植物组织培养基本技术课件
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植物组织培养技术(一)
精选课件
3
发展简史
• 1838-1839年，德国科学家Schleide 和Schwann发表了细胞学 说，奠定了组织培养的理论基础。
1902年，德国植物学家Haberlandt 根据细胞学说，提出单个 细胞的植物细胞全能性（totipotency）理论。
1904年，Hanning 最先成功地培养了萝卜和辣根菜的胚。 1922年，Knudson 采用胚培养法获得大量兰花幼苗。 1934年，White 用番茄根尖建立起第一个活跃生长的无性繁 殖系，从而使非胚器官的培养首先获得成功。
精选课件
5
植物组织培养的分类
• 外植体（explant)：由活体（in vivo)植物体上 提取下来的，接种在培养基上的无菌细胞、组 织、器官等。
• 广义的组织培养依外植体不同，可分为：器官 培养（organ culture）、茎尖分生组织培养 (shoot tip culture,shoot apex culture,apical meristem culture)、愈伤组织培养(calluse cultrue)、细胞培养(cell culture)、原生质体培养 (protoplast culture)
的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能
表现出全能性，发育成完整的植株。人工条件下实现
的这一过程，就是植物精组选织课件培养。
13
植物细胞全能性的表达
• 脱分化（dedifferentiation)：将来自已分 化组织的已停止分裂的细胞从植物体部 分的抑制性影响下解脱出来，恢复细胞 的分裂活性。
精选课件
15
植物组织培养特点
• ①培养条件可以人为控制
组织培养采用的植物材料完全是在人为提供的培养基质和小气候环境条件下 进行生长，摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响， 且条件均一，对植物生长极为有利，便于稳定地进行周年培养生产。
植物组织培养 PPT
5、移栽锻炼 将生根的苗从锥形瓶中移至草炭土或蛭石中，用玻璃罩或 塑料布保持80%以上的湿度，2-3天后打开玻璃罩逐渐降 低湿度进行锻炼，直到将罩全部打开处于自然湿度为止。
6、定植 苗健壮后移至土中培养（定植），即可长成植株并开花。
例题：右图是实验室进行植 物组织培养的一般过程。请 回答下列问题：
(3)基本过程
①愈伤组织：由离体的植物组织或细胞经 脱分化 形成的一 种 相对没有分化 的活的薄壁细胞团组成的新生组织。 ②脱分化：又叫去分化，是由_高__度__分__化___的植物组织或细胞产 生_愈__伤___组__织__的过程。 ③再分化：愈伤组织继续培养，重新分化成_根__或___芽__等器官的 过程。
2、下面是宁夏农林科学院进行苹果试管苗培养的一般过程:
⑴请填写a～c所表示的内容。a. 脱分化 ； b. 愈伤组织 ；c. 再分化 。
⑵实验室一般使用保存的培养基母液来制备MS固体培养基,配制母液 时, 大量元素 、 微量元素 和有机物要浓缩5～10倍。 细胞分 ⑶该过程中a、c的启动关键在于培养基中所加 生长素 和 裂素 的浓度配比。
MS培养基中各成分的作用
植物激素和人工合成的植物激素
植物中存在的天然激素都有相应的使之分解的酶，这样，天 然激素在植物体内作用和存在的时间就较短，而人工合成的 激素在植物中没有相应分解它的酶，所以作用和存在的时间 长，作用效果明显。
大家应该也有点累了，稍作休息
大家有疑问的，可以询问和交流
生长素和细胞分裂素在植物组织培养中的相互作用
诱导芽的形成 愈伤组织不分化 诱导根的形成
菊花组织培养操作步骤:
生芽 生根
消毒
无菌水
1
酒精灯火焰 封口膜
生芽
植物组织培养技术.pptx
③插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖 基部插入培养基利于吸收水分和养分
思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实 验吗？
答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养 基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养， 用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。
