三七茎、叶中皂苷类成分的含量测定
RP-HPLC法测定三七叶中皂苷成分的含量
世界最新医学信息文摘 2019年 第19卷 第69期119投稿邮箱:zuixinyixue@·药物研究·RP-HPLC 法测定三七叶中皂苷成分的含量覃佩莉,林海英(通讯作者)(广西白云山盈康药业有限公司,广西 南宁 530002)0 引言三七叶为五加科植物三七Panax notoginseng (Burk )F.H.Chen 的干燥叶,具有止血、消肿、止痛之功效,对吐血、外伤出血、痈肿毒疮等具有很好的治疗作用。
本品质量标准收载于广西壮药材质量标准第二卷(2011年版)[1],标准未对其中的活性成分进行含量测定控制,存在不足。
文献报道[2]三七叶中含有多种活性成分,包括三七皂苷R 1、人参皂苷Rg 1、人参皂苷Rb 1等,本实验参照药典方法[3]采用RP-HPLC 法测定三七叶中的三七皂苷R 1、人参皂苷Rg 1、人参皂苷Rb1成分,方法准确、可靠,可用于三七叶的质量控制。
1 仪器、样品岛津高效液相色谱仪(LC-20ATVP );对照品:三七皂苷R 1、人参皂苷Rb 1、、人参皂苷Rg 1,中国食品药品检定研究院提供;乙腈色谱纯;纯化水;其它试剂为分析纯;三七叶为广西靖西和云南产。
2 方法与结果2.1 色谱条件、系统适用性实验。
照现行版中国药典第四部通则高效液相色谱法,用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相A 、B 分别为乙腈、水,按拟定的方法梯度浓度洗脱;检测波长为206 nm 。
理论板数按三七皂苷R 1峰计算应不低于5000,见表1。
表1 色谱条件、系统适用性实验时间(分钟)流动性A(%)流动性B(%)0-16188216-8518→3982→61注:a)专属性试验。
2.2 取三七皂苷R 1、人参皂苷Rg 1、人参皂苷Rb 1对照品适量,精密称定,加甲酵制成每l mL 各含0.2 mg 的对照品混合溶液;取三七叶粉末(过四号筛)1 g ,精密称定,精密加入甲酵50 mL ,称定重量,超声处理(功率350 W ,频率50 kHz )60 min ,放冷,用甲醇补足减失重量,摇匀滤过,吸取续滤液25 mL ,蒸干,蒸干后的固体物加水15 mL 使溶解,用水饱和的正丁醇液提取3次,每次15 mL ,合并正丁酵液,蒸干,固体物加甲醇溶解,转移于25 mL 容量瓶中,用甲醇加至刻度,摇匀滤过,作为供试品溶液。
广西三七中皂苷成分的含量测定及其变化
广西三七中皂苷成分的含量测定及其变化
刘华钢;梁秋云;赖茂祥;黄慧学
【期刊名称】《中国实验方剂学杂志》
【年(卷),期】2006(12)5
【摘要】目的:高效液相色谱法测定不同药龄、不同月份生育期的广西三七中皂苷的含量,并考察其变化规律,为广西三七的质量评价提供依据。
方法:采用HPLC 法,Shim-pack CLC-ODS柱分离,流动相:乙腈与水梯度洗脱,检测波长203nm,柱温:室温,流速1mL/min。
结果:不同药龄、不同月份生育期的广西三七中人参皂苷
Rg1、Re、Rb1和三七皂苷R1的含量有明显差异,4年药龄的广西三七10月份采收三七皂苷含量最高。
结论:所建立的高效液相色谱法灵敏度高,专属性强,重复性好,能准确、快速地进行含量测定;药龄及月份生育期是影响广西三七皂苷含量的重要因素。
【总页数】3页(P5-7)
【关键词】HPLC;三七;人参皂苷;三七皂苷;采收期
【作者】刘华钢;梁秋云;赖茂祥;黄慧学
【作者单位】广西医科大学;广西中医药研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.三七中三种皂苷含量测定方法的比较研究 [J], 张涛;冯一凡;张明
2.HPLC法测定三七中人参皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量 [J], 李华丽;王小龙;李梅荣;叶晓亚
3.HPLC-ELSD 法测定含三七中成药的皂苷成分的含量 [J], 王芮;郭华
4.超高效液相色谱法测定三七中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的含量 [J], 谢耀轩;林亚珠
5.HPLC法测定三七中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1的含量 [J], 何书平
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hplc测定三七花叶颗粒中人参皂苷rb3的含量
∂1
∏
√
1 回收甲醇至干 以下按供试品溶液制备方
法从 / 回收溶剂至干 残渣用水
溶解后用
乙醚萃取 次 , , 0起 同方法操作 ∀ 试验重复
次 计算回收率 ∀ 结果见表 ∀
表 三七花叶颗粒中人参皂苷 加样回收率
样品中含量 测得量 回收率 平均值
≥⁄
1
1111来自111
1
1
1
1
1
1
1
1
1
注 加入量均为 1
为1 ∀
218 加样回收试验 分别精密称取已测知含量的
样品 批号
置具塞锥形瓶中 ∀ 精密
加甲醇
密塞 称重 超声提取
放冷
用甲醇补足失重 滤过 ∀ 精密吸取续滤液
精
密加入人参皂苷 对照品溶液 1 #
第 卷第 期 年月
中国中药杂志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Μ ατερια Μ εδ ιχα
性 但应注意选择柱的品牌 保证样品的分离度 ∀ 在
人参皂苷 洗脱后还有较多成分未洗出 使用等
度条件洗脱时间很长 在人参皂苷 出峰后可使
用乙腈 2水 Β 作为流动相进行洗脱 ∀
≈参考文献
≈ 国家中医药管理局中华本草编委会 1中华本草 ≈ 1第 册 1
上海 上海科学技术出版社
1
≈ 张雯洁 张赟华 李忠琼 1三七不同部位皂苷类成分的 ° ≤
回收正丁醇溶剂
至干 用甲醇溶解并转移至
量瓶中 加甲醇稀
释至刻度即得 ∀ 214 线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液
Λ 注入液相色谱仪 以对照品进样量 Λ 为横坐标 人参皂苷 峰面积值为纵坐标作 图得一直线 ∀ 结果表明人参皂苷 的进样量在 1 ∗ 1 Λ 内线性关系良好 ∀回归方程 Ψ
HPLC同时测定三七不同部位4种皂苷含量
HPLC同时测定三七不同部位4种皂苷含量作者:唐卿雁陈庚卢迎春张广辉赵艳张宪民杨生超来源:《热带农业科学》2018年第09期摘要建立同时测定三七地上和地下部分人参皂苷Rb1、Rb3、Rc和三七皂苷Fc含量的高效液相色谱方法。
采用Agilent Zorbax EC-C18(4.6 mm×100 mm,2.7 μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速1 mL/min,检测波长203 nm,柱温40℃。
结果表明:人参皂苷Rb1、Rb3、Rc和三七皂苷Fc分別在0.062~18.479、0.060~17.870、0.063~18.556、0.064~19.169 μg,呈良好线性关系(r>0.999 95);三七中4种皂苷的平均回收率(n=6)分别为99.53%、100.56%、99.90%、99.60%,RSD分别为0.54%、0.60%、0.49%、0.55%。
