巴氏染色液(Papanicolaou EA65)操作步骤及注意事项
巴氏染色法
巴氏染色液说明书【产品名称】 巴氏染色液 【包装规格】货号：DA0082单瓶(盒)包装规格：100ml 、250ml 、500ml 、5000ml ；套组(盒)包装规格：4×100ml/盒、4×250ml/盒、4×500ml/盒。
【预期用途】主要用于对脱落细胞的组织细胞学染色。
【检验原理】细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法，橘黄G 与EA36或EA50联合使用可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料的亲和力较强；而细胞浆则相反，它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大。
巴氏染色液利用这一特性对细胞进行多色性染色，细胞经染色后能清晰地显示细胞的结构，胞质透亮鲜丽，各种颗粒分明，细胞核染色质非常清楚，从而较容易发现异常细胞。
通过巴氏染色可反映出细胞在炎症刺激下和癌变后的形态学变化，对早期发现和诊断一些病变和肿瘤具有较重要意义。
【主要组成成分】试剂组成主要成分 l 、苏木素染色液苏木素 2、1%盐酸乙醇分化液 盐酸、乙醇 3、橘黄G 染色液橘黄G4、EA50染色液或EA36染色液EA50染色液：淡绿、伊红、磷钨酸、冰乙酸； EA36染色液：淡绿、伊红、磷钨酸【储存条件及有效期】5℃～35℃环境保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】新鲜标本涂片后，应尽快用95%乙醇固定，以避免细胞变形。
【检验方法】1、固定：将细胞涂片置于95%乙醇中固定；2、染色，按要求进行染色。
3、二甲苯透明，中性树脂封片，镜检。
【检验结果的解释】【检验方法的局限性】仅供形态学初检观察染色使用。
【注意事项】1、冬季气温较低时，苏木素染色液不易着色，可适当延长染色时间。
细胞核蓝紫色或黑色 非角化细胞的胞质 淡蓝色或淡绿色 角化细胞的胞质 粉红或橘黄色 红细胞 鲜红色或橙红色 粘液淡蓝或粉红色2、橘黄G染色液染色时间不宜过长，且在乙醇中要尽量洗净多余的染色液，否则会影响EA50染色液或EA36染色液的着色。
精子形态学染色液(巴氏法)
精子形态学染色液(巴氏法)简介：细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法，Papanicolaou Stain 最初仅用于检测阴道上皮雌激素水平以及生殖道念珠菌、滴虫等病原体。
橘黄G6与EA36或EA50联合使用，可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色。
目前大多数实验室采用成品染液，所以每种染液应注意其改良后的最佳条件。
最终胞浆染色应透明可见，核染色质应很容易辨别出来。
目前改良的巴氏染色液含有多种离子，具有多色性染色效能。
染色后胞质鲜艳、透明性好以及核膜、核仁、染色质结构清晰。
Leagene 精子形态学染色液(巴氏法) 因精子及细胞内不同等电点的蛋白质在相同的酸度下带不同的电荷，能选择性地结合相应的染料而着色。
胞核由酸性物质组成，它与碱性染料的亲和力较强；而胞浆则相反，它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大细胞质染色特别采用针对于精子染色的改良EA50染色液，细胞核染色采用Leagene 自主研发的无毒改良型苏木素染色液，特别适用于精子的染色，亦可用于胸水、腹水、痰液等细胞样本的染色。
组成：自备材料：1、 固定液(如95%乙醇-乙醚固定液)2、 系列乙醇3、 0.5%盐酸乙醇分化液操作步骤(仅供参考)：1、 细胞涂片用等量95%乙醇-冰乙酸固定液固。
2、 80%的乙醇浸泡1min 。
3、 70%的乙醇浸泡1min 。
4、 50%的乙醇浸泡1min 。
编号 名称DA0191 4×20ml DA0191 4×100ml Storage 试剂(A): Lea 苏木素染色液 20ml 100ml RT 避光 试剂(B): 蓝化液20ml 100ml RT 试剂(C): 橘黄G6染色液 20ml100ml RT 避光使用说明书1份5、 蒸馏水或自来水浸泡或冲洗。
6、Lea 苏木素染色液染色。
7、自来水冲洗。
8、盐酸乙醇分化液分化或盐酸水溶液分化。
9、自来水冲洗。
10、蓝化液中蓝化4min 。
13.巴氏染色液
