糖类测定方法大全
食品中糖的测定方法
食品中糖的测定方法对于糖的测定方法有很多,大致可分为三类1.物理法,(1.旋光法, 2 .折光法, 3.比重法,)2.物理化学法,(1.点位法, 2极普法,3.光度法,4.色谱法)3.化学方法,(1.斐林氏法. 2.高锰酸钾法. 3.碘量法.4.铁氰化钾法.5.蒽铜比色法.6.咔唑比色法)共计三大种,在测定其他碳水化合物时,往往是使其水解为糖再进行测定。
一. 总糖的测定食品中的总糖主要指具有还原性的葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖(水解后为1分子葡萄糖和1分子果糖),麦芽糖(水解后为2分子葡萄糖)以及可能部分水解的淀粉(水解后为2分子葡萄糖)。
还原糖类之所以具有还原性是由于分子中含有游离的醛基(-CHO)或酮基(=C=O)。
测定总糖的经典化学方法都是以其能被各种试剂氧化为基础的。
这些方法中,以各种根据斐林氏溶液的氧化作用的改进法的应用范围最广。
在这里我们主要给大家介绍铁氰化钾法,蒽铜比色法,斐林氏容量法。
斐林氏容量法由于反应复杂,影响因素较多,所以不如铁氰化钾法准确,但其操作简单迅速,试剂稳定,故被广泛采用。
蒽铜比色法要求比色时糖液浓度在一定范围内,但要求检测液澄清,此外,在大多数情况下,测定要求不包括淀粉和糊精,这就要在测定前将淀粉,糊精去掉,这样就使操作复杂化,限制了其广泛应用。
(一)铁氰化钾法1.原理:样品中原有的和水解后产生的转化糖都具有还原性质,在碱性溶液中能将铁氰化钾还原,根据铁氰化钾的浓度和检验滴定量可计算出含糖量。
其反应为下:C6H12O6+6K3[Fe(CN)6] + 6KOH →(CHOH)4•(COOH)2 + 6K4[Fe(CN)6]+ 4H2O滴定终了时,稍过量的转化糖即将指示剂次甲基兰还原为无色的隐色体。
2,试剂1)1%的次甲基兰指示剂2)盐酸(水解作用)3)10%和30%的NaOH溶液4)1%铁氰化钾(贮存特色瓶,临用前标定)标定步骤称蔗糖1.0000g→定容500ml→取此液50ml→于100ml容量瓶→加hcl5ml→摇匀→65-70℃水裕15分钟→取出冷却→用30%NaOH中和→加水于刻度→倒入滴定管中→取10ml1%铁氰化钾于锥形瓶中→加10%NaOH2.5ml加12.5ml的水加玻璃珠颗粒→加热至沸→保持一分钟→加次甲基兰1滴→立即以糖液滴足至蓝色退去为止,记录用量。
实验检测糖类含量的方法
实验检测糖类含量的方法
实验检测糖类含量的方法有以下几种:
1. 红糖法:将待测样品与红糖溶液混合加热,利用糖类的还原性使红糖被还原变色,颜色的深浅与糖类含量成正比。
2. 蒸馏法:将待测样品加入蒸馏水中,用蒸馏器蒸馏,收集第一滴液滴入菲林试剂,用比色计测定吸光度,从而测定糖类含量。
3. 酚高法:将待测样品与酚及硫酸混合,用比色计测定吸光度,从而测定糖类含量。
4. 酶释法:在待测样品中加入糖类酶,使其分解为糖类,然后利用酚-硫酸法或蒸馏法测定糖类含量。
5. 还原终点滴定法:将碘液与待测样品反应,然后用硫代硫酸钠滴定溶液中的剩余碘,从而测定糖类含量。
以上就是实验检测糖类含量的几种方法,根据具体情况可以选择不同的方法进行实验。
《食品中糖的测定方法》
《食品中糖的测定方法》糖是人体所需要的基本营养物质之一,天然食品中或经过加工的食品中均含有糖,因此测定食品中的糖含量是很有必要的。
本文将从常见的食品中糖的测定方法出发,详细介绍其原理及操作流程,包括显色法、高温反应法和比旋法等。
一、显色法显色法是当前最常用的测定糖含量的方法之一,适用于各种类型的糖,如单糖、双糖和多糖等。
该方法的原理是利用糖将某些金属阳离子还原为金属,而金属被还原后会显色,通过比色法来测定糖的含量。
操作流程:1. 食品样品称取适量,加入一定量的水,用搅拌器混合均匀。
2. 取一定量的样品溶液,加入适量的硫酸,然后加入稀酸性硫酸钾。
3. 将试管放入沸水中加热沸腾2~3分钟后冷却到室温,然后加入硼酸溶液,并用氢氧化钠调整pH值。
4. 添加一定量的柠檬酸铵和硫酸亚铁,摇晃5~10秒后,倒入定量瓶中,加入水至刻度并混合均匀。
5. 将比色皿放入波长648nm的分光光度计中,以纯蒸馏水为参比溶液进行调零,然后加入一定量的试液,记录吸光度。
6. 按照比色皿中的样品浓度计算出糖的含量。
二、高温反应法高温反应法通常适用于葡萄糖的测定。
该方法的原理是将葡萄糖在高温下与类似于尿素的化合物反应,生成有色产物,在一定波长下进行比色,从而测定葡萄糖的含量。
2. 将混合均匀的样品溶液倒入试管中,加入苏斯洛溶液和Copper-Tartrate液。
3. 摇晃混合均匀后,将试管放入加热水浴中,保持温度在95℃左右,反应30~40分钟。
4. 试管取出放置降温后,计算产生的颜色深度,并通过与标准溶液比色,计算出糖的含量。
三、比旋法比旋法是一种简单易行的方法,适用于多糖和单糖的测定。
该方法的原理是通过旋光仪测定糖分子的光学旋转,从而得到糖的含量。
2. 过滤处理得到无浮渣的取样液,将取样液置于旋光仪中测定旋光度。
