外周血染色体核型分析讲义

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人类外周血染色体标本制备及G带观察及核型分析

实验报告课程名称：分子医学实验指导老师：成绩：实验名称：人类外周血染色体标本制备G 带观察及核型分析同组学生姓名：一、实验目的及原理三、实验结果二、操作步骤四、讨论分析一、实验目的及原理熟悉人类外周血淋巴细胞的培养方法。

初步掌握人类染色体标本培养和制备的基本方法。

通过实验掌握Ｇ带标本制备的基本方法，学会在显微镜下直接观察G 带分裂相。

在细胞周期的不同阶段，染色体的结构不同，在细胞分裂间期，染色体呈现细长的丝状结构，分散于细胞核中，且交织成网状，难以识别其数目和每个染色体特有的结构；在细胞有丝分裂中期,染色体凝缩形成短的棒状结构，排列在赤道板上，此时染色体的形态、数目最清楚，所以一般选择有丝分裂中期的细胞来观察染色体的形态、数目。

在人类遗传分析中，普遍采用外周血培养的方法制备染色体标本。

但是在正常情况下，外周血中的淋巴细胞，几乎都处在G1期或G0期，因而外周血细胞中是没有分裂相的。

在细胞培养过程中加入植物血凝素(phytohaemagglutinin, PHA) ，可以刺激外周血淋巴细胞转变为淋巴母细胞，进行有丝分裂，再通过秋水仙素处理，将细胞阻断在有丝分离中期。

再通过离心、低渗、固定和滴片，就可以获得大量有丝分裂相。

最后通过染色就可以观察染色体的结构和数目。

本方法已为临床医学、病毒学、药理学、遗传毒理学等方面广泛应用。

有许多显示Ｇ带的方法，最常用的是将已经过老化的染色体制片放到37℃胰酶中进行处理，然后用Giemsa 染色。

胰酶可以从染色体上抽取蛋白特定的组成部分。

通过胰酶处理使Ｇ带区的疏水蛋白被除去或使它们构型变为更疏水状态。

由此可见在Ｇ带区中抽取的蛋白往往是疏水蛋白。

关于显带机理有多种论点，总的来说，还不能完全解释显带的机理问题。

二、操作步骤人类外周血染色体标本制备１、采血２、培养RPMI1640培养液，37℃ 0.5℃恒温中培养72小时。

3、秋水仙素(colchicine)处理在终止培养前２-３小时，加入秋水仙素。

外周血淋巴细胞培养与染色体核型分析

外周血淋巴细胞培养与染色体核型分析一、实验目的（1）、熟悉淋巴细胞体外培养原理。

（2）、掌握人体微量血液体外培养技术。

（3）、通过本次实验掌握制备染色体标本的方法。

（4）、观察人类染色体的形态，并计数、配对、分类和绘图。

（5）、培养学生的自主能力，锻炼学生的动手操作能力。

二、实验原理外周血液中的小淋巴细胞几乎都处在G1期（或Go期）一般情况下是不再分裂的在培养液中加入植物凝血素 (PAH) 时这种小淋巴细胞受刺激转化成为淋巴母细胞随后进入有丝分裂。

这样经过短期培养秋水仙素的处理低渗和固定就可获得大量的有丝分裂细胞。

本方法已为临床医学、病毒学、药理学、遗传毒理学等方面广泛应用。

细胞培养是在体外模拟体内的生理环境，培养从机体中取出的细胞，并使之生存和生长的技术为细胞培养技术。

要使细胞能在体外长期生长，必须满足两个基本要求：一是供给细胞存活所必需的条件，如适量的水、无机盐、氨基酸、维生素、葡萄糖及其有关的生长因子、氧气、适宜的温度，注意外环境酸碱度和渗透压的调节。

二是严格控制无菌条件。

染色体是组成细胞核的基本物质, 是基因的载体。

人类细胞遗传学研究的主要对象是染色体。

本实验采用了微量全血培养技术，既方便又节省人力物力。

在正常情况下, 人外周血中是没有分裂相的, 只有在异常情况下才能发现。

植物血细胞凝集素(PHA) 是人类淋巴细胞有丝分裂的刺激剂,在 PHA 作用下, 原处于 G0期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞, 进而进行有丝分裂。

利用 PHA 这一特性, 淋巴细胞经过含有 PHA 培养液培养, 在体外便可获得丰富的含有丝分裂的生长活跃的细胞群体, 终止分裂中期的淋巴细胞, 经过短期培养，秋水仙素的处理，低渗和固定，就可获得大量的中期有丝分裂细胞。

