平板划线试验教学内容
平板划线法分离菌种
实验六平板划线法分离菌种一、实验目的1、了解平板划线法分离菌种的基本原理2、练习平板划线法分离菌种的基本操作，掌握无菌操作技术二、实验原理平板划线法是指把杂菌样品通过在平板表面划线稀释而获得单菌落的方法。
一般是将混杂在一起的不同种微生物或同种微生物群体中的不同细胞，通过在分区的平板表面上作多次划线稀释，形成较多的独立分布的单个细胞，经培养而繁殖成相互独立的多个单菌落。
通常认为这种单菌落就是某微生物的“纯种”。
实际上同种微生物数个细胞在一起通过繁殖也可形成一个单菌落，故在科学研究中，特别是在菌种鉴定等工作中，必须对实验菌种的单菌落进行多次划线分离，才可获得可靠的纯种。
平板划线分离对细菌、酵母菌较为适宜，而霉菌和放线菌的分离多采用稀释分离法进行菌种的分离纯化。
具体的划线形式有多种，这里仅介绍一种经过长期实践并证明可获得良好实验效果的方法：将一个平板分成A、B、C、D4个面积不同的小区进行划线，A区面积最小，作为待分离菌的菌源区，B和C区为经初步划线稀释的过渡区，D区则是关键的单菌落收获区，它的面积最大，出现单菌落的概率也最高。
由此可知，这4个区的面积安排应做到D>C>B>A。
鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别，因而有助于快速鉴别某种微生物。
这样的培养基称之为鉴别培养基。
例如用以检查饮水和乳品中是否含有肠道致病菌的伊红美蓝培养基就是一种常用的鉴别性培养基。
（参考GB4789.38-2012食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数）其配方中含有乳糖、伊红和美蓝，用以鉴别肠道病原菌及其他杂菌。
伊红、美蓝作为指示剂，伊红系酸性染料，当大肠埃希氏菌或产气肠杆菌分解乳糖产酸时，由于细菌带正电荷，所以被伊红着色。
在大肠埃希氏菌中因为伊红与美蓝结合，所以菌落不呈红色，而是蓝紫黑色，且具有绿色金属光泽；菌落呈棕色者为产气肠杆菌；不分解乳糖的肠道病原菌则不着色，有时因产生碱性物质较多，细菌带负电荷，被美蓝着色后，菌落并不呈蓝色，因美蓝与伊红结合，所以菌落为淡紫色。
平板划线法实验报告
平板划线法实验报告导语：平板划线法实验是一种重要的实验方法，是描述地面上的凹凸侧界的常用方法。
该实验用以测量海岸线、山脉、河流谷等地质特征，在地质技术活动中发挥着重要作用。
本文主要介绍了平板划线法实验的原理、器材介绍、实验方法以及数据记录等内容，旨在为读者提供一份平板划线法实验报告，以帮助读者更好地理解和掌握该实验方法。
一、实验原理平板划线法实验是一种基于直线剖面的地面调查方法，主要是把一个宏观大尺度的地形调查结果用多条水平的直线剖面去描述。
它根据地形变化的规律来把一个宏观区域分割成若干划线，从而形成的一组具有特征的划线框架，又称作“划线网”，主要用于描述地面上的凹凸侧界，如海岸线、山脉、河流谷等。
二、器材介绍平板划线法实验所用的器材包括：水准仪、探点架、测距尺、画线画板等。
其中水准仪是主要的设备，是用来水平、高程测量的仪器；探点架是用来测量凹凸深度的，它的底座有微量水平调整；测距尺是用来测量划线之间的距离；画线画板是用来将测量出的结果记录在图纸上的。
三、实验方法1. 测量基准点：首先，用水准仪测量一个基准点，确定地面的水平坐标系；2. 测量基准线：然后，从基准点开始，沿着目标凹凸边界测量出一条水平线，即为基准线；3. 描绘凹凸边界：接着，纵向依次划出几条垂直于基准线的直线，距离基准线有一定距离；4. 测量线距：最后，用测距尺测量出平板网格的线距，并用画板画出来。
四、数据记录测量完后的数据应该记录妥当，其包括基准点和基准线以及平板网格等信息。
包括：1. 基准点：基准点的水平坐标、高程；2. 基准线：基准线的起点及终点水平坐标、高程；3. 网格：每条网格线的起点及终点水平坐标；4. 线距：每行网格之间的线距。
五、总结平板划线法实验是一种常见的实验方法，它可以有效地描述地面的凹凸侧界。
本文简单介绍了该实验的原理、器材介绍、实验方法以及数据记录等内容，以帮助读者更好地理解和掌握该实验方法。
《平板划线试验》课件
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接种细菌：用无菌接种环蘸取细菌 培养物，在平板上均匀涂抹
观察结果：培养结束后，观察细菌 的生长情况，记录结果
划线分离
准备平板：选择合 适的平板，如琼脂 平板、培养基平板 等
划线：使用无菌操 作，将菌液或菌落 均匀地涂布在平板 上
干燥：将涂布好的 平板放在干燥箱中 干燥，使菌液或菌 落干燥
划线深度过浅或过深都会影响实验结 果，应保持适中的深度
