变形杆菌检验
HBI变形杆菌生化鉴定条使用说明书(HBIG05)
变形杆菌生化鉴定条使用说明书（HB I G05）
1、实验准备：从包装盒中取出一条生化鉴定条，打开盖子，用打孔器开孔或直接撕下封口
膜。
如果染菌或变色，则不能使用，重新拿一条。
注：打孔器用75%酒精擦拭后使
用。
2、接种方法：
从选择性琼脂平板（SS琼脂、EMB琼脂）上至少选取2-3个典型菌落或可疑菌落，接种于营养琼脂平板上纯化培养（36C±1C培养24h±2h）。
取纯化后2-3个单菌落制成菌悬液，接种三糖铁琼脂斜面和生化鉴定条各孔，本生化鉴定条中不含三糖铁琼脂斜面；请参照WS/T9-1996标准的判断结果。
菌悬液法：取一内盛2ml无菌水或无菌生理盐水试管，用接种环挑取纯化后2-3个单菌落至无菌水中仔细研磨制成0. 5麦氏浊度的均一细菌悬液，每孔加入100ul 菌悬液。
其中鸟氨酸和氨
基酸对照需加灭菌石蜡覆盖液面。
3、接种完后盖上盖子，放入底托中，放置36±1T培养。
4、培养结束后，放在记录卡上观察。
变形杆菌类及其检验
变形杆菌类及其检验变形杆菌类为有动力的革兰氏阴性杆菌，包括变形杆菌属、普罗菲登属和摩根氏菌属。
变形杆菌属分为普通变形杆菌(P．vulgaris)、奇异变形菌(P．mirabilis)、产粘液变形杆菌(P．myxofaciens．)和潘氏变形杆菌(P．pennea)。
普罗菲登斯菌属共有5个种。
摩根氏菌属只有一个种，即摩根氏菌(Morganella morganii)。
变形杆菌类是腐物寄生菌，自然界中广泛分布，水、土壤、腐败有机物中以及动物肠中都有存在，是一种条件致病菌，这种活菌在肉品上大量繁殖，被人摄食后进人人体，在条件适合时，就有可能引起食物中毒。
所以只从样品中检出变形杆菌并无实际意义，只有变形杆菌类严重污染的食品被人摄食后，才能引起食物中毒。
检验变形杆菌引起的食物中毒时，不仅要分离鉴定变形杆菌而且还要检验变形杆菌在每克食品中的最近似数。
4起中毒事件概况1.1 2003年4月18日，康乐县苏集乡古洞沟村一村民在家举行宗教活动，参加活动的66人就餐后发生食物中毒。
经及时救治，未发生死亡。
对所食鸡肉和烩菜进行检验,检出变形杆菌；1.2 2003年4月18日，广河县阿里麻土乡古城村一村民在家举行宗教活动，参加活动的90人就餐后有62人发生食物中毒。
经及时救治，未发生死亡。
对所食羊肉进行检验，检出变形杆菌；1.3 2003年5月16日，康乐县白王乡老树村一村民宰杀病畜分食，30人发生食物中毒，未发生死亡。
经采样检验，检出变形杆菌；1.4 2003年5月26日，和政县梁家寺乡宋家沟村一清真寺举行宗教活动，参加活动者集体就餐，115人发生食物中毒，无死亡。
经采样检验，检出变形杆菌。
一、生物学特性1．形态与染色特性变形杆菌是一类大小、形态不一的细菌，有时球形，有时丝状，呈明显的多形性，周身鞭毛，能运动，无芽孢荚膜，革兰氏阴性。
2．培养特性1）需氧及兼性厌氧。
2）对营养要求不高，在普通琼脂上生长良好。
3）在固体培养基上普通和奇异变形杆菌常扩散生长，形成一层波纹薄膜，叫做迁徙生长现象。
变形杆菌分离鉴定标准(一)
变形杆菌分离鉴定标准(一)变形杆菌分离鉴定标准引言变形杆菌是一类常见的细菌，其形状呈现为弯曲状或螺旋状，广泛存在于环境中。
由于其特殊的形态和生理特征，变形杆菌在科学研究和工业应用中具有重要作用。
为了准确分离和鉴定变形杆菌，一套规范的实验方法和标准被广泛应用。
变形杆菌分离鉴定标准变形杆菌的分离鉴定可以按照以下步骤进行：1.样品采集：从目标环境中采集样品，如土壤、水体、动物肠道等。
2.预处理：对采集的样品进行预处理，以去除干扰物质并提取变形杆菌。
–用适当的缓冲液将样品悬浮并混合均匀。
–利用离心等方法将悬浮液离心，以获得细菌沉淀。
–通过适当的水洗和稀释方法，去除干扰物质并浓缩变形杆菌。
3.培养：将预处理后的样品接种到合适的培养基上进行培养。
–选用含有适当营养物质的培养基，如Czapek培养基。
–调整pH值和温度，提供适宜的培养环境。
–培养时间根据需要进行调整。
4.纯化：从培养液中筛选出单一的变形杆菌菌落。
–用不同浓度的培养基进行稀释，以筛选出单一菌落。
–利用传代培养的方法，使菌落变纯。
5.形态观察：观察和描述变形杆菌的形态特征。
–使用显微镜对菌落进行观察。
–描述变形杆菌的长度、形状、弯曲度等特征。
6.生理特征鉴定：通过多种生理特征判断菌株的身份。
–进行生化试验，如碳水化合物利用能力、蛋白质水解能力等。
