实验一细胞形态结构与几种
细胞形态结构的观察与显微测量
实验一细胞形态结构的观察与显微测量一、实验目的：1．熟悉动物细胞、植物细胞的基本形态结构2．掌握临时装片的制作方法3．掌握显微测量的原理和方法4．掌握生物绘图的方法。
二、实验原理：细胞是生物体结构功能的基本单位，其形态与功能相适应。
不同类型的细胞具有不同的大小、形态和结构，以适应其功能。
通过制作临时装片，可以观察很多细胞的结构，并借助测微尺测量细胞直径，进而获得细胞的体积。
三、实验仪器、试剂及材料：仪器：光学显微镜（台/人），载玻片、盖玻片（4套/人）、测微尺剪刀（1把）、镊子（1把）、牙签（50根）、滴管（个/组）试剂：1%碘液、瑞特染液（如果观察血细胞，则需瑞特染液）材料：洋葱、红辣椒、紫色落葵（或紫罗兰）、血细胞悬液、口腔上皮细胞四、实验步骤：1．洋葱鳞茎表皮细胞的观察在载玻片中央滴一滴1%碘液用剪刀在洋葱鳞茎叶内表面画一个1mm2的方框用镊子撕下表皮在碘液中铺平盖上盖玻片用吸水纸吸去多余碘液（也可帮助排除气泡）显微镜下观察（同法制红辣椒表皮细胞装片）2．人口腔黏膜上皮细胞的观察在载玻片中央滴一滴1%碘液用牙签刮取上皮细胞在1%碘液中搅动分散细胞染色1分钟盖上盖玻片观察3．血细胞观察（见细胞生物学实验教程：第9页）在载玻片右端滴一滴血细胞稀释液用另一张载玻片以30~45度角（两玻片夹角）推移血液成均匀薄膜滴一滴瑞特染液染色3分钟自来水洗掉染液，晾干观察4．显微测量（1）原理：测微尺由目镜测微尺和镜台测微尺组成，目镜测微尺位于目镜内，为玻璃圆片，上有一条带刻度的直线，精确度较镜台测微尺的低；镜台测微尺是一块载玻片，中央圆形区域内有一带刻度的直线，精确度较目镜测微尺高。
（2）测量：A、将镜台测微尺放入载物台上，转动目镜，使二者平行。
选择一处让二者重合，然后向右侧寻找再次重合处，记下二者的数值，并按照目镜测微尺和镜台测微尺的精度关系换算目镜测微尺每小格实际代表的刻度值。
B、将镜台测微尺取下，换上洋葱表皮细胞、口腔黏膜上皮细胞、血细胞涂片，用目镜测微尺测量出其长度和宽度。
1-细胞生物学实验
如镜台测微尺1mm处(全长)与目镜测微尺75 刻度(150小格)重合，则:
目镜测微尺每小格的实际长度=
1 150
mm
=0.0067mm=6.7μm
④同样的方法标定高倍镜下目镜测微尺 每小格的实际长度
计算公式如下:
目镜测微尺每小格的实际长度
镜台测微尺长度 ＝
目镜测微尺格数
＝ 30×10μm 200
(4)测量细胞并计算核质比
五、实验操作
1. 取猪肝1g，放入小烧杯中，加4ml 0.25M蔗糖缓冲液， 将组织剪成约1mm立方的小块。
2. 将剪碎的组织移入匀浆器的外管中，再将内管（带柄 的活塞）插入外管中，缓慢而均匀地施力，上下旋转拉 动，匀浆7-10分钟，然后用六层纱布过滤回洗净的原烧 杯中。（这两步操作略）
3. 每组取1个5ml离心管，加入匀浆液2ml，2000rpm离 心10分钟。（每组1管）
许多酸性染料不易穿过活细胞的质 膜进入细胞内，却能渗入死亡的细胞 内，使其着色，以此来鉴别死活细胞。
2.方法 取酵母悬液一滴于洁净玻片上，滴一滴0.2％亚甲基
蓝染液，加盖片，2分钟后于显微镜下观察细胞。
3.结果 死细胞被染成蓝色，活细胞不着色。
实验作业
画图记录细胞吞噬实验所见结果
实验三
细胞核与线粒体的 分级分离
实验内容
实验一、细胞的形态结构与显微测量 实验二、细胞生理活动的实验观察 实验三、细胞核与线粒体的分级分离 实验四、细胞分裂的形态观察 实验五、细胞原代培养 实验六、细胞计数及死活细胞的鉴定 实验七、综合设计性实验
实验一
细胞的形态结构与显微测量
实验目的
(一) 观察并了解细胞的基本形态。 (二)掌握临时制片和显微绘图的方法。 (三)了解显微测微尺的原理及使用方法
细胞生物学实验教案大全
