第六章品种真实性及品种纯度测定
农作物种子检验规程---真实性和品种纯度鉴定(DOC 6页)
农作物种子检验规程---真实性和品种纯度鉴定1 主题内容与适用范围本标准规定了测定种子真实性和品种纯度的方法。
本标准适用于农作物种子质量的检测。
2 引用标准GB／T 3543. 2 农作物种子检验规程扦样GB／T 3543．4 农作物种子检验规程发芽试验3 术语3. 1 种子真实性genuineness of seed供检品种与文件记录(如标签等)是否相符。
3．2 品种纯度varietal purity品种在特征特性方面典型一致的程度，用本品种的种子数占供检本作物样品种子数的百分率表示。
3．3 变异株off-type—个或多个性状(特征特性)与原品种育成者所描述的性状明显不同的植株。
3．4 育种家种子breeder seed育种家育成的遗传性状稳定的品种或亲本种子的最初一批种子，用于进一步繁殖原种种子。
3．5 原种basic seed用育种家种子繁殖的第一代至第三代，或按原种生产技术规程生产的达到原种质量标准的种子，用于进—步繁殖良种种子。
3．6 良种certified seed用常规种原种繁殖的第—代至第三代和杂交种达到良种质景标准的种子，用于大田生产。
4 试剂苯酚，愈创木酚、过氧化氢、氢氧化钾、氢氧化钠，氯化氢。
5 仪器和设备其仪器设备也随方法的差异而不同。
a.在实验室中测定配备适宜的仪器(如体视显微镜、扩大镜、解剖镜)与试剂，以供种子形态、生理及细胞学的检查、化学测定及种子发芽之用。
b. 在温室和培养室中测定配备能调节环境条件的设备(如生长箱)，以利诱导鉴别性状的发育。
c. 在田间小区里鉴定需具有能使鉴定性状正常发育的气候、土壤及栽培条件，并对防治病虫害有相对的保护措施。
6 测定程序6．1 送验样品的重量品种纯度测定的送验样品的最小重量应符合表1的规定。
表1 品种纯度测定的送验样品重量g种类限于实验室测定田间小区及实验室测定豌豆属、蚕豆属、玉米属、菜豆属、玉米属、大豆属及种于大小类似的其他属1000 2000水稻属、大麦属、燕麦属、小麦属、黑麦属及种子大小类似的其他属500 1000甜菜属及种子大小类似的其他属250 500所有其他属l00 2506．2 种子鉴定6．2. 1形态鉴定法随机从送验样品中数取400粒种子，鉴定时须设重复，每个重复不超过100粒种子。
纯度、转基因、健康测定
做发芽试验，观察幼苗
2、特异蛋白质检测方法：
①酶联免疫检测；
②横向侧流条测定．
3、DNA检测方法：
①定性PCR测定②定量PCR测定。
一、种子健康测定的传统方法：
1、未经培养检查．
直接检查；吸胀检查；洗涤物检查
2、培养后检查（生长植株的检查）
二、真菌检测方法：
吸水纸法；琼脂皿法；发芽法．
三、细菌测定方法：
１．生长植株鉴定２．检验室方法
四、病毒测定方法：
田间种植鉴定、室内检测
禾本科
试验样品：25粒×16
22℃12小时黑暗12小时光照交替处理7天
品种真实性及纯度测定、转基因特定特性测定、种子健康测定
品种真实性及纯度测定
转基因特定特性测定
种子健康测定
概念
品种真实性:指一批种子所属品种、种或属与文件描述是否相符。
品பைடு நூலகம்纯度：品种个体与个体之间的特征特性方面典型一致的程度。
用本品种的种子数(株\穗)占供检本作物种子数(株\穗)的百分率表示.
异型株:指一个或多个性状与原品种的性状明显不同的植株.
②物理化学法鉴定：
苯酚染色法麦类、水稻
荧光分析法
③生理生化方法：
愈伤木酚染色法大豆
光周期反应鉴定法
电泳法水稻酯酶同工酶、盐溶蛋白聚丙烯酰胺
④细胞学方法、
⑤分子生物学：（RFLP、ＲＡＰＤ、ＡＦＬＰ、ＳＳＲ、）
以性能为基础检测方法
常用大田作物GM种子检测方法主要有：PCR定性和定量分析，酶联免疫检测和生物测定。
品种纯度检验对象:种子,幼苗,较成熟的植株.
测定内容、目的：
1.检测，确定种子批中是否含有GMOs；
种子检验原理和技术
(一)化学鉴定
主要根据不同品种皮壳成分和化学物质的差异，而对不同化学试剂反应显色的差异来鉴定品种。 1.苯酚染色法 又名石炭酸，其染色的原理是单酚、双酚、多酚在酚酶的作用下氧化成为黑色素(C77H98O55N14S)，由于每个品种皮壳内酚酶活性不同，将苯酚氧化呈现深浅不同的褐色。该法主要适用于小麦、水稻和燕麦、大麦、黑麦草、早熟禾等牧草种子。
(2)电泳缓冲系统
(1)电泳基本设备
缓冲系统的类型 解离缓冲系统 非解离缓冲系统
缓冲液的离子强度
缓冲液的PH
1
2
3
4
5
电场特征
支持介质的选择
2.应用电泳鉴定品种的理论基础
在品种鉴定中，个体或群体间蛋白质成分的差异，反映基因表达的根本差异。由于基因是与遗传特征相联系的，所以蛋白质标志能用以标记这些特征。这种特征体系是一套基因，或是部分染色体，或是整条染色体，或是完整的基因组。通过分析足够多的蛋白质标志，可以涉及大量的基因组。由于作物品种是由各种不同遗传表现的种质集合体所组成，所以对这些集合体中的特种蛋白质或酶的成分进行比较就能用来表示或描述这些材料的特征。电泳方法提供了一种进行这种比较的绝好方法。这种有效的方法是基于各品种蛋白质的多态性，即以多种不同的分子形式存在。
A B
小麦种子的氢氧化钠测定法
Fig. Sodium hydroxide (NaOH) test: (left) Red wheat, and (right) white wheat.