–进行氧需求试验，如需氧菌或耐气菌。
–进行其它适合的鉴定试验。
7.分子鉴定：使用分子生物学方法进行鉴定。
–提取变形杆菌的DNA。
–利用PCR扩增目标基因片段。
–进行测序和比对，鉴定菌株的身份。
结论变形杆菌的分离鉴定是进行科学研究和应用的重要步骤。
遵循规范的实验方法和鉴定标准，可以准确鉴定变形杆菌并获取可靠的实验结果。
各个步骤的严格操作和结果的准确判断是保证实验成功的关键。
通过不断的实践和改进，我们可以更好地理解和利用变形杆菌在不同领域中的作用。
变形杆菌引起食物中毒检验分析论文
变形杆菌引起的食物中毒的检验分析【中图分类号】r155.3 【文献标识码】a 【文章编号】1672-3783（2013）03-0273-01【摘要】目的：了解庄河市发生的食物中毒事件中变形杆菌检测分析的流程，为变形杆菌食物中毒的实验室的检测分析与诊断提供参考。
方法：对庄河市2003-2012年间的18起食物中毒资料进行比较分析综合。
结果：引起食物中毒的 13起病原菌为普通变形杆菌， 5起病原菌为奇异变形杆菌，初步确定了引起食物中毒的变形杆菌的检验流程及判定标准。
结论：变形杆菌为引起食物中毒的常见条件致病菌，确定变形杆菌引起的食物中毒必须有完整的实验室的检验依据。
【关键词】：食物中毒检验程序普通变形杆菌/奇异变形杆菌在我国细菌性食物中毒占食物中毒总数的 2 /3 ，其中变形杆菌引起的食物中毒近年来较为常见。
由于变形杆菌食物中毒缺乏典型症状，给食物中毒的正确判定带来了一定的困难，因而实验室的检测在变形杆菌食物中毒的判定中起到了关键作用，也直接影响着变形杆菌食物中毒应急处理的工作质量。
本文就庄河市 2003年-2012年所发生的18起变形杆菌食物中毒事件，对食物中毒病原微生物之一变形杆菌的检测进行分析探讨，从而为变形杆菌食物中毒提供检测参考。
1 资料与方法来源于庄河市 2003年-2012年食物中毒资料。
1.1 流行病学资料2003年-2012年间共发生了18起变形杆菌引起的食物中毒，共涉及进食人数为 103人，发病 75人。
症状以腹痛、腹泻为主（占发病人数 80 % 以上），其次是恶心、呕吐（占40%以上），发热只占18.4%。
潜伏期最短2.5 h ，最长 20 h ，平均为 8-13 h。
发生季节 1-3月1起， 5-8月15起， 10-12月2起。
1.2 实验室检测程序1.2.1 标本采集 18起食物中毒共计采集凉菜间食物：熟制肉类36份，豆淀粉类熟制品 16份，凉拌菜 9份；冰箱内食物：熟制肉类 45份，豆淀粉类熟制品 13份；熟食砧板、刀具涂抹拭子 29份；患者肛拭子或粪便 34份，患者呕吐物 19份，厨工肛拭子 33份。
奇异变形杆菌鉴定流程
奇异变形杆菌鉴定流程一、标本采集。
这就像是破案找线索，咱得先有东西才能开始鉴定呀。
那这个标本可以从好多地方采呢。
比如说尿液，要是有人怀疑泌尿系统感染可能是奇异变形杆菌捣的鬼，那取尿液就很关键啦。
还有伤口分泌物，如果是伤口感染的话，从那儿取分泌物就像从坏蛋的作案现场找证据一样。
采集的时候可得小心哦，就像呵护小宝贝似的，保证标本不受污染，不然就像线索被弄乱了，后面的鉴定可就麻烦啦。
二、初步观察。
把标本拿到手之后，咱先大概看看。
就像看一个新朋友，先有个第一印象。
这个时候是看它的形态呢。
奇异变形杆菌在显微镜下是有它自己的小模样的。
它是革兰阴性杆菌，这就好比它穿着一件特定款式的衣服，是咱们识别它的一个重要特征。
而且它的形态还会变来变去，可调皮了，有时候是单个的杆菌，有时候又像排着队的小士兵一样，呈现出丝状。
三、培养。
这就像给这个小细菌一个小房子，让它在里面生长繁殖，这样我们就能更清楚地认识它啦。
咱们会把标本放到合适的培养基里，就像给小种子找了一块肥沃的土地。
奇异变形杆菌比较喜欢在那种营养丰富的培养基里生长。
它在培养基上生长的时候也有自己的特点呢。
它会长出那种迁徙性的菌落，就像小细菌在培养基上画了一幅抽象画，从一个点慢慢向外蔓延，可有意思了。
而且啊，它还有一股特殊的气味，有点像那种刺鼻的味道，就好像它在说“我在这儿呢，快来找我呀”。
四、生化鉴定。
这可是鉴定奇异变形杆菌的重头戏哦。
就像是一场小细菌的考试，看看它到底是不是我们要找的奇异变形杆菌。
它有好多特殊的生化反应呢。
比如说它能分解尿素，就像它有一个特殊的技能一样。
还有啊，它对某些糖的分解能力也不一样，通过检测这些，就像看它在不同学科上的成绩，我们就能越来越确定它是不是奇异变形杆菌啦。