细胞生物学实验教案【经典学习资料，收藏必备】实验一、细胞形态结构与几种细胞器的观察【实验目的】在普通光学显微镜下识别细胞和细胞器的形态结构，掌握生物绘图的方法。
【实验原理】细胞在形态上是多种多样的，有球形、椭圆形、扁平形、立方形、梭形、星形等。
虽然细胞的形状各异，但是它们却有共同的基本结构特点，都由细胞膜（动物）、细胞壁（植物）、细胞质和细胞核组成。
细胞中的各种细胞器，如线粒体、高尔基体、中心体、核仁、染色体等，一般经过一定固定染色处理后，大多数在光学显微镜下是可以看见的（图）。
细胞器的形态结构在普通光学显微镜下与电子显微镜下所看到的结构有很大的差别。
（自拍图）（a）（b）（c）（d）图 1 细胞形态结构a. 柿胚乳细胞示胞间连丝；b. 马蛔虫受精卵分裂中期示中心粒；c. 兔的神经细胞中高尔基体；d.小鼠肝细胞线粒体【实验仪器、材料和试剂】1. 仪器：复式显微镜、擦镜纸2．材料：洋葱根尖切片、小白鼠肝切片、兔神经节切片、马蛔虫受精卵切片3．香柏油或石蜡油、二甲苯【方法与步骤】一、洋葱根尖切片细胞的观察先用低倍镜观察根尖的纵切面，注意分生区、伸长区、成熟区细胞的异同，然后再仔细观察细胞的形态结构，特别注意细胞的形状、大小，以及细胞壁、细胞核、核仁、细胞质、液泡的形态结构。
二、兔神经节细胞切片高尔基体的观察先在低倍镜下找到兔神经节细胞，然后转用高倍镜观察，可看到细胞内淡黄色的背景上有黄褐色的细胞核，核的周围分布着许多深褐色的（硝酸银镀染）高尔基体，呈弯曲的线状，颗粒状，少量分散在细胞质。
三、小白鼠肝细胞切片线粒体的观察先用低倍镜后用高倍镜观察，可见到许多肝小叶，每小叶有许多紧密排列成索状的多角形的肝细胞，细胞中央有大而圆的细胞核。
这时，转用油镜观察，可见到细胞质内分布着许多被苏木精染成深紫色的线粒体，呈颗粒状和线状。
四、马蛔虫受精卵切片中心体的观察1．取马蛔虫受精卵切片，在显微镜下找到充满子宫腔的受精卵，每个马蛔虫受精卵外围有一层较厚的卵膜，膜内有宽大的围卵腔，各围卵腔内有处在不同分裂期的卵细胞。
实验一、细胞形态结构的观察和普通光学显微镜的使用
DIC显微镜下的射电子显微镜
莱卡超薄切片机
JEM-1011透射电子显微镜
内质网透射电镜图（伪彩色） 内质网透射电镜图（伪彩色）
冰冻蚀刻电镜照片
10. 扫描电子显微镜
JEOL扫描电子显微镜 JEOL扫描电子显微镜
人类血细胞SEM照片
11. 显微操作技术
2. 显微镜的调节
瞳距调节
屈光度调节
调节
粗调松紧调节旋钮
聚光镜中心调节
②10X物 10X物 镜 ①标 本
③ 孔径 光栏 ⑤ 光轴中心调节 螺钉 ④ 聚光镜升降 旋钮 ③ 视场 光栏
孔径光栏调节
N.A聚=(0.6-0.8)N.A物 = 0 6 8
孔径光栏开度与图象
100%
70%
30%
孔径光栏的运用
四. 注意事项 1.低 高倍镜的使用。 1.低、高倍镜的使用。 2.合轴调节。 2.合轴调节。 合轴调节
五. 实验结果 1.描绘一个兔肝细胞的基本形态结构。 1.描绘一个兔肝细胞的基本形态结构。 描绘一个兔肝细胞的基本形态结构 2.熟练显微镜的调节。 2.熟练显微镜的调节。 熟练显微镜的调节
六. 思考题 比较真核细胞和原核细胞的形态结构及其区别。 比较真核细胞和原核细胞的形态结构及其区别。
实验一 细胞形态结构观察和光学显微镜的使用
一. 实验原理 细胞是生物体的基本结构单位。 细胞是生物体的基本结构单位。构成生物机体的细胞 是多种多样的。要对细胞进行研究， 是多种多样的。要对细胞进行研究，首先要从其形态结构 人手。所以，要借助显微镜的成像及放大原理， 人手。所以，要借助显微镜的成像及放大原理，在显微镜 才能观察到细胞的基本形态结构。 下，才能观察到细胞的基本形态结构。 二.试剂与器械 普通光学显微镜，兔肝细胞玻片标本， 普通光学显微镜，兔肝细胞玻片标本，草履虫玻片标 本。
