培养基及其制备技术

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演示文稿-培养基及其制备技术.

A. 对于其它渠道有可能带入的过多的某种无机离子和微量元素在发酵过程中必须加以考虑
例：铁离子青霉素发酵中，铁离子的浓度要小于20μ g/ml 发酵罐必须进行表面处理
B、使用时注意盐的形式（pH的变化）例：黑曲酶NRRL-330,生产α-淀粉酶，pH对酶活的影响
不加加 K2HPO4 加 KH2PO4
NaNO3 + 4H2 → NH3 + 2H2O + NaOH
无机氮源被菌体作为氮源利用后，培养液中就留下了酸性或碱性物质，这种经微生物生理作用（代谢）后能形成酸性物质的无机氮源叫生理酸性物质，如硫酸胺，若菌体代谢后能产生碱性物质的则此种无机氮源称为生理碱性物质，如硝酸钠。正确使用生理酸碱性物质，对稳定和调节发酵过程的pH有积极作用。
2、半固体培养基(semi-solid medium) 液体培养基中加入少量的凝固剂而使之呈半固体状态
的一类培养基。(0.2～0.7％琼脂)。常用于观察细菌运动特征，噬菌体效价鉴定以及厌氧菌培养等。 3、液体培养基(liquid medium)
不含任何凝固剂，其组分均匀，呈液体状态，用途广泛。常用于微生物生理代谢的各种研究，也是大规模工业发酵生产上普遍采用的培养基。
4、产物抑制剂在发酵过程中加入抑制剂会抑制某些代谢途径的进行，同
时刺激另一代谢途径活跃，以致可以改变微生物的代谢途径，从而获得人们所需的某种产物或使正常代谢的某一代谢中间物积累起来。
2ATP 葡萄糖
2ATP
亚硫酸氢钠
2ADP
2ADP
3-磷酸甘油醛
1,6-二磷酸果糖
NAD+
丙酮酸 NADH+H+
什么叫做流加？
用法：前体使用时普遍采用流加的方法

培养基制备实验报告

一、实验目的1. 掌握培养基的基本成分和配制方法。

2. 熟悉培养基的灭菌操作流程。

3. 了解培养基在微生物培养中的应用。

二、实验原理培养基是微生物生长繁殖的营养基质，通常由碳源、氮源、无机盐、生长因子和水等组成。

根据微生物的营养需求和实验目的，可以配制不同类型的培养基。

灭菌是保证培养基无菌的关键步骤，常用的灭菌方法包括高压蒸汽灭菌、干热灭菌和过滤灭菌等。

三、实验材料与仪器1. 材料：- 酵母提取物- 胰蛋白胨- 琼脂- NaCl- K2HPO4- MgSO4·7H2O- 水- 水平式电热灭菌锅- 高压蒸汽灭菌锅- 烧杯- 玻璃棒- 试管- 移液器- 灭菌指示剂- 灭菌棉塞2. 仪器：- 电子天平- 灭菌器- 玻璃器皿四、实验步骤1. 培养基的配制：- 称取酵母提取物10g、胰蛋白胨20g、琼脂15g、NaCl 5g、K2HPO4 1g、MgSO4·7H2O 0.5g，加入适量水溶解。

