冻融土壤中碳、氮矿化测定实验方案
土壤全碳测定实验报告
土壤全碳测定实验报告实验目的：本实验旨在通过测定土壤全碳含量，了解土壤中有机质的含量以及土壤的肥力状况，并对土壤质量进行评估。
实验原理：土壤全碳测定是通过定量测定土壤中有机碳的含量来评估土壤质量和肥力状况的常用方法之一。
有机碳是土壤中有机质的主要组成部分，其含量高低直接影响土壤的物理、化学和生物学性质。
本实验采用酸化铜氧化法测定土壤全碳含量。
酸化铜氧化法是一种常用的有机碳测定方法，原理上是将有机碳氧化为CO2，风化铜被还原为铜。
其中，土壤样品经过预处理后，添加硫酸铜溶液和液体硝酸，然后加热反应，使有机碳氧化生成CO2，并被稀硝酸捕集，通过测定捕集的CO2的体积可计算出土壤中有机碳的含量。
实验材料和仪器设备：- 土壤样品- 化学草酸- 硫酸铜溶液- 液体硝酸- 高压消解管- 电磁加热板- 试管- 酸碱滴定装置实验步骤：1. 准备土壤样品，将土壤样品收集并去除杂质，取所需重量的土壤样品放入高压消解管中；2. 加入适量的化学草酸，使土壤样品与草酸的比例为10：1，用搅拌棒充分混合；3. 加入适量的硫酸铜溶液和液体硝酸，使样品完全酸化；4. 将高压消解管放入电磁加热板上，加热至样品完全分解，产生CO2气体；5. 用试管将产生的CO2气体捕集起来，并用酸碱滴定装置测定CO2气体体积；6. 根据CO2气体的体积，计算出土壤中有机碳的含量。
实验结果和数据处理：根据测定所得的CO2气体体积，通过计算公式可以得到土壤中有机碳的含量。
将得到的数据整理并进行统计分析，比较不同样品之间的有机碳含量差异。
根据有机碳含量的高低，可以评估土壤质量和肥力状况。
实验结论：通过本实验测定土壤全碳含量，可以评估土壤质量和肥力状况。
有机碳含量高的土壤通常具有较好的肥力和较高的土壤质量；而有机碳含量低的土壤则相对瘠薄。
因此，合理调控土壤有机质含量，对于提高土壤肥力和改善土壤质量具有重要意义。
冻融对湿地土壤可溶性碳、氮和氮矿化的影响
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土壤中碳氮磷实验报告单
一、实验目的1. 了解土壤中碳、氮、磷的组成及含量。
2. 掌握土壤中碳、氮、磷的测定方法。
3. 分析土壤中碳、氮、磷的相互作用及影响因素。
二、实验原理土壤中碳、氮、磷是土壤肥力的重要组成部分，对植物生长具有重要意义。
本实验采用重铬酸钾氧化法测定土壤有机碳，采用凯氏定氮法测定土壤全氮，采用钼锑抗比色法测定土壤有效磷。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：土壤样品（采集自某地区），重铬酸钾、硫酸、硫酸银、钼酸铵、抗坏血酸、盐酸、氢氧化钠等试剂。
2. 实验仪器：电子天平、高温炉、电热板、酸度计、分光光度计、凯氏瓶、消化器、蒸馏器、移液管、容量瓶等。
四、实验方法1. 土壤有机碳测定（1）称取土壤样品1.0g，置于消化器中。
（2）加入10mL浓硫酸，混匀后置于高温炉中消化，待消化液呈无色透明时取出。
（3）将消化液转移至100mL容量瓶中，用去离子水定容至刻度。
（4）取1mL消化液，加入10mL重铬酸钾溶液，混匀后置于电热板上煮沸5min。
（5）取出冷却后，用去离子水定容至50mL，用分光光度计在570nm波长下测定吸光度。
2. 土壤全氮测定（1）称取土壤样品1.0g，置于凯氏瓶中。
（2）加入10mL浓硫酸，混匀后置于电热板上消化，待消化液呈无色透明时取出。
（3）将消化液转移至100mL容量瓶中，用去离子水定容至刻度。
（4）取2mL消化液，加入1mL硫酸银溶液，混匀后置于电热板上煮沸，直至溶液呈红色。
（5）取出冷却后，用去离子水定容至50mL，用分光光度计在620nm波长下测定吸光度。
3. 土壤有效磷测定（1）称取土壤样品1.0g，置于100mL容量瓶中。
（2）加入10mL钼酸铵溶液，混匀后置于电热板上煮沸5min。
（3）取出冷却后，加入1mL抗坏血酸溶液，混匀后置于电热板上煮沸，直至溶液呈无色。
（4）取出冷却后，用去离子水定容至50mL，用分光光度计在690nm波长下测定吸光度。
五、实验结果与分析1. 土壤有机碳含量实验结果显示，土壤有机碳含量为12.34g/kg。
土壤碳的测定
土壤碳的测定实验目的：掌握测定土壤碳的方法，学会用图解表示的方法对试验结果进行分析。
实验原理：有机质在一定条件下会分解成简单无机物，根据此特性可采用凯氏定氮法测定土壤中碳的含量。
1实验准备实验材料和用具实验所需要的材料有：烧杯、酒精灯、称量瓶、量筒、蒸馏水，托盘天平、玻璃棒、镊子、酒精灯等；测定土壤中碳的工具有：容量瓶、酒精灯、滴管、 pH试纸、燃烧匙、铁架台、量筒、秒表等。
实验仪器见课本P82。
2实验步骤一、营养液的配制取草木灰适量（约500g），加水至1000ml，溶解后加入0.1mol/L 的硫酸亚铁溶液，即成营养液。
二、测定pH1.加入试剂将待测定的土样与营养液充分混合，在搅拌下徐徐注入容量瓶中，至刻度线处，此时土样与溶液之间应有大气泡。
然后，小心地用玻璃棒沿刻度线向上滴入一滴0.1mol/L的酸性高锰酸钾溶液，边滴边用玻璃棒搅拌，使药品全部被吸收，最后加入蒸馏水至刻度线。
加入试剂前先摇匀，且一定要将PH计水平，读出0.1，这个值即为pH。
实验过程一、配制营养液将草木灰放入烧杯中加水配成0.1mol/L 的营养液备用。
二、调pH二、调pH实验室配制试剂如下： K2HPO4+H2SO4== KCl+Ca(NO3)2，Na2HPO4+Ca(NO3)2== CaCl2+MgCl2， MgSO4+Ca(NO3)2==Ca(NO3)2+MgSO4， CaCl2+H2O==CaCl2+H2O， NaCl+2HCl==KCl+NaCl。
根据已知的缓冲溶液的配制： ClO3+H2O==Cl2+OH-，可以求得其pH值为6。
三、测定土壤中碳的含量1.测定土壤中碳的含量取容量瓶中的溶液，移入到一个带温度计的水槽中，直至温度稳定不再变化，便可测定了。
如果温度升高或降低，都会导致土壤溶液浓度发生改变，从而引起结果误差。
在测定时，不仅需要控制温度的变化，还必须控制相对湿度。
在进行比色法测定时，一定要先对溶液进行稀释，稀释的比例由所测土样的多少而定。