最后经空气干燥法制片，便可得到质量较好的染色体标本。

即可得到所需的人体染色体图形。

染色体组型，又称核型，是指将动物、植物、真菌等的某一个体或某一分类群（亚种、种、属等）的体细胞内的整套染色体，按它们相对恒定的特征排列起来的图像。

639对不良孕产史夫妇外周血染色体核型分析

临床研究发生。

3.3　适度的皮瓣张力。

在切口缝合的时候,要在充分切除癌可能侵犯的皮肤的基础上,尽量减小皮瓣张力。

如果皮瓣张力高,可以使用皮肤减张的方法缝合。

具体方法包括:①皮肤缺损面积小时,可以采用皮肤网状戳孔法,即用手术刀尖将切缘两侧皮肤切开多个小切口,深度达真皮层,不要全层切开,以防破坏皮下毛细血管网。

当皮瓣缝合以后颜色正常,则停止戳孔。

此法简单实用。

②如果皮肤缺损较大,则采用游离植皮术,一般采用下腹全厚皮片移植。

用刀尖在皮片上多点切开成网状,一可增加皮片面积,二可使皮下的渗血渗液能及时排出,防止移植皮片坏死。

3.4　防止皮下积液。

液体的产生几乎不可避免,如果不能顺畅引流,则可以形成皮下积液,因此尽量减少液体的产生和通畅的引流是防止皮下积液的必然手段[3][4],这些措施包括:防止淋巴管漏、术后双管引流、胸带加压包扎等。

参考文献1　许晋彦.改良乳腺癌根治术后近期并发症分析(附36例报告)[J ].山东医药2007,47(33):67～682　潘俊峰.乳腺癌改良根治术后皮瓣坏死的预防探讨[J ].肿瘤学杂志,2007,13(6):467～4683　毛国璋.乳腺癌根治术后皮瓣下局部积液的治疗体会[J ].医师进修杂志,2004,27(5):564　张艳君.两种包扎法预防乳腺癌根治术后皮下积液的疗效观察[J ].军医进修学院学报,2004,25(5):388～389作者单位:115100　辽宁省大石桥中心医院639对不良孕产史夫妇外周血染色体核型分析张志红　王金兰　孙超英【中图分类号】R596.1 【文献标识码】B 【文章编号】1672-5085(2008)03-0050-03【摘要】目的:探讨不良孕产史与染色体异常之间的关系。