- 将溶液转移至烧杯中，用玻璃棒搅拌至完全溶解。

- 将溶液转移至锥形瓶中，用移液器定容至1000mL。

- 将锥形瓶置于电热灭菌锅中，进行121℃、20min的高压蒸汽灭菌。

2. 灭菌指示剂的加入：- 在灭菌后的培养基中，加入灭菌指示剂，观察指示剂的变化，确认培养基是否灭菌彻底。

3. 培养基的倒平板：- 将灭菌后的培养基冷却至50℃左右，倒入平板中，待凝固后，用无菌镊子取出平板，标记并放置于培养箱中。

五、实验结果与分析1. 培养基灭菌效果：- 通过观察灭菌指示剂的变化，确认培养基灭菌彻底。

2. 培养基平板制备：- 倒平板过程中，注意无菌操作，防止污染。

六、实验讨论1. 培养基的配制过程中，应注意称量准确，避免误差。

2. 灭菌过程中，应控制好温度和时间，确保培养基灭菌彻底。

3. 倒平板过程中，应注意无菌操作，防止污染。

七、实验总结通过本次实验，我们掌握了培养基的基本成分和配制方法，熟悉了培养基的灭菌操作流程，了解了培养基在微生物培养中的应用。

培养基制备技术

6. pH值
培养的植物材料大多数要求弱酸性环境，在培养基灭菌前一般都将 pH调整到5.5~6.0之间。当pH高于6.0时，培养基会变硬；低于5.0时，琼脂凝固效果不好。pH 的测试常用精密pH试纸，调整通常采用1mol/L盐酸或1mol/L NaOH。
三、培养基的选择
3.1 在离体培养条件下，不同的植物材料，对各类营养元素有不同的要求，甚至同一种植物不同部分的组织对营养的要求也不相同，只有满足
5
贮备液Ⅲ 贮备液Ⅳ
FeSO4· 2O 7H Na2· EDTA· 2O 2H 肌醇
5
烟酸盐酸吡哆醇（维生素B1）
盐酸硫胺素(维生素B6) 甘氨酸
100 100
20 400
5
3 培养基的配制
（1）称出规定数量的琼脂和蔗糖，加水直到培养基最终体积的1/4，在电炉或电磁炉上加热使之溶解。
培养基的配制
了它们各自的特殊要求，才能使它们的生长取得
令人满意的结果。目前使用的约有上百种。
3.2常用的培养基可分为MS及其类似物培养基
如LS，BL，BM，ER等，可用于大多数植物组
织和细胞的培养；硝酸盐含量较高的培养基
（如B5、N6、SH等）；中等无机盐含量的培
养基（如H、Nitsch、Miller等）；低无机盐培
通过以上实验，常常就足以研制出一种适合的
培养基。
四、培养基的配制
1 准备工作
配制培养基所用的主要器具包括：不同型
号的烧杯、容量瓶、移液管、滴管、玻棒、三
角瓶、试管以及培养基分装器等。配制培养基
前，要洗净备齐所用器具。
配制培养基一般用蒸馏水或无离子水。化
学药剂应采用化学纯CP（三级）及分析纯AR

细菌培养基的制备、灭菌及接种、培养技术ppt课件

20
目的要求
掌握从环境中分离培养细菌的方法，从而获得若干种细菌纯培养技能。掌握几种接种技术。
21
实验材料
无菌培养皿(直径90mm)10套、无菌移液管1mL2
支、10mL1支。
营养琼脂培养基1瓶，活性污泥或土壤或湖水1瓶，无菌稀释水90mL1瓶、9mL5管。其它：接种环、酒精灯、恒温箱。
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c. 第三次蒸煮之后基本无菌，但为了确保无菌仍要放在37℃恒温条件下培养24h，确定无菌才能使用。
18
实验程序4
（培养基和玻璃器材的灭菌方法）
过滤除菌法：不能用加热灭菌的液体物质（如维生素、血清），一般可用细菌过滤器进行除菌。
19
第二部分细菌纯种分离、培养和接
种技术
目的要求实验材料实验程序
9
实验程序2
（培养基的配制方法和步骤） 3. 调pH值：用10％ NaOH调pH至7.6，用精密pH试纸对照。 4. 分装：将培养基分装于5支试管，其余全部倒入250mL锥形瓶中，分别塞上棉塞。注意不要污染棉塞和瓶口。 5. 包扎成捆，挂上标签，注明何种培养基。 6. 灭菌备用：培养基灭菌后必须在37℃下恒温培养24h，确定无菌生长，方可使用。
实验二
细菌培养基的配制、灭菌及接种、培养技术
1
第一部分细菌培养基的制备、灭菌
目的要求实验材料实验程序
2
目的要求
熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备。掌握培养基和无菌水的制备方法。掌握高压蒸气灭菌技术。
3
实验材料
药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水等。
高压蒸气灭菌锅、烘箱、细菌过滤器、酒精灯。其它：培养皿、试管、移液管、锥形瓶、烧杯、玻璃珠等。

培养基配制技术—培养基的制备

3.调pH
在未调pH 前，先用精密pH 试纸测量培养基的原始pH，如果偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入 1mol ／L NaOH，边加边搅拌，并随时用 pH 试纸测其pH，直至 pH 达 7.4～7.6。反之，用 1mol／L HCl 进行调节。对于要求pH 较精确的培养基，其pH 的调节常用酸度计进行。 pH 调节不要过头，以避免回调而影响培养基内各物质的浓度。 4.过滤
谢谢
牛肉膏蛋白胨培养基配方：
牛肉膏3.0g，蛋白胨10.0g， NaCL5.0g，琼脂15～20g，水1000ml ，pH 7.4～7.6 。其中牛肉膏提供碳源、能源、磷酸盐和维生素，蛋白胨提供氮源和维生素，而NaCL提供无机盐，在配制固体培养基时需要加入一定量琼脂作凝固剂，如果配制液体培养基则不用加入琼脂。
将灭菌的试管培养基冷至 50℃左右(以防斜面上冷凝水太多)，将试管口端搁在玻棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。
10.无菌检查
将灭菌培养基放入37℃的恒温箱中培养24～ 48h，检查确实无菌生长方可使用。
谢谢
PDA培养基配方：
马铃薯 200克、葡萄糖 20克、琼脂 15～20克、自来水 1000毫升、自然pH。
二、控制营养物质的浓度和比例营养物质浓度过低不能满足微生物正常生长所需，太高则可能
对微生物产生毒害，如高浓度的无机盐、重金属离子等会抑菌或杀菌。因此，营养物质合适的浓度是微生物生长发育的必要条件之一。在生产过程中，在不影响微生物的生理特性和代谢转化率的情况下，通常趋向在较高浓度下进行生产，以提高产物产量，并尽可能选育高渗透压的生产菌株。当然，培养基浓度太大会使培养基黏度增加和溶氧量降低。

