第十章 分光光度法
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透光度,透射比。用T表示。
注:溶液的透光率T反映了物质对光的吸收程度, T越大表示它对光的吸收越弱;反之,T越小,表 示对光的吸收越强。
T 取值为0.0 % ~ 100.0 %
T
全部吸收
T = 0.0 %
全部透射 T = 100.0 %
2.吸光度: 为透光率的负 A lg I0 lg 1 = lgT
(四)吸光系数 1.定义(物理意义)
一定条件下,吸光物质在单位浓度及单位液层 厚度时的吸光度,叫这个物质的吸光系数。
2.两种表示方法
(1) 摩尔吸光系数( ε ):表示一定波长下,吸光物质的溶液
浓度为1mol/L,液层厚度为1cm时,溶液的吸光度。
(2)百分吸光系数(
E1% 1cm
):表示一定波长下,吸光物质的溶
黄 橙
红
/nm 颜色 400-450 紫
450-480 蓝 480-490 青蓝 490-500 青 500-560 绿 580-610 黄 610-650 橙 650-760 红
互补光 绿
黄 橙 红 紫 蓝 青蓝 青
物质的颜色与光的关系:
完全吸收
光谱示意 复合光
表观现象示意
完全透过
吸收黄色光
二.物质对光的选择性吸收
A. A~λ曲线
B. A~c曲线
C. A~V曲线
D. E~V曲线
4、紫外分光光度法中,为了使测定结果有较高 的灵敏度和准确度,入射光的波长应( )
A.最大吸收波长
B.最小吸收波长
检测器 作用:将光信号转换为电信号,并放大 光电管,光电倍增管
信号输出 表头、记录仪、屏幕、数字显示
第十章
1 光源
在紫外可见分光光度计中,常用的光源 有两类:热辐射光源和气体放电光源 热辐射光源适用350nm-800nm,用于可见 光区,如钨灯和卤钨灯;气体放电光源适 用150nm-400nm,用于紫外光区,如氢灯 和氘灯。
对数,用A表示。
It
T
A, 1.0
T,
T A
100
T = 0.0 %
C 三 者 0.5 的
A T%
A=∞
50
T = 100.0 %
关
A = 0.0
系
0
0
c
A越大,表明物质对光的吸收程度越强,T越小,浓度高;
A越小,说明物质对光的吸收程度越弱, T越大,浓度低。
(二)吸收光谱曲线 1、定义:通过测定被测物质对不同波长的光
第十章 分光光度法
第一节 基本原理 第二节 紫外-可见分光光度计 第三节 药物分析中含量测定和特
殊杂质的检查
第一节 基本原理
紫外分光光度法
{ 分光光度法: 可见分光光度法
红外分光光度法
分光光度法: 利用物质对光的选择性吸收进行定性和定量
分析的一种仪器分析方法.
第一节 基本原理
紫外---可见分光光度法: 利用物质在紫外——可见光区(200nm-
即 A= Kc L
式中吸光系数κ与吸光物质的本性,入射光 波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度,L为 透光液层厚度。
(三)朗伯-比尔定律
适用范围: 1.均匀、无散射的稀溶液
2.平行单色光
注:朗伯比尔定律是分光光度法定量分析的依据。 不仅适用于有色溶液,也适用于无色溶液,可 见光区,紫外光区,红外光区。
射、衍射等现象,说明光具有波动性;同时 光还具有热辐射、光电效应等作用,又说明 光具有粒子性,因此可以把光的这种性质叫 作光的波粒二象性。
波动性:光速 波长 频率 粒子性:有能量
波长 :两个相邻波峰或波谷间的距离(nm)
频率 :单位时间里通过一固定点处波的数目 (s-1) =c/ 光速c= 3×1010 cm/s
长很短的光
5.用1,10-二氮菲光度法测定铁,已知Fe2+浓度为0.5mol/L, 比求色。皿厚度2厘米,在max=508nm测得配合物吸光度A =0.19,
第二节 紫外-可见分光光度计
基于样品对紫外—可见光区单色光的选择 性吸收的特性,测定物质的吸收度→定性 和定量分析
广泛应用于药物分析,环境监测,食品生 产和质量监测等行业部门。
