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抗氧化物活性测定方法总结

抗氧化物活性测定方法总结

抗氧化物活性测定方法总结抗氧化物活性测定方法是通过对样品中的抗氧化物质含量和抗氧化活性进行定量分析,评估其对自由基的清除能力和抗氧化能力。

随着抗氧化研究的不断深入,测定方法也逐渐完善。

以下是对常见的抗氧化物活性测定方法的总结。

1. ORAC法(氧化应激反应活性测定法):该方法通过测定样品清除自由基的能力来评估其抗氧化活性。

实验中,将样品与荧光试剂(如2,2'-azobis(2,4-dimethylvaleronitrile))共同作用,观察其清除自由基的能力,并通过建立标准曲线计算样品的ORAC值。

2.DPPH法(1,1-二苯基-2-苦味基-苦味酸磷):该方法是一种常用的快速测定抗氧化活性的方法。

实验中,将样品与DPPH稳定自由基共同作用,通过比色反应观察DPPH自由基被样品清除的程度,从而评估抗氧化活性。

3.ABTS法(2,2'-联氮双5-苯砜酸):该方法通过ABTS离子自由基的生成和清除反应来测定样品的抗氧化活性。

实验中,ABTS与过氧化氢反应生成ABTS离子自由基,通过观察样品对其的清除能力来评估抗氧化活性。

4.FRAP法(亚铁离子还原能力):该方法基于样品对人造抗坏血酸(Fe3+)的还原能力,通过测量还原后的Fe2+离子的生成量来评估抗氧化活性。

实验中,将样品与Fe3+离子反应生成Fe2+离子,通过比色反应来测定Fe2+的含量。

5. 碘标法(Iodine value):该方法用于测定油脂、脂肪等样品的抗氧化活性。

实验中,将已知量的碘与样品中的不饱和化合物反应,在光反应下观察反应终点的颜色变化,并根据标准曲线计算样品的抗氧化活性。

6. 硝酸盐法(Nitrite method):该方法用于测定样品中亚硝酸盐的含量,从而评估其抗氧化活性。

实验中,样品经过还原反应生成亚硝酸盐,然后与DANO(N-乙基-N-(2-苯基乙基)-对硝基苯胺)反应生成稳定的偶氮染料,通过比色测定反应终点的吸光度来计算样品中亚硝酸盐的含量。

食品成品中抗氧化活性的检测方法研究

食品成品中抗氧化活性的检测方法研究

食品成品中抗氧化活性的检测方法研究引言食品中的抗氧化活性是食品质量和营养价值的一个重要指标。

抗氧化活性不仅可以延缓食品的衰老和品质变化,还可以对抗自由基的损害,减少慢性疾病的发生风险。

因此,对食品抗氧化活性进行准确的检测具有重要意义。

本文将介绍常用的食品成品中抗氧化活性的检测方法,并对其优缺点进行分析。

一、化学法化学法是一种常见的食品抗氧化活性检测方法,常用的化学法有DPPH法、抗坏血酸法和总酚法等。

这些方法主要通过与氧化剂反应产生颜色变化或电子转移来评估食品中的抗氧化能力。

其中,DPPH法是一种简单易行的方法,通过检测食品成品中抗氧化剂与DPPH自由基发生反应时产生的颜色变化程度来判断样品的抗氧化活性。

抗坏血酸法则是通过检测食品样品中抗坏血酸的含量来评估其抗氧化活性。

总酚法是通过测量食品中的总酚含量来确定其抗氧化能力。

这些方法简便易行,且成本较低,是常用的食品抗氧化活性检测方法。

然而,化学法也存在一些局限性。

首先,这些方法只能评估样品中某一种抗氧化剂的抗氧化活性,不能全面评估样品的整体抗氧化能力。

其次,由于食品中存在多种复杂的化合物,这些方法往往无法准确区分其中的抗氧化剂。

因此,在实际应用中需要结合其他方法进行综合分析。

二、生物法生物法是近年来新兴的食品抗氧化活性检测方法,涉及到生物学方面的研究。

生物法的一种常见方法是细胞实验法,利用细胞对氧化应激的响应来评估食品中的抗氧化活性。

这种方法可以模拟人体内的环境,较好地反映食品对于人体健康的实际影响。

例如,使用人体肝细胞株进行细胞实验,通过测量细胞存活率、ROS产生水平等指标来评估样品的抗氧化能力。

生物法的主要优势在于可以全面评估样品的整体抗氧化能力,且具有较好的生物学意义。

然而,生物法也存在一些限制。

首先,该方法在实验操作上较为繁琐,需要较长的实验时间。

其次,细胞实验法所涉及的细胞株选择和实验条件的控制都会对结果产生影响,需要进行更多的标准化工作。

抗氧化活性检测方法的研究进展

抗氧化活性检测方法的研究进展

抗氧化活性检测方法的研究进展抗氧化活性是指抵抗自由基或氧化物对生物体细胞的损害能力,具有重要的生物学和医学意义。

因此,研究抗氧化活性的检测方法对于评价抗氧化剂的活性和开发新的抗氧化剂具有重要意义。

随着科技的发展,研究人员不断提出新的抗氧化活性检测方法,以满足不同的需求。

本文将对抗氧化活性检测方法的研究进展进行综述。

目前,常用的抗氧化活性检测方法主要包括化学法、生物学法和电化学法。

化学法是最早发展的抗氧化活性检测方法之一,其原理是通过测定抗氧化剂与氧自由基或氧化物的反应程度来评估其抗氧化活性。

常用的化学法包括DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基法、ABTS(2,2'-联氨基二(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸))自由基法和Folin-Ciocalteu法。