划线角度过大或过小都会影响实验结 果，应保持适中的角度
划线过程中应避免划破平板，以免影 响实验结果
划线过程中应避免划破平板，以免影 响实验结果
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平板划线试验
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平板划线试验简介
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平板划线试验的步 骤
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平板划线试验的注 意事项
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平板划线试验的应 用
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平板划线试验简介
平板划线试验的定义
平板划线试验是一 种微生物分离和纯 化的方法
实验结束后，应及时清理实 验台和设备，保持实验室整 洁
实验结果应及时分析，包括 菌落形态、生长情况、抗药
性等
实验报告应及时撰写，包括 实验目的、方法、结果、讨
论等
影响实验结果的因素及解决方法
平板划线试验的准确性受划线速度、 划线深度、划线角度等因素的影响
划线速度过快或过慢都会影响实验结 果，应保持适中的速度
特性
菌落计数：通 过平板划线试 验，可以计算 细菌的数量和
平板画线实验报告
平板画线实验报告实验目的本实验旨在通过平板画线实验，观察液体在平板上画线时的现象，并探究液体表面张力和液滴形状与液体画线的关系。
实验原理液体在平板上画线时，液滴会扩展成一系列的半圆弧，半圆弧的半径会逐渐变大，直至液滴的尾部逐渐变尖。
这是因为液体表面张力的作用，使得液滴尝试尽可能减小其表面积。
同时，由于液体分子之间的相互作用，液滴的形状受到引力和表面张力的影响。
实验器材1. 平板2. 水滴3. 滴管4. 直尺5. 毛笔6. 毛巾实验步骤1. 将平板放在水平桌面上，同一边缘贴紧直尺。
2. 用滴管向平板上滴一滴水。
注意滴水时要垂直且从较高的位置滴下。
3. 观察水滴在平板上的形状，绘制水滴的轮廓。
4. 用滴管向水滴的尖部滴几滴水，观察水滴形状的变化。
5. 用毛笔试着在平板上画线，观察画线时液滴的变化。
6. 揭去直尺，用毛巾擦拭平板，准备下一组实验。
实验结果在平板上画线时，观察到以下现象：1. 初始状态下，水滴呈近似半圆形，液滴的边缘逐渐变细，形成尖头。
2. 滴水在尖部时，液滴的形状受到扰动，呈现出波浪形状。
3. 当用毛笔在平板上画线时，液滴会顺着画线的方向移动，并在画线结束后形成不规则的形状。
实验讨论通过观察实验结果，可以得出以下结论：1. 液体的表面张力使得液滴尽力减小其表面积，因此液滴的边缘会逐渐变细形成尖头。
2. 当液滴尖部受到外力扰动时，液体分子之间的相互作用使得液滴的形状产生波浪。
3. 在画线时，液滴会顺着画线的方向移动，这是因为画线的过程中液体分子之间的相互作用，使得液滴会沿着液体自身产生的张力方向移动。
实验总结本次实验通过平板画线，观察了液滴在平板上的形状变化，并初步探究了液体表面张力和形状的关系。
通过实验结果和讨论，我们进一步了解了液体分子之间的相互作用并深化了对表面张力的认识。
同时，在实验中也采用了观察结果和现象，结合理论知识进行分析和推理的能力，提高了我们的实验技巧和科学素养。
通过本次实验，我们不仅加深了对液体性质的理解，也锻炼了观察、记录、分析和推理的能力。
平板划线分离实验报告
一、实验目的1. 熟悉平板划线分离培养法的基本原理。
2. 掌握平板划线分离培养的操作步骤。
3. 学习如何从混杂的微生物中分离纯种细菌。
4. 了解无菌操作技术在微生物实验中的重要性。
二、实验原理平板划线分离培养法是一种常用的微生物分离纯化方法。
其原理是将微生物样品涂布于固体培养基表面，利用微生物在培养基上的生长特性，通过划线操作，逐步稀释微生物，最终获得单菌落，从而实现微生物的分离和纯化。
三、实验器材1. 微生物培养箱2. 无菌操作台3. 玻璃棒、接种环、镊子等无菌操作工具4. 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基5. 菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌混合菌悬液6. 无菌培养皿、酒精灯、记号笔等四、实验步骤1. 准备工作- 将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基放入水浴锅中加热至融化。
