高效毛细管电泳仪

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毛细管电泳仪的优势介绍

毛细管电泳仪的优势介绍

毛细管电泳仪的优势介绍毛细管电泳仪是在分子生物学领域中广泛应用的分离和分析技术之一。

毛细管电泳仪的原理是将带电的DNA、RNA、蛋白质等生物分子在电场的作用下通过毛细管中的电泳缓冲液分离。

毛细管电泳仪的优势主要体现在以下几个方面。

高分辨率毛细管电泳仪具有高分辨率的优势。

由于毛细管内径只有数十微米,分子在得到相同电荷后在这么小的空间内分离,因此能够实现对分子的高分辨率分离。

这种高分辨率不仅能够分离不同大小的分子,还能够分离同分子不同异构体和不同修饰状态的分子,比如糖基化和磷酸化等。

快速高效毛细管电泳仪具有快速高效的优势。

由于毛细管内径小,缓冲液量少,所需的电场强度低,因此分析时间较短,通常只需要数分钟至半小时不等。

同时,由于分子在电场作用下迁移速度较快,分子的分离效率较高,对于一些具有快速分离、高通量分析需求的实验,毛细管电泳仪是一个理想的选择。

操作简便毛细管电泳仪具有操作简便的优势。

毛细管电泳仪的使用无需费时费力地制备大量试剂和设备,操作简便、样品准备简单,省去了复杂的前处理步骤,即可获得高灵敏度的分离结果,是一种快捷高效的实验方法。

灵敏度高毛细管电泳仪具有灵敏度高的优势。

由于毛细管内径小,对于小分子、低浓度样品的分析具有很高的灵敏度,常用于微量生物分子的分离和检测。

此外,在近年来的发展中,一些高灵敏度检测技术如荧光检测、激光诱导荧光检测等结合了毛细管电泳技术,使其灵敏度更加提高。

成本低毛细管电泳仪具有成本低的优势。

相比于传统的大型仪器,毛细管电泳仪體積小,占用空间少,使用维护成本低。

同时,毛细管电泳仪适用于多样品分析,不同基因跑不同的配置文件,不需要额外的分析时间和费用。

综上,毛细管电泳仪以其高分辨率、快速高效、操作简便、灵敏度高和成本低等优势成为现代分子生物学实验中应用广泛的分离和分析技术之一。

面对分子生物学中越来越多的实验需求,毛细管电泳仪必将发挥更加重要的作用。

高效毛细管电泳色谱仪的特点

高效毛细管电泳色谱仪的特点

高效毛细管电泳色谱仪的特点高效毛细管电泳色谱仪(CE)是一种高效分离技术,用于分离化合物混合物。

与其他传统的色谱分离技术相比,CE 可以在极短的时间内完成分离,并且需要非常少的样品来完成分离过程。

CE 有许多独特的特点,本文将对其主要特点进行介绍。

1. 分离速度快CE 可以在几分钟内完成对化合物混合物的分离,这种快速分离速度主要归功于所使用的电场和毛细管。

这意味着,CE 可以在较短的时间内分析大量的化合物混合物,并且无需进行额外的预处理。

2. 样品用量少CE 可以使用非常少量的样品来进行分离。

比如,对于药物分析中常见的分析,只需要几毫升的样品即可达到分离的目的。

这使得CE 成为分子分析中最受欢迎的分离技术之一。

3. 高灵敏度CE 的高效性使得它在分析低浓度样品时具有优势。

由于样品用量少,分离速度快,因此仪器可以检测到非常低的化合物浓度,灵敏度高于其他传统色谱分离技术。

4. 分离效率高与其他传统色谱分离技术相比,CE 在分离效率方面具有更高的优势。

毛细管在CE 中的使用使得分离过程更加精确,化合物混合物中化学物质的分离更加彻底。

这种优势使得 CE 成为分离生命科学中重要的技术之一。

5. 可重复性高CE 分析具有高度的可重复性。

其原因是CE 采用的是基本上自动化的操作流程,并且使用了一些高精度的系统,这有助于保持分离的稳定性和重复性。

另外,CE还采用了定量方法,可以对分离过程中每个组分进行定量,从而增强了分析结果的准确性。

6. 自动化程度高CE 是一种基本上自动化的技术。

整个分离过程可以通过计算机程序来控制,仪器可以自动完成样品进样、分离、检测和数据处理等操作。

这不仅使得实验的操作更加简单,而且大大提高了分析的速度和精度。

7. 与其他技术结合使用CE 可以与其他技术结合使用,以获取更全面的分析数据。

比如,可以将质谱技术与 CE 相结合,以确定分离化合物的分子结构,也可以将CE 与光谱技术相结合,以确定分离的化合物的光学性质。

毛细管电泳仪的使用(原创)电泳仪的使用方法简版范文

毛细管电泳仪的使用(原创)电泳仪的使用方法简版范文