DPPH 自由基法是一种简单、快速的测定方法,但其对抗氧化剂的浓度敏感,且不能区分氧化还原反应和酸碱中和反应。

ABTS自由基法是一种灵敏度较高的测定方法,但其对抗氧化剂的浓度也很敏感。

Folin-Ciocalteu法是一种测定总抗氧化能力的方法,但其结果可能受到样品的颜色和浊度的影响。

生物学法是通过测定抗氧化剂对生物体内氧自由基或氧化物的清除能力来评估其抗氧化活性。

常用的生物学法包括超氧化物歧化酶(SOD)活性测定法、还原力测定法和DNA损伤抑制法。

SOD活性测定法是一种常用的测定方法,其原理是通过测定抗氧化剂对超氧阴离子的清除能力来评估其抗氧化活性。

还原力测定法是一种简单、快速的测定方法,其原理是通过测定抗氧化剂对还原剂的还原能力来评估其抗氧化活性。

DNA损伤抑制法是一种测定抗氧化剂对DNA氧化损伤的抑制能力的方法,但其结果受到DNA浓度和pH值的影响。

电化学法是一种新兴的抗氧化活性检测方法,其原理是通过测定抗氧化剂在电化学系统中的电化学反应来评估其抗氧化活性。

常用的电化学法包括循环伏安法、方波伏安法和差分脉冲伏安法。

循环伏安法是一种常用的测定方法,其原理是通过测定抗氧化剂在电极上的氧化还原过程来评估其抗氧化活性。

火炭母有效成分的提取及抗氧化活性研究

火炭母有效成分的提取及抗氧化活性研究

火炭母有效成分的提取及抗氧化活性研究黄国霞;刘柳;汪青;黄姿梅【摘要】In order to study the antioxidant activity,the effective components in Polygonum chinense L. Were extracted by ultrasonic auxiliary method, and the antioxidant activity was detecminated by H2O2/Fe2 + system and adjacent pyrogallol system. The results showed that the extracted liquid had higher antioxidant activity when the volume ratio of methanol and water was 1∶ 1. The effect of 40g raw materials was almost equal to 6.29 g vitamine C for the removal of hydroxyl radicals, and equal to 9.82 g vitamin C for the removal of superoxide anion.%为了探讨火炭母(Polygonum chinense L.)有效成分的抗氧化作用,采用超声波辅助手段对火炭母中的有效成分进行了提取,并用H2O2/Fe2+体系法和邻苯三酚体系法对其抗氧化活性进行了研究.结果表明,当采用甲醇与水体积比为1:1混合液为提取溶剂时,火炭母提取液具有较高的抗氧化活性,40 g原材料的提取液对羟自由基的清除效果与6.29 g维生素C 的作用相当,而对超氧阴离子的清除效果与9.82g维生素C的作用相当.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2011(050)012【总页数】3页(P2490-2492)【关键词】火炭母;抗氧化;羟自由基【作者】黄国霞;刘柳;汪青;黄姿梅【作者单位】广西工学院生物与化学工程系,广西柳州545006;广西工学院生物与化学工程系,广西柳州545006;广西工学院生物与化学工程系,广西柳州545006;柳州职业技术学院汽车与环境工程系,广西柳州545006【正文语种】中文【中图分类】Q949.744;R284.2火炭母(Polygonum chinense L.)为蓼科(Polygonaceae)植物,生长于水沟边、山谷、湿地上,具有清热利湿、凉血解毒等功效,可用于湿热泄泻、痢疾、黄疸、咽喉肿痛、湿热疮疹、霉菌性阴道炎等病症的治疗[1],是广东地区常用的中草药。

抗氧活性的测定

抗氧活性的测定

园艺科学研究方法——园艺植物育种研究Ⅱ抗氧活性的测定 一、实验目的:1、掌握FRAP 法测抗氧化活力的方法;2、常见水果、蔬菜的抗氧化能力比较。

二、实验原理:Ferric-tripyridyltriazine(Fe3+-TPTZ)三、仪器、耗材:离心机、离心管、离心管,移液器、分光光度计、水浴锅、塑料比色杯、试剂瓶,吸水纸,枪头、量筒、大研钵; 苹果、青椒、葡萄、胡萝卜、番茄、芒果。

四、实验内容:1.不同果、蔬抗氧化物质的提取用自来水、蒸馏水反复冲洗干净后,分离果肉称取1~5 g ,在研钵内按1:9比例加入蒸馏水,研磨成匀浆液,10 000 r /min 离心10 min ,取上清按下述FRAP 法测定抗氧化活性,每份样品重复测定5次。

2.FRAP 测定方法操作Fe2+-TPTZ 样品中总抗氧化能力抗氧化剂antioxidant 593nm 测定取适量样品上清(必要时稀释),加入FRAP试剂,混匀后37℃反应10 min,593 nm 测定吸光度,以1.0 mM FeSO4为标准.样品抗氧化活性以达到同样吸光度所需的FeSO4的毫摩尔数表示。

(1)FRAP试剂准备100 ml醋酸缓冲液+ 10 ml TPTZ溶液+ 10 ml三氯化铁溶液+ 12 ml双蒸水,混匀,37℃保温。

(1)2 ml FRAP试剂+双蒸水1 ml,4 min后593 nm调零。

(2)2 ml FRAP试剂+100 ul 提取液+双蒸水900 ul,4 min后593nm 测量。

五、数据整理:三次重复的不同浓度Fe2+对应的吸光度Fe2+浓度(mM)吸光度(A) 平均值(A)第一次第二次第三次1.0 1.181 1.182 1.177 1.180 0.8 1.198 1.196 1.185 1.193 0.6 1.195 1.192 1.185 1.191 0.4 1.167 1.168 1.163 1.166 0.2 1.006 1.021 1.009 1.012 0.1 0.631 0.620 0.623 0.625 各种材料FRAP法抗氧化活性的测定重测量值一测量值二测量值三平均值(A) 抗氧化活性种类青椒 1.170 1.294 1.257 1.240 >1.00胡萝卜0.266 0.366 0.456 0.363 0.04苹果0.912 1.039 1.011 0.987 0.16葡萄0.739 0.703 0.729 0.724 0.12番茄 1.021 1.012 1.034 1.022 0.21芒果 1.071 1.069 1.067 1.069 0.23六、结果分析由表格得,胡萝卜的抗氧化活性最低,青椒的抗氧化活性最高。

多糖抗氧化活性研究

多糖抗氧化活性研究

多糖抗氧化活性研究引言:近年来,抗氧化活性成为了食品、保健品和医药领域研究关注的焦点之一、氧化过程会导致细胞膜的损伤、DNA的断裂及功能性蛋白质的氧化,进而导致各种疾病的发生。