- 将融化的培养基倒入无菌培养皿中，待冷却至约50℃时，均匀涂布于培养皿底部。
- 待培养基凝固后，用记号笔在培养皿底部标记A、B、C、D四个区域，分别代表菌源区、过渡区、过渡区、关键区。
2. 划线操作- 在无菌操作台中，用接种环挑取少量菌种，从A区开始，按无菌操作法划线至B区、C区，最后划线至D区。
- 划线过程中，每次划线前需用火焰灼烧接种环，以避免污染。
3. 培养- 将划线平板倒置放入培养箱中，在适宜的温度下培养24小时。
4. 观察与记录- 观察平板上的菌落生长情况，记录菌落的形态、大小、颜色等特征。
- 根据菌落特征，挑选典型单菌落进行进一步鉴定。
五、实验结果与分析1. 菌落特征- 在平板划线分离培养过程中，观察到A区菌落较多，B、C区菌落数逐渐减少，D区菌落数量明显减少，且多为单菌落。
- 通过观察，挑选出典型单菌落进行进一步鉴定。
2. 结果分析- 平板划线分离培养法是一种有效的微生物分离纯化方法，通过逐步稀释微生物，最终获得单菌落，从而实现微生物的分离和纯化。
- 在实验过程中，无菌操作是保证实验成功的关键。
任何一次操作不当都可能导致污染，影响实验结果。
培养基划线实验报告
一、实验目的1. 熟悉并掌握培养基的配制方法。
2. 学习并实践无菌操作技术。
3. 熟悉平板划线分离培养法的基本操作步骤。
4. 观察并分析菌落的生长特征。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖的基础，平板划线分离培养法是微生物学中常用的分离纯化方法。
通过在固体培养基上划线，将混合菌种逐步稀释，最终获得单个菌落，从而实现对微生物的分离和纯化。
三、实验材料与仪器1. 材料：牛肉膏蛋白胨培养基、接种环、无菌水、实验菌株等。
2. 仪器：无菌操作台、高压蒸汽灭菌器、培养箱、酒精灯、显微镜等。
四、实验步骤1. 培养基制备：按照实验指导书中的配方，称取牛肉膏、蛋白胨、氯化钠等试剂，加入适量无菌水溶解，调节pH值至7.2-7.6，然后分装于培养皿中，高压蒸汽灭菌。
2. 接种：将实验菌株接种于牛肉膏蛋白胨培养基平板上，用接种环进行划线操作。
3. 划线方法：采用分区划线法，将接种环在火焰上灼烧灭菌，待冷却后，先在平板边缘划一条平行线，然后从一端开始，用接种环在培养基上划一条曲线，每划一条曲线后，将接种环在火焰上灼烧灭菌，待冷却后，将培养皿向左转动90度，继续划线，直至整个平板被划满。
4. 培养：将划线后的平板倒置放入培养箱中，37℃恒温培养24小时。
5. 观察与记录：观察菌落生长情况，记录菌落特征，如菌落大小、形状、颜色、边缘等。
五、实验结果与分析1. 菌落生长情况：经过24小时培养，实验菌株在牛肉膏蛋白胨培养基上成功生长，形成单个菌落。
2. 菌落特征：观察到的菌落呈圆形，大小约为2-3mm，表面光滑，边缘整齐，呈现白色。
六、实验结论1. 本实验成功制备了牛肉膏蛋白胨培养基，并掌握了无菌操作技术。
2. 平板划线分离培养法是微生物学中常用的分离纯化方法，通过划线操作，可以将混合菌种逐步稀释，最终获得单个菌落。
3. 通过观察菌落特征，可以初步判断实验菌株的种类。
七、实验注意事项1. 实验过程中应严格遵守无菌操作原则，避免污染。
培养基平板划线法实训报告
一、实训目的1. 掌握平板划线法的原理和操作步骤。
2. 熟悉微生物分离纯化的基本方法。
3. 培养无菌操作技能和实验操作规范。
二、实训时间2022年10月15日三、实训地点生物实验室四、实训器材1. 实验材料：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、大肠杆菌混合菌悬液、无菌培养皿、接种环、酒精灯、无菌棉签等。
2. 实验仪器：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、显微镜等。
五、实训原理平板划线法是一种常用的微生物分离纯化方法。
其原理是利用接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，最终在适宜的条件下形成单菌落，从而分离纯化微生物。
六、实训步骤1. 培养基制备：将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基放入水浴中加热至融化，待冷却至50℃左右，按无菌操作法倒入无菌培养皿中，平置待凝固。
2. 灭菌操作：点燃酒精灯，用无菌棉签蘸取酒精，在酒精灯火焰上方进行消毒，待酒精燃烧完毕后，用无菌接种环蘸取少量大肠杆菌混合菌悬液。
3. 划线操作：将接种环在平板培养基表面连续划线，划线方向应与上一划线方向呈垂直，划线次数根据菌种生长速度和菌液浓度进行调整。
