微生物标准操作流程纲要.docx
标准微生物操作
标准微生物操作
1、在进行有关培养物及样品实验时，未经实验室主任同意，限制或禁止进入实验室。
2、进行活体处理后，实验人员要洗手；离开实验室前脱手套。
3、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。
不允许在工作区存放食物和日常生活用品。
在实验室中，戴隐型眼镜的人，也需戴口罩或面罩。
食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。
4、不能用嘴移液，只能用机械装置移液。
5、制定锐器安全使用规范。
6、所有的操作过程应尽量细心，避免产生溅出和气溶胶。
7、至少一天一次、活体溅出时，都应进行台面消毒。
8、所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前，均应使用可行的消毒方法进行消毒，如高压灭菌。
转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出实验室，其包装应符合有关地方、州、联邦法规。
9、当存在传染源时，应在实验室入口处贴生物危险标志，并显示以下信息：实验中的源名称、研究者姓名及电话号码。
10、实施控制昆虫和龋齿动物的程序。
微生物实验室操作规程【SOP】2024
正文内容：1. 培养基和试剂的制备和保存1.1 培养基的制备- 确保实验室用水质量符合要求，执行水质监测。
- 配制培养基时，按照配方的比例准确称量和混合各种成分。
- 制备后的培养基要经过高温高压灭菌处理，并记录相关信息。
1.2 试剂的准备与保存- 确保试剂的纯度和质量。
- 试剂的保存应遵循相应的储存条件，如低温、干燥、避光等。
2. 微生物实验室的清洁和消毒2.1 实验台面和设备的清洁- 实验结束后，及时清洁实验台面和设备，移除残余的微生物和污渍。
- 使用合适的清洁剂和消毒剂，遵循正确的清洁和消毒程序。
2.2 垃圾处理和废弃物管理- 将实验室生活垃圾与实验废弃物分类投放，遵循垃圾分类和废物管理的要求。
- 在实验室内配备明显的废弃物容器，并定期清理和更换。
3. 生物安全操作和防护3.1 实验室内的个人防护- 实验室工作人员应穿戴实验室指定的个人防护装备，包括实验服、手套、口罩等。
- 定期检查和更换个人防护装备，确保其完好无损。
3.2 操作台上的生物安全柜使用- 使用生物安全柜操作时，按照正确的使用方法进行操作。
- 养生物安全柜使用后，要及时清洁和消毒。
4. 微生物实验的准备和操作4.1 实验准备- 在进行微生物实验前，要仔细阅读实验方案和相关文献，了解实验目的和操作步骤。
- 准备所需的培养基、试剂、设备等，并确认其完整性和有效期。
4.2 微生物实验操作- 操作前要洗手并戴好手套，保持操作台面的清洁。
- 严格按照实验方案的指导进行操作，确保实验过程的准确性和可重复性。
- 实验过程中注意观察实验样品的变化，并记录相关数据和观察结果。
5. 实验数据记录和结果分析5.1 数据记录- 在实验过程中，实验人员要及时、准确地记录实验数据和观察结果。
- 记录的数据要清晰可辨，并加以正确的标注和注释，以便后续的数据分析和结果验证。
5.2 结果分析与总结- 在实验完成后，仔细整理和分析实验数据，得出结论并进行结果的可靠性评估。
微生物检验标准操作程序
微生物检验标准操作程序（一）菌落总数标准操作程序1 范围本操作程序规定了食品中菌落总数（aerobic plate count）的测定方法。
本操作程序适用于食品中菌落总数的测定。
2 术语和定义下列术语和定义适用于本操作程序。
菌落总数aerobic plate count食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。
3 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：3.1 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃，30 ℃±1 ℃。
3.2 冰箱：2 ℃～5 ℃。
3.3 恒温水浴箱：46 ℃±1 ℃。
3.4 天平：感量0.1 g。
3.5 均质器。
3.6 振荡器。
3.7 无菌吸管：1 mL（具0.01 mL刻度）、10 mL（具0.1 mL刻度）或微量移液器及吸头。
3.8 无菌锥形瓶：容量250 mL、500 mL。
3.9 无菌培养皿：直径90 mm。
3.10 pH计或pH比色管或精密pH试纸。
3.11 放大镜或/和菌落计数器或Petrifilm TM自动判读仪。
4 培养基和试剂4.1 平板计数琼脂培养基：见附录A中A.1。
4.2 磷酸盐缓冲液：见附录A中A.2。
4.3 无菌生理盐水：称取8.5 g氯化钠溶于1000 mL蒸馏水中，121 ℃高压灭菌15 min。
4.4 1 mol/L NaOH：称取40 g氢氧化钠溶于1000 mL蒸馏水中。
4.5 1 mol/L HCl：移取浓盐酸90 mL，用蒸馏水稀释至1000 mL。
2012 年食源性致病菌监测工作手册中国 CDC 营养与食品安全所24.6 Petrifilm TM菌落总数测试片和压板。
第一法平板计数法5 检验程序菌落总数平板计数的检验程序见图1。
36 ℃±1 ℃48 h±2 h检样25 g（mL）样品+225 mL稀释液，均质10倍系列稀释选择2个～3个适宜稀释度的样品匀液，各取1 mL分别加入无菌培养皿内培养计数各平板菌落数计算菌落总数每皿中加入15 mL～20 mL平板计数琼脂培养基，混匀报告图1 菌落总数的检验程序6 操作步骤6.1 样品的稀释6.1.1 固体和半固体样品：称取25 g样品置盛有225 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000 r/min～10000 r/min均质1 min～2 min，或放入盛有225 mL稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min，制成1:10的样品匀液。