实验一：使用高倍显微镜观察几种细胞
实验一：使用高倍显微镜观察几种细胞一、实验目的：1、学会如何使用显微镜观察细胞；2、了解细胞的结构；3、学会制作临时装片。
二、实验材料：（实验材料可换）松针、动物血液、动物神经细胞永久装片三、实验用具：载玻片、盖玻片、蒸馏水、滴管、镊子、土豆、刀片、显微镜（物镜5X、10X、40X）四、方法步骤：1、制作松针的临时切片：（1）取干净的载玻片一个平置于试验台上，用滴管在载玻片中央滴一滴蒸馏水。
（2）将土豆切成条状（截面约：0.5X0.5cm)取两条，将一根松针夹在两个土豆条之间，用刀片削成尽量薄的薄片，削时，手腕不动，靠大臂带动小臂移动刀片。
切片数次。
从中选取较薄的切片，置于载玻片的水滴上。
（3）从一侧轻轻盖上盖玻片，不要产生气泡。
用吸水纸轻轻吸去盖玻片周围的水滴，即完成临时切片的制作。
2、观察切片：（1）取出显微镜，置于试验台上靠左的位置，打开光源。
（2) 将上步制作好的切片置于显微镜的载物台上，调整载物台位置，使盖玻片对准光源。
（3）使用5X物镜观察切片，使松针切片在视野中心，换成10X物镜，观察松针叶面横切结构。
（4）换成40X物镜观察，注意细胞及细胞内物质结构，画图。
3、动物血液临时装片的制作及观察（除了不用切片，其他类似）4、动物神经细胞永久装片的观察。
五、考点提示：1、松针的叶面结构是什么样的？2、动物细胞的结构是什么样的？与植物细胞又什么不同？3、显微镜的物镜倍数愈大，视野的亮度如何？物体的大小如何？4、如何调节焦距？5、如何才能使切片尽量的薄？切片的厚薄对显微镜下观察的效果有什么影响。
实验二：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一、实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质，阐明实验原理—颜色反应，识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握鉴定上述化合物的基本方法，学会描述实验现象，掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。
二、实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。
实验1细胞结构
（四）植物细胞的后含物
糊粉粒：花生 油滴：花生 淀粉粒：马铃薯 钟乳体：橡皮树 针晶：鸭跖草 对材料进行徒手切片，用碘液对淀粉与 蛋白质进行染色; 用苏丹III对脂肪进行染 色，染色后在显微镜下观察。 材料
(五)高等植物细胞有丝分裂过程
间期
(染色体复制)
前期
(染色体出现)
中期(染色
体配对,最短)
植物学实验
实验一 植物细胞的基本结构及各种细胞器的 形态与功能
实验内容
（一）植物细胞的基本结构 （二）细胞壁、纹孔和胞间连丝 （三）质体的形态 （四）植物细胞的后含物 （五）植物细胞有丝分裂
实验目的
一、利用永久封片和自制临时装片观察 与掌握植物细胞基本结构、细胞壁以及 细胞器（主要是质体）的特点。 二、学习利用组织化学原理对细胞进行 染色的方法，在此基础上观察细胞代谢 产物的类型。 三、 利用永久封片观察细胞的有丝分裂 过程。 四、 学习各种植物细胞临时装片方法。
末期(逐渐
形成两个细胞)
末期(细胞
板开始出现)
后细胞基本结构图并标注。 制表记录本次实验所用材料和观察的特 征结构。
细胞器：细胞质中被膜包围的具
有一定形态结和功能的结构
质体
细 胞 器
线粒体 内质网 高尔基器 微体
圆球体 核糖体、溶酶体、液泡、微管、微丝等
光学显微镜下看到的植物细胞的基本结 构包括: 细胞壁、细胞质（叶绿体、白色体、 有色体等）、细胞核（核仁、核膜）、液 泡、细胞代谢产物。 本次实验以洋葱表皮细胞为例观察细胞基 本结构。