4. 分区培养：将划线后的平板放入恒温培养箱中，根据菌种生长速度设定培养温度和时间。
5. 观察结果：观察培养皿中的菌落生长情况，记录菌落特征，如大小、形状、颜色等。
6. 鉴定纯化：挑选典型单菌落，进行纯化培养，以获得纯种微生物。
七、实训结果与分析1. 划线操作：在平板划线过程中，接种环在培养基表面连续划线，划线方向应与上一划线方向呈垂直，划线次数根据菌种生长速度和菌液浓度进行调整。
2. 分区培养：将划线后的平板放入恒温培养箱中，根据菌种生长速度设定培养温度和时间。
本实验中，大肠杆菌生长速度较快，培养温度设定为37℃，培养时间为24小时。
3. 观察结果：在培养皿中观察到典型单菌落，菌落呈圆形、表面光滑、边缘整齐，颜色为白色。
记录菌落特征，如大小、形状、颜色等。
4. 鉴定纯化：挑选典型单菌落，进行纯化培养，以获得纯种微生物。
微生物平板划线试验
在液体培养基中加入一定量凝固 剂，使其成为固体状态，琼脂含 量一般为1.5%-2.0%
按 物 理 状 态 不 同 划 分
固体培养基 半固体培养基
固体培养基常用来进行微生物的分 离、鉴定、活菌计数及菌种保藏
琼脂含量一般为0.2%-0.7%
观察微生物的运动特征、分类鉴 定及噬菌体效价滴定
液体培养基
不加任何凝固剂 大规模工业生产及在实验室进行 微生物的基础理论和应用方面的 研究
平板划线实验实习
一、相关基础理论－－细菌的培养
一般细菌均可用人工方法进行培养，使其生长繁殖， 以便进一步观察和研究他们的各种生物学特征。为 了获得良好的细菌培养物，在分离培养细菌时，除 采用适宜的培养基，并考虑到其他的培养条件之外， 掌握各种分离培养和接种的基本技术，也是重要环 节。
1、培养基
圆形、突起、边缘整齐、表面光滑、湿润、有光泽， 不透明菌落，直径1～2mm
4、平板划线接种法
图2-4 灭菌接种环
4、平板划线接种法
（3）取菌种 左手持装有金黄色葡萄球菌或大肠杆菌菌液的 试管，用持有接种环的右手手掌及小指拔取试管塞， 将试管管口迅速通过火焰2~3次进行灭菌。 将已灭菌且已冷却的接种环伸入菌种管中，取 一接种环的菌液，然后退出菌种管，将菌种管管口 再次通过火焰2~3次灭菌，塞好试管塞，放至原来 的位置。
2、液体培养基接种方法
步骤:（1）用记号笔在待接种培养基上写明标记。 （2）如斜面培养基的接种方法一样，握持菌种管及 接种的肉汤管。 （3）接种环灭菌冷却后，伸入菌种管取少量细菌再 伸入肉汤管内，在接近液面管壁处轻轻研磨， 蘸取少量肉汤调和，使菌混于肉汤中。塞好试 管塞后，摇动液体，使细菌在液体中均匀分布。 （4）接种完毕，将接种环灭菌后放回试管架上。肉 汤管放37℃温箱培养，18～24小时后观察生长 情况。
平板划线实验报告
一、实验目的1. 熟悉平板划线法的基本原理和操作步骤。
2. 掌握无菌操作技术，提高实验操作能力。
3. 学习从混合微生物群体中分离纯化单一微生物的方法。
二、实验原理平板划线法是一种常用的微生物分离纯化方法。
其原理是将混合微生物涂布于固体培养基表面，通过接种环在培养基上划线，使微生物在培养基上逐渐稀释，最终形成单个菌落，从而实现微生物的分离和纯化。
三、实验器材1. 培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基2. 实验器材：无菌培养皿、接种环、酒精灯、无菌棉签、无菌生理盐水、显微镜等四、实验步骤1. 准备工作（1）将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基放入水浴中加热至融化。
（2）待培养基冷却至50℃左右，按无菌操作法倒2只平板（每皿约15ml），平置，待凝固。
2. 划线分离（1）将接种环在酒精灯上灼烧灭菌，待冷却后，用无菌棉签蘸取待分离的微生物悬液。
（2）在平板培养基上划一条直线，接种环从一侧划到另一侧，划线长度约5cm。
（3）用接种环从划线的一端开始，以螺旋状划线，逐渐减小划线面积，直至在平板上形成单个菌落。
（4）重复以上步骤，分别划线2-3次，使平板上的菌落数量适中。
3. 培养与观察（1）将平板放入恒温培养箱中，培养24-48小时。
（2）观察菌落生长情况，记录菌落特征，如菌落大小、形状、颜色等。
4. 鉴定（1）用接种环挑取单个菌落，接种于新的平板培养基上。
（2）重复培养和观察步骤，直至获得纯化后的微生物。
五、实验结果与分析1. 实验结果（1）平板上的菌落生长情况良好，菌落特征明显。
（2）通过多次划线分离，成功获得纯化后的微生物。
2. 实验分析（1）平板划线法是一种简单、有效的微生物分离纯化方法。
（2）无菌操作技术的掌握对实验结果至关重要。
（3）根据菌落特征，可初步判断分离纯化后的微生物种类。