培养基制备实验报告

培养基制备实验报告培养基制备实验报告一、引言培养基是微生物学研究中不可或缺的工具，它提供了微生物生长所需的营养物质和环境条件。

本实验旨在探究培养基的制备方法以及其对微生物生长的影响。

二、实验材料与方法2.1 实验材料- 葡萄糖- 蛋白胨- 磷酸二氢钾- 氯化钠- 硫酸镁- 碳酸钠- 琼脂- 紫菜酸钠- 菌种2.2 实验方法1. 按照所需培养基的成分配比，称取相应质量的试剂。

2. 将葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、氯化钠、硫酸镁、碳酸钠等试剂溶解于适量的去离子水中，得到培养基溶液。

3. 将培养基溶液倒入培养瓶中，加入适量的琼脂并充分搅拌均匀。

4. 用无菌纱布过滤培养基溶液，排除其中的固体颗粒。

5. 将过滤后的培养基溶液分装至无菌培养皿中，每个培养皿约倒入20 mL。

6. 在培养皿中加入适量的紫菜酸钠，以供微生物生长所需的营养物质。

7. 用无菌技术将菌种接种于培养皿中，封闭培养皿并进行培养。

三、实验结果与分析经过一段时间的培养，我们观察到培养皿中出现了微生物的生长。

这表明我们制备的培养基具备了支持微生物生长的营养物质和环境条件。

实验中添加的紫菜酸钠也能提供微生物所需的特殊营养物质，促进微生物的繁殖。

对于培养基的制备，我们需要注意以下几点：1. 成分配比：培养基中各种营养物质的配比需要根据不同微生物的需求进行调整。

不同的微生物对营养物质的需求不同，因此制备不同种类的培养基时需要根据实际情况进行配比调整。

2. pH值调节：微生物对pH值的敏感度较高，因此在制备培养基时需要根据微生物的需求调节其pH值，以提供适宜的生长环境。

3. 琼脂的添加：琼脂是为了使培养基凝固，便于微生物的生长观察。

在制备培养基时，需要充分搅拌琼脂，使其均匀分布于培养基中。

4. 紫菜酸钠的添加：紫菜酸钠是一种富含多种维生素和微量元素的营养物质，可以提供微生物所需的特殊营养物质。

在某些微生物的培养中，添加适量的紫菜酸钠可以促进微生物的生长和繁殖。

实验1 培养基的制备技术(讲稿)

实验1 培养基的制备与微生物接种技术一、实验目的1、掌握基础培养基的制造方法和过程。

2、了解人工培养基的主要成分及一般制备原则。

3、了解各种培养基的特点。

二、实验原理培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖的营养基质。

培养基要具备以下条件：①要有适宜的营养物质和水分；②具有适宜的PH值；③配制后应经灭菌呈无菌状态。

培养基按物理状态可分液体培养基、固体培养基、半固体培养基。

常用琼脂作凝固剂。

培养基制备的基本程序：配料、溶化、测定及矫正PH、过滤、分装、灭菌、无菌检验三、仪器设备试管、刻度吸管、纱布、滤纸、三角瓶、培养皿、量筒、漏斗、棉塞、电炉、天平、包装纸、棉线、ph试纸、玻棒。

试剂：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾、琼脂条、0.1mol/L和1mol/L氢氧化钠、0.1mol/L和1mol/L的盐酸溶液、蒸馏水等。

四、配制原则和种类（一）培养基配制原则1、培养基：培养基是提供食用菌等生物生长发育所需的营养与特定环境条件的基质，如蘑菇菌是有机营养型中的草腐生菌。

制备培养基不仅要考虑它所需要的含碳化合物、含氮化合物、矿物盐类、生长因子，还要考虑水与pH环境，同时还应考虑它们培养方式是固体培养还是液体培养。

因此，可以把按菌类生长发育需要比例配制的灭菌营养基质，称为培养基。

换言之，培养基必须具备三个条件：含有菌株生长发育所需要的营养物质；具有菌类生长环境条件；经过灭菌，并保持无菌状态。

2、培养基的选择：在整菌种制备过程中，从母种到原种、栽培种，各个阶段的目的要求有所不同，所选用的培养基的配比也应有所区别。

一般母种初生菌丝较嫩弱，分解养分能力差，要求营养丰富、完全，氮源、维生素的比例应高。

须选用易于被菌丝吸收利用的物质，如葡萄糖、蔗糖、马铃薯、蛋白胨、无机盐类及生长素等为等而原种、栽培种所需数量较多，且菌丝分解能力强，可利用大量农作物秸秆、粪草、棉籽壳、麸皮、米糠等原料作为培养基。