观察难点：液泡的大小与位置、细胞壁结
构、细胞核的位置与形态
实验操作
临时装片法(以洋葱表皮细胞为例) 在载玻片上加一滴水， 用镊子撕取洋葱表皮，并用刀片刮掉附在表皮 上叶肉组织； 用剪刀剪取较适宜（2m2左右）一块材料置载 玻片水液中； 加碘液染色，细胞核被染为深黄色，细胞质浅 黄色，液泡未被染色； 取盖玻片盖住材料，以不产生气泡为好； 把载玻片置显微镜载物台上，从低倍到高倍进 行观察细胞结构。
实验一 细胞形态结构的显微镜观察
生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室
大连理工大学
环境与生命学院
显微镜的成像的一般原理
显微镜的放大作用是由物 镜和目镜共同完成的。 镜和目镜共同完成的。标本经 物镜放大后， 物镜放大后，在目镜的焦平面 上形成一个倒立的实像， 上形成一个倒立的实像，再经 目镜的进一步放大形成一个虚 像，被人的眼睛所观察到。一 被人的眼睛所观察到。 般光学显微镜最大分辨率为 0.2µ m。 生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室
大连理工大学
环境与生命学院
实验一 细胞形态结构的 显微镜观察
指导教师： 指导教师：唐颖
生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室
大连理工大学 1.实验目的 1.实验目的
环境与生命学院
• 熟悉显微镜的工作原理及使用方法。 熟悉显微镜的工作原理及使用方法。 • 了解显微镜下细胞和细胞器形态结构。 了解显微镜下细胞和细胞器形态结构。 • 初步掌握临时制片的方法。 初步掌握临时制片的方法。
• •
可滴加碘液观察马铃薯块茎细胞。 可滴加碘液观察马铃薯块茎细胞。 观察与绘图。 观察与绘图。 绘制芹菜茎横切及自制的任一植物细胞标本的形态结构。 绘制芹菜茎横切及自制的任一植物细胞标本的形态结构。
生物科学与工程系细胞生物学实验教学研究室
大连理工大学
5.实验结果 5.实验结果
环境与生命学院
• 除了观察细胞的一般结构，还应注意： 除了观察细胞的一般结构，还应注意： • 马铃薯块茎细胞：注意淀粉粒观察； 马铃薯块茎细胞：注意淀粉粒观察； • 番茄注意有色体的观察； 番茄注意有色体的观察； • 菠菜注意叶绿体、气孔的观察； 菠菜注意叶绿体、气孔的观察； • 芹菜横切可观察到维管束等结构。 芹菜横切可观察到维管束等结构。
实验一 细胞的形态观察及其大小测量
实验一细胞的形态观察及其大小测量一、实验目的1. 观察细胞形态。
2. 掌握细胞大小的测量方法。
二、实验原理细胞是生命的基本单位，是生物体内最基本的形态结构。
由于其极小的体积，需要借助显微镜来观察。
在显微镜下，细胞呈透明圆形或长方形结构，包括细胞核和细胞质两部分。
细胞大小的测量是衡量细胞形态大小的一种方法，一般使用显微镜和标尺等工具进行测量。
三、实验器材和试剂1. 显微镜：10×、40×、100×梯形物镜、10×和16×目镜。
2. 小片玻片。
3. 缺口玻璃滴管。
4. 普通培养皿。
5. 滴定管。
6. 甲醛：10%浓度。
四、实验步骤1. 取用甲醛液将到手的细胞样本处理，使其纤维化、固定，并保持在透明的状态。
2. 将处理均匀的细胞悬液滴于小片玻片上。
在表面打一个平口，倒入水或细胞培养液。
3. 轻轻地将另一片小片玻片斜放在溶液上，使其尽量靠近悬液表面，并且使两片玻璃片之间尽量少的包含气泡。
4. 用载物架夹住两片玻璃片，置于显微镜镜头下面，用低倍物镜先扫描一遍细胞涂片下方，保证顶点在物镜的中央，并移动至最佳观察位置。
5. 同时调整镜片高低位，目镜内外的距离，使物镜滚轮表面接触到目镜。