3. 计算得到旋光度后,按照所测定糖的性质和种类进行计算出糖含量。
总之,每种测定方法都有其优势和局限性,选择适用于特定类型的食品的方法最为重要。
食品中糖的测定方法
食品中糖的测定方法对于糖的测定方法有很多,大致可分为三类1.物理法,(1.旋光法, 2 .折光法, 3.比重法,)2.物理化学法,(1.点位法, 2极普法,3.光度法,4.色谱法)3.化学方法,(1.斐林氏法. 2.高锰酸钾法. 3.碘量法.4.铁氰化钾法.5.蒽铜比色法.6.咔唑比色法)共计三大种,在测定其他碳水化合物时,往往是使其水解为糖再进行测定。
一. 总糖的测定食品中的总糖主要指具有还原性的葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖(水解后为1分子葡萄糖和1分子果糖),麦芽糖(水解后为2分子葡萄糖)以及可能部分水解的淀粉(水解后为2分子葡萄糖)。
还原糖类之所以具有还原性是由于分子中含有游离的醛基(-CHO)或酮基(=C=O)。
测定总糖的经典化学方法都是以其能被各种试剂氧化为基础的。
这些方法中,以各种根据斐林氏溶液的氧化作用的改进法的应用范围最广。
在这里我们主要给大家介绍铁氰化钾法,蒽铜比色法,斐林氏容量法。
斐林氏容量法由于反应复杂,影响因素较多,所以不如铁氰化钾法准确,但其操作简单迅速,试剂稳定,故被广泛采用。
蒽铜比色法要求比色时糖液浓度在一定范围内,但要求检测液澄清,此外,在大多数情况下,测定要求不包括淀粉和糊精,这就要在测定前将淀粉,糊精去掉,这样就使操作复杂化,限制了其广泛应用。
(一)铁氰化钾法1.原理:样品中原有的和水解后产生的转化糖都具有还原性质,在碱性溶液中能将铁氰化钾还原,根据铁氰化钾的浓度和检验滴定量可计算出含糖量。
其反应为下:C6H12O6+6K3[Fe(CN)6] + 6KOH →(CHOH)4•(COOH)2 + 6K4[Fe(CN)6]+ 4H2O滴定终了时,稍过量的转化糖即将指示剂次甲基兰还原为无色的隐色体。
2,试剂1)1%的次甲基兰指示剂2)盐酸(水解作用)3)10%和30%的NaOH溶液4)1%铁氰化钾(贮存特色瓶,临用前标定)标定步骤称蔗糖1.0000g→定容500ml→取此液50ml→于100ml容量瓶→加hcl5ml→摇匀→65-70℃水裕15分钟→取出冷却→用30%NaOH中和→加水于刻度→倒入滴定管中→取10ml1%铁氰化钾于锥形瓶中→加10%NaOH2.5ml 加12.5ml的水加玻璃珠颗粒→加热至沸→保持一分钟→加次甲基兰1滴→立即以糖液滴足至蓝色退去为止,记录用量。
食品中糖含量的测定方法研究
食品中糖含量的测定方法研究糖作为一种常见的食物成分,在食品中扮演着重要的角色。
然而,过多的糖摄入对健康有害。
因此,准确测定食品中糖的含量是非常重要的。
本文就食品中糖含量的测定方法进行研究。
一、高效液相色谱法高效液相色谱法是目前最常用的测定食品中糖含量的方法之一。
该方法通过将样品中的糖分离并使用色谱柱进行定性和定量分析。
高效液相色谱法有准确度高、分析速度快等优点,已经被广泛应用于食品质量检测。
二、酶法测定法酶法测定法是一种通过酶促反应来测定糖含量的方法。
该方法通过将样品与特定的酶底物反应生成可测定的产物来测定糖的含量。
酶法测定法具有反应性强、准确性高等优点,但需要较长的分析时间。
三、红外光谱法红外光谱法是一种基于糖分子对红外光的吸收和散射的特性来测定糖含量的方法。
该方法具有快速、非破坏性等特点,可以对样品进行迅速的分析。
然而,红外光谱法在某些食品样品中存在干扰物质的问题,因此需要进一步改进。
四、核磁共振法核磁共振法是一种通过测定磁共振信号来确定糖含量的方法。
该方法具有高分辨率、非破坏性等特点,可以对样品进行准确的定量分析。
然而,核磁共振法的设备昂贵且复杂,不易在所有实验室中广泛应用。
五、电化学法电化学法是一种基于糖分子在电化学反应中的电子转移特性来测定糖含量的方法。
该方法具有高灵敏度、准确性高等优点,已经成为一种常用的食品中糖含量测定方法。
然而,电化学法在某些食品样品中存在样品处理和电极选择的问题。
综上所述,食品中糖含量的测定方法有多种选择,每种方法都有其特点和局限性。
在实际应用中,我们可以根据具体情况选择合适的测定方法。
随着科学技术的不断进步,未来可能会出现更加准确和快速的测定方法,为食品质量检测提供更大的便利和贡献。
糖类抗原检测方法
糖类抗原检测方法糖类抗原是一种存在于细胞表面的糖蛋白,它在许多疾病的发生和发展中发挥着重要的作用。
因此,糖类抗原的检测成为了临床诊断和治疗中的重要手段之一。
本文将介绍几种常见的糖类抗原检测方法。
一、ELISA法ELISA法是一种常用的糖类抗原检测方法,它基于酶联免疫吸附实验原理。
该方法通过将待测样品中的糖类抗原与固定在试板上的抗体结合,再加入酶标记的二抗,通过酶的催化作用产生颜色反应来定量检测糖类抗原的含量。
ELISA法操作简便、准确性高,被广泛应用于临床检验和科研领域。
二、免疫组织化学染色法免疫组织化学染色法是一种通过使用特异性抗体来检测糖类抗原的方法。