微生物实验的操作规程
微生物实验的操作规程微生物实验的操作规程：一、实验前准备1. 确定实验目的、方法和所需试剂和设备。
2. 检查试剂和设备的完好性和有效期，确保实验所需的试剂和设备都齐全，并进行必要的消毒。
3. 穿戴实验室规定的实验服装和个人防护用品，如实验手套、护目镜和口罩等。
4. 确保工作台面和实验器具的清洁度，并做好实验台面的消毒。
5. 准备好所需的培养基及其他辅助试剂，并按照实验要求进行必要的消毒和灭菌。
二、实验操作1. 在无菌条件下，将所需试剂和设备放入实验台面上，并进行必要的消毒处理。
2. 操作前需洗手，并在工作台上喷洒70%乙醇或其他消毒剂，然后用纸巾擦拭干净。
3. 遵守无菌操作原则，使用无菌技术进行培养基的制备和菌落的分离。
4. 操作时注意防止细菌的污染，尽量避免开启试管、培养皿等时将手放入危险区域。
5. 操作过程中不得随意触摸自己的面部，以免将细菌带入自己的身体。
6. 注意实验室中的气流，尽量避免在通风不良的地方进行操作。
7. 实验操作结束后，将使用过的器材进行清洗和消毒处理，并保持实验室台面的清洁。
三、实验后处理1. 实验完成后关闭实验台面上的灯和电源，将所有试剂、实验器具和废液放置在指定的位置，并进行必要的消毒处理。
2. 将使用过的培养基和细菌培养物放入指定的消毒容器中，并进行高温高压灭菌处理。
3. 清洁和消毒实验室的工作台面和地面，保持实验室的整洁。
4. 将实验室废液倒掉并进行必要的处理，注意不要将废液倒入下水道或环境中。
5. 清洗和消毒使用过的实验服装和个人防护用品，如实验手套、护目镜和口罩等。
6. 定期对实验室进行全面清洁和消毒，并确保消毒剂的有效时间。
四、安全注意事项1. 不得进行未经指导的实验操作，以免发生意外或造成伤害。
2. 遵守实验室的安全规定，不得从事与自己能力和资质不相符合的实验操作。
3. 严格遵守实验室的消防和紧急救援措施，了解实验过程中的风险并采取相应的措施。
4. 遵守个人防护措施，使用必要的个人防护用品，如实验手套、护目镜和口罩等。
微生物实验室标准操作程序手册
微生物实验室标准操作程序质量手册实验操作者：XXXXXXXX执行日期：X 年X 月X 日启用日期：XX 年X 月X 日标准操作程序文件01 试剂贮存和配制区工作制度02 标本处理区工作制度03 细菌自动分析区工作制度04 试剂贮存和配制区标准操作程序05 标本处理区标准操作程序06 细菌自动分析区标准操作程序07 紫外消毒标准操作程序08 消毒液配制使用标准操作程序09 普通冰箱使用标准操作程序10 超低温冰箱标准操作规程11 洁净工作台使用操作规程12 VITEK32 型自动分析系统标准操作程序13 移液器使用标准操作程序14 高速离心机操作标准操作程序15 冰箱维护和保养标准操作程序16 电热恒温水浴箱操作程序17 洁净工作台维护和保养程序18 可移动紫外消毒车使用操作程序19 加样器校准标准操作程序20 离心机维护保养操作程序21 温度计校准程序22 试剂的质检操作程序23_微生物实验室岗位职责(暂行)24 临床标本的保存程序25 临床检验及收费程序26 微生物检验收收费价格27 普通培养阴性操作程序28 真菌培养阴性操作程序29 苛养菌培养阴性操作程序30 抗酸杆菌培养阴性操作程序31 支原体培养检验操作程序标本处理区工作制度进入本区需穿工作服、工作鞋。
本区只能进行：临床标本的保存，标本接种、培养、及其菌株检验前处理、菌悬液制备、染色标本检查、非上机鉴定与药敏试验操作等危险操作，其它操作不得在此区进行。
在整个本区的实验操作过程中，操作者必须戴手套、口罩和帽子，严格按照操作规程进行。
工作结束后必须立即对工作区进行清洁或消毒。
非本实验室工作人员未经允许不得进入。
试剂配制和无菌区工作制度进入该区需穿专用工作服和工作鞋。
本区只能进行贮存试剂的制备、试剂的分装和平板的制备。
在整个本区的实验操作过程中，操作者必须戴手套和帽子，严格按照操作规程进行。
工作结束后必须立即对工作区进行清洁和消毒。
非本实验室工作人员未经允许不得进入。
1.9微生物控制标准操作程序
6.18.5、如果发现有霉菌生长，并且覆盖住整个薄膜表面，同时又看不到有截然不同
的菌落，则按一个霉菌菌落计数；
6.18.6、如果观察到的微生物生长是来自于外部污染或不令人满意的其它原因，则按“实验室事故”（LA）记录和通报，如果需要用显微镜鉴别再生微生物，则参阅TM701.014再生有机物和沉积物的显微镜载片准备方法；
6.5、如果采用发酵液进行培养，则按无菌方式向培养皿中分液2毫升，均匀地使吸附垫饱合。如果采用琼脂进行培养，则要取得预制的含有相应培养基的培养皿；
6.6、用75%的乙醇（酒精）对不锈钢过滤装置（滤头）进行灭菌；
6.7、将样品倒入滤杯。（相应的样品量请参阅微生物取样计划，如对于完成饮料为100 毫升；对于糖浆20毫升用100ml无菌水混匀；白砂糖10g用100ML无菌水溶解，然后对此溶液过滤；
酵母菌、霉菌和嗜酸细菌
251C (772F)
1203小时
耐防腐剂酵母菌
251C (772F)
1203小时
大肠菌群
351C (952F)
241小时
6
6.16、如果每个滤膜表面上的菌落数少于100个，则清点所有菌落，并按单位体积样品的菌落数记录和通报，如果菌落数超过100但少于300，则将薄膜分成四个区，并清点一个区上的菌落数，将清点数乘以4，并按单位体积样品的菌落数记录和通报，如果总菌落数超过300，则按单位体积样品的TNTC记录和通报。
≤30cfu/100 ml