六、实验总结本次实验成功运用平板划线法从混合微生物群体中分离纯化单一微生物。
通过实验，掌握了无菌操作技术，提高了实验操作能力。
同时，对微生物分离纯化的原理和方法有了更深入的了解。
微生物平板划线法实验报告
微生物平板划线法实验报告一、实验目的1. 熟悉常用微生物培养基的配置方法。
2. 学习并掌握各种无菌操作技术，并用此技术进行微生物稀释分离、划线分离接种。
3. 用平板划线法和稀释法分离微生物。
4. 认识微生物存在的普遍性，体会无菌操作的重要性。
二、实验原理土壤中有数量巨大、种类丰富的微生物，可以从中分离、纯化得到许多有价值的菌株。
从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。
常用的是平板分离法。
平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释，使其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。
统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品含菌数。
三、实验器材土样10g，牛肉膏蛋白胨培养平板20个，未知菌种平板，当天降雪；平皿，涂棒，接种环，无菌200ul, 1000ul吸头，记号笔，酒精灯，取液器:1000ul 、200ul各一支，培养箱；0.9% 无菌生理盐水，250ml三角瓶中装99ml生理盐水,每瓶加约20粒玻璃珠，250ml三角瓶中99ml生理盐水,作100倍稀释用。
四、实验步骤1. 配置培养基：取牛肉膏5g，蛋白胨10g，NaCl5g，蒸馏水1000ml 配置培养基，调pH至7.2，灭菌。
于讲课前倒板20块。
2. 采集野外样品：选择肥沃土壤,去表层土,挖5~20cm深度的土壤数10g,装入烧杯,带回实验室;取校河水装入烧杯，带回实验室；取新积雪中间层转入烧瓶，带回实验室。
3. 制备土壤稀释液：称取土样1.0g，放入盛99ml无菌水并带有玻璃珠的三角瓶中，用手振荡5min使土壤均匀分散成为土壤悬液（10-2）。
用200ul的无菌吸头从中吸取0.1ml土壤悬液，注入事先分装有0.9ml无菌水的试管中，吹吸3次，摇匀（10-3）。
类推制得10-4、10-5的土壤悬液。
平板划线实验报告
平板划线实验报告平板划线实验报告引言：平板划线是一种常见的实验方法，用于测量平面上的直线的位置和方向。
通过这种实验，可以了解到平板划线的原理和操作方法。
本文将详细介绍平板划线实验的步骤、实验结果以及实验的意义。
一、实验目的平板划线实验的主要目的是通过实验测量平面上直线的位置和方向，以验证平板划线的准确性和可靠性。
通过这个实验，可以了解到平板划线的原理和操作方法，并且可以培养学生的实验操作能力和观察分析能力。
二、实验材料1. 平板划线仪2. 直尺3. 量角器4. 笔三、实验步骤1. 将平板划线仪放在平整的桌面上，确保其稳定。
2. 用直尺在平板上划出一条直线，作为基准线。
3. 将量角器放在基准线上，测量出所需角度。
4. 使用直尺在量角器上标出所需长度的线段。
5. 使用笔将线段延长至平板的边缘。
6. 重复上述步骤，测量不同角度和长度的直线。
四、实验结果通过实验，我们得到了一系列不同角度和长度的直线。
我们可以测量这些直线与基准线的夹角和长度，并记录下来。
通过对比测量结果，我们可以发现平板划线的准确性和可靠性。
五、实验分析通过对实验结果的分析，我们可以得出以下结论：1. 平板划线的准确性较高。
在实验中，我们发现所划的直线与基准线的夹角非常接近所需角度，长度也非常接近所需长度。
这表明平板划线的准确性较高，可以满足实际需求。
2. 平板划线的可靠性较好。
在实验中，我们多次重复测量同一角度和长度的直线，结果非常接近。
这表明平板划线的可靠性较好，可以重复使用，不容易出现误差。
3. 平板划线的操作相对简单。
在实验中，我们只需要使用直尺和量角器就可以完成划线的操作。
这说明平板划线的操作相对简单，不需要太多的专业知识和技能。
六、实验意义平板划线是一种常见的实验方法，广泛应用于各个领域。
通过这个实验，我们可以了解到平板划线的原理和操作方法，培养学生的实验操作能力和观察分析能力。
同时，平板划线还可以用于工程测量、建筑设计等领域，具有一定的实际应用价值。
平板划线试验-PPT课件
4、平板划线接种法
图2-4 灭菌接种环
平板划线接种法
（3）取菌种 左手持装有金黄色葡萄球菌或大肠杆菌菌液的 试管，用持有接种环的右手手掌及小指拔取试管 塞，将试管管口迅速通过火焰2~3次进行灭菌。 将已灭菌且已冷却的接种环伸入菌种管中，取 一接种环的菌液，然后退出菌种管，将菌种管管 口再次通过火焰2~3次灭菌，塞好试管塞，放至 原来的位置。