习题练习 1. 在紫外—可见分光光度中常用的检测器为
( )。 A. 光电管 B. 高莱池 C. 硒光电管
D. 光电倍增管
2. 朗伯—比尔定律的数学表达式为( )。 A. A=c·L B. A=k·c·L C. A=k·L D. A=c·L
3. 标准曲线法中的标准曲线是指( )。
液浓度为1g/100ml(1%),液层厚度为1cm时,溶液的吸光 M 1%
10
1cm
【例题:10-1】
课堂练习
1. 在紫外—可见分光光度法中,通常采用__作为测定波长。
2. 紫外—可见分光光度法的合适检测波长范围是( )。
A. 400~760nm
cx
Ax AR
CR
【例题10-2】
第十章
2.吸光系数法
在没有标准品可供比较测定的条件下,按 文献规定条件测定被测物的吸光度,从样品的 配制浓度、测定的吸光度及文献查出的吸光系 数即可计算样品的浓度,因为
A= κcL
则样品浓度C=A/κL
【例题10-3】
第九章
3 标准曲线法(校正曲线法)
方法:配制一系列不同含量的标准溶液, 选用适宜的参比,在相同的条件下,测定 系列标准溶液的吸光度,作A-c曲线,即标 准曲线,也可用最小二乘数处理,得线性 回归方程。
2.用途:
a. 不同物质吸收光谱曲线的形状和收光谱λmax 及λmin均不同,故可做为物质定性分析的依据。
b. 用光度法做定量分析时,利用吸收光谱确定 最佳测定波长。 在吸收曲线中,通常选用最大吸收波长λmax为测 定波长,进行物质定量分析
第九章
(三)朗伯-比尔定律
1、朗伯定律 布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于
光通过某一液层厚度一定的某一含有吸光物质的 稀溶液时,溶液的吸光度与吸光物质浓度成正比,
即 A= κ2 c 波长及式温中度比等例因常素数有κ关2与。吸c光为物吸质光的物本质性浓,度入。射光
第九章
(三)朗伯-比尔定律
3、朗伯-比尔定律
物理意义:当一束平行单色光通过均匀、 无散射的稀溶液时在单色光波长、强度、溶液温 度等条件不变的情况下,溶液的吸光度A与溶液 浓度c、液层厚度L乘积成正比。
第十章
2 单色器
单色器的主要组成:入射狭缝、出射 狭缝、色散元件和准直镜等部分。单 色器质量的优劣,主要决定于色散元 件的质量。色散元件常用棱镜和光栅。
第十章
3
吸收池(洗涤后要用待装液润洗)
吸收池又称比色皿或比色杯,按材 料可分为玻璃吸收池和石英吸收池,前 者不能用于紫外区。吸收池的种类很多, 其光径可在0.1~10cm之间,其中以1cm 光径吸收池最为常用。
第十章
4 检测器(核心部分) 检测器的作用是检测光信号,
并将光信号转变为电信号。现今使用的 分光光度计大多采用光电管或光电倍增 管作为检测器。
第十章
5
信号显示系统
常用的信号显示装置有直读检
流计,电位调节指零装置,以及自动记
录和数字显示装置等。
第十章
二.仪器的使用方法与注意事项
(一)紫外-可见分光光度计
第三节 药物分析中含量测定和 特殊杂质的检查
一、 药物含量测定方法
其定量方法包括吸光系数法、标准 曲线法和对照品比较法。
第十章
1 对照品比较法
即将待测溶液与某一标样溶液,在相 同的条件下,测定各自的吸光度,建立朗 伯-比尔定律,解方程求出未知样浓度与含 量。
对照品:AR=KcsL 样品:Ax=KcxL
/s-1 3×108 3×1010 3×1012 3×1014 3×1016 3×1018 3×1020 3×1022
(一)光的性质
1. 单色光
单一波长的光叫做单色光。 一般包括很窄的波长范围段。 例:黄色的光是由波长在560nm~590nm的电 磁波构成的。
2. 复合光
由不同波长的单色光混合组成的光叫复合光。 例:日光、教室里日光灯发出的光,
按光学系统分为单波长分光光度计和双波长分 光光度计 单波长分光光度计又可分为单光束和双光束
721型分光光度计
722型分光光度计
分光光度计的使用(课本第120-121页)