巴氏染色液说明书【产品名称】巴氏染色液【产品名称】巴氏染色液PAP Staining Solutions【产品编号】PAP-500ml,PAP-1000ml,PAP-2500ml【包装规格】苏木素染色液500ml、1000ml 2500ml；橘黄G6染色液500ml、1000ml 2500ml；EA50染色液500ml、1000ml 2500ml。
【预期用途】主要用于对脱落细胞的组织细胞学染色。
【检验原理】巴氏染色液由3部分组成：苏木素染色液、橘红G6染色液和EA50染色液。
苏木素染色液，是一种针对正常以及变态细胞学涂片染料，对核膜、核质、核仁染色效果非常清晰。
涂片标本可是妇科或非妇科的，如痰液，尿液及细胞学穿刺样本。
为获得优质的染色效果，苏木素染液技术完全按照帕氏染色法，以及OG-6染液；EA 31染液；同时供应选择性多色复染染料，如EA50试剂；EA65试剂，满足细胞学染色需求。
橘黄G6染色液，是橘黄G (Orange G) 染料添加磷酸（PMA）后的酒精溶液。
Papanicolaou染色，首先用苏木素将细胞核染色，之后用OG-6 试剂和EA试剂继续染色。
橘黄G染料对细胞质染色，并保持在成熟细胞和角质化细胞。
之后的EA试剂对未染色的细胞组分染色，如鳞状细胞，核仁，纤毛，红细胞。
测试样本可为妇科细胞样本和非妇科细胞样本，如痰液，尿液，细胞穿刺等。
为获得优质的染色效果，OG-6试剂特性与其他用于Papanicolaou染色法中染色试剂-苏木素试剂，EA 31试剂，及对比染色试剂EA50试剂，EA65试剂相符。
EA50染色液,为伊红Y和亮绿SF酸（加入了磷钨酸，PTA）染液的酒精溶液。
Papanicolaou染色，首先用苏木素将细胞核染色，之后用OG-6 试剂和EA试剂继续染色。
橘黄G染料对细胞质染色，并保持在成熟细胞和角质化细胞。
之后的EA试剂对未染色的细胞组分染色，如鳞状细胞，核仁，纤毛，红细胞。
巴氏染色原理
巴氏染色原理
巴氏染色原理是一种常用的细胞染色技术，用来对细胞或组织进行染色。
该原理是基于酚醛固定的原理，通过将细胞或组织固定在玻片上，然后处理它们使得它们能够与染料发生反应。
巴氏染色的步骤如下：
1. 固定：将细胞或组织浸泡在酚醛液中，使其固定在玻片上。
酚醛能够保持细胞或组织的形状和某些结构的完整性。
2. 脱水：通过将样本逐渐浸泡在濃度递增的酒精溶液中，使其逐渐失去水分。
这样做是为了减少细胞或组织内的水分，以便尽可能地提高染料对细胞或组织的亲和力。
3. 渗透：将细胞或组织浸泡在骨胶液中，使其充分浸润。
骨胶液能够渗透到细胞或组织的内部，使得染料更容易地与它们发生反应。
4. 染色：将染料溶液滴在样本上，使其与细胞或组织结合。
染料能够结合到不同的细胞或组织结构中，从而显示出不同的颜色或形态。
5. 清洗：将多余的染料以及其他杂质通过浸泡在去离子水中进行清洗。
这样可以让染色的结果更加清晰。
6. 封片：在玻片上涂上封片剂，以保护样本并固定染料。
这样可以使染色的结果保持较长时间。
通过巴氏染色原理，我们可以对细胞或组织进行染色，并观察它们的结构，从而得到更多关于它们的信息。
这种染色方法在细胞学和组织学研究中广泛应用，为我们研究生物体内部的结构和功能提供了重要的工具。
巴氏染液SOP
1.目的用于测定人类精子形态。
2.范围适用于男性精子畸形率测定。
3.原理细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料的亲和力较强；而细胞浆则相反，它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大。
巴氏染色液利用这一特性对细胞进行多色性染色，细胞经染色后能清晰地显示细胞的结构，胞质透亮鲜丽，各种颗粒分明，细胞核染色质非常清楚，从而较容易发现异常细胞。
通过巴氏染色可反映出细胞在炎症刺激下和癌变后的形态学变化，对早期发现和诊断一些病变和肿瘤具有较重要意义。
4.试剂4.1本试剂由珠海贝索生物技术有限公司提供【医疗器械生产企业许可证编号】粤食药监械生产许20010407号【医疗器械注册证书编号】粤珠食药监械（准）字2013第1400001号【产品标准编号】YZB/粤珠0010-2013【说明书批准日期】2013年1月23日4.2试剂盒组成应避免不同批次试剂盒中的各组分混用（型号EA36、EA50） 试剂组成规格 主要成分 苏木素（Harris ）染液1vial ×250ml 苏木素 橘黄G 染液1vial ×250ml 橘黄G EA36染液或EA50染液1vial ×250ml 亮绿、曙红 4.3试剂储存及效期：4.3.1有效期：未开封试剂有效期为18个月，其中EA36染液，EA50染液最佳使用时间为启用后5个月内。