每班
酵母菌/霉菌
封盖后
≤15cfu/100 ml
微生物检测操作规程
微生物检测操作规程《微生物检测操作规程》一、目的微生物检测操作规程旨在规范微生物检测实验的操作流程，确保检测结果的准确性和可靠性。
二、适用范围本规程适用于实验室内进行微生物检测实验的操作人员，包括但不限于食品、医药、环境等领域的微生物检测。
三、操作流程1. 实验前准备（1）检查所需物品和设备的完整性和清洁度；（2）准备好所需的培养基、培养皿、移液器等实验用品；（3）佩戴实验服和手套，保持操作环境清洁。
2. 样品处理（1）按照标准操作程序采集样品，并确保准确记录样品信息；（2）样品处理前进行必要的预处理，如稀释、离心等。
3. 培养和检测（1）按照操作规程在培养基上均匀涂布样品；（2）标注培养皿的信息，包括样品编号、培养基种类、培养温度等；（3）放置在适当的培养温度下培养一定时间；（4）观察培养皿的生长情况，记录培养时间和结果。
4. 结果分析（1）根据培养结果进行初步鉴定和计数；（2）必要时进行进一步的分离、鉴定和鉴定。
四、质控要求（1）实验操作人员应具备相应的微生物检测知识和技能，并接受相关的培训；（2）严格遵守操作规程，确保实验操作的准确性和一致性；（3）定期对实验室设备、试剂和培养基等进行检查和质量控制，确保其完好和有效。
五、记录和报告实验过程中产生的数据和结果应当及时记录，并进行审查和验证。
对于检测结果，应当制作详细的技术报告，包括检测方法、样品信息、结果分析和结论等内容。
六、实施本规程由实验室主管负责组织实施，并由实验室操作人员严格遵守。
七、附则本规程自发布之日起施行，如有变动将另行制定修订，并及时通知相关人员。
以上即为《微生物检测操作规程》的内容，希望广大实验室操作人员严格按照规程执行，确保微生物检测工作的准确性和可靠性。
微生物标准操作流程
微生物标准操作流程(总18页)--本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--目录生物安全柜操作规程及维护 (4)实验室高压蒸气灭菌器操作程序 (8)物体表面细菌监测 (10)医护人员手指细菌监测 (11)空气中细菌含量的监测 (12)环境卫生学监测质控标准 (14)使用中消毒剂与无菌物品保存液的质控程序 (15)一次性医疗用品微生物监测 (16)紫外线消毒质量控制程序 (17)污水的细菌监测 (总大肠菌群) (18)正确洗手的手法 (20)生物安全柜操作规程及维护1.目的：为了满足生物安全操作的要求，并且达到在操作时保护操作人员的目的，使细菌操作达到无菌操作的要求，便于操作的标准化。
2.原理：通过使用空气超高过滤器（ULPA）的过滤，使仪器内部的空气洁净度达到100级，使细菌的一般操作限制在一个相对密闭的环境中，不但保护操作人员，还可满足操作的标准化。
3.工作条件：环境温度：18－30℃相对湿度：<80%安装的环境必须达到一定的洁净度；远离人员通道及有潜在干扰气流的位置；柜后及两侧各留30cm的空隙，顶部30-35cm空隙。
环境必须有良好的通风设备。
4、操作步骤：生物安全柜的设置已经设置完全，如果需要重新设置请参看HFsafe生物安全柜使用说明。
具体操作步骤为：4.1将电源插头插入准备好的固定插座，连通电源。
4.2有系统管理员(即本室负责人)开启玻璃门门锁，并将总开关置于开位置“！”，此时系统开始上电。
4.3检查显示及按钮的各项功能，具体见后附注（注意：UV灯的测试除外，开启UV灯时必须将前玻璃门关闭）。
4.4当系统稳定后，对设备进行安全性检查。
（检查项目包括：工作室平均垂直风速；工作室内可操作区域洁净度达到100级；设备的密封有没有被破坏。
所有的安全检查项目中的洁净度建议由当地卫生防疫部门来进行尘埃粒子数、沉降菌和菌落数的检测，看是否符合其工作室的洁净度要求）。
微生物限度检查标准操作规程
微生物限度检查标准操作规程《微生物限度检查标准操作规程》一、目的微生物限度检查是药品、食品、化妆品等产品质量的重要指标之一，其目的是为了保障产品的安全性和稳定性。
本标准操作规程旨在规范微生物限度检查的操作流程，确保检查结果的准确性和可靠性。
二、范围本标准操作规程适用于药品、食品、化妆品等产品的微生物限度检查，包括大肠菌群、金黄色葡萄球菌、霉菌和酵母菌等微生物指标的检查。
三、检查设备和试剂1. 培养基：根据不同的微生物指标选择适当的培养基，如大肠培养基、Mannitol盐琼脂、Sabouraud葡萄糖琼脂等。
2. 培养皿：使用符合规定的试验培养皿。
3. 培养箱：保证培养条件的恒温培养箱。
4. 其他常用实验用具：包括无菌采样容器、吸管、移液器、无菌培养皿等。
四、操作流程1. 样品采集：从产品中采集适量样品，保持无菌状态。
2. 制备稀释液：根据样品的特性，选择适当的稀释液将样品进行适当稀释。
3. 接种培养：将稀释后的样品接种在适当的培养基上，并在符合条件的培养箱中进行培养。
4. 观察和统计：观察培养皿中微生物的生长情况，统计出微生物的数量。
5. 结果判定：根据标准规定的微生物限度标准，判断检测结果是否符合规定。
五、质量控制1. 实验员必须进行严格的无菌操作训练，并使用正确的个人防护用具。
2. 培养基的质量必须符合规定，避免培养基带有细菌污染。
3. 检查设备必须经过定期的检查和校准，保持正常的工作状态。
4. 标本的采集、处理、保存和运送必须符合规定，避免外界的污染和干扰。
六、结果报告根据检测结果和规定的限度标准，出具检测报告，标明产品的微生物限度是否符合规定，以及具体的检测结果数据。
七、总结微生物限度检查是产品质量检验的重要环节，严格按照标准操作规程进行操作，可以保证检测结果的准确性和可靠性。
实验员在操作过程中也需严格遵守规程，做好个人防护措施，确保实验室的安全和卫生。
微生物检验流程及操作标准