01
国际植物新品种保护联盟的植物新品种DUS检测指南所列入的电泳鉴定方法：1994年制订有关分析小麦高分子量麦谷蛋白的SDS-PAGE方法、分析大麦醇溶蛋白SDS-PAGE方法、分析大麦B-和C-醇溶蛋白的A-PAGE方法、分析玉米同工酶的淀粉凝胶电泳方法。
01-品种真实性与纯度测定(课件)
叶、整株幼苗)表明在田间适宜条 件下能进一步生长成为正常 的植株。
2、发芽力：指种子在适宜条件下发芽并长成正常植株 的能力。通常用发芽势和发芽率来表示 发芽势：规定日期内（发芽试验初期）正常发芽种 子数占供试种子数的百分率。 表示种子活力强，发芽迅速、整齐。
DNA的体外扩增 — 类似于其自然复制 经过变性-复性-延伸多次循环，使目标 DNA片段的总量（浓度）呈指数增长。
灵敏、简便、低费 整个反应过程早已实现自动化，一般2个 小时左右完成。
DNA标记 — 两个重要特性
与品种鉴定和育种应用密切相关的两个特性
拷贝数：单拷贝 vs 多拷贝 遗传特性：显性 vs 共显性
(1)受损伤的幼苗：由机械
处理、加热、干燥、昆虫损 害等外部因素引起，使幼苗构
造残缺不全或受到严重损伤，
以致不能均衡生长者。
3、未发芽种子 （1）硬实：由于不能吸水而在试验末期仍保持坚 硬的种子。 （2）新鲜不发芽种子：在发芽试验条件下，既非 硬实，又不发芽而保持清洁和坚硬，具有生长成为 正常幼苗潜力的种子，由生理休眠所引起。 （3）死种子：在试验末期，既不坚硬，又不新鲜， 也未产生生长迹象的种子。 （4）其他类型：如空的、无胚或虫蛀的种子。
操胶
作
流
程
PCR扩增
电泳
银 染
结果分析
DUS测试结果与DNA指纹检测结果一致
第一节 种子发芽的概念及幼苗鉴定标准
一、种子发芽的相关概念 二、种子发芽试验的目的及其重要性 三、幼苗鉴定(幼苗构造、发芽类型、鉴定标准)
一、种子发芽的相关概念
1、种子发芽：指在适宜条件 下种子萌发和发育到一定程 度，其幼苗构造(根系、胚轴、子叶、
种子质量检验标准与技术
种子收购、种子贸易和经营分级定价
㈡、种子检验的意义
1．保证种子质量、提高产品产量 2．贯彻优质优价政策，促进种子质量的提高 3．控制种子质量、保证种子贮藏运输的安全 4．防止伪劣种子流通，保护国家和农尸的利益
2、送验样品的分取
（GB/T 3543.2-1995 ）
㈥、送验样品的处理
1、分别包装、及时发送
种子批水分较低或水分测定样品必须装入防湿容器。
2、送验样品必须有记号并附有扦样证书
经过化学处理的种子，须将处理药剂的名称送交种子检验机构
扦样证书
扦样单位(检验站)名称； 检验站(室)名称； 种子批的记号和印章， 种子批容器数或袋数； 送验样品重量； 扦样日期； 检验项目； 检验站收到样品日期及样品编号等。
1、专门的检验机构
《种子法 》
第四十五条 种子质量检验机构应当配备种子 检验员。种子检验员应当具备以下条件：
1、具有相关专业中等专业技术学校毕业以上文化水平； 2、从事种子检验技术工作三年以上； 3、经省级以上人民政府农业、林业行政主管部门考核合格
2、专业的检验人员
农作物种子检验规程
GB/T 3543.1-3543.7---1995
净种子(pure seed)——从种类上看是指送验者所叙述种， 包括该种的全部植物学变种和栽培 品种；从构造上看是指完整的种子 单位 和大于原来大小一半的破损种 子单位。
二、净度分析的目的与意义
目的
测定供检样品不同成分的重量百分率和样品 混合物特性，并据此推测种子批的组成。
净度分析的意义
1、了解杂质的组成和含量为种子的清选加 工提供依据。
种子室内检验技术—品种真实性和纯度的室内测定概述
品种真实性和纯度鉴定的方法分类
品种真实性和纯度鉴定的方法分类
为鉴定品种真实性和品种纯度，必须找出品种之间形态学、 生理学、物理学、化学、生物化学、分子生物学等方面的差异。
在实际应用中可根据检验目的和要求的不同，本着简单易行、 成本低廉、省时快速、结果准确、重演性好的原则，选择合适 的方法。
四、品种纯度检验方法的要求
在实际应用过程中，理想的测定方法要达到4个要求： （1）测定结果在不同实验室或同一实验室能重演； （2）方法应简单易行； （3）省时快速； （4）成本低廉。
三、物理化学法鉴定
1、物理鉴定 （荧光分析法测定种子或幼苗的方法） 不同作物或不同品种，其种皮结构和化学组成不同，因此在紫外 光照射下发出的荧光颜色也不同。 如十字花科不同种发出荧光不同：白菜为绿色，萝卜为浅蓝绿色， 白芥为鲜红色，黑芥为深蓝色，田芥为浅蓝色。
三、物理化学法鉴定
2、化学鉴定 鉴定品种的化学特性主要是根据不同品种的种子化学成分的差异， 用化学药剂处理后所产生的颜色的差异区分不同品种。 常用的化学测定法有：麦类和水稻的苯酚染色法、大豆种子的愈 创木酚染色法等。
一、品种真实性和品种纯度的含义
3、异型株 异型株是指一个或多个性状（特征、特性）与原品种的性状明显 不同的植株。在纯度检验时主要鉴别与本品种不同的异型株。
