土壤脲酶测定

土壤脲酶测定

一、实验目的

1.了解土壤中脲酶的活性及其对氮素转化的重要作用；

2.通过脲酶测定，评估土壤中氮素的转化和利用效率；

3.为制定合理的施肥和作物管理措施提供依据。

二、实验原理

脲酶是一种能够催化尿素分解的酶，在土壤中起着至关重要的作用。它能够将尿素分解成氨和二氧化碳，释放出的氨可以被植物吸收利用。因此，脲酶的活性可以反映土壤中氮素转化的能力。

本实验采用靛酚比色法测定脲酶活性。该方法基于脲酶催化尿素分解产生的氨与靛酚反应生成靛酚蓝，其颜色深浅与脲酶活性呈正比。通过比色法可以测定样品中脲酶的相对活性。

三、实验步骤

1.样品采集与处理：选取具有代表性的土壤样品，将其风干、磨碎并过筛。称

取适量样品于试管中，加入适量的磷酸盐缓冲液，充分搅拌均匀。

2.实验溶液配制：配制尿素溶液（100mmol/L）和靛酚溶液（0.05mol/L）。

3.对照试验：取一支试管，加入等体积的磷酸盐缓冲液和尿素溶液，充分混合

后放置在30℃恒温箱中30分钟。然后加入靛酚溶液并充分混合，放置10

分钟。最后加入适量碳酸钠溶液，使溶液呈碱性，终止反应。以靛酚蓝为标准品，在625nm波长下测定吸光度。

4.样品试验：取适量样品于试管中，加入等体积的磷酸盐缓冲液和尿素溶液，

充分混合后放置在30℃恒温箱中30分钟。然后按照对照试验的步骤加入靛酚溶液并测定吸光度。

5.数据记录与处理：记录对照试验和样品试验的吸光度值，计算脲酶活性。

四、结果分析

1.对照试验与样品试验吸光度值的差异反映了样品中脲酶的活性。对照试验

中，由于没有脲酶的作用，尿素分解较慢，因此靛酚与氨的反应较慢，吸光度值较低。而在样品试验中，由于样品中存在脲酶，脲酶催化尿素分解加速，导致靛酚与氨的反应加快，吸光度值较高。

2.通过比较对照试验和样品试验的吸光度值，可以计算出样品的脲酶活性。具

体计算方法为：脲酶活性（mg/g·h）= [(样品吸光度-对照吸光度)/(对照吸光度×时间×样品质量)]×100%。

3.根据测定的脲酶活性，可以评估土壤中氮素的转化和利用效率。一般来说，

脲酶活性较高的土壤，其氮素转化和利用效率也较高。但是需要注意的是，脲酶活性并不是唯一的指标，还需要结合其他指标如土壤质地、pH值、有机质含量等进行综合分析。

4.通过比较不同土壤样品的脲酶活性，可以了解不同土壤类型或不同土地利用

方式对土壤中氮素转化的影响。同时也可以为制定合理的施肥和作物管理措施提供依据。例如，对于脲酶活性较低的土壤，可以增加氮肥施用量或采取其他措施来提高氮素转化和利用效率。

五、注意事项

1.在实验过程中要保证实验操作的准确性，避免误差的产生；

2.为了保证实验结果的可靠性，需要选取具有代表性的土壤样品；

3.在实验过程中要注意安全问题，避免接触有害物质等。