微生物检验流程及操作标准全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：微生物检验是一种重要的实验室技术，用于检测食品、水质、环境等样品中的微生物存在情况。
微生物检验需要严格遵守一系列操作标准和流程，以确保检验结果的准确性和可靠性。
下面我们将介绍一下微生物检验的流程及操作标准。
一、样品采集1. 样品的采集需要采用无菌工具，并保持样品在采集过程中不受到外界环境的污染。
2. 样品的采集过程应尽量避免接触到任何可能引入外源微生物的物质，比如皮肤、空气等。
3. 采集的样品应标明正确的标识信息，包括样品名称、采集地点、采集日期等。
二、样品处理1. 样品收到实验室后，需要尽快进行处理，避免样品内的微生物增殖或死亡。
2. 样品处理过程需要保持在无菌条件下进行，使用无菌工具进行操作。
3. 样品处理过程中需要按照检验要求进行适当的稀释，以确保实验得出准确的结果。
三、培养基准备1. 培养基的制备需要按照标准的配方和步骤进行，以确保培养基的质量符合要求。
2. 制备培养基时需要严格遵守无菌操作规范，避免细菌、真菌等外源微生物的污染。
3. 制备好的培养基需要在适当的条件下保存，确保培养基的稳定性和有效性。
四、接种操作1. 在进行微生物检验之前，需要准备好无菌的接种环、移液器等工具。
2. 采取适当的方法将处理好的样品接种到培养基上，避免接种时引入外源微生物。
3. 接种操作需要在无菌条件下进行，避免培养物受到任何污染。
五、培养与观察1. 接种后的培养基需要置于适当的温度和湿度条件下进行培养，促使样品中的微生物生长。
2. 定期观察培养基上的生长情况，记录生长的数量和形态，用于后续的分析和鉴定。
3. 在观察过程中需要注意反复进行无菌操作，避免细菌、真菌等外源微生物的污染。
六、鉴定与结果解读1. 当样品中的微生物生长到一定程度时，需要进行鉴定和分析，确定其种属和数量。
2. 鉴定过程需要参考相关的鉴定手册和标准，进行适当的试验和测试。
3. 根据鉴定结果进行结果解读，判断样品中微生物的种类和数量是否符合标准要求。
微生物标准操作流程
目录生物安全柜操作规程及维护 (3)实验室高压蒸气灭菌器操作程序 (6)物体表面细菌监测 (8)医护人员手指细菌监测 (9)空气中细菌含量的监测 (10)环境卫生学监测质控标准 (12)使用中消毒剂与无菌物品保存液的质控程序 (13)一次性医疗用品微生物监测 (14)紫外线消毒质量控制程序 (15)污水的细菌监测 (总大肠菌群) (16)正确洗手的手法 (18)生物安全柜操作规程及维护1.目的：为了满足生物安全操作的要求，并且达到在操作时保护操作人员的目的，使细菌操作达到无菌操作的要求，便于操作的标准化。
2.原理：通过使用空气超高过滤器（ULPA）的过滤，使仪器内部的空气洁净度达到100级，使细菌的一般操作限制在一个相对密闭的环境中，不但保护操作人员，还可满足操作的标准化。
3.工作条件：环境温度：18－30℃相对湿度：<80%安装的环境必须达到一定的洁净度；远离人员通道及有潜在干扰气流的位置；柜后及两侧各留30cm的空隙，顶部30-35cm空隙。
环境必须有良好的通风设备。
4、操作步骤：生物安全柜的设置已经设置完全，如果需要重新设置请参看HFsafe生物安全柜使用说明。
具体操作步骤为：将电源插头插入准备好的固定插座，连通电源。
有系统管理员(即本室负责人)开启玻璃门门锁，并将总开关置于开位置“！”，此时系统开始上电。
检查显示及按钮的各项功能，具体见后附注（注意：UV灯的测试除外，开启UV灯时必须将前玻璃门关闭）。
当系统稳定后，对设备进行安全性检查。
（检查项目包括：工作室平均垂直风速；工作室内可操作区域洁净度达到100级；设备的密封有没有被破坏。
所有的安全检查项目中的洁净度建议由当地卫生防疫部门来进行尘埃粒子数、沉降菌和菌落数的检测，看是否符合其工作室的洁净度要求）。
如果安全性测试通过，系统已经可以使用，请在《使用记录》上写下相应的信息。
在使用时需要注意的是，操作必须在工作台板无孔区域进行，物品也必须放置于无孔区域。
微生物实验室标准操作程序范文
微生物实验室标准操作程序范文一、实验室安全操作规范1. 实验室进入与离开规定a. 所有进入实验室的人员必须佩戴适当的个人防护装备，包括实验室服、手套、护目镜和口罩等。
b. 进入实验室前，应先了解实验室的安全规定和实验流程，并接受必要的培训。
c. 离开实验室时，应将实验台面清理干净，关闭实验室设备，并确保实验室内没有残留的化学品和生物制品。
2. 实验室设备操作规范a. 在使用实验室设备前，应先检查设备的工作状态和安全性能。
b. 操作实验室设备时，必须按照操作手册和相关规定进行操作，不得擅自修改设备参数或进行未经许可的实验。
c. 使用完毕后，应将设备清洗干净，并及时上报设备故障或需要维修的情况。
3. 实验室废弃物处理规范a. 废弃物应分类存放，包括化学废弃物、生物废弃物和一般垃圾等。
b. 化学废弃物应按照相关法规和规定进行处理，不得随意倾倒或排放。
c. 生物废弃物应进行高温消毒处理或按照相关规定进行无害化处理。
4. 紧急情况应急处理规范a. 发生火灾、泄露、爆炸等紧急情况时，应立即启动应急预案，确保人员安全，并及时报警和通知相关部门。
b. 在紧急情况下，应根据实验室内的情况采取适当的紧急处理措施，如关闭气源、切断电源等。
二、微生物实验操作规范1. 实验室准备工作a. 实验室内应保持清洁整齐，工作台面应清洁干净。
b. 实验室设备和试剂应进行定期检查和维护，确保其正常工作和安全使用。
c. 实验室内应配备必要的个人防护装备，如实验服、手套、护目镜和口罩等。
2. 微生物培养操作规范a. 在进行微生物培养前，应先准备好所需的培养基和培养器具，并进行必要的消毒处理。
b. 在接种微生物前，应先进行洗手和佩戴手套，避免交叉污染。
c. 在接种微生物时，应注意无菌操作，避免菌种的污染和误差。