1.预热20min。 2.选定波长 3.固定灵敏度档 4.调节T = 0% 5.调节T = 100% (A=0) 6.测定样品的吸光度A 7.浓度的测定 8.关机
3. 可见光
人眼可以看到辨别的光叫可见光。可见光的波 长范围:400nm~760nm。
4.光的色散:—白光透过三棱镜,分解成红、橙、
黄、绿、青、蓝、紫的顺序排列的彩色光带 的现象,称之为光的色散。
5.光的互补
绿 青
青蓝 蓝 紫
若两种不同颜色的单色光按一定的强度比 例混合得到白光,那么就称这两种单色光 为互补色光,这种现象称为光的互补。
第十章
. 比色皿的使用应注意:
a. 拿:为保护透光面, 使用时拿毛玻璃面。 b. 洗:比色皿内、外壁可以用蒸馏水清洗。不能 用洗液洗。因为比色皿是透明材料用胶粘成的,洗液 腐蚀性很强,会使比色皿开胶。附着有色物质:用 1mol/L HCl-乙醇溶液(1:2)清洗,再用蒸馏水洗干净。 附着油污:用5%NaOH溶液清洗,再用蒸馏水洗净。 c. 擦:用镜头纸朝一个方向轻轻的擦。 d. 装:装至容积的2/3~3/4。 e. 放:放置比色皿时,透光面朝向光通过的方向
电磁辐射按波长或频率的顺序排列,称电磁波 谱
γ射线→ X 射线→紫外光→可见光→ 红外光→微波→无线电波
紫外-可见光区的波长范围: 200~760nm
/m 10 1
10-2
10-4
10-6
10-8
10-10
10-12
10-14
无 线 电 波
微 波
红 可紫 外 见外
X 射 线
γ 射 线
400~760nm 200~400nm
(一)、吸光度和透光率
1.透光率 (透射比、透光度 )
入射光强度 I0
透射光强度It
一束平行单色光
设入射光强度为I0,吸收光强度为Ia,透射光强度为It 则
I0= Ia+ It
由于反射光强度基本相同,其影响可相互抵消,上式可简化
为:
T It I0
透光率:透射光的强度It与入射光的强度I0之比,又叫
在相同条件下测定未知试样的吸光度, 从标准曲线上就可以找到与之对应的未知 试样的浓度。
3. 标准曲线法(大批量样品)
1.配制标准系列 2.测定标准系列的吸光度 3.绘制标准曲线 4.测定待测物质的吸光度,计算溶液的浓度
二、特殊杂质的检查方法
比色法 紫外-可见吸收光谱对照法
B. 200~400nm
C. 200~760 nm D. 10~200nm
3.. 某物质的溶液显蓝色,因为它选择吸收了白光中的( )。 A. 蓝色光 B. 红色光 C. 黄色光 D. 绿色光
4.单色光是指( )。 A. 同种颜色的光 B. 颜色单纯的光 C. 单一波长的光 D. 波
的吸收强度(吸光度),以波长为横坐标,吸 光度为纵坐标作图,得出该物质在测定波长范 围的吸收曲线。
吸收曲线上最大 吸收峰所对应的 波长称为最大吸 收波长,用λmax 表示。
第十章
KMnO4溶液对波长525nm 附近的绿色光吸收最强,而 对紫色光吸收最弱。不同浓 度的KMnO4溶液所得的吸收 曲线都相似,其最大吸收波 长不变,只是相应的吸光度 大小不同。
入射光 I第0 二节 紫透外射-光可见It 分光光度计
第十章
光源 参比
样品
单色器 I0
0.575
吸收池
信号处理 检测器 及显示器
It 注意 比较
紫外-可见分光光度计
第十章
紫外-可见分光光度计组件 光源 基本要求:光源强,能量分布均匀,稳定
单色器 作用:将复合光色散成单色光
吸收池
玻璃,用于可见光区;石英用于紫外光区或可见 光区。0.5cm,1cm
760nm)的吸收程度不同进行定性和定量分 析的方法。
分光光度法的特点: 1.灵敏度高:直接测定低至10-6g/ml微量组分。 2.准确度高:相对误差5%以下 3.操作简便、快速: 4.选择性好,适用范围广:
一、光的性质与溶液颜色
(一) 光的性质 光是一种电磁辐射,由于光的折射、反
1729年和1760年阐明了当一束平行单色光通过浓 度一定的某一含有吸光物质的稀溶液时,溶液的 吸光度与液层厚度成正比,
即 A= κ1 l 光波长式及中温比度例等常因数素κ有1与关吸。光l物为质透的光本液性层,厚与度入。射
第九章