在三七地上部分和地下部分各组织中,人参皂苷Rb1在芦头部位的含量最高,人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc和三七皂苷Fc的含量均在叶片中最高。
该方法简便、准确,分离效果好,适用于三七人参皂苷Rb1、Rb3、Rc和三七皂苷Fc的测定。
关键词三七;高效液相色谱法;皂苷含量中图分类号 R917 文献标识码 A Doi:10.12008/j.issn.1009-2196.2018.09.018Abstract The high performance liquid chromatography (HPLC) method was established for simultaneous determination of ginsenosides Rb1, Rb3 and Rc and notoginsenoside Fc in different parts of Panax notoginseng. The Agilent Zorbax EC-C18 (4.6 mm×100 mm,2.7 μm) column was used in the HPLC, the mobile phases were acetonitrile-0.2% phosphoric acid with gradient elution,the detection wavelength was 203 nm, the flow rate was 1.0mL/min, and the column temperature was 40℃. The results showed that ginsenosides Rb1, Rb3 and Rc and notoginsenoside Fc had good linearity relationship (r>0.999 95) in the range of 0.061 6~18.479, 0.060~17.870, 0.063~18.556 and 0.064~19.169 μg, respectively. The ginsenosides Rb1, Rb3 and Rc, and notoginsenoside Fc had average recoveries (n=6) of 99. 53%, 100.56%, 99.90 % and 99.60%,and their relative standard deviations were 0.54%, 0.60%, 0.49% and 0.55%, respectively. The results showed that the saponins content in the underground parts and aerial parts were different apparently. The content of ginsenoside Rb1 was the highest in the rhizome, while the contents of ginsenosides Rb3 and Rc, and notoginsenoside Fc were the highest in the leaves. This HPLC method was simple and accurate with better separation effect, and hence was suitable for determination of ginsenosides Rb1, Rb3, Rc and notoginsenoside Fc.Keywords Panax notoginseng ; high performance liquid chromatography ; saponins content三七[Panax notoginseng (Burk.)F. H. Chen]是五加科人参属多年生草本植物,又名山漆、金不换、血参、田山七等[1]。
采用HPLC法测定三七中3种皂苷的含量
采用HPLC法测定三七中3种皂苷的含量目的研究探讨采用高效液相色谱仪测定复三七中三种皂苷含量的临床应用价值。
方法以三七总皂苷分散片为研究对象,对其中的人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1含量进行检测。
结果不同批次三七总皂苷分散片中,人参皂苷Rb1含量在17.91 mg/片~18.23 mg/片,人参皂苷Rg1含量在17.12 mg/片~17.65 mg/片,三七皂苷R1含量在4.73 mg/片~4.82 mg/片。
结论通过高效液相色谱仪(HPLC)可以同时对三七中不同皂苷的含量进行准确定量,且具有操作简单、快捷的优点,重复性好,稳定性强,可以用于三七相关药物质量控制的过程中,值得推广应用。
标签:高效液相色谱;三七;皂苷;含量三七是我国传统医学中最珍贵的药材之一,具有止血、补血、活血、抗血栓等多种功效[1]。
本文以三七总皂苷分散片为研究对象,通过高效液相色谱法对三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1等三种皂苷含量进行测定,并对其具体操作方法及检测结果进行分析。
具体报告如下。
1资料与方法1.1一般资料仪器:选择日本岛津仪器生产的LC-10A高效液相色谱仪(组成部分有微体积串联双柱塞、柱温箱、紫外可见双波长检测器、超声波提取器HS 3120、中文化LC工作站)。
试剂:对照品人参皂苷Rb1(批号:110703-201420)、对照品人参皂苷Rg1 (批号:110703-201421)、对照品三七皂苷R1 (批号:110703-201423);三七总皂苷分散片(三七总皂苷含量为50 mg/片);洗脱剂乙腈(色谱纯)、甲醇(分析纯)、水(超纯水)。
其中,对照品皂苷购自中国食品药品检定研究院,三七总皂苷分散片为自制,洗脱剂购自津市科密欧化学试剂开发中心。
1.2方法分别取人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1对照品进行精密称定,并使用浓度为20%的乙腈水溶液对其进行溶解,并制成1 ml的混合溶液(其中人参皂苷Rb1含量为0.5 mg、人参皂苷Rg1含量为0.4 mg、三七皂苷R1含量为0.12 m)。
广西三七皂苷类成分含量的分析
广西三七皂苷类成分含量的分析【摘要】目的研究广西三七不同产地、不同部位的皂苷含量特征。
方法利用香草醛-高氯酸比色法测定三七中总皂苷含量,以高效液相色谱法测定三七中人参皂苷Rg1,Rb1,Re和三七皂苷R1含量。
结果广西靖西县不同产地三七样品的总皂苷及单体皂苷含量存在差异;不同部位间皂苷含量的差异达到极显着水平,以根茎的最高,主根次之;同一样品中,各单体皂苷含量以人参皂苷Rg1最高,人参皂苷Re最低,不同样品中各单体皂苷间比值存在差异。
结论广西靖西县各地三七质量存在差异,药材中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1三者含量之和符合2005版《中国药典》规定。
【关键词】三七总皂苷人参皂苷三七皂苷三七Panax notoginseng为五加科植物,是我国传统名贵中药材,含皂苷、黄酮、氨基酸、多糖、三七素等多种活性成分,有散淤止血、消肿定痛之功效,用于咯血、吐血、衄血、便血、崩漏、外伤出血、胸腹刺痛、跌扑肿痛等[1]。