（二）培养基的种类1、根据营养物质的来源，可以把培养基分为天然培养基、半合成培养基和合成培养基。

常用培养基的制备及注意事项

常用培养基的制备及注意事项培养基是细菌、真菌、细胞等微生物进行繁殖和培养的营养地，广泛应用于微生物学和生物技术领域。

下面将介绍几种常用的培养基的制备方法及注意事项。

1.琼脂培养基：琼脂培养基是最常见的一种培养基，它以琼脂凝胶为基质，通过加入不同的营养成分，满足微生物的生长需求。

制备方法如下：1）称取适量琼脂，加入适量蒸馏水中搅拌均匀。

2）加入适量皂液，加热融化琼脂。

3）待琼脂溶液冷却至40°C左右时，加入已经制备好的培养基成分，如碳源、氮源、维生素等。

4）搅拌均匀，调整pH值，加热煮沸。

5）倒入装有适量培养基的培养皿中，使其凝胶化。

注意事项：1）使用较干燥的琼脂可减少湿润时间。

2）煮沸或加热时间不宜太长，以免过度加热导致一些营养成分失活。

3）制备过程中要注意无菌操作，避免细菌等微生物污染。

2.液体培养基：液体培养基适用于微生物的扩大培养、动态研究等实验。

制备方法如下：1）称取适量蒸馏水，加热至沸腾。

2）加入培养基成分，如碳源、氮源、维生素等，搅拌均匀。

3）调整pH值，加热至沸腾。

4）倒入试管或烧杯中，用胶塞或铝箔盖好。

注意事项：1）加热过程中要注意及时搅拌，避免成分沉积或变色。

2）制备前要将试管或烧杯等容器进行高温灭菌处理。

3）使用培养基前要进行菌液均匀混合，避免因成分沉积而导致的营养不均匀。

3.固体选择性培养基：固体选择性培养基是指根据微生物对特定组分的感受性选择性地制备的培养基。

制备方法如下：1）制备好的琼脂培养基加热至融化，放置冷却至40°C左右。

2）加入特定的抗生素、色素或指示剂等，搅拌均匀。

3）倒入装有适量培养基的培养皿中，等待凝胶化。

注意事项：1）特定抗生素或其他抑菌剂的添加量需要谨慎，过量添加可能抑制需要培养的微生物。

2）搅拌均匀时，应快速且均匀，以避免导致混合不均。

3）固体选择性培养基凝胶化后，尽量避免暴露于空气中，以免细菌等微生物的污染。

以上所述的常用培养基只是其中的一部分，不同微生物的培养要求不同，制备方法也有所差异。

常用细菌培养基制备及注意事项

常用细菌培养基制备及注意事项细菌培养基制备是细菌繁殖和生长的唯一途径，它是细菌数量检测、菌液量检验、药物敏感性测定和细菌学研究等细菌学实验的基础。

细菌培养基可以为细菌提供营养元素，使细菌获得有生命活动所必需的营养成分，从而使菌落的生长和增殖。

此外，还可以用来维持支持细菌的正常生理环境，如温度和酸碱度等。

细菌培养基的制备需要满足一定的技术要求，可以采用配制、消毒和培养使用。

首先，根据配方和实验要求，将碱、游离氨基酸、脂类、氨基葡萄糖和磷酸钙等营养元素以适当的重量称取，用普通净水溶解，然后按照配比，用收到的细菌消毒器将培养基管消毒，加热处理掉落的细菌，再将可溶性的物质混合溶于普通净水中，搅拌混匀内容物，然后放入培养基瓶，长时间搅拌，升温到室温，放置培养箱中均匀灭菌。

在细菌培养基制备时应注意以下几点：1、在配制时，首先应采用熔融技术将各种营养元素混合，混合前应先将各元素严格称取，费精心搅拌，以防出现混淆，造成不必要的偏差。

2、在混合时，应注意混杂物质的温度应保持在常温左右，尽量减少成分的损失，以保证培养基的质量。

3、在培养前，应将培养基瓶灭芽，以免细菌的污染，同时应把被实验的细菌以消毒仪处理，以防细菌感染。

4、培养器应用时应小心谨慎，以防细菌受到污染，培养箱中的细菌应调整到室温以及合适的温度、湿度和酸碱度。

5、在细菌培养时，应定期对细菌进行检测，以检查培养基是否被污染，如果出现异常，应立即将其清除更换。

6、细菌培养实验完成后，应及时进行清洗彻底消毒，防止培养基污染，使其保持原有质量。

综上所述，细菌培养基制备应注意操作规范、材料的准确量取和温度控制，消毒使用，检测异常和及时清洗消毒等。

只有这样，才能有效地保证培养基质量，使细菌繁衍生息，有利于实验结果的准确性。

培养基的制备与灭菌实验报告

培养基的制备与灭菌实验报告一、实验目的本实验旨在掌握培养基的制备方法和灭菌技术，为后续的微生物培养提供保障。

二、实验原理1. 培养基的制备方法：（1）选用适当的基质：如蛋白胨、肉汤、蔗糖等；（2）添加必需元素：如氮源、碳源、矿物质盐等；（3）调节pH值：使其接近微生物生长最适pH值；（4）加入琼脂：使液态培养基凝固成固态培养基。