（四）培养
愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡 化的、成无定形状态的薄壁细胞。
人参的愈伤组织
菠萝的愈伤组织
1、影响植物组织培养的因素 （1）植物材料的选择
烟草和胡萝卜的组织培养较为容易
枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 同一植物材料的年龄、保存时间的长短会 影响实验结果
菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎 上部新萌生的侧枝
使用顺序
先使用生长素，后使用 细胞分裂素
先使用细胞分裂素后使 用生长素
同时使用
实验结果 有利于细胞分裂，但不 利分化 细胞既分裂也分化
分化频率高
③生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例 对植物细胞发育方向的影响 生长素 > 细胞分裂素： 有利于根的分化 生长素 < 细胞分裂素： 有利于芽的分化，抑
2、配置培养基
① 配制培养液
② 调PH ③培养基的分装 分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此 不必添加植物激素
3、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸 汽灭菌
（二）外植体消毒
1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝 2、消毒
①流水冲洗
菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷 轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右
必要条件： 一定的营养物质、激素和其他 外界条件
原理: 细胞的全能性
思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实 验吗？
答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养 基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养， 用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。
（四）培养
愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡 化的、成无定形状态的薄壁细胞。
人参的愈伤组织
菠萝的愈伤组织
1、影响植物组织培养的因素 （1）植物材料的选择
烟草和胡萝卜的组织培养较为容易
枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 同一植物材料的年龄、保存时间的长短会 影响实验结果
菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎 上部新萌生的侧枝
使用顺序
先使用生长素，后使用 细胞分裂素
先使用细胞分裂素后使 用生长素
同时使用
实验结果 有利于细胞分裂，但不 利分化 细胞既分裂也分化
分化频率高
③生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例 对植物细胞发育方向的影响 生长素 > 细胞分裂素： 有利于根的分化 生长素 < 细胞分裂素： 有利于芽的分化，抑
2、配置培养基
① 配制培养液
② 调PH ③培养基的分装 分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此 不必添加植物激素
3、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸 汽灭菌
（二）外植体消毒
1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝 2、消毒
①流水冲洗
菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷 轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右
必要条件： 一定的营养物质、激素和其他 外界条件
原理: 细胞的全能性
植物组织培养 PPT课件
