血型鉴定方法.ppt

B、AB、O四型。 见下表
ABO血型鉴定 不规则抗体筛选
玻片法（正定型） 盐水法
聚凝胺法
试管法（正定型,反 定型）
抗人球法
ABO血型鉴定实验原理
抗原抗体反应——在ABO血型系统中，红细胞 膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A 和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗 B抗体，则产生凝集现象→从而测知受试者红 细胞膜上有无A或/和B抗原→判断血型
抗体在相邻的红细胞表面抗原决定簇之间搭桥 形成肉眼可见的颗粒状凝集团块.见图
IgM抗体凝集红细胞示意图
IgM抗体凝集红细胞示意图
IgGM在盐水介质中产生凝集
试剂
抗A、抗B试剂血清 5%的A型、B型及O型试剂红细胞悬液 受检者血清
5%的受检者红细胞悬液 (从指尖或耳垂取血一 滴，加入含1ml生理盐水的小试管内，混匀， 即得约5％红细胞悬液。采血时应注意先用75 ％酒精消毒指尖或耳垂。)(取少量受检者红细 胞（约0.2~0.5 ml）用生理盐水洗涤3次，然 后加入适量生理盐水调配成5%浓度。)
均匀的悬液;轻微凝集的，必须将液体转到载玻片上镜 检后判定凝集程度。
试管法(反定型)
Ac
Bc
Oc
受检者血清
2滴
2滴
2滴
5%的A型红细胞悬液
1滴
5%的B型红细胞悬液
1滴
5%的O型红细胞悬液
1滴
立即以1000rpm离心1分钟或3000rpm离心15秒。
轻轻扣动试管底部，观察结果----同前
侧就不能去接触另一侧。 一般先加血清，然后再加红细胞悬液，便于核实是否漏加血清。 离心时间、速度严格要求，以防假阳 性或假阴性结果。 试验用血清和试剂红细胞都应标准化。 要在光亮的背景下观察凝集,可使用光镜检查小的凝集,同时应
注意观察凝集强度，有助于A、B亚型的发现，观察后立即记录 观察结果。
ＡＢＯ正反定型结果不一致的常 见原因有哪些？
（１）人为因素：①试剂不标准、失效或污染； ③操作中加错样本或试剂、离心速度不足或过 度、细胞与血清比例不当、结果判断错误等。
（２）客观因素：①因某些疾病导致抗原减弱 如：白血病，MDS（骨髓增生异常综合征）患 者血型抗原减弱导致误定血型。②受检者抗体 效价低（如婴幼儿、老年人、大量输液的患者， 血浆蛋白低下等）③某些药物干扰如输注右旋 糖酐后会干扰血型检定。
血型判定swf
正定型
反定型
结果
抗A
抗B A型RBC B型RBC O型RBC
-
-+
+
-
O
+
--
+
-
A
-
++
-
-
B
+
+-
-
-
AB
五 注意事项
玻片、试管都要标记！！！， A及B标准血清绝对不能相混,不 要依靠用染料颜色标记血清。工作中要形成自己的习惯！
所用玻片、试管实验前必须清洗干净，以免出现假凝集现象。 红细胞悬液滴管头不能接触标准血清液面，竹签一端去混匀一
血清和红细胞悬液
（4）观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集 块浮起。先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍 显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。
（5） 判断血型 根据被试者红细胞是否被A，B型标准血清所凝集，பைடு நூலகம்判断其血型。
2.试管法(正定型)
A
B
A标准血清
2滴
B标准血清
2滴
受试者的红细胞悬液
1滴
1滴
混匀后1000rpm离心1min或3000rpm离心15秒。 。
取出观察结果。完全凝集的管底部有红细胞的凝块， 管底细胞边缘呈花边状，轻弹试管凝块不散；完全不
凝的试管，血细胞均匀的沉到管底，边缘整齐，用手
轻弹试管，红细胞像一缕烟似的立即上升，随即成为
谢谢
血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。
在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两
种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。血
型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清
（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗
体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者
红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系
统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、
为什么这次试验没有安排玻片法 的反定型？
因为存在于病人或献血者血清中的抗 Ａ及抗Ｂ，个体差异很大，如果效价较 弱，在玻片上不足以凝集大量抗原阳性 的红细胞，造成假阴牲的结果所以采用 玻片法作反定型的结果常不可靠。而用 试管离心法作反定型，则促进抗原抗体 反应，形成肉眼可见的凝块，使结果更 为可靠
二 实验原理
四 实验步骤.swf
1. 玻片法
（1） 取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端 用记号笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。
（2） 用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清 上，注意勿使滴管与血清相接触。
（3） 竹签两头分别混合，搅匀。用两根 分别用来混合A型和B型标准