异型株
一、品种真实性和品种纯度的含义
4、育种家种子 育种家种子是育种家育成的遗传性状稳定的品种或亲本种子的最 初一批种子，用于进一步繁殖原种的种子。 5、原种 原种是用育种家种子繁殖的第一代至第三代，或按原种生产技术 规程生产的达到原种质量标准的种子，用于进一步繁殖大田用种。 6、大田用种 用常规种原种繁殖的第一代至第三代或杂交种，经确定达到规定 质量要求的种子。
种子室内检验技术—品种纯度的荧光分析法测定
(HCl)和4份水]的玻璃器皿中浸泡 6 h，然后取出放在滤纸上让其 气干1 h。根据棕褐色(荧光种子)或黄色(非荧光种子)来鉴别种子。
二、幼苗鉴定法
1、燕麦种子荧光测定法 该方法在国际上主要用于黑麦草与多花黑麦草的鉴别。 取试样两份，各100粒，置于无荧光的白色滤纸上发芽，粒与 粒之间保持一定的距离，于20℃恒温或20~30 ℃变温培养。黑暗 或漫射光，发芽床保持湿润，经14d即可鉴定。 将培养皿移到紫外灯下照射，黑麦草根际不发光，多花黑麦草 根际发蓝色荧光。
二、幼苗鉴定法
2、羊茅与紫羊茅在幼苗鉴定前发芽床需先用稀氨液喷雾，然 后置于紫外灯下照射，羊茅的根发蓝绿色荧光，而紫羊茅的根发 黄绿色荧光。
一、种子鉴定法
1、蔬菜豌豆发出的淡蓝色或粉红色荧科的不同种发出的荧光也不同：白菜为绿色，萝卜 为浅蓝绿色，白芥为鲜红色，黑芥为深蓝色，田芥菜为浅蓝色。
一、种子鉴定法
3、燕麦种子荧光测定法 白皮燕麦发淡蓝色荧光，黄皮燕麦发暗色或褐色荧光；
一、种子鉴定法
种子生产与经营专业
物理鉴定法（荧光分析法）
一、品种真实性和品种纯度的含义
不同品种和类型的种子（幼苗），其种皮结构和化学成 分不同，在紫外线照射下发出的荧光波长不同，所以产生不同颜 色。
一、种子鉴定法
取试样四份，各100粒，分别排列在黑纸上，放于波 长为365nm的紫外分析灯下照射，试样距离灯管10~15cm。 照射数分钟后即可观察，根据发出的荧光鉴别品种或类型。
真实性品种纯度与田间检验ppt课件
括表型特征、解剖特征、代谢特征、分子特征等 一致性：每个品种不同个体之间具有相同的特征 稳定性：采用合理的繁殖方式，品种的特征是可以稳定
遗传的 借助各种有效手段，找出不同品种在形态学、细胞遗传学、
解剖学、生理学、生物化学、分子生物学等方面的差异
（四）实验室检验 3、物理鉴定法 应用较多的是荧光分析法，其原理是不同类型和品种的种子，
其种皮结构和化学成分不同，在紫外线照射下发出的荧光也 不同。 鉴定方法：取试样4份，每份100粒，分别排列在黑纸上，放 于波长365nm的紫外光下照射，数分钟后即可观察。 菜用豌豆发淡蓝色或粉红色荧光，谷实豌豆发褐色荧光 白菜绿色，白芥鲜红色，黑芥深蓝色，田芥鲜蓝色
为了鉴定品种真实性，应在鉴定的各个阶段与标准样品进 行比较。标准样品应代表品种原有的特征、特性，最好是 育种家种子。
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四、真实性和品种纯度鉴定
（四）实验室检验 5、田间小区种植鉴定法 （2）田间小区的设置
为使品种特征、特性充分表现，试验的设计和布局上要选 择气候环境条件适宜、土壤均匀、肥力一致、前茬无同类 作物和杂草的田块，并有适宜的栽培管理措施。
一、田间检验的内容 （1）检查种子生产田是否符合要求（如隔离、前茬作物等） （2）检查种子生产程序是否符合要求 （3）检查异作物情况 （4）检查杂草情况 （5）检查病虫害情况 （6）检查植株生长状况 （7）计算判定是否符合种子质量标准，能否作为种用种子。
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二、对田间检验员的要求
田间检验是通过田间检验员来完成的，必须满足以下条件 （1）必须经过培训，通过田间检验原理和程序知识的书面 考核、田间检验技能的实践考核 （2）必须熟悉田间检验方法和田间标准、品种特征特性、 种子生产的方法和程序等方面的知识 （3）必须具备能依据品种特征特性证实品种真实性，能鉴 别种子田混杂株并使之量化的能力 （4）对被检品种有丰富的知识，熟悉被检种品种间差异的 特征特性
第六章 品种真实性 种子检验学 教学课件
第二节 种子纯度的形态测定
是纯度测定中最基本的方法； 可分为：籽粒形态测定、种苗形态测定、
植株形态测定。 测定的可靠性受形态性状的多少、差异大
小和可靠性。 性状分为：主要性状、细微性状、特有性
状和易变性状。
籽粒形态测定 种苗形态测定 植株形态测定
1. 形态鉴定 见第二节
2. 物理化学法鉴定
物理方法：如荧光法、煮沸法； 化学方法：如苯酚染色法、碘化钾染色法等 特点：区别品种的种类少，但速度快
3. 生理生化法鉴定
以生理生化反应为基础：如愈创木酚染色法 、光周期 反应鉴定法、除草剂敏感性鉴定法
以生理生化技术为基础：电泳鉴定法（检测蛋白质、 同工酶等）、色谱鉴定法、免疫技术鉴定法