这一步就像是在一堆嫌疑人里，根据他们不同的表现来确定真正的犯人一样。
五、血清学鉴定。
这就像是给奇异变形杆菌做一个更细致的身份验证。
就好比我们每个人都有身份证，细菌也有它自己的“身份证”，那就是它的抗原。
普通变形杆菌菌落特征
普通变形杆菌菌落特征一、引言普通变形杆菌是一种常见的细菌，广泛分布于自然环境中。
其形态特征为杆状，大小约为0.5-1.0微米×2.0-5.0微米，具有两端略尖的形态。
普通变形杆菌可以通过观察其菌落特征来进行初步鉴定。
本文将详细介绍普通变形杆菌的菌落特征。
二、菌落特征1. 形态普通变形杆菌在营养琼脂平板上生长的菌落呈现出灰白色、乳白色或淡黄色等颜色，直径约为1-2毫米，表面光滑平整，边缘清晰。
在显微镜下观察，其形态呈不规则圆形或不规则卵圆形。
2. 质地普通变形杆菌的菌落质地较软，易于切割和移植。
3. 透明度普通变形杆菌的菌落透明度较高，在透光条件下可见到底部培养基。
4. 气味普通变形杆菌的菌落有一种特殊的气味，类似于腐败的气味。
5. 生长速度普通变形杆菌的菌落生长速度较快，在24小时内即可形成完整的菌落。
三、鉴定方法普通变形杆菌可以通过观察其菌落特征来进行初步鉴定。
但为了确诊，还需要进行进一步的生化和分子学检测。
1. 生化检测普通变形杆菌可以通过进行氧化-发酵试验、葡萄糖利用试验、淀粉水解试验等生化试验来进行鉴定。
2. 分子学检测近年来，随着分子生物学技术的发展，PCR技术已经成为了细菌鉴定的重要手段。
通过对细菌DNA进行PCR扩增和序列分析，可以准确地鉴定出普通变形杆菌。
四、结论普通变形杆菌是一种常见的细菌，在自然环境中广泛存在。
其在营养琼脂平板上生长的菌落具有灰白色、乳白色或淡黄色等颜色，表面光滑平整，边缘清晰，透明度较高。
通过观察其菌落特征，可以进行初步鉴定。
但为了确诊，还需要进行进一步的生化和分子学检测。
变形杆菌食物中毒应该做哪些检查？
变形杆菌食物中毒应该做哪些检查？*导读：本文向您详细介变形杆菌食物中毒应该做哪些检查，常用的变形杆菌食物中毒检查项目有哪些。
以及变形杆菌食物中毒如何诊断鉴别，变形杆菌食物中毒易混淆疾病等方面内容。
*变形杆菌食物中毒常见检查：常见检查：粪细菌培养、细菌性食物中毒检测、血凝试验*一、检查取患者急性期和恢复期(中毒后12～15d)的血清，用分离的菌株做血清凝集效价测定，恢复期滴度高于急性期滴度四倍，即有诊断意义。
同时以健康人做为对照，应为阴性。
取可疑食物、呕吐物和粪便作细菌培养，可分离出同型变形杆菌。
分离出的变形杆菌，必须作血凝试验，才能确认。
普通变形杆菌对OX19，奇异变形杆菌对OXK的凝集效价应在4倍以上增长者，才能肯定诊断。
如作间接血凝试验，灵敏度可提高2～16倍。
近年来应用变形杆菌对尿素(urea)、苯丙氨酸(phenylalanine)、硫化氢(hydrogen sulfide)的生化特性建立了快速同步定性定量检测方法-UPS法。
正确鉴定率为100%。
*以上是对于变形杆菌食物中毒应该做哪些检查方面内容的相关叙述，下面再来看看变形杆菌食物中毒应该如何鉴别诊断，变形杆菌食物中毒易混淆疾病。
*变形杆菌食物中毒如何鉴别？：*一、鉴别据进食可疑食物、共食者集体发病和临床表现等可作出初步诊断。
粪便培养可检得变形杆菌，用获得的变形杆菌为抗原作病人血清凝集反应，病人组较健康对照组凝集效价明显增高，以此可协助确诊。
血清凝集抗体有助于诊断。
本病需与霍乱及副霍乱、急性细菌性痢疾、病毒性胃肠炎、非细菌性食物中毒等疾病相鉴别。
*温馨提示：以上内容就是为您介绍的变形杆菌食物中毒应该做哪些检查，变形杆菌食物中毒如何鉴别等方面内容，更多更详细资料请关注疾病库，或者在站内搜索“变形杆菌食物中毒”了解更多，希望以上内容可以帮助到大家！。
动力试验变形杆菌实验现象
动力试验变形杆菌实验现象一、动力试验变形杆菌实验现象在进行动力试验时，会发现试件表面出现了一些白色斑点，这些斑点是由变形杆菌所引起的。
这种细菌是一种革兰氏阴性菌，可以在环境中自然生长繁殖。
当试件表面存在微小的裂纹或缺陷时，变形杆菌会侵入其中并在表面形成白色粘液状物质。
二、变形杆菌的特性1. 革兰氏阴性：革兰氏染色是一种常用于细菌分类的方法，根据细胞壁结构的不同分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。
变形杆菌属于革兰氏阴性菌。
2. 好氧：好氧细菌需要氧气才能进行代谢和生长。
变形杆菌也属于好氧细菌。
