【CN110066834A】一种白藜芦醇的提取方法【专利】

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910293456.4

(22)申请日 2019.04.12

(71)申请人 长沙市惠瑞生物科技有限公司

地址 410000 湖南省长沙市芙蓉区隆平高

科技园雄天路1号湖南金丹科技创业

大厦B栋第5层505号房

(72)发明人 王中华　

(74)专利代理机构 长沙中海宏图专利代理事务

所(普通合伙) 43224

代理人 罗霞

(51)Int.Cl.

C12P 7/22(2006.01)

C07C 37/68(2006.01)

C07C 37/72(2006.01)

C07C 39/21(2006.01)

A01H 4/00(2006.01)A01G 22/25(2018.01)A01C 21/00(2006.01)

(54)发明名称

一种白藜芦醇的提取方法

(57)摘要

本发明涉及一种白藜芦醇的提取方法，其包

括以下步骤：1）粉碎；2）煎煮；3）接种发酵；4）酶

解；5）萃取；6）脱色干燥。本发明选用高白藜芦醇

含量的虎杖为提取原料，从源头上提高白藜芦醇

的提取率；提取方法上，釆用微生物发酵＋酶解

＋超声波萃取相结合的技术，最大限度地保持白

藜芦醇的生物活性，并使天然白藜芦醇（98%）的

得率达到了1.8%以上，并且基本实现了三废零排

放，

有效保护了生态环境。权利要求书1页 说明书6页CN 110066834 A 2019.07.30

C N 110066834

A

权　利　要　求　书1/1页CN 110066834 A

1.一种白藜芦醇的提取方法，其特征在于包括以下步骤：

1）粉碎：选择高白藜芦醇含量的虎杖为原料，经破碎后其颗粒在0.5cm以下，再经超微粒化球磨成300目左右；

2）煎煮：加水煎煮60分钟，冷却到35℃-40℃；

3）接种发酵：接种复合菌种母液，混合均匀，密封，恒温发酵24-48h；

4）酶解：先加入5‰的仿人胃消化液，消化8-12h，加热至100℃约30-60min；再调ph值为6.5-8，然后加入5‰仿人肠消化液，消化8-12h，加热至100℃约30-60min；

5）萃取：粗滤，滤液通过超声波和加有机溶剂萃取；

6）脱色干燥：萃取液经膜分离后再上柱脫色，浓缩比重为1.2-1.25，啧雾干燥即得白藜芦醇粉。

2.根据权利要求1所述的白藜芦醇的提取方法，其特征在于所述的高白藜芦醇含量的虎杖为白藜芦醇含量在1%以上的虎杖原料。

3.根据权利要求1或2所述的白藜芦醇的提取方法，其特征在于所述的高白藜芦醇含量虎杖由以下方法培育：

1）虎杖繁育培植：选择白藜芦醇含量高的野生虎杖，进行植物培育，育种挑选出白藜芦醇含量在0.9%以上的虎杖种株进行扩大栽培；

2）虎杖栽培施肥：虎杖栽培管理期间，使用专用农肥，该专用农肥是以虎杖提取加工后的废渣60-70%，配合人工合成白藜芦醇生产废渣废水30-40%，接种微生物发酵后加工而成。

4.根据权利要求3所述的白藜芦醇的提取方法，其特征在于所述的植物培育为植物组织细胞培育，具体操作如下：

选择野生虎杖的根或茎切段，经无菌水清洗干净，用70%乙醇浸润消毒10-30秒，在无菌室放入准备好的组培瓶内，在25℃条件下培养7-15天；

其中培育采用的培养基由以下方法制得：1）培养基制备:愈伤组织诱导培养基即SM培养基，蔗糖含量为10g/L、2,4-D含量2mg/L；2）试验培养基:在SM培养基中加入吲哚乙酸、6-苄基氨基腺嘌呤和白藜芦醇3g/L；3）培养基灭菌:将配好的培养基加入琼脂加热溶解,调至PH5.6-5.8,无菌分装于100ml组培瓶中，每瓶约30ml,冷却后盖上组培瓶盖，在1kg/C㎡压力、121℃条件下灭菌20mim。

5.根据权利要求1所述的白藜芦醇的提取方法，其特征在于所述的复合菌种母液为乳酸杆菌、复合酵母菌和芽孢杆菌等量混合而成。

6.根据权利要求1所述的白藜芦醇的提取方法，其特征在于所述的仿人胃消化液为复合食用酸、胃蛋白酶和纤维素酶构成的混合酸，其中：所述复合食用酸由浓度为10%的食用盐酸、浓度为10%的食用醋酸及浓度为15%乳酸按体积1:1:1的比例构成，该复合食用酸的ph 值为1-2；所述胃蛋白酶活力1:400，按混合酸体积每1000ml加入3g；所述纤维素酶按混合酸体积每1000ml加入3g。

7.根据权利要求1或2或4或5或6所述的任一白藜芦醇的提取方法，其特征在于所述的仿人肠消化为胰蛋白酶和木瓜酶解等量接入。

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