6. 在目镜中调整微动盘，让细胞涂片视野平滑，移动目镜板，看到悬浮细胞。
7. 分别使用不同倍数的物镜对细胞的形态进行观察。
一般来说，使用10×的物镜可以清楚地观察到细胞核和周围细胞质的形态，而使用40×和100×的物镜则可更详细地观察到细胞内部结构和细节部位。
8. 用计数尺、标尺等工具对已观察到的细胞大小进行测量。
9. 完成实验后，将玻片倒掉，用纯净水或极其减量的甲醛显微镜氧化置换去甲醛。
再用纯净水进行冲洗。
五、实验要点1. 操作时要谨慎，避免对显微镜等仪器进行过度推拉等操作。
2. 使用时需注意玻璃片的干净和平整。
3. 需要防止玻璃片之间捏入气泡。
4. 细胞涂片的厚度应适当，过厚则不便进行观察，过薄则会付着小颗粒和杂质，影响观察效果。
实验一 细胞形态结构的观察及大小测定
将物微尺放在显微镜的载物台上小心转动目镜测微尺移动物微尺使两尺平行起点线重合然后找出另一处两尺刻度重合处记录起点线到重合线之间的各尺的刻度数格数按下式计算在该放大系统下目微尺每格所代表的实际长度
实验一 细胞形态结构的观察 及大小测定
一、实验目的： 实验目的：
1、观察几种细胞的形态结构及植物细胞的胞间连丝。 2、掌握用测微尺测定细胞大小的原理和方法。
三、实验用品： 实验用品
普通光学显微镜 载玻片 盖玻片 镊子 消毒 牙签 烧杯 吸管 0.9%生理盐水、0.1%亚甲基兰、 蒸馏水 吸水纸。
四、实验材料： 实验材料： 口腔黏膜上皮细胞；洋葱内表皮；西红柿； 芹菜；韭菜；红辣椒。
五、方法步骤：
（一）、细胞形态结构的观察： 1、人口腔上皮细胞的观察（涂片法） ： 1）、在洁净的载玻片中央，滴一滴生理盐水。 2）、用消毒牙签的一端，在漱净的口腔侧壁上轻轻地刮几 下。 3）、把牙签上附有碎屑的一端，放在载玻片上的生理盐水 滴中涂匀。 4）、用镊子夹起洁净的盖玻片，将它的一边先接触载玻片 上的生理盐水滴，然后，轻轻地盖在水滴上。然后在盖片 的一侧加一滴0.1%亚甲基兰染液，在盖片的另一侧用吸 水纸吸取，染色后细胞核被染成深蓝色，细胞质浅蓝色。 5）、用显微镜观察细胞形状，细胞呈扁平鳞状。
洋葱鳞茎表皮细胞
洋葱鳞茎表皮细胞
六、注意事项： 注意事项：
1、制作临时装片时避免产生气泡 2、用物微尺标定的目微尺每格长度的数值代表在某一放大 系统下的情况，这一数值会随物镜的放大率而改变，因此， 在什么放大倍数物镜下标定的目微尺只能在同一放大倍红柿果肉细胞观察： 西红柿果肉细胞涂片制作似人口腔上皮细胞，但将生 理盐水换成蒸馏水，且不必染色就可直接观察。细胞大小 和形状如何？ 3、植物表皮细胞观察（撕片法）： 撕一小片植物表皮（洋葱、芹菜和韭菜），放在盛有 一小滴蒸馏水的载玻片上，用镊子展平，盖上盖玻片在显 微镜下观察。细胞大小和形状如何？ 取红辣椒一片，用刀片刮去果肉或撕取红辣椒表皮一小 片，将表皮制成临时装片，用显微镜观察表皮细胞，能看 见胞间连丝吗？
实验一细胞的显微结构-光镜下的细胞器
记录观察结果
记录
详细记录观察到的细胞器形态、大小、 分布和染色特点。
分析
根据观察结果，分析细胞器的功能和 在细胞中的地位。
04
实验结果与分析
观察到的细胞器种类和形态特征
细胞器种类
实验观察到了线粒体、高尔基体、内质网、溶酶体、中心体等细胞器。
形态特征
线粒体呈现为圆形或椭球形，高尔基体呈现为扁平的囊状结构，内质网呈现为网状结构，溶酶体呈现为圆形或卵 圆形，中心体呈现为圆形小体。
根据实验需求选择适当的染色剂，如苏木精-伊红染色剂用于 显示细胞组织的一般结构。
染色过程
将染色剂与细胞样本混合，确保染色均匀，然后用水冲洗掉 多余的染色剂。
在显微镜下观察细胞器
放置样本
将染色后的细胞样本放置在载玻片上，用盖玻片轻轻覆盖。
观察
通过显微镜观察细胞器的形态和分布，注意不同细胞器的特征和差异。