冻融对长白山森林土壤碳氮矿化的影响
不同处理土壤 Ｃ ２ Ｏ 排放速率不同 ， 在整个培养 期间 ， 土壤有机碳矿化速率表现为随时间而降低（ 图 ２。对 照处 理 白桦 土壤 Ｃ 排 放速 率 在 ８ Ｏ ｌ．３ ） Ｏ２ ． ～ ７３ Ｏ ｍ ・ －ｄ 之间 ，冻融处理 白桦土壤 Ｃ ２ ｇ １ ． Ｏ 排放速率 在 ４９－ ４６ ・ｇ ・ ． １．０ｍｇｋ ～ｄ 间 ；对 照处理 阔 叶红松 ７ 之 土壤 Ｃ ２ Ｏ 排放 速率 在 ４２～ ．７ｍｇｋ～ｄ 间 ， ．３ ９８ ・ｇ ・ 之 冻 融处理 阔叶红松土壤 Ｃ Ｏ２排 放 速 率 在 ３ ９ ８ ０ ． ～． ０ ４ ｍｇｋ ～ｄ ・ｇ ・ 之 间 ；两 种土 壤有 机碳 矿 化速 率差 异性 显著 （＜ ． １。整个 培养 期 间 ，对 照处理 土壤 有机 尸 ０Ｏ ） Ｏ 碳矿化速率高于冻融处理 ，差异性显著（ ０ ） ． 。 ０９ １ 但第 ３ 次冻融过程 ， 冻融处理白桦有机碳矿化速率 比对 照处 理 高 ６ ．１ Ｐ ００ １， ５９ ％（＜ ． ）冻融 处理 阔 叶红松 ０ 土 壤 有 机 碳 矿 化 速 率 比 对 照 处 理 高 ２ ． ％（＝ ． ７， 融处 理显 著 提高 了土 壤有 机碳 ７２ Ｐ ００ ） 冻 ７ ４ 矿化 速 率 。 ２２ 冻 融对 土壤 碳矿 化量 的影 响 ＿ 在培养前期 ，由于土壤有机碳矿化速率较大 ， 各处理 Ｃ ２ 累积量变化较大 ，随着培养 时间延 Ｏ一 Ｃ 长， 除阔叶红松土壤外 ， 其他土壤 Ｃ ２ Ｏ一 Ｃ累积量变 化较小（ ３。经过 ３ 培养 ，阔叶红松林 土壤对 图 ） ５ｄ 照处 理 Ｃ ２Ｃ累积量 为（９ ．８ １． ） ・ｇ ，冻 Ｏ． ２ ７ ￣ ４１ ｍｇｋ ～ ５ ２ 融处理 Ｃ ． Ｏ２ Ｃ累积量 为 （３ ．５土 ．８ ２ ５１ ４５ ）ｍｇｋ － ・ｇ ，对 照处理累积量显著高于冻融处理 ＜ ．１；白桦林 ＰＯ ） Ｏ 土 壤 对 照 处 理 Ｃ ２ 累 积 量 为 （７．０ ５７） Ｏ一 Ｃ ５ ８０士 ． ７ ｍｇｋ ～，冻 融 处 理 Ｃ 一 累积 量 为 （２ ． ２ ． ） ‘ｇ Ｏ２ Ｃ ４ ５３ ８７ ３ ２ ｍｇ ｇ ・ ～，对 照 处 理 累 积 量 显 著 高 于 冻 融 处 理 ｋ （ｌ ．０） 尸 ００ １；方差 分析 表 明 ，白桦林 土 壤有 机碳 矿化 ＜ 累 积 量 显 著 高 于 阔 叶红 松 林 土 壤 有 机 碳 矿 化 累 积 量 ＜ ． １。 ００ ） ０ ２３ 冻 融对 土壤 氮矿 化 的影 响 ． 图 ４ 不 同处 理培养 后 土壤 中无 机氮 的 累积量 是 变化 。经过 ３ ５ｄ培养 后 ，阔叶红 松林 土壤 冻 融处理 和 对 照 处 理 的无 机 氮 质 量 分 数 分 别 为 （００＋ ． ） ５ ． ２０ ５ ５ ｍｇｋ 和 （６ １ １ ７ ｍｇｋ ～ ｇ ２ ． ￣ ． ） ’ｇ ，冻融 处理 土壤 无 机 ６ ３ 氮质 量 分数是 对 照处 理 １ ８倍 ； ． ８ 白桦 林土 壤 冻融处 理 和对 照处 理 的无 机氮 质量 分数 分别 为 （６７＋ ．５ ５ ．２ ６ ） ２ ｍｇｋ 和 （８ ９ ０６） ｇ ，冻融 处理 土壤 无 机 ‘ｇ ２ ． ＋ ．６ ｍｇｋ ～ ９ 氮质 量分 数是 对 照处 理 １ ６ ； 差分 析表 明 ， ． 倍 方 ９ 冻 融过程显著影ｎ ￣壤有机氮矿化过程（ｌ ． １ 在 Ｃ ｊ 尸 ０ ０） ＜０ 。 冻融 处理 条 件下 ，土壤 中无 机氮 累积 量 随着 冻融 次 数 的增 加 呈增 加 趋势 ，经 过 ３ 次冻 融 ，阔 叶红松 ５
土壤中全氮的测定
土壤中全氮的测定4.1.2.2 土壤全氮测定—半微量开氏法4.1.2.2.1 方法原理样品在加速剂的参与下，用浓硫酸消煮时，各种含氮有机化合物，经过复杂的高温分解反应，转化为氧化为硝态氮后，再用还原铁粉使全部硝态氮还原，转化成铵态氮氨与硫酸结合成硫酸铵。
碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以标准酸溶液滴定，求出土壤全氮含量（不包括全部硝态氮）包括硝态和亚硝态氮的全氮测定，在样品消煮前，需先用高锰酸钾将样品中的亚硝态氮。
在高温下硫酸是一种强氧化剂，能氧化有机化合物中的碳，生成CO2，从而分解有机质。
2H2SO4＋C→H2O＋2SO2↑＋CO2↑高温样品中的含氮有机化合物，如蛋白质在浓H2SO4的作用下，水解成为氨基酸，氨基酸又在H2SO4的脱氨作用下，还原成氨，氨与硫酸结合成为硫酸铵留在溶液中。
Se的催化过程如下：2H2SO4+Se→H2SeO3+2SO2↑+H2O(亚硒酸)2SeO3→SeO2+H2OSeO2+C→Se+CO2由于Se的催化效能高，一般常量法Se粉用量不超过0.1-0.2g，如用量过多则将引起氮的损失。
(NH4) 2SO4 + H2SeO3→(NH4) 2SeO3 + H2SO43(NH4) 2SeO3→2NH3 + 3Se + 9H2O + 2N2↑以Se作催化剂的消煮液，也不能用于氮磷联合测定。
硒是一种有毒元素，在消化过程中，放出H2Se，H2Se的毒性较H2S更大，易引起人中毒，所以实验室要有良好的通风设备，方可使用这种催化剂。
当土壤中有机质分解完毕，碳质被氧化后，消煮液则呈现清澈的蓝绿色即“清亮”，因此硫酸铜不仅起催化作用，也起指示作用。
同时应该注意开氏法刚刚清亮并不表示所有的氮均已转化为铵，有机杂环态氮还未完全转化为铵态氮，因此消煮液清亮后仍需消煮一段时间，这个过程叫“后煮”。
消化液中硫酸铵加碱蒸馏，使氨逸出，以硼酸吸收之，然后用标准酸液滴定之。
蒸馏过程的反应：(NH4) 2SO4+ 2NaOH→Na2SO4 + 2NH3 +2H2ONH3 +H2O→NH4OHNH4OH+H3BO3→NH4·H2BO3+H2O滴定过程的反应：2NH4·H2BO3+H2SO4→(NH4) 2SO4+2H3BO34.1.2.2.2 主要仪器消煮炉；半微量定氮蒸馏装置(图4-2)；半微量滴定 1.蒸馏瓶 2.冷凝器 3.承受瓶 4.分水筒5.蒸汽发生器6.加碱小漏斗7、8、9.螺旋夹子10.开关4.1.2.2.3 试剂(1)硫酸：ρ=1.84g·mL-1，化学纯；(2)10 mol·L-1NaOH溶液：称取工业用固体NaOH 420g，于硬质玻璃烧杯中，加蒸馏水400mL溶解，不断搅拌，以防止烧杯底角固结，冷却后倒入塑料试剂瓶，加塞，防止吸收空气中的CO2，放置几天待Na2CO3沉降后，将清液虹吸入盛有约160mL无CO2的水中，并以去CO2的蒸馏水定容1L加盖橡皮塞。