我国第一个T-DNA 插入突变体库的构建和研究为我国水稻功能基 因组学研究奠定了良好的技术和材料基础，由中国水稻研究所农业部 水稻生物学重点开放实验室和中科院上海植物生理研究所合作，通过 建立大规模、高效的农杆菌介导的转基因技术体系，将玉米转座子 Ac-Ds 等外源基因导入水稻未成熟胚和种子诱导的愈伤组织，获得了 1.2 万个独立的T-DNA 插入株系，并构建了水稻突变体的数据库。
植物细胞全能性的发现和证实，为植物种质资源的长期保存开辟 了一条新途径。采用液氮超低温保存技术，能保持很高的存活率，并 且能再生出新植株和保持原来的遗传特性。如建立茎尖分生组织培养 物的超低温保存种质库，不仅可以防止种质的遗传变异和退化，而且 可以长期保存无病毒的原种。
• <6>植物组织培养与转基因技术的应用
试管苗大规模培养
• <2>目前进展较多的大概还有胚状体形成、离体胚培养、高频 再生系 统建立、药用植物细胞培养、染色体检测、抗性研究等， 随着与其他 学科的相互渗透，植物组织培养的前景也将越来越宽广
5.植物组织培养的应用现状
• <1>植物快速繁殖和无病毒种苗生产
目前，通过离体培养获得小植株并且具有快速繁殖潜力的植物已有 100 多科1000 种以上，有的已经发展成为工业化生产的商品。世界 上80% ～ 85% 的兰花是通过组织培养进行脱毒和快速繁殖的。利用 组织培养进行植物快速繁殖及无病毒种苗生产，不仅能够挽救珍惜濒 危物种，而且能够解决植物野生资源缺乏的问题。
植物组织培养
生命科学学院0802班梅定兰2008114010239
植物组织培养
1.植物组织培养技术的历史 2.植物组织培养的原理 3.植物组织培养技术的研究应用现状 4.植物组织培养技术存在的问题及对策
植物细胞全能性的发现和证实，为植物种质资源的长期保存开辟 了一条新途径。采用液氮超低温保存技术，能保持很高的存活率，并 且能再生出新植株和保持原来的遗传特性。如建立茎尖分生组织培养 物的超低温保存种质库，不仅可以防止种质的遗传变异和退化，而且 可以长期保存无病毒的原种。
• <6>植物组织培养与转基因技术的应用
试管苗大规模培养
• <2>目前进展较多的大概还有胚状体形成、离体胚培养、高频 再生系 统建立、药用植物细胞培养、染色体检测、抗性研究等， 随着与其他 学科的相互渗透，植物组织培养的前景也将越来越宽广
5.植物组织培养的应用现状
• <1>植物快速繁殖和无病毒种苗生产
目前，通过离体培养获得小植株并且具有快速繁殖潜力的植物已有 100 多科1000 种以上，有的已经发展成为工业化生产的商品。世界 上80% ～ 85% 的兰花是通过组织培养进行脱毒和快速繁殖的。利用 组织培养进行植物快速繁殖及无病毒种苗生产，不仅能够挽救珍惜濒 危物种，而且能够解决植物野生资源缺乏的问题。
植物组织培养
生命科学学院0802班梅定兰2008114010239
植物组织培养
1.植物组织培养技术的历史 2.植物组织培养的原理 3.植物组织培养技术的研究应用现状 4.植物组织培养技术存在的问题及对策
植物组织培养的基本原理ppt课件
ppt精选版
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改变诱导期长短
主要外因方面是添加一些生长物质
Steward等(1964)用2, 4-D及其类似的 生长调节物质处理处于静止状态的组织， 看到RNA的含量很快明显地增加。并且2、 4-D积累在分裂细胞的核仁中。
Yeoman 和 Mitchell (1970) 指出了核 仁是生长物质的作用部位。
42
根发生在组织的深处，与整体植株发生 类似，是内起源。 愈伤组织的外部形态也随分化而改 变，一般由疏松转向紧密。
此时期中细胞的伸展和分裂处于 平衡，故细胞的平均大小趋于稳 定。
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形成期愈伤组织的特点：
生长旺盛的愈伤组织一般呈乳黄色或白色，
有光泽；也有浅绿色或绿色；而老化的愈伤组织
多转变为黄色甚至褐色。
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提醒：
根据形态变化列出三个时期，实际上 它们的界限并不分严格，特别是分裂期 和分化期。一块培养组织的细胞既有分 裂的又有分化的。
试管苗 试管苗
试管苗
ppt精选版
11
主要内容:
1.3.1愈伤组织的诱导与器官分化
1.3.1.1 愈伤组织诱导 1.3.1.2 器官分化
1.3.2植物体细胞胚胎发生
1.3.2.1植物体细胞胚胎发生的方式 1.3.2.2植物体细胞胚胎发生的极性和生理隔离