3. 能产生粘液：变形杆菌能够产生粘液状物质，这种物质有助于其在试件表面附着并生长繁殖。
4. 能够侵入裂纹和缺陷：由于变形杆菌体积较小，可以侵入试件表面微小的裂纹和缺陷中生长繁殖。
三、变形杆菌实验的意义动力试验变形杆菌实验是一种常用的金属表面检测方法，可以用于检测金属表面裂纹和缺陷。
由于变形杆菌能够侵入微小的裂纹和缺陷中生长繁殖，因此可以通过观察试件表面出现的白色斑点来确定试件是否存在裂纹或缺陷。
这种实验方法具有以下优点：1. 灵敏度高：由于变形杆菌能够侵入微小的裂纹和缺陷中生长繁殖，因此对于微小的裂纹和缺陷也能够进行有效检测。
2. 非破坏性：动力试验变形杆菌实验是一种非破坏性检测方法，不会对试件造成任何损伤。
3. 易操作：这种实验方法操作简单易行，不需要复杂的仪器设备和高超的技术水平。
四、动力试验变形杆菌实验步骤1. 准备工作：将金属试件表面清洁干净，并确保表面没有任何油脂或污垢。
2. 培养变形杆菌：将变形杆菌培养在适当的富营养培养基中，培养条件为温度在25-30℃，通气良好。
3. 涂布变形杆菌：将培养好的变形杆菌涂布在金属试件表面，涂布后放置在恒温箱中，在适当的时间内让细菌生长繁殖。
4. 观察实验现象：观察试件表面是否出现白色斑点，如果出现则说明试件存在裂纹或缺陷。
五、实验注意事项1. 变形杆菌对环境要求较高，应该注意保持实验室的卫生和通风。
变形杆菌检测方法
三糖铁结果：K/A 产H2S 尿素分解阳性
5、生化试验
• 经初步鉴定符合变形杆菌特征菌株， 按表3-8-1、3-8-2、3-8-3、3-8-4中项目进 行生化鉴定试验，并判定种属或种群。
• 也可用API20E和全自动微生物分析系统进 行生化鉴定。
奇异变形杆菌 API20E 结果
API 20E报告单 奇异变形杆菌
二、生物学特性
（一）形态 1.菌体形态 • 变形杆菌为革兰阴性小杆菌，两端钝圆。 大小0.4～0.6μm×1～3μm，有明显多形性。 无荚膜。 • 有周身鞭毛，运动活泼。有菌毛，可粘附 至植物和真菌细胞表面，但不能与动物或 人类细胞粘附。
奇异变形杆菌悬浮标本的细胞形态，金属镀膜 ×24000 小杆菌，两端钝圆
奇异变形杆菌api20e结果api20e报告单奇异变形杆菌6变形杆菌菌数的测定在变形杆菌食物中毒诊断检验时需要对可疑食物进行变形杆菌活菌计数常采用近似计数将检样在研钵中研磨制成悬液后用生理盐水对原样品进行102103104105等稀释度的稀释分别移取各稀释度的悬液01ml接种于琼脂斜面底部的凝结水内但勿接触培养基斜面表面
EMB培养基上为无色透明菌落
SS培养基上形成单个菌落，菌落中心呈黑色， 有粘性，打开平皿时有臭味
血平板上形成无色透明菌落 迁徙现象明显，不溶血
4、初步鉴定
将三糖铁培养基上乳糖反应阴性、硫化 氢阳性或阴性的菌株接种尿素和苯丙氨酸 鉴定培养基，37℃培养24h，变形杆菌二者 均为阳性。 变形杆菌易与沙门氏菌混淆，但变形杆 菌能够水解尿素。
7、血清学实验
在食物中毒诊断和判定中，需要对来自可 疑食物与患者的菌株进行血清型别鉴定，以判 定其同源性，如果没有分型因子血清，可做患 者血清效价和交互吸收试验。如果这两个实验 不能做，至少应该将待试菌株分别点种在普通 营养琼脂平板的两端，待两侧的菌株蔓延生长 到平板中间，菌苔完全融合，说明两株细菌没 有拮抗现象。
食源性变形杆菌属PCR检测方法
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变形杆菌属 （ ｏ ｕ ）是一种常见 的食 源性 致病 ｒ ｅ Ｐｔ ｓ
症［ １ 风 湿关节 炎 、 １９ ８】 －、 肺结核【等。其 中最 常见的是 泌 ２ ｌ ＿ 尿道感染 ，变形杆菌属是泌尿道感染 的最 主要病原 菌
ｏ ｔｉ ｅ ｏ ｅｅ ｅ ｃ ｓＰ ｏｅ ｓａ ｄ ６ ｓ ｌｔｄ Ｐ ｏｅ ． ｐｅ ｉ ｃｆａ ｍｅ ｔ ｒ ｅｅ ｔｄ ｉ ｈ ２ ｓｒ ｉ ｓ ｂ ａｎ ｄｆ ｒ３ｒ ｆ ｒｎ ｅ ｒ ｔｕ ｎ ６ ｉｏａｅ ｔ ｕ Ｎｏ ｓ ｃｆ ｒｇ ｎｓｗｅ ｅｄ ｔｃｅ ｎ ｔ ｅ １ ｔａｎ ｒ ｓ ｉ ｏ ｅ ｎ ｎ ｒ ｔ ｕ ａ ｔｒａ ｈ ｅ ｕｔｏ ｐｅ ｉ ｃｔ ｅ ｔ ｈ ｗｅ ｈａ ｈ ｅｅ ｔｏ ｉ ｔｃ ｕ ｄ ｒａ ｈ １０ ｆｔ ｏ －Ｐ ｏｅ ｂ ｃｅ ．Ｔ ｅ ｒ ｓ ｌ ｆｓ ｃｆ ｉ ｔ ｓｓ ｓ ｏ ｄ ｔ ｔｔ ｅ ｄ ｔｃｉｎ ｌ ｏ ｌ ｅ ｃ ．８ｘ ｈ ｓ ｉ ｉ ｙ ｍｉ １ ｃ ｕｍＬ． ｔ ｐ ｌ ａ ｌ ｆｄ ｔｃｉ ｇｔ ｅｐ ｔ ｏ ｅ ｉ ｏｅ ｓｒ ｐｄｌ ｎｆｏ ． ０ ｆ／ Ｉ Ｓａ ｐ ｉ ｂ ｅｏ ｅｅ ｔ ｈ ａ ｈ ｇ ｎ ｃＰｒ ｔｕ ａ ｉ ｙｉ ｏ ｄ ｃ ｎ Ｋ ｅ ｒ ： ｏ ｄ— ｏ ｎ ａ ｈ ｇ ｎ ｃｂ ｃｅ ａ Ｐ ｏｅ ； ｏｙ ｒ ｓ ｈ ｉ ｅ ｃｉｎ ｄ ｔ ｃｉｎ ｙｗｏ ｄ ｆｏ — ｒ ｅｐ ｔ ｏ ｅ ｉ ａ ｔ ｒ ； ｓ ｂ ｉ ｒ ｔｕ ｐ ｌ ｍｅａ ｅｃ ａｎ ｒａ ｔｏ ； ｅｅ ｔｏ ｓ