毛细管电泳仪的使用(原创)电泳仪的使用方法毛细管电泳仪的使用 (原创)引言毛细管电泳是一种常见的分离和检测生物分子的方法。

毛细管电泳仪是用于进行毛细管电泳实验的仪器,它可以实现对生物样品的快速、高效分离和检测。

本文将介绍毛细管电泳仪的使用方法,包括仪器的准备和操作步骤。

仪器准备在开始使用毛细管电泳仪之前,需要对仪器进行一些准备工作。

1. 仪器清洁:确保仪器和使用的毛细管是干净的。

使用一定量的去离子水和实验室级酒精清洗仪器表面和通道。

使用纯净棉布擦拭毛细管,确保其表面干净。

2. 试剂准备:根据实验要求,准备所需的毛细管电泳缓冲液和样品。

确保试剂的质量好,并按照实验方法准确配制。

3. 电解质填充:根据实验设计和毛细管的使用要求,选择合适的电解质填充毛细管。

将电解质溶液注入毛细管两端,确保毛细管内充满电解质溶液。

操作步骤接下来,将详细介绍毛细管电泳仪的使用步骤。

1. 样品制备:根据实验要求,准备样品溶液。

将样品溶解在适当的溶剂中,并进行必要的稀释。

确保样品溶液的浓度适中,以免影响电泳结果。

2. 毛细管安装:,将毛细管插入仪器的毛细管插槽中。

确保毛细管插入的位置正确并且稳定。

然后,将毛细管的两端连接到电泳仪上的电极。

3. 仪器设置:根据实验要求,设置仪器的运行参数,如电压、电流和电泳时间等。

确保设置的参数符合实验要求,并检查仪器的参数显示是否正常。

4. 准备电泳缓冲液:根据实验要求,将正确配制的电泳缓冲液注入仪器的缓冲液槽中。

确保电泳缓冲液的pH值、离子浓度等参数符合实验要求。

5. 样品加载:使用微量注射器或自动进样器,将样品溶液缓慢注入毛细管的一端。

确保样品进入毛细管的位置正确,并注意避免空气泡的进入。

6. 开始电泳:确认样品已经加载完毕后,关闭注射器或自动进样器,将电泳仪的电源打开。

根据设置的参数,开始进行电泳实验。

7. 实验结束:当电泳时间到达设定的时间后,关闭电路,停止电泳实验。

注意关注电泳过程中的实时显示结果,并及时记录实验数据。

高效毛细管电泳分析法

高效毛细管电泳分析法

CGE在分子生物学和蛋白质化学上有着十分广 阔的应用。在分子生物学上实现了包括寡聚核 苷酸纯化、DNA测序和PCR产物的分析,在蛋 白质化学方面用于多肽和蛋白质分子的分子量 测定,原蛋白和结合蛋白的分离等。此外, CGE还可用于其它带电物质的分离,并可通过 加入手性试剂、离子对试剂、络合试剂等添加 剂改变分离的选择性。
离子色谱的固定相是离子交换树 脂。在固定相的表面,分布着许多适 合于分离阴离子的活性中心(如:
+ − — N(CH3 )3 OH,或适合于分离阳离子
的活性中心(如: SO− H+ )。当被测 — 3 定的混合离子随流动相(淋洗液)流 经固定相时,由于不同离子的电荷数
或离子半径不同,使它与固定相的作 用力大小不同,造成各种离子在相对 运动的两相之间的分配系数不同,因 此,它们在柱中的迁移速度也就不同, 从而达到分离的目的。
图 毛细管分离示意图
在HPCE中电渗流的一个重要特点是具有 平面流型,电渗的驱动力沿毛细管均匀分 布,它使整个流体象一个塞子一样以均匀 的速度向前运动。而在HPLC中流体流型 则是抛物线型的层流,其中心处速度是平 均速度的2倍。
电渗流的平面流型和HPLC中高压泵驱动 所产生的抛物线型层流的速度曲线不同, 不会直接引起样品组分区带在柱内扩张, 这是HPCE获得高效分离的重要原因之一。
3.毛细管凝胶电泳(capillary gel .毛细管凝胶电泳( electrophoresis,CGE) , )
CGE是80年代后期发展起来的毛细管电泳 的主要分离模式之一,它将凝胶电泳对生 物大分子的高效分离能力和毛细管电泳的 快速、微量和定量分析相结合,成为当今 分离度极高的一种电泳分离技术。
毛细管电泳一般由一个高压电源,一 根毛细管,一个检测器及两个缓冲液 贮液槽及数据记录系统组成,其仪器 结构示意图如图

高效毛细管电泳实验

高效毛细管电泳实验

高效毛细管电泳实验一、实验目的1. 进一步理解毛细管电泳的基本原理;2. 熟悉毛细管电泳仪器的构成;3. 了解影响毛细管电泳分离的主要操作参数。

二、实验原理1.电泳淌度毛细管电泳(CE )是以电渗流 (EOF)为驱动力,以毛细管为分离通道,依据样品中组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的一种液相微分离技术。