因此,发现和开发具有抗氧化活性的天然产物成为了研究者们的目标之一多糖作为一种具有广泛生物活性的天然产物,在抗氧化活性方面表现出了巨大的潜力。

多糖具有特殊的结构和化学性质,因此被认为是一种重要的天然抗氧化剂。

材料与方法:在本次研究中,我们从植物中提取了多糖,并对其抗氧化活性进行了评估。

提取多糖的方法是首先将植物切碎,然后使用特定溶剂进行提取。

提取得到的多糖溶液经过浓缩和干燥,最终得到多糖粉末。

抗氧化活性的评估主要采用了自由基清除能力和铁离子螯合能力这两种方法。

自由基清除能力的测定使用了DPPH(2,2-二苯基-1-苦基肼)自由基清除实验,原理是通过测定多糖对自由基DPPH的清除能力来评估其抗氧化活性。

铁离子螯合能力的测定使用了FER(铁离子还原力)方法,通过观察多糖对Fe3+的还原能力来评估其抗氧化活性。

结果与讨论:我们发现,提取得到的多糖具有较强的抗氧化活性。

在DPPH自由基清除实验中,多糖对DPPH的清除率在100μg/mL浓度下达到了80%以上。

在铁离子还原力实验中,多糖对Fe3+的还原能力也较强,对不同浓度的Fe3+产生了不同程度的还原作用。

多糖的抗氧化活性可能与其特殊的结构和化学性质有关。

多糖中富含的羟基、羟乙基和酚羟基等官能团可以与自由基发生反应,抑制自由基的活性。

此外,多糖还具有一定的金属螯合能力,可以与金属离子发生配位反应,从而减少金属离子对氧自由基的促进作用。

结论:本研究表明,从植物中提取得到的多糖具有较强的抗氧化活性。

多糖可能通过清除自由基和螯合金属离子等机制发挥其抗氧化活性。

多糖的抗氧化活性为其在食品、保健品和医药领域的应用提供了新的理论基础。

然而,还有许多方面需要进一步研究。

首先,需要进一步探究多糖的抗氧化活性与其结构和化学性质之间的关系。

银杏多糖的提取与抗氧化活性研究

银杏多糖的提取与抗氧化活性研究

银杏多糖的提取与抗氧化活性研究随着人们对健康意识的提高,寻求食品中营养的方法正变得越来越流行。

寻求天然物质潜在健康效益的方法已成为许多研究人员的热门方向。

银杏多糖是一种营养成分,近年来受到越来越多的研究关注。

本文将探讨银杏多糖的提取方法和抗氧化活性研究。

银杏多糖的提取方法银杏多糖是一种由多种单糖组成的多糖类物质。

多糖类物质因结构复杂,提取困难,使银杏多糖的提取成为研究的难点之一。

幸运的是,许多研究已经开发出了有效的提取方法。

水提取法是当前最常用的银杏多糖提取方法之一。

在水下加热、搅拌和超声波等条件下,银杏叶片和其他部位的粉末可以被高效提取出来。

给水基质添加离子液体也是一种提取银杏多糖的方法。

离子液体能够形成有利于银杏多糖提取的介质环境并提高提取率。

另一种常用的提取方法是酶解法。

利用酶解方法可获得较高纯度的银杏多糖。

酶解剂作为一种降解分子结构的酶,较为特异性地针对链胡萝卜素等,具备选择性和高效性。

酶解法根据研究机构不同,可采用弱碱性、多酶、高温、超声波等条件,同时可通过酯化等化学修饰手段,实现打开或拆分银杏多糖的链式结构,使其性质和用途更多样化。

抗氧化活性的研究许多研究已经证明,银杏多糖中含有大量的多糖类物质,且这些多糖类物质具有很强的抗氧化活性。

这一发现提示着银杏多糖的潜在增强健康和预防疾病的效益。

近年来,有数不清的研究证实了银杏多糖的抗氧化活性,并推测了其对有害细胞和慢性疾病的保护作用。

实验表明,银杏多糖可以通过增强人体免疫系统的功能来保护人体健康。

多项研究发现,银杏多糖有着可以增加白细胞数量的效果,这有助于预防各种器官感染和疾病发生。

抗氧化能力已证实为保护人类健康的重要因素之一。

抗氧化效应可以通过银杏多糖的多糖成分来实现。

银杏多糖可以通过消除自由基等方式,减轻慢性疾病或衰老因素引起的细胞氧化损伤。

在多项相关研究中也发现,银杏多糖能够通过保护DNA修复过程和恢复基因表达,来保障细胞稳健的自我修复功能。

抗氧化活性研究方法

抗氧化活性研究方法

抗氧化活性研究方法引言:氧化反应是指分子或原子失去电子,而还原反应是指分子或原子获得电子。

由于氧化反应产生的自由基具有高度活性,能够对细胞结构和功能造成损害,导致多种疾病的发生。

因此,研究抗氧化活性及其机制对于预防和治疗这些疾病具有重要意义。

本文将介绍几种常用的抗氧化活性研究方法。

一、DPPH自由基清除能力测定法DPPH自由基清除能力测定法是一种常用的抗氧化活性测定方法。

DPPH(2,2-二苯基-1-苦味肼)是一种紫色自由基,其颜色随着氧化程度的增加而减弱。

在该方法中,将待测样品与DPPH溶液混合,通过测定混合液的吸光度变化来评估样品的抗氧化活性。

抗氧化活性强的样品能够清除DPPH自由基,使其浓度降低,从而导致吸光度的下降。

二、还原能力测定法还原能力测定法是通过测定待测样品对还原剂的还原能力来评估其抗氧化活性。

常用的还原剂包括铁离子、铜离子等。

在该方法中,将待测样品与还原剂混合,通过测定混合液的吸光度变化或还原剂浓度的变化来评估样品的抗氧化活性。

抗氧化活性强的样品能够还原还原剂,使其浓度降低,从而导致吸光度的下降或还原剂浓度的降低。

三、氧化脂质抑制能力测定法氧化脂质抑制能力测定法是通过测定待测样品对氧化脂质的抑制能力来评估其抗氧化活性。

常用的氧化脂质包括脂肪酸、脂肪油等。

在该方法中,将待测样品与氧化脂质混合,通过测定混合液中脂质的氧化程度来评估样品的抗氧化活性。

抗氧化活性强的样品能够有效抑制氧化脂质的形成。

四、超氧阴离子清除能力测定法超氧阴离子是一种常见的自由基,具有较高的活性。

超氧阴离子清除能力测定法是通过测定待测样品对超氧阴离子的清除能力来评估其抗氧化活性。

常用的超氧阴离子产生体系包括NBT(硝基蓝盐)-NADH(尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸)体系、XTT(二苯基四唑盐)体系等。