方法:我们对639对不良孕产史夫妇进行了外周血染色体核型分析。

结果:发现79例异常核型,常染色体异常中女性27例,男性6例;性染色体异常46例男性45例,女性1例。

异常检出为率6.18%。

人类外周血培养与染色体核型分析

1 染色体相对长度＝单条染色体长度/正常单套常染色体＋X染色体的总长度
2 染色体臂率（比）＝q/p 3 着丝粒指数＝p/单条染色体总长根据上述三个重要参数，将染色体分成7个组，即A－G
组，X染色体长短在C组内，Y染色体长短归于G组内。
思考题：
人类染色体畸变的类型制片质量的关键步骤人类染色体组型分析的标准
） “和而不同”，多元发展。近年来，中医药在防治非典、禽流感和艾滋病方面发挥的独特作用也证实了二者的有机结合，具有肯定的临床疗效。编辑本段东西方医学交融（df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr）
不管是中医学还是西医学，从二者现有的思维方式的发展趋势来看，均是走向现代系统论思维，中医药学理论与现代科学体系（45传染病q566丙肝964jo乙肝 28jgsx甲肝gh）之间具有系统同型性，属于本质相同而描述表达方式不同的两种科学形式。可望在现代系统论思维上实现交融或统一，成为中西医在新的发展水平上实现交融慢性胃炎分类慢性胃炎的命名很不统一。依据不同的诊断方法而有慢性浅表性胃炎、慢性糜烂性胃炎、慢性萎缩性胃炎、慢性胆汁返流性胃炎、慢性疣性胃炎、药物性胃炎、乙醇性胃炎等等。．慢性胃炎大体可分为三种类型：慢性肥厚性胃炎、慢性浅表性胃炎以及慢性萎缩性胃炎。慢性肥厚性胃炎在临床上较为少见，一般也不会发生癌变。慢性浅表性胃炎主要是指胃粘膜的浅表性炎症，这类炎症主要表现为胃粘膜的固有膜宽度增大并伴有水肿，被炎症细胞浸润，但胃腺体多属正常．这类胃炎在临床上较多见，一般也不会发生癌变。只要经过恰当治疗之后，炎症可消退，但如治疗不当，往往可发展成萎缩性慢性胃炎．慢性萎缩性胃炎是指胃粘膜除有浅表性胃炎病变外，胃腺体明显减少，脉管间隙扩大，胃粘膜层有全层性细胞浸润，常伴有肠上皮化生，即胃型上皮变为肠型上皮．这种性质的慢性胃炎与胃癌的关系密切，特别是有肠上皮化生者更是如此．或统一的支撑点，希冀籍此能给（df高血压958心脏病 983u6糖尿病87fr）中医学以至生命科学带来良好的发展机遇，进而对医学理论带来新的革命。在胃镜问世以前，胃炎的主要诊断依据是依靠临床症状和上消化道钡餐检查。随着纤维胃镜的临床应用，特别是经胃镜对胃粘膜的活组织检查，对越来越多的胃炎有了较明确的认识。1982年，国内胃炎会议上根据国内外经验，将慢性胃炎分为浅表性和萎缩性两大类。而在浅表性胃炎的命名上，又常常使用病理、部位、形态等含义的词，如 “慢性疣状胃炎”、 “慢性出血性胃炎” 、“慢性糜烂性胃炎 ”、 “慢性胆汁反流性胃炎”等等。1990年8月，在澳大利亚悉尼召开的第九届世界胃肠病学大会上，又提出了新的胃炎分类法，它由组织学和内镜两部分组成，组织学以病变部位为核心，确定3种基本诊断：①急性胃炎；②慢性胃炎；③特殊类型胃炎。加上前缀病因学诊断和后缀形态学描述，并对炎症、活动度、萎缩、肠化、幽门螺杆菌感染分别给予程度分级。内镜部分以肉眼所见描述为主，分别区分病变程度。 1．慢性糜烂性胃炎内镜下常表现为多发性点状或阿弗他溃疡。慢性非糜烂性胃炎可为特发性，也可由药物( 特别是阿司匹林和非甾体类消炎药，参见消化性溃疡的治疗部分)，克罗恩病或病毒感染所引起。幽门螺杆菌可能在此不发挥重要作用。症状多为非特异性的，可包括恶心，呕吐和上腹部不适。内镜下显示在增厚的皱襞隆起边缘有点状糜烂，中央有白斑或凹陷。组织学变化多样。尚无某种方法具有广泛疗效或可治愈。治疗多为对症治疗，药物包括制酸剂， H2拮抗剂和质子泵。 2．慢性胃炎的癌变对于胃溃疡发生癌变，人们比较容易理解，但对于有些类型的慢性胃炎也会发生癌变，许多人会感到不可思议．然而，慢性萎缩性胃炎发生癌变却是事实编辑本段现代中医史（df4肺炎88gdg青霉素d25f肝炎 df6） ④轴心时代中、西医学的峰巅之作。雅斯贝而斯曾说： “如果历史有一个轴心，那么我们就必须将这轴心作为一系列对全部人类都有意义的事件，…… 发生于公元前800至200年间的这种精神历程似乎构成了这样一个轴心。

外周血骨髓染色体教材护理课件

外周血骨髓染色体检测在临床上的应用
产前诊断
疾病预测与预防
孕妇在孕期可以通过外周血骨髓染色体检测进行产前诊断，预测胎儿是否存在染色体异常，提高出生缺陷的筛查率。
通过外周血骨髓染色体检测，评估个体对特定疾病的遗传风险，为制定个性化的预防和干预措施提供依据。
遗传咨询
根据外周血骨髓染色体检测结果，医生可以为患者及其家庭成员提供遗传咨询服务，指导生育决策和预防措施。
外周血骨髓染色体异常的表现和影响
外周血骨髓染色体异常可能导致遗传性疾病的发生，如唐氏综合征、威廉姆斯综合征等。
外周血骨髓染色体异常可能导致生长发育迟缓、智力障碍、免疫功能低下等表现。
外周血骨髓染色体异常可能对生育产生影响，如不孕不育、流产、胎儿畸形等。
02
外周血骨髓染色体检测的重要性和应用
检测外周血骨髓染色体的目的和意义
04
外周血骨髓染色体异常的护理和管理
外周血骨髓染色体异常患者的护理要点
密切监测病情
定期监测患者的生命体征，观察病情变化，及时发现并处理
异常情况。
疼痛护理
对于疼痛不适的患者，采取适当的疼痛缓解措施，如药物治疗、物理治疗等。
预防感染
保持患者居住环境的清洁卫生，加强口腔、皮肤和会阴部的护理，预防感染。
外周血骨髓染色体检测的优缺点和注意事项
优点
外周血骨髓染色体检测具有无创、安全、准确等优点，能够为患者提供可靠的遗传信息，有助于疾病的早期发现和预防。
缺点
外周血骨髓染色体检测可能存在一定的假阳性或假阴性结果，需要结合临床表型和其他检查结果进行综合分析。
注意事项
在进行外周血骨髓染色体检测前，患者应了解相关风险和局限性，遵循医生的建议和指导，避免自行解读结果。同时，医生也应根据患者的具体情况和需求，选择合适的检测方法和技术，确保结果的准确性和可靠性。