1.3.3离体器官诱导 1.3.4影响植物离体形态发生的因素
杂的脱分化过程恢复分裂能力转化为分生细胞。此过程有人称之
为：细胞的诱导活化过程。
期，并发生同步分裂。
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22
有人认为损伤是诱导细胞分裂的重要因素。受 伤细胞释放出的物质与外源激素共同诱导细胞 发生分裂，是诱导植物愈伤组织形成的主要原 因。
《植物组织培养技术》课件
04 植物组织培养技术的应用实例
快速繁殖技术
快速繁殖技术是指利用植物组 织培养技术，快速、大量繁殖
植物种苗的一种方法。
该技术广泛应用于花卉、果树 、林木等植物的快速繁殖，能 够大大缩短繁殖周期，提高繁
殖系数。
快速繁殖技术还可以通过控制 培养条件，实现植物的定向繁 殖，如矮化、无病毒等。
快速繁殖技术具有高效、环保 、可重复利用等优点，是现代 农业和林业生产的重要手段之 一。
濒危植物保护与复壮是保护生 物多样性和维护生态平衡的重 要手段之一，具有深远的社会 意义和生态意义。
05 植物组织培养技术的挑战与前景
技术瓶颈与解决方案
技术瓶颈
目前植物组织培养技术面临的主要瓶颈包括培养基的优化、外植体的选择与处 理、污染控制以及基因转化效率等。
解决方案
针对这些问题，研究者们正在探索新型的培养基成分、优化外植体的选择标准 、开发新型的消毒方法以及改进基因转化技术，以期提高植物组织培养的效率 和成功率。
指任何一个植物细胞都包含该物种的 全套遗传信息，具有发育成完整个体 的潜在能力。
植物细胞全能性证明
植物细胞全能性的应用
植物组织培养技术利用植物细胞的全 能性，通过离体培养获得完整的植株 ，广泛应用于植物繁殖、品种改良、 基因工程等领域。
许多植物细胞如胡萝卜、烟草、草莓 等在适宜条件下能够发育成完整的植 株，证明了植物细胞的全能性。
技术发展趋势与展望
发展趋势
随着生物技术的不断发展，植物组织培 养技术也在不断进步和完善。未来，该 技术将更加注重与基因编辑、合成生物 学等新兴技术的结合，以实现更为精准 和高效的植物育种和种质资源保护。
VS
展望
未来，植物组织培养技术有望在农业、园 艺、林业等领域发挥更大的作用，为解决 全球粮食安全、生态恢复等问题提供有力 支持。
植物组织培养ppt课件
36
三、植物组织培养的发展简史
四个阶段
探索阶段（1902-1929年） 奠基阶段（1930-1960年） 迅速发展阶段（1960-1980） 生产上广泛应用阶段(1980-今）
37
1. 探索阶段（1902-1929年）
Haberlandt：
贡献： 提出细胞全能性假说 首次进行离体细胞培养
有不同的培养反应。 （6）植物种类的差异。 一般双子叶植物比单子叶植物
及裸子植物容易。
25
4、愈伤组织（Callus）培养
①愈伤组织生长过程
在脱分化的过程中，多形成Callus, 其细胞结构无明 显极性。
• （1）诱导期：细胞准备进行分裂， 细胞大小几乎不变，
生理生化变化大，迅速合成蛋白质和核酸。
RNA
27
28
③愈伤组织的继代培养 在多数情况下，随着培养时间的延长，Callus长势
下降、褐变、分化和形态发生能力下降甚至死亡。主 要原因：染色体畸变，基因突变， 生理因素（代谢产 物），细胞或组织内激素平衡的改变，细胞对外源生 长物质的敏感性改变，培养基损耗等。
29
④愈伤组织形态发生 （1）准备：外层细胞分裂逐渐减慢并停止；内部较深
19
2 、细胞分化（Cell differentiation）
①概念
（1） 分化：是指植物体各个部分出现异质性的现象，
包括细胞分化、组织分化和器官分化。
（2）细胞分化：指同一来源的细胞逐渐产生出形态结 构、功能特征各不相同的细胞类群的过程，其结果是 在空间上细胞产生差异，在时间上同一细胞与其从前 的状态有所不同。
35
②影响细胞再分化因素： 从理论上讲，在离体培养条件下经过再分化可获 得各种
三、植物组织培养的发展简史
四个阶段
探索阶段（1902-1929年） 奠基阶段（1930-1960年） 迅速发展阶段（1960-1980） 生产上广泛应用阶段(1980-今）
37
1. 探索阶段（1902-1929年）
Haberlandt：
贡献： 提出细胞全能性假说 首次进行离体细胞培养
有不同的培养反应。 （6）植物种类的差异。 一般双子叶植物比单子叶植物
及裸子植物容易。
25
4、愈伤组织（Callus）培养
①愈伤组织生长过程
在脱分化的过程中，多形成Callus, 其细胞结构无明 显极性。
• （1）诱导期：细胞准备进行分裂， 细胞大小几乎不变，
生理生化变化大，迅速合成蛋白质和核酸。
RNA