2. 灭菌技术：灭菌是指将微生物及其孢子全部杀灭或去除，以保证培养基无菌。

常用的灭菌方法有高温灭菌法和化学药剂灭菌法。

三、实验材料和设备材料：蛋白胨、肉汤、琼脂、氧化钠等。

设备：量筒、天平、自动移液器、恒温水浴器等。

四、实验步骤1. 制备液态培养基：（1）称取所需的蛋白胨和肉汤，按比例混合加入适量的蒸馏水中，搅拌均匀；（2）调节pH值至7.0-7.2，若pH值过高可加入适量的氧化钠溶液；（3）将制好的液态培养基分装到不锈钢培养皿中，每个培养皿约20ml；（4）将分装好的液态培养基在恒温水浴器中加热至沸腾，持续煮沸10分钟。

2. 制备固态培养基：（1）按照液态培养基制备方法制备好液态培养基；（2）将琼脂加入到液态培养基中，搅拌均匀；（3）将制好的固态培养基分装到无菌试管或无菌平板中；（4）在恒温水浴器中加热至琼脂完全溶解。

3. 灭菌：将制备好的液态和固态培养基放入高压灭菌锅中进行灭菌处理，温度和时间根据不同材料和设备而定。

五、实验结果经过灭菌处理后，制备好的液态和固态培养基均无菌，可以用于微生物培养。

六、实验注意事项1. 实验过程中要严格遵守无菌操作规范，以保证培养基无菌。

2. 制备液态培养基时，要注意加入必需元素的比例和pH值的调节。

3. 制备固态培养基时，要注意琼脂的加入量和溶解度。

4. 灭菌处理时，要根据实验材料和设备选择合适的灭菌方法和时间。

5. 实验结束后，要对实验器材进行消毒处理。

七、实验结论本实验通过制备液态和固态培养基以及灭菌处理等操作，掌握了培养基制备和灭菌技术。

培养基的制备与灭菌实验报告

培养基的制备与灭菌实验报告实验目的，掌握培养基的制备方法和灭菌技术，保证培养基无菌，为微生物实验提供良好的生长条件。

一、培养基的制备。

1.1 培养基的组成。

培养基是微生物生长和繁殖的营养物质，通常包括碳源、氮源、矿物质盐和生长因子等。

根据不同微生物的需求，培养基的组成也有所不同。

1.2 制备步骤。

（1）称取适量的葡萄糖、蛋白胨、氯化钠等原料；（2）加入适量的蒸馏水，搅拌均匀；（3）调节pH值，通常为7.0-7.2；（4）分装至试管或培养皿中，加入琼脂（如需要固体培养基）；（5）高压蒸汽灭菌15分钟。

二、培养基的灭菌实验。

2.1 灭菌方法。

培养基的灭菌是为了保证培养基中无菌，通常采用高压蒸汽灭菌法。

在高压下，微生物及其孢子、病毒等能够被有效杀灭。

2.2 实验步骤。

（1）将制备好的培养基分装至试管或培养皿中；（2）密封好容器，放入高压灭菌锅中；（3）加水至适当高度，密封锅盖；（4）加热至121摄氏度，压力达到1.05kg/cm2后开始计时，持续15分钟；（5）关火，等待冷却后取出培养基。

实验结果，经过高压蒸汽灭菌处理后，培养基中无任何微生物生长。

证明培养基已达到无菌状态，可以用于微生物的培养和实验。

结论，通过本次实验，我们掌握了培养基的制备方法和灭菌技术，为后续的微生物实验提供了良好的条件。

同时，也加深了对无菌技术的理解和应用。

参考文献：[1] 陈华. 微生物学实验指导. 北京，高等教育出版社, 2015.[2] 王明. 实验室微生物学. 上海，上海科学技术出版社, 2018.以上为培养基的制备与灭菌实验报告。

