朱红膏对动物急性毒性和皮肤刺激性的实验研究

朱红膏对动物急性毒性和皮肤刺激性的实验研究

作者：张旭辉等

来源：《中国中医药信息》2012年第09期

摘要：目的研究外用制剂朱红膏对大鼠的急性毒性和对豚鼠的皮肤刺激性，为临床安全用药提供依据。方法急性毒性实验：建立朱红膏外用大鼠模型，制备破损皮肤，选取相当于临床用药剂量320倍的朱红膏（原药材609.28 mg/kg）进行实验，记录毒性反应和体质量增加情况。皮肤刺激性实验：建立朱红膏外用豚鼠模型，制备破损皮肤，采用同体左右侧自身对照法进行单次和多次给药的皮肤刺激性实验。结果急性毒性实验中，未见大鼠出现急性毒性反应，给药组大鼠体质量和对照组比较，差异无统计学意义。皮肤刺激性实验中，未见豚鼠给药处皮肤出现红斑、水肿等情况。结论一定时间内外用一定剂量的朱红膏对大鼠没有出现急性毒性反应，对豚鼠破损皮肤没有产生刺激性。

关键词：朱红膏；急性毒性；皮肤刺激性；大鼠；豚鼠

中图分类号：R285.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2012）09-0050-02

朱红膏是首都医科大学附属北京中医医院院内制剂，临床用于治疗慢性皮肤溃疡。其主要成分为朱砂和红粉，研究显示其中汞含量为16.72%[1]。临床使用时，将朱砂、红粉和凡士林以一定比例调和成膏剂，均匀涂抹于纱条上，纱条含药膏量为9 mg/cm2。前期动物实验表明，大剂量长时间给药会对大鼠肾脏产生损害，而短期小剂量给药是安全的[2-4]。为了避免临床用药时不良反应的发生，本研究对动物模型进行了急性毒性和皮肤刺激性实验[5-7]。

1 实验材料

1.1 药物

朱红膏（朱砂、红粉、凡士林）、朱红粉（朱砂、红粉）、凡士林均为首都医科大学附属北京中医医院中心制剂室提供。

1.2 动物

SD大鼠，体质量200 g，SPF级，雌雄各半，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号SCXK（京）2006-2009。白色豚鼠，体质量200 g，雄性，购自北京沙河通利试验动物养殖场，许可证号SCXK（京）2010-0004。饲养于SPF动物房内，温度（22±2）℃，相对湿度40%～60%，12 h光照。

2 实验方法

2.1 急性毒性实验

SD大鼠30只，雌雄各半，空白对照组雌、雄各5只，朱红膏给药组（原药材609.28

mg/kg）雌、雄各10只。于给药前24 h，将大鼠背部脊柱两侧毛用10%硫化钠脱净，脱毛面积30 cm2（为体表面积的10%）。实验时，先用单面刀片刮伤大鼠背部脱毛区，力度均等，以渗血为度，再将0.5 g朱红膏均匀涂抹在给药组大鼠背部，并用纱布和橡皮膏固定。给药24 h 后，用植物油洗去残留受试物。去除受试物后14 d内，观察并记录大鼠皮肤、毛发、饮食、大小便和黏膜的异常情况，隔3 d称1次体质量。若有动物死亡，则需要肉眼观察和尸检。当有肉眼可见的病变时，需要进行病理组织学检查。

2.2 皮肤刺激性实验

2.2.1 单次给药皮肤刺激性实验将朱红膏均匀涂抹于医用纱布上，制备成朱红膏纱条。24只豚鼠随机分为朱红膏高、低剂量组（原药材38.08、19.04 mg/kg），每组12只。采用同体左右侧自身对照法。于给药前24 h，将豚鼠背部脊柱两侧毛用10%硫化钠脱净，脱毛面积左右各20 cm2（为体表面积的10%）。实验时，用注射针头在脊柱两侧背部各划一“#”字，渗血为度，再将朱红膏纱条贴敷在左侧“#”字处，右侧涂布蒸馏水作为对照，用纱布和橡皮膏固定。敷药4 h后去除药物，分别于1、24、48、72 h观察皮肤反应，记录给药处有无红斑和水肿等情况，按评分标准记分及强度标准判断刺激强度[6]。对出现中度及以上皮肤刺激性的动物应在观察期结束后，对给药局部进行组织病理学检查。