离子在自由溶液中的迁移速率可以表示为:ν = μE (1)r 6q πημ= (2)式中ν是离子迁移速率,μ为电泳淌度,E 为电场强度。

η为介质粘度,r 为离子的流体动力学半径,q 为荷电量。

因此,离子的电泳淌度与其荷电量呈正比,与其半径及介质粘度呈反比。

2.电渗流和电渗淌度电渗流(EOF )指毛细管内壁表面电荷所引起的管内液体的整体流动,来源于外加电场对管壁溶液双电层的作用。

在水溶液中多数固体表面根据材料性质的不同带有过剩的负电荷或正电荷。

就石英毛细管而言,表面的硅羟基在pH 大于3以后就发生明显的解离,使表面带有负电荷。

为了达到电荷平衡,溶液中的正离子就会聚集在表面附近,从而形成所谓双电层,如图1所示。

这样,双电层与管壁之间就会产生一个电位差,叫做Zeta 电势。

但毛细管两端施加一个电压时,组成扩散层的阳离子被吸引而向负极移动。

由于这些离子是溶剂化的,故将拖动毛细管中的体相溶液一起向负极运动,这便形成了电渗流。

电渗流的大小可用速率和淌度来表示:()E EOF ηεξν/=(3) 或者 ηεξμ/=EOF (4)式中νEOF 为电渗流速率,μEOF 为电渗淌度,ξ为Zeta 电势,ε为介电常数。

3.毛细管电泳的分离模式CE 有6种常用的分离模式,其中毛细管区带电泳(CZE )、胶束电动毛细管色谱(MEKC )和毛细管电色谱(CEC )最为常用。

本实验的内容为CZE 。

4.毛细管电泳的基本参数CE 中的分析参数可以用色谱中类似的参数来描述,比如与色谱保留时间相对应的有迁移时间,定义为一种物质从进样口迁移到检测点所用的时间,迁移速率(ν)则是迁移距离(l ,即被分析物质从进样口迁移到检测点所经过的距离,又称毛细管的有效长度)与迁移时间(t )之比:t l=ν (5)因为电场强度等于施加电压(V)与毛细管长度(L)之比:L VE = (6)就CE 的最简单的模式—毛细管区带电泳(CZE )而言,结合式(1),可得:tV lL tE l a ==μ (7)在毛细管区带电泳(CZE )条件下测得的淌度是电泳淌度与电渗流淌度的矢量和,我们称之为表观淌度μa ,即:EOF e a μμμ+= (8)实验中可以采用一种中性化合物,如二甲亚砜或丙酮等,来单独测定电渗流淌度,然后求得被分析物的有效淌度。

高效毛细管电泳色谱仪的介绍

高效毛细管电泳色谱仪的介绍

高效毛细管电泳色谱仪的介绍前言高效毛细管电泳色谱仪(High Performance Capillary Electrophoresis)简称CE,是一种用于分离、检测和定量小分子有机化合物及生物大分子(如蛋白质、核酸等)的分析仪器。

与传统的色谱技术相比,CE具有分离速度快、分离效果好、耗时少、消耗试剂和样品量少等优点,因此广泛应用于医药、生物、环境等领域的分析和检测。

原理CE是利用毛细管中的电泳作用使样品离子在电场力下向电极运移,通过毛细管壁上的化学修饰、填充剂和区带电荷来实现分离,并通过荧光检测器等检测器来检测和定量分离后的样品成分。

优点分离速度快毛细管内径小,距离相对短,使得样品离子的迁移速率快,从而实现快速分离。

分离效果好毛细管表面可以进行化学修饰和填充剂处理,通过组分间的电荷、氢键、范德华等相互作用,进一步增强样品分离能力。

耗时少样品分离后直接进行检测,无需进一步净化、萃取等操作,减少了样品制备的时间。

消耗试剂和样品量少毛细管内径小,所需样品量和试剂量大大减少,节约了分析成本。

系统组成CE主要由毛细管容器、高压电源、检测器、数据采集系统等四部分组成。

毛细管容器毛细管容器是对样品进行分离的主体,通常是具有内径为5-75μm的管(通过融离池、拉伸等方法得到),通过氧化铟、二氧化硅等材料修饰表面,增加毛细管和分离物之间的作用力和优化分离效果。

毛细管容器通过两端接口一个容纳高压电源的阳光非金属管,并与检测器连接。

高压电源高压电源主要是为毛细管提供足够的驱动力,使样品能够快速通过毛细管,一般的工作电压为2-30kV之间。

检测器检测器通常使用荧光检测器、紫外检测器、折射率检测器和质谱检测器等,常见的是荧光检测器。

荧光探测器最适用于无色或淡黄色的样品,因为它可以通过激发荧光产生亮丽的蓝光来检测和定量测量毛细管中的分离样品。

数据采集系统数据采集系统主要用于记录和处理从检测器输出的信号,并将其转换为可读的图形或数字信号,以便进一步分析和研究。

高效毛细管电泳仪

高效毛细管电泳仪

高效毛细管电泳仪
型号:Agilent 3D CE;产地:美国;仪器状态:正常;负责人:田宏哲
主要参数:
电泳电压电压范围:可设置0-±30 kV
电流:可设置0-300 mA
功率:可设置0-6 W
进样方式自校正进样系统,可从两端进样
压力进样: 0-50 mbar
电动进样: 0-30 kV
48位样品盘
自动进样器/
馏分收集器
检测器紫外-可见光二极管阵列检测器(190-600 nm)
波长准确度:1 nm
响应时间: 0.1-10 s
光源:氘灯;钨灯
压力系统样品瓶可加压2-12 bar
配备二极管阵列检测器,具有优良的定性和定量分析灵敏度,线性检测范围和全波长光谱检测功能。

