植物组织培养基本技术课件
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一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观,权 力必须 为职工 群众谋 利益, 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
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2.细胞分裂素(CTK): (1)作用: ①促进细胞分裂; ②诱导芽的分化,促进侧芽萌发生长; ③抑制顶端优势,延缓离体组织衰老; ④对根的生长一般起抑制作用 (2)常用的细胞分裂素:6-苄基腺嘌呤(6-
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(三)有机营养物质:
培养基中若只含有大量元素与微量元素, 常称为基本培养基(basic medium)。为不 同的培养目的往往要加入一些有机物以利 于快速生长。常加入的有机成分主要有以 下几类:
(2)ABA:脱落酸 a.促进胚状体的发生 b.促进胚状体发育成熟但不萌发 (五)凝固剂:琼脂、卡拉胶等 浓度:一般0.4%~0.7% (六)其他物质 1.活性炭(AC):防止外植体褐变;降低玻璃
苗的产生率;有利于生根,一般0.5%~3% 2.抗生素: 3.抗氧化物质
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(2)常用的生长素:吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸 (IBA)、萘乙酸(NAA)、2,4-二氯苯氧乙酸 (2,4-D)
(3)常用浓度:0.1~5.0mg/L (4)需注意的问题: ①IAA稳定性差——过滤灭菌,避光保存; ②生长素与细胞分裂素(CTK)配合使用:IAA/CTK比值
高,促进根的分化;IAA/CTK比值低,促进芽的分化; IAA/CTK比值始终,形成愈伤组织,不分化 ③ 2,4-D可有效诱导愈伤组织的形成,但对芽的形成具 有抑制作用,且使用浓度范围较窄,稍过量对植物组 织有毒害作用; ④诱导分化、增殖和生根阶段一般选用IBA和NAA
第一节 培养基及其配制
一、培养基成分 培养基:供植物材料生长的人工配制的基质。 (一)水分:母液及培养基配制时,要用蒸 馏水,但大规模生产时,可用自来水代替。 (二)无机元素:
根据植物需要量的多少,可分为:大量 元素和微量元素。
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三、培养基的类型及特点
1、MS培养基——应用最为广泛 (1)特点:无机盐和离子浓度较高,硝酸盐
BA)、激动素(KT)、玉米素(ZT)等。 (3)使用浓度:一般0.1~10.0mg/L
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3.其他生长调节剂: (1)GA:赤霉素 ①作用: a.促进幼苗茎的伸长和不定胚发育为小植株 b.与生长素协同作用,对形成层的分化有影响:
IAA/GA比值高时,有利于木质部分化 IAA/GA比值低时,有利于韧皮部分化 c.打破休眠 d.抑制器官和胚状体的形成,但二者形成后,又可 促进其生长 ②常用浓度:0.1-0.5mg/L
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2、微量元素:指小于0.5mmol/L的元素,包括 Fe,B,Mn,Cu,Zn,Mo,Co等。 Fe:常用FeSO4·7H20,因其在pH值5.2以上,易形
成Fe(OH)3的不溶性沉淀,通常FeSO4·7H20 和 Na2—EDTA结合成络合物使用。 B:H3BO3 Mn,Cu,Zn:常用其硫酸盐; Mo:Na2MoO4 Co: CoCl2
5.天然有机附加物:如椰汁、香蕉汁、马铃 薯汁、酵母提取液等。
(四)植物生长调节剂: 1、生长素类: (1)组培中的作用: ①促进细胞伸长; ②促进生根; ③诱导愈伤组织的形成; ④2,4-D会诱导某些植物不定胚的形成。
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1、碳水化合物——碳源: 可作为碳源的有蔗糖,葡萄糖和果糖
最常用的碳源是蔗糖,蔗糖使用浓度在 2%—5% , 常 用 3% ( 30g/L ) , 即 配 制 一 升培养基称取30g蔗糖,有时可用2.5%。
1.大量元素:指浓度大于0.5mmol/L的元 素,包括:N、P、K、Ca、Mg、S等。 N:在制备培养基时以NO3-N和NH4-N两种形 式供应。常用含N物质有KNO3、NH4NO3、 (NH4)2SO4 P:常用的物质有KH2P04或NaH2P04等。 K:常用的物质有KCI、KN03、 KH2P04 Ca、Mg、S: MgSO4·7H20、 CaCl2·2H2O
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第二章 植物组织培养的 基本技术
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