2）让植株生长在特殊的逆境条件下，测定不同品种 对逆境的不同反应来鉴别不同品种。
大豆：把种子播于砂中（种子间隔2.5cm×2.5cm，播种
深度2.5cm），在25℃下培养，24h光照，每隔4d施加 Hoagland 1号培养液，至幼苗各种特征表现明显时，根据 幼苗下胚轴颜色（生长10～14d）、茸毛颜色（21d）、茸 毛在胚轴上着生的角度（21d）、小叶形状（21d）等进行 鉴定。
十字花科：种子大小、形状、颜色、胚根轴隆起 的程度、种脐形状、种子表面附属物有无、多少 及表面特性
葱类：种子大小、形状颜色、表面构造及脐部特 征等
二、幼苗测定
可以通过两个主要途径：
1）提供给植株以加速发育的条件（类似于田间小区 鉴定，只是所需时间较短），当幼苗达到适宜评 价的发育阶段时，对全部或部分幼苗进行鉴定；
莴苣：将莴苣种子播在砂中（种子间隔1.0cm×4.0cm，
玉米种子的品种真实性和纯度的田间小区种植鉴定
小 区种植 鉴定 可 以长期 观察 ，观 察时期 从 幼苗 出 土 到成 熟期 ， 时观察 小 区内 的所 有植 株 。 随 因小 区鉴定 能 充分展 示 品种 的特 征特性 ，所 以小 区种植 鉴定 是 鉴 定 品种 真实 性和 纯度 的最 可靠 、 最准确 的方 法 ， 缺点是
费工 、 时。 费
４２ 小 区 设 计 ．
其 品种真 实性 ；二 是鉴 定种 子样 品纯度 是否 符合 国家 规定 标准 或种 子标 签标 注值 的要求 。
１ ห้องสมุดไป่ตู้ 区 种 植 鉴 定 的 作 用
小 区种植 鉴定 从作 用来 说可分 为前 控 和后控 。 当 种 子批用 于 繁殖生 产下 一代 种子 时 ，该 批种 子 的小 区 种植 鉴定 对下 一代 来说 是前 控 。对 亲本 种 子的小 区种 植 鉴定 ， 于种子 生产来 说就 是前 控 。 对 前控 可在种 子生
～
主要包 括 试 验地 的 选择 、 区设 计 、 区管 理 、 小 小 鉴 定 和记 录 、 结果计 算 、 结果 填报 等项工 作 。
－
实 际情况 而定 ，只要 有 足够 的行株 距能保 证 植株 的 正 常生 长 就行 。
４－ ・ ・ ・ ＞・ ・ ・ ・ －夺 ・ ・ ＞ 夺 ・ ・ －夺 ・ ・ ・ ・ ＞・ ・ －－ －夺 ・ ・ ・ ・ ＞ －－夺 ・ ・ ・ ・ ＞ 夺 ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 夺 夺 － 夺 ÷ 夺 － ・ 夺 － ・ － ・ ４ ４ ４ ４ 夺 夺 夺 － 争 － ・ － 孛 ÷ 夺 － ・ ・ ４ ４ ４ ４ ４ 夺 寺 夺 － ・ ４ 夺 夺 ｛ 夺 夺 夺 夺 夺 夺 夺 夺 夺 夺 夺
４ １ 试 验 地 的 选 择 ．
种子检验技术智慧树知到答案章节测试2023年甘肃农业职业技术学院
第一章测试1.在种子质量分级标准中是以（）指标作为划分种子质量级别的依据。
A:净度B:水分C:品种纯度D:发芽率答案:C2.我国主要农作物种子质量标准中玉米单交种的纯度不低于（）。
A:99.0%B:98.0%C:96.0%D:95.0%答案:C3.种子发芽试验的检测属于（）。
A:生理质量的检测B:卫生质量的检测C:遗传质量的检测D:物理质量的检测答案:A4.种子检验的对象包括（）。
A:植物的营养器官B:包衣种子C:植物学上的果实D:植物学上的种子答案:ABCD5.种子检验的目的是（）。
A:保证农业生产使用符合质量标准的种子播种B:控制并减少有害杂草的蔓延和危害C:充分发挥栽培品种的丰产特性D:减少甚至杜绝因种子质量低劣所造成的缺苗减产的风险答案:ABCD6.种子的品种质量是指与遗传特性有关的品质，可用（）概括。
A:纯B:净C:壮D:真答案:AD7.种子检验是评定和控制种子质量优劣的有效手段。
（）A:对B:错答案:A8.监督性抽样检验主要关心否定结论的正确性，而不保证肯定结论的准确性。
（）A:错B:对答案:B9.通过监督性抽样检验的种子批，一定是合格的种子批。
（）A:错B:对答案:A10.贸易出证的委托检验就是《农作物种子检验规程》明确地对种子批负责的种子检验。
（）A:对B:错答案:A第二章测试1.（）是种子检验工作的第一步，也是非常重要的一步。
A:划分种子批B:净度分析C:异质性测定D:扦样答案:D2.扦样的目的是要获得一个大小适合于做种子检验的（）。
A:初次样品B:送验样品C:试验样品D:混合样品答案:B3.一个玉米种子批的最大重量为（）kg。
A:25000B:10000C:20000D:40000答案:D4.种子批的基本特征是（）。
A:异质性B:规定数量之内C:均匀性D:代表性答案:BC5.为了扦取有代表性的样品，扦样工作应遵循以下（）原则。
A:种子批要均匀一致B:合格扦样员扦样C:扦样点的分布要随机均匀D:每个初次样品数量要基本一致答案:ABCD6.常用的袋装种子扦样器有（）。