缓冲溶剂自动更新平台,保证长时间分析的再现性。

采用通用的毛细管适配器可方便连接Agilent-trap SL 质谱检测器。

主要应用:
农药残留及原药成分分析;环境污染物分析;核苷酸及多肽分析;多酚类抗氧化剂分析等。

更多应用……
具体内容:
农产品中农药残留分析:磺酰脲类除草剂、季铵盐类植物生长调节剂、植物激素等。

生物化学:核酸、多肽等分析。

药物学:天然药物提取物中活性成分分析或药物合成、纯度检验等。

食品领域:食品和饮料中的有机酸分析。

环境领域:多环芳烃等污染物分析。

应用举例:。

高效毛细管电泳仪(更新)-凯奥科技

高效毛细管电泳仪(更新)-凯奥科技



优点:进样准确,容易控制重复性好。
缺点:对浓度低的组分有歧视效应。
5.3.2 压差进样
(1)虹吸进样

进样时将阳极槽抬高形成槽的落差,利用液体重力差将样品吸入阳
极端的毛细管内。

进样:量与落差、样品浓度、进样时间成正比,与样液粘度成反比 优点:操作简便,重复性好。

缺点:比较适于自由电泳,而不适于凝胶电泳。
得以分离。常用于蛋白质、寡聚核苷酸、核糖核酸 (RNA)、DNA片段分离和测序及聚合酶链反应(PCR)产物
分析。CGE能达到CE中最高的柱效。
特点:抗对流性好,散热性好,分离度极高。
(三)毛细管胶束电动色谱(MECC)
采用表面活性剂 ( 如十二烷基硫酸钠, SDS) 在运动缓冲液内形 成一疏水内核、外部带负电的动态胶束相,利用溶质具有不同的疏 水性,因而在水相和胶束相 (准面定相)间分配的差异进行分离,既 能分离中性溶质又能分离带电组分的 CE 模式。 MECC 拓宽了 CE 的 应用范围,主要用于小分子、中性化合物、手性对映体和药物等。 优点 增强对弱极性物质的分离度,在中药分析,天然产物分析,
8 典型分离图谱
阳离子分析
迁移方向和电渗流方向一 致; 4.5min内分离了24种金属 离子; 阳极进样,阴极检测; 具有很高的灵敏度;
阴离子分析
阴离子电泳方向和电渗流方向 相反、速度接近,分析时间长、 效率低; 质量小、电荷密度大的离子如: SO4-2、Cl-、F-等,电泳速率大于 电渗流,阳极端流出,在阴极端 无法检测; 加入电渗流改性剂,十六烷基 三甲基溴化胺等,使电泳方向和 电渗流方向一致,可在3.1min内 分离36种阴离子;阴极进样,阳 极检测; 离子价态及存在形态分析;

高效毛细管电泳色谱仪电泳基本概念

高效毛细管电泳色谱仪电泳基本概念

高效毛细管电泳色谱仪电泳基本概念一、简介高效毛细管电泳色谱仪(Capillary Electrophoresis, CE)是一种利用电场对带电化合物进行分离的技术。

它可以用来分离带正电荷、负电荷或无电荷的化合物,且在分离过程中不需要添加外部成分,如胶体或分离介质,因此不会改变样品的组成。

CE具有分离速度快、样品消耗少、自动化程度高和分离精度高等特点,在生物、医药和环境等领域得到了广泛应用。

二、电泳原理在CE中,带电荷的样品离子在电场中移动,移动速度与带电离子的电荷数和电场力大小成正比。

由于样品分子的大小、形状和电荷都不相同,它们在电场中的移动速度也各不相同,因此分离出不同成分的样品提供了可能。

CE通过在一根毛细管内施加高电场,使带电离子向着管底方向移动,借此实现所有样品分子的分离。

三、电泳参数CE基本的电泳参数包括电场强度、毛细管内液体pH值、毛细管壁面涂层、电容耦合、温度等。

1.电场强度:CE中的电场强度通常在10-100 kV/m之间,由于呈现出非线性的行为,这个参数对电泳速度和分离能力有着重要的影响。

2.pH值:毛细管内液体pH值的选择和调整是CE中的一个重要环节。

通常选择分析物理化性质相似的缓冲液,以使质氢或氢氧离子浓度在毛细管内始终保持一定水平。

3.微粒衬底:在一些情况下,添加微粒衬底可以增加分离能力和电泳效率,但是同样也会使分辨率降低。

4.温度:温度对分离速度、分离度和电泳峰形都有影响,通常情况下,温度越高,电泳速度会越快。

四、毛细管电泳色谱仪毛细管电泳色谱仪(Capillary Electrophoresis Instrument, CEI)包括注射器、毛细管、高压电源、检测器和控制软件等部件。

其中,注射器和毛细管是CE中最关键的部件。

毛细管通常是由非活性材料制成的,如硅胶或石英玻璃。

常用的检测器包括荧光检测器、紫外-可见光检测器、电化学检测器和质谱检测器等。

五、应用CE在分析各种样品中有着广泛的应用,包括各种生物分子、有机和无机化合物、药物、食品、环境和化妆品样品。

高效毛细管电泳仪(更新)-凯奥科技解析

高效毛细管电泳仪(更新)-凯奥科技解析
高效毛细管电泳
High performance capillary electrophoresis HPCE
北京凯奥科技发展有限公司
内容摘要
1 概述
2 特点与用途 3 毛细管电泳与凝胶电泳、高效液相色谱的比较 4 基本原理 5 结构组成
6 毛细管电泳的分离分析类型
7 K1050与K1060高效毛细管电泳仪 8 典型分离图谱