4.3.2储存条件：本试剂盒应贮存于相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体和通风良好的5O C-30O C 室温环境。
题目：精子形态学巴氏染色标准操作规程 编号：JY-3-GC- 文件检审： 页数：3附件：0 发布部门：质量管理科首次发布日期：2015-08-01 版本号：02本版发布日期：2015-08-01拟定部门：检验科审核：分管院长批准：院长5.实验设备及材料5.1奥林巴斯CX31显微镜5.2精密移液器规格：5-50μl和200-1000μl5.3载玻片5.4生理盐水、盐酸5.5移液器吸头5.6酒精5.7染缸6.样本6.1采集方法：以手淫法采集禁欲2-7天精液于采样杯,注意收集完全。
巴氏染色液EA 染色液使用说明书
用液体基质的细胞学方法（LBC），刷子刷下细胞学样本，立即浸入固定液（CitoFix）
固定。染色前，从固定液中分离样本细胞（离心固定液），置于载玻片上，准备
进一步染色。
巴氏（Papanicolaou）染色法，进行性染色：
染色之前，样本材料应收集并固定于载玻片上。
如样本已经用 CitoSpray 固定并干燥，应放置于 95 % 乙醇（Histanol 95）中
染色结果：
蓝色—细胞核
黄色至橙色—角质化细胞
粉色至红色—表皮鳞状细胞，红细胞，核仁，纤毛
绿色—其他细胞胞质（副基底和中层鳞状细胞，柱状细胞，多核细胞白细胞，淋
巴细胞，组织细胞，腺癌细胞及未分化癌细胞）
【储存条件及有效期】保证产品包装完整的情况下，储存温度在+15°C 和 +25°C
之间。保持储存环境干燥，不要放置于寒冷的环境中，不要冷冻产品，避免直接
阳光直射。产品使用效期为 2 年，具体效期见标签。
【适用仪器】不适用
【样本要求】使用合适的设备仪器收集组织样本，并标记清楚，根据操作说明进
行实验。
为避免发生错误，染色及诊断过程最好由具相关专业知识的技术人员操作。
根据标准医疗诊断实验室标准镜检诊断。 【参考文献】
上海科汇生物技术有限公司
1. Papanicolaou, G.N. (1941): Some improved methods for staining vaginal smears. J Lab Clin Med. 2. Papanicolaou, G.N. (1942): A new procedure for staining vaginal smears. Science. 3. Carson, F.L., Hladik C. (2009): Histotechnology: A self-instructional text, 3rd ed. ASCP Press.
巴氏染色流程及注意事项
巴氏染色流程及注意事项
以下是 8 条关于巴氏染色流程及注意事项的内容：
1. 嘿，你知道巴氏染色第一步是干啥不？那就是涂片的制作呀！就像建房子得先打牢地基一样重要呢！把样本均匀地涂在玻片上，可不能马虎哦！你想啊，要是涂得不好，后面不就全乱套啦？例子：你看这涂片，是不是得像精心雕琢的艺术品一样呀！
2. 接下来，固定可不能小看呀！就好比把东西紧紧抓住一样。
固定不好，后面染色就容易出问题哦！你说，这重要不重要呀？例子：要是不固定好，那颜色不就乱跑啦。
3. 染色啦染色啦！这可是关键的步骤哟！就像给画上色一样，得仔细把握好颜色的深浅和均匀度呀！你能想象颜色乱七八糟的样子吗？例子：看这颜色，得染得恰到好处才行呢。
4. 冲洗也得注意呀！冲得太狠或者不够都不行，就跟洗车似的，不能太粗暴也不能太温柔呀！不然会咋样呢？例子：哎呀，冲洗可得小心点，不能把好不容易染上的颜色给冲没了呀！
5. 脱水干燥也很关键呢！这就好像让东西变得干脆利落一样，可不能拖泥带水哟！要不然会影响效果呀！例子：这脱水干燥，得迅速干脆呀。
6. 透明也不能马虎呢！就像给东西罩上一层清晰的外衣一样。
做不好的话，前面的努力不就白费啦？例子：你想想，不透明好怎么能看清呀。
7. 封片也很重要哦！把染好的片子保护起来，就像给宝贝穿上保护衣一样。
这你能不重视吗？例子：封片封得好，才能好好保存呀。
8. 哎呀呀，整个巴氏染色流程就是这样啦，每个步骤都得认真对待呀！可千万别掉以轻心哦，不然就达不到好的效果啦！注意事项都记住了吗？一定要记住呀！
我的观点结论：巴氏染色需要仔细按照流程操作并注意各项事项，才能保证染色的质量和效果。
巴氏染色的操纵方法及注意事项[整理版]
![巴氏染色的操纵方法及注意事项[整理版]](https://img.taocdn.com/s3/m/feb3ef357275a417866fb84ae45c3b3567ecddcc.png)