目前市场上三七主要来源于云南,并且国外也具有十分巨大的市场潜力。
随着人们生活水平的提高,对三七的需求量不断增加[2]。
在保证三七稳产优质的条件下,开辟新的种植区域是满足三七需求的重要途径。
广西作为三七的原产地,曾经也是主产地[3]。
凭借优越地理条件和长期累积的经验,在广西扩大三七的种植面积是可行的。
刘华钢等[4]也报道了广西三七含有较高人参皂苷Rg1,Rb1,Re和三七皂苷R1含量。
广西政府已将三七纳入广西靖西等县鼓励种植的中药材之一。
三七不同部位皂苷含量不同,三七主根、根茎和支根中总皂苷含量差异明显[5],广西三七茎基和须根的主要单体皂苷含量具有差异,且同一部位不同单体皂苷含量差异较大[6]。
药理研究[7]表明,各单体皂苷的药理作用不同,相互间的含量比值的差异对三七药材质量有重要影响。
因此,本文在前人研究的基础上,探索广西三七不同产地、不同入药部位的皂苷含量变化规律以及各单体皂苷在药材中的变化,为进一步研究广西三七质量奠定基础。
三七不同药用部位有效成分含量测定
三七不同药用部位有效成分含量测定崔翰明林海路文龙程慧平张春光王阶*中国中医科学院广安门医院(北京市宣武区北线阁5号,100053)摘要:目的建立三七不同药用部位中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re和Rb1的HPLC含量测定方法,比较三七不同药用部位中上述4种皂苷的含量。
方法三七不同药用部位(主根、筋条、剪口、叶、花)甲醇提取,RP-HPLC/UV法测定,Kromasil C18(250×4.6mm,5μm)色谱柱;以不同比例乙腈和水(v/v)线性梯度洗脱;流速:1mL·min-1;柱温:30℃;检测波长:203nm;进样量:10μL。
结果三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re 和Rb1可达到基线分离,其中人参皂苷Rg1和Re的分离度大于1.5;三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re和Rb1的线性范围分别为:4.4-440μg·mL-1,4.32-1080μg·mL-1,4.24-212μg·mL-1和4.48-1120μg·mL-1;4种皂苷的精密度和日间差RSD(n=5)分别为0.46%,0.24%,0.77%,0.68%和1.64%,0.69%,0.52%,0.65%;加样回收率分别为103.26±1.22%,103.18±0.49%,103.20±1.58%,103.86±0.39%;三七不同药用部位含上述4种皂苷总量的顺序为剪口>主根>筋条>叶>花;而三七主根含上述4种皂苷总量的顺序为60头>80头>40头>20头>100头。
结论本方法简便、灵敏、准确,重现性良好,可用于准确分析三七不同药用部位中上述4种皂苷的含量。
关键词:三七;三七皂苷;高效液相色谱;含量测定Abstract: Objective: A quantitative method was developed by gradient elution for the determination of notoginsenoside R1, ginsenoside Rg1, ginsenoside Re and ginsenoside Rb1 in different position of Radix Notoginseng by HPLC. The content of 4 kinds saponins in different position of Radix Notoginseng was compared. Method: The different position of Radix Notoginseng(including root, rhizome, branch root, leaf, flower) were extracted with methanol. The HPLC conditions include Kromasil C18column (250×4.6mm,5μm), different proportion acetonitrile and water linearity gradient elution, flow rate at 1.0mL·min-1, column temperature at 30℃, wavelength 203nm.Result: The linear ranges of notoginsenoside R1, ginsenoside Rg1, ginsenoside Re and ginsenoside Rb1 were 4.4-440μg·mL-1, 4.32-1080μg·mL-1, 4.24-212μg·mL-1 and 4.48-1120μg·mL-1, respectively. 4种皂苷的精密度和日间差RSD(n=5)分别为0.46%,0.24%,0.77%,0.68%和1.64%,0.69%,0.52%,0.65%;加样回收率分别为103.26±1.22%,103.18±0.49%,103.20±1.58%,103.86±0.39%;三七不同药用部位含上述4种皂苷总量的顺序为剪口>主根>筋条>叶>花;而三七主根含上述4种皂苷总量的顺序为80头>60头>20头>40头>100头。
三七皂苷含量标准
三七皂苷含量标准三七,又称田七、人参三七,是五加科人参属植物,具有丰富的药用价值。
三七皂苷是三七的主要活性成分,具有抗炎、镇痛、抗氧化、抗肿瘤等多种生物活性。
因此,三七皂苷含量的测定对于评价三七质量具有重要意义。
本文主要对三七皂苷含量的测定方法及其标准进行研究。
一、三七皂苷含量的测定方法1. 液相色谱法(HPLC)液相色谱法是目前最常用的三七皂苷含量测定方法。
该方法具有灵敏度高、分离效果好、重复性好等优点。
常用的检测器有紫外检测器(UV)和蒸发光散射检测器(ELSD)。
根据三七皂苷的化学性质,可以选择适当的色谱柱和流动相进行分离和检测。
2. 薄层色谱法(TLC)薄层色谱法是一种常用的定性分析方法,也可以用于三七皂苷含量的初步测定。
该方法操作简单,但灵敏度和分离效果相对较低。
常用的显色剂有碘化铋钾、香草醛-硫酸等。
3. 毛细管电泳法(HPCE)毛细管电泳法是一种新型的分离分析方法,具有分离效果好、操作简单、运行成本低等优点。
该方法可以用于三七皂苷组分的分离和含量测定,但目前仍处于研究阶段。
二、三七皂苷含量标准三七皂苷含量标准是评价三七质量的重要依据。
目前,国内外尚无统一的三七皂苷含量标准。
不同国家和地区根据当地的气候、土壤、生长条件等因素,制定了相应的质量标准。
例如,中国药典规定三七中人参皂苷Rb1、Rg1和Re的含量分别不低于0.8%、0.5%和0.3%。
三、三七皂苷含量标准的影响因素1. 品种差异:不同品种的三七,其皂苷含量存在显著差异。
例如,云南三七的皂苷含量通常高于云南三七。
因此,在制定三七皂苷含量标准时,需要考虑到品种的差异。
2. 生长环境:生长环境对三七皂苷含量也有显著影响。
例如,土壤肥力、光照时间、降水量等因素都会影响三七的生长和皂苷含量。
因此,在制定三七皂苷含量标准时,需要考虑到生长环境的差异。
3. 采收时间:三七的生长周期较长,不同时间段采收的三七,其皂苷含量存在显著差异。
一般来说,种植后2-3年的三七,其皂苷含量高。
HPLC法测定三七茎叶提取物中人参皂苷Rb
