糖类的测定

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第四章糖类物质的测定

第四章糖类物质的测定

第四章糖类物质的测定第四章糖类物质的测定第⼀节概述⼀、定义和分类碳⽔化合物统称为糖类,是由碳、氢、氧三种元素组成的⼀⼤类化合物,①碳⽔化合物在有机体中的重要作⽤。

糖蛋⽩糖脂--⽣理功能物质核糖和脱氧核糖--遗传物质能量来源、结构成分②作为⾷品⼯业的主要原料和辅助材料。

③⼯业发酵的主要碳源,如淀粉、糊精、双糖、单糖。

⼯业发酵过程可以根据糖量的变化判断发酵是否正常;可以根据残糖量确定发酵终点。

糖的分类有效碳⽔化合物——⼈体能消化利⽤的单糖、双糖、多糖(淀粉)。

⽆效碳⽔化合物——不能被⼈体消化利⽤的纤维素、半纤维素、果胶等多糖。

这些⽆效碳⽔化合物能改善消化系统功能,对维持⼈体健康有重要作⽤;纤维素类原料的有效利⽤是⽣物技术中具有挑战性的研究⽅向。

⼆. 糖类物质的分布和含量葡萄糖、果糖: ⽔果,蔬菜:0.96-5.82%,0.85-6.53%蔗糖:⽢蔗,甜菜:10-15%,15-20%;西⽠,菠萝:4%,8%乳糖:动物乳汁,⽜乳~4.7%麦芽低聚糖:异麦芽低聚糖在⾃然界不存在,⽽由淀粉⽔解产⽣低聚果糖、低聚半乳糖、低聚⽊糖:⾃然界少,多由⼈⼯酶法合成淀粉,纤维素,果胶在植物普遍存在三. 糖类物质的测定⽅法分类:直接法:指根据糖的物理化学性质作为分析原理的分析⽅法间接法:根据其它物质含量,⽤差减法计算出来,以总碳⽔化合物或⽆N 抽提物表⽰糖的化学性质—还原性单糖的羰基、酮基、羟基具有不同强度的还原能⼒:醛糖:与弱氧化剂溴⽔:形成糖酸;与较强氧化剂硝酸:醛基和伯醇基都被氧化为羧基,⽣成葡萄糖⼆酸;有时只有伯醇基被氧化成羧酸,形成糖醛酸。

酮糖:酮糖对溴的氧化作⽤没有反应,以此可将酮糖与醛糖分开;在强氧化剂作⽤下,酮糖在羰基处断裂,形成两个酸。

单糖在碱性溶液中,醛基和酮基都可烯醇化为活泼的烯⼆醇,⽽烯⼆醇有还原性,普通酮类则不能。

各种化学分析法⽤于测定可溶性糖总量对各种糖分别定量分析的⽅法⾊谱法:纸⾊谱、薄层⾊谱、GC、HPLC酶电极法、酶⽐⾊法:半乳糖脱氢酶:测半乳糖、乳糖葡萄糖氧化酶:测葡萄糖、蔗糖酶⽔解法:测淀粉含量糖类物质测定的其它⽅法:电泳法:对可溶性糖的分离、定量⽑细管电泳法对低聚糖、活性多糖测定本章重点介绍国内外标准分析⽅法,⼀些有影响的参考⽅法第⼆节可溶性糖类的测定⼀、可溶性糖类的提取和澄清可溶性糖类通常是指葡萄糖、果糖等游离单糖及蔗糖等低聚糖。

糖的测定

糖的测定

(一)提取液的制备
常用的提取剂有水和乙醇溶液,提取液的制备方 法要根据样品的性状而定,但应遵循以下原则: (1)取样量和稀释倍数的确定 (2)含脂肪的食品,通常需经脱脂后再以水进行提取。 一般以石油醚处理一次或几次,必要时可加热。每 次处理后,然后用水提取。 (3)含有大量淀粉和糊精的食品宜采用乙酵溶液提取。 乙醇溶液的浓度应高到足以使淀粉和糊精沉淀,通 常用70一75%的乙醇溶液,用乙醇溶液作提取剂 时,提取液不用除蛋白质,因为蛋白质不会溶解出 来。
(4)样品溶液测定 吸取碱性洒石酸铜甲液及乙液各5.00mI,置于 250m1锥形瓶中,加玻璃珠3粒,从滴定管中加入 比预测时样品溶液消耗总体积少1m1的样品溶 液,加热使其在2分钟内沸腾,准确沸腾30秒 钟,趁热以每2秒1滴的速度继续滴加样液,直至 蓝色刚好褪去为终点。记录消耗样品溶液的总体 积。同法平行操作3份,取平均值。 4.结果计算
⑤碱性酒石酸铜甲液和乙液应分别贮存,用时才混 合,否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下 会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀,使试剂有效浓度 降低。 ⑥滴定必须在沸腾条件下进行,其原因一是可以加 快还原糖与Cu+2的反应速度;二是次甲基蓝变色 反应是可逆的,还原型次甲基蓝遇空气中氧时又 会被氧化为氧化型。此外,氧化亚铜也极不稳 定,易被空气中氧所氧化。保持反应液沸腾可防 止空气进入,避免次甲基蓝和氧化亚铜被氧化而 增加耗糖量。
⑦滴定时不能随意摇动锥形瓶,更不能把锥形瓶从 热源上取下来滴定,以防止空气进入反应溶液中。 ⑧样品溶液预测的目的;一是本法对样品溶液中还 原糖浓度有一定要求(0.1ml左右),测定时样品溶 液的消耗体积应与标定葡萄糖标准溶液时消耗的 体积相近,通过预测可了解样品溶液浓度是否合 适,浓度过大或过小应加以调整,使预测时消耗 样液量在l0ml左右;二是通过预测可知道样液大 概消耗量,以便在正式测定时,预先加入比实际 用量少1m1左右的样液,只留下1m1左右样液在 续滴定时加入,以保证在1分钟内完成续滴定工 作,提高测定的准确度。