巴氏染色的操作方法及注意事项染色染色有4个步骤：1、固定；2、核染色；3、胞浆染色；4、透明。
主要达到以下要求：1、核的结构清晰；2、透明度高；3、分色恰当。
一、固定固定的目的细胞制片的迅速固定是制片过程中关键的一步，否则会影响细胞学诊断的准确性。
对于不同的标本需要不同的固定方法。
最为常用的固定方法是95％酒精作为固定液的湿固定法。
酒精作为一种脱水剂能够防止细胞内的酶捋蛋白质分解而自容，并凝固细胞内的物质如蛋白质、脂肪和糖类等，使其保持与组织生活相仿的成分，从而使细胞各部分，尤其核染色质易于着色。
对于巴氏染色来说，酒精固定最为重要的。
如果酒精浓度不足引起的固定不佳，可造成细胞的人为变化，并可导致假阳性或假阴性的诊断。
1、固定方法湿固定法：作为用95％酒精固定液固定的细胞学标本一定使用湿固定法。
制片制备完后，趁标本新鲜而又湿润时，立即放入盛有95％酒精的固定缸内。
制片在固定液内至少保持15-30min。
固定时间通常不超过1周。
这种制片染色后，颜色鲜艳，结构清晰。
如果细胞制片需要送至另一实验室或邮寄他处染色时，可以固定15min后，把制片取出后立即密封的容器中或者使用甘油防止制片干燥。
因为无论固定前或固定后的制片，如果发生干燥后都会影响染色的效果。
2、固定注意事项固定液的过滤：为了防止细胞污染，凡是使用过的固定液，必须过滤后才能再使用。
使用过长的固定液，必须用酒精相对密度计测定，酒精浓度低于90％时应该及时更换新液。
湿固定的重要性：标本再新鲜时及时固定时保证染色效果的重要因素。
如苏木素对细胞核的染色，巴氏染色中胞浆的特殊着色作用，均可因标本干燥后固定而大受影响。
制片标本的邮寄：标本再固定15min后取出，立即加甘油数滴于制片上，装入密封的小盒中。
实验室在收到标本后，先浸入95％酒精中，使甘油溶去，再进行染色。
二、核染色1、苏木素液浸染时间一般在3-5min，但是必须随气温和燃料情况而酌情改变。
夏季或放置较久的苏木素染液容易着色，时间要缩短；冬季或新配制的苏木素染液和应用已久较稀释的苏木素液不易着色，时间要延长。
巴氏染色原理及操作步骤
巴氏染色原理及操作步骤巴氏染色法就是脱落细胞染色中最好得染色方法.苏木素染液，细胞核内得染色质主要就是去氧核糖核酸（DNA，DNA得双螺旋结构中,两条链上得磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷得苏木素精碱性染料以离子或氢键结合而被染色。
苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
分化：苏木素染色之后，用水洗去未结合在细胞上得染液，但就是在细胞核中结合过多得染料与细胞浆中吸附得染料必须用分化液 1 %盐酸酒精脱去，才能保证细胞核与细胞浆染色得分明，把这个过程称为染色得分化作用.因酸能破坏苏木素得醌型结构，使色素与组织解离，分化不可过度。
蓝化：分化之后苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，在碱性条件下处于蓝色离子状态，而呈蓝色，所以分化之后用水洗去酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木精染上得细胞核变呈蓝色，称蓝化作用,一般多用自来水浸洗即可变蓝，也可用温水（50度温水最佳）变蓝。
E A50 染液得酸碱度对于巴氏染色得成功起着关键作用,EA50染液由伊红、亮绿、等染料配成。
伊红、亮绿、橘黄等属于酸性染料，在溶解媒中其发色团就是负离子部分，发色团可与蛋白质中带正电得氨基结合，从而就是胞浆显蓝色、绿色、橘黄色或红色，但蛋白质所带正负电荷得多少就是随溶液得PH值而改变得，在偏碱环境中,蛋白质得羧基游离增多（带负电），在偏酸环境中蛋白质氨基游离增多（带正电），磷钨酸在染色过程中，不但作为媒染剂可增加染料得着色力，同时磷钨酸与碳酸锂还就是一对弱酸弱碱，实际上就是一对缓冲剂，可中与分化及蓝化时可能留下得少量酸或碱，保证染色达到理想效果，其适用于上皮细胞及间皮组织得标本,就是阴道脱落细胞检查中最常用得染色方法，该染色法不但具有显示细胞核结构清晰、分色明显、透明度好、胞浆受色鲜艳等特点•巴氏染色法将胞核染为深蓝色；鳞状上皮底层、中层及表层角化前细胞胞质染绿色，表层不全角化细胞胞质染粉红色，完全角化细胞胞质呈桔黄色；细菌:灰色；滴虫：淡蓝灰色；黏液：淡蓝色或粉红色；中性粒细胞与淋巴细胞、吞噬细胞胞质均为蓝色；红细胞染粉红色；高分化鳞癌细胞可染成粉红色或桔黄色；腺癌胞质呈灰蓝色。
巴氏染色液EA50染色液使用说明书
子水冲洗
2.