人类外周血培养及染色体核型分析

人类外周血培养及染色体核型分析一、实验目的：1.学习外周血淋巴细胞悬浮培养的原理和方法；2.利用培养后进行分裂的细胞制备人类染色体标本；3.利用人类染色体核型分析软件进行核型分析。

二、实验原理：1、植物血凝素的作用外周血中的淋巴细胞几乎都是处在G0或G1期，一般情况下是不分裂的。

当在培养基中加入植物血凝素(PHA)时，这种小淋巴细胞受到刺激后转化为淋巴母细胞，进而开始进行有丝分裂。

2、秋水仙素的作用：秋水仙素(colchicines)可以抑制细胞纺锤体的形成，使处在分裂的细胞停留在中期。

因此利用秋水仙素处理可以获得许多同步的中期分裂细胞。

使用秋水仙素处理会引起染色体在一定程度上的收缩，因此在处理时间和浓度上要合适。

3、低渗的原理：徐道觉(T.C.Hsu)等于1952年发现在固定细胞之前使用低渗液进行处理，可以使细胞的核膜吸水膨胀，滴片后细胞破裂，染色体分散开来，在显微镜下易于观察和统计，染色效果也明显提高。

这种技术被广泛采用后，使人类染色体分析技术得到了发展。

4、核型和带型：核型(karyotype)：是指染色体组在有丝分裂中期的表型, 是染色体数目、大小、形态特征的总和。

在对染色体进行测量计算的基础上, 进行分组、排队、配对, 并进行形态分析的过程叫核型分析。

将一个染色体组的全部染色体逐条按其特征画下来，再按长短、形态等特征排列起来的图称为核型模式图，它代表一个物种的核型模式。

带型（banding pattern）即染色体带型。

借助细胞学的特殊处理程序，使染色体显现出深浅不同的染色带。

染色带的数目、部位、宽窄和着色深浅均具有相对稳定性，所以每一条染色体都有固定的分带模式，即称带型。

常用的显带技术所显示的带有Q带、G带、C带、R带、T带等。

就每一种分带技术而言，每一染色体的带型是高度专一和恒定的。

三、实验用具及试剂：1.实验仪器及用具：恒温培养箱、离心机、恒温水浴箱、冰箱、显微镜、显微数码摄像系统、染色体分析仪；培养瓶、注射器、微量移液器、枪头、吸管、离心管(10ml)、载玻片、烧杯、量筒。