糖类的测定实验报告

糖类的测定实验报告

一、实验目的1. 掌握糖类物质的基本性质和鉴定方法。

2. 学习使用化学试剂和方法检测溶液中的糖类物质。

3. 了解不同糖类物质的鉴定原理及其在实际应用中的意义。

二、实验原理糖类物质是一类多羟基醛或多羟基酮及其缩聚物和某些衍生物的总称,它们在化学性质上具有一些共同的特性。

例如,糖类物质可以与某些特定的试剂发生颜色反应,从而实现对糖类的鉴定。

常见的糖类鉴定方法包括:1. 还原糖的鉴定:还原糖在碱性条件下可以与斐林试剂发生反应,生成砖红色沉淀。

2. 非还原糖的鉴定:非还原糖可以通过与苏丹溶液反应,观察颜色变化来鉴定。

3. 蛋白质的鉴定:蛋白质可以与双缩脲试剂发生紫色反应。

三、实验器材1. 试管2. 烧杯3. 滴管4. 移液器5. 恒温水浴锅6. 显微镜7. 斐林试剂8. 苏丹溶液9. 双缩脲试剂10. 糖类溶液(葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉等)11. 蛋白质溶液12. 碱性溶液13. 酸性溶液四、实验步骤1. 还原糖的鉴定- 向试管中加入2mL待测糖类溶液。

- 向试管中加入1mL斐林试剂(甲乙液等量混合均匀后加入)。

- 将试管放入盛有50-65度温水的大烧杯中加热约2分钟。

- 观察溶液颜色变化,若出现砖红色沉淀,则说明溶液中含有还原糖。

2. 非还原糖的鉴定- 向试管中加入2mL待测糖类溶液。

- 向试管中滴加3滴苏丹溶液。

- 观察溶液颜色变化,若出现颜色变化,则说明溶液中含有非还原糖。

3. 蛋白质的鉴定- 向试管中加入2mL待测蛋白质溶液。

- 向试管中加入1mL双缩脲试剂A液(摇匀)。

- 向试管中加入双缩脲试剂B液4滴(摇匀)。

- 观察溶液颜色变化,若出现紫色反应,则说明溶液中含有蛋白质。

五、实验结果1. 还原糖的鉴定:实验结果显示,葡萄糖溶液在斐林试剂作用下出现砖红色沉淀,果糖溶液也出现砖红色沉淀,而蔗糖溶液没有出现沉淀。

2. 非还原糖的鉴定:实验结果显示,蔗糖溶液在苏丹溶液作用下出现颜色变化,而葡萄糖溶液和果糖溶液没有出现颜色变化。

糖类的化学实验报告(3篇)

糖类的化学实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解糖类的基本化学性质。

2. 掌握糖类物质的鉴定方法。

3. 区分还原糖和非还原糖。

4. 学习利用化学反应验证糖类的存在。

二、实验原理糖类是一类重要的有机化合物,包括单糖、双糖和多糖。

它们在自然界中广泛存在,具有重要的生物学功能。

本实验通过一系列化学反应,观察糖类的性质,包括溶解性、反应性和鉴定方法。

三、实验器材与药品1. 实验器材:试管、试管架、烧杯、滴管、酒精灯、镊子、玻璃棒、蒸馏水、加热器等。

2. 实验药品:葡萄糖、蔗糖、果糖、氢氧化钠、硫酸铜、氢氧化钠溶液、碘液、淀粉溶液等。

四、实验步骤1. 溶解性实验- 将一定量的葡萄糖、蔗糖、果糖分别加入试管中,加入适量蒸馏水,观察溶解情况。

2. 还原性实验- 将少量葡萄糖、蔗糖、果糖分别加入试管中,加入少量氢氧化钠溶液,加热至沸腾,观察溶液颜色变化。

3. 鉴定实验- 斐林试剂法:取少量葡萄糖、蔗糖、果糖分别加入试管中,加入斐林试剂,加热至沸腾,观察溶液颜色变化。

- 本尼迪克特试剂法:取少量葡萄糖、蔗糖、果糖分别加入试管中,加入本尼迪克特试剂,加热至沸腾,观察溶液颜色变化。

4. 淀粉水解实验- 取少量淀粉溶液加入试管中,加入少量稀硫酸,加热至沸腾,观察溶液颜色变化。

5. 苏丹Ⅲ染色实验- 取少量蔗糖溶液加入试管中,加入苏丹Ⅲ染液,观察溶液颜色变化。

五、实验现象1. 溶解性实验:葡萄糖、蔗糖、果糖均能溶解于水中。

2. 还原性实验:葡萄糖溶液呈红色,蔗糖溶液无明显变化,果糖溶液呈红色。

3. 鉴定实验:- 斐林试剂法:葡萄糖溶液呈红色,蔗糖溶液无明显变化,果糖溶液呈红色。

- 本尼迪克特试剂法:葡萄糖溶液呈红色,蔗糖溶液无明显变化,果糖溶液呈红色。

4. 淀粉水解实验:淀粉溶液呈蓝色,加热后颜色消失。

5. 苏丹Ⅲ染色实验:蔗糖溶液被染成红色。

六、实验结论1. 葡萄糖、蔗糖、果糖均为糖类物质,具有不同的化学性质。

2. 葡萄糖、果糖具有还原性,而蔗糖不具有还原性。

实验检测糖类含量的方法

实验检测糖类含量的方法

实验检测糖类含量的方法
实验检测糖类含量的方法有以下几种:
1. 红糖法:将待测样品与红糖溶液混合加热,利用糖类的还原性使红糖被还原变色,颜色的深浅与糖类含量成正比。

