儿童少年卫生学课件：健康筛查
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血红蛋白测定
❖实习目的 ❖了解血红蛋白测定原理 ❖熟悉测定试剂配制方法 ❖掌握测定仪器操作方法
知识准备
❖ 使用器材：刺血针、消毒敷料用品、血 红蛋白吸管、带塞试管、棕色试剂瓶、72l系 列分光光度计。
❖ 检测试剂：文齐氏浓缩试剂盒。包括氰 化高铁血红蛋白浓缩液和氰化高铁血红蛋白 校正液。
❖ 检测方法：使用WHO推荐的氰化高铁血 红蛋白测定法（具体检测方法参照试剂盒说 明）。
检测原理
❖ 按氰化高铁血红蛋白文齐氏液测定法配 制成试剂Ⅰ和试剂Ⅱ； ❖ 血液在试剂中溶解出血红蛋白，先与高 铁氰化钾化合成高铁血红蛋白； ❖ 再与氰化钾结合成稳定的氰化物； ❖ 换算为血液血红蛋白总浓度。
试剂配制
❖ 取800ml蒸馏水； ❖ 打开试剂Ⅰ倾入混合； ❖ 接着打开试剂Ⅱ倒入，再混合并用蒸馏 水加入至1000ml充分混合； ❖ 储存于阴凉暗处或放冰箱（此液可保存 一个月）。
❖ 试剂存放：试剂原液至少可保存一年， 应放至阴凉处或4～8℃冰箱，取出稀释应用 液，须在一个月内用完。
测试操作ຫໍສະໝຸດ Baidu
❖ 吸取5.0ml应用试剂置于试管内； ❖ 加20μl血液，充分混匀； ❖ 待放五分钟，完全反应后用540nm波长 光电比色检测（各种比色计均可应用，单机 也可使用）。 ❖ 经用参考液或校正验证仪器合格后方可 使用。 ❖ 浓度值变换可用系数计算，或查血红蛋 白曲线表，或血红蛋白浓度直读。
2.一定要采用一次性刺血针，严防交叉 感染。
3.仪器在测试前均需校正。 4.低血红蛋白诊断标准：
①7～13岁血红蛋白低于120g/L； ②14岁以上男性低于130g/L； ③14岁以上女性低于120g/L。
比色与计算
❖ 比色：721型分光光度计调波长540 nm， 以任一浓度检验OD读数是否在误差允许范围 之内。若在误差允许范围内即可测定样品。 ❖ 计算和报告结果：
用公式Hb(g/L)＝OD×k (常数) 计算血红 蛋白值，结果填入检测卡片的相应方格内。
注意事项
1.人体血红蛋白含量在一天内有生理波 动，应注意采血时间对结果的影响。
❖实习目的 ❖了解血红蛋白测定原理 ❖熟悉测定试剂配制方法 ❖掌握测定仪器操作方法
知识准备
❖ 使用器材：刺血针、消毒敷料用品、血 红蛋白吸管、带塞试管、棕色试剂瓶、72l系 列分光光度计。
❖ 检测试剂：文齐氏浓缩试剂盒。包括氰 化高铁血红蛋白浓缩液和氰化高铁血红蛋白 校正液。
❖ 检测方法：使用WHO推荐的氰化高铁血 红蛋白测定法（具体检测方法参照试剂盒说 明）。
检测原理
❖ 按氰化高铁血红蛋白文齐氏液测定法配 制成试剂Ⅰ和试剂Ⅱ； ❖ 血液在试剂中溶解出血红蛋白，先与高 铁氰化钾化合成高铁血红蛋白； ❖ 再与氰化钾结合成稳定的氰化物； ❖ 换算为血液血红蛋白总浓度。
试剂配制
❖ 取800ml蒸馏水； ❖ 打开试剂Ⅰ倾入混合； ❖ 接着打开试剂Ⅱ倒入，再混合并用蒸馏 水加入至1000ml充分混合； ❖ 储存于阴凉暗处或放冰箱（此液可保存 一个月）。
❖ 试剂存放：试剂原液至少可保存一年， 应放至阴凉处或4～8℃冰箱，取出稀释应用 液，须在一个月内用完。
测试操作ຫໍສະໝຸດ Baidu
❖ 吸取5.0ml应用试剂置于试管内； ❖ 加20μl血液，充分混匀； ❖ 待放五分钟，完全反应后用540nm波长 光电比色检测（各种比色计均可应用，单机 也可使用）。 ❖ 经用参考液或校正验证仪器合格后方可 使用。 ❖ 浓度值变换可用系数计算，或查血红蛋 白曲线表，或血红蛋白浓度直读。
2.一定要采用一次性刺血针，严防交叉 感染。
3.仪器在测试前均需校正。 4.低血红蛋白诊断标准：
①7～13岁血红蛋白低于120g/L； ②14岁以上男性低于130g/L； ③14岁以上女性低于120g/L。
比色与计算
❖ 比色：721型分光光度计调波长540 nm， 以任一浓度检验OD读数是否在误差允许范围 之内。若在误差允许范围内即可测定样品。 ❖ 计算和报告结果：
用公式Hb(g/L)＝OD×k (常数) 计算血红 蛋白值，结果填入检测卡片的相应方格内。
注意事项
1.人体血红蛋白含量在一天内有生理波 动，应注意采血时间对结果的影响。