奇异变形杆菌生化鉴定
奇异变形杆菌生化鉴定
奇异变形杆菌（Bacillus cereus）是一种常见的细菌，广泛存
在于土壤、灰尘、食品和水中。
对于奇异变形杆菌的生化鉴定，可以通过以下步骤进行：
1. 培养基选择：选择适合奇异变形杆菌生长的培养基，如普通营养琼脂平板培养基。
2. 培养：将待检菌株接种到培养基上，通常在37℃下孵育12-24小时。
3. 形态特征观察：观察菌落形态特征，奇异变形杆菌的菌落通常呈不透明、灰白色，边缘不规则，中央凹陷。
4. 芽孢形成观察：奇异变形杆菌属于芽孢形成细菌，可通过鉴定菌落上是否有明显的中央坚果状小球来确定。
5. 革兰染色：进行革兰染色，奇异变形杆菌为革兰阳性细菌，细胞呈直杆状。
6. 生化鉴定：可以使用一系列常规生化试验来鉴定奇异变形杆菌，如淀粉水解试验、甲烷红酚酸碱指示剂试验、溴百里酚蓝酸盐试验等。
7. 其他鉴定方法：除了生化鉴定外，还可以使用分子方法如聚合酶链反应（PCR）、16S rRNA基因测序等进行进一步的确
诊和鉴定。
需要注意的是，奇异变形杆菌与其他的芽孢形成细菌（如大肠杆菌、肠球菌等）在某些生化试验上可能存在相似性，因此综合多种鉴定方法可以提高鉴定的准确性。
同时，细菌培养和鉴定需要在合适的实验室环境下进行，并遵循相关的生物安全操作规范。
变形杆菌检验
变形杆菌检验变形杆菌（Proteus）在自然界分布极广，人和动物的粪便带菌很高，各类食品及用具等均可检出，虽是常见的腐生细菌，但在严重污染的食物中，通过生长繁殖后，可使食物含有大量此菌，食入后亦易引起食物中毒。
对此菌的实验室诊断，主要是根据生物学特性进行鉴别，也可以用血清学分型，但目前变形杆菌因子血清在国内应用尚不普遍，其检验程序一般是按肠道细菌检验方法进行。
一、检验方法（一）操作步骤1. 取被检样品25g，加225mL灭菌盐水，用均质器打碎或用乳钵磨碎，接种在SS琼脂平板和EMB琼脂平板上，经37℃、培养18~24h，普通变形杆菌和奇异变形杆菌在弱选择性的固体培养基上可出现菌落蔓延生长的特点，SS琼脂能抑制其蔓延生长，呈单个菌落。
其他变形杆菌呈半透明圆形菌落。
2. 挑取上述可疑菌落，接种三糖铁斜面培养基，经37℃、24h培养后，斜面产碱不变，底层产酸变黄，多数产少量气体，有的产硫化氢或不产硫化氢者均为可疑反应。
3. 将三糖铁斜面上可疑反应的培养物做尿素酶试验和涂片革兰氏染色镜检。
4. 对尿素酶阳性的革兰氏阴性杆菌，根据生化特性进行分型鉴定。
必要时做血清分型。
（二）检验程序表9-1变形杆菌检验程序二、结果分析判定（一）形态革兰氏阴性杆菌，形态大小很不一致，有明显的多形性，约为1~2μm×0.1-0.5ｕm，有周身鞭毛，不产生芽胞，无荚膜。
（二）培养特性生长条件与其他肠道细菌相同，一般培养基都能生长，有动力，运动活泼，普通变形杆菌和奇异形杆菌在湿润的普通琼脂培养基上和血琼脂平板上都能蔓延生长（或称游散生长），在选择性较弱的如EMB培养基，不能抑制其蔓延生长，在选择性较强的SS琼脂和DC琼脂培养基上能受到抑制，呈现单个菌落。
莫尔根变形杆菌和雷极变形杆菌呈半透明、圆形、光滑菌落，如果在1％琼脂上或经多次移种之后，莫尔根变形杆菌也可看到蔓延生长现象。
（三）生化特性根据变形杆菌属的生化学性状分为：普通变形杆菌（P.Vulgaria）、奇异变形杆菌（P.mirabilis）莫尔根变形杆菌（P.morganii）和雷极变形杆菌（P.rettgeri），共同的生化学性状为：均能迅速水解尿素，苯丙氨酸脱氨酶阳性，赖氨酸脱羧酶阴性，精氨酸阴性，不利用丙二酸盐，能在含氰化钾（KCN）的肉汤内生长，均不分解乳糖、棉子糖、纤维二糖、阿拉伯糖、卫矛醇、山梨醇。
普通变形杆菌鉴定流程
普通变形杆菌鉴定流程今天咱们来唠唠普通变形杆菌的鉴定流程呀。
一、标本采集。
这可是鉴定的第一步哦。
那这个标本从哪来呢？可以从很多地方呢，像患者的尿液、痰液、粪便，还有伤口的分泌物之类的。
