测定人血清中抗链球菌溶血素“O”的含量。
本品用于体外定量测定人尿液中NAG的活性。
1.1规格规格1： (试剂1：15mL；试剂2： 5mL)；规格2： (试剂1：30mL；试剂2：10mL)；规格3： (试剂1：60mL；试剂2：20mL)；校准品（冻干品）：为选配规格1（0.3mL×1；2水平)；规格2（0.5mL×1；2水平)；规格3（1.0mL×1；2水平)；质控品（冻干品）：为选配规格1（0.5mL×2；2水平)；规格2（1.0mL×2；2水平)。
1.2组成试剂盒组成见表1表1 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定试剂盒组成2.1试剂2.1.1外观试剂盒外观应整洁，文字符号标识清晰；试剂1、试剂2为无色透明液体，不得有沉淀和絮状物。
2.1.2装量每瓶不少于标示值。
2.1.3试剂空白吸光度用指定的空白样品测试试剂（盒），在光径1cm下，在A340nm处测定试剂空白吸光度A≤0.4，空白变化率(△A/min)≤0.005。
2.1.4分析灵敏度测定20U/L的样品，吸光度变化率(△A/min)≥0.005。
2.1.5线性范围2.1.5.1在[0.1,200] U/L内,相关系数R≥0.990。
2.1.5.2在[0.1,20]U/L内，线性绝对偏差不超过±2U/L；[20,200]U/L内，线性相对偏差不超过±10%。
2.1.6重复性重复测试(85±17) U/L和(170±34) U/L样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大5%。
2.1.7批间差测定(85±17) U/L和(170±34) U/L样本，所得结果的批间相对极差（R）应不大于10%。
2.1.8准确度）中加入一定体积高于200 U/L的N-乙酰-在正常浓度范围的临床样本（C）或由纯品配制的标准溶液，回收率应在90%-110%β-D-氨基葡萄糖苷酶纯品（Cs范围内。
牛副性腺N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶性质的测定
【１ Ｙ ， ｕｇｅＣ Ｋ Ｓｈ ｔ Ｃ Ｂ ｅ ａ Ａ ｓｃ ｔｎ ｆ ６ ６ ｕ Ｔ Ｐ Ｔ ｇｌ ， ｃ ｍｉ ， ｔ １ ｓ ｉ ｏｓｏ ｚ ． ｏ ａ
ＰＩ ｐ ｌ ｍ ｏ ｐｈｓ ｓｗ ｉｈ ｇ ｏ ｔ ｄ ｃ ｒ ａｓｔａｔ ｎ ｐｉｓ Ｔ１ ｏ ｙ ｒ ｉｍ ｔ ｒ ｗ ｈ ａ ａｃ ｓ ｒｉｓｉ ｇ ｎ
的应用 价值
精子 和精浆 两部 分组成 ， 中牛精 液 中精 浆 占 ９ 其 ０％ 左右 ， 精浆不 仅是 精子输 送 的介质 ． 含有 各种生 化成
分和 无机元 素 ．为精 子存 活提供 了适宜 的理化 环境
和所 需 的能量 ，而且 有些成分 还 对精子 的运 动功 能 产生 一定 的影 响 。来 自附睾 的精 子活力 较低 ，且 大
部分 都 为非 前 向运动 精子 ． 只有 在接触 精浆后 ， 子 精
精 囊腺 、 前列 腺及 尿道球 腺统称 为副 性腺 。 射精
时它们 的分 泌物加 上输 精管壶 腹 的分泌 物混合 在一
才具 有前 向运动 能力 。基 于精 浆对 精子 活力 的重 要 影 响且精 浆 中 Ｎ Ｇ ｓ 精 卵结合 过 程可 能起 的重 Ａ ａｅ在
卟 Ｊ ｎｍ ｃ １ ９ ， ３１ ８ — ２ ８ ｉ Ｓｉ ９５ ７ ： ２ １８ ． Ａ ， ２
【 Ｓ ｎｅ ｏａＫ， ａｃｋＤ， ｅｋｖｃｖ Ｅ ｅｔ ｆ ｅ ｅｃ ７ ｔ ｃｋ ｖ Ｖ ｓｅ Ｐ ｓｏ ｉ ａ 】 ａ ｉ ｏ Ｄ． ｆｃ ｏ ｎｔ ｇ ｉ
４
福 建 畜牧 兽 医
第３ ２卷
第１ 期
２１ ００年
牛 副性腺 Ｎ一 乙酰一 一 一 Ｉ Ｄ 氨基葡萄糖苷 酶性质 的测定 ３
叶
摘 要
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定试剂盒(MPT底物法)产品技术要求baiding
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定试剂盒（MPT底物法）适用范围：用于体外定量测定人尿液中的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的活性。
1.1规格校准品(选配)：1×1mL；质控品(选配)：1×1mL。
1.2组成：注：校准品靶值、质控品质控范围详见包装标签。
2.1 外观2.1.1试剂1：无色至淡黄色液体，无浑浊，无不溶物。
2.1.2试剂2：无色至淡黄色液体。
2.1.3校准品：无色至淡黄色液体。
2.1.4质控品：无色至淡黄色液体。
2.1.5包装外观应整洁，标签字迹清晰，不易脱落。