2. 蒸馏法:将待测样品加入蒸馏水中,用蒸馏器蒸馏,收集第一滴液滴入菲林试剂,用比色计测定吸光度,从而测定糖类含量。

3. 酚高法:将待测样品与酚及硫酸混合,用比色计测定吸光度,从而测定糖类含量。

4. 酶释法:在待测样品中加入糖类酶,使其分解为糖类,然后利用酚-硫酸法或蒸馏法测定糖类含量。

5. 还原终点滴定法:将碘液与待测样品反应,然后用硫代硫酸钠滴定溶液中的剩余碘,从而测定糖类含量。

以上就是实验检测糖类含量的几种方法,根据具体情况可以选择不同的方法进行实验。

食品中总糖的测定

食品中总糖的测定

食品中总糖的测定在食品中测定总糖含量是非常重要的,因为糖是食品中常见的能量来源之一。

在食品中准确测定总糖含量能帮助人们更好地控制摄入的糖量,从而维持健康的饮食习惯。

下面将介绍几种常见的测定总糖含量的方法。

1. 高效液相色谱法(HPLC):这是一种常用的食品分析方法,可以准确地测定食品中的糖含量。

该方法通过将食品中的糖分离,并利用色谱柱进行分析。

HPLC方法能够同时检测多种糖类物质,包括单糖、双糖和多糖。

2. 光学旋光法:这是一种基于糖类物质旋光性质的测定方法。

糖类物质对光的旋光性质与其化学结构密切相关,因此通过测量旋光角度可以推测出糖类物质的含量。

这种方法通常适用于单糖的测定。

3. 酶法:酶法是一种常用的测定食品中总糖含量的方法,它基于特定酶与糖类物质发生反应的原理。

常用的酶法包括葡萄糖氧化酶法和酶解法。

葡萄糖氧化酶法通过测定检测的光密度,从而确定食品中葡萄糖的含量。

酶解法则通过将糖类物质与特定酶进行反应,产生可检测的产物来测定总糖含量。

4. 色层分析法:这是一种常见的半定量测定糖类物质含量的方法。

色层分析法通过将食品样品与试剂反应,然后在色层板上通过比较颜色的强度和形状来推测出糖类物质的含量。

这种方法操作简单、成本较低,但精确度相对较低。

以上只是几种常见的测定总糖含量的方法,实际上还有许多其他的方法可以用于测定糖类物质的含量。

在具体进行测定时,一般需要根据样品的特点和分析要求选择适合的方法。

此外,在测定过程中还需要注意一些影响测定结果的因素,例如样品的制备、仪器的校准和样品的存储等。

通过合理选择测定方法和注意测定过程中的细节,可以准确地测定出食品中的总糖含量。

糖类测定方法大全

糖类测定方法大全

糖类测定方法大全(一)测定方法概述(二)可溶性糖类的提取和澄清1、提取液制备(1)常用提取剂——水、乙醇(2)提取液中含糖量控制0.5~3.5mg/mL(3)含脂肪食品先脱脂,然后用水提取(4)含淀粉及糊精食品(乙醇沉淀淀粉等)用70~75%乙醇溶液提取(5)含乙醇及CO2液态食品,蒸发至1/3 ~1/4 原体积,以除去C2H5OH 及CO2 (6)酸性食品应先中和防止低聚糖部分水解(7)提取固体样品有时需要加热,以提高提取效果。

一般在40~50℃,防止多糖溶出(8)乙醇作提取剂加热时应安装回流装置2、提取液的澄清(1)影响测定的杂质色素、蛋白质、果胶、可溶性淀粉、有机酸、氨基酸、单宁,可影响颜色、浑浊、过滤困难。

(2)澄清剂①醋酸铅(中性)Pb(CH3COO)2·3H2O,形成沉淀,吸附杂质,可除去蛋白质、果胶、有机酸、单宁等。

②乙酸锌和亚铁氰化钾二者生成氰亚铁酸锌↓吸附蛋白质等干扰物。

③硫酸铜和氢氧化钠Cu 离子使蛋白质沉淀。

(3)澄清剂用量用量适宜,以无新沉淀为准,如2ml 饱和醋酸铅(30%)、(4)除铅剂由于铅影响还原糖的测定,生成铅糖化合物常用除铅剂有草酸钠、硫酸钠、磷酸氢二钠(三)蓝—爱农(Lane-Eynon)法测定还原糖(国际上常用的定量糖的方法)1、原理斐林试剂甲液(CuSO·45H2O)斐林试剂乙液(酒石酸钾钠+NaOH)甲、乙混合→酒石酸钾钠合铜酒石酸钾钠合铜+葡萄糖→葡萄糖酸+ Cu2O↓(红棕)终点的确定:葡萄糖+亚甲基蓝(氧化态)→亚甲基蓝(还原态)过量兰色无色(兰色消失)终点时的颜色为:兰色消失了的红棕色2、测定①预测准确吸取斐林试剂甲液5.00mL、乙液5.00mL→锥形瓶中,△ 至沸腾,再加入亚甲基蓝指示剂,在加热的条件下,用样液滴至蓝色褪尽。

(先快后慢,要求很快达到终点,因为亚甲基蓝易被空气氧化为蓝色,且要求在加热的情况下以除去空气)②测定甲液5mL、乙液5mL→锥形瓶中,加入比上述预测量少0.5~1ml 样液在2min 内沸腾,维持沸腾2min ,加入3 滴亚甲基蓝指示剂,再在3min 内滴定至蓝色褪尽。

糖类测定方法大全

糖类测定方法大全

糖类测定方法大全(一)测定方法概述(二)可溶性糖类的提取和澄清1、提取液制备(1)常用提取剂——水、乙醇(2)提取液中含糖量控制0.5~3.5mg/mL(3)含脂肪食品先脱脂,然后用水提取(4)含淀粉及糊精食品(乙醇沉淀淀粉等)用70~75%乙醇溶液提取(5)含乙醇及CO2液态食品,蒸发至1/3~1/4原体积,以除去C2H5OH及CO2 (6)酸性食品应先中和防止低聚糖部分水解(7)提取固体样品有时需要加热,以提高提取效果。

一般在40~50℃,防止多糖溶出(8)乙醇作提取剂加热时应安装回流装置2、提取液的澄清(1)影响测定的杂质色素、蛋白质、果胶、可溶性淀粉、有机酸、氨基酸、单宁,可影响颜色、浑浊、过滤困难。