HPLC法测定三七茎叶提取物中人参皂苷Rb₁的含量摘要:目的:建立三七茎叶提取物中人参皂苷Rb₁的含量测定,为三七副产物的开发和利用提供了实验依据和理论基础。
方法:采用依利特C18色谱柱(4.6×200mm,5μm),以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,检测波长203nm,流速1.0ml/min,柱温30℃。
结果:人参皂苷Rb₁在0.02468mg/ml~0.1234mg/ml(r=0.99992 n=5)范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系;精密度试验计算得人参皂苷Rb₁的RSD=0.15%(n=6);重复性试验计算得人参皂苷Rb₁的RSD=1.39%(n=6);平均加样回收率为103.5%(RSD=0.67%,n=6)结论:建立的方法简单准确,可为三七茎叶提取物中人参皂苷Rb₁含量测定提供质量控制和评价指标。
关键词:三七茎叶提取物;HPLC法;人参皂苷Rb₁三七茎叶为五加科人参属三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥茎叶[1]。
三七作为中国传统中药,在临床上应用广泛,有较高的药用价值和经济价值,目前,三七在云南文山州、红河州、曲靖市均有大规模种植以满足快速增长的市场需求,但三七茎叶作为三七副产物利用率极低[2]。
三七茎叶的主要活性成分为人参二醇系皂苷——达玛烷型三萜皂苷类化合物,即人参皂苷Rb₁。
此外,还含有丰富的维生素、氨基酸、矿物质、蛋白质等营养成分[3]。
三七茎叶,性温,味辛,能治跌打,消淤散血,敷毒疮,治痰火,止血,又因其独特的风味“味苦回甘”,故而在我国及东南亚国家有较长的药食同源历史。
现代药理学研究表明,长期服用能够提高人体的记忆力,以及人体的免疫力。
直接食用三七的茎叶,活血化瘀的功效比较好,也能够预防冠心病、高血压等疾病。
三七的茎叶煮熟后食用,能够有效的缓解食欲不振、过度劳累、贫血、神经衰弱等症状[4~6]。
如今,三七茎叶在食用和药用方面的综合利用引起了越来越多人的关注。
三七皂苷R1检测
三七皂苷R1检测
三七皂苷R1(Notoginsenoside R1, NR1)是三七总皂苷的主要活性单体,主要存在于三七的干燥根及根茎中。
对心脑血管疾病,中枢神经系统,免疫系统等诸多系统疾病均有影响,具有抗炎、抗癌、改善微循环、防治缺血再灌注损伤等作用。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)和液质联用(LC-MS)技术,可高效、精准的检测三七皂苷R1的含量变化。
此外,迪信泰检测平台还可检测其他多种中药成分,方法成熟,可高效处理大批量样本。
HPLC和LC-MS测定三七皂苷R1样本要求:
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期:2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)
2. 相关质谱参数(中英文)
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 三七皂苷R1含量信息。
双液相萃取法测定三七块根与茎叶中三七总皂苷含量
第31卷第1期吉林医药学院学报V01.31N o.12010年02月Jour nal of J il in M e di cal C or t ege F e b.2010文章编号:1673-2995(2010)01-0024-04双液相萃取法测定三七块根与茎叶中三七总皂苷含量论著习峰敏,刘昌铭,李付名,浦周芳,刘贽心,赵文秀‘(吉林医药学院药学院,吉林吉林132013)摘要:目的比较三七根和茎叶中三七总皂苷含量。
方法以三七总皂苷回收率为指标,设计正交试验,优选硫酸铵/聚乙二醇双液相体系的最优萃取条件,在最优条件下用香草醛/高氯酸比色法分别测定三七根和茎叶中三七总皂苷的含量。
结果硫酸铵/聚乙二醇双液相最优萃取条件为聚乙二醇分子量6000,聚乙二醇浓度24%,硫酸铵浓度12%,pH值2.5,有较高的分配系数7.45,回收率82.4%。
此条件下测得三七根和茎叶中三七总皂苷含量分别为l I.24%和12.98%。
结论三七茎叶在某些方面可作为三七根的替代资源,可为合理开发利用三七资源提供依据。
关键词:三七总皂苷;双液相体系;正交试验;含量测定中图分类号:R284.2文献标识码:AD et er m i nat i on of cont ent of t ot al s aponi ns i n Panpax N ot ogi ns eng r oot s and l e ave s by aqueous t w o phase s ys t emX I Feng-m i n,L I U C ha ng.m i ng,L I Fu—m i n g,PU Zhou—fa ng,LIU r un xi n,Z H A O W en-xi u’(School of Pharm a cy,Ji—l i n M edci al C ol l ege,Ji l i n C i t y,Ji l i n Pr ovi nce,132013,C hi na)A bst r act:O bj ect i ve To com p ar e t he c o nt ent of t ot al s ap oni ns i n Pan pax N ot ogi ns eng r o ot s and l eaves.M et hodsR ecover y r at e w a s used a s i ndi ca t or t o des i gn ort hogonal exp er i m ent t o opt i m i ze t he ext r act i on c ondi t i ons of t otal s apo-ni ns i n aqueous t w o-p has e syst em s(A TP S)w i t h pol yet hyl e ne gl ycol(P E G)and a m m oni um sul f a t e.T he c ont e nt of t otal s ap oni n s i n Panp ax N ot ogi ns eng r o ot s and l eave s w a s det ec t ed by c ol or i m et ry w i t h van i l l i n and pe rc hl or at e under t he opt i m um ext r act i on condi t i on.R es ul t s T he opt i m um ext r act i on c ondi t i on of A T PS w as24%PE G6000.12%(N H4)2S04,pH2.5and m axi m um par t i t i on co ef f i ci en t w a s7.45.T he r ec ove ry r at e of t otal s ap oni ns i n Panpax N ot og-i ns eng W as82.4%.The c o nt e nt s