d. 微生物培养过程中，应定期观察培养物的生长情况，并及时记录相关数据。
3. 微生物实验操作规范a. 在进行微生物实验前，应先准备好所需的实验材料和试剂，并进行必要的消毒处理。
微生物限度检查法标准操作规程(参考Word)
1. 目的：建立微生物限度检查法标准操作规程2. 范围：适用于原辅料及成品的微生物限度检查。
3. 责任人：QC负责实施，QC主管负责监督。
4. 程序：4.1 检验依据《中华人民共和国药典》2005年版一部附录P704.2 检验规程4.2.1 微生物限度检查法总则4.2.1.1微生物限度检查法系指检查非规定灭菌制剂及其原、辅料受到微生物污染程度的方法。
检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌的检查。
4.2.1.2微生物限度检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。
检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。
4.2.1.3供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物的生长和存活无影响。
4.2.1.4除另有规定外，本检查法中细菌培养温度为30～35℃，霉菌、酵母菌培养温度为23℃～28℃，控制菌培养温度为35～37℃。
4.2.1.5检验结果以1g、1ml、10g、10ml或10cm2为单位报告。
4.2.2 供试品的检验量：检验量即一次试验所用的供试品量（g、ml或cm2）。
除另有规定外，一般供试品检验量为10g 或10ml ；中药膜剂为50cm2,贵重药品、微量包装药品检验量可以酌减。
要求检查沙门菌的供试品，其检验量应增加10g或10ml。
检验时，应从2 个以上最小包装单位中抽取供试品，大蜜丸还不得少于4 丸，膜剂还不得少于4片。
一般应随机抽取不少于检验用量（2个以上最小包装单位）的3倍量。
4.2.3供试液的制备按供试品的理化特性与生物学特性可采取适宜的方法制备供试液。
供试液制备若需用水浴加温时，温度不应超过45℃。
供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1小时。
4.2.3.1液体供试品取供试品10ml，加PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为1：10的供试液。
油剂可加适量无菌聚山梨酯80使供试品分散均匀。
水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。
微生物实验室标准操作程序（范文）
微生物实验室标准操作程序（范文）第一篇：微生物实验室标准操作程序（范文）宽城疾控检验科微生物实验室标准操作程序--------SOP文件λ细菌室工作守则（微生物室 SOP之一）λ细菌室消毒隔离措施（微生物室 SOP之二）λ微生物实验室安全与防护（微生物室 SOP之三）λ细菌室内质控制度（微生物室 SOP之四）λ细菌室操作技术规范（微生物室 SOP之五）λ无菌间规章制度（微生物室 SOP之六）λ菌（毒种）管理办法（微生物室 SOP之七）λ细菌室仪器维护保养及质控措施（微生物室 SOP之八）λ标准菌株保存及使用（微生物室 SOP之九）λ细菌室内务管理规定（微生物室 SOP之十）λ标本采集及保存要求（微生物室SOP之十一）λ酶标仪（微生物室 SOP之十二）λ细菌鉴定室内质控处理程序（微生物室 SOP之十三）λ标本拒收标准（微生物室 SOP之十四）λ温度失控处理措施（微生物室 SOP之十五）λ超净工作台（微生物室 SOP之十六）λ标本的接种和移种法（微生物室 SOP之十七）细菌室工作守则（微生物室 SOP之一）1.每日工作前用紫外线照射实验室半小时以上。
2.入室前应穿工作服，并做好实验前的各项准备工作。
3.实验室内应保持肃静，不准吸烟、吃东西及用手触摸面部。
尽量减少室内活动，以免引起风动，无关人员禁入。
4.非必要物品禁止带入实验室，必要资料和书籍带入后，应远离操作台。
5.做好标本的登记、编号及试验记录。
未发出报告前，请勿丢弃标本。
6.标本处理及各项试验应在操作间进行，接种环用完后应立即火焰灭菌，沾菌吸管、玻片等用后应浸泡在消毒液内。
7.实验时手部污染，应立即用过氧乙酸消毒或浸于3%来苏儿溶液中 5----10分钟，再用肥皂洗手并冲洗干净；8.如误入口内，应立即吐出，并用1:1000高锰酸钾溶液或3%双氧水漱口，根据实际情况服用有关药物。
9.实验过程中，如污染了实验台或地面，应用3%来苏儿覆盖其上半小时，然后清洗；如污染工作服，应立即脱下，高压灭菌。
微生物检验流程及操作标准
微生物检验流程及操作标准微生物检验的流程包括以下步骤：1. 标本采集：根据患者的症状和规章制度正确采集标本，及时将采集到的标本送至检验科进行接种处理。
在运送标本的过程中，需要保持相应的温度和氧气，以防止标本干燥。
2. 镜检：检验人员运用显微镜直接观察标本，辨别相关致病菌的形态与数目，并进行初步判断。
必要时，还需要对标本进行染色后再观察，以对致病菌的性质和来源进行鉴别，更能排除污染因素，使标本致病菌的检出率得到大幅度提升。
3. 分离培养：采集的标本中不可避免地会吸附细菌，如果在镜检环节发现标本上吸附的细菌，就需要对标本实施分离纯化，并将其接种于适宜的培养基上，如显色培养基、血平板培养基、营养琼脂培养基等。
再将空气和温度调整至适合细菌生长的数值，获得便于进一步鉴定的细菌。
4. 细菌鉴定：检验人员通过细菌形态、菌落特点、酶类检测、血清学试验、生化反应等方式鉴定分析分离获得的标本，明确致病原因。
微生物检验的操作标准如下：1. 尽量在病程早期、症状典型以及在使用抗生素之前采集标本。