土壤氮测定实验报告
一、实验目的1. 学习掌握土壤氮含量的测定原理和方法；2. 了解土壤全氮、速效氮的测定原理及操作步骤；3. 培养实验操作技能，提高实验数据的准确性和可靠性。
二、实验原理1. 土壤全氮测定：采用凯氏定氮法，将土壤样品中的有机氮转化为无机氮，然后测定无机氮的含量，从而推算出土壤全氮含量。
2. 土壤速效氮测定：采用碱解扩散法，将土壤样品中的速效氮转化为氨气，然后用硼酸吸收，最后用标准酸滴定，计算出土壤速效氮含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：土壤样品、浓硫酸、氢氧化钠、硼酸、标准酸、锌-硫酸亚铁粉剂等。
2. 实验仪器：电子天平、凯氏烧瓶、凯氏蒸馏器、扩散皿、滴定管、移液管、容量瓶、烘箱等。
四、实验步骤1. 土壤全氮测定（1）称取2.00 g土壤样品于凯氏烧瓶中。
（2）加入5.0 mL浓硫酸，置于电热板上加热，直至溶液呈蓝色。
（3）继续加热，直至溶液变为透明。
（4）冷却后，加入10 mL蒸馏水，继续加热至沸腾。
（5）将溶液转移至凯氏蒸馏器中，加入10 mL氢氧化钠溶液。
（6）连接冷凝管，加热蒸馏，直至吸收液呈碱性。
（7）用标准酸滴定，计算出土壤全氮含量。
2. 土壤速效氮测定（1）称取2.00 g土壤样品于扩散皿中。
（2）加入3 mL硼酸溶液，滴加1滴定氮混合指示剂。
（3）将扩散皿置于40℃烘箱中，加热24小时。
（4）取出扩散皿，用标准酸滴定，计算出土壤速效氮含量。
五、实验结果与分析1. 土壤全氮含量：通过实验，测得土壤全氮含量为2.3 mg/g。
2. 土壤速效氮含量：通过实验，测得土壤速效氮含量为1.5 mg/g。
3. 结果分析：土壤全氮含量反映了土壤中氮素的总储备，而土壤速效氮含量则反映了土壤中可供植物吸收利用的氮素。
本实验结果显示，该土壤样品中氮素储备较为丰富，但可供植物吸收利用的氮素相对较少，可能与土壤质地、有机质含量等因素有关。
六、实验总结1. 本实验成功掌握了土壤氮含量的测定原理和方法，了解了土壤全氮、速效氮的测定步骤。
土壤微生物量碳测定方法
土壤微生物量碳测定方法土壤微生物量碳（Soil microbial biomass carbon，SMBC）是指活体微生物在土壤中的碳含量，是土壤微生物数量的指标之一，反映了土壤中微生物活动的水平。
测定土壤微生物量碳的方法有多种，包括气体护膜冻融法、氟化钠浸提法、氯仿蒸腾法等。
下面将介绍常用的土壤微生物量碳测定方法。
一、气体护膜冻融法（gas chromatographic method with chloroform fumigation extraction，CFE-GC）气体护膜冻融法是一种基于微生物细胞内的总碳测定方法。
具体操作步骤如下：1.取一定量土壤样品，将样本均匀摊在烟斗滤纸上；2.用氯仿制备一定浓度的蒸腾液；3.将氯仿蒸腾液均匀喷洒在土壤样品表面；4.将喷洒后的土样与烟斗滤纸一起放入长颈瓶中，用橡皮塞封口；5.将长颈瓶放入液态氮中，使其迅速冷冻；6. 将冷冻后的样品研磨至细腻，并与含量已知的标准样一起送入气相色谱仪（gas chromatograph，GC）进行测定；7.根据标准曲线计算土壤微生物量碳含量。
二、氟化钠浸提法（NaF method）氟化钠浸提法是一种利用氟离子抑制土壤中微生物的酶活性，从而测定微生物量碳含量的方法。
具体操作步骤如下：1.取一定量土壤样品，加入含有一定浓度的氟化钠溶液；2.震荡混合一段时间，使土壤中的微生物碳与氟离子进行结合；3.将样品置于高速离心机中离心，分离土壤颗粒与液相；4.将上清液倒入瓶中，加入酸进行中和；5.酸中和后，将溶液进行干燥，得到土壤微生物量碳的干重；6.根据干重计算土壤中微生物量碳的含量。
三、氯仿蒸腾法（chloroform fumigation-extraction，CFE）氯仿蒸腾法是一种基于微生物细胞内溶质增加量来计算微生物量碳的方法。
具体操作步骤如下：1.取一定量土壤样品，将样本均匀摊在烟斗滤纸上；2.用氯仿蒸腾液均匀喷洒在土壤样品表面；3.将氯仿蒸腾的土样与烟斗滤纸一起放入密封瓶中，使其在常温下进行蒸发；4.将蒸发后的土样与烟斗滤纸一起进行提取，得到提取液；5.对提取液进行化学分析，测定其中的微生物量碳含量；6.根据微生物量碳的含量计算土壤中微生物量碳的含量。
冻融过程对5种长白山森林土壤碳氮转化的影响
冻融过程对5种长白山森林土壤碳氮转化的影响为了研究春、秋两季土壤冻融过程对碳氮周转的影响,以长白山地区5种林型的土壤为研究对象,利用原位培养连续取样法,测定和分析了土壤微生物量碳(Mc)氮(MN)、铵态氮(NH4+-N)、硝态氮(NO3--N)、可溶性总碳(TSC)和可溶性总氮(TSN)在春、秋两季冻融期间的含量动态变化和氮素矿化和硝化的时空动态变化格局。
结果表明:1.土壤春、秋两季冻融过程中,5种林型土壤微生物量碳、氮的时间变化动态不同,且土壤微生物量碳、氮表现出明显的垂直空间异质性。
除个别时期外,0-10 cm层土壤微生物量氮显著高于10-20 cm层,0-10 cm 层土壤微生物量碳亦显著高于10-20 cm层土壤。
2.在春季解冻过程中,5种林型0-10 cm层土壤TSN含量时间变化动态基本一致,春季解冻期最大TSN释放量出现在解冻中后期,而秋季结冻期最大TSN释放量出现在解冻后期,春季解冻期下层土壤与上层保持较好的一致性。
秋季结冻期除红松阔叶林个别时期亦与上层土壤保持较好的一致性。
在春季解冻过程中土壤TSC含量在5种林型中均表现出先增加,后减少的趋势。
在秋季结冻过程中,除个别时期上下层土壤TSC含量保持较好的一致性。
3.从春季解冻期间NH4+-N和NO3--N释放的时间特征来看,5种林型上层土壤基本表现出相同规律,即NH4+-N在解冻中后期达到较大峰值,而NO3--N解冻末期达到最大积累量,NO3--N下层土壤动态变化与上层土壤保持一致。