（文档结束）。

培养基及配制全解

2）器材：各类天平、烧杯、容量瓶、量筒、母液瓶、标签、冰箱等。
（5）母液配制（以MS培养基为例）
无机大量母液激素母液
有机物母液
无机微量母液
铁盐母液
配制MS培养基时母液的计算
A 无机大量母液(扩大10倍配1L )
成分
硝酸钾硝酸铵硫酸镁磷酸二氢钾氯化钙
称量工具
托盘天平百分电子天平
注意：无机大量母液中的各种物质在混合过程中有些离子易产生沉淀，应使每种物质先充分溶解，再进行混合，而且钙盐最后缓慢加入进去。
多数需过滤灭菌。
6.3 抗氧化物
1)常用抗氧化剂：半胱氨酸、VC 2)用量：50－200mg/L， 3)作用：防止氧化 4)注意：可用抗氧化剂洗涤外植体伤口表面。
6.4 其它成分： AgNO3 ：
• 作用：吸附乙烯，促进茎芽分化，防玻璃化苗、早衰、落叶；只能短期培养，
• 用量 1~10mg/L，需过滤灭菌
B 无机微量母液（扩大100倍配1000ml）
成分
硼酸，硫酸铜，硫酸锰，硫酸锌，氯化钴，钼酸钠，碘化钾
称量工具
万分电子天平
C 铁盐（扩大100倍1000ml）
铁盐
硫酸亚铁， Na2-EDTA
注意：铁盐选用硫酸亚铁而不用硫酸铁，是因为它溶解后易产生红色的氢氧化铁沉淀。
在装有800ml 蒸馏水的烧杯中加入2粒氢氧化钠。溶解后加入3.73g EDTA-Na2，加热使其全部溶解，然后边搅拌边慢慢加入2.78g FeSO4.7H2O直至全部溶解，冷却后定容至 1000ml，置于冰箱中备用。
使用效价： IAA<IBA<NAA<2,4-D
NAA、IBA →生根培养 2,4-D →愈伤组织诱导与增殖（2）作用诱导愈伤组织和根分化，促进细胞分裂和伸长。 NAA和IBA常与细胞分裂素结合用于芽的增殖。（3）浓度 0.05－5mg/L （4）配制生长素可溶解在稀NaOH中或溶于乙醇。

实验4 培养基的制备

4）鉴别培养基(differential medium) 用于鉴别不同类型微生物的培养基
特定的化学反应，产生明显的特征性变化(大肠杆菌在伊红美蓝固体培养基上呈现金属光泽)
根据这种特征性变化,可将该种微生物与其他微生物区分开来。 5）选择培养基(selective medium)
用于将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基根据不同种类微生物的特殊营养需求或对某种化学物质的敏感性不同，在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长(如用于沙门氏菌培养的四硫磺酸钠培养基,其可抑制非沙门氏菌的细菌生长)。
2、接种操作
无菌操作：火焰附近（酒精灯、煤气灯）进行
任何培养基都应该具备微生物生长所需要六大营养要素：碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水
任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理
培养基配制原理

依据不同的微生物对生方法
（1）、选择适宜的营养物质
（2）、营养物的浓度及配比合适
（3）、物理、化学条件适宜(如酸碱度）
在一定条件下含有某种微生物生长繁殖所需的所有营养物质的培养基
一、无菌技术
微生物无处不在，在微生物的操作和研究中无菌操作的概念必须贯串始终，因此：
1。用于分离、培养微生物的器具事先不含任何微生物； 2。在转接、培养微生物时防止其它微生物的污染；
二培养基
培养基（medium）是人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。
周四

营养琼脂：3000ml 6组，（每组500ml）真菌培养基（沙保劳氏）1200ml 2组（500ml，700ml）麦康凯培养基：1100ml 2组（500ml，600ml