该方法通过将组织切片固定后,使用特异性抗体与糖类抗原结合,再加入酶标记的二抗进行染色。
染色结果可以通过显微镜观察,从而确定糖类抗原的存在与否以及分布情况。
免疫组织化学染色法可以提供组织水平的信息,对于疾病的诊断和治疗具有重要意义。
三、免疫荧光法免疫荧光法是一种利用特异性抗体和荧光染料来检测糖类抗原的方法。
该方法通过将待测样品与特异性抗体结合,再加入荧光标记的二抗,通过荧光显微镜观察荧光信号来确定糖类抗原的存在与否。
免疫荧光法具有高灵敏度和高特异性的优点,可以在细胞和组织水平上进行糖类抗原的检测。
四、质谱分析法质谱分析法是一种通过质谱仪检测糖类抗原的方法。
该方法通过将待测样品进行离子化,然后通过质谱仪进行分析,得到糖类抗原的质谱图谱。
通过对质谱图谱的解析,可以确定糖类抗原的结构和含量。
质谱分析法具有高分辨率和高灵敏度的特点,可以用于研究糖类抗原的结构和功能。
总结:糖类抗原检测方法的选择应根据具体的实验目的和样品性质进行评估。
不同的方法有各自的优缺点,适用于不同的实验需求。
ELISA 法是一种常用的检测方法,操作简便,适用于大规模样品的检测。
免疫组织化学染色法和免疫荧光法可以提供组织水平的信息,对于疾病的诊断和治疗具有重要意义。
质谱分析法可以提供糖类抗原的结构和含量信息,对于研究糖类抗原的功能具有重要意义。
糖类的分析方法
糖分析方法(一)直接滴定法(本法是国家标准分析方法)中华人民共和国行业标准(果汁-总糖的测定-直接滴定法)SB/T 10203-1994 Ⅰ、原理❖一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合,立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀,这种沉淀很快与酒石酸钠反应,生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。
在加热条件下,以次甲基蓝作为指示剂,用标液滴定,样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应,生成红色的氧化亚铜沉淀,待二价铜全部被还原后,稍过量的还原糖把次甲基蓝还原,溶液由蓝色变为无色,即为滴定终点。
根据样液消耗量可计算出还原糖含量。
样品经除去蛋白质后,在加热条件下,以次甲基蓝做指示剂,滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液(用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液),根据样品溶液消耗体积计算还原糖量。
Ⅱ、仪器和试剂1.仪器酸式滴定管,可调电炉(带石棉板),250ml容量瓶。
2.试剂1. 盐酸。
2. 碱性酒石酸铜甲液:称取15g硫酸铜(CuSO4·5H2O)及0.05g次甲基蓝,溶于水中并稀释至1000mL。
3. 碱性酒石酸铜乙液:称取50g酒石酸钾钠与75g氢氧化钠,溶于水中,再加入4g亚铁氰化钾,完全溶解后,用水稀释至1000 ml,贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
4. 乙酸锌溶液:称取21.9 g乙酸锌,加3ml冰乙酸,加水溶解并稀释至100ml。
5. 亚铁氰化钾溶液:称取10.6g亚铁氰化钾,用水溶解并稀释至100ml。
6. 葡萄糖标准溶液:准确称取1.0000g经过96℃±2℃干燥2h的纯葡萄糖,加水溶解后加入5ml盐酸,并以水稀释至1000L。
此溶液相当于1mg/ml葡萄糖(注:加盐酸的目的是防腐,标准溶液也可用饱和苯甲酸溶液配制)。
7. 果糖标准溶液:按⑹操作,配制每毫升标准溶液相当于1mg的果糖。
8. 乳糖标准溶液:按⑹操作,配制每毫升标准溶液相当于1mg的乳糖。
9. 转化糖标准溶液:准确称取1.0526g纯蔗糖,用100ml水溶解,置于具塞三角瓶中加5ml盐酸(1+1),在68℃~70℃水浴中加热15min,放置至室温定容至1000ml,每ml 标准溶液相当于1.0mg转化糖。
糖定量测定的方法
糖定量测定的方法
糖定量测定的方法有许多种,下面列举了一些常用的方法:
1. 光度计法:利用糖溶液中吸收或散射光的特性,通过光度计测量光的强度来估算糖的浓度。
常用的光度计方法有紫外可见光光度法、葡萄糖氧化酶法等。
2. 比旋光度法:利用光的旋光现象,通过测量糖溶液中旋光的角度来确定糖的浓度。
常用的比旋光度法有葡萄糖比旋光度法、麦芽糖比旋光度法等。
3. 高效液相色谱法(HPLC):利用不同糖分子在柱上的分离速率不同,通过检测出柱上各组分的峰值面积来定量糖的浓度。
HPLC是一种常用的分离和定量糖的方法,能同时分析多种糖。
4. 毛细管电泳法:利用糖分子电泳迁移速率的差异,通过电泳分离并测量各组分的峰值面积来定量糖的浓度。
5. 高性能甲苯磺酸硅凝胶层析法(HPAEC):通过将样品溶液置于高性能甲苯磺酸硅凝胶柱中,通过洗脱不同的糖分子,再通过检测器检测各组分的浓度以获得定量结果。