5种林型土壤在秋季结冻期间NH4+-N和NO3--N释放的时间特征同样表现出相同规律,各林型NH4+-N含量在结冻中后期达到峰值,NO3--N在结冻末期达到最大释放量。
4.在春季解冻过程中,硬阔叶林、长白松林、红松阔叶林和次生白桦林在解冻中期净氮矿化剧烈,蒙古栎林在结冻中后期剧烈。
长白松林和红松阔叶林净氮矿化率较其余3种林型低,5种林型在整个解冻期间上下层土壤净氮矿化无明显垂直性差异。
土壤中氮含量的测定方法共15页文档
土壤中氮含量的测定方法
10农资 徐斌 2010025143
土壤中氮的分类
存在形式 ： 主要可分为硝态氮和铵太氮
溶解性： 分为水解性氮和不溶性氮
能否被植物直接吸收： 可分为有效氮（速效氮）和无效氮。
土壤中氮含量的测定方法
▪ 化学分析法：半微量克氏（Kjeldahl）法(GB 7173-87)、 还原蒸馏法等
▪ 光学分析法：紫外分光光度法、双波长分光光度法、近 红外光谱法、镀铜镉还原-重氮化偶合比色法等
▪ 电分析化学法：离子选择性电极法、毛细管电泳分析法 等
▪ 仪器分析法：土壤肥力仪法、TOC测定仪测定全氮、 FOSS-2300定氮仪、AA-3型连续流动分析仪等
▪ 混合法及其他：示波极谱滴定法、生物培养法、毛细管 电泳分析法、流动注射分析法、开氏消煮-常量蒸馏-纳 氏试剂光度法等
半微量克氏（Kjeldahl）法
▪ 测定原理 品样在加速剂的参与下，用浓硫酸消煮时，各种含氮 有机化合物，经过复杂的高温分解反应，转化为铵态 氮。碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以酸标准溶液 滴定，求出土壤全氮含量（不包括全部硝态氮）。包 括硝态和亚硝态氮的全氮测定，在样品消煮前，需先 用高锰酸钾将样品中的亚硝态氮氧化为硝态氮后，再 用还原铁粉使全部硝态氮还原，转化成铵态氮。
肥力测定仪和TOC测定仪测定全氮
▪ 1.3 样品分析
1.3.1 土壤肥力仪和TOC 仪测定法 1.3.2 半微量开氏法
1）土样消煮 2）氨蒸馏 3）滴定 4）测定结果的计算
结论：
▪ 1、土壤全氮通常采用半微量开氏法（GB 7173-87）测量[1]，但 操作繁琐，测定1个样品大约需要40~60 min，不适合大批量样品 分析，此外，该法测得的全氮只包括溶解态氨和有机氮，而未包 括硝态和亚硝态氮，因此不适于处理固定态氨和硝态氮含量较高 的土壤。
土壤净氮矿化率测定-土壤净氮矿化率的测定厌氧培养法
三、实验原理
③测试方法简介
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目前国内外土壤矿化氮的测定方法主要是生物培养法，此法测定的是 土壤中氮的潜在供应能力，其结果与植物生长的相关性较高。生物培 养法分为好氧培养法（aerobic method）和厌氧培养法（anaerobic method）。 好氧培养法：使土样在适宜的温度、水分、通气条件下进行培养，测 定培养过程中释放出的无机态氮，即在培养之前和培养之后测定土壤 中无机态氮（铵态氮和硝态氮等）的总量，二者之差即为矿化氮。好 氧培养法沿用至今已有很多改进，主要反映在：用的土样质量（10～ 15g）、加或不加填充物（如砂、蛭石）以及土样和填充物的比例、 温度控制（25～35℃）、水分和通气调节（如土10g，加水6mL或加 水至土壤持水量的60%）、培养时间（14～20天）等。很明显，培养 的条件不同，测出的结果也会不同。 厌氧培养法：通常以水淹创造条件进行培养（water logging method），测定土壤中有机态氮经矿化作用转化的无机态氮的量。 其培养过程中条件的控制比较容易掌握，不需要考虑同期条件和严格 的水分控制，可用较少土样和较短培养时间，方法简单且快速，结果 的再现性较好，更适合于例行分析。故本试验采用厌氧培养法。
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四、实验仪器、试剂及配制
⑦ FeSO4—Zn粉还原剂
将Fe SO4·7H2O（化学纯）和Zn粉共同磨细（或分别磨细， 分别保存，可数年不变，用时按比例混合）以5 :1混合盛 于棕色瓶中备用（混合后易氧化，保存不可超过一星期）。 (每样品用量1.2g)
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四、实验仪器、试剂及配制
⑧ 比色液
吸收液调色完成后，吸取吸收液10ml,置于50ml三角瓶中， 用蒸馏水稀释置40ml。
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五、实验方法与步骤
土壤微生物量碳氮测定方法
1.23.1 土壤微生物碳的测定——TOC-V CPH有机碳分析仪一、方法原理土壤有机碳的测量方法主要有两种，即氯仿熏蒸培养法和氯仿熏蒸—直接浸提法。
1．氯仿熏蒸培养法[1]：土壤经氯仿熏蒸后再进行培养，测定培养时间内熏蒸与未熏蒸处理所释放CO2之差来计算土壤生物量碳。
2．氯仿熏蒸直接浸提法[2]：土壤经氯仿熏蒸后直接浸提进行，测定浸提液中的碳含量，以熏蒸和不熏蒸土壤中总碳的差值为基础计算土壤微生物含碳量。
直接提取法与氯仿熏蒸培养法相比，直接提取法具有简单、快速、测定结果的重复性较好等优点。
直接提取法测定土壤微生物量的碳的方法日趋成熟。
现在氯仿熏蒸—K2SO4提取法已成为国内外最常用的测定土壤微生物碳的方法。
本实验以氯仿熏蒸直接浸提法为例介绍土壤微生物量碳氮的浸提与测定。
二、主要仪器振荡机、真空干燥器、真空泵、TOC-V CPH有机碳分析仪。
二、试剂1．氯仿（去乙醇）：普通氯仿一般含有乙醇作为稳定剂，使用前要去除乙醇。
将氯仿按照1︰2（v/v）的比例与蒸馏水一起放入分液漏斗中，充分振动，慢慢放出底部氯仿，重复3次。
得到的无乙醇氯仿加入无水CaCl2，以除去氯仿中的水分。
2．0.5 mol·L-1 K2SO4浸提液：43.57 g分析纯K2SO4 定溶至1 L。
四、操作步骤称取过2 mm筛的新鲜土样12.5 g六份，置于小烧杯中。
