不同品种西兰花种子中莱菔硫烷的HPLC分析
西兰花种子中硫苷酶解产物萝卜硫素提取分离和结构鉴定
ＩＩ
／ｓ＼／＼／＼彩、
本课题以西兰花种子为原料，研究了西兰花种子中硫苷的酶解条件及 其产物萝卜硫素的提取、分离纯化工艺，并鉴定其结构，为开发萝卜硫素 相关产品奠定了基础。
通过研究溶剂、超声、脱脂对萝卜硫素提取的影响，确定了提高样品 中萝Ｉ－硫素含量的提取工艺：西兰花种子一粉碎一酶解８ｈ一冷冻干燥一丙 酮超声浸提６０ｍｉｎ－－－＊纱布过滤一滤液浓缩一水定溶一高速离心一Ｏ．２２Ｉ－ｔｍ水 系滤膜过滤一ＨＰＬＣ分析。
ｓｔｕｄｉｅｄ，ｗｈｉｃｈ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｔｈｅ ｇｒｏｕｎｄｗｏｒｋ ｆｏｒ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｓｕｌｆｏｒａｐｈａｎｅ ｐｒｏｄｕｃｔｓ．
Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｏｌｖｅｎｔ，ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ，ｄｅｆａｔｔｉｎｇ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｏｆ ｓｕｌｆｏｒａｐｈａｎｅ ｉｎ ｂｒｏｃｃｏｌｉ ｓｅｅｄ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｈａｖｅ ｍａｘｉｍｕｍ ｓｕｌｆｏｒａｐｈａｎｅ ｃｏｎｔｅｎｔ，ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ：ｔｈｅ
ｆｏｒ ６０ ｎｌｉｎｕｔｅ．Ｔｈｅ ｃｒｕｄｅ ａｃｅｔｏｎｅ ｅｘｔｒａｃｔ Ｗａｓ ｆｉｌｔｅｒ ａｎｄ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｄ ｉｎ ｖａｃｕｏ ｔｏ
ｄａｒｋ ｂｒｏｗｎ ｏｉｌ ｏｎ ａ ｒｏｔａｒｙ ｅｖａｐｏｒａｔｏｒ（３０℃）．Ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ Ｗａｓ ｗａｓｈｅｄ ｗｉｔｈ ａ
浙江丁＝商大学硕士学位论文
行，～般是种子／水（ｗ／ｖ）＝ｌ：２（ｇ／ｍＬ）比较好。 对于萝ｂ硫素样品的分离纯化工艺研究，首先用硅胶柱层析初步分离
硫苷酶解产物，然后再用Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ．２０凝胶柱层析纯化萝卜硫素粗样， 最后用制备型高效液相色谱仪制备萝卜硫素样品，收集萝ｂ硫素的馏分， 冷冻干燥后再用ＨＰＬＣ检测其纯度，结果表明样品中萝卜硫素的纯度达到 了９２．８＋１．２％。
HPLC法同时测定莱菔子中萝卜硫苷和4—甲基亚磺酰基—3—丁烯基硫代葡萄糖苷的含量
HPLC法同时测定莱菔子中萝卜硫苷和4—甲基亚磺酰基—3—丁烯基硫代葡萄糖苷的含量作者：高荣凯关亮俊任海东王敏李琦张宏桂来源：《中国药房》2018年第21期摘要目的：建立同時测定莱菔子中萝卜硫苷和4-甲基亚磺酰基-3-丁烯基硫代葡萄糖苷含量的方法。
方法：采用高效液相色谱法。
色谱柱为Welch Ultimate LP-C18，流动相为甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液（梯度洗脱），流速为1.0 mL/min，检测波长为235 nm，柱温为30 ℃，进样量为20 µL。
采用建立的方法测定5个产地共15批样品中萝卜硫苷和4-甲基亚磺酰基-3-丁烯基硫代葡萄糖苷的含量。
结果：萝卜硫苷、4-甲基亚磺酰基-3-丁烯基硫代葡萄糖苷进样量分别在0.248～3.960、0.903～14.442 µg（r≥ 0.999 6）范围内线性关系良好；检测限分别为0.009 9、0.003 5 µg，定量限分别为0.024 8、0.008 9 µg；精密度、稳定性（24 h）、重复性试验的RSD均关键词莱菔子；高效液相色谱法；萝卜硫苷；4-甲基亚磺酰基-3-丁烯基硫代葡萄糖苷；含量测定；产地中图分类号 R917；R284.1 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2018）21-2898-04DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.21.05ABSTRACT OBJECTIVE： To establish a method for simultaneous determination of glucoraphanin and 4-methylsulfoyl-3-butenyl glucosinolate in the seeds of Raphanus sativus. METHODS： HPLC was adopted. The determination was performed on Welch Ultimate LP-C18 column with mobile phase consisted of methanol-0.05 mol/L monobasic potassium phosphate （gradient elution） at the flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 235 nm，and column temperature was 30 ℃. The sample size was 20 µL. The established method was used to determine the contents of glucoraphanin and 4-methylsulfoyl-3-butenyl glucosinolate in 15 batches of samples from 5 producing areas. RESULTS： The linear range of glucoraphanin and 4-methylsulfoyl-3-butenyl glucosinolate were 0.248-3.960 and 0.903-14.442 µg （r≥0.999 