在该方法中,将待测样品与超氧阴离子产生体系混合,通过测定混合液的吸光度变化来评估样品的抗氧化活性。

抗氧化活性强的样品能够有效清除超氧阴离子,使其浓度降低,从而导致吸光度的下降。

艾叶中总黄酮的提取及其抗氧化活性研究

艾叶中总黄酮的提取及其抗氧化活性研究

艾叶中总黄酮的提取及其抗氧化活性研究艾叶是常用的中药材之一,其具有多种药理活性,如抗氧化、抗肿瘤、治疗高血压等。

其中,艾叶中的总黄酮是一种重要的活性成分,具有较强的抗氧化活性。

因此,提取艾叶中的总黄酮,并研究其抗氧化活性,对于探索艾叶的药理作用具有重要意义。

一、艾叶中总黄酮的提取方法1. Sohxlet提取法将粉碎的艾叶样品放入芦笼中,加入乙醇和水的混合溶液,进行Sohxlet提取,直至提取液中没有可见的黄色物质为止。

然后进行浓缩和溶剂去除,得到艾叶总黄酮。

2. 超声波提取法将粉碎的艾叶样品放入贝克瓶中,加入乙醇和水的混合溶液,进行超声波提取,直至提取液中没有可见的黄色物质为止。

然后进行浓缩和溶剂去除,得到艾叶总黄酮。

二、艾叶中总黄酮的抗氧化活性研究方法1. DPPH自由基清除法将一定量的DPPH溶液与一定量的样品溶液混合,放置一段时间后,测量混合液的吸光度,并将其与DPPH自由基的吸光度进行比较,计算出样品对DPPH自由基的清除率,从而评估其抗氧化活性。

2. 过氧化氢清除法将一定量的过氧化氢溶液与一定量的样品溶液混合,放置一段时间后,测量混合液的吸光度,并将其与过氧化氢的吸光度进行比较,计算出样品对过氧化氢的清除率,从而评估其抗氧化活性。

三、艾叶中总黄酮的研究结果通过Sohxlet提取法和超声波提取法分别提取艾叶中的总黄酮,并将两种提取方法得到的总黄酮进行比较,结果表明超声波提取法的提取效率更高,提取得到的总黄酮含量也更高。

通过DPPH自由基清除法和过氧化氢清除法对艾叶总黄酮的抗氧化活性进行了研究,结果表明艾叶总黄酮具有较强的抗氧化活性,可以清除自由基并保护细胞免受氧化损伤。

综上所述,艾叶中的总黄酮是一种重要的抗氧化成分,具有良好的应用前景。

本研究通过比较不同提取方法和不同抗氧化活性测定方法,为深入探索艾叶的药理作用提供了一定的基础。

雪莲果叶提取物的抗氧化活性研究

雪莲果叶提取物的抗氧化活性研究

雪莲果叶提取物的抗氧化活性研究袁晓艳;张峰【摘要】目的对雪莲果叶进行提取分离,并对提取物及萃取各部位进行抗氧化活性测试,将雪莲果叶发展成为抗氧化植物源.方法以70%的乙醇溶剂对雪莲果叶进行提取,提取液减压浓缩后依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行分步萃取,获得雪莲果叶总提取物及石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水留层5个极性不同的部位.分别测定5个部位的总酚酸含量、DPPH自由基消除活性、ABTS+自由基消除活性、羟基自由基消除活性.结果雪莲果叶乙酸乙酯部位的总酚酸含量最高,达(29.93 ±0.31) mg/g,对自由基清除活性最强,清除DPPH、ABTS+及羟基自由基的SC50值分别为(37.96±0.43、29.46±1.05、1.67±0.03)μg/mL,活性高于(P<0.05)常用人工合成抗氧化试剂2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(butylated hydroxytoluene,BHT).结论雪莲果叶具有抗氧化活性的成分主要集中于乙酸乙酯部分,酚酸是其具有抗氧化活性的主要原因.【期刊名称】《遵义医学院学报》【年(卷),期】2016(039)005【总页数】4页(P483-486)【关键词】雪莲果;叶片;抗氧化活性;提取;分离【作者】袁晓艳;张峰【作者单位】遵义医学院药学院分析化学教研室,贵州遵义563099;遵义医学院药学院分析化学教研室,贵州遵义563099【正文语种】中文【中图分类】R284雪莲果(Smallanthus sonchifolius),为菊科(Asteraceae)向日葵属(Helianthus)多年生草本植物,又称雪莲薯、亚龙果、亚贡,原产于南美的安第斯山区,后引入日本和欧洲一些国家,当前在我国海南、台湾、云南、贵州、江苏、福建、湖南、湖北等地少量种植[1]。

雪莲果是传统的根茎食品,至今已有500年的食用史,被认为是可缓解糖尿病、肠道功能紊乱等多种慢性疾病的药食两用植物之一,民间用雪莲果叶加工成茶,冲泡饮用,有降血糖、预防动脉粥样硬化的功效[2-3]。

金银花多糖抗氧化活性研究

金银花多糖抗氧化活性研究
1 材 料 与 方 法
1.1 仪 器
RE一52AA 旋转 蒸 发仪( 海 亚 荣仪器 厂‘),THM5 I1 l 9300全波 长酶 标分 析仪(荚 围 Thermo Fisher Scientif ic公司),BS2lOS电 f
天平(北京 Sartorious公 州),HH一6数 显恒 温水 浴 (金坛 巾 疗 仪 器J一),冷 冻 f燥机(德 Christ)。 1.2 药 材 与 试 剂
金银 仡(Lonicera Japonica)购 自中草 药 市场 ,烘干 至恒 簖川 :
无水 乙醇 、二吡 啶三 吖嗪(tripyridyl—triazine,TPTZ,Aladdin1、1, 1 二苯 基 2一三 硝 瑟苯肼 (1一diphenyl一2一picryhygrazyl,DPPH)、2,2’一
Abstract:Objective:To in;estigate the antioxidant aclivity of honeysuckle p0lysaccharides in vitro M ethods:The p0lysaccha rides of honeysuckle were
Keyw ords:honeysuckle; p0lysaccha ride; antioxidant
金 银花(Lonicera Japonica)又称为 忍 冬花 、金花 、银 花等 ,足 忍冬 科植 物 忍冬 的干燥 花 蕾或带 初 开的 花[i。]。金银 花 的主要 成分 为黄 酮 类 、有机 酸类 、多l椭 、三萜 化合 物 等 ,其主 要 的药理 作用
purif ied by Sevage m ethod after w ater extraction.The content of p0lvsaccharides was determ ined by pheno1.sulfuric acid method The antioxidant capacity of

