实验一.葡萄糖的一般杂质检查

10、重金属检查法
硫代乙酰胺法 原理：
CH3CSNH2 H2O pH3.5CH3CONH2 H2S
药物：Pb2 H2S pH3.5PbS黄色～棕黑色
对照：PbNO3c、V H2S pH3.5PbS黄色～棕黑色
重金属检查方法
取50mL纳氏比色管两支，甲管中标准铅 溶液（10μg/mL）2.0mL与醋酸盐缓冲液 （pH3.5）2mL后，加水稀释至25mL;
实验要求
记录每个试验项目的称样质量 记录酸度的检查、溶液的澄清度与颜色检
查、氯化物的检查、硫酸盐的检查的实验 现象 给出实验结果、进行结果判定 实验报告
主要试剂及器皿
试剂：
酚酞指示液 25%氯化钡溶液 0.020mol/L NaOH溶液 稀硝酸 10 μg/mL NaCl标准溶液 稀盐酸 100μg/mLK2SO4标准溶液 器皿： 50mL纳氏比色管 电子天平
硫酸盐的限量
V 2.0mL，c 100g / mL，m 200g
L V c 100% m
L 100 g / mL 2.0mL 100%
2.0g
100 g / mL 2.0mL 100 % 2.01000000 g
1104 100% 1102% 0.01%
9.铁盐的检查
原理：铁盐在酸性溶液中与硫氰酸铵生成 红色可溶性硫氰酸铁配位离子，与一定量 标准铁溶液同法处理后所呈颜色比较，判 断供试品铁盐是否超限。 Fe3 6SCN H [Fe(SCN)6 ](红)
2．正确选用量具：根据检查试验一般允许误差为±10%的 要求和药品、试剂的取用量。
3．平行操作：标准品与样品必须同时进行实验，加入试 剂量、顺序等均应一致。观察时，两管受光照的程度应 一致，使光线从正面照入，比色时置白色背景上，比浊 时置黑色背景上，自上而下地观察。
4．砷盐检查时，取用的样品管与标准管应力求一致，管 的长短，内径一定要相同，以免生成的色斑大小不同， 影响比色。锌粒加入后，应立即将检砷管盖上，塞紧， 以免AsH3气体逸出，反应时勿随意晃动。
于样品溶液和对照溶液中，分别加入1mL（用滴管滴20滴） 0.1mol/L硝酸银溶液，用水稀释至50mL，摇匀，在暗处放置5min，在 黑色背景下，从比色管上方向下观察比较，样品溶液如发生浑浊，与 对照品比较不得更浓（0.010%）。
杂质限量的计算
杂质限量＝ 杂质的最大允许量 供试品量
100％
＝标准溶液浓度（ C） 标准溶液体积（ 供试品量（ m）
三、实验操作
（二）鉴别 取本品约0.2g，加水5mL溶解后，缓缓滴
入温热的碱性酒石酸铜试液，即生成氧化 亚铜红色沉淀。
（三）检查 1.酸度的检查
取葡萄糖2.0g至50mL比色管，加水20mL溶 解后，加酚酞指示剂3滴与0.020mol/L氢氧 化钠溶液0.20mL，应显粉红色。
记录：称量质量和实验现象 标准要求：溶液应粉红色 单项判定：□合格□不合格
实验记录举例
实验现象
实验项目
实验结果 标准要求 实验结论
氯化物
如样品溶 液没有标 准对照液 浑浊
＜0.01%
如样品溶 液比标准 对照液浑 浊
＞0.01%
合格 ≤0.01%
不合格
8.硫酸盐的检查
取葡萄糖2.0g至50mL纳氏比色管中， 加水溶解使成约 40mL （溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性，如溶液不澄 清，过滤），加稀盐酸2mL，摇匀，即得样品溶液。
7.氯化物的检查
取葡萄糖0.60g至50mL纳氏比色管中， 加水溶解使成25mL（溶液 如显碱性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10mL（如溶液不澄 清，应过滤），加水使成约40mL，摇匀，即得样品溶液。
另取标准10μg/mL氯化钠溶液6.0mL，置于50mL比色管中，加稀 硝酸10mL，加水使约成40mL，摇匀，即得对照溶液。
对照液
葡萄糖
铁盐的检查试验方法
取葡萄糖2.0g至50mL纳氏比色管中， 加水 20mL溶解后，滴加硝酸3滴，小火煮沸5min， 放冷，加水稀释使成45mL，加硫氰酸铵 (30→100) 3mL，摇匀，如显色，与标准Fe溶 液（10μg/mL）2.0mL用同一方法制成的对照 液比较，白色背景下从上向下观察，不得更 深（0.001%）
2.溶液的澄清度与颜色检查
取葡萄糖12.5g至50mL纳氏比色管中，加 热水溶解后，放冷，用水稀释至25mL， 观察，溶液应澄清无色。
记录：称量质量和实验现象 标准要求：溶液应澄清无色 单项判定：□合格□不合格
4.亚硫酸盐与可溶性淀粉检查