苏木素 HP，Pap 1A 染色
2-3 min
3.
Scott 溶液或显蓝试剂处理
1 min
注：若没有此试剂，可直接用自来水冲洗
3-5 min
4.
递增梯度浓度乙醇溶液（Histanol 70, Histanol
3 组，每组上下跌落 6-8 次
80 and Histanol 95）进行脱水
5.
次
馏水或去离子水冲洗
2.
苏木素 HP，Pap 1A 染色
6 min
3.
蒸馏水或去离子水冲洗
上下跌落 6-8 次
4.
HCL Pap 溶液或 0.1 % HCl 溶液分化处理
5-10s
注：此步骤可去除细胞核和细胞质上过多的苏
木素染液，但分化时间过长会使细胞核发生褪
色。
5.
蒸馏水冲洗
上下跌落 6-8 次
6.
9.
100 %乙醇（Histanol 100）脱水
上下跌落 6-8 次
10.
100 %乙醇（Histanol 100）脱水
3-5 min
11.
二甲苯（BioClear）或其替代物（BioClear New）
上下跌落 6-8 次
透明处理
12.
二甲苯（BioClear）或其替代物（BioClear New）
【产品编号】 EA50-OT-100 ，EA50-OT-500 ，EA50-OT-1L，EA50-OT-2.5L
【包装规格】 100 ml 500 ml 1000 ml 2500 mL
【预期用途】细胞质染色试剂，用于 Papanicolaou 染色法细胞学上使用的对比
巴氏染液说明书
巴氏染液说明书全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：巴氏染液是一种用于细菌染色的染液，它是由德国微生物学家巴尔特洛米·奥古斯特·冯·巴尔蒂莫（Robert Koch）所发明的一种染色方法。
巴氏染液主要用于显微镜下观察分离出来的细菌，并加以染色，以便于观察和鉴定不同种类的细菌。
巴氏染液的配方主要包括三种成分：一是花青素染料，用于染色细菌的细胞壁；二是碘液，用于固定染色；三是含有碱性成分的溶液，用于除去细菌细胞的色素。
这三种成分的配比和使用方法对于染色效果至关重要，以下我们来详细介绍一下巴氏染液的制作和使用方法：一、制作巴氏染液配方：1.花青素染料：将适量的花青素染料溶解于无色无味的酒精中，使其充分溶解，成为染色液。
2.碘液：将适量的碘结晶溶解于无色的乙醇中，加入适量的甘油作为固定剂，充分搅拌溶解。
3.碱性溶液：将适量的氢氧化钠或氨水溶解于蒸馏水中，使其呈碱性状态，用于去色反应。
二、使用巴氏染液的步骤：1.将待染的玻璃载玻片上涂上待染的涂片物，如细菌培养物。
2.在玻片上滴上花青素染料液，使其充分覆盖待染的涂片物，静置数分钟，让染料充分渗入细菌细胞壁。
3.将碘液滴在染色后的玻片上，修饰几秒钟，然后用蒸馏水冲洗，固定染色。
4.滴上碱性溶液，静置片面上数分钟，然后用蒸馏水冲洗，直至不再有颜色流出。
5.待玻片干燥后，即可放入显微镜下观察分离出的细菌。
巴氏染液在细菌学研究中具有重要的应用意义，它能够让科学家们更清晰地观察和鉴定不同种类的细菌，为疾病的防治提供了重要的依据。
巴氏染液的制作和使用方法也并不复杂，只要按照正确的步骤和配方来进行操作，就可以得到理想的染色效果。
希望通过本文的介绍，大家对巴氏染液有了更深入的了解，能够在日常的实验工作中更加得心应手。
第二篇示例：巴氏染液是一种用于微生物检测的重要试剂，其原理是利用染色剂对生物样品进行染色，从而使微生物在显微镜下更容易被观察和分析。
快速巴氏染色液 注意事项
快速巴氏染色液注意事项快速巴氏染色液是一种常用的细胞染色方法，具有快速、简单、显色明亮等优点。
然而，在使用快速巴氏染色液时，我们需要注意一些事项，以确保染色效果的准确性和稳定性。
以下是使用快速巴氏染色液的注意事项：1. 样本制备：在进行细胞染色前，样本制备非常关键。
首先，要确保样本的新鲜度，尽量选择新鲜组织或细胞。
其次，样本处理要轻柔，避免引起细胞破裂或变形。
最后，要注意样本固定的时间和方法，固定时间过短或过长都会影响染色效果。
2. 清洗步骤：在染色之前，样本需要进行充分的清洗，以去除可能的干扰物质。
清洗步骤应该重复进行，直到洗涤液不再有颜色残留为止。
同时，要避免使用含有蛋白酶或酸碱性溶液进行清洗，以免影响细胞的形态和染色结果。
3. 染色时间控制：染色时间的控制对于快速巴氏染色液来说非常重要。