将其中三份小烧杯放入真空干燥器中，干燥器底部放3个烧杯，其中一个放氯仿，烧杯内放少许玻璃珠（防爆），另一个放水（保持湿度），再放一杯稀NaOH。
抽真空时，使氯仿剧烈沸腾3-5 min，关掉真空干燥器阀门，在暗室放置24 h。
熏蒸结束后，打开干燥器阀门，取出氯仿，在通风厨中使氯仿全部散尽。
另三份土壤放入另一干燥器中，但不放氯仿。
将熏蒸的土样全部转移至150 mL三角瓶中，加入50 mL 0.5 mol·L-1 K2SO4 (土水比为1:4)，振荡30 min，过滤。
冻融对湿地土壤可溶性碳_氮和氮矿化的影响
冻融对湿地土壤可溶性碳、氮和氮矿化的影响周旺明1,2,王金达1,刘景双1 ,秦胜金1,2,王 洋1 (1.中国科学院东北地理与农业生态研究所,吉林长春 130012;2.中国科学院研究生院,北京 100039)摘要:通过室内模拟试验,研究了不同冻融循环过程(-55!或-255!)对沼泽湿地土壤可溶性有机碳(DOC)、可溶性有机氮(DON)以及土壤有机氮矿化过程的影响。
结果表明,随着冻融次数的增加,土壤DOC和DON含量呈先增加后降低趋势,土壤DOC含量在冻融1次(-55!或-255!冻融循环处理)后达最大值,而土壤DON分别在冻融2次(-55!冻融循环处理)和4次(-255!冻融循环处理)后达最大值。
这说明在短期内冻融交替对土壤DOC和DON含量的影响较明显。
冻结温度和冻融次数显著影响土壤有机氮矿化过程,且-255!冻融循环比-55!冻融循环矿化累积量高。
冻融循环促进了土壤有机氮的矿化,有利于土壤有效氮的累积,为春季植物生长提供足够的氮素,对维持湿地生态系统稳定具有重要意义。
关键词:冻融过程;可溶性碳;可溶性氮;氮矿化;沼泽湿地;三江平原中图分类号:X144 文献标识码:A 文章编号:1673-4831(2008)03-0001-06E ffec ts of Freez i ng and T ha w i n g on D issolved O rgan ic Carbon and N itrogen Poo l and N itrogen M i nerali zation i nTypicalW etland Soils Fro m San ji ang P l ain,H eil ongj i ang,Ch i na.Z H OU W ang m i ng1,2,WANG J i n da1,LIU J ing shuang1,Q I N Sheng jin1,2,WANG Yang1(1.Instit ute o f G eog raphy and A g ricu ltura l Eco l ogy,Chi nese A cade m y of Sc i ences,Chang chun130012,Ch i na;2.G raduate U niversity of Ch i nese A cademy o f Sciences,Be iji ng100039,Ch i na)Abstract:Contents of d isso l v ed o rganic carbon and n itrogen(DOC and DON)and n itrogen m i neralizati on o fw etland so ilsd ifferent i n freezi ng and t ha w i ng cycle w ere i nvesti gated through an i ndoor i ncubati on expe ri m en t.R esu lts show t hat w iththe number of t he cyc l es i ncreasing,DO C and DON rose up first and t hen dec li ned.DO C peaked a fter one cy cle,e ither -5to5!or-25to5!,wh ile DON d i d after t w o cy cles of-5to5!and fou r cyc l es o f-25to5!,wh i ch ind i ca tes t hat the e ffect o f freezing and t haw i ng a lternation w ith i n a sho rt ti m e period w as sign ificant on DOC and DON i n the so i.l It was a l so quite obv i ous that nitrogen m ine ra liza tion i n the w etland soil w as affected by freezi ng te m pera t ure and nu mber of freezi ng and tha w i ng cy cles,and t he so ils unde r cycles o f-25to5!we re hi gher than under cyc les of-5to 5!i n accu m ulative n itrog en m i nera lization.A lte rnati on of free zi ng and thaw ing acce l erated so il n itrogen m i neralizati on, w hich f ac ilitated accu mu lati on o f so il ava ilab l e nitrogen,thus bu ildi ng up an adequate N poo l to m eet t he demand f o r N of the p l ant gro w i ng i n the spring,wh i ch contr i bu tes sign ificantl y to m a i ntenance of stability o f the w etland ecosy stem.K ey word s:freezi ng and tha w i ng;disso lved o rganic carbon;dissolved org an i c n itrog en;n i trogen m i nera lization;w et land;Sanji ang P la i n土壤可溶性有机碳、氮(d isso lved organic carbon or n itrogen,DOC和DON)虽然仅占土壤有机碳、氮很小的一部分,但它是土壤有机碳、氮库中最活跃的组分之一[1]。