对实验过程的反思与改进建议
反思
在实验过程中，我们需要注意实验操作和观察的准确性，避免因操作不当导致观察结果 出现误差。同时，还需要注意实验过程中的安全问题，如避免使用过于尖锐的刀片等。
改进建议
为了提高实验效果，我们可以更加细致地观察细胞器的形态和分布，同时加强对实验原 理和操作步骤的理解和掌握。此外，我们还可以尝试采用其他实验方法和技术来进一步
解细胞的显微结构。
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与理论知识的对比分析
实验结果与理论知识基本一致，实验中观察到的细胞器种类 、形态特征和功能均符合理论描述。这表明实验操作正确， 观察结果可靠。
实验中可能存在一些误差，如细胞器的形态特征可能受到细 胞固定和染色等因素的影响，导致观察结果与理论不完全一 致。因此，需要进一步优化实验条件和方法，提高实验结果 的准确性。
细胞生物学实验方案
实验目的
在光学显微镜下识别细胞和细胞器的形态结构， 掌握生物绘图的方法。
实验原理
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细胞在形态上是多种多样的， 有球形、椭圆形、扁平形、立方形、梭形、星
形等。虽然细胞的形状各异，但是它们却有共同的基本结构特点．都由细胞膜（动
物）、细胞壁（植物）、 细胞质和细胞核组成。 细胞中的各种细胞器， 如线粒体、 高尔基体、中心体、核仁、染色体等， 一般经过一定固定染色处理后， 大多数在
方法与步骤
剪取 一 小块红辣椒， 用小刀小心刮除果肉，留下 一 层极薄的表皮，放在载玻
片上， 滴一滴水， 盖上盖玻片后观的胞间连丝。
实验三 细胞膜的通透性
实验目的
了解相对分子质量、脂溶性大小、电解质和非电解质溶液对细胞膜透性的影 响。
实验原理
细胞膜在不断变化的环境中，必须保持自身的稳恒状态，才能生存。细胞膜 允许一些物质通透，又能降低甚至阻挡另 一些物质的通透， 所以细胞膜具有选择 通透性。水分子可以自由通过细胞膜，当细胞处千低渗液环境时，水分子大量渗 到细胞内，使细胞膨胀、进而破裂，血红蛋白释放到介质中，由不透明的红细胞 悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这就是溶血现象，溶血现象可作为测量物质 进入红血细胞速度的一种指标。
6. 在制好的密度梯度上小心地沿离心管壁加入 0.4 mL 上清液。 7. 严格平衡离心管， 份量不足的管内轻轻加入少量上清液。 8. 用水平转头离心 8000r/min, 20 min。 9. 取出离心管， 可见叶绿体在密度梯度液中间形成带， 用滴管轻轻吸出滴千载
玻片上， 盖上盖玻片， 显微镜下观察。 还可用荧光显微镜观察。 作业 1. 分离的叶绿体是否纯净？试分析原因。 2.匀浆介质为什么选用 0.25mol/L 庶糖？匀浆在低温下快速进行是何道理？
实验一 细胞形态及细胞器的观察
1.2 放大镜：约在四百年前眼镜片工匠们开始磨制 放大镜。当时的放大镜的放大倍数只有3—5x 1.3 显微镜： 1590年，荷兰和意大利的眼镜制造者造出类似显 微镜的放大仪器。 1673～1677年期间，列文胡克制成单组元放大镜 式的高倍显微镜 19世纪70年代，德国人阿贝奠定了显微镜成像的 古典理论基础。 1850年出现了偏光显微术； 1893年出现了干涉显微术； 1935年荷兰物理学家泽尔尼克创造了相衬显微术 ，
3.9工作距离
工作距离也叫物距，即指物镜前透镜的表面 到被检物体之间的距离。 在物镜数值孔径一定的情况下，工作距离短孔 径角则大。 数值孔径大的高倍物镜，其工作距离小。
提高显微镜分辨率的方法：
（1）增大物镜的数值孔径 在物镜和盖玻片之间充以n 较大的油，如香柏油n =1.52,不仅使n 增大，而且孔径角 也增大。 （2）用短波长的光照射 如紫外光显微镜，电子显微镜。