就好比侦探找线索，这些标本就是我们找到普通变形杆菌这个“小坏蛋”的重要线索来源。
采集的时候可得小心又仔细啦，不然线索就可能断了或者不准咯。
二、初步观察。
拿到标本后呢，咱们就开始初步瞅瞅啦。
在显微镜下看呀，普通变形杆菌是革兰阴性杆菌呢。
它长得有点像小棍子，不过可别小瞧它哦。
这个时候呢，我们就像在人群里先把那些穿着特定颜色衣服（革兰阴性）的人先挑出来一样，把它从一堆微生物里初步区分出来。
而且呀，它还有个特点，就是具有多形性，就像孙悟空会七十二变似的，有时候形状不太规则呢。
三、培养特性。
接着就把标本放到合适的培养基里培养啦。
普通变形杆菌在普通琼脂平板上就能生长得不错呢。
它会长出那种迁徙生长的菌落。
这就像是一群小蚂蚁在搬家，慢慢扩散开来。
它还会产生一种特殊的气味，有点像臭鸡蛋的味道，这味道可不好闻，但这也是它的一个小特征呢。
如果是在血琼脂平板上呢，它还能溶血，就像把周围的血细胞给弄破了一样，可调皮了。
四、生化反应。
这一步就像是给普通变形杆菌做各种小测试啦。
比如说，它的硫化氢试验是阳性的哦。
这就好比它会一种特殊的技能，在这个试验里能表现出来。
它的脲酶试验也是阳性的，这就像是它又一个独特的本事。
通过这些生化反应的测试，我们就能更准确地判断这个微生物是不是普通变形杆菌啦。
就像我们通过一个人的各种特长来确定他到底是谁一样。
五、血清学鉴定。
有时候呀，我们还会用到血清学鉴定呢。
就像每个人都有自己的身份证号一样，普通变形杆菌也有它特定的血清型。
通过血清学鉴定，我们可以更加精确地确定它到底是哪一种类型的普通变形杆菌。
这就像是给它一个更详细的身份认证，确保我们没有认错这个小微生物。
5.1.3变形菌鉴定微生物学检验
SS平板：乳（—）、H2S（+）
生物学特性
奇异变形杆菌显微镜下形态特征，革兰染色，×1000
生物学特性
变形杆菌迁徙生长现象（血琼脂平板）
生物学特性
变形杆菌迁徙生长现象（普通琼脂平板）
生物学特性
普通变形杆菌的菌落形态特征SBA，24h，不扩散生长株
生物学特性
奇异变形杆菌的菌落形态特征, SS平板，48h
生物学特性
生化反应
三属：乳糖（—）、苯丙AA（+） 变形杆菌属共同生化反应： 尿素（+）、苯丙AA（+）
生物学特性
变形杆菌KIA（K A+ + ）MIU（+ +/- +）
• 最后鉴定：
– 属、种间鉴别 – 食物中毒检验
微生物学检查
根据典型的迁徙现象,迅速分解尿素，苯丙氨酸脱氨酶阳性，KIA为 KA++，IMViC为-/++--，可鉴定为变形杆菌。
微生物学检查
任务目标
知识目标：掌握变形杆菌的生物学特性、临床意义、 微生物学检验。 能力目标：能进行变形杆菌的常规微生物检验。
生物学特性
形态与染色
革兰阴性杆菌,多形性、周毛、有菌毛，无芽胞；
摩根菌属部分菌株30℃以上不形成鞭毛。
生物学特性
变形杆菌革兰染色
生物学特性
变形杆菌鞭毛染色
生物学特性
培养特性
温度：10～43℃ 普通平板或血平板：
生物学特性
变形杆菌苯丙氨酸脱氨酶试验（＋）
变形杆菌检测方法
二、生物学特性
（一）形态 1.菌体形态 • 变形杆菌为革兰阴性小杆菌，两端钝圆。 大小0.4～0.6μm×1～3μm，有明显多形性。 无荚膜。 • 有周身鞭毛，运动活泼。有菌毛，可粘附 至植物和真菌细胞表面，但不能与动物或 人类细胞粘附。
奇异变形杆菌悬浮标本的细胞形态，金属镀膜 ×24000 小杆菌，两端钝圆
扩散性生长，厚薄交替、同心圆型的层层波状菌苔 迁徙生长现象
在SS琼脂培养基上形成的菌落为圆形，扁薄半透明， 易与沙门菌菌落混淆，没有迁徙现象。
（二）生化特性 • 变形杆菌可使各种氨基酸脱氨分解，不具 有赖氨酸脱羧酶和精氨酸双水解酶，苯丙 氨酸脱氨酶阳性，多数产生靛基质并水解 尿素，发酵少数糖类，不产生气体或产生 少量气体。 • 变形杆菌属的特性表现为甘露糖阴性，蔗 糖、麦芽糖、木糖和蕈糖阳性，明胶酶、 脂酶、DNA酶阳性，多数产H2S。
变 形 杆 菌 的检 测
一、概 述
变形杆菌广泛分布于水、土壤、腐败 有机物等自然界和人与动物肠道中，是一 类条件致病菌，引起医院感染的常见条件 致病菌，耐药菌株日益增多，常引起泌尿 系感染等多种感染；污染食物后易在其中 繁殖，引起食物中毒。
变形杆菌食物中毒是我国最常见的一 类食物中毒之一，全年均可发生，多发于5 月～10月，以7月～9月常见，主要中毒食 品为含有大量变形杆菌活菌的熟肉制品和 凉拌菜。 该菌引起的食物中毒潜伏期较短，一 般为3～4h，主要症状为恶心、呕吐、腹部 剧烈疼痛、腹泻、头疼、发热、全身无力 等。腹泻一日数次，多为水样便、少数粘 液便，有恶臭。病程较短。