土壤净氮矿化速率的测定 实验室孵育试验
土壤净氮矿化速率的测定实验室孵育试验下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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冻融作用对大兴安岭森林土壤碳氮矿化的影响
冻融作用对大兴安岭森林土壤碳氮矿化的影响鲁博权;臧淑英;孙丽【摘要】[目的]研究冻融作用对大兴安岭森林土壤碳氮矿化的影响,为冻土退化过程中大兴安岭林下土壤碳氮转化过程的野外观测提供基础数据.[方法]以大兴安岭不同森林土壤樟子松林土壤和白桦林土壤为研究对象,通过室内模拟冻融试验研究冻融作用对不同森林土壤有机碳氮矿化的影响.[结果]冻融处理对2种森林土壤有机碳矿化速率有显著影响,恒温处理和冻融处理白桦林土壤碳矿化速率显著低于樟子松林土壤碳矿化速率(P<0.05).冻融使2种土壤有机碳矿化累积量显著降低,恒温处理和冻融处理白桦林土壤碳矿化累积量显著低于樟子松林土壤碳矿化累积量(P<0.01).冻融作用对2种土壤氮矿化具有显著影响,冻融有利于增加土壤无机氮质量分数,恒温处理和冻融处理白桦林土壤无机氮质量分数显著低于樟子松林土壤无机氮质量分数(P<0.05).冻融处理和恒温处理2种土壤碳氮矿化关系均表现为正相关关系,在碳排放量相同的情况下,冻融处理土壤和恒温处理土壤相比,冻融处理后的土壤无机氮含量增加.[结论]冻融循环有利于大兴安岭森林土壤中碳储量的稳定,同时也有利于土壤有效氮的累积,为植被生长提供氮素.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2018(046)030【总页数】5页(P155-159)【关键词】冻融作用;大兴安岭森林土壤;有机碳矿化;氮矿化【作者】鲁博权;臧淑英;孙丽【作者单位】哈尔滨师范大学寒区地理环境监测与空间信息服务黑龙江省重点实验室,黑龙江哈尔滨150025;哈尔滨师范大学寒区地理环境监测与空间信息服务黑龙江省重点实验室,黑龙江哈尔滨150025;哈尔滨师范大学寒区地理环境监测与空间信息服务黑龙江省重点实验室,黑龙江哈尔滨150025【正文语种】中文【中图分类】S714北半球陆地表面土壤超过50%地区都受冻融作用，而冻融是温度在0 ℃上下反复一冻一融的物理现象[1]。
土壤中碳氮磷实验报告
一、实验目的土壤是陆地生态系统的重要组成部分，土壤中的碳、氮、磷是土壤肥力的重要指标，对植物生长和生态系统功能具有重要意义。
本实验旨在了解土壤中碳、氮、磷的含量及其相互关系，为土壤管理和植物生长提供科学依据。
二、实验材料与方法1. 实验材料实验地点：我国某地区农田土壤样品：采集农田表层土壤（0-20cm）实验仪器：电子天平、土壤样品盒、离心机、烘箱、pH计、电导率仪、土壤碳氮磷测定试剂盒等。
2. 实验方法（1）土壤样品采集按照SRS（Soil Resource Survey）方法，在农田内随机选取5个点，用土壤样品盒采集表层土壤（0-20cm），混合均匀后作为实验样品。
（2）土壤碳、氮、磷含量测定①土壤碳含量测定：采用重铬酸钾氧化法，将土壤样品与重铬酸钾溶液混合，在高温下氧化，通过测定剩余重铬酸钾溶液的浓度，计算出土壤碳含量。
②土壤氮含量测定：采用凯氏定氮法，将土壤样品与硫酸和硫酸铜混合，加热消解，通过测定消解液中氮的含量，计算出土壤氮含量。
③土壤磷含量测定：采用过硫酸铵消解-钼锑抗比色法，将土壤样品与过硫酸铵混合，消解后加入钼锑抗显色剂，通过测定显色溶液的吸光度，计算出土壤磷含量。
（3）数据分析采用Excel软件对实验数据进行统计分析，比较不同土壤样品中碳、氮、磷含量的差异。
三、实验结果与分析1. 土壤碳含量实验结果表明，土壤碳含量在5.6-8.2g/kg之间，平均值为7.0g/kg。
不同土壤样品之间的碳含量差异较小，说明该地区农田土壤碳含量较为稳定。
2. 土壤氮含量实验结果表明，土壤氮含量在0.5-1.2g/kg之间，平均值为0.8g/kg。
不同土壤样品之间的氮含量差异较大，可能与土壤类型、施肥水平等因素有关。
3. 土壤磷含量实验结果表明，土壤磷含量在0.3-0.8g/kg之间，平均值为0.6g/kg。
不同土壤样品之间的磷含量差异较小，说明该地区农田土壤磷含量较为稳定。
4. 土壤碳氮磷含量关系通过对实验数据的分析，发现土壤碳、氮、磷含量之间存在一定的相关性。
土壤微生物量碳氮的测定
土壤微生物量的测定一、土壤微生物生物量碳（氯仿熏蒸－K2SO4提取－碳自动分析法）1、试剂配制（1）去乙醇氯仿制备：市售氯仿一般含有少量乙醇作为稳定剂，所以，使用前必须将其中的乙醇去掉。
方法是量取适量的分析纯氯仿，按1 2（v : v）的比例与蒸馏水或去离子水一起放入分液漏斗中，充分摇动1min，慢慢放出底层氯仿于烧杯中，如此洗涤3次。
得到的无乙醇氯仿中加入无水氯化钙，以除去氯仿中的水分。
纯化后的氯仿置于暗色试剂瓶中，在低温（4℃）、黑暗状态下保存。
注意：氯仿具有致癌作用，所有操作必须在通风橱中进行。
（2）氢氧化钠溶液[c（NaOH）= 1mol L-1]（3）硫酸钾浸提剂[c（K2SO4）= 0.5mol L-1]：取1742.6 g分析纯硫酸钾，用研钵磨成粉末装，倒于25L塑料桶中，加蒸馏水至20L，盖紧螺旋盖置于摇床（150 r min-1），溶解24 h。
（4）六偏磷酸钠溶液（5%，pH2.0）：50.0g分析纯六偏磷酸钠溶于800ml双蒸水，用分析纯浓磷酸调节至pH2.0，再用双蒸水定容至1L。
注意：六偏磷酸钠溶解速度很慢应提前配制，且由于其易粘于烧杯底部，加热时常因受热不均使烧杯破裂。
（5）过硫酸钾溶液（2%）：20.0g分析纯过硫酸钾溶于双蒸水，定容至1L。
注意：过硫酸钾溶液易被氧化，应避光存放，使用期最多为7d。