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28
③愈伤组织的继代培养 在多数情况下，随着培养时间的延长，Callus长势
下降、褐变、分化和形态发生能力下降甚至死亡。主 要原因：染色体畸变，基因突变， 生理因素（代谢产 物），细胞或组织内激素平衡的改变，细胞对外源生 长物质的敏感性改变，培养基损耗等。
29
④愈伤组织形态发生 （1）准备：外层细胞分裂逐渐减慢并停止；内部较深
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2 、细胞分化（Cell differentiation）
①概念
（1） 分化：是指植物体各个部分出现异质性的现象，
包括细胞分化、组织分化和器官分化。
（2）细胞分化：指同一来源的细胞逐渐产生出形态结 构、功能特征各不相同的细胞类群的过程，其结果是 在空间上细胞产生差异，在时间上同一细胞与其从前 的状态有所不同。
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②影响细胞再分化因素： 从理论上讲，在离体培养条件下经过再分化可获 得各种
植物组织培养 植物组织培养技术认识护理课件
该技术通过无菌操作，将植物组织或 细胞接种在人工培养基上，在适宜的 环境条件下进行培养，诱导其分裂、 分化并发育成完整的植株。
植物组织培养技术的发展历程
1902年，德国植物学家哈伯兰 特首次提出了植物细胞具有全能
性的理论。
1958年，斯图尔德成功地将胡 萝卜根部的细胞培养成完整的植 株，标志着植物组织培养技术的
THANKS
感谢观看
基因编辑与组织培养结合
利用基因编辑技术对植物进行精确改 良，提高组织培养效率。
智能化与自动化
引入智能化和自动化技术，实现植物 组织培养的精准控制和高效生产。
生物反应器应用
利用生物反应器大规模培养植物细胞 ，为药物生产、生物燃料等领域提供 原料。
06
植物组织培养技术的伦理和社会影响
植物知识产权保护问题
培养条件与观察记录
培养条件
提供适宜的光照、温度、湿度等环境 条件，以满足植物生长需求。
观察记录
定期观察植物生长情况，记录生长数 据，及时发现问题并采取相应措施。
04
植物组织培养技术的实践应用
快速繁殖与育种
快速繁殖
通过植物组织培养技术，可以在短时间内快速繁殖大量植物，提高繁殖效率，缩短生长周期。
生物多样性
植物组织培养技术可能对生物多样性产生影 响，尤其是当某些人工繁殖的植物品种取代 野生种时，可能导致某些物种的消失或濒临 灭绝。
技术应用的伦理规范和法规
要点一
伦理原则
要点二
法规监管
植物组织培养技术的应用应遵循伦理原则，尊重生命、保 护环境和生态平衡，同时保障育种者的权益。
政府应制定相关法规和监管措施，规范植物组织培养技术 的研发和应用，确保技术的可持续发展和社会效益的发挥 。
植物组织培养技术的发展历程
1902年，德国植物学家哈伯兰 特首次提出了植物细胞具有全能
性的理论。
1958年，斯图尔德成功地将胡 萝卜根部的细胞培养成完整的植 株，标志着植物组织培养技术的
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感谢观看
基因编辑与组织培养结合
利用基因编辑技术对植物进行精确改 良，提高组织培养效率。
智能化与自动化
引入智能化和自动化技术，实现植物 组织培养的精准控制和高效生产。
生物反应器应用
利用生物反应器大规模培养植物细胞 ，为药物生产、生物燃料等领域提供 原料。
06
植物组织培养技术的伦理和社会影响
植物知识产权保护问题
培养条件与观察记录
培养条件
提供适宜的光照、温度、湿度等环境 条件，以满足植物生长需求。
观察记录
定期观察植物生长情况，记录生长数 据，及时发现问题并采取相应措施。
04
植物组织培养技术的实践应用
快速繁殖与育种
快速繁殖
通过植物组织培养技术，可以在短时间内快速繁殖大量植物，提高繁殖效率，缩短生长周期。
生物多样性
植物组织培养技术可能对生物多样性产生影 响，尤其是当某些人工繁殖的植物品种取代 野生种时，可能导致某些物种的消失或濒临 灭绝。
技术应用的伦理规范和法规
要点一
伦理原则
要点二
法规监管
植物组织培养技术的应用应遵循伦理原则，尊重生命、保 护环境和生态平衡，同时保障育种者的权益。
政府应制定相关法规和监管措施，规范植物组织培养技术 的研发和应用，确保技术的可持续发展和社会效益的发挥 。
12-03-12高二生物《专题3植物的组织培养技术》(课件)
愈伤组织
湖南长郡卫星远程学校
制作 03
2012年上学期
污染的预防措施