这些方法各有优缺点,选择适合的糖定量测定方法需考虑样品性质、测定目的、设备可用性等因素。
食品中糖的测定方法
食品中糖的测定方法对于糖的测定方法有很多,大致可分为三类1.物理法,〔1.旋光法, 2 .折光法, 3.比重法,〕2.物理化学法,(1.点位法, 2极普法,3.光度法,4.色谱法)3.化学方法,(1.斐林氏法. 2.高锰酸钾法. 3.碘量法.4.铁氰化钾法.5.蒽铜比色法.6.咔唑比色法)共计三大种,在测定其他碳水化合物时,往往是使其水解为糖再进展测定。
一. 总糖的测定食品中的总糖主要指具有复原性的葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖和在测定条件下能水解为复原性的单糖的蔗糖〔水解后为1分子葡萄糖和1分子果糖〕,麦芽糖〔水解后为2分子葡萄糖〕以及可能局部水解的淀粉〔水解后为2分子葡萄糖〕。
复原糖类之所以具有复原性是由于分子中含有游离的醛基〔-CHO〕或酮基(=C=O)。
测定总糖的经典化学方法都是以其能被各种试剂氧化为根底的。
这些方法中,以各种根据斐林氏溶液的氧化作用的改良法的应用围最广。
在这里我们主要给大家介绍铁氰化钾法,蒽铜比色法,斐林氏容量法。
斐林氏容量法由于反响复杂,影响因素较多,所以不如铁氰化钾法准确,但其操作简单迅速,试剂稳定,故被广泛采用。
蒽铜比色法要求比色时糖液浓度在一定围,但要求检测液澄清,此外,在大多数情况下,测定要求不包括淀粉和糊精,这就要在测定前将淀粉,糊精去掉,这样就使操作复杂化,限制了其广泛应用。
〔一〕铁氰化钾法1.原理:样品中原有的和水解后产生的转化糖都具有复原性质,在碱性溶液中能将铁氰化钾复原,根据铁氰化钾的浓度和检验滴定量可计算出含糖量。
其反响为下:C6H12O6+6K3[Fe(CN)6] + 6KOH →(CHOH)4•(COOH)2 + 6K4[Fe(CN)6]+ 4H2O滴定终了时,稍过量的转化糖即将指示剂次甲基兰复原为无色的隐色体。
2,试剂1〕1%的次甲基兰指示剂2)盐酸〔水解作用〕3〕10%和30%的NaOH溶液4〕1%铁氰化钾〔贮存特色瓶,临用前标定〕标定步骤称蔗糖1.0000g→定容500ml→取此液50ml→于100ml容量瓶→加hcl5ml→摇匀→65-70℃一分钟→加次甲基兰1滴→立即以糖液滴足至蓝色退去为止,记录用量。
四种糖的测定方法
四种糖的测定方法糖是一类普遍存在于食品和生物体内的有机化合物,在生物体内扮演着能量供应和结构支持的重要角色。
因此,准确测定糖的含量对于食品工业、医学研究以及农业等领域至关重要。
本文将介绍四种常见的糖类测定方法:离子色谱法、高效液相色谱法、酶法和光学旋光法。
离子色谱法(Ion Chromatography,IC)是一种基于糖与离子交换柱相互作用的分析方法。
该方法的原理是,通过将样品中的糖溶解成离子形式,并通过离子色谱柱对其进行分离和定量测定。
该方法具有高灵敏度、分离效果好和操作简便等特点。
离子色谱法广泛应用于果汁、乳制品、饮料等食品中糖的含量测定,同时也可用于生物体内糖的测定,如血糖测定。
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种利用高压将流动相通过色谱柱以及对样品中的目标物进行分离和检测的方法。
在糖的测定中,通常采用葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase,GOD)进行检测。
首先,将样品中的糖通过酶反应转化为过氧化氢和酮糖,然后过氧化氢再和荧光素酶反应生成荧光素,最后通过荧光检测器进行定量测定。
该方法具有高灵敏度、准确度高和分离效果好的特点,广泛应用于食品和生物体中糖类的测定。
酶法是一种常见的测定糖的方法。
在糖类测定中,常使用葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase,GOD)进行测定。
该酶与葡萄糖结合形成过氧化氢和酮糖,然后通过反应转换为酸与染料反应产生有色产物,最后根据产生的色度与糖的浓度成正比进行定量测定。
酶法具有操作简便、准确性高和灵敏度高等特点,广泛应用于血糖检测和食品中糖类的测定等领域。
光学旋光法是一种通过测量糖溶液在光的干涉下发生的旋光现象来测定糖含量的方法。
根据糖分子中的手性碳原子的存在,使得糖分子能够旋光,通过测量光经过旋光液体时的偏离程度,并与标准旋光度进行对比,可以确定糖的含量。
光学旋光法具有准确性高、非破坏性测量以及对复杂样品的适用性等特点,广泛应用于食品、医药等领域的糖类测定。
蔗糖含量测定方法
蔗糖含量测定方法
蔗糖是一种常见的糖类物质,在食品工业和医药工业中被广泛应用。
蔗糖含量的测定对于食品的质量控制非常重要。
本文将介绍几种常见的蔗糖含量测定方法。
1.折射法
折射法是一种常用的测定蔗糖含量的方法。
这种方法基于溶液中溶质浓度和折射率之间的关系。
通过使用折射仪测定样品溶液的折射指数,然后使用经验公式将折射指数转换为蔗糖含量。