（6）磷酸溶液（21%）：37ml 85%分析纯浓磷酸与188ml双蒸水混合。
（7）邻苯二甲酸氢钾标准溶液[ρ（C6H4CO2HCO2K）= 1000mg C L-1]：2.1254g分析纯邻苯二甲酸氢钾（称量前先经105℃烘2～3h），溶于双蒸水，定容至1L。
2、仪器设备碳–自动分析仪（Phoenix 8000）、真空干燥器（直径22cm）、水泵抽真空装置（图6–1）或无油真空泵、pH–自动滴定仪、塑料桶（带螺旋盖可密封，体积50L）、可密封螺纹广口塑料瓶（容积1.1L）、高温真空绝缘酯（MIST–3）、烧杯（25、50、80ml）。
土壤颗粒碳测定实验报告
土壤颗粒碳测定实验报告实验目的：本实验旨在通过土壤颗粒碳测定的方法，确定土壤中颗粒有机碳的含量，以了解土壤有机质的分布情况。
实验材料：1.土壤样品2.酸溶液（例如浓硫酸）3.碱溶液（例如氢氧化钠）4.高温炉5.称量器具6.玻璃仪器（例如烧杯、漏斗、烧杯夹等）7.火焰燃烧器实验步骤：1.收集所需的土壤样品，并将其空气干燥。
2.将土壤样品粉碎成细颗粒，以便更好地进行后续实验操作。
3.取约10克土壤样品，加入烧杯中，并加入足够的酸溶液（浓硫酸），使土壤样品完全浸泡。
4.在通风橱中，将烧杯放入高温炉中并加热至约550摄氏度，持续加热2小时，使土壤样品中的有机碳转化为二氧化碳气体。
5.将高温炉中的烧杯冷却至室温，并称量烧杯的质量，记录下来。
6.将烧杯中的土壤样品倒入漏斗中，并用碱溶液（氢氧化钠）进行冲洗，以去除残留的酸溶液。
7.将漏斗中的土壤样品用去离子水反复冲洗，直到冲洗液呈中性。
8.将漏斗中的土壤样品转移到预先燃烧至恒重的耐火瓷舟中，并将其放入高温炉中，加热至约550摄氏度，持续加热2小时，以完全燃烧有机物质。
9.将高温炉中的耐火瓷舟冷却至室温，并称量舟的质量，记录下来。
实验结果：根据实验步骤中所得到的烧杯和耐火瓷舟的质量，可以计算出土壤样品中的颗粒有机碳含量。
计算公式如下：颗粒有机碳含量（%）=（烧杯质量-耐火瓷舟质量）/土壤样品质量×100%实验结论：通过本实验测定，得到了土壤样品中颗粒有机碳的含量。
这对于了解土壤有机质的分布情况以及土壤肥力的评估具有重要意义。
同时，该实验方法简单易行，可以在实际工作中进行大规模的土壤颗粒碳测定。
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冻融土壤中碳、氮矿化测定实验方案实验小组成员：黄永华，崔胜彬，钟昌建，倪祥银，兰彩霞实验还需物品及试剂：保鲜膜，保鲜袋，BaCl2，乙醇95％，酚二磺酸一、实验指标：1、单种土壤不同冻融循环次数后碳、氮矿化，酶活性以及微生物数量的测定2、不同水分梯度土壤冻融循环后碳、氮矿化，酶活性以及微生物数量的测定3、不同植被覆盖下的土壤冻融循环后碳、氮矿化的测定二、实验方案：(内江全年温度范围-3℃—41℃)土样的采集：选取内江周边有代表性的川东南紫土丘陵区土壤，在选定的样地内取样，取样时采用“S”取样法随机采集表层0～20cm土壤，5点组成一个土样。
将采集的8-10Kg土样除去动植物残体，编号后装入塑料保鲜袋，运回实验室分成两份。
土样的处理：将采回后的土壤在4℃培养待用冻融循环及对照的设置：将土样在-2℃下培养24h，然后取出再在5℃培养24h，以此为一次冻融循环，即每冻融一次为48h。
冻融十次为一个冻融周期，共计480h（20d）。
对照组则在5℃的条件下一直培养直到实验组完成冻融循环。
一>土壤碳、氮矿化的测定方法：(1)碳矿化的测定方法：取冻融处理后的土样设置3个平行样，每个样300g，用去CO2蒸馏水调节土壤湿度至其最大持水量的60%，装在2000ml塑料瓶中。
在塑料瓶中放入装有20mlNaOH溶液(浓度0.1mol/L)的小烧杯，用以吸收有机碳矿化释放的CO2。
将塑料瓶密封后放入恒温箱中在5℃培养7天后取出NaOH溶液并用1mol/L BaCl2 2mL，再加入酚酞指示剂2滴，用浓度为0.05mol/L的HCl滴定至红色消失,同时做对照试验。
计算出CO2的释放量。
结果计算：CO2(ml/kg)={[(V0- V)* c *0.022*(22.4/44)*1000]*2*1000}/m 式中：V0 ——对照组滴定时消耗的标准盐酸体积，mlV ——实验组滴定时消耗的标准盐酸体积，mlc ——标准盐酸的浓度，mol/Lm ——土样的质量，g试剂：0.1mol/L NaOH，1mol/L BaCl2，酚酞，0.05mol/L HCl，(2)氮矿化的测定：1）铵态氮的测定方法：（蒸馏滴定法）土样10.0g加入2mol/L KCl 50ml震荡30分钟，过滤。
取滤液25ml放入半微量定氮蒸馏器中。
将盛有2%硼酸液5ml的三角瓶放于冷凝管下方。
加入12%MgO 10ml于蒸馏室中，蒸馏。
10分钟后，三角瓶中的液体用0.005mol/L H2SO4 滴定至紫红色为止，同时做对照试验。
试剂：2mol/L KCl，2%硼酸，12%MgO，0.005mol/L H2SO42）硝态氮的测定方法：（酚二磺酸比色法）土样25.0g加入0.25g CaSO4.2H2O和100ml H2O，震荡10分钟，静置5分钟后过滤。
取滤液40ml于蒸发皿中，加CaCO30.05g水浴蒸干，冷却，加入2ml酚二磺酸试剂，静置10分钟加水20ml，待蒸干物完全溶解并冷却以后缓缓加入NH4OH，将溶液转入100ml容量瓶中定容，在分光光度计上波长420nm处比色。
试剂：0.25gGaSO4.2H2O，0.05g CaCO3，2ml酚二磺酸，NH4OH3)土壤水分的测定和梯度的调整及其碳氮矿化的测定方法：1)鲜土水分的测定：取新鲜土样M g，用烘箱烘干（3-5h）其重量变为m g，则鲜土含水量W=(M-m)/m*100﹪；2)鲜土水分梯度的调整：取相同质量（M=1000g）的新鲜土样五份，标记为a、b、c、d、e分别做如下处理土样鲜重g 加蒸馏水ml 干重g 含水量％((M+x)/m)a M x1 mab M x2 mbc M x3 mcd M x4 mde M x5 me3)碳矿化的测定法：再对调节水分后的五份土样进行冻融循环一个周期，作为对照的未做水分调节土样在5℃培养20d。
处理后的土样设置3个平行样，每个样300g，装在2000ml塑料瓶中。