2. 标本应使用无菌容器盛放。
3. 血液为无菌液体，因此在采集时要避免皮肤的正常菌群污染。
多采用血培养瓶运送，随后放入血培养系统自动培养。
如有报阳则进行下一步检验：涂片镜检报给临床初步结果；需氧和厌氧瓶分别转种血平板，巧克力平板与厌氧血平板等；随后进行菌种鉴定以及药敏试验。
4. 脑脊液标本一般需要进行离心，以富集细胞。
一般检验流程为进行涂片镜检，包括革兰染色，抗酸染色与墨汁染色等。
增菌管进行增菌，分离培养转至血平板，巧克力平板，沙保弱平板等。
5. 痰液镜检一般包括革兰染色与抗酸染色，分离培养多用巧克力平板和血平板。
6. 尿液常做定量检测，取10微升尿液进行连续划线。
7. 粪便常用革兰染色做菌群比检测；分离培养多用麦康凯与SS平板。
8. 各类微生物标本应通过传递窗进行传递。
以上信息仅供参考，建议咨询专业人士获取准确信息。
微生物标准操作规程五
标本接种标准操作规程1.目的规范标本接种标准操作规程，确保检验结果准确可靠。
2.范围微生物室所有标本的接种。
3.职责微生物检验人员严格执行本程序。
4.程序4.1 分区划线法4.1.1 此法多用于粪便等含菌量较多的标本。
4.1.2 用接种环先将标本涂布在平板第一区并作数次划线，再在二、三……区依次用接种环划线。
每划一个区域，应将接种环烧灼1次，待冷却后冉划下一区域。
每一区域的划线应接触上一区域的接种线2～3次，使菌量逐渐减少，以形成单个菌落。
4.2 倾注平板法4.2.1 本法用于尿液等标本的细菌计数。
4.2.2 将灭菌生理盐水适量稀释(通常作10～10稀释)的标本1ml，置于灭菌平皿内，注入已熔化并冷却至50℃左右的培养基15 ml，混匀，待冷却后，倒置。
4.3斜面接种法4.3.1 此法主要用于鉴定或保存菌种，或观察细菌的某些生化特性和动力。
4.3.2 用左手握住菌种管和斜面培养管底部，右手持接种针(环)。
用右手小指与手掌、小指与无名指分别拔出两管的棉塞，将管口通过火焰灭菌。
用接种针（环）伸入菌种管内挑取移种之菌落。
伸入斜面培养管内，先从斜面底部到顶端拖一条接种线，再自下而上地蜿蜒划线，或直接自下而上地蜿蜒划线。
将接种针垂直插入半固体培养基的中央，穿刺至培养基底部，然后沿原穿刺线退出接种针。
4.4穿刺培养法4.4.1 此法用于保存菌种，观察动力及某些生化反应。
4.4.2 以接种针挑取细菌培养物，插入半固体培养基的中央，穿刺至培养基底部，然后沿原穿刺线退出接种针。
4.5 液体培养基接种法用灭菌接种环挑取菌落或标本。
在试管内壁与液面交界处轻轻研磨，使细菌混匀在液体培养基中。
微生物实验操作规程
微生物实验操作规程
1. 实验目的
本操作规程旨在确保微生物实验的安全进行，并保证实验结果的准确性和可靠性。
2. 实验器材准备
- 高温灭菌器
- 密封培养皿
- 不锈钢接种环
- 培养基
- 显微镜
- 实验台
3. 实验步骤
3.1. 准备工作
1. 确保实验台面干净整洁，并消毒实验器材。
2. 检查培养基是否符合要求，如有需要，根据实验要求进行调配。
3.2. 培养菌种
1. 使用无菌的不锈钢接种环在培养基表面划线，接种菌种。
避
免污染其他区域。
2. 密封培养皿，标记上菌种信息和日期，放入高温灭菌器中进
行培养。
3.3. 现场观察
1. 从高温灭菌器取出培养皿，置于实验台上。
2. 使用显微镜观察菌落的形态和生长情况。
记录实验结果。
3.4. 数据处理
1. 将观察到的数据整理成表格或图表。
2. 分析数据并得出结论。
4. 实验注意事项
- 操作过程中要佩戴实验手套，避免污染。
- 实验器材要经过高温灭菌处理，确保无菌状态。
- 实验完毕后及时清理实验台面和器材，保持实验环境的卫生。
- 严格遵守实验操作规程，避免操作失误和意外发生。
5. 实验结果分析
根据实验结果分析，我们可以得出结论并进一步探索微生物的特性和应用领域。
以上为微生物实验操作规程，详细描述了实验的步骤和注意事项，希望能对实验操作提供指导和帮助。
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> 注：以上内容仅供参考，实际操作请根据实验要求和实验室安全规定进行。
标准微生物操作规程
标准微生物操作规程微生物操作规程是用于规范实验室中微生物的处理和操作的一套标准化程序。
这些规程的制定和执行有助于确保实验室中的微生物操作的安全性和准确性。
下面是一份标准微生物操作规程的示例，包括样品的处理、培养基的配制、菌种的传代和储存等方面。
一、样品的处理1. 所有样品在处理前必须进行消毒处理，使用酒精喷雾器或其他消毒方式进行表面消毒。
2. 需要处理的液体样品应使用无菌移液器进行移液操作，避免污染。
二、培养基的配制1. 根据实验需求选择合适的培养基，并按照标准配方准备。
2. 使用无菌的培养基瓶或试管，避免外界污染。
3. 配制好的培养基需要经过高温高压灭菌处理，确保无菌。
三、菌种的传代1. 选择新鲜菌落进行传代，避免使用已经繁殖过多的菌落。
2. 使用无菌的培养基瓶或试管接种菌落，并尽量避免接触到容器外部。
3. 传代过程中需要进行切口贴片观察，确保菌种纯度。
四、菌种的储存1. 储存菌种时，选择适合的储存方法，如冷冻、冷藏或干燥保存。
2. 冷冻保存时，使用无菌的冷冻管存放菌种，加入保护剂并封存，冷冻温度为-80℃。
3. 冷藏保存时，使用无菌的试管或培养基瓶进行存储，冷藏温度为4℃。
4. 干燥保存时，使用无菌的琼脂坡上存放菌种，放入干燥箱中进行干燥处理。
五、废弃物的处理1. 废弃的培养基、试剂和细菌培养物等实验废弃物必须进行规范的处置。
2. 废弃物应放置在专用的生物危险废弃物容器中，并进行正确的标识。
3. 废弃物容器应定期消毒和按规定处理。
六、个人安全措施1. 在进行微生物操作前必须正确佩戴个人防护用品，如实验服、手套和口罩等。