原种培养基的制备实验报告

原种培养基的制备实验报告一、引言原种培养基是一种用于细菌原种保存和增殖的培养基。

它提供了细菌生长所需的营养物质和环境条件，可以维持细菌的生命活动，并确保其纯度和活力。

本实验旨在制备一种适用于原种保存的培养基，并探究其制备方法及效果。

二、实验材料与方法2.1 实验材料本实验所需材料包括葡萄糖、酵母提取物、大豆胰蛋白酶胨、氯化钠、琼脂、纯水等。

2.2 实验方法1）称取适量的葡萄糖、酵母提取物、大豆胰蛋白酶胨、氯化钠，按一定比例加入纯水中。

2）将上述混合物溶解均匀，并加热至沸腾。

3）加入适量的琼脂，搅拌均匀，待冷却至约50℃时，倒入培养皿中。

4）待培养基凝固后，用无菌针将待保存的细菌原种划线接种于培养基上。

5）将接种好的培养皿倒置于恒温培养箱中，设定适宜的温度和湿度进行培养。

三、实验结果与分析经过一段时间的培养，观察到培养皿上有细菌生长，并呈现典型的菌落形态。

通过显微镜观察，发现菌落中细菌呈现出典型的形态特征，证明该培养基能够维持细菌的生长和繁殖。

四、实验讨论本实验制备的原种培养基采用了常见的成分，如葡萄糖、酵母提取物等，这些成分为细菌提供了所需的营养物质。

而大豆胰蛋白酶胨和氯化钠则提供了细菌生长所需的氮源和无机盐。

琼脂作为固化剂，使培养基凝固后能够提供良好的生长环境。

通过本实验制备的原种培养基，在适宜的温度和湿度条件下，成功保存了细菌原种，并促使其生长和繁殖。

这为细菌的后续研究提供了有力的支持和基础。

五、实验结论本实验制备的原种培养基有效地保存和增殖了细菌原种，证明其具有一定的生长促进作用。

该培养基的制备方法简单易行，成本较低，可广泛应用于细菌的原种保存和研究工作中。

六、致谢感谢实验组成员的共同努力和合作，为本次实验的顺利进行提供了有力的支持。

参考文献：1. 张三，李四，王五. 原种培养基的制备及应用[J]. 微生物学杂志，2010，28(3)：123-128.2. 陈六. 微生物学实验技术手册[M]. 北京：科学出版社，2008.（注：以上参考文献为虚构，仅供参考）以上就是本次原种培养基制备实验的全部内容。

培养基的制备与灭菌实验报告

培养基的制备与灭菌实验报告实验目的，通过本次实验，掌握培养基的制备方法和灭菌技术，为后续微生物培养实验打下基础。

一、培养基的制备。

1.准备所需试剂和设备，蔗糖、蛋白胨、酵母提取物、琼脂、蒸馏水、培养皿、量筒、坩埚、移液器等。

2.称取适量蔗糖、蛋白胨、酵母提取物加入蒸馏水中，充分溶解后调节pH值至7.0。

3.加入适量琼脂，搅拌均匀。

4.分装至培养皿中，待凝固后进行灭菌处理。

二、培养基的灭菌。

1.将制备好的培养基装入培养皿中，封口。

2.将培养皿放入高压灭菌锅中，进行高压灭菌处理。

3.灭菌条件，121℃，压力为15psi，持续20分钟。

4.取出培养皿，放置在无菌工作台上待凉，避免细菌再次污染。

5.观察培养基表面是否有凝固不均匀或气泡，如有则说明灭菌不彻底，需重新处理。

三、实验结果。

1.经过灭菌处理的培养基表面平整，无气泡，无明显异物。

2.在无菌条件下打开培养皿，用无菌移液器移取适量微生物菌种接种于培养基表面。

3.将接种好的培养皿放入培养箱中，进行培养观察。

4.培养箱条件，温度控制在37℃，培养时间根据不同微生物而定。

四、实验结论。

本次实验通过制备培养基和灭菌处理，成功培养出微生物菌种，并观察到了微生物的生长情况。

培养基的制备和灭菌是微生物实验中非常重要的步骤，只有保证培养基的无菌，才能得到准确的实验结果。

通过本次实验的学习，相信对于今后的微生物实验有了更深入的认识和理解。

五、实验注意事项。

1.在制备培养基时，需注意称取试剂的准确性和加入顺序。

2.灭菌处理时，要确保培养基充分接受高压蒸汽的灭菌作用。

3.实验操作要在无菌条件下进行，避免外界污染。

4.培养箱的温度和培养时间要根据不同微生物的生长特性进行调整。

六、实验延伸。

在今后的实验中，可以尝试不同种类的培养基制备和灭菌处理，观察其对微生物生长的影响，进一步探索微生物的生长规律和特性。

总之，培养基的制备和灭菌是微生物实验中不可或缺的重要环节，只有掌握了这些基本技能，才能进行准确可靠的微生物实验。

培养基制备的基本方法和注意事项

培养基制备的基本方法和注意事项1.培养基配方的选定同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。

因此，除所用的是标准方法，应严格按其规定进行配制外．一般均应尽量收集有关资料．加以比较核对．再依据自己的使用目的加以选用，记录其来源。

2 ．培养基的制备记录每次制备培养基均应有记录，包括培养推各称，配方及其来源．和各种成份的牌号。

最终pH 值、消毒的温度和时间制各的日期和制备者等，记录应复制一份，原记录保存备查，复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。

3.培养基成分的称取培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱．最好一次完成，不要中断。

可将配方置于傍侧，每称完一种成分即在配方上做出记号，并将所需称取的药品一次取齐，置于左侧，每种称取完毕后，即移放于右侧。

完全称取完毕后．还应进行一次检查。

4.培养基各成份的混合和溶化培养基所用化学药品均应是化学纯的。

使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。

最好使用不锈钢锅加热溶化．也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。

在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动，以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。

待大部分固体成分溶化后，再用较小火力使所有成分完全溶化．迄至煮沸。

如为琼脂培养基，应先用一部分水将琼脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后将两溶液充分混合。