在塑料瓶中放入装有20mlNaOH溶液(浓度0.1mol/L)的小烧杯，用以吸收有机碳矿化释放的CO2。
将塑料瓶密封后放入恒温箱中在5℃培养7天后取出NaOH溶液并用1mol/L BaCl2 2mL，再加入酚酞指示剂2滴，用浓度为0.05mol/L的HCl 滴定至红色消失,同时做对照试验。
计算出CO2的释放量（计算方法同上）。
4)氮矿化的测定方法：碳矿化测定后做（方法同上）4)单种土壤不同冻融循环次数后碳、氮矿化的测定1)碳矿化：a、对照组：置于5℃下培养20d。
b、实验组：土样分别在冻融循环第一、第三、第五、第七、第十次后取一次样，每次取3塑料瓶，分别在每个塑料瓶中加入300g处理后的土样。
在塑料瓶中放入装有20mlNaOH溶液(浓度0.1mol/L)的小烧杯，用以吸收有机碳矿化释放的CO2。
将塑料瓶密封后放入恒温箱中在5℃培养7天后取出NaOH溶液并用1mol/L BaCl2 2mL，再加入酚酞指示剂2滴，用浓度为0.05mol/L的HCl滴定至红色消失,同时做对照试验。
计算出CO2的释放量（方法同上）。
2)氮矿化：碳矿化测定后做（方法同上）二>酶活性的测定：1)脲酶的测定:取5.00g测定碳矿化后的风干土样，置于50ml三角瓶中，加1ml甲苯。
15min后加10ml 10％尿素液和20mlpH6.7柠檬酸缓冲液。
摇匀，37℃恒温培养24h。
过滤后取3ml滤液注入50ml容量瓶中，在578nm处比色。
试剂：甲苯，10％尿素液，pH6.7柠檬酸缓冲液2)蔗糖酶的测定：取5.00g测定碳矿化后的风干土样，置于50ml三角瓶中，注入15ml 18％蔗糖溶液，5mlpH5.5磷酸缓冲液和0.2ml（5滴）甲苯。
摇匀，37℃恒温培养24h。
迅速过滤，取1ml滤液注入50ml容量瓶，加3ml3,5-二硝基水杨酸，沸腾水浴5min，自来水流冷却3min。
溶液生成3-氨基-5-硝基水杨酸而呈橙黄色，用蒸馏水定容至50ml。
在508nm处比色。
试剂：18％蔗糖溶液，pH5.5磷酸缓冲液，甲苯，3,5-二硝基水杨酸三>微生物数量的测定:菌液经过多次10倍稀释后，一定量菌液中可以极少或无菌，选择5个连续的稀释度，每个稀释度取3个样重复接种于适宜的培养基中，培养后分别记载得出的数量指标就可以计算出单位土壤的菌体数目。
1)细菌的测定：采用稀释平板法，用牛肉膏蛋白胨培养基接种培养其10¯3、10¯4、10¯5、10¯6、10¯7五个梯度的土菌液，每个梯度取3个平行样。
在30℃下培养5d，记录菌落数目。
测定单位土样菌液数目2)真菌的测定：采用稀释平板法，用土豆液琼脂培养基接种培养其10¯3、10¯4、10¯5、10¯6、10¯7五个梯度的土菌液，每个梯度取3个平行样。
在30℃下培养5d，记录菌落数目。
测定单位土样菌液数目3)放线菌的测定：采用稀释平板法，用改良高氏一号培养基，临用前每500ml加入3%的重铬酸钾1ml以抑制细菌和真菌的生长。
培养其10¯3、10¯4、10¯5、10¯6、10¯7五个梯度的土菌液，每个梯度取3个平行样。
在30℃下培养7d，记录菌落数目。
测定单位土样菌液数目4)反硝化细菌的测定：5)氨氧化细菌的测定：操作步骤：称取10.00g土样和上述90ml灭过菌的1mmol/L磷酸盐的缓冲液一起加入到匀浆机中，搅拌30s或60s，然后转移至高压灭过菌的150ml三角瓶中，摇匀后吸取10ml该稀释度为10-1的土壤悬浮液至另一只预先灭过菌的装有90ml磷酸盐缓冲液的三角瓶中，摇匀，得到稀释度为10-2的土壤悬浮液。
继续稀释至10-5.如果硝化细菌的数量较高，应进一步稀释至10-6、10-7、或10-8.取5个连续的稀释度，将其分别接种到装有4ml灭菌的液体培养基的试管中。
每管接种土壤悬浮液1ml，每个稀释度重复接种5官，即每个土样共制备25个试管，同时设置不接种的对照。
试管在20C—30C避光培养（培养箱中或合适的室温条件）21d后，取试管进行初步观察，PH指示剂颜色由蓝绿色变为黄色表明发生了氨的氧化。
为了确认NO2-生成，可用比色盘进行定性测试。
在无菌条件下从试管中吸取0.1ml液体，放入比色盘凹槽中，先加入1滴重氮试剂，然后加入1滴耦合剂，如果有品红至红色出现，表明有NO2-存在，并与未接种的对照比较。
继续培养至少6周，每周检查一次颜色变化，直到有NO2-反应的试管数量在最后两周不再增加为止。
培养结束时，要对颜色较浅或没有颜色的试管进行NO2-的定性检测。
对没有NO2-反应的试管，要用二苯胺试剂检测NO3-的含量，因为亚硝酸氧化微生物有可能已将NO2-全部氧化为NO3-。
硝酸盐检测的灵敏度不如亚硝酸盐高。
内江气候条件：内江市位于天府之国的东南部，座落在美丽富饶的沱江之滨。
东连重庆，西接成都，南通自贡、宜宾、泸州，北到遂宁、南充，是川东重镇、四川省规划建设的8个大城市之一。
地理位置东经104°15′--105°26′，北纬29°11′--30°2′。
内江历史悠久。
内江是开发较早的巴蜀腹心城市，东汉建县，曾称汉安、中江，隋文帝时改称内江，至今已有2000多年的历史。
1950年设内江专区，1985年改建省辖内江市。
1998年，经国务院批准，内江行政区划进行再次调整至今。
由于历史上盛产蔗糖，制糖业发达，素有"甜城"之称。
内江文化底蕴深厚。
内江素有"大千故里"、"文化之乡"的美誉，是川中文化发达地区之一。
自古以来，人文荟萃、才俊辈出，孔子之师苌弘、西汉辞赋家王褒、东汉教育家董均、宋代理学家陈抟、国画大师张大千、新闻巨子范长江、被孙中山授予四大将军之一的喻培伦大将军等都是内江彪炳史册的杰出代表。
内江市属亚热带湿润季风气候。
受盆地和本地自然环境的影响，具有气候温和、降雨量丰富、光热充足、无霜期长的特点。
内江冬季不冷，一月份的平均气温为6℃--8℃，极端最低温度-3℃；夏季也不太热，七月份的平均气温为26℃--28℃，但也曾出现过41℃的极端最高气温。
因此全年气温在-3℃—41℃之间，无霜期达330天。
灾害性天气以旱为主，旱涝常交替出现；春夏秋冬，低温、风、暴雨时有发生，绵雨显著，同时，夏旱伏旱的现象也时有发生。
年降雨量在1000毫米左右，多分布在夏季，约占全年雨量的60％，高温期与多雨季基本一致，春季约占17％，冬季仅占4％。