外周血染色体核型分析项目简介

外周血染色体核型分析项目简介临床应用：用于染色体遗传病的诊断、不孕不育、先天畸形、智障诊断、胚胎植前筛选等。

检测结果的临床意义我国，人口中有20-25%的人患有各种遗传病，其中由染色体病导致的有近1400多万人。

染色体病主要表现为不孕、不育、反复性或自发流产、死胎、生育异常儿、闭经、智力发育不全或智力低下、多发畸形等。

然而，染色体病至今没有特殊、有效的疗法，主要在于预防和早期干预，所以做染色体检查，对于遗传咨询、降低出生缺陷、正确的生育指导及提高人口素质均具有重要意义。

适检人群1.不明原因的生长、发育迟缓，异常面容，多发畸形，身材矮小，两性畸形和智力发育迟缓的病人。

2.不明原因死产和新生儿死亡。

10%是由于染色体异常导致。

3.具有原发性闭经或不明原因的继发性闭经的女性。

4.原发性不育或习惯性流产的夫妇。

约3%～6%的原发性不育或习惯性流产的夫妇，其中一方存在染色体异常。

5.一级亲属中携带已知的或者可疑的染色体异常。

6.肿瘤。

几乎所有的肿瘤都与一条或多条染色体异常相关，肿瘤组织的染色体检查有助于临床诊断和预后评估。

7.高龄妊娠。

孕妇年龄大于30～35岁时，其胎儿染色体异常的风险明显增加，因此应对高龄孕妇的胎儿常规进行染色体分析。

标本采集要求1.采集要求：无菌采静脉血3ml，使抗凝剂与静脉血充分混匀,防止凝固，等待本中心配送人员收取，应在室温4～25℃保存。

采样和送检过程要严格无菌操作，严防溶血、凝血。

2.化疗期间病人和大剂量或长期使用抗生素病人需停药半个月后采血。

3所有样本应在保质期内及时送检（保存24小时）。

过了保质期样本不能保证培养效果。

或通知临床重新抽血送检。

4.如有大量饮酒或有酗酒习惯，采血期间尽量避免。

临床项目收费标准。

核型分析【范本模板】

人外周血淋巴细胞的分离培养及核型分析一、实验目的1．学习人体微量外周血分离培养的方法2．学习应用培养淋巴细胞进行染色体制片的方法3．了解人类染色体核型的基本特征4．通过对人类染色体组型进行分析，初步学会对染色体进行分析的方法. 二、实验原理人体外周血的形成包括红细胞、白细胞、血小板，其中红细胞和血小板不能离体培养,白细胞中含有小淋巴细胞.外周血是制备动物染色体标本的重要材料之一。

通常情况下哺乳动物外周血中是没有分裂相的,只有在异常情况下才能发现,其他动物如两栖类外周血中也只是偶尔能见到分裂相。

外周血中的小淋巴细胞几乎都处于G1期或G0期的非增殖状态.在人工离体培养时,在培养基中加入一定剂量的植物血凝素（PHA）后,小淋巴细胞受刺激可转变为淋巴母细胞，重新进入增殖周期，进行有丝分裂.外周血中的淋巴细胞经过68—72小时（三个周期）的短期培养，即可产生大量的增殖期细胞群。

用秋水仙素(细胞分裂阻断剂）处理，积累分裂相，可使处在分裂期的淋巴细胞停留在分裂中期或早中期，从而获得足够的可供分析的中期分裂相。

此外，秋水仙素还能使染色单体缩短、分开，使染色体呈现明显形而利于辨认。

核型分析是指在有丝分裂中期，对染色体大小形态、数目测量，进行排队分组分析。

不同物种的染色体都有各自特定的形态结构（包括染色体的长度、着丝点位置、臂比、随体大小等）特征，而且这种形态特征是相对稳定的。

在显微镜下观察染色体的结构和数量。

正常男性的染色体核型为44条常染色体加2条性染色体X和Y.正常女性的常染色体与男性相同，性染色体为2条XX。

三、实验仪器与试剂1. 实验材料：人外周血淋巴细胞2.实验试剂RPMI“1640”培养基、小牛血清（冰冻保存,用时在56℃水浴条件灭活）、、秋水仙素、植物血球凝集素（PHA）、肝素、生理盐水溶液（500U/ml）、5%NaHCO3双抗（青霉素：50000U/ml，链霉素：50000ug/ml）、2％碘酒、pH6。

206例男性不育患者外周血染色体核型分析

染色体多态９例，全部被检者４３％，占异常核型占．７
物治疗基本无效，故建议患者放弃药物治疗。本文ｌ例克氏９
综合征中还有１例合并染色体结构异常，型为４，Ｘｉ核７ＸＹ，ｖｎ
（）９。
２染色体结构异常在染色体结构异常中主要有倒位、．易位、缺失。本文共检出染色体结构异常８例，占异常核型的２．９７５％。染色体倒位１例，９号染色体倒位，为由于没有遗传物质的缺失，以表型正常，由于倒位染色体在形成生殖所但细胞的减数分裂过程中，生畸形配子，临床上表现为不产故育、流产、死胎或畸胎等不良孕产史。易位与倒位类似，携带者本身无明显的异常表现，生殖细胞减数分离时无法形但成正常配子。本文中检出平衡易位４例，中１为罗伯逊其例易位，临床表现为少、弱精子及无精。原因可能是同源染色体在减数分裂前期不能联合，造成配子染色体大量重复与缺失，从而使各种基因组产生不平衡，导致配子死亡，造成少精或无
一
体数目异常引起的综合征，最常见核型为４，Ｘ７ＸＹ。典型的克氏综合征体征：身体修长（别偏胖）男性第二性征发育不个，良，丸小、睾质硬，阴茎短小，皮肤细腻，无胡须，喉结不明显。
本病是由于患者双亲之一在生殖细胞形成过程中发生性染色
出率１．８。染色体数目异常１４０％８例，全部被检者占８７％，．４占异常核型６．７。其中克氏综合征非嵌合型１２０％７例，合型Ｉ例。染色体结构异常８例，全部被检者嵌占３８％，．８占异常核型２．９。染色体数目异常（氏综合７５％克征）合并结构异常１。另有１例例性反转（６Ｘ，４，Ｘ）１例性反转及嵌合体（６Ｘ／６Ｘ。异常核型及临床表现见表１４，Ｙ４，Ｘ）。