2.2.2 多次给药皮肤刺激性实验选用动物、操作方法、评价方法同“2.2.1”，每隔3 d在脊柱两侧背部各划一“#”字，并给药。在每次去除药物后1、24、48、72 h，分别观察和记录红斑、水肿、色素沉着、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲薄等情况，及其发生时间和消退时间，并对红斑和水肿进行评分，连续14 d。

3 统计学方法

使用SPSS17.0软件系统进行统计，数据用—x±s表示，组间均数比较采用独立样本t检验，P

4 结果

4.1 朱红膏对大鼠的急性毒性

在整个观察期间，所有动物正常生长，毛色、行为活动、饮水、饮食及大小便均正常，口、鼻、耳等处无异常分泌物，所有动物均存活，虽然给药组动物体质量普遍低于空白对照组，但差异无统计学意义，提示一定剂量的朱红膏外用对大鼠无明显的急性毒性反应。结果见表1。

4.2 朱红膏对豚鼠的皮肤刺激性

朱红膏高、低剂量组单次、多次给药后动物表现为蜷卧少动，可能是因为皮肤刮伤和绑缚橡皮膏导致；敷药部位皮肤未见红斑、水肿，所有观察时间点刺激强度评分值均为0；有部分动物破损皮肤处形成少量结痂，1周内结痂逐渐脱落，恢复正常，考虑是针头划伤皮肤所致。实验期间共有9只动物死亡，尸检显示为胸腔积水、积血或肠胀气，且死亡数量和给药时间、给药剂量之间没有相关性，考虑是实验操作原因引起。

5 讨论

朱红膏具有提脓祛腐、敛疮生肌的功效，临床常用的贴敷面积为6 cm2，剂量为原药材0.34 mg/kg[2]。根据人和动物体表面积折算等效剂量，急性毒性实验所选取的剂量相当于临床剂量的320倍，皮肤刺激性实验朱红膏高、低剂量分别相当于临床剂量的20、10倍。

朱红膏的主要成分是朱砂、红粉和凡士林。其中朱砂的主要成分是HgS，占98.0%[8]，因其是共价化合物，溶解度很小，所以在汞的化合物中，朱砂的急性毒性比较小，合理用药不会对人体产生急性毒性损害[9]。红粉的主要成分是HgO，占99%[10]。目前关于红粉的毒性研究比较少，多是对其丹药的研究。凡士林是一种矿物蜡，不被皮肤吸收，且能在肌肤表面形成一道保护膜，使皮肤的水分不易蒸发散失，而且它极不溶于水，可长久附着在皮肤上，具有良好的保湿效果，使伤口部位的皮肤组织保持最佳状态，加速了皮肤自身的修复能力。凡士林虽然没有杀菌能力，但是它能阻挡来自空气中的细菌和皮肤接触，从而降低感染的可能性。目前为止，未发现对以凡士林为基质的含汞药物毒性研究的报道[11]。

急性毒性实验显示，一次性给予破损皮肤模型大鼠大剂量的朱红膏没有产生急性毒性。选取比人皮肤敏感的豚鼠进行皮肤刺激性实验，结果显示朱红膏对豚鼠破损皮肤没有明显的刺激性。

参考文献：

[1] 毛克臣，李卫敏，李洋，等.朱红膏的质量控制[J].中国中医药信息杂志， 2003，10（4）：44-45.

[2] 董建勋，王乐平，李建荣，等.朱红膏毒性靶器官及安全用药范围研究[J].中华中医药杂志，2011，26（6）：1293-1295.

[3] 董建勋，罗玲，李建荣，等.朱红膏促进皮肤溃疡愈合的安全性研究[J].中国中医药信息杂志，2011，18（6）：47-49.

[4] 王乐平，董建勋，罗玲，等.外用制剂朱红膏肾脏早期毒性敏感指标NAG、RBP的监测[J].中华中医药杂志，2011，26（10）：2261.

[5] 吕秋军.新药药理学研究方法[M].北京：化学工业出版社，2007：379，426-428.