2.重量法
重量法是一种直接测定蔗糖含量的方法。
它通过测量样品中蔗糖的重量来确定其含量。
具体操作是将样品溶解在适量的溶剂中,然后将其溶液适当稀释,最后将溶液中的蔗糖沉淀出来并称重,通过计算可得到蔗糖的含量。
3.比色法
比色法是一种常用的快速测定蔗糖含量的方法。
它基于蔗糖溶液在一定浓度下对光的吸收作用。
通过将样品溶液与适当浓度的标准溶液进行比色,根据样品与标准溶液的吸光度之差,可以确定样品中蔗糖的含量。
4.液相色谱法
液相色谱法是一种高效的测定蔗糖含量的方法。
这种方法利用溶液中的蔗糖与色谱柱中的固定相进行相互作用,通过不同的保留时间来确定蔗糖的含量。
液相色谱法具有高灵敏度、高分辨率和高重复性的优点,广泛应用于蔗糖含量的测定。
总结起来,测定蔗糖含量的方法有折射法、重量法、比色法和液相色
谱法等。
根据具体情况,可以选择适合的方法进行测定。
这些方法的选择
应该考虑到测定时间、精确度、仪器设备和操作条件等因素。
同时,要保
证测定的准确性和可重复性,可以进行多重测定和与标准方法的对比验证。
糖类测定
③ 乙酸锌溶液
④ 亚铁氰化钾溶液 澄清剂 ⑤ 葡萄糖标准溶液:准确称取经 98 ~ 100 ℃ 干燥至恒 重的无水葡萄糖,加水溶解后移入1000 m1容量瓶中,加入 5mL盐酸(防止微生物生长)。
⑥ 测定方法 样品处理
取适量样品,按本章第二节中的原则对样品进行提 取,提取液移入250 mL 容量瓶中,慢慢加入 5 mL乙酸 锌溶液和 5 mL亚铁氰化钾溶液,加水至刻度,摇匀后静 置 30分钟。用干燥滤纸过滤,弃初滤液,收集滤液备用。
二是通过预测可知道样液大概消耗量,以便在正式测定 时,预先加入比实际用量少 1 mL 左右的样液,只留下 1 mL 左右样液在续滴定时加入,以保证在 1 分钟内完 成续滴定工作,提高测定的准确度。 ⑧影响测定结果的主要操作因素是反应液碱度、热源强 度、煮沸时间和滴定速度。反应液的碱度直接影响二价 铜与还原糖反应的速度、反应进行的程度及测定结果。
沸腾时间和滴定速度对结果影响也较大,一般沸腾时 间短,消耗糖液多。反之,消耗糖液少;滴定速度过 快,消耗糖量多,反之,消耗糖量少。因此,测定时 应严格控制上述实验条件,应力求一致。平行试验样 液消耗量相差不应超过0.1mL 。
(二)高锰酸钾滴定法
1.原理
将一定量的样液与一定量过量的碱性酒石酸铜溶液 反应,还原糖将二价铜还原为氧化亚铜,经过滤,得到 氧化亚铜沉淀,加入过量的酸性硫酸铁溶液将其氧化溶 解,而三价铁盐被定量地还原为亚铁盐,用高锰酸钾标 准溶液滴定所生成的亚铁盐,根据高锰酸钾溶液消耗量 可计算出氧化亚铜的量,再从检索表中查出与氧化亚铜 量相当的还原糖量,即可计算出样品中还原糖含量。
各步反应式如下: Cu2+ + 还原糖 2Cu+ + I2 = 2Cu2+ = I2 + 2 Na2S2O3 Cu+ + 2 INa2S4O6 + 2 NaI
糖含量的测定方法
糖含量的测定方法
糖含量的测定方法有多种,常用的方法包括以下几种:
1. 折射率法:将待测物溶解于水中,使用折射计测量溶液的折射率,通过折射率与糖溶液浓度之间的关系,计算出糖含量。
2. 还原糖法:将待测物溶解于水中,加入一定量的还原剂(如硫酸铜),反应生成氧化物。
通过测量溶液中氧化物的浓度或测定溶液的光吸收率,计算糖含量。
3. 比旋光法:将待测物溶解于水中,使用比旋光仪测量溶液的旋光角度,通过旋光角度与糖溶液浓度之间的关系,计算出糖含量。
4. 高效液相色谱法(HPLC):利用HPLC仪器将待测物溶解于有机溶剂中,通过样品在色谱柱中的保留时间和峰面积,与已知浓度的标准品进行比较,计算出糖含量。
5. 毛细管电泳法:将待测物溶解于缓冲液中,通过电泳的方式分离不同的糖类,并测量它们的峰面积来计算糖含量。
以上仅是常用的糖含量测定方法,根据实际需求和样品性质的不同,还可以选择其他适合的测定方法。
用什么方法鉴定糖
用什么方法鉴定糖要鉴定糖,可以使用多种方法。
下面将介绍一些常见的方法,包括视觉观察法、颜色反应法、结晶形态法、熔点测定法和甜度测定法等。
1. 视觉观察法:糖的外观可以提供一些初步的信息。
一般来说,糖是结晶状的或者是颗粒状的,具有不同的颜色,例如白色、黄色或棕色。
结晶状的糖往往比颗粒状的糖更纯净。
通过观察糖的颜色、结晶形状和大小等特征,可以初步判断糖的品质。
2. 颜色反应法:糖可以通过与一些特定试剂发生颜色反应来进行鉴定。
例如,糖可以与硝酸银溶液反应生成白色的沉淀,这是因为糖中的羟基与银离子结合形成不溶性盐。
此外,一些糖类(如还原糖)可以与法尼斯试剂发生颜色反应,产生深红色。
这些颜色反应可以提供进一步的信息来鉴定糖。
3. 结晶形态法:结晶形态法是通过观察糖的晶体形态来鉴定糖。
糖的晶体形态可以受到制备过程、纯度和结晶温度等因素的影响。
不同糖类(如蔗糖、果糖和葡萄糖等)的晶体形态具有不同的特征,例如形状、大小和聚集程度等。
通过比较不同糖类的晶体形态,可以初步鉴定糖的类型。
4. 熔点测定法:糖的熔点也是一种鉴定糖的方法。