在加热溶化过程中，因蒸发而丢失的水分，最后必须加以补足。

5.培养塞pH 的初步调整培养基各成分完全溶解后，应进行pH 的初步调正，因培养基在加热消毒过程中、pH 会有所变化，例如，牛肉浸液约可降低pH0.2.而肠浸液pH 却会有显著的升高。

因此，对这个步骤，操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的最终pH ，保证培养基的质量。

pH 调正后，还应将培养基煮沸数分钟，以利培养基沉淀物的析出。

6．培养基的过滤澄清液体培养基必须绝对澄清，琼脂培养基也应透明无显著沉淀，因此，须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。

细菌的纯培养技术—制备培养基

刃天青在无氧条件下呈无色；在有氧条件下，其颜色与溶液的pH有关，一般在中性时呈紫色，酸性时为红色；在微含氧溶液中，呈粉红色。
3. 目的明确
实验室一般培养：普通常用培养基；遗传研究：成分清楚的合成培养基；生理、代谢研究：选用相应的培养基配方。
例如枯草芽孢杆菌：一般培养：肉汤培养基或LB培养基；自然转化：基础培养基；观察芽孢：生孢子培养基；产蛋白酶：以玉米粉、黄豆饼粉为主的产酶培养基
配制培养基的4个基本原则： 1. 营养协调； 2.物理、化学条件适宜； 3.目的明确； 4. 经济节约
1. 营养协调
营养物质的浓度适宜；营养物质之间的配比适宜。
培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累，其中碳氮比(C/N)的影响较大。
C/N比：培养基所含碳源中碳原子的摩尔数与氮源中氮原子的摩尔数之比。
缺乏氮源的选择性培养基可用来分离固氮微生物
抑制剂：
青霉素（抑制G+细菌）
分离G-细菌
抗生素氯霉素，链霉素（抑制细菌）分离酵母菌，霉菌
放线菌酮（抑制酵母，霉菌）分离细菌，放线菌
染料
结晶紫：抑制G+
分离G-
胆盐：抑制G+
分离G-
孟加拉红：抑制细菌、放线菌
分离酵母，霉菌
其它叠氮化钠：抑制霉菌分离乳酸菌
凝固剂特点和种类
理想的凝固剂应具备以下条件： ①不被微生物液化、分解和利用； ②在微生物生长的温度范围内保持固体状态； ③凝固点的温度对微生物无害； ④不会因高温灭菌而受到破坏； ⑤透明度好、凝固力强； ⑥配制方便，价格低廉。
琼脂和明胶用作凝固剂的性能比较
凝固剂微生物利用程度

简述配制培养基的基本步骤及注意事项

简述配制培养基的基本步骤及注意事项配制培养基是在实验室中进行细胞培养和微生物培养的重要步骤。

正确的配制培养基对于细胞和微生物的生长和繁殖至关重要。

下面将简述配制培养基的基本步骤及注意事项。

一、准备培养基所需的原料和试剂配制培养基所需的原料和试剂包括蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖、盐酸、硝酸钠等。

在备用的容器中准备好这些原料和试剂，确保其纯度和质量。

二、称量原料和试剂按照所需的培养基配方，准确称量所需的原料和试剂。

注意要使用准确的称量工具，并遵循准确的称量方法，以确保配制的培养基的准确性和一致性。

三、溶解原料和试剂将称量好的原料和试剂逐一加入适量的蒸馏水中，并充分搅拌溶解。

溶解过程中要注意控制溶解温度和时间，避免结晶或沉淀的产生。

四、调节pH值根据培养基配方的要求，使用盐酸或硝酸钠等酸碱溶液逐渐调节培养基的pH值。

调节过程中要注意使用准确的pH计，并逐渐添加酸碱溶液，以避免pH值过大或过小。

五、加入其他添加物根据具体需要，可以添加抗生素、染料或其他添加物来增强培养基的特定功能。

添加时要注意添加的量不能过多，以避免对细胞或微生物的生长产生不良影响。

六、灭菌配制好的培养基需要进行灭菌处理，以杀死其中可能存在的细菌、真菌或其他微生物。

常用的灭菌方法有高温高压灭菌和过滤灭菌。

要选择适合的灭菌方法，并严格按照操作规程进行灭菌处理。

七、保存和使用灭菌后的培养基应尽快冷却并储存在无菌条件下。

使用时要注意避免污染，使用无菌的培养皿或试管，并采取无菌操作，以确保培养基的纯净度。

在配制培养基的过程中，我们需要注意以下几点：1. 严格按照培养基配方的要求进行操作，避免原料和试剂的误用或误量。

2. 使用纯净的蒸馏水和高质量的原料和试剂，以确保培养基的质量和纯度。

3. 在配制过程中要注意溶解的充分和均匀，避免结晶或沉淀的产生。

4. 调节pH值时要小心操作，逐渐添加酸碱溶液，以避免pH值的剧烈变化。

5. 添加其他添加物时要谨慎，避免添加过多或添加不当。