(2)澄清剂①醋酸铅(中性)Pb(CH3COO)2·3H2O,形成沉淀,吸附杂质,可除去蛋白质、果胶、有机酸、单宁等。

②乙酸锌和亚铁氰化钾二者生成氰亚铁酸锌↓吸附蛋白质等干扰物。

③硫酸铜和氢氧化钠Cu离子使蛋白质沉淀。

(3)澄清剂用量用量适宜,以无新沉淀为准,如2ml饱和醋酸铅(30%)、(4)除铅剂由于铅影响还原糖的测定,生成铅糖化合物。

常用除铅剂有草酸钠、硫酸钠、磷酸氢二钠。

(三)蓝—爱农(Lane-Eynon)法测定还原糖(国际上常用的定量糖的方法)1、原理斐林试剂甲液(CuSO4·5H2O)斐林试剂乙液(酒石酸钾钠+NaOH)甲、乙混合→酒石酸钾钠合铜酒石酸钾钠合铜+葡萄糖→葡萄糖酸+ Cu2O↓(红棕)终点的确定:葡萄糖+亚甲基蓝(氧化态)→亚甲基蓝(还原态)过量兰色无色(兰色消失)终点时的颜色为:兰色消失了的红棕色2、测定①预测准确吸取斐林试剂甲液5.00mL、乙液5.00mL→锥形瓶中,△至沸腾,再加入亚甲基蓝指示剂,在加热的条件下,用样液滴至蓝色褪尽。

(先快后慢,要求很快达到终点,因为亚甲基蓝易被空气氧化为蓝色,且要求在加热的情况下以除去空气)②测定甲液5mL、乙液5mL→锥形瓶中,加入比上述预测量少0.5~1ml样液在2min 内沸腾,维持沸腾2min,加入3滴亚甲基蓝指示剂,再在3min内滴定至蓝色褪尽。

糖类的测定的实验报告心得

糖类的测定的实验报告心得

糖类的测定的实验报告心得引言糖类是生命中不可或缺的能量来源,也是许多食物的主要成分之一。

因此,糖类的测定对于食品科学、营养学等领域的研究具有重要意义。

本次实验通过测定糖类样品中还原糖的含量,掌握了一种常用方法——差色法的原理和操作技巧。

实验目的1. 了解差色法测定糖类含量的原理及方法;2. 掌握差色法在糖类测定实验中的操作技巧;3. 分析实验结果,总结经验教训。

实验步骤1. 根据所要测定的糖类样品的特性和浓度范围,选择合适的稀释倍数;2. 将样品经过稀释后,通过加入试剂并加热反应得到含还原糖的溶液;3. 测定溶液的光密度值,并制定标准曲线;4. 根据标准曲线,计算出待测样品中还原糖的含量;5. 重复以上步骤,进行数据的重复性验证;6. 分析实验结果并撰写实验报告。

实验结果通过实验我们得到了一组标准曲线,该曲线具有良好的线性关系。

利用该标准曲线,我们可以准确地测定糖类样品中还原糖的含量。

同时,在进行数据的重复性验证时,我们得到了一致的结果,说明本实验操作规范准确。

实验分析通过本次实验,我们了解了差色法测定糖类含量的原理与方法。

差色法是一种常用的测定糖类含量的方法,其优点是操作简便、准确度高。

通过加热反应和试剂的作用,还原糖被氧化成醛酮酸,这个过程使得我们可以通过测定溶液的光密度值来推算出糖类的含量。

实验过程中的关键是选择合适的稀释倍数以及准确测量光密度值。

在稀释倍数的选择上,应根据样品的特性和浓度范围选择,避免过高或过低的稀释倍数。

另外,在测量光密度值时,要注意操作的准确性,避免操作不慎导致数据的偏离。

在实验操作中,我们也遇到了一些问题。

比如,在加热反应时,温度的控制非常重要,过高的温度可能导致糖类的热解,从而影响结果的准确性;而过低的温度则可能导致反应速度过慢、不完全,影响测定的灵敏度。

因此,在操作过程中,我们需要严格控制加热温度,确保反应的进行。

实验结论本次实验通过差色法测定糖类含量的方法,成功得到了一组标准曲线,并能够准确测定糖类样品中还原糖的含量。

糖分的测定实验报告(3篇)

糖分的测定实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 理解并掌握糖分测定的原理和方法。

2. 通过实验操作,学习使用本尼迪克特试剂(Benedict's reagent)检测还原糖的含量。

3. 了解糖类物质在食品和生物体内的作用及其检测的重要性。

二、实验原理还原糖是指具有游离醛基或酮基的糖,它们在加热条件下能与斐林试剂或本尼迪克特试剂发生反应,生成砖红色沉淀。

本实验采用本尼迪克特试剂进行还原糖的定量测定。

三、实验材料与仪器材料:- 食品样品(如水果汁、饮料、蜂蜜等)- 本尼迪克特试剂- 水浴加热装置- 移液管- 试管- 酒精灯- 精密天平仪器:- 烧杯- 滴定管- 移液器- 比色计四、实验步骤1. 样品准备:取适量食品样品,用蒸馏水稀释至适当浓度。

2. 试剂准备:按照本尼迪克特试剂的配制方法,准确称取试剂,溶解后备用。

3. 样品处理:取5支试管,分别加入1mL样品溶液。

4. 试剂添加:向每支试管中加入2mL本尼迪克特试剂。

5. 混合:充分混合试管中的溶液。

6. 加热:将混合后的溶液放入水浴中加热至沸腾,保持5分钟。

7. 冷却:将试管从水浴中取出,静置至室温。

8. 比色:使用比色计测定溶液的吸光度。

9. 计算:根据吸光度值,参照标准曲线计算样品中的还原糖含量。

五、实验结果与分析结果:- 样品A:吸光度值为0.6- 样品B:吸光度值为0.8- 样品C:吸光度值为1.2- 样品D:吸光度值为1.5- 样品E:吸光度值为0.3分析:根据比色结果,可以得出以下结论:- 样品A中的还原糖含量为0.6mg/mL- 样品B中的还原糖含量为0.8mg/mL- 样品C中的还原糖含量为1.2mg/mL- 样品D中的还原糖含量为1.5mg/mL- 样品E中的还原糖含量为0.3mg/mL通过实验,可以观察到不同食品样品中的还原糖含量存在差异,这与食品的种类和加工方法有关。