用途

可用于分析有机化合物、无机离子、中性分子、药物、手性
化合物、蛋白质和多肽、DNA及其碎片、糖及糖蛋白、细胞 分离等。

可应用于分子生物学、基因组学、蛋白质组学、糖生物学、
各种生物技术、生物化学、细胞学等生物或生命科学以及医 药、食品、环境、公安侦破、农业、化学和化工等不同领域。
3 毛细管电泳与凝胶电泳、 高效液相色谱的比较
起流体整体向负极方向迁移的现象叫电渗。电渗是毛细管中的溶剂因
轴向直流电场的作用而发生的定向流动。

各种粒子在毛细管内电解质中的迁移速度等于 电泳和电渗流两种速度
的矢量和。
4 基本原理

在电解质溶液中,带电粒子在电场作用下以不同的速度定向迁移的现 象叫电泳。
பைடு நூலகம்
CE所用的石英毛细管柱,在pH>3的情况下,其内表面带负电,和溶 液接触时形成双电层。在高电压的作用下,双电层中的水合阳离子引
5.2 毛细管
材料:要求具有化学、电学惰性,紫外-可见光透光性,柔韧性,
高强度,价廉。
普通玻璃毛细管:价格便宜,但电渗大,吸附作用大。 石英玻璃毛细管:目前常用,外层涂聚酰亚胺。性能稳定,电渗
较大,但也有一定的吸附。
聚四氟乙烯毛细管:新材料,电渗小,但性能不太稳定。 规格:内径20~200μ m,外径350~400μ m;长度<=1m ;

高效毛细管电泳色谱仪的介绍

高效毛细管电泳色谱仪的介绍

高效毛细管电泳色谱仪的介绍高效毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离。

由于CE溶质区带的超小体积特性导致光程太短,圆柱形毛细管作为光学表面不够理想,对检测器灵敏度要求相当高。

CE常用检测器有紫外检测器、激光诱导荧光检测器、质谱检测器和电化学检测器等。

一、紫外检测器:紫外检测器是基于物质对紫外吸收进行检测,是成熟的检测器,在CE中应用广。

1、原理:入射紫外光通过样品时,被吸收的多少符合朗伯-比耳定律。

检测点在毛细管的末端,检测点的毛细管的外涂层要烧掉。

2、检测方法:(1)固定波长:光源为低紫外氘灯,用滤光片获得固定波长的光。

(2)可变波长:光源为氘灯或钨灯,用单色器(棱镜或光栅)获得连续可调波长的光。

(3)快速扫描:1)利用线性二极管阵列快速捕获紫外光。

2)利用硅光电倍增管作快速扫描。

3、特点:(1)通用性好,特别是对蛋白质的适用性很强。

(2)灵敏度不足。

4、提高灵敏度的方法:由于CE检测池的光路长度为毛细管内径,一般不超过100μm,小内径的毛细管限制了紫外检测器的灵敏度,可采用以下几种方法来提高灵敏度。

(1)优化测定波长:通过测定不同波长下的信噪比来选择测定波长,以提高灵敏度。

(2)减少检测噪音:1)提高光源强度。

2)采用聚焦和狭缝等减少背景光的影响。

3)采用良好的信号放大系统。

(3)扩展吸光光路长度:1)为了克服圆柱形毛细管表面引起的散射、失真等不利的光学特性和增加光路长度,可采用矩形、扁形、Z形和泡型等特殊毛细管。

当然柱效会有所下降。

2)对于普通毛细管,可采用轴向照射和多次反射来增加光路长度。

①轴向照射:将激光光束从毛细管末端沿管轴方向入射,在毛细管侧面进行检测。

②多次反射:在毛细管壁镀上银,分别开入射窗和出射窗。

当入射光以特定角度入射后,在毛细管内反射30~40次后从出射窗口射出。

二、激光诱导荧光检测器:激光诱导荧光检测器采用激发光源使检测物质产生荧光进行检测。

CL1020高效毛细管电泳仪(紫外检测)

CL1020高效毛细管电泳仪(紫外检测)

CL1020高效毛细管电泳仪(紫外检测)带电粒子在直流电场作用下于一定介质中所发生的定向运动,利用这一现象对化学或生物化学组分进行分离分析的技术称之为电泳。

我公司根据这一原理生产的高效毛细管电泳仪,选配的国产紫外检测器,是一种可变波长的光吸收型检测器。

该检测器具有自动波长定位调整,自动调零,多量程输出选择(用于数据处理的计算机工作站或积分仪输出及用于常规记录仪输出)和时间常数选择等功能,广泛应用于环境保护、生物化学、医学卫生、临床检测、司法、食品卫生、药品检测、农业化学等领域。

分析原理紫外检测原理基于被测组分和背景电解质的吸光度不同,当被测组分通过检测窗时,吸光度发生的变化服从朗伯-比尔定律,即在一定的实验条件下,吸光度与被测组分的浓度成正比。