6）， respectively. The detection limits were 0.009 9 and 0.003 5 µg， and limits of quantitation were 0.024 8 and 0.008 9µg， respectively. RSDs of precision， stability （24 h） and reproducibility tests were all lower than 2% （n=6）. The average recoveries were 99.83% and 100.40% （RSD=1.42%， 1.50%，n=6）. The average contents of 15 batches of glucoraphenin in the seeds of R. sativus from producing areas （Anhui， Gansu， Hebei， Shandong， Yunnan） were 1.881， 5.120， 3.634， 3.237 and 2.856 mg/g （n=3）. Average contents of 4-methylsulfoyl-3-butenyl glucosinolate were 37.561，46.389， 40.136， 37.000， 41.101 mg/g （n=3）. CONCLUSIONS： The established method is simple， accurate and repeatable， which can be used for content determination of glucoraphanin and 4-methylsulfoyl-3-butenyl glucosinolate in the seeds of R. sativus. Among samples of 5 producing areas， average contents of glucoraphanin and 4-methylsulfoyl-3-butenyl glucosinolate in the seed of R. sativus from Gansu province are the highest.KEYWORDS Seeds of Raphanus sativus； HPLC； Glucoraphanin； 4-methylsulfoyl-3-butenyl glucosinolate； Content determination； Producing areas莱菔子为十字花科植物萝卜（Raphanus sativus L.）的干燥成熟种子，具有消食除胀、降气化痰的功效，多用于饮食停滞、脘腹胀痛、大便秘结、积滞泻痢、痰壅喘咳等症[1]。
西兰花籽中萝卜硫苷的提取、分离及结构鉴定
西兰花籽中萝卜硫苷的提取、分离及结构鉴定
江敏;石林娟;杨毅
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2013(034)005
【摘要】研究一种从西兰花籽中提取分离萝卜硫苷(4-甲基亚磺酰丁基硫代葡萄糖苷)的方法.用甲醇溶液从西兰花籽中提取硫苷,经弱阴离子交换树脂纯化得到萝卜硫苷粗品,通过半液相制备色谱进一步分离纯化,制得萝卜硫苷纯品.利用液-质联用、核磁共振、红外光谱检测、紫外光谱检测等方法对其进行结构确定,结果符合萝卜硫苷的分子结构.此方法适用于萝卜硫苷的简单有效提取.
【总页数】3页(P124-126)
【作者】江敏;石林娟;杨毅
【作者单位】合肥工业大学农产品生物化工教育部工程研究中心,安徽合肥230009;合肥工业大学农产品生物化工教育部工程研究中心,安徽合肥 230009;合肥工业大学农产品生物化工教育部工程研究中心,安徽合肥 230009
【正文语种】中文
【中图分类】S377
【相关文献】
1.西兰花茎中硫苷的提取工艺研究 [J], 贾治勇;张素敏;贾阳希
2.亚麻籽中木脂素的提取分离与结构鉴定 [J], 邵云晓;裘爱泳;徐德平
3.西兰花籽中萝卜硫苷的HPLC分析 [J], 李银花;李娟;李海;张盛
4.油菜籽中硫苷的提取、结构鉴定及杀钉螺试验 [J], 易健民;钟明;施天益;冯新港
5.西兰花萝卜硫苷提取物的抑菌及体外免疫活性探究 [J], 张睿;于建丽;宋璇;闫媛媛;李超
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不同西兰花品种中硫代葡萄糖苷的组分与含量分析
3 讨论与结论
本研究的29个品种中，B18～B23为市场上流通的品种，总硫苷含量10.99～17.04 其他品种均为商品性优良的候选品种，其中B1～B3同一个母本，总硫苷含量9.34～11.00 B4、B5、B34、B40～B43同一个母本，总硫苷含量6.93～13.50 B6～B9同一个母本，总硫苷含量5.60～14.19 B10～B14同一个母本，总硫苷含量7.22～
能[11～15]，西兰花的营养保健价值受到越来越多科研人员的。
西兰花不同品种之间硫苷含量存在明显的差异，Vallej等[14]研究发现，生长条件一致的12个西兰花品种中，最高的硫苷含量为28.3 moLg干质量，下同 ，最低的仅3.0 moLg。因此，在西兰花品质育种中，硫苷组分与含量是一个值得的重要指标。本研究对24个综合表现优良的候选品种和5个市场上流通品种的硫苷组分和含量进行了测定与分析，以期为选育高硫苷含量的西兰花品种提供科学依据。
参考文献
[1] Oginsky E L， Stein A E，Greer M A. Myrosinase activity in bacteria as demonstrated by the conversion of progoitrin to goitrin[J]. Exp Bi～B17、B35、B44、B49同一个母本，总硫苷含量10.90～16.96 molg。由此可见，不同亲本的品种总硫苷含量都存在较大的变异范围，但B15～B17、B35、B44、B49这组品种的总硫苷含量与B18～B23这组市场上流通的商品种基本接近，都处于比较高的水平。前人研究证明，不同品种间由于基因型不同硫苷种类与含量存在差异[16]，本研究也说明不同基因型的品种硫苷含量存在差异，而B15这组品种的亲本在西兰花富硫苷的品质育种上或许更有利用价值。