取本品1.0g至试管中，加水10mL溶解 后，加0.1mol/L碘试液1滴，应即刻显示 黄色。
V）100％
L C V 100% m
氯化物的限量
V 6.0mL，c 10g / mL，m 0.60g
L V c 100% m
L 10g / mL 6.0mL 100 %
0.60 g
10g / mL 6.0mL 100 % 0.60 1000000 g
1104 100% 1102% 0.01%
另取标准硫酸钾（100μg/mL）溶液2.0mL置于50mL比色 管中，加水使成40mL，加稀盐酸2mL，摇匀，即得对照溶 液。
于样品溶液和对照溶液中，分别加入25%氯化钡溶液 5mL ，用水稀释至50mL，充分摇匀，放置10min，在黑色背 景下，从比色管上方向下观察比较，样品溶液如发生浑浊， 与对照品比较不得更浓。（0.010%）
取葡萄糖4.0g至于乙管， 加水20mL溶解后， 加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL，加水稀 释至25mL;
再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各 2mL,摇匀，放置2min,同置白色背景上， 从上向下观察，不得更深。
11.砷盐
原理 锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中微
量砷盐反应生成具挥发性的砷化氢，遇溴化汞试 纸产生黄色至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液 所生成的砷斑比较，判定药物中砷盐的含量。其 反应式如下： AsO33-+3Zn+9H+ AsH3+3Zn2++3H2O
砷盐检查方法
样品砷盐检查：取葡萄糖2.0g至检砷瓶中， 加水
5mL溶解后，加（浓）盐酸5mL与水稀释至28mL， 加KI试液5mL与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放 置10min后，加锌粉2g，迅速将导气管塞于瓶口上， 并将检砷器置在25℃下反应45min，取出溴化汞试 纸，将生成的砷斑与2ml标准砷溶液（1μg/mL）在 相同条件下生成的砷斑比较，颜色不得更深 (0.0001%)。 注意：KI试液与氯化亚锡还可抑制锑化氢的生成。
1.G板：玻璃背面先贴上标签（G板）， 取硅胶G粉5g，加18毫升水，向同一个方 向研磨混合，去除表面气泡，从中心倒入 洁净玻璃板，研钵棒助涂布均匀(快速)， 拍板，转向，再拍板，平推，勿动！！做完让老师看板，认可后方能离开。
2.H板：玻璃背面先贴上标签（H板）， 取硅胶H粉5g，加18毫升CMC-Na，同上 法制板，平推，勿动！！
5. 砷盐检查实验结束后，醋酸铅棉花自导气管上部全数夹 出，废液倒入回收桶，切勿倒入水槽以免造成堵塞。
本实验技术要点：
1.比色管正确使用； 2.点滴瓶用法； 3.检砷瓶用法拿法及用法（醋酸铅棉花塞
入的位置、长度及蓬松程度；导气管的密 闭程度等）；
下周预备实验-G板和H板的制备 （每人做一个G和一个H ）
C6H12O6 + 2 Cu2+ + 4OH- = C6H12O7 + Cu2O↓ + 2 H2O
本实验除了检查氯化物、硫酸盐、铁盐、重 金属、砷盐等一般杂质外，还检查溶液的澄清度 （目的检查不溶性杂质，如糊精、蛋白质等）、 亚硫酸盐与可溶性淀粉（因制备时使用的酸可能 带有亚硫酸盐，可溶性淀粉为引入的中间体）。
标准砷斑的制备：精密量取标准砷溶液 （As 1μg/ml）2ml，于另一个试砷瓶中， 加盐酸5ml与蒸馏水21ml，照上述方法自 “加碘化钾试液5ml”起，依法操作，即得。
四、注意事项
1．比色管的正确使用：选择配对的两支纳氏比色管，用 清洁液荡洗除去污物，再用水冲洗干净。采用旋摇的方 法使管内液体混合均匀。
AsH3+2HgBr2 2HBr+AsH(HgBr)2 黄色 AsH3+3HgBr2 3HBr+As(HgBr)3 棕色
检砷装置的准备：
取60mg醋酸铅棉花撕成疏松 状，每次少量，用细玻璃棒轻 轻而均匀的装入导气管中，装 管高度约60mm，用镊子取出一 片溴化汞试纸，置旋塞顶端平 面上，盖住孔径，用橡皮筋固 定。
药物分析实验 实验一 葡萄糖的分析
一、教学目的
了解葡萄糖的全检过程；
掌握葡萄糖中氯化物、硫酸盐、铁盐、重 金属、砷盐等一般杂质检查的基本原理 、 操作方法及杂质限量计算；
正确使用载：
D-葡萄糖
二、基本原理
葡萄糖分子中具有醛基，还原碱性酒石 酸铜生成红色氧化亚铜。