培养基及其配制

MS salts reduced to 0.47 g. l-1
Some root growth but reduced development of shoots
MS salts increased to 9.52 g. l-1
Shoots developed on upper surface of
作用：促进幼苗茎的伸长生长，打破休眠， 促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发。
激素配比模式
生长素/细胞分裂素 高：有利于根的形成 适中：有利于愈伤组织形成或根芽分化 低：有利于芽的形成
No 6-BA
Profuse development of roots and a reduced number of shoots. Undifferentiated callus is developing at the edges of the explant
肌醇：使用浓度一般为100mg／L 氨基酸：是很好的有机氮源，可直接被细胞吸收
利用，常用甘氨酸。
4、植物生长调节物质
1）生长素类： 作用：诱导愈伤组织形成、根的分化和促进细
胞分裂、伸长生长。 IAA(indo acetic acid吲哚乙酸) NAA(naphthalene acetic acid萘乙酸) IBA(indolebutyri acid吲哚丁酸) 2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸) 作用的强弱顺序：2,4-D > NAA > IBA >IAA
2）细胞分裂素类 ( cytokinin )
作用①诱导芽的分化促进侧芽萌发生长;②促 进细胞分裂与扩大;③抑制根的分化
6-BA(6-苄基氨基腺嘌呤) Kt (kinetin 激动素) Zt (zeatin 玉米素) 作用的强弱顺序：Zt>6-BA>Kt
3）GA(gibberellic acid赤霉素)
Poor shoot development and no roots
NAA reduced to 0.1 mg. l-1
Poor shoot development and no roots. Extensive callus generation
NAA increased to 5.0 mg. l-1
2）微量元素：浓度小于0.5mmol／L的元素
Fe B Mn Cu Mo Co
3、有机物质
碳源和能源：蔗糖、葡萄糖和果糖。蔗糖：2%— 5%，常用3%，可调节渗透压；
维生素：VBl(盐酸硫胺素)、VB6(盐酸吡哆醇)、 Vpp(烟酸)、Vc（抗坏血酸），生物素、叶酸、 VB12等。一般用量为0.1—10mg／L；
explant. No roots or callus.
5、培养材料的支持物
琼脂 用量：6—10g／L； 优点：操作简便，通气较好，便于观察； 缺点：含杂质，养分扩散慢，有毒物质聚集；
其他 有玻璃纤维、滤纸桥、海绵、卡拉胶等。
6、活性炭(active carbon)
用量：0.5—l0g／L。 作用：吸附 应用：
Profuse development of roots over the explant upper and lower surface, and few shoots. Some callus
No MS salts
No siwenku.baidu.comn of regeneration from explant
at all.
强铬酸洗涤液（强液）：与浓硫酸加热的同时 缓慢加入磨碎的重铬酸钾，直到重铬酸钾达到 饱和为止。一般浓硫酸1L加入重铬酸钾50g
第二章 培养基及其配制
第一节 培养基的成分 第二节 培养基的配制 第三节 常用培养基的配方
第一节 培养基的成分
一、培养基的产生及名称 1、培养基的产生 1680年和1681年：Sacks和Knop 1943年：white 1962年：Murashige和Skoog （MS） 2、培养基的名称
沿用，多数以发明人的名字来命名
二、培养基的成分
水 无机营养 有机物质 植物生长调节剂 培养材料的支持物 活性炭 抗生素类 天然复合物
1、水
2、无机营养（无机盐类） 1）大量元素：浓度大于0.5mmol／L N：NO3-N和NH4-N两种形式供应，如KNO3、
NH4NO3 P：KH2P04或NaH2P04 K：Kcl、KN03 Ca、Mg、S：MgSO4·7H20、CaCl2
2、铬酸液的配制
① 配制步骤： 选用合适容器； 按配方称量好重铬酸钾和蒸馏水，然后
将重铬酸钾完全溶于蒸馏水中； 缓缓加入浓硫酸，切忌过急； 自然冷却、备用
②配制过程：
稀铬酸洗涤液（弱液）：重铬酸钾50g+蒸馏水 1L，加热溶化，冷却后再缓慢加入浓硫酸90ml。
饱和铬酸洗涤液（中液）：用重铬酸钾50g加 入蒸馏水100ml，加热溶化，冷却后再缓慢加 入浓硫酸875ml。
一、玻璃器皿的选择
4、培养皿 规格：9、12cm直径； 适于：游离细胞、 原生质体、花粉等的静置培养、 看护培养、无菌种子的发芽、植物材料的分离等。 5、果酱瓶 规格：200ml罐头瓶，加盖半透明的塑料盖； 特点：成本较低，操作方便，也减少了培养材料的
损伤；缺点是易引起污染。
6、瓶口封塞
要求：要具有一定的通气性和密闭性， 以防止培养基干燥和杂菌污染。
常用： 1） 棉塞； 2） 聚丙烯塑料薄膜； 3） 也可采用专用的封口膜
二、玻璃器皿的清洗
1、玻璃器皿的清洗步骤 浸泡：目的是软化和溶解附着物，新 5%盐酸 刷洗：放在洗涤剂中反复刷洗 浸酸： 酸液又称洗涤液；有强氧化作用 冲洗：“注满水-倒空”10次以上或注入“2/3
的水振荡冲洗”10次以上→蒸馏水冲洗2～3次
6-BA reduced to 0.1 mg. l-1
More balanced development of roots and shoots. However, undifferentiated callus is developing at the edges of the explant
No NAA