一种hplc法测定十字花科蔬菜中萝卜硫素和莱菔素的方法与流程
一种hplc法测定十字花科蔬菜中萝卜硫素和莱菔素的方法与流程一、原理高效液相色谱法是一种分离和检测复杂混合物中特定成分的常用技术。
其原理是利用不同物质在固定相和流动相之间的分配系数差异进行分离，再通过检测器对分离后的成分进行检测。
本方法采用C18柱为固定相，甲醇和磷酸水溶液为流动相，进行梯度洗脱，以实现对萝卜硫素和莱菔素的准确定量分析。
二、材料与试剂1. 十字花科蔬菜样品2. 甲醇（色谱纯）3. 磷酸（分析纯）4. 超纯水5. 萝卜硫素标准品6. 莱菔素标准品三、仪器与设备1. 高效液相色谱仪（配备紫外检测器）2. 混合器3. 超声波清洗器4. 离心机5. 微孔滤膜（0.45μm）6. 容量瓶（10mL）7. 玻璃注射器（1mL）四、方法与步骤1. 样品制备：称取一定量蔬菜样品，清洗后切碎，加入混合器中破碎成匀浆。
将匀浆转移至离心管中，加入适量甲醇，超声提取20分钟。
离心（5000rpm，10分钟），取上清液，用微孔滤膜过滤，收集滤液。
滤液需在48小时内进行分析。
2. 标准溶液配制：准确称取萝卜硫素和莱菔素标准品，用甲醇溶解并定容至10mL容量瓶中，配制成一定浓度的标准溶液。
3. 色谱条件：色谱柱为C18柱（5μm，4.6mm×250mm）；流动相为甲醇-磷酸水溶液（0.01mol/L）（5:95）；流速为1.0mL/min；检测波长为254nm；柱温为30℃。
4. 梯度洗脱程序：在0-20分钟内，将流动相中的甲醇从0%线性增加至5%。
在20-30分钟内，保持5%甲醇。
在30-40分钟内，将甲醇恢复至0%。
5. 定量分析：分别取标准溶液、样品滤液及试剂空白进样，记录色谱图。
通过对比保留时间和峰面积，对样品滤液中的萝卜硫素和莱菔素进行定性及定量分析。
6. 结果计算：根据测得样品滤液中萝卜硫素和莱菔素的峰面积，使用标准曲线法计算其浓度。
通过以下公式计算样品中萝卜硫素和莱菔素的含量：含量（mg/kg）=（测得浓度×提取液体积）/样品重量。
西兰花种子水提物中萝卜硫素的抗炎功能研究进展
西兰花种子水提物中萝卜硫素的抗炎功能研究进展一、西兰花西兰花也叫青花椰菜（Brassicaoleacea)，英文名称Broccoli，是十字花科（Cruciferous）植物的一种，其硫代葡萄糖苷含量非常丰富，含有的硫苷以萝卜硫苷（4-甲基亚磺酰基丁烯基硫代葡萄糖苷(Glucoraphanin,RAA）和3﹣甲基亚磺酰基丙烯基硫代葡萄糖苷（Glucoiberin）)为主，其降解产物异硫代氰酸盐。
萝卜硫苷的降解产物主要以萝卜硫素（Sulforaphane)、萝ト硫素腈（Sulforaphanenitrile)、嚅唑烷硫酮(Goitrin,3甲基亚砜基异硫代氰酸盐（Iberin）为主，其中含量最高的是萝卜硫素。
萝卜硫素抗癌活性大，是一种多功能诱导物，可诱导机体产生I型解毒酶﹣谷光甘肽转移酶和醌还原酶，此酶可对许多致癌物产生抗性，从而起到抗癌作用。
但是萝ト硫素因其结构的特殊性，本身非常不稳定，在高溫或者碱性条件易发生分解。
图1：芸薹属蔬菜的主要生物活性及其生物活性化合物二、萝卜硫素萝卜硫素（Sulforaphane,SF）为萝卜硫苷(Glucoraphanin,RAA）的水解产物，广泛存在于十字花科植物中，是目前发现的防癌抗癌效果最好、效力最强的一种硫代葡萄糖单体，作为药品或功能食品的有效成分，具有较高的研究价值和广阔的应用前景。
目前国内外市场上主要以西兰花种子水提物为产品，提取物的主要成分为RAA，其药效成分SF的含量极低。
这是由于SF分子中存在不稳定的异硫氰酸酯结构，温度和氧气等因素都能够使其降解失活，极大地限制了SF的开发和应用。
采用赣州华汉生物科技有限公司的微胶囊技术，能将不稳定的SF包埋在高分子材料中，提高其稳定性，应用前景十分广阔。
华汉生物深耕天然植提行业多年，目前已申请了相关专利，“一种高纯度萝卜硫素的制备方法”已在国内率先实现成果转化。
三、西兰花种子中萝卜硫素的提取研究发现，西兰花虽然不是总硫代葡萄糖苷含量最高的蔬菜，但西兰花中硫代葡萄糖苷均具有较高的活性，酶解产物最高的是萝卜硫素。
不同品种西兰花种子中莱菔硫烷的HPLC分析
不同品种西兰花种子中莱菔硫烷的HPLC分析【摘要】目的建立西兰花种子中莱菔硫烷的HPLC含量测定方法。
方法色谱柱：Waters公司XBridgeTM C18 (150 mm×4.6 mm，5μm)；流动相：甲醇��水(体积比30∶70)；流速：1.0 mL/min；PDA检测器；检测波长：240 nm；柱温:30 ℃。
结果莱菔硫烷在14.6～292.5 μg/mL范围内线性关系良好，r=0.9994，平均回收率为97.32%（RSD=1.2%）。
结论本法简便、准确，重复性好，可用作西兰花种子的质量控制，为不同产地不同品种的西兰花种子的收购及栽培等提供有效监控依据。
【关键词】西兰花种子；莱菔硫烷；HPLC；含量测定Abstract:Objective To establish a method for content analysis of sulforaphane in broccoli seeds.Methods Samples were analyzed on a Waters XbridgeTM C18 (150 mm×4.6 mm，5 μm) column by using m ethanol��water (30∶70) as the mobile phase.The flow rate was 1.0 ml/ min.The detection wavelength was 240 nm.The column temperature was 30℃. Results The calibration curve was linear over the concentration of 14.6～292.5μg/ml for sulforaphane (r=0.9994).The average recovery of sulforaphane was 97.32% and RSD 1.2%.Conclusion The method is simple，accurate，reproducible and can be used for the quality control of broccoli seeds.Keywords:broccoli seeds；sulforaphane； HPLC西兰花又名绿花菜、青花菜等，为十字花科芸苔属甘蓝种中以绿色花球为产品的一个变种，一、二年生草本植物。