六、实验讨论1. 本实验采用本尼迪克特试剂进行还原糖的测定,该试剂具有操作简便、灵敏度高等优点。

糖类测定

糖类测定

1.糖蜜成分分析1.1糖蜜中总糖、蔗糖及还原糖含量分析1.1.1总糖含量的测定——苯酚-硫酸法苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸(或甲苯衍生物)起显色反应,己糖反应产物在490nm处(戊糖及糖醛酸反应产物在480nm)有最大吸收,吸收值与糖含量呈线性关系。

1.1.1.1 试剂:浓硫酸(分析纯,95.5%)6%苯酚(临用前配制) 标准葡萄糖1.1.1.2 实验方法与实验结果①标准曲线的制定准确称取标准葡萄糖20mg于500mL容量瓶中,加水至刻度,分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8mL,并以水补充总体积至2.0mL,然后加入6%苯酚1.0mL及浓硫酸5.0mL,静置10min,摇匀,室温放置20min后于490nm 测光密度,以2.0mL水按同样显色操作为空白,横坐标为多糖微克数,纵坐标1为光密度值,得标准曲线,如图②样品含量测定吸取样品液1.0mL,按上述步骤操作,测光密度,以标准曲线计算多糖含量。

③实验结果表1 糖蜜中的总糖含量甘蔗糖蜜524甜菜糖蜜4431.1.2 蔗糖含量的测定——Roe比色法六碳糖与浓盐酸作用产生羟甲基糠醛,但酮糖比醛糖产生的羟甲基糠醛的量要多得多(1-1.5%酮糖与20%醛糖所产生的轻甲基糠醛量相等)。

此羟甲基糠醛在一定条件下和酚类化合物一间苯二酚形成鲜红色。

此反应在一定条件下为酮糖所特有,所以可作为酮糖测定的依据。

样液中若同时存在果糖、葡萄糖或麦芽糖等不影响蔗糖的测定。

其测定范围在40-360μg。

1.1.2.1试剂A:间苯二酚溶液,0.1g间苯二酚用6mol/L盐酸溶液溶解后定容至100mL;B:10mol/L盐酸,量取83.5mL浓盐酸(比重1.19)注入蒸馏水中,并稀释到100mL,冷却;C: 2mol/L氢氧化钠,准确称取8.0g氢氧化钠,用蒸馏水溶解后定容至100mL;D:蔗糖标准溶液(1mg/mL),精确称取0.1g恒重蔗糖(90℃烘至恒重),以蒸馏水溶解并定容至100mL。

四种糖的测定方法

四种糖的测定方法

四种糖的测定方法糖是一类普遍存在于食品和生物体内的有机化合物,在生物体内扮演着能量供应和结构支持的重要角色。

因此,准确测定糖的含量对于食品工业、医学研究以及农业等领域至关重要。

本文将介绍四种常见的糖类测定方法:离子色谱法、高效液相色谱法、酶法和光学旋光法。

离子色谱法(Ion Chromatography,IC)是一种基于糖与离子交换柱相互作用的分析方法。

该方法的原理是,通过将样品中的糖溶解成离子形式,并通过离子色谱柱对其进行分离和定量测定。

该方法具有高灵敏度、分离效果好和操作简便等特点。

离子色谱法广泛应用于果汁、乳制品、饮料等食品中糖的含量测定,同时也可用于生物体内糖的测定,如血糖测定。

高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种利用高压将流动相通过色谱柱以及对样品中的目标物进行分离和检测的方法。

在糖的测定中,通常采用葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase,GOD)进行检测。

首先,将样品中的糖通过酶反应转化为过氧化氢和酮糖,然后过氧化氢再和荧光素酶反应生成荧光素,最后通过荧光检测器进行定量测定。

该方法具有高灵敏度、准确度高和分离效果好的特点,广泛应用于食品和生物体中糖类的测定。

酶法是一种常见的测定糖的方法。

在糖类测定中,常使用葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase,GOD)进行测定。

该酶与葡萄糖结合形成过氧化氢和酮糖,然后通过反应转换为酸与染料反应产生有色产物,最后根据产生的色度与糖的浓度成正比进行定量测定。

酶法具有操作简便、准确性高和灵敏度高等特点,广泛应用于血糖检测和食品中糖类的测定等领域。

光学旋光法是一种通过测量糖溶液在光的干涉下发生的旋光现象来测定糖含量的方法。

根据糖分子中的手性碳原子的存在,使得糖分子能够旋光,通过测量光经过旋光液体时的偏离程度,并与标准旋光度进行对比,可以确定糖的含量。

光学旋光法具有准确性高、非破坏性测量以及对复杂样品的适用性等特点,广泛应用于食品、医药等领域的糖类测定。

第八章 糖类的测定

第八章 糖类的测定

的理化性质
3、过剩的澄清剂应不干扰后面分析操作或应易
于除掉。
高锰酸钾滴定法
1.原理
过量的碱性酒 石酸甲铜溶液
① ②
一定量的样液
+
△ Cu O↓ 2
2FeSO4
还原糖
Cu2O↓
2
Cu2+
4 3
+过量酸性Fe (SO )
+CuSO4

滴定终点如 何确定???
KMnO4
萨 氏 法
过量的KIO3 + 5 KI + 3H2SO4 = 3I2
2Cu+ +过量的I2 = 2Cu2+ +2 II2 + 2 Na2S2O3 = Na2S4O6 + 2 NaI 淀粉作为指示剂
酶法
三、蔗糖的测定
蔗糖经盐酸水解转化为还原糖,再按还原糖 测定。水解前后还原糖的差值为蔗糖含量。
四、总糖的测定
食品中的总糖通常是指具有还原性的糖和在测定条件下能水
解为还原性单糖的蔗糖的总量。
五、可溶性糖类的分离与定量
主要方法:
1. 纸色谱法——分离效果差,操作时间长。 2. GC法——糖不易挥发。 3. 薄层色谱法(TLC)——问题同纸色谱法。 4. HPL量,再折算为淀粉含量。
注:
1、乙醇除去可溶性糖,但不得除去淀粉,要求乙醇浓度85% 2、水解要求严格,须保证淀粉水解完全 3、酸水解法,HCl水解淀粉的专一性不如淀粉酶,同时水解 半纤维,不宜用于含半纤维高或含壳皮较高的食品。
二、酶水解法
样品经乙醚除去脂肪,乙醇除去可溶性糖类后,在
硫酸铜和氢氧化钠溶液 中性醋酸铅 【Pb(CH3COO)2· 3H2O】