（一）防止外植体带菌 （二）保证培养基及接种器具彻底灭菌 （三）操作人员严格遵守无菌操作规程 （四）保证接种与培养环境清洁
湖南长郡卫星远程学校
制作 03
2012年上学期
（二）影响植物组织培养的因素
植物组织培养条件
含有全部营养成分的培养基、一定
湖南长郡卫星远程学校
制作 03
2012年上学期
（三）影响花药培养的因素
——材料的选择 花期早期时的花药比后期的更容易产生花 粉植株。一般月季的花药培养时间选在五月初 到五月中旬，即月季的初花期。 选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成 功率的重要因素。一般来说，在单核期，细胞 核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功 率最高。 为了挑选到单核期的花药，通常选择完全 未开放的花蕾。
湖南长郡卫星远程学校 制作 03 2012年上学期
湖南长郡卫星远程学校 制作 03 2012年上学期
（三）影响花药培养的因素
——材料的选择 花期早期时的花药比后期的更容易产生花 粉植株。一般月季的花药培养时间选在五月初 到五月中旬，即月季的初花期。 选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成 功率的重要因素。一般来说，在单核期，细胞 核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功 率最高。 为了挑选到单核期的花药，通常选择完全 未开放的花蕾。
的温度、空气、无菌环境、适合的PH、
适时光照等。
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制作 03
2012年上学期
高
生长素/细胞分裂素
利于根的形成
适中 促进愈伤组织的生长
低
使用顺序
利于芽的形成
本科课件-植物组织培养(完整)
• 1922年，植物离体组织培养取得了一些进展。德国人Kotte 和美国人Robbins两人同时分别独立地将分生组织作为外植 体。Kotte研究切下的根尖，如豌豆、玉米根尖，将它们放 在含有Knop溶液盐成分、葡萄糖、含氮化合物如天冬酰氨 酸、丙氨酸以及肉汁的各种营养液中。Kotte观察到根尖生 长持续了2周，但他没有进行继代培养。另一方面Robbins 通过继代，将玉米根尖离体培养了更长的时间，但随着时 间延长，生长量减少，最后消失。
① 组培技术是无菌操作技术。 ② 组培材料处于完全的异养状态。 ③ 组培材料可以是离体状态的器官、组织、细胞
或原生质体。 ④ 组织培养物可以形成克隆（clone，无性繁殖
系），也可以进行茎芽增殖或生根。
⑤ 组培容器内的气体和环境气体可通过封口材 料进行交换，相对湿度通常是几乎100％，因 此，组培苗叶片表面一般都无角质层或蜡质 层，且气孔保卫细胞功能缺乏，气孔始终都 是张开的。
• 外植体（explant）：用于离体培养的那部分植物 器官、组织或细胞。
• 愈伤组织（callus） ：是指外植体因受伤或在离体 培养时，其细胞进行活跃的分裂增殖而形成的一 种无特定结构和功能的组织。
0.1.2 植物组织培养的特点
• 采用微生物学的实验手段来操作植物离体 的器官、组织和细胞。
具体表现为以下方面：
0.2 植物组织培养的形成和发 展
开创阶段 （上世纪初－上世纪30年代末）
1. Schleiden 和Schwann
• 植物组织培养的理论基础源于德国植物学家 Schleiden和动物学家Schwann于1838-1839年提 出的细胞学说：一切生物都是由细胞构成，细 胞是生物体的基本功能单位，细胞只能由细胞 分裂而来。
相关主题
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（2）常用的生长素：吲哚乙酸（IAA）、吲哚丁酸 （IBA）、萘乙酸（NAA）、2,4-二氯苯氧乙酸 （2,4-D）
（3）常用浓度：0.1~5.0mg/L （4）需注意的问题： ①IAA稳定性差——过滤灭菌，避光保存； ②生长素与细胞分裂素（CTK）配合使用：IAA/CTK比值
高，促进根的分化；IAA/CTK比值低，促进芽的分化； IAA/CTK比值始终，形成愈伤组织，不分化 ③ 2,4-D可有效诱导愈伤组织的形成，但对芽的形成具 有抑制作用，且使用浓度范围较窄，稍过量对植物组 织有毒害作用； ④诱导分化、增殖和生根阶段一般选用IBA和NAA
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