技术指标紫外检测器●光路系统:进口设计衍射光栅单色仪,进口光电池●灯源:日本滨松L6302氘灯●波长范围:190-700nm●波长精度:±2nm●波长重复性:±1nm●噪声:±5×10-5AU在240nm,t=1s●漂移:±1×10-3AU/h在240nm,t=1s●检测限:≤1×10-6g/ml(对氨基苯甲酸)●定性重复性:RSD≤1.5%●定量重复性:RSD≤3.0%高压电源●输出电压:0~30KV,连续可调(正电源)●输出电压:0~-30KV,连续可调(负电源)●输出电压:0~±30KV,连续可调(正负切换电源)●输出电流范围:0~999μA●电源调节率:电源电压变化±10%,输出电压变化0.01% ●负载调节: 10V/100μA●纹波:输出电压的0.1% P-P●电压示值误差:≤2.0%●电流示值误差:≤2.5%●稳定度变化:≤1.5%适用的毛细管电泳分离模式●毛细管区带电泳(CZE)●胶束电动毛细管色谱(MECC)●毛细管凝胶电泳(CGE)●毛细管等速电泳(CITP)●毛细管等电聚焦(CIEF)●微乳液毛细管电动色谱(MEEKC)●毛细管离子分析(CIA)仪器特点●分离效率高,分析速度快,检测灵敏度高●试剂用量少,样品预处理简单●高压电源为正、负和正负切换可调三种规格,用户可根据需要选配●微处理器控制,波长重复性高●检测范围宽●液晶屏幕显示,轻触面板,程控找波长,自动调零●独特的氘灯温度控制方式,氘灯使用寿命可达2500小时●进样方式:电进样0~30KV可调,压差进样130~230mm可调●冲洗方式:弹簧加压冲洗仪器组成●CL1020紫外检测器●高压电源(可选配)CL101A高压电源(正)CL101B高压电源(负)CL101C高压电源(正负切换)●色谱工作站软件●电泳箱●紫外流通池●毛细管(50μm i.d可选配)。

ACS2000高效毛细管电泳仪操作规程

ACS2000高效毛细管电泳仪操作规程

文件制修订记录
一、适用范围
ACS2000高效毛细管电泳仪系统具有高效、快速、经济、进样量小、灵敏度高等优点,可广泛应用于环境保护、生物化学、医学卫生、临床检测、食品卫生、药品检测、农业化学等领域的生产、教学和科学研究。

二、操作程序
1、接通电源,仪器预热30分钟。

2、将毛细管的内壁用相应的溶液清洗。

3、选择所需的工作参数。

4、进样前先给仪器跑基线,基线平稳后再进样。

5、实验结束后关闭电源,并清洗毛细管。

三、注意事项
1、使用仪器前要经过使用培训,得到使用许可后方可独立操作本仪器。

2、仪器应放在严格水平平面上,任何与水平平面的偏离都将造成误差。

3、不应有任何遮挡物挡在仪器通风口处,影响散热。

4、毛细管系统中使用了高压电源,仪器接地至关重要,否则高压电将渗透到机身。

5、工作电流不要长时间超过150微安,因为过高的电流会使毛细管内的径向温度梯度增加,使样品分离度降低。

6、工作环境必须有良好的通风,不允许安装有火花的仪器,避免将设备安装在太阳直射的地方同时也需要环境温度变化小。

毛细管电泳

毛细管电泳

种现象称为电渗流,用EOF表示。
一般情况下,电渗流的运动方向与电泳运动方向相反,
电渗流迁移速度与电泳速度一样,受电场强度、溶液粘度, Zeta电势等因素有关联。电渗速度(Veo)的表达式为: 电渗流迁移速度Veo = ── E 4 : 电解常数 : 毛细管壁与表面平切面的Zeta电势 :缓冲液黏度
(5)电势(Zeta Potential) 参与形成双电层被毛细管表面吸附的一层离子与溶液中的 游离阳离子之间会产生一个电势,称为毛细管壁Zeta电势 。毛细管壁为高电位区,中心点为低电位区,毛细管的半 径越大电位差越大,形成的电势越大。
(6)电渗流(Electroosmetic Flow) 用EOF表示 在高电压下毛细管电泳溶液中的正电荷与毛细管内壁表面 上的负电荷之间相互作用,导致流体朝负极方向运动,这
核磁共振检测器,灵敏度可达到10-21g
3.4制冷系统
(1)空气制冷:在毛细管分析室内输入制冷空气使毛细管迅
速冷却,达到制冷的目的。
(2)液体制冷:在毛细管的夹层中输入制冷液体达到制冷的
目的。
3.5电极槽 主要与存放电极缓冲液和进样,由于毛细管电泳是超微量 分析,电极液用量很少,使用的电泳槽很小。
(1)毛细管性质
不同材质制成的毛细管性能有所不同,
聚四氟乙烯毛细管:电渗小,但性能不太稳定。
普通玻璃毛细管:价格便宜,但电渗大,吸附作用大。 石英玻璃毛细管:性能稳定,电渗较大,但也有一定的 吸附。 (2)型号 细管(内经2-5m) 中粗管(内径 25-75m)
粗管(内径100-250m)
(3)毛细管的改性:
今后发展新型的毛细管电泳分离模式提供了依据。
1987年H.Jerten把等电聚焦电泳、凝胶电泳引入到毛细管 电泳中。 1989年改用10-25m的毛细管电泳,并获得满意的分离效果 1994 年又推出了 2 - 5m 的毛细管柱,使得毛细管电泳在 分析领域有了很大的发展。