(三)朗伯-比尔定律
2、比尔定律 1852年比耳(Beer)又提出当一束平行单色
注:溶液的透光率T反映了物质对光的吸收程度, T越大表示它对光的吸收越弱;反之,T越小,表 示对光的吸收越强。
T 取值为0.0 % ~ 100.0 %
T
全部吸收
T = 0.0 %
全部透射 T = 100.0 %
2.吸光度: 为透光率的负 A lg I0 lg 1 = lgT
(四)吸光系数 1.定义(物理意义)
一定条件下,吸光物质在单位浓度及单位液层 厚度时的吸光度,叫这个物质的吸光系数。
2.两种表示方法
(1) 摩尔吸光系数( ε ):表示一定波长下,吸光物质的溶液
浓度为1mol/L,液层厚度为1cm时,溶液的吸光度。
(2)百分吸光系数(
E1% 1cm
):表示一定波长下,吸光物质的溶
黄 橙
红
/nm 颜色 400-450 紫
450-480 蓝 480-490 青蓝 490-500 青 500-560 绿 580-610 黄 610-650 橙 650-760 红
互补光 绿
黄 橙 红 紫 蓝 青蓝 青
物质的颜色与光的关系:
完全吸收
光谱示意 复合光
表观现象示意
完全透过
吸收黄色光
二.物质对光的选择性吸收
A. A~λ曲线
B. A~c曲线
C. A~V曲线
D. E~V曲线
4、紫外分光光度法中,为了使测定结果有较高 的灵敏度和准确度,入射光的波长应( )
A.最大吸收波长
B.最小吸收波长
检测器 作用:将光信号转换为电信号,并放大 光电管,光电倍增管
信号输出 表头、记录仪、屏幕、数字显示
第十章
1 光源
在紫外可见分光光度计中,常用的光源 有两类:热辐射光源和气体放电光源 热辐射光源适用350nm-800nm,用于可见 光区,如钨灯和卤钨灯;气体放电光源适 用150nm-400nm,用于紫外光区,如氢灯 和氘灯。
对数,用A表示。
It
T
A, 1.0
T,
T A
100
T = 0.0 %
C 三 者 0.5 的
A T%
A=∞
50
T = 100.0 %
关
A = 0.0
系
0
0
c
A越大,表明物质对光的吸收程度越强,T越小,浓度高;
A越小,说明物质对光的吸收程度越弱, T越大,浓度低。
(二)吸收光谱曲线 1、定义:通过测定被测物质对不同波长的光
第十章 分光光度法
第一节 基本原理 第二节 紫外-可见分光光度计 第三节 药物分析中含量测定和特
殊杂质的检查
第一节 基本原理
紫外分光光度法
{ 分光光度法: 可见分光光度法
红外分光光度法
分光光度法: 利用物质对光的选择性吸收进行定性和定量
分析的一种仪器分析方法.
第一节 基本原理
紫外---可见分光光度法: 利用物质在紫外——可见光区(200nm-
即 A= Kc L
式中吸光系数κ与吸光物质的本性,入射光 波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度,L为 透光液层厚度。
(三)朗伯-比尔定律
适用范围: 1.均匀、无散射的稀溶液
2.平行单色光
注:朗伯比尔定律是分光光度法定量分析的依据。 不仅适用于有色溶液,也适用于无色溶液,可 见光区,紫外光区,红外光区。
射、衍射等现象,说明光具有波动性;同时 光还具有热辐射、光电效应等作用,又说明 光具有粒子性,因此可以把光的这种性质叫 作光的波粒二象性。
波动性:光速 波长 频率 粒子性:有能量
波长 :两个相邻波峰或波谷间的距离(nm)
频率 :单位时间里通过一固定点处波的数目 (s-1) =c/ 光速c= 3×1010 cm/s
长很短的光
5.用1,10-二氮菲光度法测定铁,已知Fe2+浓度为0.5mol/L, 比求色。皿厚度2厘米,在max=508nm测得配合物吸光度A =0.19,
第二节 紫外-可见分光光度计
基于样品对紫外—可见光区单色光的选择 性吸收的特性,测定物质的吸收度→定性 和定量分析
广泛应用于药物分析,环境监测,食品生 产和质量监测等行业部门。
习题练习 1. 在紫外—可见分光光度中常用的检测器为
( )。 A. 光电管 B. 高莱池 C. 硒光电管