of of t ot al s ap oni ns i n Pan pax N ot ogi ns eng i n oot s and l e a ves w er e I1.24%a nd 12.98%.C oncl usi on T he P a npa x N ot ogi ns cng l e a ves cou l d be us ed a s a sub st i t ut i v e r es o ur ce of Panpax N ot ogi n—s en g r oo t s i n so m e w ay s.T he r e sul t s cou l d provi de t he ba s i s f or r at i on al devel opm ent and ut i l i zat i on of r e so ur ce s of Pa-nax N ot ogi ns eng..K ey w or ds:P anpa x N ot ogi ns eng s ap oni n s;aqueo us t w o phas e s ys t e m;or t hogonal t e st;det er m i nat i on of c ont e nt三七(P a npax N ot ogi m eng(B ur k.)F.H.chen)为五加科人参属多年生草本植物,是传统的名贵中药材,主产予我国云南、广西。
NP_HPLC法测定三七药材中总皂苷含量_高瑛
中国药品标准 2011 年第 12 卷第 5 期 347
图 1 HPLC 色谱图
A. 甲醇; B. 混合对照品; C. 三七药材
表 1 4 种皂苷线性关系测定结果
指标成分
回归方程
人参皂苷 Rg1 人参皂苷 Re 人参皂苷 Rb1 三七皂苷 R1
Y = 310 127X - 9 443. 2 Y = 322 747X + 1 898. 9 Y = 277 376X - 35 807 Y = 328 372X + 3 866. 9
精密吸取“2. 3”项下供试品溶液,在制备后 0, 1,2,4,8,12,24 h 进样测定,结果人参皂苷 Rg1 ,人 参皂苷 Re,人 参 皂 苷 Rb1 ,三 七 皂 苷 R1 峰 面 积 的 RSD 分 别 为 1. 98% ,1. 73% ,2. 06% ,2. 43% ; 表 明 供试品溶液在 24 h 内稳定。 2. 7 重复性试验
29不同规格三七药材的含量测定的加样回收率结果n6称样量g样品中含量mg加入量mg测得量mg回收率平均回收率rsd02011791604243212282410290019937845142434122052102750199878648435351232541024610255082020047888442538123004103720199778609417941208791011401991783734198012132910233人参皂苷re的加样回收率结果n6称样量g样品中含量mg加入量mg测得量mg加样回收率平均回收率rsd0201123096101353321999890199322889091083179697790199822946089673151695579732196020042301509033316849596019972293509041318999915019912286608934314039555的加样回收率结果n6称样量g样品中含量mg加入量mg测得量mg回收率平均回收率rsd020115328440030925999821019935280740669931709925019985293941035939751000099260780200453098407419364299520199752913413809432910009019915275440185923289848的加样回收率结果n6称样量g样品中含量mg加入量mg测得量mg回收率平均回收率rsd020111176210831225479958019931165710004216419980019981168610340216589644993817202004117211070722272985401997116801102922796100780199111645112322300310112称取不同规格的三七粉末过四号筛按23项下方法制备供试品溶液依上述色谱分析条件测定各规格三七药材中所含4种皂苷及总皂苷含量结果见表6
快速薄层扫描法测定三七中总皂甙含量概要
快速薄层扫描法测定三七中总皂甙含量李吉来曾宇珠提要报道用薄层扫描法测定市售不同规格三七中三七总皂甙的含量。
三七总皂甙经甲醇提取,直接点样于硅胶G薄层板上,以氯仿一甲醇一水(14 : 11 : 2) 展开,使三七总皂甙集中于一点,以三七皂甙C1为标准,显色,A S=530 nmA R=5650 nm,外标二点法扫描测定,计算总皂甙的含量。
此法快速简便,结果准确,重现性好。
关键词三七;三七皂甙C1;三七总皂甙;薄层扫描Determination of Total Dammaranesaponin in PanaxNotoginseng (Burk.) F.H. Chen by TLC-ScanningLi Jilai, Zeng YuzhuThe First Medical University of PLA,Guangzhou 510515Abstract A TLC scanning method for determination of total dammaranesaponin in panax notoginseng (Burk.) F. H. chen has been established in this paper.Total dammaranesaponin in the samples was extracted with methanol and then spotted on thin -layer plates ofSilica gel G and developed with the mobile phase consisting of trichloromethane —methanol —water(14 : 11 : 2).The total dammaranesaponin were collected in one spot.after the spots were colored,determinations were carried out with shimadzu CS —930 scanner with A S=530nm and A R=650nm.The method is simple,fast with exact result and good repetition.Key words Panax notoginseng; Sanchinoside C1; Total dammaranesaponin; TLC—Scanning三七为五加科植物Panax notoginseng (Burk.) F. H. Chen 的干燥根,是我国特产的传统珍贵药材。
HPLC法快速测定三七提取物中皂苷的含量
别为 9 . 9 %、10 %和 10 %。本方法快速、节省试剂,可用于三七提取物 中三七皂苷 R 、人参皂苷 R t R l 3 0. 4 0. 7 l g 和 b 的测定。 关键词:三七皂苷提取物;三七皂苷;人参皂苷;I L IC P