最新医学遗传学实验：人类染色体常规核型分析教学讲义ppt

清点实验物品：
每组剪刀、镊子、离心管、吸管各4，止血钳2
秋水仙素处理培养的血细胞
用止血钳去掉培养瓶（瓶中为已培养了约70小时的血细胞）瓶盖表面的铁皮
打开瓶盖，每瓶加入秋水仙素2~3滴盖上瓶盖，轻轻摇匀，作好标记 37℃继续培养约2小时
教学内容
人类外周血淋巴细胞染色体标本的制备人类染色体常规核型分析
了解人外周血淋巴细胞常规染色体标本制备的原理与方法
实验用品
实验器械：冰箱、恒温培养箱、恒温水浴箱、离心机、天平、吹风机、15ml离心管、吹打管、试管架、染色架、废液缸。
实验试剂：RPMIl640完全培养基( 含胎牛血清、PHA、抗生素等) 肝素、秋水仙素、0.045M KCl、甲醇、冰醋酸、 Giemsa染液
每组剪刀镊子离心管吸管各4止血钳2秋水仙素处理培养的血细胞用止血钳去掉培养瓶瓶中为已培养了约70小时的血细胞瓶盖表面的铁皮打开瓶盖每瓶加入秋水仙素23滴盖上瓶盖轻轻摇匀作好标记37继续培养约2小时人类外周血淋巴细胞染色体标本的制备人类染色体常规核型分析人类染色体常规核型分析核型
医学遗传学实验：人类染色体常规核型分析
注意：
１.用镊子取冰片，千万不要用手摸冰片的表面，以免染色体不能附着。
2.滴片时要有一定高度，且玻片要稍倾斜。
3.冰片一定要清洁湿冷，易于染色体的分散。
染色
1∶10 Giemsa染液（pH 6.8）染色10min。流水冲洗，吹风机吹干，镜检。
1 采血、接种、细胞培养 8 终止培养前2小时,加入秋水仙素
褥垫层的设计
褥垫层的设计目的（1）保护桩土共同承担荷载；（2）调整桩土荷载应力分担比；（3）减少基础底面的应力集中；
（4）调整桩土水平荷载的分担。

5blood实验5 人外周血淋巴细胞培养及染色体核型分析

实验5 人外周血淋巴细胞培养及染色体核型分析5.1 相关基础知识人外周血液中的小淋巴细胞，几乎都处在G1期（G0期），一般情况下是不再分裂的。

在培养液中加入植物凝血素（PAH）时，小淋巴细胞受刺激转化为淋巴母细胞，随后进入有丝分裂。

这样经过短期培养、秋水仙素的处理、低渗和固定，就可获得大量的有丝分裂细胞。

目前本方法已为临床医学、病毒学、药理学、遗传毒理学等领域广泛采用。

人类每个体细胞有46条染色体，22对常染色体和一对性染色体，男子是46，XY；女子是46，XX。

根据各组染色体的特征予以分组：A组：（N01～03）是最大的一组染色体，它们的着丝粒在中部或几乎在中部；B组（N04～05）为两对大的亚中着丝粒染色体，它们有显的长臂和短臂；C组（N06～12+X）为中等大小的亚中着丝粒染色体，它们大小相差不多，X染色体大小介于期间，一般难以区分；D组（N013～15）为中等大小的端着丝粒染色体，它们的一个重要形态特征是随体，随体是一对着色很深的小球，处于短臂的末断，随体与短臂之间的区域很少着色；E组（N016～18）包括一对中着丝粒染色体，亚中着丝粒染色体和一对近端着丝粒染色体；F组（N019～20）为两对小的中着丝粒；G组（N021～22+Y）为最小的一组端着丝粒染色体，在N021～22的短臂上可见随体，Y常呈现异固缩状态，着色更深，可以识别。

5.2 实验目的和要求(1)掌握人体微量血液体外培养技术和制备染色体标本的方法；(2)观察人类染色体的形态，并计数、配对、分类和绘图。

5.3 实验材料和仪器5.3.1 实验材料和试剂(1)人的外周血淋巴细胞；(2)Giemsa母液：量取33ml甘油，先在研钵内加入少量甘油与0.5g Giemsa粉混合，研磨至无颗粒为止，再将剩余甘油倒入，搅拌后于56o C水浴保温2小时，再加入33ml甲醇，搅拌均匀后储存于棕色瓶中；(3)Giemsa染色液：将Giemsa母液用0.1M pH7.4磷酸缓冲液稀释至10倍。