不同糖类的熔点范围是不同的,因为它们的结构和物理特性不同。
例如,蔗糖的熔点约为160-186摄氏度,而葡萄糖的熔点约为146-150摄氏度。
通过测定糖的熔点范围,可以初步确定糖的类型。
5. 甜度测定法:甜度测定法是用来测定糖的甜度的方法,可以间接地鉴定糖。
常用的甜度测定方法有色度法和感官评价法。
色度法是通过测量糖溶液的吸光度或色度来确定糖的甜度。
感官评价法是通过人的味觉来判断糖的甜度。
一般来说,蔗糖的甜度较高,而果糖和葡萄糖的甜度较低。
通过测定糖的甜度,可以更准确地判断糖的品质和类型。
总之,鉴定糖可以使用多种方法。
视觉观察法、颜色反应法、结晶形态法、熔点测定法和甜度测定法等都是常用的方法。
通过综合应用这些方法,可以对糖进行准确的鉴定和分析。
当然,在实际应用中,还需要结合具体的实验条件和相关的知识来进行判断和鉴定。
食品中糖的测定方法
食品中糖的测定方法对于糖的测定方法有很多,大致可分为三类1.物理法,(1.旋光法, 2 .折光法, 3.比重法,)2.物理化学法,(1.点位法, 2极普法,3.光度法,4.色谱法)3.化学方法,(1.斐林氏法. 2.高锰酸钾法. 3.碘量法.4.铁氰化钾法.5.蒽铜比色法.6.咔唑比色法)共计三大种,在测定其他碳水化合物时,往往是使其水解为糖再进行测定。
一.总糖的测定食品中的总糖主要指具有还原性的葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖(水解后为1分子葡萄糖和1分子果糖),麦芽糖(水解后为2分子葡萄糖)以及可能部分水解的淀粉(水解后为2分子葡萄糖)。
还原糖类之所以具有还原性是由于分子中含有游离的醛基(-CHO)或酮基(=C=O)。
测定总糖的经典化学方法都是以其能被各种试剂氧化为基础的。
这些方法中,以各种根据斐林氏溶液的氧化作用的改进法的应用范围最广。
在这里我们主要给大家介绍铁氰化钾法,蒽铜比色法,斐林氏容量法。
斐林氏容量法由于反应复杂,影响因素较多,所以不如铁氰化钾法准确,但其操作简单迅速,试剂稳定,故被广泛采用。
蒽铜比色法要求比色时糖液浓度在一定范围内,但要求检测液澄清,此外,在大多数情况下,测定要求不包括淀粉和糊精,这就要在测定前将淀粉,糊精去掉,这样就使操作复杂化,限制了其广泛应用。
(一)铁氰化钾法1.原理:样品中原有的和水解后产生的转化糖都具有还原性质,在碱性溶液中能将铁氰化钾还原,根据铁氰化钾的浓度和检验滴定量可计算出含糖量。
其反应为下:C6H12O6+6K3[Fe(CN)6] + 6KOH →(CHOH)4•(COOH)2 + 6K4[Fe(CN)6]+ 4H2O滴定终了时,稍过量的转化糖即将指示剂次甲基兰还原为无色的隐色体。
2,试剂1)1%的次甲基兰指示剂2)盐酸(水解作用)3)10%和30%的NaOH溶液4)1%铁氰化钾(贮存特色瓶,临用前标定)标定步骤称蔗糖1.0000g→定容500ml→取此液50ml→于100ml容量瓶→加hcl5ml→摇匀→65-70℃水裕15分钟→取出冷却→用30%NaOH中和→加水于刻度→倒入滴定管中→取10ml1%铁氰化钾于锥形瓶中→加10%NaOH2.5ml加12.5ml的水加玻璃珠颗粒→加热至沸→保持一分钟→加次甲基兰1滴→立即以糖液滴足至蓝色退去为止,记录用量。
糖类测定方法大全
糖类测定方法大全(一)测定方法概述(二)可溶性糖类的提取和澄清1、提取液制备(1)常用提取剂——水、乙醇(2)提取液中含糖量控制0.5~3.5mg/mL(3)含脂肪食品先脱脂,然后用水提取(4)含淀粉及糊精食品(乙醇沉淀淀粉等)用70~75%乙醇溶液提取(5)含乙醇及CO2液态食品,蒸发至1/3~1/4原体积,以除去C2H5OH及CO2(6)酸性食品应先中和防止低聚糖部分水解(7)提取固体样品有时需要加热,以提高提取效果。
一般在40~50℃,防止多糖溶出(8)乙醇作提取剂加热时应安装回流装置2、提取液的澄清(1)影响测定的杂质色素、蛋白质、果胶、可溶性淀粉、有机酸、氨基酸、单宁,可影响颜色、浑浊、过滤困难。
(2)澄清剂①醋酸铅(中性)Pb(CH3COO)2·3H2O,形成沉淀,吸附杂质,可除去蛋白质、果胶、有机酸、单宁等。
②乙酸锌和亚铁氰化钾二者生成氰亚铁酸锌↓吸附蛋白质等干扰物。
③硫酸铜和氢氧化钠,Cu离子使蛋白质沉淀。
(3)澄清剂用量用量适宜,以无新沉淀为准,如2ml饱和醋酸铅(30%)。
(4)除铅剂由于铅影响还原糖的测定,生成铅糖化合物。
常用除铅剂有草酸钠、硫酸钠、磷酸氢二钠。
(三)蓝—爱农(Lane-Eynon)法测定还原糖(国际上常用的定量糖的方法)1、原理斐林试剂甲液(CuSO4·5H2O)斐林试剂乙液(酒石酸钾钠+NaOH)甲、乙混合→酒石酸钾钠合铜酒石酸钾钠合铜+葡萄糖→葡萄糖酸+ Cu2O↓(红棕)终点的确定:葡萄糖+亚甲基蓝(氧化态)→亚甲基蓝(还原态)过量兰色无色(兰色消失)终点时的颜色为:兰色消失了的红棕色2、测定预测准确吸取斐林试剂甲液5.00mL、乙液5.00mL→锥形瓶中,△至沸腾,再加入亚甲基蓝指示剂,在加热的条件下,用样液滴至蓝色褪尽。