平板划线接种法
平板划线接种法
（5）划线完毕，将琼脂平板放进皿盖，将培养皿倒 放，送进37℃温箱培养。 （6）培养18~24h后将培养皿取出。观察琼脂平板 表面生长的各种菌落，注意其大小、形状、边缘、 表面结构、透明度、颜色等性状。
平板划线接种法
常用于分离单个菌落，也可用于观察细菌 的生长状况和观察某些生化反应。
平板划线接种法——接种方法
（1）标记 在培养皿底面，用记号笔注明接种的菌名、接 种 者姓名、日期等。
4、平板划线接种法
（2）灭菌接种环 点燃酒精灯，右手以持笔式握持接种环，并放置 火焰中烧灼灭菌，先将接种环的接种丝部分置于 火焰中，待金属丝烧红并蔓延至金属端，再直接 烧灼金属环直至烧红，然后由金属环至金属杆方 向快速通过火焰，随后再反方向通过火焰，如此 2~3次。然后将接种环移开火焰，待其冷却。
平板划线接种法
（4）分离划线接种细菌（四区接种法） ①左手持琼脂平板培养基（将皿盖反放在桌上酒精 灯附近），尽量使之直立以免空气中的细菌落入 其中，并靠近火焰。右手持接种环在琼脂平板上 端来回划线，涂成一细菌薄膜（约占平板的1/10 ），视为一区。划线时使接种环与接种平板面呈 30~40度角，以腕力在平板表面行轻而快地来回 滑动动作。 ②旋转琼脂平板90度，烧灼接种环，以杀灭环 上的残留细菌，将接种环触及培养基表面以使其 冷却。灭菌接种环通过薄膜处作连续平行划线（ 约占平板1/5），此视为二区。
平板划线法的实验报告
平板划线法的实验报告平板划线法的实验报告引言：平板划线法是一种常用的实验方法，广泛应用于物理、化学、生物等领域。
本实验旨在通过平板划线法，研究液体的表面张力和接触角的变化规律，并探讨其在实际应用中的意义。
实验材料与方法：实验所需材料包括平板、毛细管、滴定管、液体样品以及实验记录表等。
首先，将平板清洗干净并晾干，以确保实验结果的准确性。
然后，将液体样品注入滴定管中，利用毛细管将液体滴在平板上。
通过改变液体滴的大小和形状，观察液体在平板上的行为，并记录相关数据。
实验结果与分析：在实验过程中，我们观察到液体滴在平板上形成一个凸起的形状。
通过测量液体滴的直径和高度，我们可以计算出液体的表面张力和接触角。
实验结果显示，液体的表面张力与其分子间的相互作用力有关。
当分子间的相互作用力增强时，液体的表面张力也会增加。
而液体的接触角则与液体与平板之间的相互作用力有关。
当液体与平板之间的相互作用力增强时，接触角也会增加。
进一步分析表明，液体的表面张力和接触角在实际应用中具有重要意义。
例如，在工业领域中，表面张力的大小决定了液体在管道中的流动性能。
高表面张力的液体更容易形成液滴，从而降低了管道的流动效率。
因此，控制液体的表面张力可以提高工业生产的效率。
而接触角则决定了液体在固体表面上的附着性能。
在涂料、油漆等领域中，通过调整液体的接触角，可以实现液体在固体表面上的均匀覆盖，提高涂层的质量。
结论：通过平板划线法的实验研究，我们了解到液体的表面张力和接触角的变化规律，并明白了它们在实际应用中的重要性。
掌握了这些知识，我们可以更好地理解液体的性质，并运用于实际生产和科研中。
同时，本实验也提醒我们，在实验过程中要严格控制实验条件，确保实验结果的准确性。
只有准确的实验结果，才能为科学研究和工业生产提供有力的支持。
总结：平板划线法是一种简单而有效的实验方法，通过观察液体在平板上的行为，可以研究液体的表面张力和接触角。
这些性质在实际应用中具有重要意义，因此对于科学研究和工业生产来说，平板划线法是一项不可或缺的实验技术。
实验六 平板划线法分离菌种
实验六平板划线法分离菌种一、实验目的1、了解平板划线法分离菌种的基本原理2、练习平板划线法分离菌种的基本操作，掌握无菌操作技术二、实验原理平板划线法是指把杂菌样品通过在平板表面划线稀释而获得单菌落的方法。
一般是将混杂在一起的不同种微生物或同种微生物群体中的不同细胞，通过在分区的平板表面上作多次划线稀释，形成较多的独立分布的单个细胞，经培养而繁殖成相互独立的多个单菌落。
通常认为这种单菌落就是某微生物的“纯种”。
实际上同种微生物数个细胞在一起通过繁殖也可形成一个单菌落，故在科学研究中，特别是在菌种鉴定等工作中，必须对实验菌种的单菌落进行多次划线分离，才可获得可靠的纯种。
平板划线分离对细菌、酵母菌较为适宜，而霉菌和放线菌的分离多采用稀释分离法进行菌种的分离纯化。
具体的划线形式有多种，这里仅介绍一种经过长期实践并证明可获得良好实验效果的方法：将一个平板分成A、B、C、D4个面积不同的小区进行划线，A区面积最小，作为待分离菌的菌源区，B和C区为经初步划线稀释的过渡区，D区则是关键的单菌落收获区，它的面积最大，出现单菌落的概率也最高。