观察细胞及细胞器的形态
口腔上皮细胞
洋葱表皮鳞状细胞
植物和动物细胞形态差别
动植物细胞都可以观察到细胞核 动物细胞没有细胞壁（形状不规则） 植物细胞具有细胞壁（形状较为规则）
洋葱根尖细胞
细胞有丝分裂
根据细胞形态结构的变化，将有丝分裂人为地划 分为6个时期： 前期(prophase)、前中期(premetaphase)、中期 (metaphase)、后期(anaphase)和末期 (telophase)、胞质分裂。
3 显微镜的几个基本概念
3.1 光源：能发射光波的物体。 可见光频率范围：7.5×1014 - 3.9×1014 Hz。 真空中对应的波长范围：390nm – 760nm 相应光色：紫、蓝、青、绿、黄、橙、红
3.2分辨率(鉴别距离)：显微镜能分辨的最小距离，用 D表示。显微镜的鉴别距离越小，分辨率越高。 D=0.61λ / nsin D：分辨率 λ :光波的波长 N:介质折射率 α :物 镜镜口角 3.3孔径角：由标本上一点发出的进入物镜最边缘光线 L和进入物镜中心光线OA之间的夹角称为孔径角。 3.4数值孔径：N·A = nsin , 叫物镜的数值孔径 。 数值孔径与显微镜的分辨率有密切关系，越短 ，NA越大，分辨率越高。
实验1-植物细胞的基本形态与结构
植物细胞的结构与功能是相互关联的，未来可以通过深入研究不同植物 细胞的结构特点与功能特性，来揭示植物细胞结构与功能之间的内在联 系和规律。
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组成
主要由磷脂和蛋白质组成，具有 选择透过性。
功能
控制物质进出细胞，维持细胞内环 境的相对稳定。
特点
具有一定的流动性和选择透过性， 能够根据需要调节物质的进出。
细胞质
组成
包括细胞质基质和细胞器，如线粒体、叶绿体、核糖 体等。
功能
进行细胞内的各种生化反应，维持细胞的正常生理功 能。
特点
呈半透明的胶状物质，其中含有多种酶和细胞器，是 细胞代谢的主要场所。
实验1植物细胞的基本形态与结构
目录
• 引言 • 植物细胞的基本形态 • 植物细胞的基本结构 • 植物细胞的特殊结构 • 植物细胞的生理功能 • 实验步骤与操作 • 数据记录与分析 • 结论总结与讨论
01 引言
实验目的
掌握植物细胞的基本 形态和结构特征。
学会使用显微镜观察 植物细胞的基本方法。
了解植物细胞的显微 结构和亚显微结构。
功能
液泡对细胞内的环境起着调节作用，能维持细胞的渗透压和膨压，同时也与植物 的代谢活动密切相关。此外，液泡还能贮存和分解细胞内的某些物质。
05 植物细胞的生理功能
物质运输功能
细胞膜的选择透过性
控制物质进出细胞，维持细胞内部环境的相对稳定。
细胞质流动
促进细胞内的物质运输，将营养物质和代谢废物运送到细胞的不同 部位。
图。
注意事项及安全规范
操作规范
使用显微镜时要轻拿轻放，避免损坏镜头； 盖玻片要轻放，防止产生气泡。
实验一细胞形态多样性及细胞计数
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
常使用計數ABCD四區域有n個細胞，則細胞濃度為 = n / 4 x 104 （個/mL）
細胞計數時，細胞濃度不要太稀，太稀準確度會 比較低，最好在1～3 x 106 個/mL
由此滴加樣本
二.试剂与器械
器材 :光学显微镜、血细胞计数板。
三．实验步骤
1. 取血细胞计数板，加盖玻片盖住两边的小槽。
在细胞机能状态不良时，细胞轮廓会增强，反差增大；细胞内颗粒较多，透 明差，空泡多。
若细胞胞体肥大、胞浆内混浊、颗粒增多、折光性下降、变扁平透明，细胞核 明显增大、细胞排列极不规则则，细胞可能已经衰老。