第二章 植物组织培养的 基本技术
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
IAA/GA比值高时，有利于木质部分化 IAA/GA比值低时，有利于韧皮部分化 c.打破休眠 d.抑制器官和胚状体的形成，但二者形成后，又可 促进其生长 ②常用浓度：0.1-0.5mg/L
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
BA）、激动素（KT）、玉米素（ZT）等。 （3）使用浓度：一般0.1~10.0mg/L
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
3.其他生长调节剂： （1）GA：赤霉素 ①作用： a.促进幼苗茎的伸长和不定胚发育为小植株 b.与生长素协同作用，对形成层的分化有影响：
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
三、培养基的类型及特点
1、MS培养基——应用最为广泛 （1）特点：无机盐和离子浓度较高，硝酸盐
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
（三）有机营养物质：
培养基中若只含有大量元素与微量元素， 常称为基本培养基（basic medium)。为不 同的培养目的往往要加入一些有机物以利 于快速生长。常加入的有机成分主要有以 下几类：
5.天然有机附加物：如椰汁、香蕉汁、马铃 薯汁、酵母提取液等。
（四）植物生长调节剂： 1、生长素类： （1）组培中的作用： ①促进细胞伸长； ②促进生根； ③诱导愈伤组织的形成； ④2,4-D会诱导某些植物不定胚的形成。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
第一节 培养基及其配制
一、培养基成分 培养基：供植物材料生长的人工配制的基质。 （一）水分：母液及培养基配制时，要用蒸 馏水，但大规模生产时，可用自来水代替。 （二）无机元素：
根据植物需要量的多少，可分为：大量 元素和微量元素。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
（2）ABA：脱落酸 a.促进胚：琼脂、卡拉胶等 浓度：一般0.4%~0.7% （六）其他物质 1.活性炭（AC）：防止外植体褐变；降低玻璃
苗的产生率；有利于生根，一般0.5%~3% 2.抗生素： 3.抗氧化物质
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
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2.细胞分裂素（CTK）： （1）作用： ①促进细胞分裂； ②诱导芽的分化，促进侧芽萌发生长； ③抑制顶端优势，延缓离体组织衰老； ④对根的生长一般起抑制作用 （2）常用的细胞分裂素：6-苄基腺嘌呤（6-
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
1、碳水化合物——碳源： 可作为碳源的有蔗糖，葡萄糖和果糖
最常用的碳源是蔗糖，蔗糖使用浓度在 2%—5% ， 常 用 3% （ 30g/L ） ， 即 配 制 一 升培养基称取30g蔗糖，有时可用2.5%。
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2、微量元素：指小于0.5mmol／L的元素，包括 Fe，B，Mn，Cu，Zn，Mo，Co等。 Fe：常用FeSO4·7H20，因其在pH值5.2以上，易形
成Fe(OH)3的不溶性沉淀，通常FeSO4·7H20 和 Na2—EDTA结合成络合物使用。 B：H3BO3 Mn，Cu，Zn：常用其硫酸盐； Mo：Na2MoO4 Co: CoCl2
1.大量元素：指浓度大于0.5mmol／L的元 素，包括：N、P、K、Ca、Mg、S等。 N：在制备培养基时以NO3-N和NH4-N两种形 式供应。常用含N物质有KNO3、NH4NO3、 (NH4)2SO4 P：常用的物质有KH2P04或NaH2P04等。 K：常用的物质有KCI、KN03、 KH2P04 Ca、Mg、S： MgSO4·7H20、 CaCl2·2H2O
（3）常用浓度：0.1~5.0mg/L （4）需注意的问题： ①IAA稳定性差——过滤灭菌，避光保存； ②生长素与细胞分裂素（CTK）配合使用：IAA/CTK比值