文章篇号:17.0 82 1)—5 .5 639 7(0 07737 5
C N —i , E G ej Ya g i a HE Yuxa Z N W ii , n - -e Ly
(.e eY l gP amaet a G o pC . t. h i h ag0 0 3 , hn ) 1 b i in h r cui l ru o, d, ia un 5 0 5 C i H i c L S jz a
mmx . m, .wn a2 3 n daro t ea r. ct ii ()wa r ) a sda te blp ae o aier rdet l i 4 6m 26 ) t 0 n l n t om e rt eA e ntl A 一 t ( W ue h mo i hs fr l a gai u o a mp u o re eB s s e n nt oe hlcl sea lh d h a l ees a t nP eo ee ie xC8 0A (0 oo neoi i ie xC r・Se ou wa s bi e .T esmpe w r e r e o hn m nxKnt 110 5 g d un e l mn t s s p ad e
r c v r fR1 Rg n b r 93 、 1 0 4 a d 1 07 , e p c v l . h s to s i l n a t t s e g n o s pi n e o ey o 。 l dR l a wee 9 - % 0 -% n 0 . % r s e t ey T i h dWa smp ea d f s wi l s a e t n u t , i me h e r c m o
三七茎叶提取物中皂甙成分定性及三七皂甙Fa的制备
三七茎叶提取物中皂甙成分定性及三七皂甙Fa的制备
本文运用高效液相色谱-质谱和质谱/质谱联用技术,在适宜的分析条件下,对三七茎叶提取物中的皂甙成分进行分离并定性。
同时,运用制备型高效液相色谱,确定了从三七茎叶提取物中制备三七皂甙Fa的工艺条件。
高效液相色谱-质谱和质谱/质谱联用技术是对中药成分定性的一种重要手段。
本实验确定液质联用中液相色谱的分离条件为:乙腈-1mM的醋酸氨水溶液作为流动相进行梯度洗脱,最终共分离出12种皂甙。
通过研究其一级质谱和二级质谱,对12种皂甙进行定性,分别为人参皂甙Rg<sub>1</sub>,Rb<sub>1</sub>,Rc及其同分异构
体,Rb<sub>2</sub>,Rb<sub>3</sub>,Rd,三七皂甙R<sub>1</sub>,Fa,Fc,Fe和绞股兰皂甙IX。
以三七茎叶提取物为原料,三七皂甙Fa为目的产物,直接利用制备型高效液相色谱从原料中提纯三七皂甙Fa。
分别考察了流动相配比、流动相流速以及原料上样量对分离过程和产品纯度的影响,最终确定了适宜的制备色谱条件为:流动相流速是30ml/min,流动相配比为甲醇:水=70:30,原料上样量0.3~0.4g。
在此条件下,制得的三七皂甙Fa的纯度为91.2%。
将制得产品进行液质分析,确定为目的产物三七皂甙Fa。
三七茎叶中特有人参皂甙的制备及其定量分析的研究
三七茎叶中特有人参皂甙的制备及其定量分析的研究
本文研究了三七茎叶中特有的有效成分人参皂甙Rb3的分离纯化工艺,期望得到人参皂甙单体Rb3纯品,为定量分析奠定基础。
以三七茎叶提取物为原料,直接应用反相半制备液相色谱进行分离纯化。
分别考察了色谱柱尺寸、流动相组成、流动相配比、流量和上样量对分离效果的影响,最终确定了适宜的制备色谱条件,得到人参皂甙单体Rb3含量为98%以上的纯品,同时得到人参皂甙单体Rc含量在92%以上的纯品,为后续定性、定量实验奠定基础。
为确定准确、可靠的定量分析色谱条件,考察了检测器、流动相组成和流动相配比对原料及产品的分离效果的影响,最终确定了适宜的分析色谱条件。
为实验的顺利进行提供了保障。
建立了定量分析三七茎叶提取物中人参皂甙Rb3和Rc的外标法,并确定了检测范围。
本文所建立的人参皂甙Rb3标准品的分离纯化工艺简便、高效,外标法定量分析三七茎叶提取物中人参皂甙Rb3和Rc方法有效、可靠,对三七茎叶提取物的质量控制具有重要意义。
HPLC法测定不同产地的三七叶中人参皂苷Rb_3的含量
HPL C法测定不同产地的三七叶中人参皂苷Rb3的含量王隶书 程东岩 程东红 (吉林省中医中药研究院 长春130021)摘 要 目的:建立中药材三七叶中人参皂苷Rb3的含量测定方法。
方法:HPLC法,流动相:乙腈2水(30∶70),检测波长205 nm。
结果:人参皂苷Rb3含量测定线性范围为1.36~8.19μg,平均回收率101.2%,RSD为1.7%。
结论:方法可靠,简单可行,为建立三七叶的质量标准提供了科学依据。
关键词 三七叶 人参皂苷Rb3 高效液相色谱法中图分类号:R927.2 文献标识码:A 文章编号:10082049X(2003)0520284202Content Determination of Ginsenosides Rb3of Folium Notoginseng from Different Areas by HPLCWang Lishu,Cheng Dongyan,Cheng Donghong(Academy of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica of Jilin Province, Changchun130021,P.R.China)ABSTRACT Objective:To set up a method for content determination of ginsenosides Rb3in Folium Notoginseng.Method:HPLC, mobile phase:Acetonitrile2water(30∶70),detection wavelength:205nm.R esult:The standard curve was linear within a range of 1.365-8.19μg.The average recovery rate and RSD were101.2%and1.7%,respectively.Conclusion:This method is accurate, reliable,can providing a scientic index for quality controll of Folium Notoginseng.KE Y WOR DS G insenosides Rb3;Folium notoginseng;Content determination;HPLC 三七为五加科植物三七Panax notogi nseng (Burk.)F.H.Chen.的干燥根,具有散瘀止血,消肿定痛、补益气血等功效,是传统的名贵中药材,主要产区为云南、广西,药用资源有限。
三七药材中总皂苷的含量测定
三七药材中总皂苷的含量测定
三七药材中总皂苷的含量测定
姚志娟;徐健
【期刊名称】《黑龙江医药》
【年(卷),期】2005(018)005
【摘要】目的:测定三七中总皂苷的含量.方法:应用比色法.结果:三七中总皂苷的平均含量为0.452mg/g.结论:本法简便、可行,可供本品质量控制用.