西兰花芽苗菜中莱菔硫烷的提取及含量变化趋势的研究_李扬
粮油加工
2009 年第 2 期 111
技术·食品工程 ＞＞＞
CEREALS AND OILS PROCESSING
生长不同天数的新鲜的西兰花芽苗菜， 经鼓风烘 干后粉碎过 100 目筛。 称取 10g， 加入用盐酸调 pH 值 到 4 的含有 Vc （0．02 mg ／ mL） 的水， 料液比 1∶3， 振荡 8h （25℃、 180r ／ min）。 冷 冻 干 燥 得 粉 末 ， 粉 末 加 入 二 氯甲烷浸提 4h， 抽虑除去粉末， 粉末 再用 二 氯 甲 烷 浸 提 4h。 合并两次二氯甲烷提取 液， 滤纸 过 滤 ， 再 加 入 二氯甲烷进行萃取， 分液漏洞中分层， 取二氯甲烷层， 旋转蒸发浓缩得莱菔硫烷的样品， 甲醇定容后， 0．22μm 水系膜过滤， 样品至于－20℃冰箱中待用。
色谱条件 ： Kromasil C185μ， 250×4．6mm， 检测波 长 ： 201nm； 进 样 量 ： 20μL； 柱 温 25℃ ； 分 析 时 间 ： 30min。 流动相： 甲醇∶水＝ 4∶6； 流速： 1mL ／ min。
标 准 曲 线 的 绘 制 ： 移 液 枪 准 确 移 取 0．5mL 的 甲 醇 于 规 格 为 5mg 的 莱 菔 硫 烷 标 准 品 中 ， 配 制 成 浓 度 为 10mg ／ mL 的 标 准 溶 液 ， 摇 匀 后 取 5μL、 7．5μL、 10μL、 12．5μL、 15μL、 17．5μL、 20μL 于 1．5mL 的 离 心 管 中 ， 再 用 色 谱 级 甲 醇 溶 液 定 容 至 100μL， 即 莱 菔 硫 烷 的 浓 度分别相当于 0．5mg ／ mL、 0．75 mg ／ mL、 1 mg ／ mL、 1．25 mg ／ mL、 1．5 mg ／ mL、 1．75 mg ／ mL、 2 mg ／ mL， 对每个浓 度进行 HPLC 检测， 条件同上， 进样 量都 为 10μL。 以 莱菔硫烷浓度为横坐标， 它们的峰面积为纵坐标， 做 出标准曲线。 根据标准曲线就可以把莱菔硫烷所对应 的峰面积换算出样品中莱菔硫烷的浓度。 2．3 不同发芽阶段的西兰花芽苗菜莱菔硫烷提取 液的 制备
青花菜中莱菔硫烷含量遗传分析、QTL定位及相关基因研究
青花菜中莱菔硫烷含量遗传分析、QTL定位及相关基因研究青花菜(Brassica oleracea var. italica)，又名西兰花、西班牙芥蓝等，是十字花科（Cruciferae）芸薹属（Brassica）一、二年生草本植物，甘蓝类蔬菜的一个变种。
青花菜富含硫代葡萄糖苷（Glucosinolate，GS，简称“硫甙”）成分4-甲基亚磺酰基丁基硫甙（Glucoraphanin，RAA），其水解产物莱菔硫烷（Sulforaphane，SF）是迄今为止在蔬菜中发现的抗癌活性最强的活性成分之一。
研究发现，莱菔硫烷能够显著降低肝癌、胃癌、肺癌、乳腺癌、膀胱癌等多种癌的患病率，同时能够预防心脑血管疾病的发生。
目前，国内外对莱菔硫烷的医学价值报道较多，而对甘蓝类蔬菜作物中莱菔硫烷含量水平和资源筛选，青花菜整个生育过程中莱菔硫烷含量变化规律，青花菜花球中莱菔硫烷含量的遗传效应、QTL定位和相关基因在青花菜中的表达调控研究鲜有报道。
本研究以甘蓝类蔬菜变种（甘蓝、青花菜、芥蓝和苤蓝），青花菜DH群体（176份）和六世代群体（P1、P2、F1、B1、B2和F2）为材料，对甘蓝类蔬菜变种的可食性器官和非可食性部分中莱菔硫烷含量进行了检测和分析，研究了青花菜整个生长发育过程不同器官中莱菔硫烷含量变化规律，青花菜DH群体和六世代群体花球中莱菔硫烷含量的遗传效应，构建了基于青花菜DH永久群体的较高密度的遗传连锁图谱，并对青花菜花球中莱菔硫烷含量进行了QTL定位，最后对青花菜莱菔硫烷含量相关调控基因进行了RT-PCR表达分析和相关性分析，构建了CYP79F1和AOP2超表达和RNAi表达载体。
主要研究结果如下：（1）构建了用于测定甘蓝类蔬菜中莱菔硫烷成分的RP-HPLC检测体系和UPLC-MS/MS鉴定体系，并采用正交设计L9（34）优化了莱菔硫烷提取方法。
结果表明采用梯度洗脱法检测莱菔硫烷成分，在标准浓度范围内线性方程良好：Y=3.69e-004X-1.26（R2=0.9994），回收率为96.2%（n=6），精密度良好（RSD=2.50e-9%，n=6）。
西兰花种子莱菔硫烷
西兰花种子莱菔硫烷西兰花是一种在中国十分普遍的蔬菜，也是人们生活中经常食用的蔬菜之一。
而要想种植出高质量的西兰花，除了需要注意肥料、光照、水分等方面的控制以外，还需要使用一种叫做“莱菔硫烷”的种子处理剂。
本文将详细介绍莱菔硫烷的作用机理、使用方法以及在西兰花种植中的应用。
莱菔硫烷是一种种子处理剂，主要成分是四硫咪。
四硫咪是一种杀菌剂，可以有效地抑制种子表面菌斑的形成，降低种子与土壤中的病菌感染的风险，从而提高西兰花的育苗率和产量。
莱菔硫烷的使用方法很简单。
首先将要处理的西兰花种子放入一个塑料袋中，加入适量的莱菔硫烷和10%的湿度调节剂，然后将塑料袋密封，轻轻摇晃几下，使种子和处理剂充分混合。
接下来将处理好的种子取出，放在室温下晾干，即可投入土壤中种植。
莱菔硫烷的使用对西兰花种植的影响非常显著。
首先，它可以有效地防止种子和土壤中的病菌感染，保证了西兰花苗的健康生长。
其次，莱菔硫烷还能促进种子的萌发和生长，使西兰花苗长势更加旺盛。
最后，由于西兰花的谷蓝蛋白是在育苗期形成的，使用莱菔硫烷可以提高育苗期的生长质量，最终增加西兰花产量。
虽然莱菔硫烷对西兰花的生长起到了显著的促进作用，但我们在使用时还需要注意以下几点。
首先，莱菔硫烷是一种有毒的化学物质，因此在使用时需要注意安全，避免直接接触皮肤和眼睛，注意避免误食。
其次，在使用时一定要按照说明书的用量进行，过多使用可能会对西兰花产生不良影响。
最后，使用莱菔硫烷的过程中需要注意保持环境通风，并且在处理后应该将废弃的袋子和种子垃圾妥善处理，避免对环境造成污染。
总的来说，莱菔硫烷是一种对西兰花生长有显著促进作用的种子处理剂。
它能够有效地防止病菌感染、促进种子的萌发和生长，提高西兰花的产量。
但在使用时需要注意安全，按照说明书用量和方法进行操作，避免造成环境污染。
莱菔硫烷的提取、测定及功能研究
莱菔硫烷的提取、测定及功能研究