2. 在操作过程中应避免直接接触微生物，尽量使用无菌移液器等工具。
3. 操作完毕后，洗手消毒并正确处理实验室工作区域，确保清洁和消毒。
七、事故处理1. 发生微生物泄漏或其他事故时，立即向上级报告，并按指导进行相应的处理。
2. 发生化学品或其他危险品泄漏时，立即采取措施进行清理和处理，并按相关规定报告。
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目录生物安全柜操作规程及维护............................................................................错误 ! 未定义书签。
实验室高压蒸气灭菌器操作程序....................................................................错误 ! 未定义书签。
物体表面细菌监测. .............................................错误 ! 未定义书签。
医护人员手指细菌监测. .........................................错误 ! 未定义书签。
空气中细菌含量的监测. .........................................错误 ! 未定义书签。
环境卫生学监测质控标准. .......................................错误 ! 未定义书签。
使用中消毒剂与无菌物品保存液的质控程序. .......................错误 ! 未定义书签。
一次性医疗用品微生物监测. .....................................错误 ! 未定义书签。
紫外线消毒质量控制程序. .......................................错误 ! 未定义书签。
污水的细菌监测(总大肠菌群) . ..................................错误 ! 未定义书签。
正确洗手的手法................................................错误 ! 未定义书签。
生物安全柜操作规程及维护1.目的：为了满足生物安全操作的要求，并且达到在操作时保护操作人员的目的，使细菌操作达到无菌操作的要求，便于操作的标准化。
2.原理：通过使用空气超高过滤器（ ULPA）的过滤，使仪器内部的空气洁净度达到100 级，使细菌的一般操作限制在一个相对密闭的环境中，不但保护操作人员，还可满足操作的标准化。
3. 工作条件：环境温度： 18－ 30℃相对湿度：<80%安装的环境必须达到一定的洁净度；远离人员通道及有潜在干扰气流的位置；柜后及两侧各留30cm 的空隙，顶部30-35cm 空隙。
环境必须有良好的通风设备。
4、操作步骤：生物安全柜的设置已经设置完全，如果需要重新设置请参看HFsafe 生物安全柜使用说明。
具体操作步骤为：将电源插头插入准备好的固定插座，连通电源。
有系统管理员( 即本室负责人) 开启玻璃门门锁，并将总开关置于开位置“！”，此时系统开始上电。
检查显示及按钮的各项功能，具体见后附注（注意：UV 灯的测试除外，开启UV灯时必须将前玻璃门关闭）。
当系统稳定后，对设备进行安全性检查。
（检查项目包括：工作室平均垂直风速；工作室内可操作区域洁净度达到100 级；设备的密封有没有被破坏。
所有的安全检查项目中的洁净度建议由当地卫生防疫部门来进行尘埃粒子数、沉降菌和菌落数的检测，看是否符合其工作室的洁净度要求）。
如果安全性测试通过，系统已经可以使用，请在《使用记录》上写下相应的信息。
在使用时需要注意的是，操作必须在工作台板无孔区域进行，物品也必须放置于无孔区域。
操作者应先把手臂放进安全柜内大约 1 分钟，以使柜子适应并且让气流扫过手臂手臂移入移出柜内应保持前门气流的连续性，应缓缓移入移出，并且方向和前门垂直；为使跨越前门的动作量降低，在实验开始前应把所需的物品放入柜子；柜子在开始工作前以及完成后至少要运行 5 分钟是，使柜子净化，以便于污染空气从柜内排出。
实验操作方向应从清洁区到污染区，一般要求为左→右。
当工作完成后需要关机前，将试验使用的所有材料和其他物品从设备中取出。
关闭前玻璃门前，需要维持气流循环一段时间（时间长短视所操作材料的危险性而定）。
关闭风机，停止气流循环。
每日使用后维护( 见后面维护中的第一二步) 。
维护完成后，关闭电源开关。
锁住前玻璃门，并如实填写《使用记录》。
5、仪器的维护：基本保养：清洁：在通常的情况下，清洁只需要用少量家用或商用的碗碟清洗剂，将它溶于水后直接擦洗，就可将设备表面的污染擦掉。
请不要擦拭任何玻璃，以免产生摩擦。
在使用过程中每日或每周的清洁:清洁工作室消毒（一般使用1000mg/L 的次氯酸钠溶液）和对操作面板进行消毒和清洗。
用柔性的清洁剂或玻璃专用清洁剂清洗箱体外表面和玻璃。
对照说明书对设备的各种功能进行检查。
将本次工作记录下来。
月清洗：用清洁剂将所有外表面的尘埃清除。
对设备内部进行消毒处理。
对设备进行功能检验，并在通常使用时检查设备的安全。
将本次清洗记录下来。
每月必须对紫外灯进行照射强度检测。
每年维护：对设备进行安全性全面的检查，对设备进行维护。
包括柜体防泄露、高效过滤器的完整性、人员保护能力、产品保护能力、下降气流流速、流入气流流速、负压、气流模式、警报和联锁等的检测。
一般安全检测由仪器公司进行。
检查前玻璃门驱动装置的松劲程度。
检查紫外灯管。
将本次维护记录下来。
每两年更换日光灯管。
故障的维护处理：当故障发生时必须停止一切操作，尽量维持设备内部空气的循环过滤，将正在进行的试验材料和工具全部取出并妥善管理，然后通知有关部门前来维修。