【总页数】2页(319-320)
【关键词】三七;三七总皂苷;比色法;含量测定
【作者】姚志娟;徐健
【作者单位】哈药集团三精制药有限公司,哈尔滨150069
【正文语种】中文
【中图分类】R9
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三七不同加热炮制品中5种皂苷类成分的含量测定
三七为五加科人参 属植 物三七 P a n a x n o t o g i n — s e n g ( B u r k . ) F . H . C h e n的干燥根和根茎[ 1 1 , 是云南 的 道地药材和名贵药材 。 三七 中含有皂苷 、 挥发油 、 三 七素、 黄酮 、 多糖和其他成分 , 其 中皂苷是主要活性 成分之一[ 2 ] 。三七皂苷具有抑制血小板凝集、 延长凝
中测定 了这 5 种皂苷类成分的含量。 目前研究中三七 的炮制方法主要是 0 7 0 3 — 2 0 1 0 2 7 ) 、人参皂苷 R e( 批号 :
基金项 目:国家 中医药管理局科研专项( N O: 2 0 1 1 0 7 0 0 7) 收稿 日期 :2 0 1 3 —1 0 — 3 1 修回 日期 :2 0 1 3 —1 1 —1 2
V0 l _3 6 N o .6 1 2 .2 0 1 3
三七不 同加热炮 制品中 5种皂苷 类成分 的含量 测定
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三七茎、叶中皂苷类成分的含量测定实习学生:杨正丹 2009级中药3班指导老师:* *摘要目的:建立三七茎、叶中皂苷类成分的比色测定方法,分析三七茎、叶中皂苷类成分的含量,为三七茎叶原料的质量评价提供依据。
方法:采用香草醛-高氯酸比色法分别测定三七茎、叶中皂苷类成分含量。
结果:测得三七茎和叶中皂苷类成分的含量分别为2.71%和12.79%,含量差异较大,三七叶中皂苷类成分含量为三七茎的5倍。
结论:本法可用于对三七茎叶的质量控制,为三七茎叶原料的质量评价及开发利用提供实验依据。
关键词三七茎叶;含量测定;三七茎叶皂苷;人参皂苷Rb1Abstract:To establish an analysis method of colorimetry of PnGL from the stalks and leaves of Panax notoginseng,and The results could provide the basis for rational development and utilization of resourcesof the stalks and leaves of Panax notoginseng. Methods:Determine theegnoside of the content of PnGL through colorimetry with vanillin and perchlorate respectively. Results: The contents of PnGL in Panpax Notoginseng stalks and leaves were 2.71% and 12. 79%. The contents of total saponins in Panax notoginseng stalks and leaves vary significantly.The contents of PnGL in Panpax Notoginseng leaves is 5 times more than the stalks. Conclusion:This method can be used for quality evaluation of Panax notoginseng stalks and leaves.Key Words:Panax notoginseng stalks and leaves; content determination;Panax notoginsegnoside of the leaves; ginsenoside Rb1.三七( Panax Notoginseng (Burk. ) F. H. chen)为五加科人参属多年生草本植物,是传统的名贵中药材,主产于我国云南、广西。
三七的干燥根,《本草纲目》中记载有散瘀止血、消肿定痛、补益气血等功效。
大量研究证明,三七根对血液和造血系统、心脑血管系统、中枢神经系统、免疫系统等都具有显著的作用,其主要有效成分为总皂苷( total saponins of Panax Notoginseng, PNS) 、三七素等[1]。
三七的干燥茎叶,含有与三七根类似的皂苷类有效成分,但却也存在差异,研究表明三七茎叶的活性成分三七茎叶总皂苷(Panax notoginsengoside of the leaves,PnGL)亦是达玛烷型四环三萜皂苷,具有明显的镇静、镇痛和消炎等作用,且其毒副作用小[2]。
目前市场上以三七茎叶皂苷类成分为原料主要开发的药品有七叶神安片、速效降脂灵胶囊、三七叶苷胶囊、七叶神安滴丸等;保健品有三七睡亦香胶囊、三七健眠软胶囊、金不换袋泡茶等。
《中国药典》2010版自2010年10月1日实施以来,要求所有中成药生产均以中药饮片投料,而三七茎叶在我省尚无质量标准。
为了更好地控制三七茎叶质量,开发三七茎叶,本实验通过测定三七茎、叶中三七茎、叶中皂苷类成分的含量的研究,对三七茎叶的质量进行综合评价,可为合理开发利用三七资源及三七茎叶中皂苷类成分的提取工艺研究提供依据。
1 材料与试剂1.1材料三年生春三七茎、叶(由云南特安呐制药股份有限公司提供),经鉴定为正品。