马天芳;于淑兰;于明月;张来俊;任肖艳
【期刊名称】《山东化工》
【年(卷),期】2022(51)5
【摘要】莱菔硫烷(Sulforaphane,SF)也称为萝卜硫素,是由富含于十字花科蔬菜中的硫代葡萄糖苷(Glucoraphanin,GRA)经黑芥子酶酶解作用产生的一类异硫氰酸酯物质。
莱菔硫烷具有一系列独特的生物活性,是目前为止发现的最有效的PhaseⅡ酶诱导剂之一,能有效发挥抗癌作用。
因此,科研工作者对莱菔硫烷展开了深入的研究。
本综述主要是对近年来有关莱菔硫烷的提取、含量测定及功能等方面研究进行了总结,从而为后期莱菔硫烷的提取条件及防癌机制的探究提供参考。
【总页数】3页(P120-122)
【关键词】莱菔硫烷;提取工艺;高效液相色谱法;抗氧化功能;抗癌活性
【作者】马天芳;于淑兰;于明月;张来俊;任肖艳
【作者单位】潍坊职业学院化学工程学院
【正文语种】中文
【中图分类】O657.7
【相关文献】
1.UPLC-MS/MS快速测定甘蓝类蔬菜中活性成分莱菔硫烷
2.莱菔硫烷对染镉小鼠睾丸间质细胞抗氧化功能影响的研究
3.莱菔硫烷脱毒和抗氧化功能研究进展
4.蔬
菜中莱菔硫烷提取工艺的正交优选5.十字花科蔬菜中莱菔素与莱菔硫烷含量测定方法研究
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西兰花中提取的萝卜硫苷的稳定性研究_王向阳
SPD- 20A 高 效 液 相 色 谱 仪 ： 岛 津 公 司 ；
SHZ- 82 恒温振荡器：国华企业；LOOYE ZX98- 1 旋转蒸发仪：Buchi 公司；DELTA 320pH 计：梅特 勒 - 托利多仪器有限公司。 1.3 方法 1.3.1 萝卜硫苷 HPLC 检测条件的确定及萝卜硫苷 出峰时间和芥子苷标准曲线的制作 色谱条件：岛 津高效液相色谱仪，包括 LC- 20AT 泵，SPD- 20A 紫外检测器，RP- 18C 分析柱。流动相：5 mmol/L 四甲基溴化铵∶甲醇 =9∶1；流速 0.8 mL/min，柱温 25 ℃，进样量 10 μL，检测波长 227 nm。
Abstract: Objective: The effect of temperature, pH value, illumination and Ascorbic acid Vc on stability of
glucoraphanin (4-methylsulfinyl-butyl glucosinolate) was studied. Method: The glucoraphanin extractions were processed at different temperatures (70, 80, 100, 120 ℃ ) for 0.5 ～4 h respectively. The pH values of the extractions were changed at 4, 5, 6, 6.6 and stored for 9 d respectively. Compare experiments between illumination and dark, adding Ascorbic acid and no adding for the glucoraphanin extractions storage condition were carried out. The content of glucoraphanin was measured by HPLC. Result: The content of glucoraphanin of 120 ℃ treatment decreased from 0.098 mg/mL to 0.0855 mg/mL after 1 hour, and glucoraphanin was relative stable when treatment temperature no more than 100 ℃. The content of glucoraphanin decreased to less than 0.03 mg/mL when it was stayed at the condition of pH value less than 6 for 9 d, but the content of glucoraphanin still remained at 0.0806 mg/mL when pH of the extraction was 6.6. The content of glucoraphanin was 0.0548 mg/mL when the extraction was illuminated for 9 d. If it was stored in dark for 9 d, it remained at
西兰花种子提取物及其制剂工艺的研究
根据制剂原料的理化性质，结合片剂本身特点，通过对辅料的筛选，确定西兰花 提取物片的制剂工艺为：先将微晶纤维素、淀粉、ＣＭＣ－Ｎａ 按（２０：２０：１）的比例混 合；柠檬酸溶解在西兰花浓缩液中，调节 ｐＨ 值为 ３．５；然后将该浓缩液加入到混匀的 辅料中，搅拌均匀，加入 ３０％ 乙醇制软材，挤压过 １６ 目筛制粒，４０℃烘箱干燥 ２ｈ， 取出过筛整粒，加入 １％硬脂酸镁混匀，压片，每片片重 ０．５ｇ，片厚 ２．１ｍｍ－２．２ｍｍ。 将 压得的片子筛去细粉，投入包衣锅中包白色 ｏｐａｄｙｒ 薄膜衣，即得西兰花种子提取物 薄膜衣片。采用高效液相色谱法对制剂中的主要有效成分莱菔硫烷进行含量测定，西 兰花种子提取物片中莱菔硫烷的含量不得少于 １ｍｇ／片。
According the physical and chemical properties of sulforaphane and combination the the data of the stability, the eluate was selected, sulforaphanusing was seprated using silica gel column after three times .The purity of sulforaphane monomer was detected by high performance liquid chromatography ,the result is 95.29%.