通过细胞模型体外评价抗氧化活性实验方法研究综述

通过细胞模型体外评价抗氧化活性实验方法研究综述

通过细胞模型体外评价抗氧化活性实验方法研究综述源瀚祺;黄庆华;李娆玲【摘要】对抗氧化活性的细胞筛选实验方法进行综述,重点介绍了目前常用的细胞氧化应激损伤模型及其应用,并总结了构建该模型的细胞选择和氧化受损细胞的药效检测方法,为选择合适的抗氧化活性的细胞筛选实验提供参考.%This paper summarizes the methods for screening of the cellular antioxidant activity, and highlights the current cellular oxidative stress models and its application. Cell selection and oxidative injury examination were also discussion. The article aims to provide better references for perfecting the cellular antioxidant activity assay.【期刊名称】《广东药学院学报》【年(卷),期】2012(028)002【总页数】4页(P208-211)【关键词】氧化应激;细胞模型;抗氧化活性【作者】源瀚祺;黄庆华;李娆玲【作者单位】广东药学院药科学院,广东广州510006;广东药学院药科学院,广东广州510006;广东药学院药科学院,广东广州510006【正文语种】中文【中图分类】R965.1机体内正常生理活动过程中都有氧化活性物质参与的氧化反应,但当机体或细胞内的氧自由基(ROS)及其诱发产生的新自由基超出自身的抗氧化能力,或外源性氧化物质的过量摄入,就会导致氧自由基在细胞内过量蓄积而引发氧化应激的状态[1]。

人体内自身存在自由基清除系统可维持氧自由基的动态平衡[2]。

但随着年龄的增长,清除系统功能减退,氧自由基产生增加,加速了机体的衰老性变化[3],同时可能导致心血管疾病、糖尿病、癌症及神经性疾病的产生[4-6]。

真菌多糖的抗氧化活性研究

真菌多糖的抗氧化活性研究

真菌多糖的抗氧化活性研究杨岚;邱树毅;卢卫红【摘要】机体在生命活动的氧化代谢过程中不断产生各种活性氧自由基(ROS),ROS容易损伤机体内的组织,从而引发各种各样的疾病.大量的研究表明,大部分从自然界物质中分离获得的多糖类化合物具有抑制脂质过氧化和清除自由基等抗氧化作用.通过本次实验,研究了黑木耳、香菇多糖的抗氧化活性.结果表明:黑木耳多糖、香菇多糖都具有一定的体外抗氧化能力,其中香菇多糖具有较强的清除羟基自由基(·OH)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)的作用;并且黑木耳、香菇多糖也具有一定的体内抗氧化活性,均能不同程度的提高血清和肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)活力以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,可以减少肝脏和血清中丙二醛(MDA)含量,增强心脏过氧化物酶(POD)活力以及减少全脑单胺氧化酶(MAO)活力.%The body produces a variety of reactive oxygen species (ROS) in the oxidative metabolism of life activities.ROS can damage tissue in the body and cause several of diseases.A large number of studies proved that a large number of polysaccharides isolated from natural products can scavenge free radicals,inhibit lipid peroxidation,and inhibit linoleic acid oxidation and so on.The antioxidant activities of Auricularia auricula polysaccharide and Letinous edodes polysaccharide were studied in this paper.Auricularia auricula polysaccharide and Letinous edodes polysaccharide have a certainly in vitro and in vivo antioxidant capacity.Letinous edodes polysaccharide has stronger a bility to scavenge DPPH · and hydroxyl radicals.Auricularia auricula polysaccharide and Letinous edodes polysaccharide can increase SOD activity and GSH-Px activity in serum andliver,reduce MDA content in serum and liver,decrease MAO activity of whole brain and increase cardiac POD activity.【期刊名称】《贵州师范大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2017(035)004【总页数】6页(P95-99,119)【关键词】真菌多糖;活性氧自由基;体外抗氧化;体内抗氧化【作者】杨岚;邱树毅;卢卫红【作者单位】贵州大学酿酒与食品工程学院,贵州贵阳550025;哈尔滨工业大学化工与化学学院,黑龙江哈尔滨 150090;贵州大学酿酒与食品工程学院,贵州贵阳550025;哈尔滨工业大学化工与化学学院,黑龙江哈尔滨 150090【正文语种】中文【中图分类】O629.12;Q503Highlights: The body produces a variety of reactive oxygen species (ROS) in the oxidative metabolism of life activities. ROS can damage tissue in the body and cause several of diseases. A large number of studies proved that a large number of polysaccharides isolated from natural products can scavenge free radicals, inhibit lipid peroxidation, and inhibit linoleic acid oxidation and so on. The antioxidant activities of Auricularia auricula polysaccharide and Letinous edodes polysaccharide were studied in this paper. Auricularia auricula polysaccharide and Letinous edodes polysaccharide have a certainly in vitro and in vivo antioxidant capacity.Letinous edodes polysaccharide has stronger ability to scavenge DPPH· and hydroxy l radicals. Auricularia auricula polysaccharide and Letinous edodes polysaccharide can increase SOD activity and GSH-Px activity in serum and liver, reduce MDA content in serum and liver, decrease MAO activity of whole brain and increase cardiac POD activity. 生物体在新陈代谢过程中,会不断地产生各种活性氧自由基(ROS)。