由此可知，这4个区的面积安排应做到D>C>B>A。
鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别，因而有助于快速鉴别某种微生物。
这样的培养基称之为鉴别培养基。
例如用以检查饮水和乳品中是否含有肠道致病菌的伊红美蓝培养基就是一种常用的鉴别性培养基。
（参考GB4789.38-2012食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数）其配方中含有乳糖、伊红和美蓝，用以鉴别肠道病原菌及其他杂菌。
伊红、美蓝作为指示剂，伊红系酸性染料，当大肠埃希氏菌或产气肠杆菌分解乳糖产酸时，由于细菌带正电荷，所以被伊红着色。
在大肠埃希氏菌中因为伊红与美蓝结合，所以菌落不呈红色，而是蓝紫黑色，且具有绿色金属光泽；菌落呈棕色者为产气肠杆菌；不分解乳糖的肠道病原菌则不着色，有时因产生碱性物质较多，细菌带负电荷，被美蓝着色后，菌落并不呈蓝色，因美蓝与伊红结合，所以菌落为淡紫色。
微生物平板划线试验教学内容
4、平板划线接种法
（4）分离划线接种细菌（四区接种法） ①左手持琼脂平板培养基（将皿盖反放在桌上酒
精灯附近），尽量使之直立以免空气中的细菌落入 其中，并靠近火焰。右手持接种环在琼脂平板上端 来回划线，涂成一细菌薄膜（约占平板的1/10）， 视为一区。划线时使接种环与接种平板面呈30~40 度角，以腕力在平板表面行轻而快地来回滑动动作。
平板划线实验实习
一、相关基础理论－－细菌的培养
一般细菌均可用人工方法进行培养，使其生长繁殖， 以便进一步观察和研究他们的各种生物学特征。为 了获得良好的细菌培养物，在分离培养细菌时，除 采用适宜的培养基，并考虑到其他的培养条件之外， 掌握各种分离培养和接种的基本技术，也是重要环 节。
1、培养基
表3 常见的几种细菌的培养和基接种方法举例
平板划线接种法
斜面培养基 接种法
液体培养基 接种法
穿刺接种法
菌种
葡萄球菌和大肠 杆菌的混合菌液
大肠杆菌培养物
大肠杆菌培养物 枯草杆菌培养物
变形杆菌培养物 痢疾杆菌培养物
培养基 普通琼脂平板
琼脂斜面 培养基
普通肉汤 培养基
半固体琼脂 培养基
1、斜面培养基接种法
4、平板划线接种法
图2-4 灭菌接种环
4、平板划线接种法
（3）取菌种 左手持装有金黄色葡萄球菌或大肠杆菌菌液的
试管，用持有接种环的右手手掌及小指拔取试管塞， 将试管管口迅速通过火焰2~3次进行灭菌。
将已灭菌且已冷却的接种环伸入菌种管中，取 一接种环的菌液，然后退出菌种管，将菌种管管口 再次通过火焰2~3次灭菌，塞好试管塞，放至原来 的位置。
3、实验用品
（1）菌液：金黄色葡萄球菌和普通大肠杆菌 菌液各一管。
平板划线法
实验三菌种的分离纯化技术——平板划线法实验目的了解平板划线分离纯种的原理，并熟练掌握该操作法。
实验内容1．培养基平板的制备。
2．用平板划线分离法分离混菌。
实验原理平板划线分离法是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。
有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的，故必须反复分离多次才可得到纯种。
其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。
划线的形式有多种，可将一个平板分成四个不同面积的小区进行划线,第一区(A区)面积最小，作为待分离菌的菌源区，第二和第三区(B、C区)是逐级稀释的过渡区，第四区(D 区)，则是关键区，使该区出现大量的单菌落以供挑选纯种用。
为了得到较多的典型单菌落,平板上四区面积的分配应是D＞C＞B＞A。
实验器材大肠杆菌、枯草芽孢杆菌混合菌悬液牛肉膏蛋白胨培养基无菌培养皿，水浴锅，接种环等。
实验步骤1．融化培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基放入水浴中加热至融化。
2．倒平板：待培养基冷却至50℃左右，按无菌操作法倒2只平板(每皿约15m1)，平置，待凝固。
倒平板的方法：右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边，用左手将试管塞或瓶塞轻轻地拨出，试管或瓶口保持对着火焰；然后用右手手掌边缘或小指与无名指夹住管(瓶)塞(也可将试管塞或瓶塞放在左手边缘或小指与无名指之间夹住。
如果试管内或三角瓶内的培养基一次用完，管塞或瓶塞则不必夹在手中)。
左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝，迅速例入培养基约15m1，加盖后轻轻摇动培养皿，使培养基均匀分布在培养皿底部，然后平置于桌面上，待凝后即为平板。