普通变形杆菌为革兰阴性杆菌，多数为单个存在，
也可见成对或短链排列，周身鞭毛，运动活泼，无荚膜。
变形杆菌周身鞭毛 运动活泼
2.培养特性
检验微生物学 变形杆菌属
变形杆菌属： 普通和奇异变形杆菌引起尿路感染、菌血 症；烧伤、创伤和呼吸道等多种感染，是 医院感染主要病原菌；还可引起食物中毒、 胃肠炎等。
耐药性
变形杆菌对磺胺类、氨苄西林、羧苄西 林和四环素等敏感率较低，容易产生耐 药。
对喹诺酮类、二代、三代头孢菌素类、 氨基糖苷类敏感率较高，但须对奇异变 形杆菌进行ESBLs监测。
微生物学检验
2.分离培养 血液和穿刺液先增菌 选择培养基 迁徙生长菌落
微生物学检验
3.生化鉴定 可疑菌落接种KIA、 IMViC 、MIU及苯丙氨
酸琼脂作初筛试验。 普通变形杆菌和奇异变形杆菌主要区别试
验是吲哚和鸟氨酸脱羧酶
微生物学检验
4.鉴别试验 知道普罗威登斯菌属和摩根菌属的鉴别
生物学性状
四、抗原构造 三个菌属主要抗原有O、H、K三类抗原 特殊抗原：OX19、OX2、OXK与立克次体 有共同抗原成分，可发生交叉反应，提取 上述类型变形杆菌的O抗原代替立克次体 的抗原，与患者血清进行凝集，此试验可 辅助诊断立克次病，即外斐试验。
1812年，法俄战争
微生物学检验
1.显微镜检查：革兰染色，镀银染色
变形杆菌属
普通、奇异、产黏和潘氏变形四种
生物学性状
一、形态染色： G-杆菌、无芽胞、
有菌毛、周鞭毛，运 动活泼。
生物学性状
生物学性状
二、培养特性 在营养琼脂和血平
板上普通变形杆菌和 奇异变形杆菌的大多 数菌株呈迁徙生长。
生物学性状
生物学性状
三、生化反应 不发酵乳糖KIA：KA++ 奇异变形IMViC:-+-普通变形IMViC：++-奇异变形MIU：+-+ 普通变形MIU：+++ 苯丙氨酸阳性
变形杆菌的硫化氢实验结果
变形杆菌的硫化氢实验结果
一、实验目的
1、了解细菌生理生化反应原理，掌握细菌鉴定中常用的生理生化反应的测定方法；
2、通过不同细菌对不同含碳、含氮化合物的分解利用情况，了解细菌碳、氮硫化氢的多样性；
3、了解细菌在培养基中的生长现象及其代谢产物在鉴别细菌中的意义；
4、学习各种接种技术。
二、实验原理
1、各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质分解能力也不一样，因而代谢的产物存在差别。
2、细菌的这种代谢特点可供鉴别细菌之用。
（具体原理略）
3、用生理生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的种属，称之为细菌的生理生化反应。
三、实验器材
1、仪器和用具
恒温培养箱。
试管：每个试验4根试管(3根接种，1根对照)。
接种环、接种针、酒精灯、试管架、记号笔、打火机、杜氏小管。
2、微生物
大肠杆菌（Escherichia coli）、变形杆菌（Proteus vulgaris）、枯草杆菌（Bacillus subtilis）、产气杆菌（Enterobacter aerogenes）和未知菌S3的各自悬液。
3、试剂
甲基红试剂、V、P、试剂、吲哚试剂。
上次配制的试管培养基（葡萄糖/乳糖发酵培养基，葡萄糖蛋白胨水培养基，胰蛋白胨水培养基，硫化氢试验培养基，明胶液化培养基，柠檬酸盐培养基），淀粉培养基平板。
四、实验结果：
变形杆菌：发酵葡萄糖，不发酵乳糖，迅速分解尿素，硫化氢阳性或阴性，产酸不产气。
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变形杆菌检验
变形杆菌（Proteus）在自然界分布极广，人和动物的粪便带菌很高，各类食品及用具等均可检出，虽是常见的腐生细菌，但在严重污染的食物中，通过生长繁殖后，可使食物含有大量此菌，食入后亦易引起食物中毒。
对此菌的实验室诊断，主要是根据生物学特性进行鉴别，也可以用血清学分型，但目前变形杆菌因子血清在国内应用尚不普遍，其检验程序一般是按肠道细菌检验方法进行。
一、检验方法
（一）操作步骤
1. 取被检样品25g，加225mL灭菌盐水，用均质器打碎或用乳钵磨碎，接种在SS琼脂平板和EMB琼脂平板上，经37℃、培养18~24h，普通变形杆菌和奇异变形杆菌在弱选择性的固体培养基上可出现菌落蔓延生长的特点，SS琼脂能抑制其蔓延生长，呈单个菌落。
其他变形杆菌呈半透明圆形菌落。