(先快后慢,要求很快达到终点,因为亚甲基蓝易被空气氧化为蓝色,且要求在加热的情况下以除去空气)测定甲液5mL、乙液5mL→锥形瓶中,加入比上述预测量少0.5~1ml 样液在2min内沸腾,维持沸腾2min,加入3滴亚甲基蓝指示剂,再在3min内滴定至蓝色褪尽。
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糖类测定方法大全(一)测定方法概述(二)可溶性糖类的提取和澄清1、提取液制备(1)常用提取剂——水、乙醇(2)提取液中含糖量控制0.5~3.5mg/mL(3)含脂肪食品先脱脂,然后用水提取(4)含淀粉及糊精食品(乙醇沉淀淀粉等)用70~75%乙醇溶液提取(5)含乙醇及CO2液态食品,蒸发至1/3~1/4原体积,以除去C2H5OH及CO2 (6)酸性食品应先中和防止低聚糖部分水解(7)提取固体样品有时需要加热,以提高提取效果。
一般在40~50℃,防止多糖溶出(8)乙醇作提取剂加热时应安装回流装置2、提取液的澄清(1)影响测定的杂质色素、蛋白质、果胶、可溶性淀粉、有机酸、氨基酸、单宁,可影响颜色、浑浊、过滤困难。
(2)澄清剂①醋酸铅(中性)Pb(CH3COO)2·3H2O,形成沉淀,吸附杂质,可除去蛋白质、果胶、有机酸、单宁等。
②乙酸锌和亚铁氰化钾二者生成氰亚铁酸锌↓吸附蛋白质等干扰物。
③硫酸铜和氢氧化钠Cu离子使蛋白质沉淀。
(3)澄清剂用量用量适宜,以无新沉淀为准,如2ml饱和醋酸铅(30%)、(4)除铅剂由于铅影响还原糖的测定,生成铅糖化合物。
常用除铅剂有草酸钠、硫酸钠、磷酸氢二钠。
(三)蓝—爱农(Lane-Eynon)法测定还原糖(国际上常用的定量糖的方法)1、原理斐林试剂甲液(CuSO4·5H2O)斐林试剂乙液(酒石酸钾钠+NaOH)甲、乙混合→酒石酸钾钠合铜酒石酸钾钠合铜+葡萄糖→葡萄糖酸+ Cu2O↓(红棕)终点的确定:葡萄糖+亚甲基蓝(氧化态)→亚甲基蓝(还原态)过量兰色无色(兰色消失)终点时的颜色为:兰色消失了的红棕色2、测定①预测准确吸取斐林试剂甲液5.00mL、乙液5.00mL→锥形瓶中,△至沸腾,再加入亚甲基蓝指示剂,在加热的条件下,用样液滴至蓝色褪尽。
(先快后慢,要求很快达到终点,因为亚甲基蓝易被空气氧化为蓝色,且要求在加热的情况下以除去空气)②测定甲液5mL、乙液5mL→锥形瓶中,加入比上述预测量少0.5~1ml样液在2min 内沸腾,维持沸腾2min,加入3滴亚甲基蓝指示剂,再在3min内滴定至蓝色褪尽。
3、计算F还原糖% = --------------------- ×100( V1/V ) × mm--样品质量,mg;V1--滴定量mL;V--样液总mL;F--还原糖因素,10mL费林试剂,相当的还原糖量mgF的求得有两种方法:A、用标准还原糖液用上面同样方法标定10ml费林试剂求得。
B、查蓝—爱农法专用“还原糖因数表”附表例若V1=26 则F=49.9(四)直接滴定法测定还原糖1、原理(GB/T5009.7-1985)斐林试剂甲液(CuSO4·5H2O+亚甲基蓝),斐林试剂乙液(酒石酸钾钠+NaOH+亚铁氰化钾,混合→酒石酸钾钠合铜,酒石酸钾钠合铜+葡萄糖→葡萄糖酸+ Cu2O↓(红棕),亚铁氰化钾使Cu2O↓(红棕)生成无色络合物K2Cu2Fe(CN)6。
Cu2O + K4Fe(CN)6 + H2O →K2Cu2Fe(CN)6 + 2KOH红棕无色终点的确定:葡萄糖+亚甲基蓝(氧化态)→亚甲基蓝(还原态过量兰色无色2、测定①碱性酒石酸铜溶液的标定(乙液(内有亚铁氰化钾)取甲、乙液各5.00mL,加入9~9.5ml葡萄糖标准溶液(1mg/mL),△2min内沸腾,准确沸腾30s,滴至蓝色褪去,记下消耗葡萄糖V1。
F = C·V1(F--10mL斐林试剂相当于葡萄糖质量,mg;C--葡萄糖液浓度mg/mL;V1--葡萄糖液消耗体积)②预测:吸取甲、乙液各5.00mL,加水10mL,2min内△至沸,准确沸腾30s,用样液滴定至蓝色褪去,记录V样液预测③测定:吸取甲、乙液各5.00mL,加入预测样液V少1mL样液,△,2min内沸腾,准确沸腾30s,继续滴定至蓝色褪去,记下V23、计算 F还原糖% = --------------------×100( V2/V ) × mF---- 10mL斐林试剂相当于葡萄糖质量,mgV2----消耗样液的体积,mlV----样液定溶的总体积,mlM----样品的质量,mg(五)高锰酸钾法测定还原糖1、原理(GB/T5009.7-1985)还原糖与酒石酸合钠反应生成Cu2O↓Cu2O + 2Fe3+ + 2H+ → 2Cu2+ + 2Fe2+ + H2O10Fe2+ + 2MnO4- +16H+ → 10Fe3+ + 2Mn2+ + 8H2O5mol Cu2O 相当于 2mol KMnO4由KMnO4耗量求出Cu2O量,再由Cu2O检索表得出相当的还原糖量。