2在加样回收率实验中样品的制备采取水解后再加入对照品的方法若先加入对照品则对照品溶液中的乙腈会使种子中的黑芥子酶灭活从而使莱菔硫烷等异硫氰酸盐无法水解生成故测定加样回收率时采取水解后再加入莱菔硫烷对照品的方3莱菔硫烷对照品室温下在甲醇中会随时间慢慢降解但是种子样品中的莱菔硫烷在甲醇中室温下8h内含量稳定未发生降解分析其原因可能是因为种子中的其它种类的异硫氰酸盐更易于oh发生反应而降解从而延缓了莱菔硫烷的降解
西兰花种子水提物,究竟对癌症有什么好处？
西兰花种子水提物，究竟对癌症有什么好处？
前几天说到基能营养粉成分中蛋白质用料的门道：
和普通蛋白粉及其他同类营养粉类相比，基能营养粉选用了更适合肿瘤患者肠胃功能的分离乳清蛋白，这种蛋白质具有蛋白质比例更高，脂肪含量更低，且无乳糖避免不耐受导致腹泻等等优势，这些优势使得分离乳清蛋白这一原料和普通的乳清蛋白、大豆蛋白相比，价格要贵上很多
但在基能营养粉中，价格最为昂贵的“贵族”原料并不是分离乳清蛋白，而是它：西兰花种子水提物。
这种成分由于和其他成分相比价格高昂，因此在很多同类产品中并不会添加。
但是贵有贵的道理，这种西兰花种子水提物究竟对肿瘤患者有什么好处呢？
（下文内容均来自网络文献）
西兰花种子水提物起作用的物质为其中的SFN（菜菔硫烷）研究表明，SFN可以通过调节致癌物代谢酶和阻断诱变剂的作用来进行DNA保护；抑制细胞增殖和诱导凋亡，从而延缓或消除起始的，转化的和/或肿瘤细胞的克隆扩增；抑制新血管发生，良性肿瘤进展到恶性肿瘤和转移形成肿瘤治疗药物。
SFN与肿瘤的关系研究正成为肿瘤学和营养学研究的热点。
SFN除具有抗肿瘤作用外，还具有抗氧化损伤、免疫调节、抗菌作用，并且可以有效改善肥胖、缓解糖尿病引发的相关疾病。
另外，有实验表明，莱菔硫烷具有良好的神经保护作用，一定程度改善阿尔茨海默病（alzheimer's disease，AD）所致的神经损伤。
2017年5月31日，西兰花种子水提物被国家卫计委批准为新食品原料，国内应用得到肯定。
并且SFN 与肿瘤的关系研究正成为肿瘤学和营养学研究的热点。
基于抗肿瘤方面的作用，西兰花种子水提物在保健食品行业中的应用将更加广泛。
#肿瘤#癌症肿瘤#癌症#抗癌#抗癌日記#癌症日记#化疗。
十字花科蔬菜中莱菔素与莱菔硫烷含量测定方法研究
十字花科蔬菜中莱菔素与莱菔硫烷含量测定方法研究作者：蔡达王玉涛王文博来源：《山东农业科学》2022年第01期摘要：為快速、准确定性定量十字花科蔬菜中的活性成分莱菔素与莱菔硫烷，本试验建立了超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）同时测定萝卜、西兰花、白菜中莱菔素与莱菔硫烷含量的方法。
采用水解-乙酸乙酯提取莱菔素和莱菔硫烷，WatersACQUITYUPLCBEHC18色谱柱（100mm ×2.1mm，1.7μm）分离，流动相A为0.1%甲酸-水溶液，流动相B为乙腈，梯度洗脱，质谱采用电喷雾正离子（ESI+）电离，多反应监测扫描模式（MRM）。
莱菔素与莱菔硫烷在5～500μg/L浓度范围内具有良好的线性关系，添加回收率分别在82.09% ～107.42%、89.79% ～105.55%，相对标准偏差（RSD）分别在2.16% ～4.80%、1.52% ～4.96%，检出限分别为0.5、0.4μg/L。
该方法准确度、精密度和灵敏度均满足定性定量分析的要求，可以准确测定十字花科蔬菜中莱菔素和莱菔硫烷的含量。
关键词：十字花科蔬菜;莱菔素;莱菔硫烷;超高效液相色谱-串联质谱中图分类号：TS207.3 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2022）01-0144-08十字花科植物因花冠呈十字型而得名，属于双子叶植物纲，五桠果亚纲，白花菜目中的一科，约有388个属，3700余种，现已被引种到世界各地。
常见的十字花科蔬菜主要有芸薹属的白菜、西兰花、甘蓝，以及萝卜属的萝卜等。
流行病学研究发现，十字花科蔬菜具有防癌抗癌的作用，随着十字花科蔬菜摄入量的增加，可以明显降低多种恶性肿瘤的发病风险，包括肺癌、肝癌、结肠癌等[1-4]，此外，十字花科蔬菜还有抗氧化、抗衰老、预防心脑血管疾病的功效[5-9]，具有重要的营养保健价值，备受广大消费者青睐。
与其它蔬菜相比，十字花科蔬菜突出的防癌抗癌功效主要归功于其含有大量的异硫氰酸酯类物质，如莱菔素和莱菔硫烷等[10]。
西兰花籽中萝卜硫苷的HPLC分析