《染色体核型分析》PPT课件

在完成环境因素分析和SWOT 矩阵的构造后，便可以制定出相应的行动计划。
SW优势与劣势分析（内部环境分析）
……
产品的质量
服务态度
提高公司盈利性
服务的及时性
产品的适用性
产品线的宽度
竞争优势可以指消费者眼中一个企业或它的产品有别于其竞争对手的任何优越的东西。
产品价格
产品的可靠性
二、染色体标本制备
实验步骤
细胞收获低渗处理
预固定固定
要求：洁净、冰冻处理：逐片清洗（洗洁精→ 超声波→自来水→纯水）， 95%乙醇浸泡24 h，纯水逐片刷洗，放置于装有纯水的器
皿中，4 ℃保存。
制片
用滴管吸取细胞悬液，高空滴在冰冻玻片上，立即在酒精灯的火焰下过火几次，置80℃烤箱中烤片2h。
直接进攻企业优势所在，或采取更为有力的策略
企业在维持竞争优势过程中，必须深刻认识自身的资源和能力，采取适当的措施。因为一个企业一旦在某一方面具有了竞争优势，势必会吸引到竞争对手的注意。
而影响企业竞争优势的持续时间，主要的是三个关键因素：（1）建立这种优势要多长时间? （2）能够获得的优势有多大？（3）竞争对手作出有力反应需要多长时间？如果企业分析清楚了这三个因素，就会明确自己在建立和维持竞争优势中的地位了。
前期处理
样品要求：对数期生长，状态良好，紧密度高，折光性好，细胞量≥T25 / 60 mm平皿差速贴壁法去除MEF （ KSR培养体系除外）终止培养前1~2小时，加入秋水仙素（100ug/ml），最终浓度为0.1~0.2ug/ml。
作用：破坏纺锤体防护：有剧毒、无挥发性
因素：时间、浓度
Special lecture notes

人类外周血染色体标本制备及核型分析

PHA、灭活小牛血清和双抗。
3 、接种的血样愈新鲜愈好，最好在 24 小时内培养。如果
不能立刻培养，应置于4℃冰箱，保存时间过久会影响细胞活力。
4、温度和培养液的酸碱度十分重要。人的外周血中淋巴细胞培养最适温度为37℃0.5℃，温度过高过低都将影响细胞的生长，但细胞对低温比对高温耐受力强；若是中途停电，可相应延长培
人类染色体Ｇ带标本制备及观察
一、实验目的
通过实验掌握Ｇ带标本制备的基本方法，学会在显微镜下
直接观察G带分裂相。
二、实验原理
有许多显示Ｇ带的方法，最常用的是将已经过老化的染色体
制片放到37℃胰酶中进行处理，然后用Giemsa染色。胰酶可以从染色体上抽取蛋白特定的组成部分。通过胰酶处理使Ｇ带区的疏水蛋白被除去或使它们构型变为更疏水状态。由此可见在Ｇ带区中抽取的蛋白往往是疏水蛋白。关于显带机理有多种论点，总的来说，还不能完全解释显带的机理问题。
养时间。培养液的最适pH7.2-7.4。pH偏酸，细胞发育不良，偏碱
细胞会出现轻度固缩。 5、PHA的质量和浓度是培养成败的关键问题。PHA如果保存时间太长，效价会降低，应在培养基中多加一些。 6、培养过程中，如发现血样凝集可轻轻震荡，使凝集块散开，
继续培养。
7、最好使用水平式离心机，离心速度不易过高，否则沉降在管底的细胞团不易打散；反之，离心速度太低，细胞会丢失。
10、再固定，加入5mL固定液（甲醇：冰醋酸=1：3），室温固定
10-15分钟
11、再离心 1000转/分离心10分钟，弃去上清液。 12、再固定加入固定液（甲醇：冰醋酸1：1）5mL,打匀，固定 10－15分钟。 13、制片
固定后，1000转/分离心留下0.2ml沉淀物，吸取细胞悬液滴