3．作分区标记在皿底将整个平板划分成A、B、C、D四个面积不等的区域。
各区之间的交角应为120℃左右（平板转动一定角度约60℃），以便充分利用整个平板的面积，而且采用这种分区法可使D区与A区划出的线条相平行，并可避免此两区线条相接触。
平板划线法试验记录
平板划线法
一、实验目的
1、了解平板划线法分离菌种的基本原理
2、练习平板划线法分离菌种的基本操作，掌握无菌操作技术
二、实验原理
平板划线法是指把杂菌样品通过在平板表面划线稀释而获得单菌落的方法。
一般是将混杂在一起的不同种微生物或同种微生物群体中的不同细胞，通过在分区的平板表面上作多次划线稀释，形成较多的独立分布的单个细胞，经培养而繁殖成相互独立的多个单菌落。
通常认为这种单菌落就是某微生物的“纯种”。
实际上同种微生物数个细胞在一起通过繁殖也可形成一个单菌落，故在科学研究中，特别是在菌种鉴定等工作中，必须对实验菌种的单菌落进行多次划线分离，才可获得可靠的纯种。
三、材料和器皿
1、菌种：前期帅选中有溶钙圈的单菌落
2、培养基：MRS固体培养基
3、器皿：无菌培养皿，接种环，培养箱等。
四、实验步骤
1、MRS培养基的配置：用MRS肉汤按每升48g计算配置，向其中加入1.5%的比例加入琼脂，按1%的比例加入CaCO3后，121℃灭菌15min。
2、倒平板：培养皿灭菌，烘干后，取灭菌的MRS固体培养基倒平板（每个平板倒10mL 左右），放入4℃冰箱备用。
3、划线：于超净工作台中，将涂布平板中的单菌落用接种环挑取，按图1中所示的方法与平板上划线。
4、将接种好的平板置于37℃厌氧培养箱中培养24h。
5、培养期间，注意观察菌的生长情况，培养结束后，拍照留底。
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（3）取菌种
左手持装有金黄色葡萄球菌或大肠杆菌菌液的 试管，用持有接种环的右手手掌及小指拔取试管 塞，将试管管口迅速通过火焰2~3次进行灭菌。
将已灭菌且已冷却的接种环伸入菌种管中，取 一接种环的菌液，然后退出菌种管，将菌种管管 口再次通过火焰2~3次灭菌，塞好试管塞，放至 原来的位置。
（4）分离划线接种细菌（四区接种法） ①左手持琼脂平板培养基（将皿盖反放在桌上酒精
（1）标记 在培养皿底面，用记号笔注明接种的菌名、接
种者姓名、日期等。
（2）灭菌接种环 点燃酒精灯，右手以持笔式握持接种环，并放置 火焰中烧灼灭菌，先将接种环的接种丝部分置于 火焰中，待金属丝烧红并蔓延至金属端，再直接 烧灼金属环直至烧红，然后由金属环至金属杆方 向快速通过火焰，随后再反方向通过火焰，如此 2~3次。然后将接种环移开火焰，待其冷却。
③旋转琼脂平板90度，灼烧接种环灭菌并使之 冷却。将灭菌接种环接二区连续平行划线（约占 平板1/4），此为三区。
④旋转琼脂平板90度，接种环不必再灭菌，接 三区连续平行划线，划满平板其余达到细菌逐渐
稀释的目的。
平板划线接种法
四区划线
（5）划线完毕，将琼脂平板放进皿盖，将培养皿倒 放，放进37℃温箱培养。
平板划线试验
二、细菌的接种方法
将混合的细菌分离的方法有多种，平板划线法即 是其中之一，该方法主要是借划线而将混杂的细 菌在琼脂平板表面分散开，是单个细菌能固定在 某一点，生长繁殖后形成单个的菌落以达到分离 纯种的目的。 当细菌分离成纯种后，一般还可用斜面、液体和 半固体培养基来检验细菌的培养特征，因此接种 方法可相应的分为四种。
灯附近），尽量使之直立以免空气中的细菌落入 其中，并靠近火焰。右手持接种环在琼脂平板上 端来回划线，涂成一细菌薄膜（约占平板的 1/10），视为一区。划线时使接种环与接种平板 面呈30~40度角，以腕力在平板表面行轻而快地 来回滑动动作。 ②旋转琼脂平板90度，烧灼接种环，以杀灭环上的 残留细菌，将接种环触及培养基表面以使其冷却。 灭菌接种环通过薄膜处作连续平行划线（约占平 板1/5），此视为二区。
（6）培养18~24h后将培养皿取出。观察琼脂平板 表面生长的各种菌落，注意其大小、形状、边缘、 表面结构、透明度、颜色等性状。
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常见的几种细菌的培养和基接种方法举例
菌种
培养 基
平板划线接种 斜面培养基
法
接种法
液体培养基 接种法
葡萄球菌和大 肠杆菌的混合
菌液
大肠杆菌培养 物
大肠杆菌培养 物枯草杆菌培
养物
普通琼脂平板
琼脂斜面 培养基
普通肉汤 培养基
穿刺接种法
变形杆菌培养 物痢疾杆菌培
养物 半固体琼脂
培养基
三、平板划线接种法
常用于分离单个菌落，也可用于观察细菌 的生长状况和观察某些生化反应。