染色时间过短会导致染色不均匀或染色效果不明显，而染色时间过长则可能出现过度染色的情况。
因此，在染色之前，要根据样本类型和染色液的浓度进行试验，以确定最佳的染色时间。
4. 染色液的使用：在使用快速巴氏染色液时，要注意染色液的储存和使用。
首先，要避免染色液暴露在阳光下或高温环境中，以免影响染色效果。
其次，要定期检查染色液的有效期，过期的染色液可能会导致染色效果不佳。
最后，要遵循染色液的供应商提供的使用说明，按照正确的比例稀释染色液，避免使用过量或过少的染色液。
5. 染色结果的观察和记录：染色完成后，要仔细观察染色结果，并及时记录。
观察时要注意细胞的形态和染色的均匀性。
如果发现染色结果不理想，可以尝试调整染色时间或染色液的浓度。
同时，要将染色结果进行记录，以备后续分析和比较。
使用快速巴氏染色液时需要注意样本制备、清洗步骤、染色时间控制、染色液的使用和染色结果的观察和记录等方面。
遵循这些注意事项，可以提高染色效果的准确性和稳定性，为后续的细胞分析和研究提供可靠的基础。
巴氏染色液作用安全操作及保养规程
巴氏染色液作用安全操作及保养规程巴氏染色液是在生物科学研究和医学诊断中广泛使用的一种染色剂。
就像所有化学试剂一样，正确的使用和保养非常重要。
下面我们将重点介绍巴氏染色液的作用、安全操作和保养规程。
巴氏染色液的作用巴氏染色液是由甲醛和孟德尔水杨酸（也称为苯酚）混合而成的染色剂。
它广泛用于细胞和组织的标本制备，以便观察细胞学的形态、结构和功能。
巴氏染色液可以染色核糖核酸（RNA）、蛋白质和细胞核等有机物。
安全操作规程巴氏染色液是一种刺激性化学物质，在使用时需要保护好自己和实验室同事的健康。
以下是一些巴氏染色液的安全操作规程：1.密封存储巴氏染色液必须密封存储在冷暗处，避免暴露在阳光下或高温地方。
应该将巴氏染色液储存在标有危险物品的储存柜或房间中。
2.戴手套和护目镜在接触巴氏染色液前必须戴上手套和护目镜。
如果不小心触碰到染色液，要迅速将其冲洗掉并咨询专业人员。
3.通风操作巴氏染色液时必须在通风的环境下进行。
这将有助于防止呼吸危害和其他安全问题。
4.遵循正确的操作程序使用巴氏染色液前要阅读和理解安全数据表和物质安全说明书，确保了解正确的操作程序和应急处理方法。
5.避免接触皮肤和呼吸道避免巴氏染色液接触皮肤和呼吸道。
如果染色液不慎接触到皮肤或呼吸道，需要立即清洗或呼吸新鲜空气，并在情况严重时咨询医生。
保养规程保养巴氏染色液可以最大限度地保持其质量和性能，并延长其使用寿命。
下面是一些保养巴氏染色液的规程：1.不要过度稀释巴氏染色液不宜过度稀释。
稀释过量会使其染色效果不佳，使用寿命缩短。
2.避免冻结巴氏染色液不宜冻结，其应储存在常温下的冷暗处。
3.不要照射巴氏染色液不宜长时间暴露在阳光下。
光照下，其中的苯酚会发生氧化反应，降低其稳定性。
4.定期检查定期检查巴氏染色液的颜色和透明度。
如果其发生变化，可能是因为其受到了污染，需要重新制备。
5.避免细菌污染巴氏染色液易受到细菌的污染。
因此，在制备和使用巴氏染色液时需要遵循卫生规程，避免细菌的污染。
巴氏染色原理及操作步骤
巴氏染色原理及操作步骤
巴氏染色原理及操作步骤
巴氏染色法是脱落细胞染色中最好的染色方法。
苏木素染液，细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA的双螺旋结构中，两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素精碱性染料以离子或氢键结合而被染色。
苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
分化：苏木素染色之后，用水洗去未结合在细胞上的染液，但是在细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用分化液
色，表层不全角化细胞胞质染粉红色，完全角化细胞胞质呈桔黄色；细菌：灰色；滴虫：淡蓝灰色；黏液：淡蓝色或粉红色；中性粒细胞和淋巴细胞、吞噬细胞胞质均为蓝色；红细胞染粉红色；高分化鳞癌细胞可染成粉红色或桔黄色；腺癌胞质呈灰蓝色。
巴氏染色的操作方法及注意事项
染色有4个步骤：1、固定；2、核染色；3、胞浆染色；4、透明。