种子学第六章 种子检验原理和技术
（GB8079-8080-87）
作为衡量原良种生产、提纯复壮、加工贮藏标准，是贯彻以
质论价，优质优价政策的依据。
（4）种子检验规程——农作物种子检验规程
（ GB/T35431~3543 7-2019）
确保种子质量，维护国家声誉
二、种子检验的发展史
种子检验是伴随着种子交易的出现而出现，随着种子科 技的发展而发展的。18世纪60年代的欧洲，随着种子交 易的出现，不法商贩惟利是图，贩卖伪劣种子的事件时有 发生，给农业生产造成损失。为了维护种子贸易的正常开 展，种子检验应运而生。
1869年，德国诺培博士(Dr.Friedrich Nobbe)率先在 萨克森州建立了世界上第一个种子检验实验室，开展种子 真实性、净度和发芽率等种子质量特性检验工作，在总结 前人工作经验和自己的研究成果的基础上，于1876年编 写出版了《种子学手册》，标志着种子检验科学的诞生。
1956年在农业部设立种子管理局和种子检验室， 1957年农业部种子管理局组织浙江农学院等单位的专 家在北京举办了种子检验培训班，开始了我国的种子检验 工作。 1983年和1984年分别颁布和实施了《农作物种子检验 规程》 2019年和2019年分别颁布了《农作物种子检验规程和 《农作物种子质量标准》 2019年“种子工程”的实施 。伴随《种子法》的颁布 实施 ，也为我国种子检验整体水平的稳步提高提供了保
第六章 种子检验原理和技术
第一节 种子检验发展史和种子检验规程
一、种子检验的概念和意义
1.种子检验的概念 种子检验是指采用科学的技术和方法，按照一定标准，
种子检验学习题3
第一章绪论一、名词解释：1.种子检测:是指采用科学的技术和方法，按照一定的标准，运用一定的仪器设备，对种子质量进行分析测定，判断其优劣，评定其种用价值的一门应用科学。
2.自检:是种子的生产单位、经营单位或使用单位，对本身的种子进行检验，以了解其种子质量的高低。
3.监督检验:是种子质量管理部门或管理部门委托种子检测中心对辖区内的种子质量进行检测，以便对种子质量进行监督管理。
4.仲裁检验:是仲裁机构、权威机构或贸易双方采用仲裁程序和方法，对种子质量进行检测，提出仲裁结果。
5.田间检验：是在种子生产过程中，根据植株的特征、特性，对田间的纯度进行测定，同时对异作物、杂草、病虫感染、生育情况及倒伏程度等项目进行调查。
6.室内检验：是种子收获以后在加工、储藏、销售及使用过程中扦取种子样品进行检验。
7.小区种植检验：是将种子样品播到田间小区中，以标准品种为对照，根据生长期间表现的特征、特性，对种子真实性和品种纯度进行鉴定。
二、填空题1.优良的种子是指种子应具备优良的品种品质和优良的播种品质.2.品种品质包括真实性和一致性两个方面，播种质量是指影响播种质量的种子质量性状，分为净、壮、饱、键、干五个方面。
3.ISTA是指国际种子检验协会。
AOSA是指北美洲官方种子分析者协会。
ESTA是指欧洲种子检验协会。
4.种子检验从职能上分为内部检验、监督检验和仲裁检验，从检验对象上分为田间检验、室内检验、小区种植鉴定。
二、简述题：1.简述种子检验的内容。
答：●田间检验：通过检验，确定该田块牧草是否可以留种，在作物生育期间，到良种繁育地段（田块）取样鉴定，主要是真实性，品种纯度。
●室内检验：脱粒、贮藏、运输、播前种子检验。
步骤：1、扦样（取样）——要有代表性2、分析检验——要正确3、评定（签证）——结论要求：种子检验是一项复杂、细致的技术工作，为获得正确的检验结果（1）必须熟悉种子检验操作规程；（2）严格按照规定的方法、步骤工作；（3）掌握和了解各种检验仪器的构造、原理和使用方法；（4）检验中细心耐心，以免疏忽，造成差错。
玉米杂交种子品种真实性和纯度检验鉴定方法
苗木 的检疫工作 ，避免运输传播 ；调查清楚 当地蚧壳
虫 的生 活 习性 ，发 生规 律 ，抓 住若 虫 期 易 防治 的这 一
有 利时 机进 行 防治 ，特 别 是越 冬 后 刚孵 化 的若 虫 ，虫
虫 孵 化 盛 期 ，虫 体 没 有 蜡 质 保 护 时 施 药 以 压 低 虫 口
美 度 的石硫合剂 。几种蚧壳虫混 合发生 的果树 ，可
喷施柴油乳油加 喹硫磷 （ 杀 虫 剂 ） 进 行 防 治 ，取 清 水 １ ０ ０ ０ ｍＬ ，加 入 柴油 １ ０ ０ ｇ和 洗 衣 粉 １ ０ ０ ｇ 进 行 搅 拌 ，使 柴 油 充 分 乳 化 。 喷 施 时 再 加 水 １ ４ ０ ０ ０ ｍＬ稀 释 ，最 后 加入 喹 硫磷 （ 杀 虫剂 ） １ ６ ｍＬ并 充 分 搅拌 后 即可 使 用 。 由于 梨 圆蚧 夏 季世 代 重 叠 ，发 生 不 整 齐 ，
治极 易取得 良好 的防治效果 ；保护 和发 展害虫 的天
敌 ，增 加 果 园 内 害虫 天 敌 密 度从 而 抑 制 害 虫 的 发 展 。