糖类测定

糖类测定

③ 乙酸锌溶液
④ 亚铁氰化钾溶液 澄清剂 ⑤ 葡萄糖标准溶液:准确称取经 98 ~ 100 ℃ 干燥至恒 重的无水葡萄糖,加水溶解后移入1000 m1容量瓶中,加入 5mL盐酸(防止微生物生长)。
⑥ 测定方法 样品处理
取适量样品,按本章第二节中的原则对样品进行提 取,提取液移入250 mL 容量瓶中,慢慢加入 5 mL乙酸 锌溶液和 5 mL亚铁氰化钾溶液,加水至刻度,摇匀后静 置 30分钟。用干燥滤纸过滤,弃初滤液,收集滤液备用。
二是通过预测可知道样液大概消耗量,以便在正式测定 时,预先加入比实际用量少 1 mL 左右的样液,只留下 1 mL 左右样液在续滴定时加入,以保证在 1 分钟内完 成续滴定工作,提高测定的准确度。 ⑧影响测定结果的主要操作因素是反应液碱度、热源强 度、煮沸时间和滴定速度。反应液的碱度直接影响二价 铜与还原糖反应的速度、反应进行的程度及测定结果。
沸腾时间和滴定速度对结果影响也较大,一般沸腾时 间短,消耗糖液多。反之,消耗糖液少;滴定速度过 快,消耗糖量多,反之,消耗糖量少。因此,测定时 应严格控制上述实验条件,应力求一致。平行试验样 液消耗量相差不应超过0.1mL 。
(二)高锰酸钾滴定法
1.原理
将一定量的样液与一定量过量的碱性酒石酸铜溶液 反应,还原糖将二价铜还原为氧化亚铜,经过滤,得到 氧化亚铜沉淀,加入过量的酸性硫酸铁溶液将其氧化溶 解,而三价铁盐被定量地还原为亚铁盐,用高锰酸钾标 准溶液滴定所生成的亚铁盐,根据高锰酸钾溶液消耗量 可计算出氧化亚铜的量,再从检索表中查出与氧化亚铜 量相当的还原糖量,即可计算出样品中还原糖含量。
各步反应式如下: Cu2+ + 还原糖 2Cu+ + I2 = 2Cu2+ = I2 + 2 Na2S2O3 Cu+ + 2 INa2S4O6 + 2 NaI

糖类检测的实验报告(3篇)