每次仪器出现故障时必须填写故障登记表，注明故障情况及处理情况。
常见的故障，原因及其处理方法见下表：现象原因处理方法备注照明光源或紫外灯无线路故障检查线路法点亮灯管坏更换灯管镇流器失效更换镇流器蜂鸣器间断报警过滤器失效更换过滤器安全检查蜂鸣器连续报警可能玻璃门过高向下调整玻璃门6、注意事项：只有负责管理本设备的人员才有权关闭风机。
只有经过培训和指导的人员才能操作本设备。
顶部通风口不能被任何东西覆盖以保证排气通畅。
当系统失效时会发出声讯号，此时不能继续操作，否则会导致材料的损失，污染和人身安全方面的危险。
如果发现过滤器失效，要更换过滤器时，必须由专业人员进行更换。
柜内溅出物的处理：在柜内如果出现危险生物材料溅出，应该不能关闭风机继续运行，覆盖滤纸或吸水纸于溅出物表面，然后向滤纸上滴加消毒液（1000mg/L 的次氯酸钠溶液）浸泡 5 分钟，用钳子钳取滤纸丢入感染性废物收集袋中，然后用浸泡了消毒液的干净抹布擦拭柜内表面。
生物安全柜内避免使用明火，因为使用明火会破坏柜内的气流方向。
也禁止使用易挥发易燃易爆物品，以免造成危险。
接种环可以使用微波炉或“电炉”，最好使用一次性接种环。
实验室高压蒸气灭菌器操作程序1．目的：培养基等的液体灭菌，溶解。
器具等的灭菌。
1.3废弃物的处理灭菌。
2．原理：高压蒸气灭菌。
灭菌温度105℃-135 ℃，溶解温度60℃ -100 ℃，保温温度45℃ -60 ℃；压力兆帕3．工作条件 :环境温度 :5 ℃ -35 ℃背面距离墙10 厘米以上 , 右侧距离墙 5 厘米以上。
需放置在无阳光直接照射及湿度不高, 灰尘少的地方。
4.操作步骤：放置排气储存桶注意 : 不得在灭菌器附近放置或放入可燃性物质 , 爆炸性物质 , 氧化性物质 ,易燃性物质 , 可燃性气体。
在排气容器孔中务必插入排气软管添密件, 关紧盖罩 ,接通电源开关注意 : 安装专用电源连接插口, 安装地线 , 可靠接地。
发生异常情况时立即停止运转, 切断电源。
检修时要切断电源。
打开盖子注入加热用水注意 :需采用蒸馏水或自来水。
放入灭菌物品;注意 :不得将灭菌物品装入蒸气不能进入的容器和袋子, 否则无法灭菌装盛灭菌物品的容器不得密封。
不要让灭菌物品堵塞和挤压灭菌器内的孔和温度传感器。
仅对试管 , 烧瓶等容器本身灭菌时, 开口要向下或横放。
物品灭菌时，应同时放入监控指标。
用对热敏感的染料标记的变色带子。
灭菌时，将变色带夹放在试验包裹中,以监视灭菌效果，关闭盖子选择过程 ( 变更设定内容 )( 设定预定运行作业)注意 :运行中要开启排水阀。
按下操作按钮R1 或 b1C1D1灭菌.保温灭菌.溶解器具灭菌运行注意 : 运行中如有蒸气泄漏时，不要靠近安全阀排气口。
运行完毕 ,打开盖子,取出灭菌物品注意 : 不要被烫伤 , 脸不要靠近灭菌器。
切断电源开关排放加热用水物体表面细菌监测1.目的规范物体表面采样及监测标准操作规程。
2.适用范围医院感染监控重点科室，每月常规监测。
发生医院感染暴发流行。
3、职责医院感染管理专职人员或兼职人员应遵守本程序。
4.程序方法监测对象：选择有代表性的可能污染表面采样时间：选择消毒处理后， 4 小时内进行采样面积： 100cm225cm 2细菌定量采样皿培养法：①使用时将采样器去盖，在待测物品上直接接触10 秒钟后加盖（采样皿为一样本面积不得少于 10cm2）。
②将采样皿置35～ 37℃温箱培育18－ 24 小时，直接细菌计数（细菌个数／cm2）和分离鉴定细菌。
棉拭子涂擦法：对物体表面采样时，将内径为5× 5 cm2的灭菌规格板放在被检物表面，用浸有灭菌生理盐水的棉拭子，在规格板空心处涂抹 5 次（往返为一次）；移动规格板，按同样方法涂抹采样，连续采样 4 次（采样 4 次为一样本）剪掉或烧去手接触部分。
将棉拭子放入装有10 亳升的灭菌生理盐水的采样管中，送实验室进行培养鉴定细菌和细菌计数。
门把手等小型物体则用棉拭2子直接涂擦物体表面，以每件为单位计算，较大门把手等则按面积（cm）计算。
一、二类区域细菌总数≤ 5 CFU/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。
三类区域细菌总数≤ 10 CFU/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。
四类区域细菌总数≤ 15 CFU/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。
母婴同室、婴儿室、新生儿室及科病房的物体表面不得检出沙门菌为合格。
医护人员手指细菌监测1.目的规范医务人员手采样标准操作程序。
2.适用范围手卫生监测。
3.职责医院院感管理专职人员或兼职人员应遵守本程序。
4.程序采样时间：在接触病人，人事医疗活动前进行采样面积及方法：被检人五指并拢，将带有无菌生理盐水的棉拭子放在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各 2 次（往返算一次）并随之转动采样拭子剪去手接触部分，将棉拭子放入10ml30 cm2）采样液试管内送检（每只手面积均为结果计算：手污染细菌菌落数（Cfu/cm2）＝平器上菌落数×稀释倍数305 结果判断一、二类区域工作人员细菌总数≤ 5 CFU/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及铜绿假单胞菌为消毒合格。
三类区域工作人员细菌总数≤ 10 CFU/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及铜绿假单胞菌为消毒合格。
四类区域工作人员细菌总数≤ 15 CFU/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及铜绿假单胞菌为消毒合格。