西兰花籽中萝卜硫苷的HPLC分析李银花;李娟;李海;张盛【期刊名称】《福建分析测试》【年(卷),期】2016(025)003【摘要】建立了西兰花籽中萝卜硫苷的高效液相色谱测定方法.色谱条件为:Ecosil C18(200 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱;0.1％甲酸水溶液-甲醇溶液(98:2,V/V)为流动相,等梯度洗脱;检测波长225 nm;流速为1.0 mL/min;柱温30℃.在该色谱条件下萝卜硫苷与其他物质得到了有效的分离,且萝卜硫苷在0.196～7.84 μg范围内与峰面积有良好的线性关系,R=0.99997,萝卜硫苷回收率在97.91％～101.02％之间.该方法重复性好、精密度高、回收率较好,可作为西兰花籽提取物中萝卜硫苷的定量测定方法.【总页数】5页(P24-28)【作者】李银花;李娟;李海;张盛【作者单位】国家植物功能成分利用工程技术研究中心/湖南农业大学茶学教育部重点实验室,湖南长沙410128;国家植物功能成分利用工程技术研究中心/湖南农业大学茶学教育部重点实验室,湖南长沙410128;长沙三福生物科技有限公司,湖南长沙410126;国家植物功能成分利用工程技术研究中心/湖南农业大学茶学教育部重点实验室,湖南长沙410128【正文语种】中文【中图分类】O657.7【相关文献】1.西兰花籽中萝卜硫苷的提取、分离及结构鉴定 [J], 江敏;石林娟;杨毅2.不同烹饪方式下烹饪时间对西兰花中萝卜硫苷和萝卜硫素的影响 [J], 卢旭;马绍英;李胜;张聪聪;包金玉;张秀民3.西兰花萝卜硫苷提取物的抑菌及体外免疫活性探究 [J], 张睿;于建丽;宋璇;闫媛媛;李超4.白光和红光光周期对西兰花芽苗菜生理生化和萝卜硫苷代谢的影响 [J], 赵西连;庄莉;肖军霞;李晓丹;郭丽萍5.白光和红光光周期对西兰花芽苗菜生理生化和萝卜硫苷代谢的影响 [J], 赵西连;庄莉;肖军霞;李晓丹;郭丽萍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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不同品种西兰花种子中莱菔硫烷的
HPLC分析
(作者：__________ 单位：__________ 邮编： __________ )
作者：张婵娟，郭晓玲，孟青，冯毅凡
【摘要】目的建立西兰花种子中莱菔硫烷的HPLC含量测定方法。
方法色谱柱：Waters 公司XBridgeTM C18 (150 mn K 4.6 mm,5 卩m); 流动相：甲醇拟水(体积比30 : 70);流速：1.0 mL/min; PDA检测器；检测波长：240 nm 柱温:30 C。
结果莱菔硫烷在14.6〜292.5卩g/mL范围内线性关系良好尸0.9994 ，平均回收率为97.32%
(RSD=1.2%。
结论本法简便、准确，重复性好，可用作西兰花种子的
质量控制，为不同产地不同品种的西兰花种子的收购及栽培等提供有效
监控依据。
【关键词】西兰花种子；莱菔硫烷；HPLC含量测定
Abstract:Objective To establish a method for content an alysis of sulforapha ne in broccoli seeds.Methods Samples were analyzed on a Waters XbridgeTM C18 (150 mm x 4.6 mm,5 卩m) column by using methanol 拟water (30 : 70) as the mobile
phase.The flow rate was 1.0 ml/ min .The detection wavelength
was 240 nm.The column temperature was 30 °C . Results The calibrati on curve was lin ear over the concen trati on of 14.6 〜292.5 卩g/ml for sulforaphane (r=0.9994).The average recovery of sulforapha ne was 97.32% and RSD 1.2%.C on clusi on The method is simple,accurate,reproducible andean be used for the quality con trol of broccoli seeds.