D. 光电倍增管
2. 朗伯—比尔定律的数学表达式为( )。 A. A=c·L B. A=k·c·L C. A=k·L D. A=c·L
3. 标准曲线法中的标准曲线是指( )。
液浓度为1g/100ml(1%),液层厚度为1cm时,溶液的吸光 M 1%
10
1cm
【例题:10-1】
课堂练习
1. 在紫外—可见分光光度法中,通常采用__作为测定波长。
2. 紫外—可见分光光度法的合适检测波长范围是( )。
A. 400~760nm
cx
Ax AR
CR
【例题10-2】
第十章
2.吸光系数法
在没有标准品可供比较测定的条件下,按 文献规定条件测定被测物的吸光度,从样品的 配制浓度、测定的吸光度及文献查出的吸光系 数即可计算样品的浓度,因为
A= κcL
则样品浓度C=A/κL
【例题10-3】
第九章
3 标准曲线法(校正曲线法)
方法:配制一系列不同含量的标准溶液, 选用适宜的参比,在相同的条件下,测定 系列标准溶液的吸光度,作A-c曲线,即标 准曲线,也可用最小二乘数处理,得线性 回归方程。
2.用途:
a. 不同物质吸收光谱曲线的形状和收光谱λmax 及λmin均不同,故可做为物质定性分析的依据。
b. 用光度法做定量分析时,利用吸收光谱确定 最佳测定波长。 在吸收曲线中,通常选用最大吸收波长λmax为测 定波长,进行物质定量分析
第九章
(三)朗伯-比尔定律
1、朗伯定律 布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于
光通过某一液层厚度一定的某一含有吸光物质的 稀溶液时,溶液的吸光度与吸光物质浓度成正比,
即 A= κ2 c 波长及式温中度比等例因常素数有κ关2与。吸c光为物吸质光的物本质性浓,度入。射光
第九章
(三)朗伯-比尔定律
3、朗伯-比尔定律
物理意义:当一束平行单色光通过均匀、 无散射的稀溶液时在单色光波长、强度、溶液温 度等条件不变的情况下,溶液的吸光度A与溶液 浓度c、液层厚度L乘积成正比。
第十章
2 单色器
单色器的主要组成:入射狭缝、出射 狭缝、色散元件和准直镜等部分。单 色器质量的优劣,主要决定于色散元 件的质量。色散元件常用棱镜和光栅。
第十章
3
吸收池(洗涤后要用待装液润洗)
吸收池又称比色皿或比色杯,按材 料可分为玻璃吸收池和石英吸收池,前 者不能用于紫外区。吸收池的种类很多, 其光径可在0.1~10cm之间,其中以1cm 光径吸收池最为常用。
第十章
4 检测器(核心部分) 检测器的作用是检测光信号,
并将光信号转变为电信号。现今使用的 分光光度计大多采用光电管或光电倍增 管作为检测器。
第十章
5
信号显示系统
常用的信号显示装置有直读检
流计,电位调节指零装置,以及自动记
录和数字显示装置等。
第十章
二.仪器的使用方法与注意事项
(一)紫外-可见分光光度计
第三节 药物分析中含量测定和 特殊杂质的检查
一、 药物含量测定方法
其定量方法包括吸光系数法、标准 曲线法和对照品比较法。
第十章
1 对照品比较法
即将待测溶液与某一标样溶液,在相 同的条件下,测定各自的吸光度,建立朗 伯-比尔定律,解方程求出未知样浓度与含 量。
对照品:AR=KcsL 样品:Ax=KcxL
/s-1 3×108 3×1010 3×1012 3×1014 3×1016 3×1018 3×1020 3×1022
(一)光的性质
1. 单色光
单一波长的光叫做单色光。 一般包括很窄的波长范围段。 例:黄色的光是由波长在560nm~590nm的电 磁波构成的。
2. 复合光
由不同波长的单色光混合组成的光叫复合光。 例:日光、教室里日光灯发出的光,
按光学系统分为单波长分光光度计和双波长分 光光度计 单波长分光光度计又可分为单光束和双光束
721型分光光度计
722型分光光度计
分光光度计的使用(课本第120-121页)
1.预热20min。 2.选定波长 3.固定灵敏度档 4.调节T = 0% 5.调节T = 100% (A=0) 6.测定样品的吸光度A 7.浓度的测定 8.关机