〖医学〗人类外周血培养和染色体核型分析

人类外周血培养和染色体核型分析
人类外周血培养和染色体核型分析
主要仪器：（1）超净工作台（2）大容量低速离心机（3）二氧化碳培养箱和电热恒温培养箱（4）电热恒温干燥箱（5）水浴锅（6）天平（7）显微镜
人类外周血培养和染色体核型分析
试剂：
培养基（含80% RPMI-1640营养液，20% 胎牛血清，每5mL中加1-2%植物血球凝集素和各500单位的青、链霉素）
2 染色体臂率（比）＝q/p 3 着丝粒指数＝p/单条染色体总长根据上述三个重要参数，将染色体分成7个组，即A－G
组，X染色体长短在C组内，Y染色体长短归于G组内。
思考题：
人类染色体畸变的类型制片质量的关键步骤人类染色体组型分析的标准
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根据第五次人类遗传学国际会议讨论通过的内容， 1978 年发表了 ISCN （ An International System for Human Cytogenetic Nomenelature）根据规定的内容，非显带方法的人类染色体的核型分析依据如下：
1 染色体相对长度＝单条染色体长度/正常单套常染色体＋X染色体的总长度
* Giemsa工作液（10%）需要新鲜配制（以蒸馏水或 1/15M 磷酸缓冲溶液配制）
人类外周血培养和染色体核型分析
0.0125%胰蛋白酶（效价1:250，以生理盐水配制）
0.2M HCL 2.5% Ba(OH)2：新鲜配制并经65oC热过滤 2×SSC（0.3M NaCL + 0.03M 柠檬酸钠）
编辑本段明清时期（df肺25s血液f369血小板t5172红血球gdf55m白血球fd2）
是中医学理论综合汇编、深化发展，临床各科辨证体系丰富、提高阶段。如明代楼英的《医学纲目》和王肯堂的《证治准绳》，清代吴谦等编著的《医宗金鉴》和陈梦雷主编的《古今图书集成·医部全录》等。王清任著《医林改错》，注重实证研究，（ df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr）纠正了古医籍中关于解剖知识的某些错误，肯定了 “脑主思维” ，发展了瘀血理论。温病学说的形成和发展，标志着中医理论的创新与突破，吴有性著《温疫论》，叶天士著《温热病篇》，吴鞠通著《温病条辨》等，在药物学研究方面，（45传染病q566丙肝964jo乙肝28jgs x甲肝gh）李时珍著的《本草纲目》，总结了16世纪以前我国药物学研究的成就。医的诊察疾病能参考现代医学的微观分析，将辨证与辨病相结合，实现宏观与微观的统一，使中医诊断客观化，即把分析与综合相结合的方法引入中医理、法、方、药的研究，使二

人体外周血淋巴细胞培养与染色体核型分析

西南大学《细胞生物学自主实验》课程论文论文题目：人体外周血淋巴细胞培养与染色体核型分析学院：生命科学学院专业：生物科学年级班级：2010级5班校区编码：北区姓名：陈建坤二零一二年十二月四日人体外周血淋巴细胞培养与染色体核型分析【摘要】：染色体是遗传物质的载体，它具有贮存和传递DNA、控制基因活动和调整基因重组的作用。

本文着重介绍通过对人体外周血淋巴细胞培养与染色体核型分析，初步了解到对人体外周血淋巴细胞培养方法与人类体细胞染色体核型分析的方法。

该实验采用人工离体培养的方法，采集人体外周血淋巴细胞，在加有植物血球凝集素（PHA，刺激小淋巴细胞转化为淋巴母细胞而进行有丝分裂）的培养基中培养。

经过（72±2）恒温培养，秋水仙素处理、低渗和固定，获得大量有丝分裂中期细胞。

最后经过空气干燥法制片，对人体外周血淋巴细胞进行染色体核型分析。

【关键字】：人体外周血淋巴细胞染色体核型人工离体培养一．引言:染色体是遗传物质的载体，它具有贮存和传递DNA、控制基因活动和调整基因重组的作用。

人类染色体核型分析是将人的一个体细胞有丝分裂中期的染色体，在技术的基础上，按照染色体的大小和形态特征（主要根据着丝点位置），对染色体进行分组、排队和配对。

这对于探索人类遗传病的发病机理，探讨动物和植物的起源，以及物种间的亲缘关系等都具有重要意义。

直到上世纪50年代，科学家对染色体本身的细致深入研究才成为可能。

染色体组型分析是细胞遗传学研究的基本方法，是研究物种演化、分类以及染色体结构、形态与功能之间，人类G显带核型图谱关系所不可缺少的重要手段。

1952年徐道觉用低渗法使细胞膨胀，使染色体充分分散开来。

1956年，Tjio等用秋水仙素使细胞分裂固定在分裂中期，增加了细胞分裂相。

之后，有科学家建立了人体外周血培养法，使得染色体取材变得更加容易，大大推动了人类对染色体的研究。

二．人体外周血淋巴细胞培养与染色体核型分析1.实验依据：.细胞培养是在体外模拟体内的生理环境，培养从机体中取出的细胞，并使之生存和生长的技术为细胞培养技术。