2.2 净含量液体试剂的净含量不低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度试剂空白吸光度≤0.5；2.4 分析灵敏度样本浓度为100 U/L时，△A≥0.01 。
2.5 线性区间在[1，200] U/L范围内，线性相关系数r≥0.990；测试浓度在[1，30] U/L时，绝对偏差不超过±3 U/L，测试浓度在（30，200] U/L时，相对偏差不超过±10%。
2.6 精密度2.6.1 批內精密度用高、低2个浓度的样本测试试剂盒，各重复测试10次，其变异系数（CV）应不大于10%。
2.6.2批间差用样本分别测试3个不同批次的试剂盒，每个批次测试3次，其相对极差（R）应不大于10%。
2.7 准确度回收率在85%-115%范围内。
2.8 质控品赋值有效性测试结果在质控范围内。
2.9 瓶内均匀性校准品和质控品瓶内均匀性（CV）应不大于10%。
2.10 量值溯源校准品量值溯源至公司内部工作校准品并，与北京九强生物技术股份有限公司生产的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定试剂盒（MPT底物法）比对验证。
2.11 稳定性2.11.1校准品开瓶稳定性校准品开瓶后2℃～8℃避光保存可稳定3天。
稳定期过后4小时内进行测试，测试结果与靶值的相对偏差不超过±10%。
2.11.2质控品开瓶稳定性质控品开瓶后2℃～8℃避光保存可稳定3天。
尿液N-乙酰-β—D-氨基葡萄糖苷酶连续监测法测定
终 点 法 对 比测 定结 果 相 关 性 良好 ， Ｙ（ 本法） ＝ ０ ． ８ ４ ９ ２ ｘ （ 终 点法 ） ＋ ０ ． ６ ７ ４ ２ ｔ ＝ ０ ． ９ ８ ３ ４。结 论
定 尿 液 ＮＡ Ｇ， 反应 后 生 成 色 源 Ｃ ＮＰ ， Ｐ Ｋ ａ 为５ ． ５ ， 与 酶 的最 适 Ｐ Ｈ５ ． ０ 接近 ， 反应 后 即显 色 ， 通 过 连 续 测 ＡＡ ／ ｍｉ ｎ ， 用
按表 １设 置 自动分析 ２ ． ４ 精密度 和同收 率
参 数 。混 匀 ， 延迟 １ ２ ０ Ｓ ， 读取 ４ ０ ５ ｒ ｉ ｍ 波 示批 内 Ｃ Ｖ ３ ． ８ ６ ％（ ｎ ２ ５ ） ， 批问Ｃ Ｖ ４ ． ６ ７ ％
为 底 物 用 连续 测 法 测 定 尿 液 （ ＮＡＧ ） ， ２ ． １ 反应 时 间
效果满意， 现报道如下。
１ 资 料 与方 法
液分 别 与工 作液 混 合 ， 于１ ０ 、 ２ ０ 、 ４ ０ 、６ ０ 、 １ ２ ０ 、 １ ８ ０ 、 ２ ４ ０ 、 ３ ０ ０及 ３ ６ ０ Ｓ 读 取 吸 光度 ， 尿
表 １ 尿液 ＮＡＧ测定
ｄ： △Ａ ／ ｍｉ ｎ ￣ ２ ０ １ ４ 。（ Ｖ ｔ ： 反应 活 力 总 尿Ｎ ＡＧ 活 力 增 高 是 肾 小 管 损 害 的 ｘ
一
项 灵敏 指 标 ， 常 见 于 急慢 性 肾炎 ， 休 克 体积 ； Ｖ ｓ ： 样本 体积 ； △Ａ ／ ｍｉ ｎ ： 每分钟 吸
０． ０ ８
１ ． １ 试剂与仪器
ｍｍｏ ｌ ／ Ｌ， Ｐ Ｈ ５ ． ０ Ｃ ＮＰ ． ＮＡＧ ２ ． １ ｍｍｏ ｌ ／ Ｌ，
含促溶剂适量 。 选用 岛津 Ｕ Ｖ 一 ２ ４ ｌ ０ ． ｐ ｃ 紫 ２ ． ２ 最适 ｐ Ｈ 用５ ０ ｍｍｏ ｌ ／ Ｌ柠檬 酸 缓
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N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定标准操作程序
1.摘要
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测主要用于肾脏疾病、肝硬化和慢性活动性肝炎的诊断。
2.适用范围
程序适用于日立7600自动生化分析仪检测尿液中NAG的浓度。
3.职责
使用日立7600自动生化分析仪进行测定NAG浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化
室负责人、科主任签字批准生效。
4.检测方法
上海科华生物工程股份有限公司生产的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）试剂盒采用
的是速率法。
5.原理
2
6N
-
-
-
O
-
-
-β
−
+
−→
−
D
N NAG-
H
-
氨基葡萄糖苷
乙酰
硫代吡啶
甲基
巯基吡啶
氨基葡萄糖
-
甲基-
乙酰
6
2
-
-
2
-
-
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)催化底物6-甲基-2-硫代吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MPT-NAG)水解产生6-甲基-2-巯基吡啶(MPT)和N-乙酰-氨基葡萄糖，MPT在340nm