主要达到以下要求：1、核的结构清晰；2、透明度高；3、分色恰当。
如染色为红色，可以加少许磷钨酸溶液纠正；如染色均为蓝色或绿色，可以加少许饱和碳酸锂溶液纠正。
对于改良EA染液，每100ml
染液加入2ml冰醋酸后染色效果更佳；染液使用更持久。
染色液
AB—PAS染色AB—两种不同粘液物质染色的染料分别显示不同的粘液物质于同一组织切片。
在AB—PAS染色中，酸性粘液物质被Alcian blue染色呈湖兰色；中性粘液物质被PAS1.切片脱蜡至水；2.蒸馏水洗；3.Alcian blue染色液染色10--15分钟；4.蒸馏水洗；5.过碘酸处理10分钟；6.蒸馏水洗2 X 1分钟；7.滴加Schiff液2ml染色10--15分钟；8.流水洗5分钟；9.苏木素复染细胞核；10.分化、水洗；返兰、水洗；11.脱水透明；树胶封片。
PAS染色1.切片脱蜡至水；2.蒸馏水洗；3.0.5%过碘酸处理10分钟；4.蒸馏水洗2 X 1分钟；5.滴加Schiff液2ml染色10--15分钟；6.流水洗3分钟；7.脱水透明；8.光学树脂胶封片。
Masson三色染色维结缔组织的增生和分布，纤维性肿瘤与肌源性肿瘤的鉴别。
对酒精性肝硬化/坏死后性肝硬化及各型肝炎导致的小叶汇管区纤维组织增生程度的差别具有重要价值。
Masson染色在肾穿刺活检中可以用于判别在肾小球毛细血管网的系膜氏和上皮下是否存在嗜复红蛋白的沉积，对于肾脏疾病的病理诊断有重要意义。
二．染色方法：1. 切片脱蜡至水，2. Harris’s苏木素染胞核10分钟水洗，3. 分化、水洗，返蓝、水洗，4. 入Masson复合染色液染色10-20分钟，5. 0.2%醋酸速洗1—5秒钟两次，6. 1%磷钼酸处理5—8分钟，7. 0.2%醋酸速洗1—5秒钟两次，8. 1%亮绿SF染色2—4分钟，9. 0.2%醋酸速洗1—5秒钟两次，10. 直接用新鲜95%乙醇分化20—30分钟，11. 脱水、透明、封片。
Van Gieson 染色一．Van Gieson染色试剂盒：Van辨效果一直被广泛使用。
在Van Gieson 染色中品红和苦味酸的比例关系一般为1：9，但由于每批染料的性能和被染色的组织不同以及组织处理方法的不同在实际应用时应根据染色的实际效果进行必要的调整以达到红黄两色适当的对比。
巴氏染液配制
巴氏染液配制巴氏染液配制1、苏木精：Harris苏木精：苏木精5g溶于无水乙醇50ml ，硫酸铝钾100g溶于蒸馏水1000ml ，混合后煮沸，待稍冷加入氧化汞2.5g，再煮沸2min，用前加冰醋酸20ml改良Gill氏半氧化苏木精：苏木精2g, 无水乙醇250ml, 硫酸铝17.6g,（可减半量）碘酸钠0.2g, 柠檬酸2g，甘油50ml, 蒸馏水750ml。
配制方法：将苏木精溶于无水乙醇，硫酸铝溶于蒸馏水，完全溶解后两液混合，依次加入碘酸钠，柠檬酸，甘油。
此配方特点：配制时勿须加温。
配后即可应用。
性能稳定，基本消除了过度氧化的苏木精结晶污染涂片的麻烦。
唯染色时间较长，须5～10min。
2、桔黄G6(orangeG6)：桔黄G 0.5g，溶于95%酒精100ml, 加磷钨15mg。
3、EA染液：EA36：由三种贮备液按比例混合而成：0.5%亮绿(light green)酒精溶液45ml，0.5%裨士麦褐(bismark brown)酒精溶液10ml，0.5%伊红Y(eosin yellowish)酒精溶液45ml，混合后，再加磷钨酸0.2g，饱和碳酸锂水溶液1滴。
EA50：3%亮绿水溶液10ml，纯甲醇250ml，20%伊红Y 水溶液20ml，冰醋酸20ml，磷钨酸2g (水溶后加入)，95%酒精700ml 。
染色方法1、经固定的涂片入水、苏木精染核、盐酸酒精分化、返兰同HE 染色。
2、70%、80%、95%酒精逐级脱水各1min。
3桔黄G6 3～5 min 。
4、95%酒精二缸漂洗各 1 min 。
5、EA36或EA50 5 min 。
6、95%酒精二缸漂洗各 1 min 。
7、无水酒精二缸漂洗各 1 min 。
8、二甲苯二缸透明各 1 min 。
9、中性树胶封片。
染色结果核深蓝色, 鳞状上皮底层、中层及表层角化前细胞浆染绿色，表层不全角化细胞胞浆染粉红色, 完全角化细胞胞浆呈桔黄色, 红细胞染鲜红色，粘液染淡蓝色或粉红色。
住院医师规范化培训考核项目操作标准：巴氏染色