2. 挑取上述可疑菌落，接种三糖铁斜面培养基，经37℃、24h培养后，斜面产碱不变，底层产酸变黄，多数产少量气体，有的产硫化氢或不产硫化氢者均为可疑反应。
3. 将三糖铁斜面上可疑反应的培养物做尿素酶试验和涂片革兰氏染色镜检。
4. 对尿素酶阳性的革兰氏阴性杆菌，根据生化特性进行分型鉴定。
必要时做血清分型。
（二）检验程序
表9-1变形杆菌检验程序
二、结果分析判定
（一）形态
革兰氏阴性杆菌，形态大小很不一致，有明显的多形性，约为1~2μm×0.1-0.5ｕm，有周身鞭毛，不产生芽胞，无荚膜。
（二）培养特性
生长条件与其他肠道细菌相同，一般培养基都能生长，有动力，运动活泼，普通变形杆菌和奇异形杆菌在湿润的普通琼脂培养基上和血琼脂平板上都能蔓延生长（或称游散生长），在选择性较弱的如EMB培养基，不能抑制其蔓延生长，在选择性较强的SS琼脂和DC琼脂培养基上能受到抑制，呈现单个菌落。
莫尔根变形杆菌和雷极变形杆菌呈半透明、圆形、光滑菌落，如果在1％琼脂上或经多次移种之后，莫尔根变形杆菌也可看到蔓延生长现象。
（三）生化特性
根据变形杆菌属的生化学性状分为：普通变形杆菌（P.Vulgaria）、奇异变形杆菌（P.mirabilis）莫尔根变形杆菌（P.morganii）和雷极变形杆菌（P.rettgeri），共同的生化学性状为：均能迅速水解尿素，苯丙氨酸脱氨酶阳性，赖氨酸脱羧酶阴性，精氨酸阴性，不利用丙二酸盐，能在含氰化钾（KCN）的肉汤内生长，均不分解乳糖、棉子糖、纤维二糖、阿拉伯糖、卫矛醇、山梨醇。
葡萄糖产酸，可产生少量的气体（产气量一般占倒管的10％~15％），有少数菌株不产气。
分解糖类的能力较弱，一般只能发酵少数几种糖类，普通变形杆菌和奇异变形杆菌能迅速而丰富的产生大量硫化氢，液化明胶，而莫尔根变形杆菌和雷极变形杆菌无此特征。
奇异变形杆菌和莫尔根变形杆菌能使鸟氨酸脱羧，雷极变形杆菌的绝大多数菌株能发酵甘露醇，但其余种别则不能。
变形杆菌的主要生化学性状见表9-1，变形杆菌族生化试验的鉴别可参考表9-2。
注：＋90％以上为阳性；－90％以上为阴性；＋或－大部分菌株为阳性，偶有少数菌株为阴性；－或＋大部分菌株为阴性，偶有少数菌株为阴性；＋或（＋）大部分菌株阳性，有少数菌株迟缓阳性；d有不同的反应[＋，（＋），－]。
表9-2 变形杆菌族生化试验的鉴别
注：变形杆菌属和普罗菲登斯菌属产气量少（一个小气泡为10％~15％）。
（四）血清学
对变形杆菌各个种别的血清学研究，Perch氏（1948，1950）曾对普通变形杆菌和奇异变形杆菌建立了一个抗原表，提出了49和O抗原群和19个鞭毛抗原。
Rauss和V oros（1936，1959）建立了莫尔根变形杆菌的抗原表，该表有29和O群，19个H抗原和57个血清型。
Namioka和Sakazaki二氏（1958）对雷极变形杆菌建立的抗原表，有34个O抗原样，26个鞭毛抗原和45个血清型。
能用O和H因子血清做玻片凝集试验以确定其型别。
但由于变形杆菌的因子血清在国内尚未供应，目前还不能普遍应用，一般仅采用生化学试验进行鉴别。
为证实从不同样品中分离的变形杆菌是否为同一菌型时，最好是用血清学的方法进行分型，但在没有因子血清的情况下，也可采用以下几种方法试验。
1. 凝集试验：用两株菌的免疫血清与两株细菌作交叉凝集试验，测定交叉凝集效价，观察两菌是否相同。
2. 吸收试验：用两株菌的免疫血清与两株细菌做相互交叉吸收试验，观察是否将血清中的凝集素完全吸除，确定两株细菌的抗原是否相同。
3. 拮抗试验：将两株不同来源分离的菌株点种在普通琼脂平板或血琼脂平板上，经37℃、24h后观察结果，在两株细菌菌落交界处出现明显的分界线时，为菌株不同出现拮抗现象（即称为Dienes现象）。
如果菌株相同时，菌株之间无拮抗现象产生，两株细菌的菌落可以融合在一起。
但应注意也有少数例外。
（五）菌数测定方法
目前，尚没有较好的方法准确测定变形杆菌对食品污染的程度，仅可初步了解样品中大概含量供参考。
可将磨碎的样品悬液，用无菌盐水稀释成不同稀释度（1:100，1:1000，1:10000…等），每个稀释度取0.1mL接种在琼脂斜面底部的凝固水中，经37℃、24h培养后，观察由下向上蔓延生长的最高稀释度，乘以10即为每克标本变形杆菌的最近似数。
三、培养基
变形杆菌的培养条件与其他肠道细菌基本相同，所用有关培养基的制备方法，如SS琼脂、EMB琼脂、三糖铁琼脂、尿素酶试验及各种生化学试验用培养基等，均可参照第三章培养基部分进行。