1.2主要仪器调温电热套(型号:ZDHW,产自北京中兴伟业仪器有限公司)、XY系列精密电子天平(型号:XY10MA,产自常州市幸运电子设备有限公司)、电子天平(型号BS224S,产自北京赛多利斯仪器系统有限公司)、紫外分光光度计UV-1800。
对照品(购自中国药品生物制品检定所,纯度1.3主要试剂人参皂苷Rb192.6%);甲醇,香草醛,冰醋酸,高氯酸,石油醚,乙醇等试剂均为分析纯,市售。
2 测定方法为对照品测定三七茎、叶中采用香草醛-冰醋酸显色法[3],以人参皂苷Rb1皂苷类成分的含量。
标准品(纯度92.6%),2.1 对照品溶液的制备精密称取9.5mg人参皂苷Rb1加甲醇定容至10 mL。
对照品溶液、三七茎2.2 吸收波长的确定分别精密吸取适量人参皂苷Rb1叶总皂苷样品溶液适量,至磨口具塞试管中,热水浴挥干溶剂,加5%香草醛冰醋酸溶液(新配置)0.2 ml,高氯酸0.8 ml,于60℃恒温水浴15 min,立即取出置冰水浴内冷却,加冰醋酸5.0 ml 摇匀,以相应试剂为空白,紫外分光光度仪上扫描。
结果表明,人参皂苷Rb1对照品溶液和三七茎叶皂苷样品溶液显色后于551nm处有一明显吸收峰,因此选择551 nm为三七茎叶总皂苷的吸收波长。
2.3线性关系考察精密量取人参皂苷Rb1对照品溶液100μl、110μl、120μl、130 μl、140μl、150μl,分别置25 ml磨口具塞试管中,热水浴挥干溶剂,加5%香草醛冰醋酸溶液(新配置)0.2 ml,高氯酸0.8 ml,于60℃恒温水浴15 min,立即取出置冰水浴内冷却,加冰醋酸5.0 ml摇匀,以相应试剂为空白,在551 nm波长处测定吸收度,结果见表1。
表1 线性关系数据表取样量(μl)吸光度A100 110 120 130 140 150 0.318 0.354 0.389 0.424 0.458 0.495以人参皂苷Rb1含量(mg)为横坐标,吸光度(ABS)为纵坐标作图,得标准曲线:y=4.0014x-0.0337,r =0.9999,结果表明人参皂苷在0.08797~0.131955 mg范围内线性关系良好。
2.4 精密度考察精密量取人参皂苷Rb1照品溶液100μl,按香草醛-冰醋酸比色法,在紫外分光光度仪551nm处连续测定 6 次,测得吸光度RSD值为0.4286%,表明精密度良好。
2.5 回收率试验精密称取一定量的人参皂苷Rb1对照品加入到已测定含量的样品中,按香草醛-冰醋酸比色法测定含量,计算加样回收率,结果见表2。
表2 回收率数据表样品号含量(mg)加标量(mg)测定值(mg)回收率(%)1 0.0576 0.0565 0.1024 97.582 0.0696 0.0565 0.1261 100.43 0.0672 0.0560 0.1206 104.034 0.0648 0.0526 0.1184 98.715 0.0648 0.0523 0.1186 97.426 0.0624 0.0512 0.1126 99.63平均回收率为99.63%,RSD=2.24%。
3 样品测定3.1三七茎叶重量比的测定选取完整的三七植株,分别测定其茎叶干燥后的重量,计算其重量比。
结果见表3。
表3 茎叶重量比数据表测定次数茎(g)叶(g)茎(g):叶(g)重量比平均值1 6.5681 2.5573 2.56842 6.7542 3.2235 2.09533 5.9456 2.9467 2.0177 2.173424 7.7445 4.0746 1.90075 7.4864 3.2763 2.285结果表明三七茎与叶的质量比约为2:13.2 三七茎叶皂苷类成分含量的测定分别精密称取的三七茎5g、三七叶5g,各加12倍量70%乙醇浸泡30min 后回流提取三次,每次回流提取2小时。
合并提取液,蒸馏除去乙醇溶液, 过滤,用D101大孔吸附树脂柱, 水洗脱, 去多糖等杂质, 弃去水洗脱液, 再用70%的乙醇洗脱得洗脱液, 采用阴离子交换树脂进行脱色。
脱色液蒸馏除去乙醇溶液,加纯化水定容至25ml.摇匀。
取1ml挥干,加甲醇定容稀释至适宜浓度作为供试品。
取供试品溶液100μl,按香草醛-冰醋酸比色法,在紫外分光光度仪551nm 处测定其吸光度A,用标准曲线法计算三七茎、叶中皂苷类成分的含量。
结果见表3。
表3样品次数皂苷类成分含量(g/100g) 平均含量(g/100g)1 2.572 2.85茎 3 2.72 2.714 2.625 2.786 2.701 12.062 13.51叶 3 12.71 12.794 12.845 13.116 12.51三七茎、叶中皂苷类成分的含量分别为2.71%、12.79%。
4 分析与讨论三七茎叶中的化学成分非常复杂,除含有人参皂苷Rbl 、Rb3、Rc;三七叶皂苷XIII、IX、XVI;三七皂苷Fa、Fc、Fe等20多种化学成分外,还含有糖类、黄酮、果胶、色素、脂质、蛋白质等化学成分[4-8]。
本实验在供试品制备中采用大孔树脂吸附分离[9]和阴离子交换树脂进行脱色[10],排除三七茎、叶中黄酮类和糖类成分的干扰,使所用分析方法专属性更强,准准确性更高。
研究结果表明,三七茎、叶中所含皂苷类成分含量差异较大,三七叶中的含量高于三七茎,而且,约为三七茎的5倍。
而三七茎、叶的质量比为2:1。
由此可知,采购三七茎叶原材料时,为保证其质量,应选取含叶较多的三七茎叶,加大三七茎叶中叶的比列可对提高三七茎叶总皂苷生产率有一定的帮助。
由于时间关系,本课题只分析了产自云南特安呐制药股份有限公司9月GAP基地的三七茎叶。
在市场上三七茎叶还存在不同年限、不同月份及不同产地等多种规格,对各规格所含皂苷类成分含量的变化规律是否符合该研究,还有待进一步探讨研究。
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