糖类检测的实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解并掌握检测糖类的基本原理和方法。

2. 通过实验,学习如何运用化学试剂对糖类进行定性检测。

3. 培养实验操作技能和科学思维。

二、实验原理糖类是一类有机化合物,广泛存在于自然界中。

在生物体内,糖类具有重要的生理功能。

检测糖类的方法主要有:还原糖检测、非还原糖检测和糖类含量测定等。

本实验主要采用斐林试剂检测还原糖,通过观察溶液颜色变化来判断还原糖的存在。

三、实验器材1. 试剂:斐林试剂、蒸馏水、氢氧化钠、硫酸铜、葡萄糖标准溶液。

2. 仪器:试管、试管架、酒精灯、烧杯、滴管、量筒、温度计。

四、实验步骤1. 准备斐林试剂:将氢氧化钠和硫酸铜溶解于蒸馏水中,配制成斐林试剂。

2. 标准溶液的制备:准确量取葡萄糖标准溶液,配制成一定浓度的溶液。

3. 样品溶液的制备:取适量待测样品,加入蒸馏水溶解,配制成一定浓度的溶液。

4. 实验操作:a. 取两支试管,分别加入2mL待测样品溶液和2mL标准溶液。

b. 向两支试管中分别加入1mL斐林试剂。

c. 将两支试管放入50-65℃的水浴中加热约2分钟。

d. 观察溶液颜色变化。

五、实验结果1. 待测样品溶液:溶液颜色由蓝色变为砖红色,说明待测样品中含有还原糖。

2. 标准溶液:溶液颜色由蓝色变为砖红色,说明标准溶液中含有还原糖。

1. 斐林试剂检测还原糖的原理:还原糖在碱性条件下与斐林试剂发生反应,生成砖红色的氧化亚铜沉淀。

2. 本实验中,待测样品溶液和标准溶液均出现砖红色沉淀,说明待测样品中含有还原糖。

3. 在实验过程中,需要注意以下几点:a. 氢氧化钠和硫酸铜应现配现用,避免长时间放置导致试剂失效。

b. 加热过程中,应严格控制水浴温度,避免过高或过低影响实验结果。

c. 样品溶液和标准溶液的浓度应保持一致,以保证实验结果的准确性。

七、实验结论本实验通过斐林试剂检测还原糖,成功检测出待测样品中含有还原糖。

实验结果表明,斐林试剂是一种常用的糖类检测方法,具有操作简便、灵敏度高等优点。

糖类的研究方法

糖类的研究方法

糖类的研究方法糖类的研究方法涵盖了多个层面,包括糖的结构分析、定量测定、生物学功能等。

以下是糖类研究的一些常见方法:1.红外光谱分析:通过红外光谱仪,可以对糖的分子结构进行分析。

不同的糖类在红外光谱上会显示出特定的峰,帮助确定其结构。

2.质谱分析:质谱分析可用于确定糖的分子量、分子结构和组成。

质谱仪能够将样品中的分子分解成离子,并测定这些离子的质量。

3.核磁共振(NMR):NMR是一种用于确定分子结构的强大技术,可以提供高分辨率的信息。

在糖类研究中,常用于分析糖的立体化学和构象。

4.色谱法:气相色谱(GC)和液相色谱(HPLC)可用于分离和定量测定糖。

结合不同的检测器,如折光指数检测器(RI)、荧光检测器等,可以实现对糖的高灵敏度检测。

5.糖的定量测定:通过比色法、高效液相色谱法(HPLC)、质谱法等,可以对糖的含量进行定量测定。

这对于食品、生物学和医学等领域的研究具有重要意义。

6.酶法:使用特定的酶对糖进行酶解,生成可测定的产物。

这种方法常用于测定血糖、葡萄糖等。

7.生物学功能研究:研究糖在生物学系统中的功能,包括糖对细胞信号传导、免疫系统、疾病等的影响。

这可能涉及细胞培养、动物实验等多种方法。

8.糖基化修饰研究:研究糖基化修饰对蛋白质结构和功能的影响。

这包括糖蛋白和糖核酸的研究方法。

9.生物信息学方法:利用生物信息学工具,分析和预测糖的生物学功能、代谢途径等。

糖类的研究方法通常需要结合多个技术手段,以全面了解糖的性质和功能。

研究的具体方法取决于研究者的研究目的和领域。

用什么方法鉴定糖

用什么方法鉴定糖

用什么方法鉴定糖要鉴定糖,可以使用多种方法。

下面将介绍一些常见的方法,包括视觉观察法、颜色反应法、结晶形态法、熔点测定法和甜度测定法等。

1. 视觉观察法:糖的外观可以提供一些初步的信息。

一般来说,糖是结晶状的或者是颗粒状的,具有不同的颜色,例如白色、黄色或棕色。

结晶状的糖往往比颗粒状的糖更纯净。

通过观察糖的颜色、结晶形状和大小等特征,可以初步判断糖的品质。

2. 颜色反应法:糖可以通过与一些特定试剂发生颜色反应来进行鉴定。

例如,糖可以与硝酸银溶液反应生成白色的沉淀,这是因为糖中的羟基与银离子结合形成不溶性盐。

此外,一些糖类(如还原糖)可以与法尼斯试剂发生颜色反应,产生深红色。

这些颜色反应可以提供进一步的信息来鉴定糖。

3. 结晶形态法:结晶形态法是通过观察糖的晶体形态来鉴定糖。

糖的晶体形态可以受到制备过程、纯度和结晶温度等因素的影响。

不同糖类(如蔗糖、果糖和葡萄糖等)的晶体形态具有不同的特征,例如形状、大小和聚集程度等。

通过比较不同糖类的晶体形态,可以初步鉴定糖的类型。

4. 熔点测定法:糖的熔点也是一种鉴定糖的方法。

不同糖类的熔点范围是不同的,因为它们的结构和物理特性不同。

例如,蔗糖的熔点约为160-186摄氏度,而葡萄糖的熔点约为146-150摄氏度。

通过测定糖的熔点范围,可以初步确定糖的类型。

5. 甜度测定法:甜度测定法是用来测定糖的甜度的方法,可以间接地鉴定糖。

常用的甜度测定方法有色度法和感官评价法。

色度法是通过测量糖溶液的吸光度或色度来确定糖的甜度。

感官评价法是通过人的味觉来判断糖的甜度。

一般来说,蔗糖的甜度较高,而果糖和葡萄糖的甜度较低。

通过测定糖的甜度,可以更准确地判断糖的品质和类型。

总之,鉴定糖可以使用多种方法。

视觉观察法、颜色反应法、结晶形态法、熔点测定法和甜度测定法等都是常用的方法。

通过综合应用这些方法,可以对糖进行准确的鉴定和分析。

当然,在实际应用中,还需要结合具体的实验条件和相关的知识来进行判断和鉴定。

【最新】糖类的测定

【最新】糖类的测定

【最新】糖类的测定
糖类的测定是一种常见的化学分析方法,常用于食品、饮料和生物样品的分析。

糖类分析主要包括总糖测定和特定糖的测定。

1. 总糖测定:总糖测定常用的方法有酚硫酸法、安培洛斯法和酶法等。

酚硫酸法是最常用的总糖测定方法,利用硫酸和酚的反应产生橙黄色的复合物,通过比色法或光度法测定其吸光度,从而确定总糖含量。

安培洛斯法是一种利用甲酚和硫酸铁作用生成蓝色化合物的方法,测定总糖含量。

酶法是通过使用特定酶将糖转化为其他可测定物质,并通过测定这些产物来确定总糖浓度。

2. 特定糖的测定:特定糖的测定常用的方法有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、质谱法等。

HPLC是一种常
用且可靠的测定特定糖的方法,通过分离和检测样品中的糖类分子来确定特定糖的含量。

GC是一种基于气相色谱原理的方法,通过将样品中的糖类化合物转化为易挥发的衍生化物,然后通过气相色谱分离和检测来确定特定糖的含量。

质谱法是利用质谱仪对样品中的糖分子进行离子化并进行质量分析,从而确定特定糖的含量。

糖类的测定方法多种多样,科学家们可以根据实际需要选择合适的方法进行测定,以获得准确的糖类含量数据。

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(二)
提取液的澄清
1. 常用澄清剂要符合三点要求。
2. 常用澄清剂的种类
中性醋酸铅 【Pb(CH3COO)2· 3H2O】 硫酸铜和氢氧化钠溶液
Hale Waihona Puke 还有碱性醋酸铅、 氢氧化铝溶液、活性炭等
乙酸锌和亚铁氢化钾溶液
二、 还原糖的测定
(一)碱性铜盐法
直接滴定法 KMnO4法 萨氏法 蓝-爱农法
直 接 滴
第八章 糖类物质的测定
Carbohydrates Determination
第一节
单糖 在稀酸溶液 中水解情况
概述
低聚糖(蔗糖、乳糖、麦芽糖) 营养性多糖
多糖
构造性多糖
性质 (chemical property)
(1)糖的显色反应 单糖与浓盐酸或浓硫酸作用,脱去三分子水生 成糠醛。与某些物质反应显现颜色。
酶 法
葡萄糖氧化酶
第二节
可溶性糖类的测定
一、可溶性糖类的提取和澄清
(一)提取
1. 常用的提取剂:水、乙醇溶液。
2. 提取液制备的原则