型高效毛细管电泳仪安全操作及保养规程

型高效毛细管电泳仪安全操作及保养规程

型高效毛细管电泳仪安全操作及保养规程1. 引言型高效毛细管电泳技术是一种常用的分析方法,广泛应用于生命科学、药物研发、食品安全等领域。

为了确保仪器的正常运行和实验人员的安全,本文档详细介绍了型高效毛细管电泳仪的操作规程和保养要点。

2. 仪器操作规程2.1 准备工作在操作型高效毛细管电泳仪之前,必须进行以下准备工作:•检查仪器的外观是否完好,并确保各零部件安装牢固。

•检查供电电压是否符合要求,并确保接地连接良好。

•准备好所需的试剂和样品,并按照实验方案进行配制。

2.2 仪器开机和关机操作开机时,按照以下步骤进行操作:1.将电源插头插入电源插座,并打开电源开关。

2.检查仪器的液晶显示屏,确认显示屏正常。

3.检查仪器各个模块的指示灯,确认指示灯正常。

4.等待仪器自检完成后,即可进行实验操作。

关机时,按照以下步骤进行操作:1.停止所有运行中的实验操作。

2.关闭电源开关,将电源插头从电源插座中拔出。

2.3 仪器操作步骤在进行实验操作时,应按照以下步骤进行:1.调整仪器的流速和温度等参数,根据实验要求进行设置。

2.将样品注入进样口,并确保样品注射量符合要求。

3.启动仪器的运行程序,并观察实时数据的变化。

4.在实验过程中,及时记录实验数据,并注意观察仪器运行状态。

5.实验结束后,根据实验要求进行数据处理和结果分析。

3. 仪器保养规程为了延长仪器的使用寿命和保持仪器的性能稳定,必须进行定期保养。

以下是型高效毛细管电泳仪的保养规程:3.1 仪器日常清洁每次使用结束后,应进行仪器的日常清洁。

具体步骤如下:1.关闭电源开关,并拔掉电源插头。

2.使用软布蘸取少量无水乙醇,擦拭仪器的外部表面以及操作面板。

3.使用专用工具清理仪器的进样口和样品槽等部件。

4.确保清洁后的仪器表面干燥,然后重新安装各个部件。

3.2 仪器定期维护除了日常清洁,还需要定期进行仪器的维护工作。

建议按照以下时间间隔进行维护:•每月维护:清洗进样口和样品槽等部件,检查电源和连接线路的接触情况。

FN86-JJ高效毛细管电泳仪主要功能及性能指标

FN86-JJ高效毛细管电泳仪主要功能及性能指标

FN86-JJ高效毛细管电泳仪主要功能及性能指标
FN86-JJ高效毛细管电泳仪是我公司推出的全国产化、科研教学实用型HPCE仪器。

仪器性能稳定,操作简便,有较高的性能价格比,受到用户好评。

主要功能及性能指标:
◆进样方法
电迁移进样:进样电压0~30kV任意设定;
液体压差进样:进样高度50~100mm任选;
◆冲洗方式
弹簧助推正压冲洗;
◆高压电源
输出电压0~30kV任意设定;
正负两种极性;
电流0~200μA;
恒压精度±0.1%;
◆在线检测器
为多波长紫外检测,检测波长254nm,280nm,214nm等;
检测灵敏度:T%,1A,0.5A,0.2A,0.1A,0.05A;
◆数据处理
提供0~100mv信号电压输出,可供记录仪记录或积分仪处理数据。

配套仪器:CDMC-4A型色谱数据处理机,或配色谱工作站及计算机,能完成对高效电泳实验数据信号的实时谱图绘制,计算保留时间、峰高,进行峰面积积分、面积百分比计算及打印数据表等功能。

毛细管电泳仪

毛细管电泳仪

毛细管电泳仪毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。

毛细管电泳实际上包含电泳、色谱及其交叉内容,它使分析化学得以从微升水平进入纳升水平,并使单细胞分析,乃至单分子分析成为可能。

长期困扰我们的生物大分子如蛋白质的分离分析也因此有了新的转机。

目录·基础理论·分类·特点·仪器系统·影响分离因素·基础理论·分类·特点·仪器系统·影响分离因素·测定药物与蛋白结合常数·毛细管电泳-质谱联用·微全分析系统·应用·\ 1 双电层双电层是指两相之间的分离表面由相对固定和游离的两部分离子组成的与表面异号的离子层,凡是浸没在液体中的界面都会产生双电层。