植物化学物质与抗氧化研究的方法探索

植物化学物质与抗氧化研究的方法探索

植物化学物质与抗氧化研究的方法探索植物化学物质是自然界中广泛存在的一类化合物,它们在植物体内扮演着重要的生理功能。

其中,具有抗氧化活性的植物化学物质引起了科研界的广泛关注。

抗氧化剂可以清除体内自由基,对抗氧化应激,起到保护细胞健康的作用。

因此,研究植物化学物质与抗氧化的关系具有重要的理论和应用价值。

本文旨在对植物化学物质与抗氧化研究的方法进行探索和总结,以促进相关研究的发展。

一、分离纯化植物化学物质要研究植物化学物质的抗氧化活性,首先需要从植物中提取并分离纯化目标化合物。

传统的提取方法包括浸提、蒸馏等,但这些方法不仅耗时耗力,而且可能导致化合物在提取过程中的损失。

因此,近年来逐渐兴起的超声波提取和微波辅助提取等新技术成为研究的热点。

这些新技术能够有效提高提取效率,并且减少对环境的污染。

对于分离纯化植物活性成分,常用的技术包括柱层析、液相色谱、气相色谱等。

这些方法可以根据物质的物化性质,如极性和分子量等进行分离。

此外,还可以借助质谱技术对分离的化合物进行结构鉴定,如质谱联用技术(LC-MS、GC-MS)等。

这些技术的发展不仅提高了植物化学物质的纯度和鉴定准确性,还可以用于快速筛查植物中的活性成分,从而加速抗氧化研究的进程。

二、抗氧化活性评价方法为了评估植物化学物质的抗氧化活性,目前有多种方法可供选择。

其中比较常用的方法包括过氧化脂质产物(TBARS、MDA)测定法、氧自由基吸收能力(ORAC、DPPH)实验以及细胞模型实验等。

过氧化脂质产物测定法是一种直接评估抗氧化能力的方法。

该方法通过测定产生的过氧化脂质产物的数量,从而得出样品的抗氧化能力。

然而,该方法有一定的局限性,缺乏选择性。

氧自由基吸收能力实验通过评估样品抑制自由基的能力来评估其抗氧化能力。

ORAC实验用于评估样品对水溶性自由基的抗氧化能力,而DPPH实验主要用于评估样品对脂溶性自由基的抗氧化能力。

这些方法具有较高的敏感性和选择性,并且可以用于评估不同类型物质的抗氧化能力。

DPPH法评价抗氧化活性研究进展

DPPH法评价抗氧化活性研究进展

DPPH法评价抗氧化活性研究进展一、本文概述随着人们对健康生活的追求和对疾病预防的重视,抗氧化剂的研究和应用逐渐成为科学研究的热点。

DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)法作为一种简便、快速、高效的抗氧化活性评价方法,在抗氧化剂筛选、食品营养评价、药物研发等领域得到了广泛应用。

本文旨在综述DPPH法在评价抗氧化活性方面的研究进展,包括其基本原理、实验操作、影响因素以及应用实例等方面,以期为该领域的研究者提供全面的参考和借鉴。

通过本文的阐述,读者可以深入了解DPPH法的优势与局限性,进一步推动抗氧化活性评价方法的优化与创新。

二、DPPH法的基本原理DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)法是一种常用的体外抗氧化活性评价方法,其基本原理基于DPPH自由基的稳定性和颜色变化。

DPPH 自由基是一种紫色的有机自由基,其溶液在517nm处具有强吸收峰。

当抗氧化物质存在时,它们可以通过提供氢原子或电子来与DPPH自由基发生反应,从而使其颜色由紫色变为黄色,最大吸收峰也随之降低。

这种颜色变化与DPPH自由基被清除的程度成正比,因此可以通过测定反应前后溶液吸光度的变化来评价抗氧化物质的活性。

DPPH法具有操作简便、快速、灵敏度高和重现性好等优点,因此在抗氧化活性评价中被广泛应用。

DPPH自由基是一种脂溶性的自由基,可以模拟生物体内多种自由基的反应,因此DPPH法也具有一定的生理意义。

然而,需要注意的是,DPPH法仅是一种体外评价方法,其结果并不能完全代表抗氧化物质在生物体内的实际抗氧化效果。

因此,在评价抗氧化物质的活性时,还需要结合其他方法进行综合分析。

以上内容仅为简要介绍,如需更深入了解DPPH法的基本原理和应用,建议查阅相关文献或咨询专业人士。

三、DPPH法在抗氧化活性评价中的应用DPPH法作为一种简便、快速、灵敏且可重复性强的方法,已被广泛应用于抗氧化活性的评价中。

该方法基于DPPH自由基的稳定性和其在可见光区具有的特征吸收峰,通过测定待测物与DPPH自由基反应后吸光度的变化,可以推算出待测物的抗氧化活性。

天然药物抗氧化活性研究

天然药物抗氧化活性研究

安徽农学通报,Anhui Agri,Sci,Bull,2020,26(17)天然药物抗氧化活性研究权春梅1,2张兴3丁瑞苹1黄力1(1亳州职业技术学院,安徽亳州236800;2安徽中医药科学院亳州中医药研究所,安徽亳州236800;3阜阳师范大学,安徽阜阳236037)摘要:该文介绍了抗氧化机制及研究天然药物抗氧化活性的必要性,阐述了体外抗氧化活性及体内抗氧化活性的研究方法,旨在为天然药物抗氧化研究及开发利用提供参考。

关键词:天然药物;抗氧化活性;研究方法中图分类号R282.7文献标识码A文章编号1007-7731(2020)17-0036-03Study on Antioxidant Activity of Natural MedicineQUAN Chunmei1,2et al.(1Bozhou Vocational and Technical College,Bozhou236800,China;2Bozhou Institute of the Anhui Academy of Chi⁃nese Medicine,Bozhou236800,China)Abstract:This paper introduced the antioxidant mechanism and the necessity of studying the antioxidant activity of natural medicine,and detailed the research methods of antioxidant activity in vitro and in vivo,in order to provide reference for the research,development and utilization of natural medicine。

Key words:Natural medicine;Antioxidant activity;Research methods天然药物来源于植物、动物、矿物、微生物和海洋生物,我国天然药物主要是指中草药。