3. 可见光
人眼可以看到辨别的光叫可见光。可见光的波 长范围:400nm~760nm。
4.光的色散:—白光透过三棱镜,分解成红、橙、
黄、绿、青、蓝、紫的顺序排列的彩色光带 的现象,称之为光的色散。
5.光的互补
绿 青
青蓝 蓝 紫
若两种不同颜色的单色光按一定的强度比 例混合得到白光,那么就称这两种单色光 为互补色光,这种现象称为光的互补。
第十章
. 比色皿的使用应注意:
a. 拿:为保护透光面, 使用时拿毛玻璃面。 b. 洗:比色皿内、外壁可以用蒸馏水清洗。不能 用洗液洗。因为比色皿是透明材料用胶粘成的,洗液 腐蚀性很强,会使比色皿开胶。附着有色物质:用 1mol/L HCl-乙醇溶液(1:2)清洗,再用蒸馏水洗干净。 附着油污:用5%NaOH溶液清洗,再用蒸馏水洗净。 c. 擦:用镜头纸朝一个方向轻轻的擦。 d. 装:装至容积的2/3~3/4。 e. 放:放置比色皿时,透光面朝向光通过的方向
电磁辐射按波长或频率的顺序排列,称电磁波 谱
γ射线→ X 射线→紫外光→可见光→ 红外光→微波→无线电波
紫外-可见光区的波长范围: 200~760nm
/m 10 1
10-2
10-4
10-6
10-8
10-10
10-12
10-14
无 线 电 波
微 波
红 可紫 外 见外
X 射 线
γ 射 线
400~760nm 200~400nm
(一)、吸光度和透光率
1.透光率 (透射比、透光度 )
入射光强度 I0
透射光强度It
一束平行单色光
设入射光强度为I0,吸收光强度为Ia,透射光强度为It 则
I0= Ia+ It
由于反射光强度基本相同,其影响可相互抵消,上式可简化
为:
T It I0
透光率:透射光的强度It与入射光的强度I0之比,又叫
在相同条件下测定未知试样的吸光度, 从标准曲线上就可以找到与之对应的未知 试样的浓度。
3. 标准曲线法(大批量样品)
1.配制标准系列 2.测定标准系列的吸光度 3.绘制标准曲线 4.测定待测物质的吸光度,计算溶液的浓度
二、特殊杂质的检查方法
比色法 紫外-可见吸收光谱对照法
B. 200~400nm
C. 200~760 nm D. 10~200nm
3.. 某物质的溶液显蓝色,因为它选择吸收了白光中的( )。 A. 蓝色光 B. 红色光 C. 黄色光 D. 绿色光
4.单色光是指( )。 A. 同种颜色的光 B. 颜色单纯的光 C. 单一波长的光 D. 波
的吸收强度(吸光度),以波长为横坐标,吸 光度为纵坐标作图,得出该物质在测定波长范 围的吸收曲线。
吸收曲线上最大 吸收峰所对应的 波长称为最大吸 收波长,用λmax 表示。
第十章
KMnO4溶液对波长525nm 附近的绿色光吸收最强,而 对紫色光吸收最弱。不同浓 度的KMnO4溶液所得的吸收 曲线都相似,其最大吸收波 长不变,只是相应的吸光度 大小不同。
入射光 I第0 二节 紫透外射-光可见It 分光光度计
第十章
光源 参比
样品
单色器 I0
0.575
吸收池
信号处理 检测器 及显示器
It 注意 比较
紫外-可见分光光度计
第十章
紫外-可见分光光度计组件 光源 基本要求:光源强,能量分布均匀,稳定
单色器 作用:将复合光色散成单色光
吸收池
玻璃,用于可见光区;石英用于紫外光区或可见 光区。0.5cm,1cm
760nm)的吸收程度不同进行定性和定量分 析的方法。
分光光度法的特点: 1.灵敏度高:直接测定低至10-6g/ml微量组分。 2.准确度高:相对误差5%以下 3.操作简便、快速: 4.选择性好,适用范围广:
一、光的性质与溶液颜色
(一) 光的性质 光是一种电磁辐射,由于光的折射、反
1729年和1760年阐明了当一束平行单色光通过浓 度一定的某一含有吸光物质的稀溶液时,溶液的 吸光度与液层厚度成正比,
即 A= κ1 l 光波长式及中温比度例等常因数素κ有1与关吸。光l物为质透的光本液性层,厚与度入。射
第九章
(三)朗伯-比尔定律
2、比尔定律 1852年比耳(Beer)又提出当一束平行单色