果园生长期内尽量避免使用高毒 、高残 留广谱性杀虫 剂 ，以利于天敌的发展 ；抓好果农对蚧壳虫防治技术 的学习培训工作 ，使其能熟练地掌握和运用 ；组织和
体 幼嫩 ，抗 药力 弱 ，又无 蚧 壳保 护 ，这 一 时期 喷 药 防
密度。可选择喷 Ｏ ． ３ 波美度的石硫合剂 、或 ４ ０ ％乐果
乳油 、或 ５ ０ ％敌 敌 畏乳 油 １ ５ ０ ０倍 液 、或进 口杀 扑磷
２ ０ ０ ０ ～２ ５ ０ ０倍 液进 行 防 治 。一般 于 ４月上 旬 用 小 刀
种子真实性和品种纯度鉴定Gao
利用DNA指纹进行种子检测：
不同基因型间存在着多态性非常丰富的DNA 差异，用分子生物学方法找出不同品种（组合、 个体）在DNA水平上的差异，从而有效的检测这 些品种。
DNA 结 构 解 析
DNA指纹
图
DNA 鉴定的主要优势：
准确性：不受时空表达影响； 谱带容易分辨 快捷性：实验持续时间短 方便性：操作简单快速
DNA分子标记技术检测方法 限制性片段长度多态性 （RFLP） 随机片段长度多态性 扩增片段长度多态性 单核苷酸多态性 简单序列重复 （RAPD） （AFLP） （SNP） （SSR） 序列特征片段长度多态性 (SCAR)
SSR标记：由1-5个碱基对为重复单元的长达几十至几百个核苷酸的串联重复序列。
展望
定量PCR技术的应用； 检测芯片的研制与应用； 开发和利用与产量、株高、抗逆性等农 艺性状紧密连锁的标记，确保实验室检测 结果与田间观测结果的一致
现有关于分子检测的国家标准
其它检测标准的研制
杂交棉花及亲本真实性和纯度的DNA鉴定分析方法 20080958-T-326 杂交油菜及亲本真实性和纯度的DNA鉴定分析方法 20080959-T-326 油菜杂交种子真实性和品种纯度SSR分子技术鉴定方法
问题
相关检测标准研制、推广力度不够； 检测样本的容量； 检测结果的判读标准性
对b)的情况，再选用12个SSR位点进行分析，若新选用的12个SSR位点中 a) 与标准对照不一致位点数≥1，判定为异品种； b) 与标准对照不一致位点数＝0 ，判定为相同品种。
品种纯度检验结果按公式计算：
P（%）= பைடு நூலகம்中：
NT − N D × 100% NT
种子真实性和品种纯度的影响因素及鉴定方法
影 响种 子 真实 性 和 品种 纯度 的因 素很 多 ， 先 要考 虑 首 的是 上代材 料 ， 即繁 殖材 料 的真实性 和 纯度 。 果 由育种 家 如 种 子 直接 拿 来作 繁殖 材 料 。 产 过程 无 误 的情 况下 所 得 种 生 子 的真 实 性和 纯 度勿 容 置疑 。 往作 为 繁殖 材 料 的种 子 都 往 是 由育 种 家种 子 多代 繁殖 以后得 来 的 ， 部分 育 种单 位 也 不 着 重提 纯 复壮 ， 由于 基 因变 异 、 退化 等 原 因 ． 殖材 料 的基 繁
进行， 增加 了 电泳操 作 和 电泳技术 推 广的难 度 。 同工酶 存在 时 期特 异性 和器 官特 异性 ， 测定 时 需要按 一定 程 序操作 ， 在 否 则 重演 性 低 。 目前 ， 白质 电泳 鉴 测法 比 较成 熟 ， 用 也 蛋 应 比较 广泛 ． 农业部 对 此发 布有技 术 规程 ， 在 种子真 实性 和 但 品种 判 定 时难 度 也 比较 大 。 只有 技 术 高 的检 验 员 才 能经 常 做 出 清晰 的色谱 。 色谱 相似 的带 型 太多 ， 有较 为明 显 的品 只
准确 度 不高 。 物形 态鉴 定准 确可 靠 ， 时间长 、 植 但 难度 大 、 费 用 高［ 有些 种子如 玉米 可 到海 南地 区种 植 、 ４ １ 。 鉴定 。 大 部分 但
种子如 需做 植株 形态 鉴定 时 ， 经远 远落后 于生产 进程 。 已
统 一招 标 采购 。 由于不 同品种 的 栽培 环 境 、 培技 术 、 量 栽 产
的种 子检 验机 构 、 具丰 富 经验 的检 验 员 也不 能 对 每份 样 最
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第六章-品种真实性及品种纯度测定————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期:第六章品种真实性及品种纯度测定本章讲4节:§1、品种纯度检验的意义§２、种子纯度的形态测定§３、种子纯度的快速测定§4、种子纯度的电泳测定品种真实性(culｔiｖar geｎuinｅnｅss)和品种纯度(vａrietaｌpｕriｔy)是构成种子质量的两个重要指标，是种子质量评价的重要依据。
这两个指标都与品种的遗传基础有关，因此都属于品种的遗传品质。
品种纯度检验可分为田间检验、室内检验和小区种植检验3部分。
本章主要介绍品种真实性及品种纯度的含义及室内常用的测定方法。
第一节品种纯度检验的意义一、品种纯度的含义品种纯度检验应包括两方面内容:种子的真实性和品种纯度。