抗氧化活性

抗氧化活性

1. 徐春兰,钦传光,尚晓娅,牛卫宁. Enterobacter CloacaeZ0206细菌胞外富硒多糖的抗氧化活性.化学研究,2010,21(2:)64-68.CHEMICAL RESEARCH多糖是自然界中与人类生活紧密相关的一类天然生物高分子,具有免疫调节、抗氧化等多种生物学功能.国内外近年来对于多糖的抗氧化作用进行了广泛的研究[1,2],并有人据此解释了多糖抗衰老功效的药理机理.1.3 E.cloacaeZ0206富硒多糖的制备取出冷藏的E.cloacaeZ0206菌种,室温放置1 h后,在PDA培养基上2次活化后,接种到基础发酵培养基中进行试管发酵培养,30℃往复振荡培养,培养时间10 h,得到摇瓶发酵种子液. 2 000 mL摇瓶内加入500 mL基础发酵培养基,121℃蒸汽灭菌20 min,接种种子液,于摇床中30℃、220 r/min往复振荡培养,在培养的第6 h加入一定浓度的已过滤除菌的Na2SeO3溶液(使其终浓度为25 mg/L),发酵时间48 h,得到含有E.cloacaeZ0206富硒多糖的发酵液.发酵液于50℃浓缩为原体积的1/10, 90℃水浴1 h,5 000 r/min离心20 min,收集上清液,加入3~5倍体积预冷的95%乙醇,4℃静置24 h后, 5 000 r/min离心20 min,沉淀真空干燥,即得到粗多糖粉末.将其溶于适量蒸馏水,Sevag法除蛋白,反复进行多次至无蛋白层,然后用自来水和蒸馏水各透析24 h,透析液中加无水乙醇,置4℃冰箱中醇沉过夜,再离心分离,沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚各洗涤2次,真空干燥,即得到E.cloacaeZ0206富硒多糖.E.cloacaeZ0206富硒多糖中多糖的测定采用苯酚-硫酸法,蛋白质含量的测定用考马斯亮蓝法,硒含量的测定采用紫外分光光度法.1.4清除DPPH自由基试验准确地将E.cloacaeZ0206富硒多糖配成5.0 g/L,用超纯水将该溶液稀释成6种浓度:0.16、0.31、0.625、1.25、2.5、5 g/L.以维生素C(Vc)为对照品.称取20 mg的DPPH用无水乙醇溶解定容至500 mL.试验分为样品组和空白对照组:取2 mL 40 mg/L的DPPH溶液加入10 mL 具塞的试管中,再加入2 mL样品溶液,空白对照组以超纯水代替样品溶液,充分混匀,室温下避光反应30 min后,在517 nm处测定吸光度.E.cloacaeZ0206富硒多糖清除DPPH自由基的能力由下式计算:DPPH自由基清除率=(A0-A1)/A0×100%,式中A0为空白对照的平均吸光度值,A1为试样的平均吸光度值.1.5清除羟自由基试验由Fenton法产生·OH.将E.cloacaeZ0206富硒多糖用双蒸水配制成质量浓度为5 g/L的多糖溶液,并稀释成6个不同浓度:0.16、0.31、0.625、1.25、2.5、5 g/L.各取2 mL上述浓度的多糖溶液,依次加入6mmol/L的FeSO4溶液2 mL,混匀,6 mmol/L的H2O2溶液2 mL,混匀,静置30 min后于510 nm处测其吸光度值.空白对照组以双蒸水代替多糖溶液,以维生素C(Vc)做对照,临用前以双蒸水配制.羟自由基的清除率以下式计算:羟自由基清除率=(A0-A1)/A0×100%,式中A0为空白对照的平均吸光度值,A1为试样的平均吸光度值.1.6清除超氧阴离子自由基试验采用邻苯三酚自氧化法产生O-2进行试验.将E.cloacaeZ0206富硒多糖用双蒸水配制成质量浓度为5g/L的多糖溶液,并稀释成6个不同浓度:0.16、0.31、0.625、1.25、2.5、5 g/L.取0.05 mol/L Tris-HCl缓冲溶液(pH=8.2)4.5 mL,置于25℃水浴中预热25 min,分别加入1 mL不同浓度的多糖溶液和0.4 mL25 mmol/L邻苯三酚溶液,空白对照组以双蒸水代替多糖溶液,混匀后在25℃水浴中反应5 min,加入1mL 8 mol/L的HCl终止反应,于299 nm处测吸光度.超氧阴离子的清除率以下式计算:超氧阴离子的清除率=(A0-A1)/A0×100%,式中A0为空白对照的平均吸光度值,A1为试样的平均吸光度值.1.7还原能力的测定将E.cloacaeZ0206富硒多糖用双蒸水配制成质量浓度为5 g/L的多糖溶液,并稀释成6个不同浓度:0.16、0.31、0.625、1.25、2.5、5 g/L,各取1 mL上述浓度的多糖溶液,加入pH 6.6的磷酸盐缓冲液2.5mL、1%铁氰化钾2.5 mL,混合均匀后于50℃水浴中保温20 min,再加入10%的三氯乙酸2.5 mL,混匀,以3 000 r/min离心10 min,移取上清液2.5 mL于试管中,加蒸馏水2.5 mL和0.1% FeCl30.5 mL,常温反应5 min后于700 nm处测定吸光度值,OD700 nm值越大说明测试样的还原能力越强,实验中选用Vc做对照.2.谢辉,李莉,吴鸣谦,陈双林*1株杜仲内生真菌的抗氧化活性分析和菌种鉴定.安徽农业科学,Journal ofAnhui ,37(1):230-232Harper等的研究表明,植物内生真菌具有抗氧化活性或可产生天然的抗氧化活性产物[3-4]。

抗氧化研究方法

抗氧化研究方法

抗氧化研究方法氧化损伤的产生线粒体呼吸链中,由于发生电子漏,导致氧分子经单电子转移反应,生成了超氧阴离子。

某些氧化酶催化氧化底物时,释放出活性氧,如黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶体系放出超氧阴离子、葡萄糖/葡萄糖氧化酶体系放出过氧化氢。