Keywords:broccoli seeds ; sulforaphane ; HPLC
西兰花又名绿花菜、青花菜等，为十字花科芸苔属甘蓝种中以绿色花球为产品的一个变种，一、二年生草本植物。
20世纪50年代，西兰花就已经成为国际上最受欢迎的抗癌抗衰老的十字花科蔬菜，并被誉为“防癌新秀” [1]。
西兰花中所含的来服硫烷、烯丙基异硫氰酸盐、苯乙基异硫氰酸盐等异硫氰酸盐类化合物可以有效地预防肝癌、肺癌、前列腺癌、乳腺癌、直肠癌、胃癌等癌症［2, 3］。
而其中的莱服硫烷是目前发现的抗氧化、防癌、抗癌活性最显著的异硫氰酸盐类化合物，是一种有效的保护酶诱导物，能够防护致癌化合物引起的伤害，也因此有开发成抗癌药或保健品的价值，具有较为广阔的市场前景［4］。
有关十字花科植物中莱服硫烷的含量测定已有文献报道［5, 6］，本研究对不同产地不同品种的西兰花种子中莱服硫烷的含量进行了比较，方法
简便准确，重复性好，可用作西兰花种子的质量控制，为不同产地不同品种的西兰花种子的收购及栽培等提供有效监控依据。
1仪器与试药
1.1仪器
Waters 2695/2996高效液相色谱仪；Empower色谱工作站；十万分之一电子天平（Sartorius）；KQ；【250B型超声波清洗器（昆山市超声波仪器厂）；FW180密封式高速超细粉碎机（上海市国创建筑机械厂）。
1.2试剂与试药
甲醇（色谱纯，英国TEDIA公司）;三蒸水（自制）；莱菔硫烷对照品（sigma公司，含量〉98%）;实验所用样品见表1,经本院生药教研室鉴定均为西兰花种子。
表1不同品种西兰花种子样品（略）
Tab.1 Sample of differe nt kinds of broccoli seed
2方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱：Warers 公司产XbridgeTM C18 （150 mm< 4.6 mm,5 卩m）;流动相：甲醇拟水（体积比30：70）；流速：1.0
mL/min ;检测波长：240 nm;进样量：10卩L;柱温30 C。
2.2对照品溶液的制备
精密称取莱菔硫烷对照品5.85 mg ,置20 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，得到质量浓度为292.5卩g/mL的对照品溶液。
2.3供试品溶液的制备
取不同品种的西兰花种子，粉碎成粉末，过20目筛,取粉末0.3 g,精密称定，加1 mL蒸馏水，超声30 min后，置35 C水浴水解4 h,加入10 mL甲醇，超声30 min后，滤过，滤渣用约8 mL甲醇分3次洗涤，合并滤液并定容至20 mL。
再经0.45卩m滤膜滤过得供试品溶液。
2.4系统适用性试验
分别吸取对照品及西兰花药材溶液各10 L，注入液相色
谱仪。
在此条件下，莱菔硫烷色谱峰与其相邻组分峰达到基线分离，理论塔板数以莱菔硫烷计不低于 5 300。
见图1。
A.莱菔硫烷对照品；
B.西兰花种子样品
图1 HPLC色谱图（略）
Fig.1 HPLC chromatogram
2.5线性关系考察
精密量取“ 2.3 ”项下储备液分别用甲醇稀释制成质量浓度
为14.6、58.5、117.0、175.5、234.0 和292.5 卩g/mL 的对照品溶液，分别进样20卩L,以峰面积(A )对质量浓度(p )进行回归分析，得回归方程:A=3 743.7 p -2 878.2,r=0.999 4 。
结果表明莱菔硫烷的质量浓度在14.6〜292.5卩g/mL范围内与峰面积线性关系良好。
2.6重复性试验
精密称取1号种子粉末6份，按“2.4 ”项下制备，依法测定莱菔硫烷的含量。
结果平均含量为 1.4014%,RSD为0.49%<
2.7中间精密度试验
精密吸取浓度为292.5卩g/mL的对照品溶液10卩L,重复进样6次，以莱菔硫烷峰面积计算，RSD=0.14%表明中间精密度良好。
2.8稳定性试验
取重复性试验中同一浓度供试品溶液室温下放置，于0、2、4、6、8h后依法测定莱菔硫烷的含量，结果其RSD直为0.84%，表明样品溶液在8 h内测定结果稳定。
2.9加样回收率试验
精密称取9份已知含量的1号种子样品0.15 g,按“ 2.4
项下，同法制成供试品溶液。
经0.45卩m微孔滤膜过滤，各取续滤液0.5 mL,分别置于25 mL量瓶中，分别加入不同量的质量浓度为
292.5卩g/mL的莱菔硫烷对照品溶液0.1、0.2、0.3 mL ,甲醇定容
至刻度。
按“ 2.1 ”项下色谱条件测定莱菔硫烷的含量，结果平均回收率为97.32%,RSD为 1.20%,见表2。
表2莱菔硫烷加样回收率试验（略）
Tab.2 The results of recovery test
2.10样品的含量测定
取不同品种的西兰花种子按“ 2.4 ”项下，同法制成供试品溶液，依法测定，结果见表3。
3讨论
3.1从表3可以看出，不同品种的西兰花种子中莱菔硫烷的含量有明显差别，台湾和日本进口的西兰花种子莱菔硫烷的含量明显没有我国的高，但是我国产的几种西兰花种子中莱菔硫烷的含量也有较大差别。
本方法简便、准确，可作为西兰花种子的质量控制，同时为不同产地的西兰花种子的收购及栽培等提供有效依据。
表3西兰花种子中莱菔硫烷的含量（略）
Tab.3 Con te nts of sulforapha ne in broccoli seeds
3.2制备供试品溶液采用的前处理过程的原理是：异硫氰酸盐以其前体芥子油苷的形式存在于西兰花种子中，完整的芥子油苷没有防癌活性，莱菔硫烷等异硫氰酸盐是由西兰花种子中的芥子油苷经过内
源性黑芥子酶水解才能产生；粉碎种子过程中，随着种子细胞壁的破碎
内源性黑芥子酶得以释放出来］2］。
故本试验关键步骤是水解，本试验采用正交试验筛选出了最佳的水解条件；由于甲醇会使黑芥子酶
灭活,故测定加样回收率时采取水解后再加入莱菔硫烷对照品的方法。
【参考文献】
:1］季宇彬，池文杰，邹翔，等.西兰花中萝卜硫素提取、分离与抗癌活性研究］J ］•哈尔滨商业大学学报：自然科学
版,2005,21(3):270-273.
:2］单毓娟.十字花科蔬菜的癌症预防作用］J ］.国外医
学卫生学分册,2005,32(5):269-273.
:3]王舒然，夏薇.莱菔硫烷与肿瘤]J].疾病控制杂
志,2004,8 (5) :452-455.
:4 ] LAURENCES，PENGFEI L，SOLANGEL，et al . Sulforapha ne,a n atural occurri ng isothiocya nate ，in duces cell cycle arrest and apoptosis in HT29humancolon cancer cells
[J]. Cancer Research,2000，60(5):1426 .
［5］梁浩，袁其朋，东惠茹，等.十字花科植物种子中莱菔硫烷含量的比较］J］.中国药学杂志，2004,39(12):898.
:6］胡晔，梁浩，袁其明.十字花科植物种子中莱菔硫烷
的薄层色谱鉴别［J］.北京化工大学学报：自然科学版，2000,6 (2): 237-238.。