在品种纯度检验之前,应先进行种子真实性鉴定,如果种子真实性有问题，品种纯度检验就毫无意义了。
1、种子的真实性：是指一批种子所属品种、种或属与文件描述(desc ｒiｐtioｎ）是否相符。
这是鉴定种子样品的真假问题。
2、品种纯度:是指品种个体与个体之间在特征特性方面典型一致的程度，用本品种的种子数(或株、穗数)占供检验本作物样品数的百分率表示。
在纯度检验时主要鉴别与本种不同的异型株（off-ｔyｐe plant)。
异型株:是指1个或多个性状（特征、特性)与原品种的性状明显不同的植株。
品种纯度检验的对象:可以是种子、幼苗（sｅedling)或植株。
因此，品种纯度检验可分为:田间检验、室内检验、田间种植鉴定。
三者关系:以田间检验为主,田间检验与室内检验相结合，辅之田间种植鉴定。
二、品种纯度检验的意义(了解）1、是保证品种优良遗传特性得以充分发挥的前提研究表明,玉米种子纯度每降低１%，造成的减产幅度就会接近1%。
在杂交稻种子生产中，亲本纯度每降低１％,制种田纯度就会下降6~7%,粮食生产就会减产l0%左右。
２、是正确评定种子等级、贯彻优种优价政策的主要依据。
玉米大田生产一般每穴播2粒;优质种子可单粒播种，如先玉335、郑单9５8等。
3、是防止品种混杂退化，提高种子质量的必要手段；品种混杂、品种纯度降低,会明显降低作物产量和品质。
品种纯度不高的种子播入田间后会导致作物生长发育不一致、植株高矮不齐、成熟迟早不同。
种子纯度降低越多，影响产量的幅度也越大。
因此,品种真实性和品种纯度检验在种子生产、加工、贮藏及经营贸易中具有重要意义和应用价值。
在生产实践中，由于忽视种子真实性和品种纯度的鉴定，往往给农业生产造成不可弥补的损失。
（１)如杂交稻生产中，错把不育系当杂交种播种，造成颗粒无收。
（2)刘恩训老师前些年搞玉米不育系育种,挂在墙上被人偷,结果不结粒。
(3)若把小白菜(青菜)当作大白菜播种,秋天就不结球。
(４）倘若把生长期长的秋大白菜当伏菜种植,会出现因不耐热而染病,且迟迟不能卷心，不能及早上市;反过来，倘若把伏菜当秋菜种植,就会出现早熟、产量低、不耐贮藏。
(莱阳二蔬把伏菜当秋菜发,培了90 万)。
(５)若把耐旱小麦品种烟农18种在高肥水地快,会造成倒伏而减产;若把高肥水品种‘莱州137’种在旱薄地里，生物产量不够而减产。
三、品种纯度检验的方法分类品种纯度检验的方法很多,但在生产中真正能广泛应用的方法较少，没有一个很好的方法。
根据测定的原理不同分５类:形态鉴定、物理化学法鉴定、生理生化法鉴定、分子生物学方法鉴定和细胞学方法鉴定。
根据检验的方法原理分类，是较为公认的分类体系。
还可依据检验的对象分为：种子纯度测定、(实质上是上面的形态鉴定）幼苗纯度测定、植株纯度测定。
根据检验的场所分为:田间纯度检验、室内纯度检验田间小区种植检验。
在实际应用中，理想的测定方法要达到4个要求:测定结果能重演;方法简单易行；省时快速；成本低廉。
下面介绍依据测定原理区分为5大类:（一）、形态鉴定：又分为:籽粒形态测定、种苗形态测定和植株形态测定。
1、籽粒形态测定：仅适合于籽粒较大、籽粒形态较丰富的作物。
如玉米种子、大麦；豆类不丰富不能用。
时间0.５ｈ,测定结果受主观影响较大,结果不太准确,只能在调种时大体测定,保证不出大的问题。
（玉米父母本差别大易区别)2、种苗形态测定:适用于幼苗形态性状丰富的作物，如十字花科、豆科等双子叶植物，时间一般在7~30 ｄ。
因苗期用的性状太少，测定结果也不太准确。
禾谷类胚芽鞘颜色比较稳定，可鉴别品种纯度。
若双亲都是紫色或无色的,则也不准确。
如郑单95８(郑58×昌7－2).3、植株形态测定:需一个生长季节2～6个月，依据的性状较多，测定结果较准确。
分为:田间纯度检验和田间小区种植鉴定。
但所需要时间较长,不能满足在调种过程中快速测定的需要。
（二）物理化学法鉴定（快速法）:分为：物理方法和化学方法。
1、物理方法:如荧光鉴定法等,时间10几分钟,仅利用于个别作物，不太准确。
2、化学方法：主要依据化学反应所产生的颜色差异区分不同品种，如苯酚染色法、碘化钾染色法等。
时间１0几分钟→1d，都不太准确。
这类方法测定速度快,在实际中有一定的利用价值。
(三）生理生化法鉴定：这类方法中包括的技术较多:１、以生理生化反应为基础的有：愈创木酚染色法、光周期反应鉴定法等。
这些方法鉴别品种的能力较低，测定结果不太准确。
２、以生理生化技术为基础的方法有:电泳法鉴定、色谱法鉴定、免疫技术鉴定等。
（1)电泳技术:相对技术较为简单，相对较准确地测定品种纯度,是目前品种纯度测定中较为快速准确的方法（二者结合)：①同工酶电泳:主要测幼苗，时间1~７d，比较准确。
同工酶的提取需要在低温下进行,操作技术严格,技术麻烦。
②蛋白质电泳:时间１～2d，比较准确。
蛋白质提取时一般在室温下进行，操作技术简单。
是目前品种纯度测定中较为快速准确的方法。