项目
操作 准备
固定
操作 流程
核染色 胞浆染色
封片
操作后
效果评价
整体 评价
操作熟练 医技沟通
操作时间：10分钟
操作内容
评分
考评细则
固定液成分及浓度各3分， 使用95%的乙醇固定液进行湿固定15min 10 固定方法4分，不能说明的
不得分
清水浸洗固定液后，放入苏木素染色液 中3-5min，然后盐酸分化，45度热水返 蓝并观察染色效果。
30
浸洗10分，染色10分，分化 返蓝10分
浸入染色液中1min，逐级梯度乙醇脱水 并烘干。
20
浸染10分，脱水10分
浸入二甲苯中透明5秒，中性树胶封片 10 透明并封片操作各5分
细胞核效果 细胞浆效果 生物安全性操作规范 查对流程规范 器械整理
操作流畅，程序清楚，时间适宜 与技术员沟通有效，体现严谨细致
总 分：100分
5
细胞核染色层次、细节清 楚，否则不得分
5 染色层次清楚，否则不得分ຫໍສະໝຸດ 5 操作无误，不规范不得分
3 缺失该流程扣3分
2
归类器械，清理取材台，未 完成不得分
5
操作不流畅扣2分，超时扣2 分，程序颠倒扣1分
5 无医技沟通者扣5分
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巴氏染色液(Papanicolaou EA65)操作步骤及注意事项
货号：G1614
规格：4×100ml/4×500ml
有效期：6个月有效。
产品内容：
产品组成4×100ml4×500ml Storage
试剂(A):苏木素染色液100ml500ml RT避光
试剂(B):蓝化液100ml500ml RT
试剂(C):橘黄G6染色液100ml500ml RT避光
试剂(D):EA65染色液100ml500ml RT避光
产品说明：
细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法。
Papanicolaou Stain最初仅用于检测阴道上皮雌激素水平以及生殖道念珠菌、滴虫等病原体。
橘黄G6与EA36或EA50联用使用，可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色。
目前大多数实验室采用成品染液，所以每种染液应注意其改良后的最佳条件。
最终胞浆染色应透明可见，核染色质应很容易辨别出来。
目前改良的巴氏染色液含有多种离子，具有多色性染色效能。
染色后胞质鲜艳、透明性好以及核膜、核仁、染色质结构清晰。
细胞核染色液主要为Harris苏木素染液，细胞质染色液主要为EA36染液、EA50染液。
巴氏染色液用于细胞脱落标本，细胞核呈蓝色或黑色，角化鳞状细胞胞浆呈粉红或橘红色。
巴氏染色液(Papanicolaou EA50)细胞质染色采用EA50染色液，细胞核染色采用无毒改良型苏木素染色液，不仅适用于妇科细胞学涂片染色如筛查宫颈癌和癌前病变，也适用于胸水、腹水、痰液等非妇科细胞样本的染色。
自备材料：
1、固定液(如95%乙醇-冰乙酸固定液)
2、系列乙醇
3、显微镜
4、盐酸乙醇分化液
操作步骤(仅供参考)：
1、细胞涂片用95%乙醇-冰乙酸固定液固定10～15min。
2、95%的乙醇浸泡1min。
3、80%的乙醇浸泡1min。
4、70%的乙醇浸泡1min。
5、蒸馏水或自来水浸泡或冲洗1min。
6、苏木素染液染色5～10min。
7、自来水冲洗2min。
8、1%的盐酸乙醇分化液分化约4～5s或0.5%盐酸水溶液分化10s。
9、自来水冲洗2min。
10、蓝化液中蓝化2min。
11、自来水冲洗2min。
12、70%的乙醇脱水2min。
13、80%的乙醇脱水2min。
14、95%的乙醇(Ⅰ)、(Ⅱ)脱水各2min。
15、橘黄G6染液染色2min。
16、95%的乙醇(Ⅰ)、(Ⅱ)冲洗各2min。
17、EA65染色液染色3～5min。
18、95%的乙醇(Ⅰ)、(Ⅱ)脱水各1min。
19、无水乙醇(Ⅰ)、(Ⅱ)脱水各1min。
20、二甲苯透明，中性树脂封片。
染色结果：
细胞核蓝紫色或黑色
非角化细胞的胞质淡蓝色或淡绿色
角化细胞的胞质粉红或橘红色
注意事项：
1、所有染液均需过滤，需经常更换染液。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。