附近有吸收峰，所以，可以通过监测340nm附近的吸光度变化值计算样本中的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力。
6.仪器
日立7600自动生化分析仪
7.试剂
7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供
7.2试剂瓶内主要成分：柠檬酸缓冲液、Tris6-甲基-2-硫代吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷、
防腐剂
7.3试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为
12个月。
试剂不可冰冻。
7.4试剂准备：试剂为即用式。
8.标准品和质量控制
8.1校准程序：使用上海科华公司提供的K校准因子对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品：上海科华公司提供的生化质控血清做为室内质控品。
每日在测定前做一
次质控。
该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。
8.3质控数据管理：按程序对检验后的质控后结果进行转换，及时质控数据进行分析处
理，如出现失控值，应及时分析失控原因，并填写好相关失控记录。
8.4质控判断规则：按《Westgard多规则质控方法测定标准操作程序》
8.5室间质评：分别参加某地区室间质评，对回报的室间质评结果按《室间质量评价程
序》进行处理。
9.标本
9.1标本为尿液样本，如尿液混浊，使用前应离心去除沉淀。
尿液样本保存于2-8℃可稳
定1周，冻存可稳定1个月，但如果尿液的pH<4或>8应及时测定。
也可采用新鲜血清。
9.2标本拒收：由实验室人员核收送来标本，如有溶血、已被污染、标识不清或与申请单
不符状况，一律要求重新留取标本。
9.3标本处理：收集编号后离心获取尿液/血清以备检测使用。
10.测定程序
10.1分析参数：详见参数表。
10.2操作步骤：签收样本→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。
10.3获取结果：在日立7600仪器上或日立7600传送的中文系统电脑上查找相应结果。
10.4结果报告：对检验后的结果进行审核，系统分析，判断结果的可报告性。
可报告的
结果直接发报告，对不可报告结果进行复检后发报告。
11.计算
标准品校准项目后，测定室内质控，质控结果符合质控要求后方可测定样本。
无需手工计算，每个标本的结果自动打印
12.废液处理
参阅检验科《安全手册》废液处理标准规程处理。
13.操作性能
13.1可报告范围：本法对NAG检测范围为1.6～500U/L。
当样品测定值超过上限时，应
将样品用9 g/L氯化钠溶液作倍比稀释，重新测定，结果乘以稀释倍数。
13.2特异性/干扰：当样品中VC≤600 mg /L，胆红素浓度≤600mg/L，血红蛋白浓度≤
5.00g/L，乳糜≤10mmol/L时对测定结果的影响可忽略。
13.3精密度:重复性CV%≤6% 批间差≤10%
14.注意事项
14.1.试剂盒仅用于体外诊断，测定结果仅作为相关疾病的临床辅助诊断依据。
14.2.使用试剂时请根据实际使用量，将试剂倒入干净容器内再测定，其余试剂盖紧后放
回冰箱。
14.3.如试剂变混浊，请勿使用。
14.4.如试剂以蒸馏水作空白，试剂在340nm处吸光度大于0.2A，请勿使用。
14.5.本试剂中含有叠氮钠，切勿吞咽，避免与皮肤及粘膜接触。
如不慎接触，应用大量
清水冲洗，如误服，应立即上医院诊治。
15.参考值
血清：< 19.5 U/L 。
随机尿液：<13.5 U/L。
如果结果做为诊断指标应结合病史及其它临床检查结果。
16.临床意义
本试剂盒用于定量测定人尿液或血清样本中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）的活力，用于临床相关疾病的辅助诊断。
尿NAG活力增高是肾小管损害的较灵敏指标。
增高见于急慢性肾炎、休克引起的肾衰竭(NAG 特高)、肾病综合征、流行性出血热、中毒性肾病。
肾病恢复期或肾实质病变不重时，增高不明显。
下泌尿系统感染和尿路结石时，NAG可正常。
肾移植患者，尿NAG测定可早期发现排斥反应。
一般在临床出现各种指征前1～3天即有尿NAG活力增高。
肝硬化和慢性活动性肝炎晚期，肝组织有纤维化倾向者，血清NAG活力升高;中晚期妊娠血清NAG活力亦见升高。
17.支持性文件
17.1日立7600自动生化分析仪使用说明书。
17.2日立7600自动生化分析仪分析参数。
17.3上海科华生物工程股份有限公司提供的试剂说明书。
用户可根据自身情况添加支持性文件。
18.参考文献
18.1《全国临床检验操作规程》第三版，叶应妩等，2006。