成本低:配套电泳仪500０～6000元(北京六一仪器厂）一个样品(1００粒)药品费 60～７0元。
目前500万以上的种子公司都必须配备电泳仪。
(2）色谱法技术→技术含量较高:时间1～２ｄ,分辨率高,结果比较准确,自动化程度高，操作简便，不象电泳技术性强。
主要用于禾谷类。
仪器构造复杂，价格昂贵,成本太高，用不起。
此外，电泳板上能同时分析多个样品,而色谱技术每次只能注射一个样品，总体效益不如电泳技术。
(3）免疫技术:是个新兴学科，目前需要大量技术开发研究,难以在生产实际中广泛应用。
（四）分子生物学方法鉴定。
方法种类非常多,它是在DＮＡ和RNＡ等分子水平上鉴别不同品种。
目前在品种检测中最常用的分子技术有：RＡＰＤ技术、SSＲ技术。
时间1~１5d，技术比较复杂,花费大、时间长。
目前主要用于种性测定，测定结果非常准确。
因技术复杂、成本高，目前难以广泛应用,但有广阔的前景。
（五）细胞学方法鉴定。
主要依据染色体数目和结构变异、染色体带型差异区分种及品种,在品种纯度测定中应用价值不大。
综上所述，品种纯度测定的方法非常多，但在生产实际中真正能广泛应用的方法较少。
本章主要以国家和国际标准为依据，介绍在品种纯度检验中有着广泛应用价值的方法。
第二节种子纯度的形态测定品种纯度检验的送验样品重量:扦样一章已讲过。
即实验室测定：玉米等大粒种子1００0g;小麦等中粒种子5０0ｇ;甜菜等小粒种子250ｇ.试验样品：所有方法要求4０0粒,每重复1０0粒。
种子纯度的形态测定是纯度测定中最基本的方法,可分为籽粒形态测定、幼苗形态测定和植株形态测定。
一、籽粒形态测定籽粒形态测定特别适合于籽粒形态性状丰富、粒型较大的作物。
在测定时应注意因环境影响易引起变异的籽粒性状(如甘肃的莱农14、与东北、本地、夏播的颜色不一样）。
同时该方法易受主观因素的影响，种子检验员须积累丰富的经验。
这一技术可以与计算机识别相结合对品种纯度进行快速测定，消除主观影响（杨锦忠）。
(一)测定方法随机从送验样品中数取40０粒种子，每个重复≯１00粒种子。
根据种子的形态特征,逐粒观察区别本品种与异品种，必须备有标准样品。
品种纯度(%）= 供检种子数—异品种种子数×１00% 供检种子数测定结果(ｘ)是否符合国家种子质量标准值或标签值(a)要求, 可查表６-１(p86)判别。
如果xa ≥容许差距，说明不符合国家种子质量标准值或标签值要求。
如杂交玉米种子纯度的国家标准为９6.0%,查表6－1：规定值96%，n＝40０株时，容许差距为1．６%。
抽检结果为９4.５％，比规定值低1.5％<1.6％。
表明这批玉米种是合格的。
表6-１品种纯度的容许差距(５%显著水平的一尾测定) 标准规定值样本株数、苗数或种子粒数50%以上５0%以下5０75 １０0 １０0099 1 ２.3 1．9 1．6 1.３１.２０．8 ０.7 0．５98 2 3.３ 2.7 2．３1．9 1.６１.2 0.9 0．797 3 4.０ 3.３ 2.8 2．3 2.０ 1.４１．2 0.99６ 4 ４.６3．7 3．２ 2.6 ２.３1．６ 1.3 1．095 5 ５.1 4.2 3.6 2.9 2.５ 1.８1．5 1．１9４ 6 5．5 4.5 3．９３.2 ２.8 2.0 1.6 1.293 7 ６.０ 4.９4．２ 3.4 3.0 ２.1 1.７１．392 8 ６.3 5.2 4．５3．７3．2 2.2 1.8 1．４9１９ 6.7 5.５ 4.7 3．9 3.3 2.4 １.９ 1.５９0 10 ７.０ 5.7 ５．0 4.0 3.５ 2.5 ２.0 1.6 8９１１7.3 ６.0 ５.２ 4.2 3．７ 2.6 2．1 1．688 12 7.6 6．２ 5.4 4.４ 3.８ 2.7 ２.2 1．787 13 7．9 6．４5．5 4.５ 3.9 2.8 2．3 １.886 1４8.1 6.6 ５.7 4.７4．0 ２．9 2．3 1．885 1５８.3 6．８ 5.９ 4.8 4.2 3.0 2.4 1．９84 16 8．6 7.0 6.1 ４．9 ４.３ 3.０ 2.５1．9８3 17 ８.8 7.2 ６.2 5.1 4.4 ３.1 2.5 2.082 18 9.0 7．３６.３５.2 4．5 3.2 ２.6 ２.081 19 9．２7.5 6.５5．3 4.６ 3.2 2.6 ２.1表6-1中的容许差距是怎样计算出来的?可以通过下列公式计算：容许差距Ｔ=1．65nqp/⨯Ｐ—→标准值或标签值;q-→100-Pn－→样品的粒数或株数【例1】小麦大田用种的纯度国标为９9.0％,试验样品4０0粒种子，则P=9９．0,q=1００-99=1.0容许差距T＝1.65400/199⨯＝0.８【例2】纯度为90.0%，种植7８株,那么P=90,q=10,ｎ=7８,则T=5．6特别适用于试样不是表中的定数时，用上述公式计算容许误差就更方便了。