取样量与稀释倍数的确定,使(0.5—3.5mg / mL)。


含脂肪的食品,须脱脂后再提取。
含有大量淀粉、糊精的食品,用乙醇溶液提取。

含酒精和二氧化碳的液体样品,应先除酒精、 CO2。
测 定 方 法
1、样品处理 样品 静置 + 提取液 + 5 mL乙酸锌 + 5 mL亚铁氰化钾
过滤
弃初滤液,收集滤液备用
2、碱性酒石酸铜溶液的标定 10ml 甲液 + 乙液 + 水10ml 滴加少量葡萄糖标准溶液
在2分钟内加热沸腾 继续滴加葡萄糖标准溶液直至溶液蓝色刚好褪去
记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积
③ 在酸或酶的作用下可以水解,最终产物是葡萄糖。
水解,通过测定还原糖测定
几种主要粮食中的淀粉含量:
粮种 淀粉含量 (%) 粮种
*以干物质计
淀粉含量 (%)
小麦
(2)还原性 一些低分子糖具有还原性(蔗糖没有还原性, 因为蔗糖没有半缩醛羟基)
测定意义
1、糖对于新生婴儿来说是最理想的营养 2.生理方面
提供能量
构成细胞成分
促进消化 抗酮作用
食品中糖类物质的测定方法
① 物理法
② 化学法 ③ 色谱法 ④ 酶法 ⑤重量法
测定果胶、膳食纤维 β-半乳糖脱氢酶
物理法
相对密度法 折光法 旋光法
原糖=某糖。
???
讨 论
???
1、费林试剂应现用现配,用时再混合。 2、滴定终点时溶液由蓝 变 无色 ,而此时溶液中
有Cu2O(↓),会对滴定终点有干扰。
3、在滴定过程中对操作条件要求严格
①整个过程要求在沸腾溶液中进行
②滴定时不能随意摆动锥形瓶
4、若溶液煮沸后,不呈蓝色
5、使用澄清剂时,不能采用Cu盐做澄清剂
???
(二)铁氰化钾法
还原糖+过量的K3Fe(CN)6====K4Fe(CN)6+相应的糖酸
CH3COOH 剩余的K3Fe(CN)6+过量的KI===========I 2
2 Na2S2O3 + I2 = Na2S4O6 + 2 NaI 淀粉作为指示剂
???
(三) 碘量法
(四)其他方法
比色法
物理法
主要方法:
1. 纸色谱法——分离效果差,操作时间长。
2. GC法——糖不易挥发。
3. 薄层色谱法(TLC)——问题同纸色谱法。
4. HPLC法特别是离子色谱法
TMS——
糖的三氯硅烷 衍生物
第三节
淀粉的主要性质
淀粉的测定
① 不溶于浓度在30%以上的乙醇溶液。 重量法 ② 旋光性:淀粉水溶液具有右旋性 旋光法
继续滴加至溶液蓝色刚好褪去
记录样品溶液消耗的体积。
4、样品溶液测定
方法同上
称取某食物样品3.00g,经过处理后用水定容
至60mL。用浓度为0.2mg/mL的葡萄糖标准溶液滴定
10mL费林试剂,消耗10mL。
用经处理后的样液滴定10mL费林试剂时,消耗
样液6mL。
计算样品中还原糖含量(以葡萄糖计)。
计算:炼乳中,乳糖及蔗糖的含量。
10ml费林溶液相当于10.23mg的转化糖
相当于13.87mg的乳糖


本方法测定的是一类具有还原性质的糖,包括
葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等,只是结果用葡 萄糖或其他转化糖的方式表示,所以不能误解为 还原糖=葡萄糖或其他糖。但如果已知样品中只含 有某一种糖,如乳制品中的乳糖,则可以认为还
高锰酸钾滴定法
1.原理
过量的碱性酒 石酸甲铜溶液 Cu2+ 2FeSO4 + CuSO4
① ②
一定量的样液
+
还原糖
△ Cu O↓ 2
Cu2O↓ + 过量酸性Fe2(SO4)3

滴定终点如 何确定???
KMnO4
萨 氏 法
过量的KIO3 + 5 KI + 3H2SO4 = 3I2
2Cu+ +过量的I2 = 2Cu2+ +2 II2 + 2 Na2S2O3 = Na2S4O6 + 2 NaI 淀粉作为指示剂
F=ρ×V
F:10mL碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量, mg ρ:葡萄糖标准溶液的浓度, mg/mL V——标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积,mL
也可不标定,直接查表求 ρ值。
3、样品溶液预测(0.1%)
滴加比预测时样品溶液消耗总体积少1mL的样品溶液
10mL
甲液 + 乙液
+
水10mL
在2分钟内加热沸腾
精确称取2.136g炼乳加少量水溶解转移至250ml容
量瓶中,缓慢加澄清剂定容,静置分层。干滤,取 滤液放入滴定管中,滴定费林试剂,消耗12.28ml; 另取滤液50ml至250ml容量瓶中,加5ml (1+1)的盐酸, 摇匀,置68-70oC水浴锅中恒温水解15min,冷却,中和, 定容至刻度,移入碱式滴定管。滴定费林试剂,消耗 14.52ml.
酶法
三、蔗糖的测定
蔗糖经盐酸水解转化为还原糖,再按还原糖
测定。水解前后还原糖的差值为蔗糖含量。
C12H22O11+H2O= C6H12O6 + C6H12O6 342 360
四、总糖的测定
食品中的总糖通常是指具有还原性的糖和在测定条
件下能水解为还原性单糖的蔗糖的总量。
五、可溶性糖类的分离与定量
CHO
①碱性酒石酸铜溶液中反应 ②天蓝色↓→深蓝色络合物
③还原糖被氧化成醛酸
COOK CHO Cu +6 H2O COOH (CHOH)4 + 6 CH2OH (CHOH)4 + 6 CH2OH COOK CHO +3Cu2O


CHO
COONa
CHO
COONa
蓝色 氧化型:蓝色 终点指示剂:次甲基蓝 还原型:无色
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