巨噬细胞受刺激后呼吸爆发产生活性氧。

体内自由基的产生e e2H eHO2 O2-. H2O2 .OH H2O 主要自由基简介单线态氧超氧阴离子过氧化氢脂质过氧自由基碳中心自由基氧的状态2p2p2p2pssss Ground singlet O2 Superoxide Peroxide ion state O2 O2- O22- 氧自由基的反应超氧阴离子歧化2O2-. 2H H2O2 O2过氧化氢的反应:Mn H2O2 . M n1 OH OH- 铁催化的羟自由基产生-Fenton Reaction and Harber-Weiss Reaction Fenton Reaction: Fe2 H2O2 Fe3 .OH OH- Weiss Reaction: Fe3 O2-. Fe2 O2 1 Fe2 H2O2 Fe3 .OH OH- 2 Net O2-. H2O2 O2.OH OH- 3 脂质过氧化Initiation: -CH2-.OH -. CH2-H2O CH. O2 CHO2.Propagation: CHO2. CH2 CHO2H CH.Termination: CH. CH. -CH-CH -抗氧化研究内容清除自由基抑制脂质过氧化总抗氧化活力测定抑制氧化导致的细胞损伤缺血再灌注损伤及炎症1、清除自由基 a. 清除羟自由基b. 清除超氧阴离子 c. 清除单线态氧d. 清除DPPH自由基 e. 清除碳中心自由基电子顺磁共振法Electronic ParamagneticResonance EPR 以DMPO 捕获剂,测定羟自由基Hydroxyl radical和超氧阴离子自由基以TEMP为捕获剂,测定单线态氧Singlet oxygen 直接测定DPPH自由基以4-POBN为捕获剂,测定碳中心自由基典型的羟自由基-DMPO加合物图谱典型的超氧阴离子自由基-DMPO加合物图谱典型的单线态氧-TEMP加合物图谱典型的碳中心自由基-4-POBN加合物图谱典型的DPPH自由基图谱化学法Hydroxyl radical Drug effects were tested on deoxyribose oxidation induced by 60 min incubation at 37C with nonchelated Fe2 namely 20 M FeSO4 with or without 1.42 mM H2O2 in PPB pH7.4. The TBA-test which detects aldehydic products such as malondialdehyde MDA resulting from deoxyribose or lipid oxidation was then carried out adding to 0.5 mL of sample 1.0 mL of 2.8 trichloroacetic acid and 1.0 mL of 0.6 aqueous solution of TBA tubes were heated at 95 C for30 min to develop the color and successively cooled in ice. The red chromogen expression of the TBA:MDA adduct formation was extrtacted with n-butanol kept at 4C after a brief centrifugation to favor organic phase separation the upper n-butanol layer was removed and read spectrophotometrically at 532 nm against an appropriate blank. Results were caculated as nmol TBARS per mL using a molar extinction coefficient of 154000 at 532nm.Superoxide anion To a mixture of tested compound 50 M xanthine oxidase 25munit/ml and nitro blue tetrazolium 50 M in Tris buffer 0.1 M pH 7.4 and aliquot of 10l hypoxanthine 3.5 mM was added the total volume of the mixture was 1 ml. The absorbance of the reaction mixture was monitored spectrophotometrically at 560 nm for 10 min using a UV-VS spectrum meter.Total antioxidant status TAS assay ABTS was dissolved in water to a 7 mM concentration. ABTS radical cation ABTS was produced by first adding MnO2 powder in the solution and keeping in the dark at room temperature for more than 12 h then filtrated with syringe filter and kept in dark for another 6 hours. The obtained radical was stable in this form for more than two days when stored in the dark at room temperature. Stock solution of ABTS was diluted with PBS pH 7.4 to an absorbance of 0.70 0.02 at 734 nm and equilibrated at 30°C. After adding 1.0 ml of diluted ABTS to 10 l of serum or tissue homogenate supernate the absorbance reading was taken at 30°C exactly 2 min after initial mixing. The total antioxidant capacityconcentration was compared to equivalent antioxidant capacity of Trolox and is expressed in mols of Trolox/g of tissue.Quenching DPPH radical DPPH dissolved in ethanol to a concentration of 90M tested compounds dissolved in ethanol or distilled water to 120 M solution to 2.5 ml DPPH solution the suitable amount of tested compound solution was added the total volume was adjusted to 3 ml with ethanol and mixed thoroughly the absorbency was recorded at 517 nm exactly at 10 min.。

食品中多酚类物质提取及其抗氧化活性研究

食品中多酚类物质提取及其抗氧化活性研究

食品中多酚类物质提取及其抗氧化活性研究导论:食品中多酚类物质是一类具有抗氧化活性的重要化合物。

多酚类物质是一种具有多个酚环结构的化合物,包括类黄酮、花青素、儿茶素等。

这些物质在食物中广泛存在,具有很高的抗氧化活性,在人体内可以起到抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降血压、保护心血管等多种作用。

因此,研究食品中多酚类物质的提取方法和抗氧化活性对于食品科学领域具有重要意义。

一、食品中多酚类物质提取方法1. 溶剂提取法:溶剂提取法是最常用的提取多酚类物质的方法之一。

常用的溶剂有乙醇、乙酸乙酯、水等。

乙醇提取法是最常用的方法之一,其原理是通过乙醇将多酚类物质溶解出来。

这种方法简单易行且成本较低,适用于大规模生产。

但是由于乙醇易挥发,所以提取后的多酚类物质稳定性较差。

2. 超临界流体萃取法:超临界流体萃取法是近年来发展的一种新型提取方法。

超临界流体是介于液体和气体之间的物质,在一定的温度和压力下具有较好的溶解性。

利用超临界流体萃取法可以在较低的温度下高效地提取多酚类物质。

这种方法具有环境友好,提取效果好等优点,但设备成本较高。

3. 微波辅助提取法:微波辅助提取法是利用微波的热效应进行提取的方法。

通过微波的加热作用,可以使多酚类物质从食物基质中迅速释放出来。

这种方法具有提取时间短、产率高等优点,但是对设备的要求较高。

二、食品中多酚类物质的抗氧化活性研究多酚类物质具有很高的抗氧化活性,是一种重要的天然抗氧化剂。

其抗氧化活性主要体现在以下几个方面:1. 自由基清除作用:多酚类物质可以通过清除自由基来发挥抗氧化作用。

自由基是一类非常活跃的分子,具有很强的氧化能力,对人体细胞和基因造成损害。

多酚类物质可以捕捉自由基,减少其危害。

2. 抗肿瘤作用:多酚类物质对肿瘤细胞有抑制作用。

研究表明,多酚类物质可以抑制肿瘤细胞的生长和分裂,从而减小肿瘤的体积和数量。

3. 抗衰老作用:多酚类物质具有抗衰老的效果。

它可以减少自由基对细胞的氧化损伤,促进细胞的再生和修复,延缓衰老过程。

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