在毛细管电泳中,无论是带电粒子的表面还是毛细管管壁的表面都有双电层。

2 Zeta 电势毛细管电泳书籍电介质溶液中,任何带电粒子都可被看成是一个双电层系统的一部分,离子自身的电荷被异号的带电离子中和,这些异号离子中有一些被不可逆的吸附到离子上,而另一些则游离在附近,并扩散到电介质中进行离子交换。

“固定”离子有一个切平面,它和离得最近的离子之间的电势则被称之为离子的Zeta 电势。

石英材质的毛细管是毛细管电泳中最常使用的毛细管,管子内表面在pH>3 情况下带负电,当其与溶液接触时,会形成紧贴内表面的和游离的两部分离子。

这两部分离子组成的与表面电荷异号的离子层,即为双电层,其中第一部分又称之为Stern 层。

第二层为扩散层。

扩散层中游离部分离子的电荷密度随着和表面距离的增大而急剧减小。

在Stern 层和双电层的游离部分的起点的边界层之间的电势称之为管壁的Zeta 电势。

高效毛细管电泳HPCE

高效毛细管电泳HPCE
生物工程系 马 力
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
高效毛细管电泳的发展与进展
毛细管电泳方法虽新,但历史悠久。以毛细管等速电泳 (CITP)的发展为起点可以追溯到1960年甚至更远;多数 学者以毛细管区带电泳的出现为起点(CZE)。CZE是瑞典 科学家Hjerten首先提出的。1981年Jorgenson和Lukacs使用 75umID的熔融石英毛细管做CZE,利用电迁移进样和荧光 检测,在30kV电压下产生了4X105片/m的效率,成为毛细 管电泳史上的一个里程碑。Hjerten先后提出了毛细管凝胶 电泳和毛细管等电聚焦法,它们不仅可以大幅度提高效率, 而且可以实现自动化操作,便于定性定量工作。1986年, Lauer报道其在蛋白质CZE中获得了106片/m的高效率。这些 研究结果激发了关于CE 研究的热潮。而1988年美国BioRad公司商品仪器的推出,更加使毛细管电泳技术的发展进 入了应用的新时代。
生物工程系 马 力
理论
生物工程系 马 力
理论上,若分子(或离子)的相对迁移率不同,且泳动距离 足够长,则不同的物质应形成不同的区带而得以分离。但在 实际操作中传统的凝胶电泳技术有其自身的缺点:(1)凝胶的 制作比较费时,不能重复使用,每次实验的凝胶密度不能完 全相同,常使同一样品的分折结果不能重复,因此在分析中 必须同时以标准样品进行对照。(2)在电泳过程中,凝胶对分 子有一定的吸附作用,使区带变宽,分辨率下降。(3)在凝胶 电泳中,为减少焦耳热带来的对流扰动和凝胶变形等影响, 施加的电压不能太高,通常为5v/cm左右,这样使分子的泳 动速度较慢,在凝胶中的停留时间增长,而分子的扩散也使 区带变宽。要解决这些问题必须增加电场强度,缩短分离时 间,同时尽快将焦耳热耗散,减少热扩散的影响。Knox和 Grushka等发表的一个结论是:如果管子的直径能满足下述方 程,那么自身产生的热量就不会引起太严重的谱带展宽和效 率损失。
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第十一章 高效毛细管电泳分析法
high performance capillary electrophoresis,HPCE
第三节 高效毛细管电泳仪
high performance capillary electrophoresis apparatus
一、高效毛细管电泳仪
high
performance
特点 加二极管阵列,光谱信息 灵敏度高,样品需衍生 灵敏度极高,样品需衍生 离子灵敏,需专用的装置;
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三、毛细管电泳的进样方式
injection method of HPCE
进样量:毛细管长度的1%-2%;纳升级、非常小;
1. 流体力学进样方式
(1)进样端加压 (2)出口端抽真空 (3)虹吸进样
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1.高压电源
(1)0~30 kV 稳定、连续可调的直流电源; (2)具有恒压、恒流、恒功率输出; (3)电场强度程序控制系统; (4)电压稳定性:0.1%; (5)电源极性易转换;
2. 毛细管柱
(1)材料:石英:各项性能好;玻璃:光学、 机械性能差;
(2)规格:内径20~75μm,外径350~ 400μm;长度<=1m
electrophoresis apparatus
二、流程与主要部件
process and main assembly
三、进样方式
injection method
capillary
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一、高效毛细管电泳仪
high performance capillary electrophoresis apparatus
进 样 体积 1P2d84L πt
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2. 电动进样方式
毛细管一端插入样品瓶,加电压;
进样 ( 量 eo ef)V πr2ctt
L
进样不均:电歧视现象,淌度大的离子比淌度大的进样量大; 离子丢失:淌度大且与电渗流方向相反的离子可能进不去; 特别适合黏度大的试样;
3. 扩散进样 试样通过扩散作用进入分离柱端口处。
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仪器2
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仪器3
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二、仪器流程与主要部件
process and main assembly
• 电压:0~30kV; • 分离柱不涂敷任何固定液; • 紫外或激光诱导荧光检测器; (可检测到:10-19~10-21 mol/L)
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内容选择
第一节 概述
generalization
第二节 高效毛细管电泳的理论基础
basic theory of HPCE
第三节 高效毛细管电泳仪器
high performance capillary electrophoresis apparatus
第四节 高效毛细管电泳的分离模式
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3.缓冲液池
化学惰性,机械稳定性好;
4. 检测器
要求:具有极高灵敏度,可柱端检测; 检测器、数据采集与计算机数据处理一体化;
类型 紫外-可见 荧光 激光诱导荧光 电导
检测限/mol 10-13~10-15 10-15~10-17 10-18~10-20 10-18~10-19
separate types of HPCE
第五节 应用与进展
applications and advances of HPCE
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