培养基内有pH指示剂的存在，因此它的颜色往往可以间接地表明细胞的生长 状态。呈橙黄色时，细胞一般生长状态较好；呈淡黄色时，则可能是培养时问过长， 营养不足，死亡细胞过多；如呈紫红色，则可能是细胞生长状态不好，或已死亡。 当细胞生长状态良好时，培养液应清澈透明，悬浮的细胞和碎片很少。当瓶内培养 基混浊时，应想到细菌真菌污染的可能。
sp2/0 1.细胞种类：小鼠骨髓瘤细胞 2.培养的天数：复苏后12小时； 3.放大倍速：倒置显微镜 X20； 4.培养基种类：DMEM+6%FBS； 5.细胞状态与特征简述:细胞呈圆型或椭圆形。
培养细胞形态分析
贴壁细胞在生长状态良好时，胞体细长、胞浆清亮，细胞内颗粒少，看不到有 空泡，细胞边缘清楚，细胞长成单层时呈漩涡状排列；悬浮细胞当表现出边缘清楚， 透明发亮时，生长较好；反之，则较差或已死亡。
四. 注意事项
防止液体滴入过多，否则溢出并流入两侧槽内，会使盖
玻片浮起，体积改变，会影响计数结果。
五. 实验结果
血球计数板的清洁 血球汁数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬
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注意事项
显微镜使用油镜后,必须用擦镜纸、擦镜液擦 拭干净，放回原处。
把实验台清理干净，仪器放好。
作业
绘制洋葱根尖细胞、兔神经节细胞高尔基 体、小白鼠肝细胞线粒体、马蛔虫受精卵中 心体图，并标示出细胞的各部分。
细胞生物学绘图的要求和方法
一、在仔细观察的基础上，选择典型结构进行描绘 ，要求真实、准确(注意各部结构的比例关系)。
课堂考查 40%
实验报告 50%
考勤
10%(包括清洁卫生等)
参考图片
洋葱根尖细胞有丝分裂
神经节细胞(示高尔基复合体)
马蛔虫受精卵细胞 、分裂中期(示中心体)
彭勇 实验楼s415 26534149
小白鼠肝细胞切片线粒体的观察 肝切片中，肝细胞体积较大，呈多边形，多角形；细胞核大而圆位于细胞中央，染色 较浅。细胞质呈天蓝色，其中分布有许多蓝黑色（或深紫色）的线粒体。线粒体呈颗粒 状或线条状。
马蛔虫受精卵切片中心体的观察 找到充满子宫腔的受精卵，在受精卵各围卵腔内有处于不同分裂期的卵细胞。找到处于 分裂中期的细胞：染色体位于细胞中央，被染成蓝色条状或棒状。在染色体两侧各有一 个较小的，被染成蓝色的小粒，称中心粒，中心粒周围有一圈明亮的细胞质称为中心球， 中心粒和中心球合称为中心体。其周围可见称放射光芒状的星丝，成为星射线。
实验一细胞形态结构与几种
方法与步骤
洋葱根尖切片细胞的观察
先用低倍镜观察根尖的纵切面，注意区分分生区、伸长区、成熟区细胞的异同，再仔细观察 细胞的形态结构。细胞的形状、大小、细胞壁、细胞核、核仁、细胞质、液泡等。
观察洋葱有丝分裂的各个阶段：间期：前期：中期：后期：末期：
兔神经节切片高尔基体的观察 神经细胞中因蛋白质合成旺盛而具有发达的内质网和高尔基复合体。神经组织切片中的高 尔基复合体是以硝酸钴固定后，再经硝酸银染料浸染制成。由于组成高尔基复合体的物 质具有还原银盐的能力并使其呈现棕褐色沉淀，因而显示出高尔基复合体的形态和位置。 神经节细胞呈淡黄色圆形或椭圆形，高倍镜下可见细胞中央有一圆形或椭圆形的不着色 区域即为细胞核，高尔基复合体被染成棕褐色，呈线状、点状或卷曲成网状，分布于核 周围的细胞质中。
二、用铅笔绘图，线条要明确清晰，图的深浅明暗 一律以点的疏密来表示，点要圆而一致，不得涂暗 影或进行其它美术加工。
三、各部结构名称要在一侧引直线注明。各引线要 平行不得交叉。
四、每幅图的大小、位置在纸面上必须安排得当并 注意纸面的整洁。
五、图像的名字，要准确。 六、显微镜倍数Байду номын сангаас标明。
成绩考核