2、适用范围及特点适用于各类食品中还原糖的测定,有色样液不受限制,准确度高,重现性好,但费时,需检索表。
3、测定:吸取样液50ml于烧杯中,加费林试剂甲、乙各25mL,△,4min内沸腾,2min趁热在古氏坩埚中抽滤,60℃热水洗涤去滤液。
保留Cu2O↓,将坩埚用硫酸铁溶液50mL分数次将Cu2O溶解,滤入吸滤瓶中,热水洗涤,加入20mL2 mol/L H2SO4,用KMnO4溶液滴至微红色,同时作空白试验(V0)。
4、计算X=CMnO4-×(V-Vo) ×(5/2)×143.08(MCu2O)A还原糖(%)= --------------- ×100m×V2/V1×1000X-Cu2O量mg,A-由x查出还原糖量mg,m-样品质量g,如:x=105.8 A=46.0, 也可以参考P89 (5-2) m1 ( A) = 0.4388x-0.4805(六)蔗糖的测定1、原理:蔗糖经用HCl水解,使蔗糖转化为还原糖,然后按还原糖测定方法,分别测定水解前后样液中还原糖含量,两者之差即为由蔗糖水解产生的还原糖量,乘以一个换算系数0.95即蔗糖%2、测定:吸取样液2份各50ml,其中一份直接加入100ml容量瓶中,用水稀释至刻度。
另一份加入5ml 6M HCl,置68~70℃水浴加热15min冷后加入100ml 容量瓶加2滴甲基红,用20%NaOH中和至中性,加水至刻度。
然后用直接滴定法或高锰酸钾法测定还原糖含量。
3、结果计算蔗糖(%)=(转化后还原糖%-转化前还原糖%)×0.950.95——蔗糖+ H2O = 葡糖+ 果糖342 18 180 180转化糖换成蔗糖系数=342/360 = 0.95(七)总糖分的测定食品中的总糖分包括还原性糖(葡、果、乳、麦芽糖)和蔗糖,反映的是可溶性单糖和低聚糖的总量,为常规分析项目是麦乳精、糕点、果蔬罐头、饮料……质量指标。
1、原理:同蔗糖的测定2、测定:按测定蔗糖的方法水解样品,再测定还原糖量3、计算m——样品质量mgF——10ml斐林试剂相当于葡萄糖质量,mg;V1、V2——样品总体积、消耗样品液体积50/100——稀释比例(八)淀粉的测定1、酸水解法淀粉→盐酸水解→葡萄糖→测定还原糖2、酶水解法淀粉→酶水解→葡萄糖→测定还原糖3、旋光法(九)食物中不溶性膳食纤维的测定1、实验原理在中性洗涤剂的消化作用下,样品中的糖、淀粉、蛋白质、果胶等物质被溶解去,不能消化的残渣为不溶性膳食纤维,主要包括纤维素、半纤维素、木质素、角质和二氧化硅等,并包括不溶性灰分。
2、测定步骤(1)取样1.00g,置高型无嘴烧杯中,如样品脂肪含量超过10%,需先去除脂肪,即样品1.00g,用石油醚(30-60℃)提取3次,每次10mL。
(2)加2.5%α-淀粉酶溶液20mL,于37℃(或者水浴锅)恒温箱中保温1小时。
(3)加100mL中性洗涤剂溶液,再加0.5g无水亚硫酸钠。
(4)电炉加热,5-10min内使其煮沸,移至电热板上,保持微沸1h。
(5)将耐酸玻璃滤器洗净,移至烘箱内,110℃4h,取出置干燥器中,冷至室温,称量,得m1。
(6)将煮沸后样品趁热倒入滤器中,用水泵抽滤。
用500mL热水(90-100℃),分数次洗烧怀及滤器,抽滤至干。
洗净滤器下部的液体和泡沫,塞上橡皮塞。
(7)于滤器中加丙酮,液面需覆盖纤维,保持5分钟,除去底部塞子,抽干,再以丙酮洗2次。
(8)将滤器置烘箱中,110℃4h,取出,置干燥器中,冷至室温,称量,得m2。
3、结果计算m2-m1X(%)=———— × 100m式中:X—样品中不溶性膳食纤维的含量%;m1—滤器的质量,g;m2—滤器及样品中纤维的质量,g;m—样品质量,g。
(十)果胶物质的测定常用测定方法:重量法、咔唑比色法1、重量法原理样品+ 70%乙醇→ 果胶↓ →分别用乙醇、乙醚洗涤(除糖、脂肪、色素)→残渣→分别用水、酸提取→提取液+NaOH →果胶酸钠+CH3COOH→果胶酸+CaCl2 →果胶酸钙↓ →烘干→称重2、适用范围及特点:适用于各类食品,方法稳定可靠,但费时,易夹杂。
3、测定①样品处理A.新鲜样品切片+无水乙醇→ 沸水浴中回流15min→过滤→残渣→分别用乙醇、乙醚洗涤→残渣B.干燥样品研细过筛→称样+ 70%乙醇→过滤(反复)→残渣→分别用乙醇、乙醚洗涤→残渣②提取A.水溶性果胶:残渣→水→沸腾1h →冷却→定容→过滤(弃去粗滤液)→水溶性果胶提取液。
B.总果胶:残渣+0.05mol/L HCl → 沸水浴中回流1h(装冷凝管)→冷却+0.05mol/LNaOH,中性红,中和→ 定容(250ml)→过滤(弃去粗滤液)→总果胶提取液。
③测定吸取提取液25ml +0.1mol/LNaOH 100mL →搅拌、放置0.5h +1mol/L CH3COOH 50mL →放置5min + 1mol/L CaCl2 25mL →放置1h(陈化)→煮沸5min→过滤→滤渣+滤纸→干燥恒重。
4、计算(m1-m0)× 0.9233果胶酸(%)= —————————— ×100m ×25/250m0——埚+纸,m1——埚+纸+胶,m——试样,0.9233——果胶酸/果胶酸钙系数。