高，促进根的分化；IAA/CTK比值低，促进芽的分化； IAA/CTK比值始终，形成愈伤组织，不分化 ③ 2,4-D可有效诱导愈伤组织的形成，但对芽的形成具 有抑制作用，且使用浓度范围较窄，稍过量对植物组 织有毒害作用； ④诱导分化、增殖和生根阶段一般选用IBA和NAA
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第二章 植物组织培养的 基本技术
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IAA/GA比值高时，有利于木质部分化 IAA/GA比值低时，有利于韧皮部分化 c.打破休眠 d.抑制器官和胚状体的形成，但二者形成后，又可 促进其生长 ②常用浓度：0.1-0.5mg/L
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BA）、激动素（KT）、玉米素（ZT）等。 （3）使用浓度：一般0.1~10.0mg/L
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3.其他生长调节剂： （1）GA：赤霉素 ①作用： a.促进幼苗茎的伸长和不定胚发育为小植株 b.与生长素协同作用，对形成层的分化有影响：
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三、培养基的类型及特点
1、MS培养基——应用最为广泛 （1）特点：无机盐和离子浓度较高，硝酸盐
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（三）有机营养物质：
培养基中若只含有大量元素与微量元素， 常称为基本培养基（basic medium)。为不 同的培养目的往往要加入一些有机物以利 于快速生长。常加入的有机成分主要有以 下几类：
5.天然有机附加物：如椰汁、香蕉汁、马铃 薯汁、酵母提取液等。
（四）植物生长调节剂： 1、生长素类： （1）组培中的作用： ①促进细胞伸长； ②促进生根； ③诱导愈伤组织的形成； ④2,4-D会诱导某些植物不定胚的形成。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
第一节 培养基及其配制
一、培养基成分 培养基：供植物材料生长的人工配制的基质。 （一）水分：母液及培养基配制时，要用蒸 馏水，但大规模生产时，可用自来水代替。 （二）无机元素：
根据植物需要量的多少，可分为：大量 元素和微量元素。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
（2）ABA：脱落酸 a.促进胚：琼脂、卡拉胶等 浓度：一般0.4%~0.7% （六）其他物质 1.活性炭（AC）：防止外植体褐变；降低玻璃
苗的产生率；有利于生根，一般0.5%~3% 2.抗生素： 3.抗氧化物质
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
2.细胞分裂素（CTK）： （1）作用： ①促进细胞分裂； ②诱导芽的分化，促进侧芽萌发生长； ③抑制顶端优势，延缓离体组织衰老； ④对根的生长一般起抑制作用 （2）常用的细胞分裂素：6-苄基腺嘌呤（6-
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
1、碳水化合物——碳源： 可作为碳源的有蔗糖，葡萄糖和果糖
最常用的碳源是蔗糖，蔗糖使用浓度在 2%—5% ， 常 用 3% （ 30g/L ） ， 即 配 制 一 升培养基称取30g蔗糖，有时可用2.5%。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
2、微量元素：指小于0.5mmol／L的元素，包括 Fe，B，Mn，Cu，Zn，Mo，Co等。 Fe：常用FeSO4·7H20，因其在pH值5.2以上，易形
成Fe(OH)3的不溶性沉淀，通常FeSO4·7H20 和 Na2—EDTA结合成络合物使用。 B：H3BO3 Mn，Cu，Zn：常用其硫酸盐； Mo：Na2MoO4 Co: CoCl2
1.大量元素：指浓度大于0.5mmol／L的元 素，包括：N、P、K、Ca、Mg、S等。 N：在制备培养基时以NO3-N和NH4-N两种形 式供应。常用含N物质有KNO3、NH4NO3、 (NH4)2SO4 P：常用的物质有KH2P04或NaH2P04等。 K：常用的物质有KCI、KN03、 KH2P04 Ca、Mg、S： MgSO4·7H20、 CaCl2·2H2O